1.syn-car-t細胞的制備方法,其特征在于,所述方法包括:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,所述syn?car逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的質(zhì)粒是靶向cd19分子,bcma分子,cd38分子,或gpc3分子的psr.synnotch載體的質(zhì)粒。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述syn?car逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的質(zhì)粒是靶向cd19分子的psr.synnotch載體的質(zhì)粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟1中,在所述piggybac轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)的pb轉(zhuǎn)座子5’itr和3’itr序列之間順序地插入sin-γ-rv載體的5’ltr,5’utr,和3’sin-ltr序列;所述非編碼區(qū)utr包括為病毒載體包裝信號的ψ元件和為剪切供體位點的sd,所述3’sin-ltr序列中u3區(qū)刪除,只保留r區(qū)和u5區(qū)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,5’utr刪除所有g(shù)ag和pol編碼區(qū)序列以及起始密碼子atg。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,5’ltr和3’sin-ltr之間分別插入synnotch系統(tǒng)的效應分子uas?tagbfp和誘導受體sffv_scfv?notch?gal4vp64,誘導受體蛋白由sffv啟動子啟動表達。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,在gal4vp64蛋白下游添加p2a-egfp熒光蛋白,作為載體受體蛋白cd19?scfv、bcma?scfv、cd38?scfv或gpc3?scfv的檢測標簽。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述方法構(gòu)建的syn-car-t細胞。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的syn-car-t細胞是靶向cd19的syn-car-t細胞。
10.權(quán)利要求8所述的syn-car-t細胞在制備腫瘤藥物中的應用。
11.一種用于治療腫瘤的藥物組合物,其特征在于,所述藥物組合物含有權(quán)利要求8所述的car-t細胞,以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
12.一種體外抑制腫瘤細胞的方法,其特征在于,包括將腫瘤細胞與如權(quán)利要求8所述的car-t細胞或如權(quán)利要求11所述的藥物組合物接觸,從而抑制所述腫瘤細胞。