本發(fā)明屬于靈芝孢子粉加工，具體涉及一種靈芝孢子全成分分離及利用的方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、靈芝，別名芝草，為擔(dān)子菌綱多孔菌科真菌赤芝ganoderma?lucidum(leyss.exfr.)karst或紫芝ganoderma?sinense?zhao,xu?et?zhang的干燥子實(shí)體，其性味甘平，具有扶正固本、滋補(bǔ)強(qiáng)壯等功效，藥用價(jià)值高。靈芝在生長(zhǎng)成熟期，會(huì)從菌褶中彈射出極其微小的卵形生殖細(xì)胞，稱(chēng)為靈芝孢子或靈芝孢子粉。近年來(lái)，研究者對(duì)其進(jìn)行了大量研究，發(fā)現(xiàn)靈芝孢子粉包含多種活性成分，如多糖、三萜、氨基酸、生物堿、甾醇和無(wú)機(jī)元素等，并從基因、蛋白或代謝通路等不同層次確證了抗腫瘤、抗癲癇、增強(qiáng)免疫、調(diào)節(jié)血糖血脂等一系列藥理作用。目前，已有相應(yīng)藥品進(jìn)入市場(chǎng)，并取得了較好的臨床療效。

2、cn104013652a公開(kāi)了一種靈芝孢子粉的精制工藝與綜合利用方法，在破壁后對(duì)破壁的靈芝孢子粉進(jìn)行去壁精制，用體積分?jǐn)?shù)為20％～95％的乙醇溶液和水浸泡后，分離壁殼，得到去壁靈芝孢子粉濾液和靈芝孢子粉壁殼，去壁靈芝孢子粉濾液經(jīng)濃縮、干燥制得精制靈芝孢子粉，靈芝孢子粉壁殼經(jīng)過(guò)綜合回收利用工藝，制得壁殼醇提物固體粉末、二氯甲烷提取固體粉末、乙酸乙酯提取固體粉末、壁殼水提物固體粉末、正丁醇提取固體粉末、水相粉末或殼聚糖。該發(fā)明通過(guò)去壁精制實(shí)現(xiàn)了孢子粉無(wú)效成分(壁殼)的分離和有效成分(多糖及三萜等)的富集，實(shí)現(xiàn)了對(duì)壁殼的綜合利用，提高了經(jīng)濟(jì)效益。

3、cn106692213a公開(kāi)了一種孢子油，該靈芝孢子油是靈芝孢子經(jīng)破壁、制粒、干燥和超臨界co2萃取后經(jīng)兩級(jí)分離直接制備所得，無(wú)需進(jìn)行任何脫酸、脫臭等常規(guī)精煉工序，該靈芝孢子油富含以油酸為主的單不飽和脂肪酸，且保留了靈芝特有的三帖酸、麥角笛醇、脂溶性維生素等功效成分，具有很好的抗腫瘤活性。

4、cn108159090a公開(kāi)了靈芝孢子粉膳食纖維提取物在制備治療和/或預(yù)防腸道菌群失調(diào)相關(guān)疾病制劑中的用途，并公開(kāi)了一種靈芝孢子粉膳食纖維提取物的制備方法，包括將靈芝孢子粉采用乙醇回流提取，將濾渣采用水回流提取，再將提取液酶解、沉淀、洗脫，得到靈芝孢子粉膳食纖維提取物。

5、目前靈芝孢子粉活性成分的分離工藝復(fù)雜，工藝間的兼容性差，且尚未發(fā)現(xiàn)可一次性分離孢子多糖、孢子油和殼聚糖的研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種靈芝孢子全成分分離及利用的方法，本發(fā)明的兼容性好，可一次性完成小分子肽、孢子多糖、孢子油、可溶性膳食纖維和殼聚糖分離，實(shí)現(xiàn)了靈芝孢子的全成分分離和利用。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、一方面，本發(fā)明提供一種靈芝孢子全成分分離及利用的方法，包括如下步驟：

4、s1、靈芝孢子軟化，乳化破壁，固液分離，得到乳化液與孢子壁殼；

5、s2、將步驟s1得到的乳化液濃縮，降溫加入乙醇醇沉，得到上清液和沉淀物；

6、s3、分別將步驟s2得到的上清液和沉淀物干燥，得到小分子肽組分和多糖組分；

7、s4、將步驟s1得到的孢子壁殼采用復(fù)合酶a酶解，初次酶解后，加入復(fù)合酶b，二次酶解，滅酶，得到酶解混合物，固液分離后，得到酶解液和料渣；

8、s5、將步驟s4得到的酶解液干燥，得到可溶性膳食纖維；

9、s6、將步驟s4得到的料渣干燥后萃取，得到靈芝孢子油和殘料；

10、s7、將步驟s6得到殘料經(jīng)酸堿處理，得到殼聚糖。

11、優(yōu)選地，步驟s1中所述軟化為加水浸泡過(guò)夜，所述水的加入量為靈芝孢子質(zhì)量的3-20倍。

12、優(yōu)選地，步驟s1中所述乳化破壁為：以水為溶劑，高壓均質(zhì)。

13、進(jìn)一步優(yōu)選地，所述高壓均質(zhì)為：均質(zhì)壓力60-120mpa，均質(zhì)溫度30-70℃，均質(zhì)至少1次。

14、優(yōu)選地，步驟s1中所述固液分離為離心、過(guò)濾和壓濾中的至少一種。

15、優(yōu)選地，步驟s2中所述濃縮為30-80℃下濃縮至靈芝孢子質(zhì)量的25-75％。

16、優(yōu)選的，步驟s2中所述醇沉為：加入乙醇使乙醇的濃度為50-85wt％，在0-10℃下靜置8-48h。進(jìn)一步優(yōu)選地，加入乙醇使乙醇的濃度為55-65wt％。

17、優(yōu)選地，步驟s4中所述復(fù)合酶a包括纖維素酶和幾丁質(zhì)酶，所述復(fù)合酶b包括木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和α-淀粉酶。

18、進(jìn)一步優(yōu)選地，所述纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的重量比為(1-2):(2-3)，所述木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和α-淀粉酶的重量比為(2-4):(2-4):1。

19、優(yōu)選地，步驟s4中所述復(fù)合酶a為孢子壁殼質(zhì)量的0.3-0.5％，所述復(fù)合酶b為孢子壁殼質(zhì)量的0.8-1％。

20、優(yōu)選地，步驟s4中所述初次酶解的條件為：溫度40-60℃，時(shí)間1-5h，ph?5-5.5；進(jìn)一步優(yōu)選為溫度40-50℃，時(shí)間1-3h。

21、優(yōu)選地，步驟s4中所述二次酶解的條件為：溫度30-50℃，時(shí)間1-5h，ph?6-7；進(jìn)一步優(yōu)選為溫度40-50℃，時(shí)間1-3h。

22、優(yōu)選地，步驟s4中所述固液分離為離心、過(guò)濾和壓濾中的至少一種。

23、優(yōu)選地，步驟s6中所述萃取為co2超臨界萃取，進(jìn)一步優(yōu)選地，所述萃取的條件為：萃取壓力10-45mpa，溫度25-50℃。

24、本發(fā)明中所涉及的干燥均為本領(lǐng)域常規(guī)的干燥方式，目的在于控制含水量不超過(guò)10％。例如噴霧干燥，冷凍干燥、真空干燥、烘干或風(fēng)干，優(yōu)選地，所述干燥為噴霧干燥，溫度為30-70℃。

25、另一方面，本發(fā)明提供了上述方法制備的產(chǎn)品在制備化妝品、食品或藥品中的應(yīng)用。

26、本發(fā)明具有以下有益效果：

27、本發(fā)明的兼容性好，可一次性完成小分子肽、孢子多糖、孢子油、可溶性膳食纖維和殼聚糖分離，實(shí)現(xiàn)了靈芝孢子的全成分分離和利用。

28、相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明制備的靈芝孢子油和可溶性膳食纖維的產(chǎn)率更高，同時(shí)還可以提高可溶性膳食纖維的純度。

技術(shù)特征：

1.一種靈芝孢子全成分分離及利用的方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s1中所述軟化為加水浸泡過(guò)夜。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟s1中所述乳化破壁為：以水為溶劑，高壓均質(zhì)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s2中所述濃縮為30-80℃下濃縮至靈芝孢子質(zhì)量的25-75％。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟s2中所述醇沉為：加入乙醇使乙醇的濃度為50-85wt％，在0-10℃下靜置8-48h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s4中所述纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的重量比為(1-2):(2-3)，所述木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和α-淀粉酶的重量比為(2-4):(2-4):1；和/或

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟s4中所述初次酶解的條件為：溫度40-65℃，時(shí)間1-5h，ph?5-5.5。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟s4中所述二次酶解的條件為：溫度30-50℃，時(shí)間1-5h，ph?6-7。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s6中所述萃取為co2超臨界萃取。

10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的方法制備的產(chǎn)品在制備化妝品、食品或藥品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)一種靈芝孢子全成分分離及利用的方法及應(yīng)用，屬于加工技術(shù)領(lǐng)域。所述方法包括S1制備得到乳化液與孢子壁殼；S2乳化液濃縮醇沉，得上清液和沉淀物；S3分別將上清液和沉淀物干燥，得小分子肽組分和多糖組分；S4孢子壁殼采用復(fù)合酶A和復(fù)合酶B酶解，固液分離，得酶解液和料渣；復(fù)合酶A包括纖維素酶和幾丁質(zhì)酶，復(fù)合酶B包括木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和α?淀粉酶；S5酶解液制備可溶性膳食纖維；S6料渣干燥萃取，得靈芝孢子油和殘料；S7殘料制備殼聚糖。本發(fā)明可一次性完成多種產(chǎn)品的分離，實(shí)現(xiàn)了靈芝孢子的全成分分離和利用。相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明孢子油和可溶性膳食纖維的產(chǎn)率更高，同時(shí)還可以提高可溶性膳食纖維的純度。

技術(shù)研發(fā)人員：李振皓,李明焱,徐靖,陳美紅,胡凌娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者：浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/28