本發(fā)明涉及一種魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法。

背景技術(shù)：

1、我國具有約6.9億畝的低洼鹽堿水域，廣泛分布于我國東北、華北、西北等19個(gè)省、市、自治區(qū)。鹽堿水普遍具有高碳酸鹽堿度、高ph、離子系數(shù)不平衡等特點(diǎn)，其中堿度是制約其漁業(yè)利用的關(guān)鍵生態(tài)因子。低堿度鹽堿水(堿度<10mm)基本已被開發(fā)利用，但約90％以上的中、高堿度鹽堿水仍處于低產(chǎn)或荒置狀態(tài)。近年來，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部出臺(tái)相關(guān)政策，強(qiáng)調(diào)要循序漸進(jìn)、穩(wěn)步推進(jìn)鹽堿漁業(yè)發(fā)展，拓寬宜漁空間。中堿度鹽堿水(堿度10～30mm)，有望用于漁業(yè)生產(chǎn)。培育耐鹽堿魚類是對(duì)中堿度鹽堿水進(jìn)行開發(fā)利用的前提。鯉科魚類對(duì)堿度具有較強(qiáng)的耐受能力，如達(dá)里湖瓦氏雅羅魚能夠耐受達(dá)里湖堿度高達(dá)54mm的極堿環(huán)境，青海湖裸鯉能夠在堿度32mm的湖水中正常生長。評(píng)價(jià)魚類的耐堿性能，是篩選和培育耐鹽堿魚類的重要基礎(chǔ)。早期主要以96h半致死濃度(lc50)、安全濃度(sc)等方法評(píng)價(jià)魚類的耐堿性能。然而，高堿度急性脅迫會(huì)對(duì)魚類的組織器官造成器質(zhì)性損傷，進(jìn)而影響其生理、代謝等功能，擾亂其生理穩(wěn)態(tài)，即使有部分個(gè)體能夠存活，但由于其身體機(jī)能受到損傷，繼續(xù)進(jìn)行養(yǎng)殖或遺傳選育存在風(fēng)險(xiǎn)。因此，建立一種無損傷耐堿性能評(píng)價(jià)技術(shù)或方法尤為重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明為了解決現(xiàn)有的魚類耐堿性能評(píng)價(jià)中容易造成魚體損傷的問題，而提供了一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法。

2、本發(fā)明鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法按照以下步驟進(jìn)行：

3、一、采集待檢魚類樣本；

4、二、堿脅迫魚類樣本，抽取血液，分離血清；

5、三、測(cè)定血清中的谷氨酸脫氫酶gdh含量；

6、四、通過血清中g(shù)dh含量來評(píng)價(jià)耐堿性能，即gdh含量低于5nmol/min/ml的魚類，耐堿能力判定為高度；gdh含量為5～8nmol/min/ml的魚類，耐堿能力判定為中度；gdh含量高于8nmol/min/ml的魚類，耐堿能力判定為低度。

7、本發(fā)明有益效果：

8、本發(fā)明基于谷氨酸脫氫酶含量來評(píng)價(jià)草魚群體或個(gè)體的耐堿能力。血清中谷氨酸脫氫酶含量反應(yīng)了堿性脅迫下氨代謝機(jī)能，具有檢測(cè)快速、反應(yīng)靈敏的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明利用血清中g(shù)dh含量來度量群體或個(gè)體的耐堿性能，建立一種魚類無損傷耐堿性能評(píng)價(jià)方法，克服傳統(tǒng)耐堿性能評(píng)價(jià)對(duì)機(jī)體高損傷的缺陷，能夠快速實(shí)現(xiàn)草魚群體或個(gè)體的耐堿性評(píng)估，達(dá)到無損傷挑選耐堿性能高的群體或個(gè)體的目的。

9、本發(fā)明建立的草魚無損傷耐堿性能評(píng)價(jià)方法，能夠快速實(shí)現(xiàn)草魚耐堿性評(píng)估，挑選耐堿性能高的群體或個(gè)體，為耐堿草魚新品種選育及推廣養(yǎng)殖提供了理論依據(jù)和工作基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法按照以下步驟進(jìn)行：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟一中待檢魚類樣本為魚類群體或者魚類個(gè)體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟一中待檢魚類為草魚。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟一中待檢魚類樣本為2～4月齡幼魚，規(guī)格為體質(zhì)量13～30g。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟二中用nahco3堿脅迫魚類樣本。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟二中用濃度為20～30mmol/l的nahco3對(duì)魚類樣本進(jìn)行堿脅迫。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟二中堿脅迫魚類樣本期間持續(xù)充氣并保持水體循環(huán)過濾，抽取血液50μl，4℃靜置3h，分離血清為18～23μl。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，其特征在于步驟三中測(cè)定血清中的谷氨酸脫氫酶gdh含量采用的是多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定，讀取5min反應(yīng)時(shí)間340nm處的吸光值，計(jì)算得到待測(cè)樣本谷氨酸脫氫酶的含量。

技術(shù)總結(jié)
一種鯉科魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法，本發(fā)明涉及一種魚類耐堿性能評(píng)價(jià)方法。本發(fā)明解決了現(xiàn)有的魚類耐堿性能評(píng)價(jià)中容易造成魚體損傷的問題。方法：一、采集待檢魚類樣本；二、用NaHCO<subgt;3</subgt;脅迫魚類樣本，分離血清；三、測(cè)定血清中的谷氨酸脫氫酶GDH含量；四、通過血清中GDH含量來評(píng)價(jià)耐堿性能。本發(fā)明基于谷氨酸脫氫酶含量來評(píng)價(jià)草魚群體或個(gè)體的耐堿能力。血清中谷氨酸脫氫酶含量反應(yīng)了堿性脅迫下氨代謝機(jī)能，具有檢測(cè)快速、反應(yīng)靈敏的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明利用血清中GDH含量來度量群體或個(gè)體的耐堿性能，建立一種魚類無損傷耐堿性能評(píng)價(jià)方法。

技術(shù)研發(fā)人員：常玉梅,魯翠云,鄭先虎,黃晶,孫志鵬,張渴新,劉天奇,戶國,王瑞,石昌何,鄒宇婷
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6