本發(fā)明屬于微生物,具體涉及一株蘇云金芽孢桿菌zr-560及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、蘇云金芽孢桿菌(bacillus?thuringiensis,bt)屬于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,芽孢桿菌屬的一個(gè)種。bt在芽孢形成的同時(shí)產(chǎn)生晶體蛋白(insecticidal?crystal?proteins,icps),晶體蛋白主要由晶體蛋白基因(crystal,cry)和溶細(xì)胞素(cytolytic,cyt)基因編碼。據(jù)報(bào)道,蘇云金芽孢桿菌的晶體形態(tài)有很多種,主要包括:方形、菱形、多邊形、球形、橢圓形、米粒形、無(wú)規(guī)則形等。而不同亞種,甚至不同菌株中所含殺蟲(chóng)晶體蛋白的種類和數(shù)量都是有差異的,有些菌株包含了不止一種晶體形態(tài),一般有菱形和球形的組合、菱形和方形的組合等等,晶體形態(tài)的不同也表明菌株中基因的不同,導(dǎo)致菌株的殺蟲(chóng)活性差異。
2、晶體蛋白具有特異的殺蟲(chóng)活性,且高效專一、無(wú)毒、不污染環(huán)境,因而被廣泛作為微生物殺蟲(chóng)劑應(yīng)用在農(nóng)林、果蔬、衛(wèi)生等領(lǐng)域,近年來(lái)也大量推廣應(yīng)用在轉(zhuǎn)基因植物中,并取得了良好的效果。
3、夜蛾科(noctuidae)是鱗翅目(lepidoptera)中最大的科,世界約有3.5萬(wàn)種左右,草地貪夜蛾(spodoptera?frugiperda)、甜菜夜蛾(spodoptera?exigua)、斜紋夜蛾(spodoptera?liturafabricius)等同屬鱗翅目夜蛾科,是我國(guó)主要的農(nóng)林業(yè)害蟲(chóng)。近年來(lái),又以草地貪夜蛾危害最為嚴(yán)重。據(jù)全國(guó)農(nóng)技推廣中心綜合分析,2023年全國(guó)發(fā)生草地貪夜蛾危害面積達(dá)4500萬(wàn)畝,充分說(shuō)明我國(guó)草地貪夜蛾的防控工作形勢(shì)十分嚴(yán)峻,面臨重大挑戰(zhàn)。
4、現(xiàn)有技術(shù)cn112695001b(公開(kāi)日:2021-10-08)公開(kāi)了一株對(duì)夜蛾科害蟲(chóng)具有高毒殺活性的蘇云金芽孢桿菌nbi-646及其應(yīng)用,在其發(fā)酵液的濃度為0.5μl/ml時(shí),對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的毒殺活性最高,達(dá)到89%。
5、然而,目前國(guó)內(nèi)登記的用于草地貪夜蛾防治的bt產(chǎn)品較少,對(duì)草地貪夜蛾的可持續(xù)綠色防控的微生物農(nóng)藥仍然較為缺乏。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于針對(duì)以上不足,提供一株高毒力蘇云金芽孢桿菌zr-560,豐富了在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用中防治以草地貪夜蛾為主的作物害蟲(chóng)的高效菌株資源,為解決上述問(wèn)題提供一種新的選擇。
2、本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
3、本發(fā)明提供的蘇云金芽孢桿菌,分類命名為蘇云金芽孢桿菌bacillusthuringiensis,采集自四川成都距地表5-10cm深處的土壤,命名為蘇云金芽孢桿菌zr-560,已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏編號(hào)為cgmccno.30586,保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),保藏日期為2024年5月17日。
4、本發(fā)明提供的蘇云金芽孢桿菌zr-560的形態(tài)特征如下:在lb培養(yǎng)基上的菌落為圓形或者橢圓形,淡黃色,邊緣不規(guī)則、不透明,微隆起呈滴蠟狀。菌株在顯微鏡下呈紫色橢圓形桿狀,芽孢為橢圓形,靠近中間生長(zhǎng),芽孢囊微膨大。
5、基于全基因組測(cè)序中的同源基因組分析結(jié)果,以鄰接法(neighbour-joining)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),結(jié)果顯示蘇云金芽孢桿菌zr-560屬蘇云金芽孢桿菌中華亞種(bacillusthuringiensis?serovar?chinensis?ct-43),與同一分支的血清型亞種(aizawai)親緣關(guān)系最近。
6、本發(fā)明還提供上述的蘇云金芽孢桿菌zr-560在防治作物害蟲(chóng)中的應(yīng)用。
7、進(jìn)一步的是,所述作物害蟲(chóng)包括草地貪夜蛾、玉米螟、斜紋夜蛾和/或甜菜夜蛾。
8、本發(fā)明還提供一種用于防治作物害蟲(chóng)的微生物制劑,所述微生物制劑包含上述的蘇云金芽孢桿菌zr-560的伴胞晶體蛋白。
9、進(jìn)一步的是,所述微生物制劑中所述的蘇云金芽孢桿菌zr-560的伴胞晶體蛋白濃度不低于450mg/ml。
10、本發(fā)明還提供上述的微生物制劑在防治作物害蟲(chóng)中的應(yīng)用。
11、進(jìn)一步的是,所述作物害蟲(chóng)包括草地貪夜蛾、玉米螟、斜紋夜蛾和/或甜菜夜蛾。
12、本發(fā)明的有益效果是:
13、1.本發(fā)明提供的蘇云金芽孢桿菌zr-560菌株具有較高的殺蟲(chóng)毒力,其伴胞晶體蛋白制劑對(duì)草地貪夜蛾、玉米螟、斜紋夜蛾、甜菜夜蛾的校正死亡率達(dá)到100%,是一株具有相對(duì)廣譜殺蟲(chóng)效果的bt菌株。
14、2.以zr-560菌株的伴胞晶體制備的微生物菌劑對(duì)環(huán)境友好、抗逆性強(qiáng),離體葉片生物活性、盆栽防效及田間防效測(cè)定均表明該菌株對(duì)草地貪夜蛾等害蟲(chóng)具有高防效,能顯著降低其對(duì)作物危害,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具備較高的應(yīng)用潛力。
1.一株蘇云金芽孢桿菌(bacillus?thuringiensis),名稱為蘇云金芽孢桿菌zr-560,其保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏編號(hào)為cgmcc?no.30586,保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),保藏日期為2024年5月17日。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌zr-560在防治作物害蟲(chóng)中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述作物害蟲(chóng)包括草地貪夜蛾、玉米螟、斜紋夜蛾和/或甜菜夜蛾。
4.一種用于防治作物害蟲(chóng)的微生物制劑,其特征在于,所述微生物制劑包含權(quán)利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌zr-560的伴胞晶體蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種用于防治作物害蟲(chóng)的微生物制劑,其特征在于,所述微生物制劑中所述的蘇云金芽孢桿菌zr-560的伴胞晶體蛋白濃度不低于450mg/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微生物制劑在防治作物害蟲(chóng)中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述作物害蟲(chóng)包括草地貪夜蛾、玉米螟、斜紋夜蛾和/或甜菜夜蛾。