本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)研究，具體涉及sirt5分子在ph+all惡性進(jìn)展中的作用及具體機(jī)制

背景技術(shù)：

1、費(fèi)城染色體陽(yáng)性的急性淋巴細(xì)胞白血病(philadelphia?chromosome-positiveacute?lymphoblastic?leukemia，ph+all)是一種起源于造血干/祖細(xì)胞的惡性增殖性疾病，其特征是具有費(fèi)城染色體(philadelphia?chromosome，ph染色體)，是急性淋巴細(xì)胞白血病(all)的高危亞型。酪氨酸激酶抑制劑(tki)和異基因造血干細(xì)胞移植(allo-hsct)顯著改善了ph+all患者的預(yù)后，延長(zhǎng)患者生存期，但仍有相當(dāng)一部分患者預(yù)后較差，且長(zhǎng)期生存率低于20％。因此，亟須進(jìn)一步探尋治療ph+all的新靶點(diǎn)及策略。

2、通過蛋白質(zhì)組學(xué)測(cè)序分析，我們發(fā)現(xiàn)與其他白血病細(xì)胞相比，ph+all細(xì)胞中氧化磷酸化(oxidative?phosphorylation，oxphos)通路顯著上調(diào)。用seahorse能量代謝分析儀檢測(cè)ph+all與其他類型白血病細(xì)胞株及臨床骨髓樣本的基礎(chǔ)氧消耗率(oxygen?consumption?rate，ocr)、細(xì)胞外酸化率(extracellular?acidification?rate，ecar)水平，結(jié)果表明與其他類型白血病細(xì)胞相比，ph+all細(xì)胞的基礎(chǔ)oxphos明顯升高，但糖酵解水平無(wú)明顯差異。

3、通過蛋白質(zhì)組學(xué)測(cè)序分析，我們發(fā)現(xiàn)調(diào)控能量代謝的sirt5分子在sup-b15細(xì)胞(一種ph+all細(xì)胞株)中顯著高表達(dá)。sirt5是沉默信息調(diào)節(jié)因子(silent?informationregulator，sirt)家族中重要的一員。sirt家族是最近發(fā)現(xiàn)的依賴煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)的組蛋白去乙?；负蚢dp-核糖基轉(zhuǎn)移酶。sirt5因其n-末端具有靶向線粒體的序列，主要定位于線粒體發(fā)揮其生物學(xué)功能，參與線粒體中多種能量代謝過程，包括脂肪酸β氧化、酮體生成、氧化磷酸化以及尿素氮循環(huán)，被認(rèn)為是生物體能量代謝調(diào)節(jié)器。然而，相較于sirt家族其他成員在血液系統(tǒng)腫瘤中的深入研究，當(dāng)前對(duì)sirt5調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞新陳代謝途徑的研究相對(duì)較少，且多局限于實(shí)體腫瘤和aml，在費(fèi)城染色體陽(yáng)性急性淋巴細(xì)胞白血病進(jìn)展中的作用還未見報(bào)道。

4、我們經(jīng)qrt-pcr和western?blotting實(shí)驗(yàn)證實(shí)，sirt5的mrna及蛋白水平在ph+all細(xì)胞中顯著高表達(dá)。敲低sirt5后，sup-b15細(xì)胞的oxphos明顯下降。這說(shuō)明sirt5可能調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的oxphos代謝。但是，sirt5調(diào)節(jié)的oxphos增高是否促進(jìn)ph+all細(xì)胞的惡性表型、sirt5具體通過哪條代謝途徑調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的oxphos、sirt5又是通過什么機(jī)制調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的oxphos，目前都沒有相關(guān)研究報(bào)道，本發(fā)明具體闡述了上述三個(gè)問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是闡明ph+all中bcr::abl以外的致病機(jī)制，為治療ph+all提供一種新的策略，以解決背景技術(shù)中所提出的問題。

2、本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

3、sirt5分子在ph+all惡性進(jìn)展中的作用及具體機(jī)制

4、進(jìn)一步的，所述分子對(duì)ph+all惡性進(jìn)展的影響。

5、進(jìn)一步的，所述分子作用于ph+all細(xì)胞的氧化磷酸化。

6、進(jìn)一步的，所述分子調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的谷氨酸代謝途徑。

7、更進(jìn)一步的，所述分子調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的谷氨酸脫氫酶的活性。

8、進(jìn)一步的，所述分子通過去琥珀?；险{(diào)谷氨酸脫氫酶的酶活性。

9、進(jìn)一步的，所述分子在篩選診斷、預(yù)防、緩解和/或治療ph+all中的應(yīng)用。

10、本發(fā)明提供了sirt5分子在研究ph+all發(fā)生、發(fā)展機(jī)制中的應(yīng)用。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

12、(1)本發(fā)明首次提出sirt5分子在研究ph+all發(fā)生、發(fā)展機(jī)制中的應(yīng)用。

13、(2)本發(fā)明首次闡述了sirt5通過去琥珀酰化修飾調(diào)節(jié)gdh的活性，提高谷氨酸轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸(α-kg)的效率，使進(jìn)入三羧酸循環(huán)(tca)的碳流量增多，產(chǎn)生更多的nadh和fadh2進(jìn)入氧化呼吸鏈，進(jìn)而增強(qiáng)細(xì)胞的oxphos。

14、(3)本發(fā)明首次檢測(cè)了ph+all細(xì)胞中sirt5的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)sirt5敲低表達(dá)的ph+all細(xì)胞的氧化磷酸化水平降低，而非ph+all細(xì)胞無(wú)影響，預(yù)示sirt5有望成為臨床上治療ph+all的新靶點(diǎn)。

15、(4)本發(fā)明首次提出sirt5分子在開發(fā)ph+all診斷、預(yù)防和/或治療靶點(diǎn)中的潛力。

技術(shù)特征：

1.sirt5通過去琥珀酰化gdh增強(qiáng)氧化磷酸化促進(jìn)ph+all惡性進(jìn)展。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述sirt5分子作用于ph+all細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述sirt5分子作用于ph+all細(xì)胞的氧化磷酸化。

4.根據(jù)權(quán)利要求1、3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述sirt5分子調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的谷氨酸代謝途徑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述sirt5分子調(diào)節(jié)ph+all細(xì)胞的谷氨酸脫氫酶的活性從而影響谷氨酸代謝。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述sirt5分子通過去琥珀?；险{(diào)谷氨酸脫氫酶的酶活性。

7.sirt5分子作為靶點(diǎn)，在ph+all診斷、預(yù)防、緩解和/或治療中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了SIRT5促進(jìn)費(fèi)城染色體陽(yáng)性急性淋巴細(xì)胞白血病(Ph+ALL)惡性進(jìn)展的作用及具體機(jī)制。本發(fā)明首次在Ph+ALL中闡述SIRT5通過去琥珀酰化修飾谷氨酸脫氫酶從而上調(diào)其酶活性，促進(jìn)谷氨酸代謝而增強(qiáng)細(xì)胞氧化磷酸化，進(jìn)而促進(jìn)Ph+ALL疾病進(jìn)展。本發(fā)明為探明Ph+ALL發(fā)生及發(fā)展的機(jī)制、以及以SIRT5為靶點(diǎn)開發(fā)治療Ph+ALL的藥物提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

技術(shù)研發(fā)人員：黃崢蘭,杜妍,劉索天
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶醫(yī)科大學(xué)國(guó)際體外診斷研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2