本發(fā)明屬于治療性單克隆抗體領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明涉及一種針對cldn18.2的抗體；還涉及所述抗體在治療疾病中的用途。
背景技術(shù)：
：：0、技術(shù)背景1、claudin?18.2(cldn18.2)是緊密連接蛋白claudin蛋白家族成員。緊密連接蛋白是一類介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞之間緊密連接的蛋白，不同亞型的claudin蛋白表達(dá)于不同的組織，與不同類型的癌癥有關(guān)。claudin?1在結(jié)腸癌中高表達(dá)，claudin?7與肝癌的復(fù)發(fā)有關(guān)。claudin?18.2在正常組織中的表達(dá)僅限于胃粘膜細(xì)胞，不表達(dá)于其他正常組織中。同時(shí)claudin?18.2表達(dá)于70％的原發(fā)性胃腺癌及其轉(zhuǎn)移瘤中，在其他一些癌癥如胰腺癌(50％)，食管癌(30％)和非小細(xì)胞肺癌(25％)中也有表達(dá)，其中胃癌、胰腺癌預(yù)后差、死亡率高，目前藥物需求極大。2、claudin?18.2蛋白包括4個(gè)跨膜區(qū)域、兩個(gè)細(xì)胞外環(huán)和一個(gè)細(xì)胞內(nèi)環(huán)，其n末端和c末端在胞漿內(nèi)。兩個(gè)細(xì)胞外環(huán)使其成為理想的抗體靶點(diǎn)。claudin?18.2蛋白序列在物種間高度保守。其同源家族蛋白claudin?18.1在肺組織中特異性表達(dá)，和claudin?18.2的序列非常相似，細(xì)胞外環(huán)d1中只有8個(gè)氨基酸差異，決定了抗體識別表位。claudin?18.2和claudin?18.1之間的高相似性使claudin?18.2特異性抗體藥物的發(fā)現(xiàn)更具挑戰(zhàn)性。3、安斯泰來公司的zolbetuximab(imab362)是一種人鼠嵌合igg1型抗體，靶向claudin?18.2。它與腫瘤細(xì)胞表面的claudin18.2結(jié)合，激活抗體依賴性細(xì)胞毒性(adcc)和補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(cdc)功能。它還可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤細(xì)胞增殖。4、然而，尚沒有相關(guān)藥物上市。因此，發(fā)展具有更高的特異性、更低的毒副作用、更優(yōu)的臨床藥效的抗靶向claudin?18.2抗體是迫切而必要的，這將給癌癥患者提供更多的用藥選擇。技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路1、在本技術(shù)中，發(fā)明人首先開發(fā)了具有優(yōu)良性質(zhì)的鼠源抗體，其能夠特異性識別/結(jié)合cldn18.2，而不結(jié)合cldn18.1。在此基礎(chǔ)上，發(fā)明人又付出了大量的創(chuàng)造性勞動(dòng)，對該鼠源抗體進(jìn)行了深入的研究和改造，從而開發(fā)了該鼠源抗體的嵌合抗體和人源化抗體。本發(fā)明的人源化抗體不僅具有極高的人源化程度，而且具有與鼠源抗體和人鼠嵌合抗體(嵌合抗體具有與鼠源抗體完全相同的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū))基本上相同的(或甚至更優(yōu)良的)生物學(xué)功能。2、因此，本發(fā)明的抗體(特別是人源化抗體)是極為有利的，其不僅保留了親本鼠源抗體的功能和性質(zhì)，例如以很高的親和力和特異性結(jié)合cldn18.2，而因而具有用于預(yù)防和治療腫瘤的潛力；本發(fā)明的人源化抗體具有極高的人源化程度，從而可安全地施用給人受試者，而不引發(fā)免疫原性反應(yīng)。所以本發(fā)明的抗體具有重大的臨床價(jià)值。3、本發(fā)明的抗體4、在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種能夠特異性結(jié)合cldn18.2的抗體或其抗原結(jié)合片段。5、在一些實(shí)施方案中，其中所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如下的互補(bǔ)決定區(qū)(cdrs)：6、(a)seq?id?no:1所示的重鏈可變區(qū)(vh)中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或7、seq?id?no:2所示的輕鏈可變區(qū)(vl)中含有的cdr-l1、cdr-l2以及cdr-l3；8、或9、(b)seq?id?no:3、39或40所示的vh中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或10、seq?id?no:4或41所示的vl中含有的cdr-l1、cdr-l2以及cdr-l3；11、或(c)seq?id?no:44所示的vh中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或12、seq?id?no:45所示的vl中含有的cdr-l1、cdr-l2列以及cdr-l3；13、或(d)seq?id?no:46所示的vh中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或14、seq?id?no:47所示的vl中含有的cdr-l1、cdr-l2以及cdr-l3；或15、(e)seq?id?no:48所示的vh中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或16、seq?id?no:49所示的vl中含有的cdr-l1、cdr-l2以及cdr-l3；或17、(f)seq?id?no:50所示的vh中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或18、seq?id?no:51所示的vl中含有的cdr-l1、cdr-l2以及cdr-l3；或19、(g)seq?id?no:52所示的vh中含有的cdr-h1、cdr-h2以及cdr-h3；和/或20、seq?id?no:53所示的vl中含有的cdr-l1、cdr-l2以及cdr-l3；或21、(h)下述重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)，其中，所述重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)與(a)至(g)任一所述的重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)相比，至少一個(gè)cdr含有突變，所述突變?yōu)橐粋€(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)或3個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)；優(yōu)選地，所述的置換為保守置換；22、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述cdr根據(jù)kabat，imgt，chothia或abm編號系統(tǒng)定義；優(yōu)選地，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl中包括來自人或鼠的免疫球蛋白的構(gòu)架區(qū)(frs)，優(yōu)選地，所述抗體或其抗原結(jié)合片段結(jié)合人cldn18.2。23、在一些實(shí)施方案中，提供了一種能夠特異性結(jié)合cldn18.2的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含：重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)。24、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含下述重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)，其中cdr按imgt編號系統(tǒng)定義：25、(a)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：5的cdr-h1，序列為seqid?no：6的cdr-h2，序列為seq?id?no：7的cdr-h3；和/或，26、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：8的cdr-l1，序列為seq?idno：9的cdr-l2，序列為seq?id?no：10的cdr-l3；27、或28、(b)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：11的cdr-h1，序列為seq?id?no：12或110的cdr-h2，序列為seq?id?no：13的cdr-h3；和/或，29、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：14的cdr-l1，序列為seqid?no：15的cdr-l2，序列為seq?id?no：16的cdr-l3；30、或31、(c)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：81的cdr-h1，序列為seq?id?no：82的cdr-h2，序列為seq?id?no：83的cdr-h3；和/或，32、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：95的cdr-l1，序列為seqid?no：96的cdr-l2，序列為seq?id?no：97的cdr-l3；33、或34、(d)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：81的cdr-h1，序列為seq?id?no：84的cdr-h2，序列為seq?id?no：85的cdr-h3；和/或，35、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：95的cdr-l1，序列為seqid?no：96的cdr-l2，序列為seq?id?no：97的cdr-l3；36、或37、(e)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：86的cdr-h1，序列為seq?id?no：87的cdr-h2，序列為seq?id?no：88的cdr-h3；和/或，38、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：95的cdr-l1，序列為seqid?no：98的cdr-l2，序列為seq?id?no：99的cdr-l3；39、或40、(f)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：89的cdr-h1，序列為seq?id?no：90的cdr-h2，序列為seq?id?no：91的cdr-h3；和/或，41、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：95的cdr-l1，序列為seqid?no：98的cdr-l2，序列為seq?id?no：99的cdr-l3；42、或43、(g)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：92的cdr-h1，序列為seq?id?no：93的cdr-h2，序列為seq?id?no：94的cdr-h3；和/或，44、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：95的cdr-l1，序列為seqid?no：100的cdr-l2，序列為seq?id?no：101的cdr-l3。45、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含下述重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)，其中cdr按abm編號系統(tǒng)定義：46、(a)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：17的cdr-h1，序列為seq?id?no：18的cdr-h2，序列為seq?id?no：19的cdr-h3；和/或，47、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：20的cdr-l1，序列為seqid?no：21的cdr-l2，序列為seq?id?no：22的cdr-l3；48、或49、(b)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：23的cdr-h1，序列為seq?id?no：24或111的cdr-h2，序列為seq?id?no：25的cdr-h3；和/或，50、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：26的cdr-l1，序列為seqid?no：27的cdr-l2，序列為seq?id?no：28的cdr-l3；51、或52、(c)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：58的cdr-h1，序列為seq?id?no：62的cdr-h2，序列為seq?id?no：67的cdr-h3；和/或，53、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：72的cdr-l1，序列為seqid?no：74的cdr-l2，序列為seq?id?no：78的cdr-l3；54、或55、(d)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：58的cdr-h1，序列為seq?id?no：63的cdr-h2，序列為seq?id?no：68的cdr-h3；和/或，56、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：72的cdr-l1，序列為seqid?no：74的cdr-l2，序列為seq?id?no：78的cdr-l3；57、或58、(e)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：59的cdr-h1，序列為seq?id?no：64的cdr-h2，序列為seq?id?no：69的cdr-h3；和/或，59、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：72的cdr-l1，序列為seqid?no：75的cdr-l2，序列為seq?id?no：79的cdr-l3；60、或61、(f)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：60的cdr-h1，序列為seq?id?no：65的cdr-h2，序列為seq?id?no：70的cdr-h3；和/或，62、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：72的cdr-l1，序列為seqid?no：76的cdr-l2，序列為seq?id?no：79的cdr-l3；63、或64、(g)包含如下3個(gè)cdr的重鏈可變區(qū)(vh)：序列為seq?id?no：61的cdr-h1，序列為seq?id?no：66的cdr-h2，序列為seq?id?no：71的cdr-h3；和/或，65、包含如下3個(gè)cdr的輕鏈可變區(qū)(vl)：序列為seq?id?no：73的cdr-l1，序列為seqid?no：77的cdr-l2，序列為seq?id?no：80的cdr-l3。66、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含下述重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)，其中，所述重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)與前述imgt、chothia、kabat或abm定義下(a)至(g)任一所述的重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)相比，至少一個(gè)cdr含有突變，所述突變?yōu)橐粋€(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)或3個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)；優(yōu)選地，所述的置換為保守置換。67、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的vh包含來源于鼠免疫球蛋白的重鏈可變區(qū)(vh)構(gòu)架區(qū)(fr)，和/或所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vl包含來源于鼠免疫球蛋白的輕鏈可變區(qū)(vl)構(gòu)架區(qū)(fr)。因此，在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段是鼠源的。68、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的vh包含來源于人免疫球蛋白的重鏈可變區(qū)(vh)構(gòu)架區(qū)(fr)，和/或所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vl包含來源于人免疫球蛋白的輕鏈可變區(qū)(vl)構(gòu)架區(qū)(fr)。因此，在某些優(yōu)選地實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段是人源化的。在此類實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈可變區(qū)fr和/或輕鏈可變區(qū)fr可以包含一個(gè)或多個(gè)非人源(例如，鼠源)氨基酸殘基，例如所述重鏈構(gòu)架區(qū)fr和/或輕鏈構(gòu)架區(qū)fr可以包含一或多個(gè)氨基酸回復(fù)突變，在這些回復(fù)突變中有相應(yīng)的鼠源氨基酸殘基。69、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：70、(a)人免疫球蛋白的重鏈構(gòu)架區(qū)或其變體，所述變體與其所源自的胚系抗體基因序列相比具有至多20個(gè)氨基酸的保守置換(例如至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的保守置換；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的保守置換)；和/或71、(b)人免疫球蛋白的輕鏈構(gòu)架區(qū)或其變體，所述變體與其所源自胚系抗體基因的序列相比具有至多20個(gè)氨基酸的保守置換(例如至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的保守置換；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的保守置換)。72、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的人源化程度為至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％。73、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：74、(a)重鏈可變區(qū)(vh)，其包含選自下列的氨基酸序列：75、(i)seq?id?nos：1、29、30、31、32任一項(xiàng)所示的序列；76、(ii)與seq?id?nos：1、29、30、31、32任一項(xiàng)所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或77、(iii)與seq?id?nos：1、29、30、31、32任一項(xiàng)所示的序列具有至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；78、和/或79、(b)輕鏈可變區(qū)(vl)，其包含選自下列的氨基酸序列：80、(iv)seq?id?nos：2、33、34、35、36、37、38任一項(xiàng)所示的序列；81、(v)與seq?id?nos：2、33、34、35、36、37、38任一項(xiàng)所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或82、(vi)與seq?id?nos：2、33、34、35、36、37、38任一項(xiàng)所示的序列具有至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列。83、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：84、(a)重鏈可變區(qū)(vh)，其包含選自下列的氨基酸序列：85、(i)seq?id?nos：3、39、40任一項(xiàng)所示的序列；86、(ii)與seq?id?nos：3、39、40任一項(xiàng)所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或87、(iii)與seq?id?nos：3、39、40任一項(xiàng)所示的序列具有至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；88、和/或89、(b)輕鏈可變區(qū)(vl)，其包含選自下列的氨基酸序列：90、(iv)seq?id?nos：4、41任一項(xiàng)所示的序列；91、(v)與seq?id?nos：4、41任一項(xiàng)所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或92、(vi)與seq?id?nos：4、41任一項(xiàng)所示的序列具有至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列。93、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有如下的重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)：seq?id?nos：1、29、30、31、32任一項(xiàng)所示的vh序列，和/或,seq?idnos：2、33、34、35、36、37、38任一項(xiàng)所示的vl序列。94、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有如下的重鏈可變區(qū)(vh)和/或輕鏈可變區(qū)(vl)：seq?id?nos：3、39、40任一項(xiàng)所示的vh序列，和/或,seq?id?nos：4、41任一項(xiàng)所示vl的序列。95、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有seq?id?no：44所示的vh序列，和/或,seq?id?no：45所示vl的序列。96、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：44所示的vh序列，和/或,seq?id?no：45所示的vl序列至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。97、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：44所示的vh序列，和/或,seq?id?no：45所示的vl序列具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)。在優(yōu)選地實(shí)施方案中，所述的置換是保守置換。98、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有seq?id?no：46所示的vh序列，和/或,seq?id?no：47所示vl的序列。99、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：46所示的vh序列，和/或,seq?id?no：47所示的vl序列至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。100、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：46所示的vh序列，和/或,seq?id?no：47所示的vl序列具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)。在優(yōu)選地實(shí)施方案中，所述的置換是保守置換。101、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有seq?id?no：48所示的vh序列，和/或,seq?id?no：49所示vl的序列。102、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：48所示的vh序列，和/或,seq?id?no：49所示的vl序列至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。103、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：48所示的vh序列，和/或,seq?id?no：49所示的vl序列具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)。在優(yōu)選地實(shí)施方案中，所述的置換是保守置換。104、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有seq?id?no：50所示的vh序列，和/或,seq?id?no：51所示vl的序列；105、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：50所示的vh序列，和/或,seq?id?no：51所示的vl序列至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。106、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：50所示的vh序列，和/或,seq?id?no：51所示的vl序列具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)。在優(yōu)選地實(shí)施方案中，所述的置換是保守置換。107、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具有seq?id?no：52所示的vh序列，和/或,seq?id?no：53所示vl的序列；108、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：52所示的vh序列，和/或,seq?id?no：53所示的vl序列至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。109、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段的vh和/或vl具有與相比seq?idno：52所示的vh序列，和/或,seq?id?no：53所示的vl序列具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)。在優(yōu)選地實(shí)施方案中，所述的置換是保守置換。110、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：111、(a)具有如seq?id?no：1所示的序列的vh和具有如seq?id?no：2所示的序列的vl；112、(b)具有如seq?id?no：29所示的序列的vh和具有如seq?id?no：33113、所示的序列的vl；114、(c)具有如seq?id?no：29所示的序列的vh和具有如seq?id?no：34115、所示的序列的vl；116、(d)具有如seq?id?no：29所示的序列的vh和具有如seq?id?no：35117、所示的序列的vl；或118、(e)具有如seq?id?no：29所示的序列的vh和具有如seq?id?no：36119、所示的序列的vl。120、(f)具有如seq?id?no：29所示的序列的vh和具有如seq?id?no：37121、所示的序列的vl。122、(g)具有如seq?id?no：29所示的序列的vh和具有如seq?id?no：38123、所示的序列的vl。124、(h)具有如seq?id?no：30所示的序列的vh和具有如seq?id?no：33125、所示的序列的vl。126、(i)具有如seq?id?no：31所示的序列的vh和具有如seq?id?no：33127、所示的序列的vl。128、(j)具有如seq?id?no：32所示的序列的vh和具有如seq?id?no：33129、所示的序列的vl。130、(k)具有如seq?id?no：3所示的序列的vh和具有如seq?id?no：4所示的序列的vl；131、(l)具有如seq?id?no：39所示的序列的vh和具有如seq?id?no：41132、所示的序列的vl；133、(m)具有如seq?id?no：40所示的序列的vh和具有如seq?id?no：41134、所示的序列的vl；135、(n)具有如seq?id?no：44所示的序列的vh和具有如seq?id?no：45136、所示的序列的vl137、(o)具有如seq?id?no：46所示的序列的vh和具有如seq?id?no：47138、所示的序列的vl139、(p)具有如seq?id?no：48所示的序列的vh和具有如seq?id?no：49140、所示的序列的vl；141、(q)具有如seq?id?no：50所示的序列的vh和具有如seq?id?no：51142、所示的序列的vl；或143、(r)具有如seq?id?no：52所示的序列的vh和具有如seq?id?no：53144、所示的序列的vl。145、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)與(a)至(r)中任一組相比，重鏈可變區(qū)(vh)具有至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；和/或，輕鏈可變區(qū)(vl)具有至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。146、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述重鏈可變區(qū)(vh)和輕鏈可變區(qū)(vl)與(a)至(r)中任一組相比，重鏈可變區(qū)(vh)具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)；和/或，輕鏈可變區(qū)(vl)具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)；優(yōu)選地，所述的置換是保守置換。147、在以上任一方面中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段可以進(jìn)一步包含來源于哺乳動(dòng)物(例如，鼠或人)免疫球蛋白的恒定區(qū)序列或其變體。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈包含人或鼠免疫球蛋白的重鏈恒定區(qū)(ch)或其變體，所述變體與其所源自的野生型序列相比具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如，至多20個(gè)、至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)；和/或，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的輕鏈包含人或鼠免疫球蛋白的輕鏈恒定區(qū)(cl)或其變體，所述變體與其所源自的野生型序列相比具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如，至多20個(gè)、至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)。148、在某些優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈包含人免疫球蛋白的重鏈恒定區(qū)(ch)或其變體，所述變體與其所源自的野生型序列相比具有至多20個(gè)氨基酸的保守置換(例如至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的保守置換；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的保守置換)；和/或，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的輕鏈包含人免疫球蛋白的輕鏈恒定區(qū)(cl)或其變體，所述變體與其所源自的野生型序列相比具有至多20個(gè)氨基酸的保守置換(例如至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的保守置換；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的保守置換)。149、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈包含鼠免疫球蛋白的重鏈恒定區(qū)(ch)或其變體，所述變體與其所源自的野生型序列相比具有至多20個(gè)氨基酸的保守置換(例如至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的保守置換；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的保守置換)；和/或，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的輕鏈包含鼠免疫球蛋白的輕鏈恒定區(qū)(cl)或其變體，所述變體與其所源自的野生型序列相比具有至多20個(gè)氨基酸的保守置換(例如至多15個(gè)、至多10個(gè)、或至多5個(gè)氨基酸的保守置換；例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的保守置換)。150、在一些實(shí)施方案中，恒定區(qū)被改變，例如被突變，以修飾抗cldn18.2抗體分子的性質(zhì)(例如改變下列中的一個(gè)或更多個(gè)特性：fc受體結(jié)合、抗體糖基化、半胱氨酸殘基的數(shù)目、效應(yīng)細(xì)胞功能或補(bǔ)體功能)。可以通過將抗體恒定區(qū)中的至少一個(gè)氨基酸殘基替換為不同殘基，產(chǎn)生功能改變，例如，改變抗體對效應(yīng)子配體(如fcr或補(bǔ)體c1q)的親和力，從而改變效應(yīng)子功能(例如增強(qiáng))?？贵w的fc區(qū)介導(dǎo)幾種重要的效應(yīng)子功能，例如adcc、吞噬作用、cdc等。在某些情況下，這些效應(yīng)子功能對于治療性抗體是需要的。151、在某些實(shí)施方案中，抗cldn18.2抗體分子具有重鏈恒定區(qū)(fc)，其選自例如igg1、igg2、igg3、igg4、igm、iga1、iga2、igd和ige的重鏈恒定區(qū)；特別地選自例如igg1、igg2、igg3和igg4的重鏈恒定區(qū)，更特別地選自igg1或igg4(例如是人igg1或igg4)的重鏈恒定區(qū)。在一些實(shí)施方案中，抗cldn18.2抗體分子具有輕鏈恒定區(qū)，其選自例如κ或λ的輕鏈恒定區(qū)，優(yōu)選κ輕鏈恒定區(qū)(例如人κ輕鏈)。152、在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含選自下列的重鏈恒定區(qū)：153、(1)人igg1重鏈恒定區(qū)；或154、(2)人igg4重鏈恒定區(qū)。155、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：156、(a)重鏈恒定區(qū)(ch)，其包含選自下列的氨基酸序列：157、(i)seq?id?no:42所示的序列；158、(ii)與seq?id?no:42所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或159、(iii)與seq?id?no:42所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；160、和/或161、(b)輕鏈恒定區(qū)(cl)，其包含選自下列的氨基酸序列：162、(iv)seq?id?no:43所示的序列；163、(v)與seq?id?no:43所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或164、(vi)與seq?id?no:43所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列。165、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，(ii)或(v)中所述的置換是保守置換。166、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)和如seq?id?no：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)。167、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：1所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：2所示序列的vl和seq?id?no：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。168、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：29所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：33所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。169、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：29所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：34所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。170、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：29所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：35所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。171、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：29所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：36所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。172、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：29所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：37所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。173、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：29所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：38所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。174、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：30所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：33所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。175、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：31所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：33所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。176、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：32所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：33所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。177、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：3所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：4所示序列的vl和seq?id?no：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。178、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：39所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：41所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。179、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：40所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：41所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。180、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：44所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：45所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。181、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：46所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：47所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。182、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：48所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：49所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。183、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：50所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：51所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。184、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體包括seq?id?no：52所示序列的vh和seqid?no：42所示的重鏈恒定區(qū)(ch)的重鏈，和，包括seq?id?no：53所示序列的vl和seq?idno：43所示的輕鏈恒定區(qū)(cl)的輕鏈。185、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：186、(a)重鏈，其包含選自下列的氨基酸序列：187、(i)seq?id?no：102所示的序列；188、(ii)與seq?id?no：102所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或189、(iii)與seq?id?no：102所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；190、和191、(b)輕鏈，其包含選自下列的氨基酸序列：192、(iv)seq?id?no：103所示的序列；193、(v)與seq?id?no：103所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或194、(vi)與seq?id?no：103所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列。195、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，(ii)或(v)中所述的置換是保守置換。196、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：197、(a)重鏈，其包含選自下列的氨基酸序列：198、(i)seq?id?no：106所示的序列；199、(ii)與seq?id?no：106所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或200、(iii)與seq?id?no：106所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；201、和202、(b)輕鏈，其包含選自下列的氨基酸序列：203、(iv)seq?id?no：107所示的序列；204、(v)與seq?id?no：107所示的序列相比具有一個(gè)或幾個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個(gè)，2個(gè)，3個(gè)，4個(gè)或5個(gè)氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或205、(vi)與seq?id?no：107所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列。206、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，(ii)或(v)中所述的置換是保守置換。207、在某些示例性實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段包含：208、(1)具有如seq?id?no：102所示的序列的重鏈和具有如seq?id?no：103所示的序列的輕鏈；或209、(2)具有如seq?id?no：106所示的序列的重鏈和具有如seq?id?no：107所示的序列的輕鏈。210、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體是嵌合抗體或人源化抗體。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段選自scfv、fab、fab’、(fab’)2、fv片段、二硫鍵連接的fv(dsfv)、雙抗體(diabody)、雙特異性抗體、和多特異性抗體。211、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體分子或其抗原結(jié)合片段可以顯示出以下性質(zhì)中的至少一種：212、(a)以小于約100nm，例如小于約10nm、1nm、0.1nm或更低的kd結(jié)合cldn18.2(例如，人cldn18.2)；例如所述kd通過生物薄膜干涉技術(shù)(bli)(如fortebio?)測得；213、(b)以小于約500nm，例如小于約100nm、10nm、1nm、0.9nm、0.8nm、0.7nm、0.6nm、0.5nm、0.4nm、0.3nm、0.2nm、0.1nm或更小的ec50結(jié)合cldn18.2(例如，人cldn18.2)；例如所述ec50通過流式細(xì)胞技術(shù)或細(xì)胞競爭elisa技術(shù)測得；214、(c)所述抗體或其抗原結(jié)合片段不結(jié)合cldn18.1(如人cldn18.1)。215、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段具有adcc活性。216、在某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段具有cdc活性。217、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段具有adcc和cdc活性。218、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段具有增強(qiáng)的adcc和/或cdc活性。219、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具備以下生物學(xué)功能中的至少一項(xiàng)：220、(a)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；221、(b)抑制腫瘤細(xì)胞增殖；222、(c)在體外或受試者(例如人)體內(nèi)提高免疫細(xì)胞活性；223、(d)在受試者(例如人)中增強(qiáng)免疫應(yīng)答；224、(e)在受試者(例如人)中治療腫瘤；225、(f)誘發(fā)和/或增加t細(xì)胞浸潤；226、(g)誘發(fā)和/或增強(qiáng)免疫反應(yīng)；227、(h)誘發(fā)和/或增加補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒活性；228、(i)誘發(fā)和/或增加抗體依賴性細(xì)胞毒活性；229、(j)增加nk細(xì)胞活性；230、(k)抑制cldn18.2的表達(dá)和活化；或231、(l)抑制cldn18.2介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)。232、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段具備上述生物學(xué)功能的任意組合。233、衍生的抗體234、本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段可進(jìn)行衍生化，例如被連接至另一個(gè)分子(例如另一個(gè)多肽或蛋白)。通常，抗體或其抗原結(jié)合片段的衍生化(例如，標(biāo)記)不會(huì)不利影響其對cldn18.2(特別是人cldn18.2)的結(jié)合。因此，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段還意欲包括此類衍生化的形式。例如，可以將本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段功能性連接(通過化學(xué)偶合、基因融合、非共價(jià)連接或其它方式)于一個(gè)或多個(gè)其它分子基團(tuán)，例如另一個(gè)抗體(例如，形成雙特異性抗體)，檢測試劑，藥用試劑，和/或能夠介導(dǎo)抗體或抗原結(jié)合片段與另一個(gè)分子結(jié)合的蛋白或多肽(例如，抗生物素蛋白或多組氨酸標(biāo)簽)。235、一種類型的衍生化抗體(例如，雙特異性抗體)是通過交叉連接2個(gè)或多個(gè)抗體(屬于同一類型或不同類型)而產(chǎn)生的。獲得雙特異性抗體的方法是本領(lǐng)域公知的，其實(shí)例包括但不限于，化學(xué)交聯(lián)法、細(xì)胞工程法(雜交雜交瘤法)或基因工程法。236、另一種類型的衍生化抗體是標(biāo)記的抗體。例如，可以將本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段連接至可檢測的標(biāo)記。本發(fā)明所述的可檢測的標(biāo)記可以是可通過熒光、光譜、光化學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)、電學(xué)、光學(xué)或化學(xué)手段檢測的任何物質(zhì)。這類標(biāo)記是本領(lǐng)域熟知的，其實(shí)例包括但不限于，酶(例如，辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、脲酶、葡萄糖氧化酶，等)、放射性核素(例如，3h、125i、35s、14c或32p)、熒光染料(例如，異硫氰酸熒光素(fitc)、熒光素、異硫氰酸四甲基羅丹明(tritc)、藻紅蛋白(pe)、德克薩斯紅、羅丹明、量子點(diǎn)或花菁染料衍生物(例如cy7、alexa?750))、吖啶酯類化合物、磁珠(例如，)、測熱標(biāo)記物例如膠體金或有色玻璃或塑料(例如，聚苯乙烯、聚丙烯、乳膠，等)珠、以及用于結(jié)合上述標(biāo)記物修飾的親和素(例如，鏈霉親和素)的生物素。教導(dǎo)該標(biāo)記物的使用的專利包括，但不限于，美國專利3,817,837；3,850,752；3,939,350；3,996,345；4,277,437；4,275,149；及4,366,241(全部通過引用并入本文)。如上所述的可檢測的標(biāo)記可通過本領(lǐng)域已知的方法檢測。例如，放射性標(biāo)記可使用攝影膠片或閃爍計(jì)算器檢測，熒光標(biāo)記物可使用光檢測器檢測，以檢測發(fā)射的光。酶標(biāo)記物一般通過給酶提供底物及檢測通過酶對底物的作用產(chǎn)生的反應(yīng)產(chǎn)物來檢測，及測熱標(biāo)記物通過簡單可視化著色標(biāo)記物來檢測。在某些實(shí)施方案中，此類標(biāo)記能夠適用于免疫學(xué)檢測(例如，酶聯(lián)免疫測定法、放射免疫測定法、熒光免疫測定法、化學(xué)發(fā)光免疫測定法等)。在某些實(shí)施方案中，可通過不同長度的接頭(linker)將如上所述的可檢測的標(biāo)記連接至本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段，以降低潛在的位阻。237、此外，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段還可以用化學(xué)基團(tuán)進(jìn)行衍生，例如聚乙二醇(peg)，甲基或乙基，或者糖基。這些基團(tuán)可用于改善抗體的生物學(xué)特性，例如增加血清半衰期。238、作為抗體的衍生物之一，本發(fā)明提供一種偶聯(lián)物，其包括本發(fā)明的單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段以及偶聯(lián)部分，所述偶聯(lián)部分選自：可檢測的標(biāo)記、放射性同位素、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、有色物質(zhì)、酶、聚乙二醇(peg)、核素、核酸、小分子毒素，具有結(jié)合活性多肽、蛋白、受體、配體，以及其它抑制腫瘤細(xì)胞生長、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡或壞死的活性物質(zhì)。239、作為抗體的衍生物之一，本發(fā)明提供一種嵌合抗原受體，其包括所述單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述嵌合抗原受體包括本發(fā)明的單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段(例如，scfv)、跨膜結(jié)構(gòu)域、以及一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞內(nèi)t細(xì)胞信號結(jié)構(gòu)域。本發(fā)明同時(shí)提供含有或表達(dá)所述嵌合抗原受體的宿主細(xì)胞，如免疫細(xì)胞(例如t淋巴細(xì)胞，nk細(xì)胞)。240、作為抗體的衍生物之一，本發(fā)明提供一種多特異性抗體，所述抗體由第一抗體或其片段與其他抗體或其片段或抗體類似物通過偶聯(lián)形成，各抗體或其片段或抗體類似物保持原結(jié)合特異性，所述第一抗體或其片段為本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段；優(yōu)選的，所述多特異性抗體為雙特異性抗體或三特異性抗體或四特異性抗體。241、抗體的制備242、本發(fā)明的抗體可以本領(lǐng)域已知的各種方法來制備，例如通過基因工程重組技術(shù)來獲得。例如，通過化學(xué)合成或pcr擴(kuò)增獲得編碼本發(fā)明抗體的重鏈和輕鏈基因的dna分子。將所得dna分子插入表達(dá)載體內(nèi)，然后轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。然后，在特定條件下培養(yǎng)轉(zhuǎn)染后的宿主細(xì)胞，并表達(dá)本發(fā)明的抗體。243、本發(fā)明的抗原結(jié)合片段可以通過水解完整的抗體分子獲得(參見morimoto?etal.,j.biochem.biophys.methods?24:107-117(1992)and?brennan?et?al.,science?229:81(1985))。另外，這些抗原結(jié)合片段也可以直接由重組宿主細(xì)胞產(chǎn)生(reviewed?inhudson,curr.opin.immunol.11:548-557(1999)；little?et?al.,immunol.today,21:364-370(2000))。比如，fab’片段可以直接從宿主細(xì)胞中獲得；可以將fab’片段化學(xué)偶聯(lián)形成f(ab’)2片段(carter?et?al.,bio/technology,10:163-167(1992))。另外，fv、fab或f(ab’)2片段也可以直接從重組宿主細(xì)胞培養(yǎng)液中直接分離得到。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員完全知曉制備這些抗原結(jié)合片段的其它技術(shù)。244、因此，在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種分離的核酸分子，其包含編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段，或其重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列。根據(jù)本領(lǐng)域的密碼子簡并性，在某些實(shí)施方案中，所述核苷酸序列是可以根據(jù)密碼子簡并性進(jìn)行替換的。在某些實(shí)施方案中，所述核苷酸序列是密碼子最優(yōu)化的。245、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述分離的核酸分子包含分別編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)的第一和第二核酸，或分別編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈可變區(qū)和重鏈恒定區(qū)的的第一核酸，和輕鏈可變區(qū)和輕鏈恒定區(qū)的第二核酸，或分別編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈和輕鏈的第一和第二核酸，該抗體選自下組中的任意一種：1e9.2，19h11.6，16a9.11，9c8.1，6b9.22，19g10.14，2c6.9，1e9.2hz11，1e9.2hz12，1e9.2hz13，1e9.2hz14，1e9.2hz15，1e9.2hz17，1e9.2hz21，1e9.2hz31，1e9.2hz41，2c6.9hz11，2c6.9hz21；或與所述第一和第二核酸基本上相同的序列。例如，所述分離的核酸分子可以包含序列表中seq?id?no:54,seq?id?no:55,seq?idno:56,seq?id?no:57，seq?id?no:104,seq?id?no:105,seq?id?no:108,seq?id?no:109所示的核苷酸序列或與其基本上相同的序列(例如，與其相比具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列，或與序列表中所示的序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列)。246、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種的分離的核酸分子，其包含編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子，和/或編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子，其中，所述編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子具有選自下列的序列：(a).如seq?id?no:54所示的核苷酸序列，或(b).與(a)所述的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，與(a)所述的核苷酸序列相比，具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列，或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列)，或(c).與(a)所述的核苷酸序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列；所述編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子具有選自下列的序列：(d).如seq?id?no:55所示的核苷酸序列，或(e).與d)所述的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，與d)所述的核苷酸序列相比，具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列，或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列)，或(f)與(d)所述的核苷酸序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列。247、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種的分離的核酸分子，其包含編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子，和/或編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子，其中，所述編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子具有選自下列的序列：(a).如seq?id?no:56所示的核苷酸序列，或(b).與(a)所述的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，與(a)所述的核苷酸序列相比，具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列，或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列)，或(c).與(a)所述的核苷酸序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列；所述編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子具有選自下列的序列：(d).如seq?id?no:57所示的核苷酸序列，或(b)與(d)所述的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，與(a)所述的核苷酸序列相比，具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列，或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列)，或(f)與(d)所述的核苷酸序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列。248、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子具有如seq?idno:54所示的核苷酸序列，以及所述編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子具有如seq?id?no:55所示的核苷酸序列。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的分離的核酸分子包含如seq?idno:54所示的編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子，和/或如seq?id?no:55所示的編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子。249、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子具有如seq?idno:56所示的核苷酸序列，以及所述編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子具有如seq?id?no:57所示的核苷酸序列。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的分離的核酸分子包含如seq?idno:56所示的編碼抗體重鏈可變區(qū)的核酸分子，和/或如seq?id?no:57所示的編碼抗體輕鏈可變區(qū)的核酸分子。250、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種的分離的核酸分子。其包含編碼抗體重鏈的核酸分子，和/或編碼抗體輕鏈的核酸分子，其中，所述編碼抗體重鏈的核酸分子具有選自下列的序列：(a).如seq?id?no:104或108所示的核苷酸序列，或(b).與(a)所述的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，與(a)所述的核苷酸序列相比，具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列，或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列)，或(c).與(a)所述的核苷酸序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列，和/或，所述編碼抗體輕鏈的核酸分子具有選自下列的序列：(d).如seq?id?no:105或109所示的核苷酸序列，或(e).與(d)所述的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，與(d).所述的核苷酸序列相比，具有至少大約85％、90％、95％、99％或更高序列同一性的序列，或具有一個(gè)或更多個(gè)核苷酸取代的序列)，或(f).與(d)所述的核苷酸序列相差不超過3、6、15、30或45個(gè)核苷酸的序列。251、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述編碼抗體重鏈的核酸分子具有如seq?id?no:104所示的核苷酸序列，和/或所述編碼抗體輕鏈的核酸分子具有如seq?id?no:105所示的核苷酸序列；252、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述編碼抗體重鏈的核酸分子具有如seq?id?no:108所示的核苷酸序列，和/或所述編碼抗體輕鏈的核酸分子具有如seq?id?no:109所示的核苷酸序列。253、本發(fā)明另一方面，本發(fā)明提供了一種載體(例如克隆載體或表達(dá)載體)，其包含本發(fā)明的分離的核酸分子。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的載體是例如質(zhì)粒，粘粒，噬菌體，慢病毒等。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述載體能夠在受試者(例如哺乳動(dòng)物，例如人)體內(nèi)表達(dá)本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段。254、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段可用于構(gòu)建嵌合抗原受體(car)，所述嵌合抗原受體包含特異性結(jié)合cldn18.2的細(xì)胞外抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域(例如，scfv)、跨膜結(jié)構(gòu)域、以及一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞內(nèi)t細(xì)胞信號結(jié)構(gòu)域。在此類實(shí)施方案中，本發(fā)明的分離的核酸分子可以包含編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列，所述編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列進(jìn)一步包含編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段(例如scfv)的核苷酸序列。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的分離的核酸分子編碼包含本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段(例如scfv)的嵌合抗原受體。255、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段可用于嵌合抗原受體修飾的免疫細(xì)胞，所述嵌合抗原受體包含可用于構(gòu)建嵌合抗原受體(car)，以及免疫細(xì)胞(例如t淋巴細(xì)胞，nk細(xì)胞)。256、本發(fā)明另一方面，本發(fā)明提供了一種宿主細(xì)胞，其包含本發(fā)明的分離的核酸分子或本發(fā)明的載體。宿主細(xì)胞可以是真核細(xì)胞(例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、酵母細(xì)胞)或原核細(xì)胞(例如大腸桿菌)。合適的真核細(xì)胞包括但不限于ns0細(xì)胞、vero細(xì)胞、hela細(xì)胞、cos細(xì)胞、cho細(xì)胞、hek293細(xì)胞、bhk細(xì)胞、和mdckii細(xì)胞。適宜的昆蟲細(xì)胞包括但不限于sf9細(xì)胞。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的宿主細(xì)胞是哺乳動(dòng)物細(xì)胞，例如cho(例如cho-k1、cho-s、cho?dxb11、cho?dg44)。257、在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的宿主細(xì)胞可以是嵌合抗原受體t細(xì)胞(car-t)。在此類實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞所包含的分離的核酸分子可以包含編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列，所述編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列進(jìn)一步包含編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段(例如scfv)的核苷酸序列。在某些實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞所包含的分離的核酸分子編碼包含本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段(例如scfv)的嵌合抗原受體。258、本發(fā)明另一方面，提供了制備本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，其包括，在允許所述抗體或其抗原結(jié)合片段表達(dá)的條件下，培養(yǎng)本發(fā)明的宿主細(xì)胞，和從培養(yǎng)的宿主細(xì)胞培養(yǎng)物中回收所述抗體或其抗原結(jié)合片段。259、治療方法和藥物組合物260、本發(fā)明另一方面，公開了藥物組合物，其包含本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或多特異性抗體，以及藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。261、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段，以及藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。262、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā)明的載體或宿主細(xì)胞，以及藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。在此類實(shí)施方案中，所述載體所包含的分離的核酸分子包含編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列，所述編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列進(jìn)一步包含編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段(例如scfv)的核苷酸序列；所述宿主細(xì)胞包含如前所述的分離的核酸分子或載體。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述分離的核酸分子編碼包含本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段(例如scfv)的嵌合抗原受體。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞是t細(xì)胞。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞是嵌合抗原受體t細(xì)胞(car-t)。263、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述藥物組合物還可以包含另外的藥學(xué)活性劑。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述另外的藥學(xué)活性劑是用于治療免疫相關(guān)疾病的藥物。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述另外的藥學(xué)活性劑是具有抗腫瘤活性的藥物。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述另外的藥學(xué)活性劑是干擾素、白細(xì)胞介素-2或化療藥物。264、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，在所述藥物組合物中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段與所述另外的藥學(xué)活性劑作為分離的組分或作為同一組合物的組分提供。因此，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段與所述另外的藥學(xué)活性劑可以同時(shí)、分開或相繼施用。265、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述藥物組合物還可以包含另外的藥學(xué)活性劑。所述另外的藥學(xué)活性劑選自：表柔比星、奧沙利鉑、卡培他濱、5-氟尿嘧啶、亞葉酸、紫杉醇、白蛋白結(jié)合型紫杉醇、表柔比星(epirubicin)+奧沙利鉑(oxaliplatin)+5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)的組合、folfox4、folfox6、mfolfox6(包含奧沙利鉑、亞葉酸和5-氟尿嘧啶)中的一種或多種。266、另一方面，本發(fā)明的藥物組合物中的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或者多特異性抗體足以在受試者中：267、(a)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；268、(b)抑制腫瘤細(xì)胞增殖；269、(c)誘發(fā)和/或增加t細(xì)胞浸潤；270、(d)誘發(fā)和/或增強(qiáng)免疫反應(yīng)；271、(e)誘發(fā)和/或增加補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒活性；272、(f)誘發(fā)和/或增加抗體依賴性細(xì)胞毒活性；273、(g)增加nk細(xì)胞活性；274、(h)抑制cldn18.2的表達(dá)和活化；275、(i)抑制cldn18.2介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)；或276、(j)(a)-(i)的任意組合。277、另一方面，本發(fā)明的藥物組合物還包含特異性結(jié)合選自以下受體或配體的第二抗體或編碼所述第二抗體的核酸，其中，所述受體或配體選自：pd-1、pd-l1、pd-l2，tim-3、lag-3、vista、ctla-4、ox40、btla、4-1bb、cd96、cd27、cd28、cd40、lair1、cd160、2b4、tgf-r、kir、icos、gitr、cd3、cd30、baffr、hvem、cd7、light、slamf7、nkp80、b7-h3及其任意組合。278、本發(fā)明另一方面，提供本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或者多特異性抗體在制備藥物中的用途，所述藥物用于：279、(a)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；280、(b)抑制腫瘤細(xì)胞增殖；281、(c)在體外或受試者(例如人)體內(nèi)提高免疫細(xì)胞活性；282、(d)在受試者(例如人)中增強(qiáng)免疫應(yīng)答；283、(e)在受試者(例如人)中治療腫瘤；284、(f)誘發(fā)和/或增加t細(xì)胞浸潤；285、(g)誘發(fā)和/或增強(qiáng)免疫反應(yīng)；286、(h)誘發(fā)和/或增加補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒活性；287、(i)誘發(fā)和/或增加抗體依賴性細(xì)胞毒活性；288、(j)增加nk細(xì)胞活性；289、(k)抑制cldn18.2的表達(dá)和活化；290、(l)抑制cldn18.2介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)；或291、(m)(a)-(l)的任意組合。292、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)本發(fā)明的載體或宿主細(xì)胞用于制備藥物時(shí)，所述載體所包含的分離的核酸分子包含編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列，所述編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列進(jìn)一步包含編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段(例如scfv)的核苷酸序列；所述宿主細(xì)胞包含如前所述的分離的核酸分子或載體。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述分離的核酸分子編碼包含本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段(例如scfv)的嵌合抗原受體。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞是t細(xì)胞。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞是嵌合抗原受體t細(xì)胞(car-t)。293、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)本發(fā)明的載體或宿主細(xì)胞用于制備藥物時(shí)，所述藥物用于在受試者(例如人)中治療腫瘤。294、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或者多特異性抗體涉及的腫瘤選自實(shí)體腫瘤、血液腫瘤(例如，白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，例如，多發(fā)性骨髓瘤)和癌癥的轉(zhuǎn)移性、難治性或復(fù)發(fā)性病灶；例如，包括但不限于食管癌、胃腸癌、胰腺癌、甲狀腺癌、結(jié)直腸癌、腎癌、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌)、肝癌、胃癌、胃食管交界處(gej)腺癌、頭頸癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮癌、宮頸癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖細(xì)胞癌、骨癌、皮膚癌、胸腺癌、膽管癌、膽囊癌、黑素瘤、間皮瘤、淋巴瘤、骨髓瘤(例如多發(fā)性骨髓瘤)、肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、白血病。295、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤選自胃癌、胃食管交界處(gej)腺癌、食管癌、胃腸癌、胰腺癌、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌)。296、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤選自胃癌或胃食管交界處(gej)腺癌，例如局部晚期不可切除或轉(zhuǎn)移的胃癌或胃食管交界處(gej)腺癌。297、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤為claudin?18.2陽性，進(jìn)一步，所述腫瘤為her2陰性。298、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤為her2陰性。299、在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種在受試者中預(yù)防和/或治療腫瘤的方法。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種在受試者中延遲腫瘤進(jìn)展的方法。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種在受試者中降低或抑制腫瘤復(fù)發(fā)的方法。以上所述方法包括向有此需要的受試者施用有效量的本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或者多特異性抗體、藥物組合物。300、在某些的實(shí)施方案中，發(fā)明提供了一種在受試者中預(yù)防和/或治療腫瘤的方法，包括向有此需要的受試者施用有效量的本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或者多特異性抗體、以及藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑；與另外的藥學(xué)活性劑分開、聯(lián)合、同時(shí)、或相繼施用；301、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述另外的藥學(xué)活性劑選自：表柔比星、奧沙利鉑、卡培他濱、5-氟尿嘧啶、亞葉酸、紫杉醇、白蛋白結(jié)合型紫杉醇、表柔比星(epirubicin)+奧沙利鉑(oxaliplatin)+5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)的組合、folfox4、folfox6、mfolfox6(包含奧沙利鉑、亞葉酸和5-氟尿嘧啶)中的一種或多種。302、當(dāng)本發(fā)明的宿主細(xì)胞用于以上所述方法時(shí)，所述宿主細(xì)胞表達(dá)包含本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段(例如scfv)的嵌合抗原受體。因此，在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞所包含的分離的核酸分子包含編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列，所述編碼嵌合抗原受體的核苷酸序列進(jìn)一步包含編碼本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段(例如scfv)的核苷酸序列。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述分離的核酸分子編碼包含本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段(例如scfv)的嵌合抗原受體。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞是t細(xì)胞。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述宿主細(xì)胞是嵌合抗原受體t細(xì)胞(car-t)。303、在另一個(gè)方面，以上所述方法還包括向所述受試者施用第二療法，所述第二療法選自手術(shù)、化療、放療、免疫療法、基因療法、dna療法、rna療法、納米療法、病毒療法、輔助療法及其任意組合。304、在某些實(shí)施方案中，所述第二療法可以與以上所述的方法分開或聯(lián)合應(yīng)用；或，所述第二療法可以與以上所述的方法分開或聯(lián)合應(yīng)用同時(shí)或相繼應(yīng)用；305、在某些優(yōu)選實(shí)施方案中，所述化療選自：表柔比星、奧沙利鉑、卡培他濱、5-氟尿嘧啶、亞葉酸、紫杉醇、白蛋白結(jié)合型紫杉醇、表柔比星(epirubicin)+奧沙利鉑(oxaliplatin)+5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)的組合、folfox4、folfox6、mfolfox6(包含奧沙利鉑、亞葉酸和5-氟尿嘧啶)中的一種或多種。306、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體或其修飾的免疫細(xì)胞、或者多特異性抗體涉及的腫瘤選自實(shí)體腫瘤、血液腫瘤(例如，白血病、淋巴瘤、骨髓瘤，例如，多發(fā)性骨髓瘤)和癌癥的轉(zhuǎn)移性、難治性或復(fù)發(fā)性病灶；例如，包括但不限于食管癌、胃腸癌、胰腺癌、甲狀腺癌、結(jié)直腸癌、腎癌、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌)、肝癌、胃癌、胃食管交界處(gej)腺癌、頭頸癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮癌、宮頸癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖細(xì)胞癌、骨癌、皮膚癌、胸腺癌、膽管癌、膽囊癌、黑素瘤、間皮瘤、淋巴瘤、骨髓瘤(例如多發(fā)性骨髓瘤)、肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、白血病。307、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤選自胃癌、胃食管交界處(gej)腺癌、食管癌、胃腸癌、胰腺癌、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌)。308、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤選自胃癌或胃食管交界處(gej)腺癌，例如局部晚期不可切除或轉(zhuǎn)移的胃癌或胃食管交界處(gej)腺癌。309、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤為claudin?18.2陽性，進(jìn)一步，所述腫瘤為her2陰性。310、在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段涉及的腫瘤為her2陰性。311、在另一個(gè)方面，以上所述方法還包括向所述受試者施用第二療法，所述第二療法選自手術(shù)、化療、放療、免疫療法、基因療法、dna療法、rna療法、納米療法、病毒療法、輔助療法及其任意組合。312、本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、本發(fā)明的藥物組合物可以配制成醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已知的任何劑型，例如，片劑、丸劑、混懸劑、乳劑、溶液、凝膠劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、酏劑、錠劑、栓劑、注射劑(包括注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液)、吸入劑、噴霧劑等。優(yōu)選劑型取決于預(yù)期的給藥方式和治療用途。本發(fā)明的藥物組合物應(yīng)當(dāng)是無菌的并在生產(chǎn)和儲(chǔ)存條件下穩(wěn)定。一種優(yōu)選的劑型是注射劑。此類注射劑可以是無菌注射溶液。例如，可通過下述方法來制備無菌注射溶液：在適當(dāng)?shù)娜軇┲袚饺氡匦鑴┝康谋景l(fā)明的重組蛋白，以及任選地，同時(shí)摻入其他期望的成分(包括但不限于，ph調(diào)節(jié)劑，表面活性劑，佐劑，離子強(qiáng)度增強(qiáng)劑，等滲劑、防腐劑、稀釋劑，或其任何組合)，隨后過濾除菌。此外，可以將無菌注射溶液制備為無菌凍干粉劑(例如，通過真空干燥或冷凍干燥)以便于儲(chǔ)存和使用。此類無菌凍干粉劑可在使用前分散于合適的載體中，例如無菌無熱原水。313、此外，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段可以以單位劑量形式存在于藥物組合物中，以便于施用。314、本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、藥物組合物可以通過本領(lǐng)域已知的任何合適的方法來施用，包括但不限于，口服、口腔、舌下、眼球、局部、腸胃外、直腸、葉鞘內(nèi)、內(nèi)胞漿網(wǎng)槽內(nèi)、腹股溝、膀胱內(nèi)、局部(如，粉劑、藥膏或滴劑)，或鼻腔途徑。但是，對于許多治療用途而言，優(yōu)選的給藥途徑/方式是胃腸外給藥(例如靜脈注射，皮下注射，腹膜內(nèi)注射，肌內(nèi)注射)。技術(shù)人員應(yīng)理解，給藥途徑和/或方式將根據(jù)預(yù)期目的而發(fā)生變化。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、藥物組合物通過靜脈輸注或注射給予。315、本發(fā)明的藥物組合物可以包括“治療有效量”或“預(yù)防有效量”的本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段?！邦A(yù)防有效量”是指，足以預(yù)防，阻止，或延遲疾病的發(fā)生的量?！爸委熡行Я俊笔侵福阋灾斡蛑辽俨糠肿柚挂鸦加屑膊〉幕颊叩募膊『推洳l(fā)癥的量。本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的治療有效量可根據(jù)如下因素發(fā)生變化：待治療的疾病的嚴(yán)重度、患者自己的免疫系統(tǒng)的總體狀態(tài)、患者的一般情況例如年齡，體重和性別，藥物的施用方式，以及同時(shí)施用的其他治療等等。316、在本發(fā)明中，可調(diào)整給藥方案以獲得最佳目的反應(yīng)(例如治療或預(yù)防反應(yīng))。例如，可以單次給藥，可以在一段時(shí)間內(nèi)多次給藥，或者可以隨治療情況的緊急程度按比例減少或增加劑量。317、本發(fā)明的重組蛋白的治療或預(yù)防有效量的典型非極限范圍是0.02～100mg/kg，例如0.1～100mg/kg，0.1～50mg/kg，或1～50mg/kg。應(yīng)注意的是，劑量可隨需要治療的癥狀的類型和嚴(yán)重性不同而發(fā)生變化。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，對于任一特定患者，特定的給藥方案應(yīng)根據(jù)患者需要和醫(yī)生的專業(yè)評價(jià)而隨時(shí)間調(diào)整；此處給出的劑量范圍只用于舉例說明目的，而不限定本發(fā)明藥物組合物的使用或范圍。318、在本發(fā)明中，所述受試者可以為哺乳動(dòng)物，例如人。319、檢測方法和試劑盒320、本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段能夠特異性結(jié)合cldn18.2，從而可用于檢測cldn18.2在樣品中的存在或其水平。321、因此，在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種試劑盒，其包括本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段帶有可檢測的標(biāo)記。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述試劑盒還包括第二抗體，其特異性識別本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段。優(yōu)選地，所述第二抗體還包括可檢測的標(biāo)記。322、在本發(fā)明中，所述可檢測的標(biāo)記可以是可通過熒光、光譜、光化學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)、電學(xué)、光學(xué)或化學(xué)手段檢測的任何物質(zhì)。特別優(yōu)選的是，此類標(biāo)記能夠適用于免疫學(xué)檢測(例如，酶聯(lián)免疫測定法、放射免疫測定法、熒光免疫測定法、化學(xué)發(fā)光免疫測定法等)。這類標(biāo)記是本領(lǐng)域熟知的，包括但不限于，酶(例如，辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、脲酶、葡萄糖氧化酶，等)、放射性核素(例如，3h、125i、35s、14c或32p)、熒光染料(例如，異硫氰酸熒光素(fitc)、熒光素、異硫氰酸四甲基羅丹明(tritc)、藻紅蛋白(pe)、德克薩斯紅、羅丹明、量子點(diǎn)或花菁染料衍生物(例如cy7、alexa?750))、吖啶酯類化合物、磁珠(例如，)、測熱標(biāo)記物例如膠體金或有色玻璃或塑料(例如，聚苯乙烯、聚丙烯、乳膠，等)珠、以及用于結(jié)合上述標(biāo)記物修飾的親和素(例如，鏈霉親和素)的生物素。教導(dǎo)該標(biāo)記物的使用的專利包括，但不限于，美國專利3,817,837；3,850,752；3,939,350；3,996,345；4,277,437；4,275,149；及4,366,241(全部通過引用并入本文)。本發(fā)明中涵蓋的標(biāo)記物可通過本領(lǐng)域已知的方法檢測。例如，放射性標(biāo)記可使用攝影膠片或閃爍計(jì)算器檢測，熒光標(biāo)記物可使用光檢測器檢測，以檢測發(fā)射的光。酶標(biāo)記物一般通過給酶提供底物及檢測通過酶對底物的作用產(chǎn)生的反應(yīng)產(chǎn)物來檢測，及測熱標(biāo)記物通過簡單可視化著色標(biāo)記物來檢測。在某些實(shí)施方案中，可通過不同長度的接頭將如上所述的可檢測的標(biāo)記連接至本發(fā)明的重組蛋白，以降低潛在的位阻。323、在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了檢測cldn18.2在樣品中的存在或其水平的方法，其包括使用本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段的步驟。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段還帶有可檢測的標(biāo)記。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法還包括，使用帶有可檢測的標(biāo)記的試劑來檢測本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段。所述方法可以用于診斷目的，或者非診斷目的(例如，所述樣品是細(xì)胞樣品，而非來自患者的樣品)。324、在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種檢測樣品中cldn18.2存在或其水平的方法，所述方法包括將所述抗體或其抗原結(jié)合片段與cldn18.2之間形成復(fù)合物，使所述樣品與本發(fā)明所述抗體或其抗原結(jié)合片段接觸，并且檢測所述復(fù)合物的形成。325、在另一個(gè)方面，提供了本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用于檢測cldn18.2在樣品中的存在或其水平。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了診斷性或治療性試劑盒，其包括本發(fā)明所述的的抗體或其抗原結(jié)合片段、載體、宿主細(xì)胞、偶聯(lián)物、嵌合抗原受體、或者多特異性抗體，以及使用說明書。326、鑒于claudin?18.2在正常組織中的低表達(dá)或不表達(dá)，在一些癌癥中的表達(dá)或高表達(dá)，可以通過檢測cldn18.2在樣品中的存在或其水平來診斷腫瘤及腫瘤轉(zhuǎn)移，如在肺組織中檢測到cldn18.2，基本可以判斷肺組織發(fā)生了癌變，結(jié)合其他的一些指標(biāo)，如病理形態(tài)學(xué)可以判斷癌癥是胃癌轉(zhuǎn)移還是非小細(xì)胞肺癌，從而判斷出癌癥的亞型。因此，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、偶聯(lián)物、多特異性抗體、或試劑盒可以用于診斷腫瘤及腫瘤轉(zhuǎn)移。因此，在另一個(gè)方面，提供了本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段、偶聯(lián)物、多特異性抗體、或試劑盒在診斷腫瘤及腫瘤轉(zhuǎn)移中的用途。327、本發(fā)明的抗體與cldn18.2的結(jié)合親和力高，且具有極強(qiáng)的特異性。因此，本發(fā)明的抗體具有用于預(yù)防和/或治療腫瘤的潛力。本發(fā)明的人源化抗體保留了親本鼠源抗體的功能和性質(zhì)。而且本發(fā)明的人源化抗體具有較高的人源化程度，從而可安全地施用給人受試者，而不引發(fā)免疫原性反應(yīng)。因此，本發(fā)明的抗體(特別是人源化抗體)具有重大的臨床價(jià)值。328、縮略詞329、cdr?免疫球蛋白可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)330、fr?抗體構(gòu)架區(qū)：抗體可變區(qū)中除cdr殘基以外的氨基酸殘基331、vh?抗體重鏈可變區(qū)332、vl?抗體輕鏈可變區(qū)333、igg?免疫球蛋白g334、abm?abm?cdr定義方式來源于martin的相關(guān)研究(martin?acr,cheetham?jc,reesar(1989)modelling?antibody?hypervariable?loops:a?combined?algorithm.proc?natlacad?sci?usa?86:9268-9272)，此定義方法整合了kabat及chothia兩者的部分定義。335、kabat?由elvin?a.kabat提出的免疫球蛋白比對及編號系統(tǒng)(參見，例如kabat?etal.,sequences?of?proteins?of?immunological?interest,5th?ed.public?healthservice,national?institutes?of?health,bethesda,md.,1991)。336、chothia?由chothia等人提出的免疫球蛋白編號系統(tǒng)，其是基于結(jié)構(gòu)環(huán)區(qū)的位置鑒定cdr區(qū)邊界的經(jīng)典規(guī)則(參見，例如chothia&lesk(1987)j.mol.biol.196:901-917；chothia等人(1989)nature?342:878-883)。337、imgt?基于由lefranc等人發(fā)起的國際免疫遺傳學(xué)信息系統(tǒng)(the?internationalimmunogenetics?information?(imgt))的編號系統(tǒng)，可參閱lefranc?et?al.,dev.comparat.immunol.27:55-77,2003。338、mab?單克隆抗體339、ec50?產(chǎn)生50％功效或結(jié)合的濃度340、ic50?產(chǎn)生50％抑制的濃度341、elisa?酶聯(lián)免疫吸附測定342、pcr?聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)343、hrp?辣根過氧化物酶344、il-2?白細(xì)胞介素2345、kd?平衡解離常數(shù)346、ka?結(jié)合速率常數(shù)347、kd?解離速率常數(shù)348、adcc?抗體依賴性細(xì)胞毒性349、cdc?補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性350、facs?流式細(xì)胞熒光分選351、cdr-h1免疫球蛋白重鏈可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)1cdr-h2免疫球蛋白重鏈可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)2cdr-h3免疫球蛋白重鏈可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)3cdr-l1免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)1cdr-l2免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)2cdr-l3免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)中的互補(bǔ)決定區(qū)3352、在本發(fā)明中，除非另有說明，否則本文中使用的科學(xué)和技術(shù)名詞具有本領(lǐng)域技術(shù)人員所通常理解的含義。并且，本文中所用的細(xì)胞培養(yǎng)、生物化學(xué)、核酸化學(xué)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室等操作步驟均為相應(yīng)領(lǐng)域內(nèi)廣泛使用的常規(guī)步驟。同時(shí)，為了更好地理解本發(fā)明，下面提供相關(guān)術(shù)語的定義和解釋。353、如本文中所使用的，術(shù)語“抗體”是指，通常由兩對多肽鏈(每對具有一條輕鏈(lc)和一條重鏈(hc))組成的免疫球蛋白分子?？贵w輕鏈可分類為κ(kappa)和λ(lambda)輕鏈。重鏈可分類為μ、δ、γ、α或ε，并且分別將抗體的同種型定義為igm、igd、igg、iga和ige。在輕鏈和重鏈內(nèi)，可變區(qū)和恒定區(qū)通過大約12或更多個(gè)氨基酸的“j”區(qū)連接，重鏈還包含大約3個(gè)或更多個(gè)氨基酸的“d”區(qū)。各重鏈由重鏈可變區(qū)(vh)和重鏈恒定區(qū)(ch)組成。重鏈恒定區(qū)由3個(gè)結(jié)構(gòu)域(ch1、ch2和ch3)組成。各輕鏈由輕鏈可變區(qū)(vl)和輕鏈恒定區(qū)(cl)組成。輕鏈恒定區(qū)由一個(gè)結(jié)構(gòu)域cl組成。恒定結(jié)構(gòu)域不直接參與抗體與抗原的結(jié)合，但展現(xiàn)出多種效應(yīng)子功能，如可介導(dǎo)免疫球蛋白與宿主組織或因子，包括免疫系統(tǒng)的各種細(xì)胞(例如，效應(yīng)細(xì)胞)和經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)的第一組分(c1q)的結(jié)合。vh和vl區(qū)還可被細(xì)分為具有高變性的區(qū)域(稱為互補(bǔ)決定區(qū)(cdr))，其間散布有較保守的稱為構(gòu)架區(qū)(fr)的區(qū)域。各vh和vl由按下列順序：fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4從氨基末端至羧基末端排列的3個(gè)cdr和4個(gè)fr組成。各重鏈/輕鏈對的可變區(qū)(vh和vl)分別形成抗原結(jié)合部位。氨基酸在各區(qū)域或結(jié)構(gòu)域的分配可遵循kabat,sequences?of?proteins?ofimmunological?interest(nationalinstitutes?of?health,bethesda,md.(1987and?1991))，或chothia&lesk(1987)j.mol.biol.196:901-917；chothia等人(1989)nature?342:878-883，或abm，martin的相關(guān)研究(martin?acr,cheetham?jc,rees?ar(1989)modelling?antibody?hypervariableloops:a?combined?algorithm.proc?natl?acad?sci?usa?86:9268-9272)的定義。354、在本文中，除非上下文明確指出，否則當(dāng)提及術(shù)語“抗體”時(shí)，其不僅包括完整抗體，而且包括抗體的抗原結(jié)合片段。355、如本文中所使用的，術(shù)語“互補(bǔ)決定區(qū)”或“cdr”是指抗體可變區(qū)中負(fù)責(zé)抗原結(jié)合的氨基酸殘基。這些氨基酸殘基的精確邊界可根據(jù)本領(lǐng)域已知的各種編號系統(tǒng)進(jìn)行定義，例如可按照kabat編號系統(tǒng)(kabat?et?al.,sequences?of?proteins?of?immunologicalinterest,5th?ed.public?health?service,national?institutes?of?health,bethesda,md.,1991)、chothia編號系統(tǒng)(chothia&lesk(1987)j.mol.biol.196:901-917；chothia等人(1989)nature?342:878-883)，imgt編號系統(tǒng)(lefranc?et?al.,dev.comparat.immunol.27:55-77,2003)，或，martin的相關(guān)研究(martin?acr,cheethamjc,rees?ar(1989)modelling?antibody?hypervariable?loops:a?combinedalgorithm.proc?natl?acad?sci?usa?86:9268-9272)，此定義方法整合了kabat及chothia兩者的部分定義，最早應(yīng)用在oxford?molecular抗體建模軟件中(martin?a?c?r.proteinsequence?and?structure?analysis?of?antibody?variabledomains[m]//antibodyengineering.springer,berlin,heidelberg,2010:33-51.)中的定義。對于給定的抗體，本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地鑒別各編號系統(tǒng)所定義的cdr。并且，不同編號系統(tǒng)之間的對應(yīng)關(guān)系是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的(例如，可參見lefranc?et?al.,dev.comparat.immunol.27:55-77,2003)。356、在本發(fā)明中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段含有的cdr可根據(jù)本領(lǐng)域已知的各種編號系統(tǒng)確定。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段含有的cdr優(yōu)選地通過kabat、chothia、imgt或abm編號系統(tǒng)確定。357、如本文中所使用的，術(shù)語“構(gòu)架區(qū)”或“fr”殘基是指，抗體可變區(qū)中除了如上定義的cdr殘基以外的那些氨基酸殘基。358、“胚系抗體基因”是由非淋巴細(xì)胞編碼的免疫球蛋白序列，它沒有經(jīng)歷導(dǎo)致表達(dá)特異免疫球蛋白的遺傳學(xué)重排及成熟的成熟過程。本發(fā)明的各種實(shí)施方案所提供的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)來源于一種認(rèn)識，那就是胚系抗體基因比成熟抗體基因更多地保留了動(dòng)物物種個(gè)體的特征性的重要氨基酸序列結(jié)構(gòu)。因此當(dāng)被治療性應(yīng)用于該物種時(shí)，更少地被該物種識別為外源物質(zhì)。359、術(shù)語“抗體”不受任何特定的產(chǎn)生抗體的方法限制。例如，其包括，重組抗體、單克隆抗體和多克隆抗體?？贵w可以是不同同種型的抗體，例如，igg(例如，igg1，igg2，igg3或igg4亞型)，iga1，iga2，igd，ige或igm抗體。360、如本文中所使用的，術(shù)語抗體的“抗原結(jié)合片段”是指抗體的片段的多肽,例如全長抗體的片段的多肽，其保持特異性結(jié)合全長抗體所結(jié)合的相同抗原的能力，和/或與全長抗體競爭對抗原的特異性結(jié)合，其也被稱為“抗原結(jié)合部分”。通常參見，fundamentalimmunology,ch.7(paul,w.,ed.,第2版，raven?press,n.y.(1989)，其以其全文通過引用合并入本文，用于所有目的?？赏ㄟ^重組dna技術(shù)或通過完整抗體的酶促或化學(xué)斷裂產(chǎn)生抗體的抗原結(jié)合片段?？乖Y(jié)合片段的非限制性實(shí)例包括fab、fab’、f(ab’)2、fd、fv、dab和互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)片段、單鏈抗體(例如，scfv)、嵌合抗體、雙抗體(diabody)、線性抗體(linearantibody)、納米抗體(技術(shù)來自domantis)、結(jié)構(gòu)域抗體(技術(shù)來自ablynx)、和這樣的多肽，其包含足以賦予多肽特異性抗原結(jié)合能力的抗體的至少一部分。工程改造的抗體變體綜述于holliger等,2005；nat?biotechnol,23:1126-1136中。361、如本文中所使用的，術(shù)語“全長抗體”意指，由兩條“全長重鏈”或“重鏈”和兩條“全長輕鏈”或“輕鏈”組成的抗體。其中，“全長重鏈”或“重鏈”是指這樣的多肽鏈，其在n端到c端的方向上由重鏈可變區(qū)(vh)、重鏈恒定區(qū)ch1結(jié)構(gòu)域、鉸鏈區(qū)(hr)、重鏈恒定區(qū)ch2結(jié)構(gòu)域、重鏈恒定區(qū)ch3結(jié)構(gòu)域組成；并且，當(dāng)所述全長抗體為ige同種型時(shí)，任選地還包括重鏈恒定區(qū)ch4結(jié)構(gòu)域。優(yōu)選地，“全長重鏈”是在n端到c端方向上由vh、ch1、hr、ch2和ch3組成的多肽鏈?！叭L輕鏈”或“輕鏈”是在n端到c端方向上由輕鏈可變區(qū)(vl)和輕鏈恒定區(qū)(cl)組成的多肽鏈。兩對全長抗體鏈通過在cl和ch1之間的二硫鍵和兩條全長重鏈的hr之間的二硫鍵連接在一起。本發(fā)明的全長抗體可以來自單一物種，例如人；也可以是嵌合抗體或人源化抗體。本發(fā)明的全長抗體包含分別由vh和vl對形成的兩個(gè)抗原結(jié)合部位，這兩個(gè)抗原結(jié)合部位特異性識別/結(jié)合相同的抗原。362、如本文中所使用的，術(shù)語“fd片段”意指由vh和ch1結(jié)構(gòu)域組成的抗體片段；術(shù)語“dab片段”意指由vh結(jié)構(gòu)域組成的抗體片段(ward等人,nature341:544?546(1989))；術(shù)語“fab片段”意指由vl、vh、cl和ch1結(jié)構(gòu)域組成的抗體片段；術(shù)語“f(ab’)2片段”意指包含通過鉸鏈區(qū)上的二硫橋連接的兩個(gè)fab片段的抗體片段；術(shù)語“fab’片段”意指還原連接f(ab’)2片段中兩個(gè)重鏈片段的二硫鍵后所獲片段，由一條完整的輕鏈和重鏈的fd片段(由vh和ch1結(jié)構(gòu)域組成)組成。363、如本文中所使用的，術(shù)語“fv片段”意指由抗體的單臂的vl和vh結(jié)構(gòu)域組成的抗體片段。fv片段通常被認(rèn)為是，能形成完整的抗原結(jié)合位點(diǎn)的最小抗體片段。一般認(rèn)為，六個(gè)cdr賦予抗體的抗原結(jié)合特異性。然而，即便是一個(gè)可變區(qū)(例如fd片段，其僅僅含有三個(gè)對抗原特異的cdr)也能夠識別并結(jié)合抗原，盡管其親和力可能低于完整的結(jié)合位點(diǎn)。364、如本文中所使用的，術(shù)語“fc片段”意指，由抗體的第一重鏈的第二、第三恒定區(qū)與第二重鏈的第二、第三恒定區(qū)經(jīng)二硫鍵結(jié)合而形成的抗體片段。抗體的fc片段具有多種不同的功能，但不參與抗原的結(jié)合。365、如本文中所使用的，術(shù)語“scfv”是指，包含vl和vh結(jié)構(gòu)域的單個(gè)多肽鏈，其中所述vl和vh通過接頭(linker)相連(參見，例如,bird等人,science?242:423-426(1988)；huston等人,proc.natl.acad.sci.usa?85:5879-5883(1988)；和pluckthun，thepharmacology?of?monoclonal?antibodies，第113卷，roseburg和moore編，springer-verlag，紐約，第269-315頁(1994))。此類scfv分子可具有一般結(jié)構(gòu)：nh2-vl-接頭-vh-cooh或nh2-vh-接頭-vl-cooh。合適的現(xiàn)有技術(shù)接頭由重復(fù)的ggggs氨基酸序列或其變體組成。例如，可使用具有氨基酸序列(ggggs)4的接頭，但也可使用其變體(holliger等人(1993)，proc.natl.acad.sci.usa?90:6444-6448)。可用于本發(fā)明的其他接頭由alfthan等人(1995)，protein?eng.8:725-731，choi等人(2001)，eur.j.immunol.31:94-106，hu等人(1996)，cancer?res.56:3055-3061，kipriyanov等人(1999)，j.mol.biol.293:41-56和roovers等人(2001)，cancer?immunol.描述。在一些情況下，scfv的vh與vl之間還可以存在二硫鍵。如本文中所使用的，術(shù)語“di-scfv”是指，由兩個(gè)scfv連接形成的抗體片段。366、如本文中所使用的，術(shù)語“雙抗體(diabody)”意指，其vh和vl結(jié)構(gòu)域在單個(gè)多肽鏈上表達(dá)，但使用太短的連接體以致不允許在相同鏈的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域之間配對，從而迫使結(jié)構(gòu)域與另一條鏈的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)域配對并且產(chǎn)生兩個(gè)抗原結(jié)合部位(參見，例如,holliger?p.等人,proc.natl.acad.sci.usa?90:6444-6448(1993)，和poljak?r.j.等人,structure?2:1121-1123(1994))。367、上述各個(gè)抗體片段均保持了特異性結(jié)合全長抗體所結(jié)合的相同抗原的能力，和/或與全長抗體競爭對抗原的特異性結(jié)合。368、如本文中所使用的，“雙特異性抗體”，指由第一抗體(片段)和第二抗體(片段)或抗體類似物通過偶聯(lián)臂所形成的偶聯(lián)物，偶聯(lián)的方式包括但不限于化學(xué)反應(yīng)、基因融合，蛋白融合，多肽融合和酶促。“多特異性抗體”包括例如：三特異性抗體和四特異性抗體，前者是具有三種不同抗原結(jié)合特異性的抗體，而后者是具有四種不同抗原結(jié)合特異性的抗體。369、如本文中所使用的，“抗體類似物(antibody?mimetics)”，指與抗體一樣特異性結(jié)合抗原，但卻沒有抗體結(jié)構(gòu)。它們通常是人工肽或蛋白質(zhì)，摩爾質(zhì)量約為3至20kda。例如，錨蛋白重復(fù)蛋白(darpin)和fynomer。經(jīng)設(shè)計(jì)的錨蛋白重復(fù)蛋白(darpin)，與igg抗體，scfv-fc抗體片段相連或其組合，如cn104341529a?？筰l-17a的fynomer與抗il-6r抗體結(jié)合，如wo2015141862a1。370、如本文中所使用的，“嵌合抗原受體(chimeric?antigen?receptor，car)”指一種融合到細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)域的腫瘤抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，能激活t細(xì)胞。常見地，car的胞外結(jié)合結(jié)構(gòu)域來源于小鼠或人源化或人的單克隆抗體。371、如本文中所使用的，“免疫球蛋白”或“ig”可以指作為抗體起作用的一類蛋白質(zhì)。由b細(xì)胞表達(dá)的抗體有時(shí)稱為嵌合抗原受體或抗原受體。包括在這類蛋白質(zhì)中的五個(gè)成員是iga、igg、igm、igd和ige，其中igg是最常見的循環(huán)抗體。它是凝集、補(bǔ)體固定和其他抗體反應(yīng)中最有效的免疫球蛋白，在防御細(xì)菌和病毒方面是重要的。372、在本文中，獲得抗體的技術(shù)可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)(例如，重組dna技術(shù)或酶促或化學(xué)斷裂法)從給定的抗體(例如本發(fā)明提供的抗體)獲得抗體的抗原結(jié)合片段(例如，上述抗體片段)，并且以與用于完整抗體的方式相同的方式就特異性篩選抗體的抗原結(jié)合片段。373、如本文中所使用的，術(shù)語“單克隆抗體”、“單抗”、“mab”具有相同的含義且可互換使用可互換，其是指，來自一群高度同源的抗體分子中的一個(gè)抗體或抗體的一個(gè)片段，也即，除可能自發(fā)出現(xiàn)的自然突變外，一群完全相同的抗體分子。單抗對抗原上的單一表位具有高特異性。多克隆抗體是相對于單克隆抗體而言的，其通常包含至少2種或更多種的不同抗體，這些不同的抗體通常識別抗原上的不同表位。此外，修飾語“單克隆”僅表明該抗體的特征為從高度同源的抗體群中獲得，不能理解為需要通過任何特定方法來制備所述抗體。374、本發(fā)明的單克隆抗體可以通過多種技術(shù)進(jìn)行制備，例如雜交瘤技術(shù)(參見，例如kohler等人.nature,256:495,1975)，重組dna技術(shù)(參見，例如美國專利申請4,816,567)，或噬菌體抗體庫技術(shù)(參見，例如clackson等.nature352：624-628,1991，或marks等.j.mol.biol.222：581-597,1991)。375、例如，可以如下來制備單克隆抗體。首先用免疫原(必要時(shí)候添加佐劑)免疫注射小鼠或其它合適的宿主動(dòng)物。免疫原或佐劑的注射方式通常為皮下多點(diǎn)注射或腹腔注射。可將免疫原預(yù)先偶聯(lián)到某些已知蛋白，如血清白蛋白或大豆胰酶抑制劑上，以增強(qiáng)抗原在宿主內(nèi)的免疫原性。佐劑可以是弗氏佐劑或mpl-tdm等。動(dòng)物在接受免疫后，體內(nèi)將產(chǎn)生分泌特異性結(jié)合免疫原的抗體的淋巴細(xì)胞。另外，淋巴細(xì)胞也可以利用體外免疫獲得。收集目的淋巴細(xì)胞，并用合適的融合劑，如peg，使其與骨髓瘤細(xì)胞融合以獲得雜交瘤細(xì)胞(goding,monoclonal?antibodies:principles?and?practice,pp.59-103,academicpress,1996)。上述制備的雜交瘤細(xì)胞可以接種到合適的培養(yǎng)液中生長，培養(yǎng)液中優(yōu)選含有一種或多種能夠抑制未融合的、母體骨髓瘤細(xì)胞生長的物質(zhì)。例如，對于缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸轉(zhuǎn)移酶(hgprt或hprt)的母體骨髓瘤細(xì)胞，在培養(yǎng)液中添加次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶(hat培養(yǎng)基)等物質(zhì)將可以抑制hgprt-缺陷細(xì)胞的生長。優(yōu)選的骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)該具有融合率高，抗體分泌能力穩(wěn)定，對hat培養(yǎng)液敏感等特征。其中，骨髓瘤細(xì)胞首選鼠源骨髓瘤，如mop-21或mc-11小鼠腫瘤衍生株(the?salk?institute?cell?distribution?center,san?diego,calif.usa)，和sp-2/0或x63-ag8-653細(xì)胞株(american?type?culturecollection,rockville,md.usa)。另外也有研究報(bào)道，利用人骨髓瘤和人鼠異源骨髓瘤細(xì)胞株制備人單抗(kozbor,j.immunol.,133:3001(1984)；brodeur?et?al.,monoclonalantibody?production?techniques?and?applications,pp.51-63,marcel?dekker,inc.,new?york,1987)。生長雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液用于檢測針對特異抗原的單抗的產(chǎn)生。測定雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單抗的結(jié)合特異性的方法包括例如，免疫沉淀或體外結(jié)合試驗(yàn)，如放射免疫試驗(yàn)(ria)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。例如，可利用munson等在anal.biochem.107:220(1980)描述的scatchard分析法來測定單抗的親和力。當(dāng)確定了雜交瘤產(chǎn)生的抗體的特異性、親和力和反應(yīng)性之后，目的細(xì)胞株可以通過(goding,monoclonal?antibodies:principles?and?practice,pp.59-103,academic?press,1996)所描述的標(biāo)準(zhǔn)的有限稀釋法進(jìn)行亞克隆化。合適的培養(yǎng)液可以是dmem或rpmi-1640等。另外，雜交瘤細(xì)胞還可以腹水瘤的形式在動(dòng)物體內(nèi)生長。利用傳統(tǒng)的免疫球蛋白純化方法，如蛋白a瓊脂糖凝膠、羥基磷灰石層析、凝膠電泳、透析或親和層析等，可以將亞克隆細(xì)胞分泌的單抗從細(xì)胞培養(yǎng)液、腹水或血清中分離出來。376、還可以通過基因工程重組技術(shù)獲得單克隆抗體。利用特異性結(jié)合單抗重鏈和輕鏈基因的核酸引物進(jìn)行pcr擴(kuò)增，可以從雜交瘤細(xì)胞中分離得到編碼單抗重鏈和輕鏈基因的dna分子。將所得的dna分子插入表達(dá)載體內(nèi)，然后轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞(如e.coli細(xì)胞、cos細(xì)胞、cho細(xì)胞、或其它不產(chǎn)生免疫球蛋白的骨髓瘤細(xì)胞)，并在合適的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，可以獲得重組表達(dá)的目標(biāo)抗體。377、抗體可通過公知的技術(shù)，例如使用蛋白a或蛋白g的親和層析進(jìn)行純化。隨后或作為替代，可將特異性抗原(該抗體識別的靶分子)或其抗原表位固定在柱上，并通過免疫親合層析法來純化免疫特異性抗體。免疫球蛋白的純化可參考例如d.wilkinson(thescientist,published?by?the?scientist,inc.,philadelphia?pa.,vol.14,no.8(apr.17,2000),pp.25-28)。378、如本文中所使用的，術(shù)語“鼠源抗體”是指，來源于免疫接種過的小鼠的b細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，繼而篩選出既能無限增殖又能分泌抗體的鼠雜交融合細(xì)胞，進(jìn)而進(jìn)行篩選、抗體制備和抗體純化。或者由于抗原侵入小鼠體后b細(xì)胞分化增殖而形成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可產(chǎn)生分泌抗體。由特異性抗原刺激產(chǎn)生，抗體的產(chǎn)生是由于抗原侵入人體后引起各種免疫細(xì)胞相互作用，使淋巴細(xì)胞中的b細(xì)胞分化增殖而形成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可產(chǎn)生分泌抗體。379、如本文中所使用的，術(shù)語“嵌合抗體(chimeric?antibody)”是指，這樣的抗體，其輕鏈或/和重鏈的一部分源自一個(gè)抗體(其可以源自某一特定物種或?qū)儆谀骋惶囟贵w類或亞類)，且輕鏈或/和重鏈的另一部分源自另一個(gè)抗體(其可以源自相同或不同的物種或?qū)儆谙嗤虿煌目贵w類或亞類)，但無論如何，其仍保留對目標(biāo)抗原的結(jié)合活性(u.s.p4,816,567to?cabilly?et?al.；morrison?et?al.,proc.natl.acad.sci.usa,81:68516855(1984))。例如，術(shù)語“嵌合抗體”可包括這樣的抗體(例如人鼠嵌合抗體)，其中抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)來自第一抗體(例如鼠源抗體)，而抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)來自第二抗體(例如人抗體)。380、如本文中所使用的，術(shù)語“人源化抗體”是指，經(jīng)基因工程改造的非人源抗體，其氨基酸序列經(jīng)修飾以提高與人源抗體的序列的同源性。通常而言，人源化抗體的全部或部分cdr區(qū)來自于非人源抗體(供體抗體)，全部或部分的非cdr區(qū)(例如，可變區(qū)fr和/或恒定區(qū))來自于人源免疫球蛋白(受體抗體)。人源化抗體通常保留了供體抗體的預(yù)期性質(zhì)，包括但不限于，抗原特異性、親和性、反應(yīng)性、提高免疫細(xì)胞活性的能力、增強(qiáng)免疫應(yīng)答的能力等。供體抗體可以是有預(yù)期性質(zhì)(例如，抗原特異性、親和性、反應(yīng)性、提高免疫細(xì)胞活性的能力和/或增強(qiáng)免疫應(yīng)答的能力)的小鼠、大鼠、兔或非人靈長類動(dòng)物(例如，食蟹猴)抗體。381、人源化抗體既能夠保留非人源供體抗體(例如鼠源抗體)的預(yù)期性質(zhì)，又能夠有效降低非人源供體抗體(例如鼠源抗體)在人受試者中的免疫原性，因此，是特別有利的。然而，由于供體抗體的cdr與受體抗體的fr之間的匹配問題，人源化抗體的預(yù)期性質(zhì)(例如，抗原特異性、親和性、反應(yīng)性、提高免疫細(xì)胞活性的能力和/或增強(qiáng)免疫應(yīng)答的能力)通常低于非人源供體抗體(例如鼠源抗體)。382、因此，盡管本領(lǐng)域的研究人員已對抗體的人源化展開了深入的研究，并取得了一些進(jìn)展(參見例如，jones?et?al.,nature,321:522?525(1986)；reichmann?et?al.,nature,332:323?329(1988)；presta,curr.op.struct.biol.,2:593?596(1992)；andclark,immunol.today?21:397?402(2000))，但是，如何對某一供體抗體進(jìn)行充分的人源化，以使得所產(chǎn)生的人源化抗體既具有盡可能高的人源化程度，又能夠盡可能地保留供體抗體的預(yù)期性質(zhì)，現(xiàn)有技術(shù)并沒有提供詳盡的指導(dǎo)。技術(shù)人員需要針對具體供體抗體進(jìn)行摸索、探究和改造，付出大量的創(chuàng)造性勞動(dòng)才有可能獲得，既具有高人源化程度(例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％的人源化程度)、又保留具體供體抗體的預(yù)期性質(zhì)的人源化抗體。383、在本發(fā)明中，為了使人源化抗體盡可能保留供體抗體的性質(zhì)(包括例如，抗原特異性、親和性、反應(yīng)性、提高免疫細(xì)胞活性的能力和/或增強(qiáng)免疫應(yīng)答的能力)，本發(fā)明的人源化抗體中構(gòu)架區(qū)(fr)可以既包含人源受體抗體的氨基酸殘基，也包含相應(yīng)的非人源供體抗體的氨基酸殘基。384、本發(fā)明的嵌合抗體或人源化抗體可以根據(jù)上述制備的鼠單克隆抗體的序列進(jìn)行制備。編碼重鏈和輕鏈的dna可以從目標(biāo)鼠雜交瘤中獲得，并且使用標(biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行工程改造以包含非鼠(例如人)免疫球蛋白序列。385、為制備嵌合抗體，可使用本領(lǐng)域已知的方法將鼠免疫球蛋白可變區(qū)連接至人免疫球蛋白恒定區(qū)(參見例如cabilly等人的美國專利no.4,816,567)。例如，將編碼vh的dna可操作的連接至編碼重鏈恒定區(qū)的另一dna分子以獲得全長重鏈基因。人重鏈恒定區(qū)基因的序列是本領(lǐng)域已知的(參見例如kabat,e.a.等人(1991)sequences?of?proteins?ofimmunological?interest,fifth?edition,u.s.department?of?health?and?humanservices,nih?publication?no.91-3242)，包含這些區(qū)的dna片段可以通過標(biāo)準(zhǔn)pcr擴(kuò)增獲得。重鏈恒定區(qū)可以是igg1、igg2、igg3、igg4、iga、ige、igm或igd恒定區(qū)，但是通常優(yōu)選為igg1或igg4恒定區(qū)。例如，將編碼vl的dna可操作的連接至編碼輕鏈恒定區(qū)cl的另一dna分子以獲得全長輕鏈基因(以及fab輕鏈基因)。人輕鏈恒定區(qū)基因的序列是本領(lǐng)域已知的(參見例如kabat，e.a.等人(1991)sequences?of?proteins?of?immunological?interest，fifth?edition，u.s.department?of?health?and?human?services，nih?publicationno.91-3242)，包含這些區(qū)的dna片段可以通過標(biāo)準(zhǔn)pcr擴(kuò)增獲得。輕鏈恒定區(qū)可以是κ或λ恒定區(qū)，但通常優(yōu)選為κ恒定區(qū)。386、為制備人源化抗體，可以使用本領(lǐng)域已知的方法將鼠cdr區(qū)插入人源框架序列(參見winter的美國專利no.5,225,539；queen等人的美國專利nos.5,530,101；5,585,089；5,693,762和6,180,370；以及l(fā)o,benny,k.c.,editor,in?antibody?engineering:methodsand?protocols,volume?248,humana?press,new?jersey,2004)?；蛘撸€可以利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，其能夠在免疫后不產(chǎn)生內(nèi)源性免疫球蛋白、并且能夠產(chǎn)生完整人抗體庫。例如，已有報(bào)道在嵌合和種系突變小鼠中抗體重鏈連接區(qū)(jh)基因的純合缺失可以完全抑制了內(nèi)源性抗體產(chǎn)生，然后將人種系免疫球蛋白基因陣列轉(zhuǎn)移到所述種系突變小鼠中將導(dǎo)致該小鼠在遇到抗原刺激時(shí)產(chǎn)生人抗體(參見例如，jakobovits等，1993，proc.natl.acad.sci.usa90：2551；jakobovits等，1993，nature362：255-258；bruggermann等，1993，year?inimmunology?7：33；和duchosal等，1992，nature?355：258)。上述轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的非限制性實(shí)例包括，humab小鼠(medarex,inc.)，其含有編碼未重排的人重鏈(μ和γ)和κ輕鏈免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因微型基因座(miniloci)，加之使內(nèi)源μ和κ鏈基因座失活的靶向突變(參見例如lonberg等人(1994)nature?368(6474):856-859)；或攜帶人重鏈轉(zhuǎn)基因和人輕鏈轉(zhuǎn)染色體的“km小鼠tm”(參見專利申請wo02/43478)。其他抗體人源化改造的方法還包括噬菌體展示技術(shù)(hoogenboom等，1991，j.mol.biol.227：381；marks等，j.mol.biol.1991，222：581-597；vaughan等，1996，nature?biotech?14：309)。387、如本文中所使用的，術(shù)語“人源化程度”是用于評價(jià)人源化抗體中非人源氨基酸殘基的數(shù)量的指標(biāo)。人源化抗體的人源化程度例如可通過imgt網(wǎng)站domaingapalign來預(yù)測可變區(qū)序列與人v結(jié)構(gòu)域的同源性。388、如本文中所使用的，“同源抗體”指抗體的變體，其包含的重鏈和輕鏈可變區(qū)所包含的氨基酸序列與本文中所提供的抗體或其抗原結(jié)合片段的氨基酸序列同源，且其中所述變體保留了本發(fā)明抗cldn18.2抗體的期望的功能特性。389、用于比較的序列比對方法在本領(lǐng)域是熟知的。多種程序和比對算法描述于：smithtf和waterman?ms,adv.appl.math.,2:482,1981；higgins?dg和sharp?pm,cabios5:151,1989。altschul?sf等,nature?genet.,6:119,1994提供了序列比對方法和同源性計(jì)算的詳細(xì)思路。390、如本文中所使用的，術(shù)語“特異性結(jié)合”是指，兩分子間的非隨機(jī)的結(jié)合反應(yīng)，如抗體和其所針對的抗原之間的反應(yīng)。特異性結(jié)合相互作用的強(qiáng)度或親和力可以該相互作用的平衡解離常數(shù)(kd)或半最大效應(yīng)濃度(ec50)表示。391、兩分子間的特異性結(jié)合性質(zhì)可使用本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行測定。一種方法涉及測量抗原結(jié)合位點(diǎn)/抗原復(fù)合物形成和解離的速度?！敖Y(jié)合速率常數(shù)”(ka或kon)和“解離速率常數(shù)”(kdis或koff)兩者都可通過濃度及締合和解離的實(shí)際速率而計(jì)算得出(參見malmqvist?m,nature,1993,361:186-187)。kdis/kon的比率等于解離常數(shù)kd(參見davies等人,annual?rev?biochem,1990；59:439-473)?？捎萌魏斡行У姆椒y量kd、kon和kdis值。在某些實(shí)施方案中，可以使用生物發(fā)光干涉測量法(例如fortebio?octet法)來測量解離常數(shù)。除此以外還可用表面等離子共振技術(shù)(例如biacore)或kinexa來測量解離常數(shù)。392、如本文中所使用的，術(shù)語“載體(vector)”是指，可將多聚核苷酸插入其中的一種核酸運(yùn)載工具。當(dāng)載體能使插入的多核苷酸編碼的蛋白獲得表達(dá)時(shí)，載體稱為表達(dá)載體。載體可以通過轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)導(dǎo)或者轉(zhuǎn)染導(dǎo)入宿主細(xì)胞，使其攜帶的遺傳物質(zhì)元件在宿主細(xì)胞中獲得表達(dá)。載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，包括但不限于：質(zhì)粒；噬菌粒；柯斯質(zhì)粒；人工染色體，例如酵母人工染色體(yac)、細(xì)菌人工染色體(bac)或p1來源的人工染色體(pac)；噬菌體如λ噬菌體或m13噬菌體及動(dòng)物病毒等?？捎米鬏d體的動(dòng)物病毒包括但不限于，逆轉(zhuǎn)錄酶病毒(包括慢病毒)、腺病毒、腺相關(guān)病毒、皰疹病毒(如單純皰疹病毒)、痘病毒、桿狀病毒、乳頭瘤病毒、乳頭多瘤空泡病毒(如sv40)。一種載體可以含有多種控制表達(dá)的元件，包括但不限于，啟動(dòng)子序列、轉(zhuǎn)錄起始序列、增強(qiáng)子序列、選擇元件及報(bào)告基因。另外，載體還可含有復(fù)制起始位點(diǎn)。393、表達(dá)及克隆載體含有使載體能在一或多個(gè)所選宿主細(xì)胞中復(fù)制的核酸序列。通常，在克隆載體中，此序列為使載體能獨(dú)立于宿主染色體dna而復(fù)制者，且其包括復(fù)制起點(diǎn)或自主復(fù)制序列。本文所用的術(shù)語“表達(dá)載體”是指包含重組多核苷酸的載體，其包含與待表達(dá)的核苷酸序列有效連接的表達(dá)調(diào)控序列。表達(dá)載體包含用于表達(dá)的足夠的順式作用元件(cis-acting?elements)；用于表達(dá)的其它元件可以由宿主細(xì)胞或體外表達(dá)系統(tǒng)提供。表達(dá)載體包括本領(lǐng)域所有已知的那些，例如粘粒、質(zhì)粒(例如裸露或包含在脂質(zhì)體中的)和病毒(例如，慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒)。394、如本文中所使用的，術(shù)語“宿主細(xì)胞”是指，可用于導(dǎo)入載體的細(xì)胞，其包括但不限于，如大腸桿菌或枯草菌等的原核細(xì)胞，如酵母細(xì)胞或曲霉菌等的真菌細(xì)胞，如s2果蠅細(xì)胞或sf9等的昆蟲細(xì)胞，或者如纖維原細(xì)胞，cho細(xì)胞，cos細(xì)胞，nso細(xì)胞，hela細(xì)胞，bhk細(xì)胞，hek?293細(xì)胞或人細(xì)胞等的動(dòng)物細(xì)胞。在本文中，宿主細(xì)胞還包括用于構(gòu)建嵌合抗原受體t細(xì)胞(car-t)的免疫細(xì)胞，例如t淋巴細(xì)胞，nk細(xì)胞等。395、如本文中所使用的，術(shù)語“同一性”用于指兩個(gè)多肽之間或兩個(gè)核酸之間序列的匹配情況。當(dāng)兩個(gè)進(jìn)行比較的序列中的某個(gè)位置都被相同的堿基或氨基酸單體亞單元占據(jù)時(shí)(例如，兩個(gè)dna分子的每一個(gè)中的某個(gè)位置都被腺嘌呤占據(jù)，或兩個(gè)多肽的每一個(gè)中的某個(gè)位置都被賴氨酸占據(jù))，那么各分子在該位置上是同一的。兩個(gè)序列之間的“百分?jǐn)?shù)同一性”是由這兩個(gè)序列共有的匹配位置數(shù)目除以進(jìn)行比較的位置數(shù)目×100的函數(shù)。例如，如果兩個(gè)序列的10個(gè)位置中有6個(gè)匹配，那么這兩個(gè)序列具有60％的同一性。例如，dna序列ctgact和caggtt共有50％的同一性(總共6個(gè)位置中有3個(gè)位置匹配)。通常，在將兩個(gè)序列比對以產(chǎn)生最大同一性時(shí)進(jìn)行比較。這樣的比對可通過使用，例如，可通過計(jì)算機(jī)程序例如align程序(dnastar,inc.)方便地進(jìn)行的needleman等人(1970)j.mol.biol.48：443-453的方法來實(shí)現(xiàn)。還可使用已整合入align程序(版本2.0)的e.meyers和w.miller(comput.applbiosci.，4:11-17(1988))的算法，使用pam120權(quán)重殘基表(weight?residue?table)、12的缺口長度罰分和4的缺口罰分來測定兩個(gè)氨基酸序列之間的百分?jǐn)?shù)同一性。此外，可使用已整合入gcg軟件包(可在www.gcg.com上獲得)的gap程序中的needleman和wunsch(j?moibiol.48:444-453(1970))算法，使用blossum?62矩陣或pam250矩陣以及16、14、12、10、8、6或4的缺口權(quán)重(gap?weight)和1、2、3、4、5或6的長度權(quán)重來測定兩個(gè)氨基酸序列之間的百分?jǐn)?shù)同一性。396、如本文中所使用的，術(shù)語“保守置換”意指不會(huì)不利地影響或改變包含氨基酸序列的蛋白/多肽的預(yù)期性質(zhì)的氨基酸置換，通過保守置換氨基酸得到的抗體的變體保留其來源序列的生物學(xué)活性，如特異性地與cldn18.2結(jié)合。例如，可通過本領(lǐng)域內(nèi)已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)例如定點(diǎn)誘變和pcr介導(dǎo)的誘變引入保守置換。保守氨基酸置換包括用具有相似側(cè)鏈的氨基酸殘基替代氨基酸殘基的置換，例如用在物理學(xué)上或功能上與相應(yīng)的氨基酸殘基相似(例如具有相似大小、形狀、電荷、化學(xué)性質(zhì)，包括形成共價(jià)鍵或氫鍵的能力等)的殘基進(jìn)行的置換。已在本領(lǐng)域內(nèi)定義了具有相似側(cè)鏈的氨基酸殘基的家族。這些家族包括具有堿性側(cè)鏈(例如，賴氨酸、精氨酸和組氨酸)、酸性側(cè)鏈(例如天冬氨酸、谷氨酸)、不帶電荷的極性側(cè)鏈(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)、非極性側(cè)鏈(例如丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)、β分支側(cè)鏈(例如，蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸)和芳香族側(cè)鏈(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)的氨基酸。因此，優(yōu)選用來自相同側(cè)鏈家族的另一個(gè)氨基酸殘基替代相應(yīng)的氨基酸殘基。鑒定氨基酸保守置換的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的(參見，例如，brummell等人，biochem.32:1180-1187(1993)；kobayashi等人protein?eng.12(10):879-884(1999)；和burks等人proc.natl?acad.set?usa?94:412-417(1997)，其通過引用并入本文)。397、本文涉及的二十個(gè)常規(guī)氨基酸的編寫遵循常規(guī)用法。參見例如，immunology-asynthesis(2nd?edition,e.s.golub?and?d.r.gren,eds.,sinauer?associates,sunderland,mass.(1991))，其以引用的方式并入本文中。在本發(fā)明中，術(shù)語“多肽”和“蛋白質(zhì)”具有相同的含義且可互換使用。并且在本發(fā)明中，氨基酸通常用本領(lǐng)域公知的單字母和三字母縮寫來表示。例如，丙氨酸可用a或ala表示。398、如本文中所使用的，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑”是指在藥理學(xué)和/或生理學(xué)上與受試者和活性成分相容的載體和/或賦形劑，其是本領(lǐng)域公知的(參見例如remington's?pharmaceutical?sciences.edited?by?gennaro?ar,19thed.pennsylvania:mack?publishing?company,1995)，并且包括但不限于：ph調(diào)節(jié)劑，表面活性劑，佐劑，離子強(qiáng)度增強(qiáng)劑，稀釋劑，維持滲透壓的試劑，延遲吸收的試劑，防腐劑。例如，ph調(diào)節(jié)劑包括但不限于磷酸鹽緩沖液。表面活性劑包括但不限于陽離子，陰離子或者非離子型表面活性劑，例如tween-80。離子強(qiáng)度增強(qiáng)劑包括但不限于氯化鈉。防腐劑包括但不限于各種抗細(xì)菌試劑和抗真菌試劑，例如對羥苯甲酸酯，三氯叔丁醇，苯酚，山梨酸等。維持滲透壓的試劑包括但不限于糖、nacl及其類似物。延遲吸收的試劑包括但不限于單硬脂酸鹽和明膠。稀釋劑包括但不限于水，水性緩沖液(如緩沖鹽水)，醇和多元醇(如甘油)等。防腐劑包括但不限于各種抗細(xì)菌試劑和抗真菌試劑，例如硫柳汞，2-苯氧乙醇，對羥苯甲酸酯，三氯叔丁醇，苯酚，山梨酸等。穩(wěn)定劑具有本領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解的含義，其能夠穩(wěn)定藥物中的活性成分的期望活性，包括但不限于谷氨酸鈉，明膠，spga，糖類(如山梨醇，甘露醇，淀粉，蔗糖，乳糖，葡聚糖，或葡萄糖)，氨基酸(如谷氨酸，甘氨酸)，蛋白質(zhì)(如干燥乳清，白蛋白或酪蛋白)或其降解產(chǎn)物(如乳白蛋白水解物)等。399、本文所用的術(shù)語“治療”是指在試圖改變個(gè)人或處理細(xì)胞引起的的疾病過程中的臨床干預(yù)，既可以進(jìn)行預(yù)防也可以在臨床病理過程干預(yù)。治療效果包括但不限于，防止疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)、減輕癥狀、減少任何疾病直接或間接的病理后果、防止轉(zhuǎn)移、減慢疾病的進(jìn)展速度、改善或緩解病情、緩解或改善預(yù)后等。400、如本文中所使用的，術(shù)語“預(yù)防”是指，為了阻止或延遲疾病或病癥或癥狀(例如，腫瘤、感染或自身免疫性疾病)在受試者體內(nèi)的發(fā)生而實(shí)施的方法。如本文中所使用的，術(shù)語“治療”是指，為了獲得有益或所需臨床結(jié)果而實(shí)施的方法。為了本發(fā)明的目的，有益或所需的臨床結(jié)果包括但不限于，減輕癥狀、縮小疾病的范圍、穩(wěn)定(即，不再惡化)疾病的狀態(tài)，延遲或減緩疾病的發(fā)展、改善或減輕疾病的狀態(tài)、和緩解癥狀(無論部分或全部)，無論是可檢測或是不可檢測的。此外，“治療”還可以指，與期望的存活期相比(如果未接受治療)，延長存活期。401、如本文中使用的，術(shù)語“受試者”是指哺乳動(dòng)物，例如靈長類哺乳動(dòng)物，例如人。在某些實(shí)施方式中，所述受試者(例如人)患有腫瘤、感染或自身免疫性疾病，或者，具有患有上述疾病的風(fēng)險(xiǎn)。402、如本文中所使用的，術(shù)語“有效量”是指足以獲得或至少部分獲得期望的效果的量。例如，預(yù)防疾病(例如，腫瘤、感染或自身免疫性疾病)有效量是指，足以預(yù)防，阻止，或延遲疾病(例如，腫瘤、感染或自身免疫性疾病)的發(fā)生的量；治療疾病有效量是指，足以治愈或至少部分阻止已患有疾病的患者的疾病和其并發(fā)癥的量。測定這樣的有效量完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。例如，對于治療用途有效的量將取決于待治療的疾病的嚴(yán)重度、患者自己的免疫系統(tǒng)的總體狀態(tài)、患者的一般情況例如年齡，體重和性別，藥物的施用方式，以及同時(shí)施用的其他治療等等。403、如本文中所使用的，術(shù)語“免疫細(xì)胞”包括具有造血的起源并在免疫應(yīng)答中起作用的細(xì)胞，例如淋巴細(xì)胞，例如b細(xì)胞和t細(xì)胞；天然殺傷細(xì)胞；髓樣細(xì)胞，例如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜曙紅細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿細(xì)胞和粒細(xì)胞。404、如本文中所使用的，術(shù)語“免疫應(yīng)答”是指，免疫細(xì)胞(例如淋巴細(xì)胞、抗原呈遞細(xì)胞、吞噬細(xì)胞或粒細(xì)胞)以及由免疫細(xì)胞或肝臟所產(chǎn)生的可溶性大分子(包括抗體、細(xì)胞因子、以及補(bǔ)體)的作用，該作用導(dǎo)致對侵入性病原體、被病原體感染的細(xì)胞或組織、癌細(xì)胞、或者在自身免疫或病理炎癥情況下的正常人類細(xì)胞或組織的選擇性損害、破壞或?qū)⑺鼈儚娜梭w中清除。在本發(fā)明中，術(shù)語“抗原特異性t細(xì)胞應(yīng)答”指由t細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答，該應(yīng)答產(chǎn)生于當(dāng)該t細(xì)胞特異的抗原對該t細(xì)胞的刺激之時(shí)。由t細(xì)胞在抗原特異性刺激時(shí)產(chǎn)生的反應(yīng)的非限制性實(shí)例包括t細(xì)胞的增殖以及細(xì)胞因子(例如il-2)的產(chǎn)生。405、如本文中所使用的，術(shù)語“效應(yīng)子功能(effector?function)”是指，那些可歸因于抗體fc區(qū)(天然序列fc區(qū)或氨基酸序列變體fc區(qū))的生物學(xué)活性，且其隨抗體同種型而變化?？贵w效應(yīng)子功能的例子包括但不限于：fc受體結(jié)合親和性、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(adcc)、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性(cdc)、抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用(adcp)、細(xì)胞表面受體(例如b細(xì)胞受體)的下調(diào)、b細(xì)胞活化、細(xì)胞因子分泌、抗體和抗原-抗體復(fù)合物的半衰期/清除率等。改變抗體的效應(yīng)子功能的方法是本領(lǐng)域已知的，例如通過在fc區(qū)引入突變來完成。406、如本文中所使用的，術(shù)語“抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(adcc)”是指，一種細(xì)胞毒性形式，ig通過與細(xì)胞毒性細(xì)胞(例如自然殺傷(nk)細(xì)胞、中性粒細(xì)胞或巨噬細(xì)胞)上存在的fc受體(fcr)結(jié)合，使這些細(xì)胞毒性效應(yīng)細(xì)胞特異性結(jié)合到抗原附著的靶細(xì)胞上，然后通過分泌細(xì)胞毒素殺死靶細(xì)胞。檢測抗體的adcc活性的方法是本領(lǐng)域已知的，例如可通過測定待測抗體與fc受體(例如cd16a)之間的結(jié)合活性來評價(jià)。407、如本文中所使用的，術(shù)語“補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性(cdc)”是指，通過使補(bǔ)體成分c1q與抗體fc結(jié)合來激活補(bǔ)體級聯(lián)的細(xì)胞毒性形式。檢測抗體的cdc活性的方法是本領(lǐng)域已知的，例如可通過測定待測抗體與fc受體(例如c1q)之間的結(jié)合活性來評價(jià)。408、術(shù)語“癌癥”“腫瘤”可互換使用，其是指以體內(nèi)異常細(xì)胞的不受控生長為特征的一大類疾病。不受管制的細(xì)胞分裂可能導(dǎo)致惡性腫瘤或侵入鄰近組織的細(xì)胞的形成，并可能通過淋巴系統(tǒng)或血流轉(zhuǎn)移到身體的遠(yuǎn)端部位。癌癥包括良性和惡性癌癥以及休眠腫瘤或微轉(zhuǎn)移。癌癥也包括血液學(xué)惡性腫瘤。409、術(shù)語“血液學(xué)惡性腫瘤”包括淋巴瘤，白血病，骨髓瘤或淋巴惡性腫瘤，以及脾癌和淋巴結(jié)腫瘤。示例性淋巴瘤包括b細(xì)胞淋巴瘤和t細(xì)胞淋巴瘤。b細(xì)胞淋巴瘤，包括例如霍奇金淋巴瘤。t細(xì)胞淋巴瘤，包括例如皮膚t細(xì)胞淋巴瘤。血液學(xué)惡性腫瘤還包括白血病，例如繼發(fā)性白血病或急性淋巴細(xì)胞性白血病。血液惡性腫瘤還包括骨髓瘤(例如多發(fā)性骨髓瘤)及其他血液學(xué)和/或b細(xì)胞或t細(xì)胞相關(guān)的癌癥。410、如本文中所使用的，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”指當(dāng)分子本體、分子片段或組合物適當(dāng)?shù)亟o予動(dòng)物或人時(shí)，它們不會(huì)產(chǎn)生不利的、過敏的或其他不良反應(yīng)?？勺鳛樗帉W(xué)上可接受的載體或其組分的一些物質(zhì)的具體示例包括糖類(如乳糖)、淀粉、纖維素及其衍生物、植物油、明膠、多元醇(如丙二醇)、海藻酸等。411、在本文中，組合療法包括將本發(fā)明涵蓋抗cldn18.2抗體或其抗原結(jié)合片段與一或多種另外的第二療法的活性治療劑(例如化學(xué)治療劑)或其他預(yù)防或治療模式(例如，放療)組合使用。412、第二療法示例性的抗癌劑可包括化學(xué)治療劑(例如有絲分裂抑制劑)、烷化劑(例如氮芥nitrogen?mustard)、抗代謝物(例如葉酸類似物)、天然產(chǎn)物(例如長春花生物堿vinca?alkaloid)、多種試劑(例如鉑配位絡(luò)合物)、激素和拮抗劑(例如腎上腺皮質(zhì)類固醇)、免疫調(diào)節(jié)劑(例如溴匹立明bropirimine,upjohn)等。其他抗癌治療包括特異性靶向癌細(xì)胞的其他抗體。413、在此類組合療法中，各種活性劑經(jīng)常具有不同的互補(bǔ)作用機(jī)制，組合療法可能導(dǎo)致協(xié)同效應(yīng)。組合療法包含影響免疫反應(yīng)(例如增強(qiáng)或活化反應(yīng))之治療劑及影響(例如抑制或殺死)腫瘤/癌細(xì)胞之治療劑。組合療法可降低抗藥性癌細(xì)胞發(fā)生的可能性。組合療法可允許試劑中的一或多種試劑劑量減少，以減少或消除與試劑中之一或多種相關(guān)的不良作用。此類組合療法可對潛在疾病、病癥或病狀具有協(xié)同的治療或預(yù)防作用。414、在本文中，“組合”包括可以分開施用的療法，例如針對單獨(dú)投藥分開調(diào)配(例如，可以在套組中提供)，及可以按單一調(diào)配物(亦即“共調(diào)配物”)一起施用的療法。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗cldn18.2抗體或其抗原結(jié)合片段可依次序施用。在其他實(shí)施方案中，抗cldn18.2抗體或其抗原結(jié)合片段可同時(shí)施用。本發(fā)明的抗cldn18.2抗體或其抗原結(jié)合片段可以與至少一種其他(活性)藥劑以任何方式組合使用。415、在本文中，claudin?18.2陽性，由專業(yè)臨床病理醫(yī)師進(jìn)行免疫組化和染色強(qiáng)度評價(jià)獲得。her2陰性，包括ihc?1+，或ihc?2+/fish陰性，還包括ihc?0至1+及ihc?1+至2+的范圍。416、下面將結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，下列附圖和實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的范圍的限定。根據(jù)附圖和優(yōu)選實(shí)施方案的下列詳細(xì)描述，本發(fā)明的各種目的和有利方面對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說將變得可實(shí)施。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12