1.一種烯酮還原酶,其特征在于,所述烯酮還原酶相對(duì)于seq?id?no:1、seq?id?no:3或seq?id?no:5所示的氨基酸序列或與seq?id?no:1、seq?id?no:3或seq?id?no:5所示的氨基酸序列相比具有至少95%、96%、97%、98%或99%的同一性的氨基酸序列,至少存在氨基酸殘基w117或其同源位點(diǎn)的差異,其中117位置參照seq?id?no:1中的氨基酸殘基編號(hào)。
2.如權(quán)利要求1所述的烯酮還原酶,其特征在于,其選自以下:
3.如權(quán)利要求2所述的烯酮還原酶,其特征在于,所述烯酮還原酶相對(duì)于seq?id?no:1所示的氨基酸序列還存在氨基酸殘基p35c/e/a/l、m40a/f/l、i76l/v、l119i、r244a、s246t和i352l的差異中的一種或多種。
4.如權(quán)利要求1所述的烯酮還原酶,其特征在于,所述烯酮還原酶相對(duì)于seq?id?no:1所示的氨基酸序列存在選自以下組的氨基酸殘基的差異:
5.一種分離的核酸,其特征在于,其編碼如權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的烯酮還原酶。
6.一種重組表達(dá)載體,其特征在于,其包含如權(quán)利要求5所述的分離的核酸;
7.一種基因工程菌,其特征在于,其包含如權(quán)利要求5所述的分離的核酸或如權(quán)利要求6所述的重組表達(dá)載體。
8.一種生產(chǎn)烯酮還原酶的方法,其特征在于,將如權(quán)利要求7所述的基因工程菌接種于適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到所述烯酮還原酶。
9.一種生產(chǎn)中間產(chǎn)物1的方法,其特征在于,所述方法包括:將烯酮還原酶或生產(chǎn)所述烯酮還原酶的基因工程菌與底物混合,反應(yīng)后得到所述中間產(chǎn)物1;
10.一種生產(chǎn)中間產(chǎn)物2的方法,其特征在于,所述方法包括:將酮還原酶與中間產(chǎn)物1混合,反應(yīng)后得到所述中間產(chǎn)物2;
11.一種生產(chǎn)布瓦西坦中間體(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮的方法,其特征在于,所述方法包括:將烯酮還原酶或生產(chǎn)所述烯酮還原酶的基因工程菌與底物混合,反應(yīng)后得到中間產(chǎn)物1;利用所述中間產(chǎn)物1制得(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮;
12.如權(quán)利要求11所述的方法,其特征在于,所述緩沖液為pbs緩沖液;和/或,
13.一種生產(chǎn)布瓦西坦中間體(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮的方法,其特征在于,所述方法包括:將酮還原酶與中間產(chǎn)物1混合,反應(yīng)后得到所述(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮;
14.如權(quán)利要求13所述的方法,其特征在于,所述緩沖液為pbs緩沖液;和/或,
15.一種生產(chǎn)布瓦西坦中間體(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮的方法,其特征在于,所述方法包括:將烯酮還原酶或生產(chǎn)所述烯酮還原酶的基因工程菌中的任意一種或兩種、酮還原酶和底物混合,反應(yīng)后得到所述(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮;
16.如權(quán)利要求15所述的方法,其特征在于,所述緩沖液為pbs緩沖液;和/或,
17.一種化合物,其特征在于,所述化合物具有如式4所示的結(jié)構(gòu):
18.一種制備如權(quán)利要求17所述的化合物的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:將芐溴或溴乙烷中的任意一種與5-羥基-4-正丙基-2(5h)-呋喃酮混合,反應(yīng)后得到所述化合物;
19.如權(quán)利要求17所述的化合物在生產(chǎn)(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮中的應(yīng)用。
20.如權(quán)利要求7所述的基因工程菌在生產(chǎn)烯酮還原酶或(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮中的應(yīng)用,或如權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的烯酮還原酶在生產(chǎn)(r)-4-丙基-二氫呋喃-2-酮中的應(yīng)用。