技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種RNA反義純化方法。所述方法包含以下步驟:S1、細(xì)胞的交聯(lián)、裂解及基因組DNA的消化,得到RNA樣品;S2、探針組溶液的制備;S3、磁珠預(yù)處理;S4、探針組?磁珠復(fù)合物的制備;S5、反義純化;S6、RNA的洗脫;S7、RNA的純化。本發(fā)明通過預(yù)先使用BSA和寡核苷酸隨機(jī)引物封閉磁珠,降低了磁珠的非特異性吸附。本發(fā)明中磁珠首先與探針孵育,去除多余探針后再與RNA孵育,過量探針封閉鏈霉親和素與蛋白質(zhì)、核酸等的非特異性結(jié)合,提高檢測特異性,靈敏度高;雜交后經(jīng)梯度溫度多次洗滌,保證磁珠充分結(jié)合探針并結(jié)合目標(biāo)RNA,提高雜交效率。
技術(shù)研發(fā)人員:王曉香;董先輝;張娟;曾健;周劍
受保護(hù)的技術(shù)使用者:廣州伯信生物科技有限公司
文檔號碼:201710074375
技術(shù)研發(fā)日:2017.02.10
技術(shù)公布日:2017.05.31