技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種纖維素外切酶多拷貝表達(dá)提高黑曲霉纖維素酶酶活的方法，屬于基因工程領(lǐng)域。本發(fā)明方法包括如下步驟：（1）構(gòu)建以啟動(dòng)子序列?信號(hào)肽編碼序列?纖維素外切酶編碼序列?終止子序列為基本單元的纖維素外切酶多拷貝表達(dá)盒。表達(dá)盒中各單元的信號(hào)肽編碼序列均不相同。（2）在纖維素外切酶多拷貝表達(dá)盒兩端加入限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)序列，通過(guò)限制性?xún)?nèi)切酶、DNA連接酶將表達(dá)盒構(gòu)建到表達(dá)載體上。（3）將構(gòu)建的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到黑曲霉中，轉(zhuǎn)化有重組載體的黑曲霉菌株纖維素酶酶活得到提高。本發(fā)明利用不同的信號(hào)肽進(jìn)行組合，避免相同信號(hào)肽競(jìng)爭(zhēng)，從而提高了黑曲霉所產(chǎn)纖維素酶的酶活。

技術(shù)研發(fā)人員：薛棟升;曾徐浩
受保護(hù)的技術(shù)使用者：湖北工業(yè)大學(xué)
文檔號(hào)碼：201710065833
技術(shù)研發(fā)日：2017.02.06
技術(shù)公布日：2017.05.31