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一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒的制作方法

文檔序號:11040246閱讀:684來源:國知局
一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒的制造方法與工藝

本實用新型涉及一種試劑盒,特別涉及一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒。



背景技術(shù):

構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選,建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的工程是需要很多的試驗。為此,我們提出一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒。



技術(shù)實現(xiàn)要素:

本實用新型的主要目的在于提供一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒,通過轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將SpCas9的表達(dá)片段插入哺乳動物基因組,并通過熒光篩選標(biāo)記mCherry得到穩(wěn)定表達(dá)SpCas9的細(xì)胞株。該系統(tǒng)安全,簡便,高效,適合大多數(shù)實驗室的應(yīng)用,能很好滿足科學(xué)、醫(yī)療工作需要,可以有效解決背景技術(shù)中的問題。

為實現(xiàn)上述目的,本實用新型采取的技術(shù)方案為:

一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒,包括盒體,所述盒體內(nèi)部設(shè)置有襯墊,所述的襯墊上設(shè)有容器孔,分別盛裝SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry,轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X,轉(zhuǎn)染試劑,Opti-MEM培養(yǎng)基和去離子水,所述SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry,轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X,轉(zhuǎn)染試劑,Opti-MEM培養(yǎng)基和去離子水的中間放置著容器控制臺,所述容器控制臺上設(shè)置著控制開關(guān)并通過導(dǎo)線連接著。

進(jìn)一步地,所述容器控制臺的下方設(shè)置有試劑工作臺,所述試劑工作臺的下端連接著驅(qū)動盤,所述驅(qū)動盤的輸入端連接著電動機(jī)。

進(jìn)一步地,所述試劑工作臺一側(cè)剪切著試驗物品輸送臺,所述試驗物品輸送臺的另一側(cè)設(shè)置有放置口。

進(jìn)一步地,所述SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry,轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X,轉(zhuǎn)染試劑,Opti-MEM培養(yǎng)基和去離子水的下方各設(shè)置一個點(diǎn)滴針,所述點(diǎn)滴針的開關(guān)連接著控制開關(guān)。

進(jìn)一步地,所述試劑工作臺的外側(cè)設(shè)置觀測窗口,所述觀測窗口是采用透明玻璃制成。

與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實用新型具有如下有益效果:本試劑盒通過轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將SpCas9的表達(dá)片段插入哺乳動物基因組,并通過熒光篩選標(biāo)記mCherry得到穩(wěn)定表達(dá)SpCas9的細(xì)胞株。該系統(tǒng)安全,簡便,高效,適合大多數(shù)實驗室的應(yīng)用,能很好滿足科學(xué)、醫(yī)療工作需要。

【附圖說明】

圖1為本實用新型醫(yī)療用制藥攪拌設(shè)備的整體結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2為本實用新型醫(yī)療用制藥攪拌設(shè)備的內(nèi)部結(jié)構(gòu)俯視圖。

圖中:1、盒體;2、襯墊;3、SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry;4、轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X;5、轉(zhuǎn)染試劑;6、Opti-MEM培養(yǎng)基;7、去離子水;8、控制開關(guān);9、容器控制臺;10、點(diǎn)滴針;11、放置口;12、試驗物品輸送臺;13、試劑工作臺;14、電動機(jī);15、驅(qū)動盤;16、觀測窗口。

【具體實施方式】

為使本實用新型實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解,下面結(jié)合具體實施方式,進(jìn)一步闡述本實用新型。

如圖1-2所示,一種建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒,包括盒體1,所述盒體1內(nèi)部設(shè)置有襯墊2,所述的襯墊2上設(shè)有容器孔,分別盛裝SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry3,轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X4,轉(zhuǎn)染試劑5,Opti-MEM培養(yǎng)基6和去離子水7,所述SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry3,轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X4,轉(zhuǎn)染試劑5,Opti-MEM培養(yǎng)基6和去離子水7的中間放置著容器控制臺9,所述容器控制臺9上設(shè)置著控制開關(guān)8并通過導(dǎo)線連接著。

本實用新型建立穩(wěn)定表達(dá)SpCas9細(xì)胞株的試劑盒,通過轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)將SpCas9的表達(dá)片段插入哺乳動物基因組,并通過熒光篩選標(biāo)記mCherry得到穩(wěn)定表達(dá)SpCas9的細(xì)胞株。該系統(tǒng)安全,簡便,高效,適合大多數(shù)實驗室的應(yīng)用,能很好滿足科學(xué)、醫(yī)療工作需要。

其中,所述容器控制臺9的下方設(shè)置有試劑工作臺13,所述試劑工作臺13的下端連接著驅(qū)動盤15,所述驅(qū)動盤15的輸入端連接著電動機(jī)14,在試驗過程中可以旋轉(zhuǎn)試劑工作臺13,對試驗有很大的幫助。

其中,所述試劑工作臺13一側(cè)剪切著試驗物品輸送臺12,所述試驗物品輸送臺12的另一側(cè)設(shè)置有放置口11,來把試驗的材料放進(jìn)來。

其中,所述SpCas9表達(dá)質(zhì)粒pT-SpCas9-mCherry3,轉(zhuǎn)座酶表達(dá)質(zhì)粒SB100X4,轉(zhuǎn)染試劑5,Opti-MEM培養(yǎng)基6和去離子水7的下方各設(shè)置一個點(diǎn)滴針10,所述點(diǎn)滴針10的開關(guān)連接著控制開關(guān)8,使得在試驗過程中隨時控制點(diǎn)滴針10來點(diǎn)滴容器內(nèi)的藥物。

其中,所述試劑工作臺13的外側(cè)設(shè)置觀測窗口16,所述觀測窗口16是采用透明玻璃制成,在試驗過程中清楚看到試驗所發(fā)生的變化。

以上顯示和描述了本實用新型的基本原理和主要特征和本實用新型的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解,本實用新型不受上述實施例的限制,上述實施例和說明書中描述的只是說明本實用新型的原理,在不脫離本實用新型精神和范圍的前提下,本實用新型還會有各種變化和改進(jìn),這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本實用新型范圍內(nèi)。本實用新型要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。

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