本實(shí)用新型涉及一種生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)，尤指一種進(jìn)行一次分析多個(gè)基因型特性以確認(rèn)生化物質(zhì)成份的功效的生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)。
背景技術(shù)：
：一般在研發(fā)實(shí)驗(yàn)室中用以檢測(cè)保養(yǎng)品成效的檢測(cè)平臺(tái)的相關(guān)技術(shù)，其中，透過(guò)基因陣列晶片檢測(cè)即為一例，而基因陣列晶片的判讀可分為螢光法及化學(xué)呈色法(CLMA，colorimetricmembranearray)兩種方式，其中，螢光法是將樣本、晶片與螢光染劑一同雜交反應(yīng)，洗滌后以雷射光激發(fā)分析其位點(diǎn)的螢光強(qiáng)弱，便可得知基因表現(xiàn)量，雖螢光型基因陣列晶片具備高靈敏度及特異性的優(yōu)點(diǎn)，但因需操作螢光染劑，因此操作技術(shù)門(mén)檻較高，所需時(shí)間也較長(zhǎng)，試劑成本也較高，此外，更需要專業(yè)且高價(jià)的判讀裝置。市面上可購(gòu)得或皮膚科診所中所使用如抗老化、美白的保養(yǎng)品皆宣稱其具有使細(xì)胞活化的成份，惟對(duì)使用者而言，對(duì)于該些保養(yǎng)品實(shí)際上是否適用于個(gè)人皮膚的細(xì)胞，并無(wú)法明確得知，而習(xí)知以螢光法作為基因陣列晶片的檢測(cè)并無(wú)法落實(shí)于個(gè)人化醫(yī)療來(lái)評(píng)估及使用，故如何提供一種個(gè)人化保養(yǎng)品的功效評(píng)估平臺(tái)，是一亟需解決的課題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本實(shí)用新型所解決的技術(shù)問(wèn)題即在提供一種可藉由以已知美白表現(xiàn)寡核苷酸探針的基因晶片平臺(tái)確立保養(yǎng)品特定化學(xué)成份對(duì)于細(xì)胞刺激效果的檢測(cè)平臺(tái)。本實(shí)用新型所采用的技術(shù)手段如下所述。提供提供一種生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)，包括一供預(yù)先制備檢體的檢體預(yù)制裝置，以及一與該檢體預(yù)制裝置連接反應(yīng)的檢測(cè)裝置，該檢測(cè)裝置包括一生物晶片，以及一基因模組，該生物晶片具有相鄰的一第一呈色區(qū)及一第二呈色區(qū)，該第一呈色區(qū)具有至少一第一制備區(qū)及一第一評(píng)比區(qū)，該第二呈色區(qū)具有對(duì)應(yīng)該第一制備區(qū)的至少一第二制備區(qū)及對(duì)應(yīng)該第一評(píng)比區(qū)的一第二評(píng)比區(qū)，該基因模組包括至少一標(biāo)的基因及一評(píng)比基因，該標(biāo)的基因分別設(shè)于該第一制備區(qū)及該第二制備區(qū)，該評(píng)比基因分別設(shè)于該第一評(píng)比區(qū)及該第二評(píng)比區(qū)。進(jìn)一步地，本實(shí)用新型所述的生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)，其中，每一該標(biāo)的基因分別打點(diǎn)于一對(duì)相鄰的該第一制備區(qū)及該第二制備區(qū)。進(jìn)一步地，本實(shí)用新型所述的生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)，其中，該評(píng)比基因?yàn)棣?actin。進(jìn)一步地，本實(shí)用新型所述的生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)，其中，該生物晶片為薄膜式陣列晶片。本實(shí)用新型所產(chǎn)生的技術(shù)效果：1.本實(shí)用新型所使用的生物晶片基因檢測(cè)技術(shù)採(cǎi)用薄膜式陣列晶片，可在一次的操作同時(shí)分析數(shù)百點(diǎn)以上的不同基因表現(xiàn)位點(diǎn)，同時(shí)具備操作時(shí)間短及靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，與玻璃晶片相較也具有操作簡(jiǎn)易及低成本的優(yōu)點(diǎn)，藉此，有效率地評(píng)估保養(yǎng)品成份對(duì)于細(xì)胞刺激的功效，建立個(gè)人化保養(yǎng)品功效評(píng)估平臺(tái)。附圖說(shuō)明圖1為本實(shí)用新型生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)的方塊圖。圖2為本實(shí)用新型生物晶片放入基因模組示意圖。圖3為本實(shí)用新型細(xì)胞株經(jīng)由傳明酸處理后的呈色結(jié)果示意圖。圖號(hào)說(shuō)明：1生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)10檢體預(yù)制裝置11培養(yǎng)單元12配置單元13合成單元20檢測(cè)裝置21第一呈色區(qū)211第一制備區(qū)212第一評(píng)比區(qū)22第二呈色區(qū)221第二制備區(qū)222第二評(píng)比區(qū)。具體實(shí)施方式請(qǐng)參閱圖1所示，本實(shí)用新型生化物質(zhì)檢測(cè)平臺(tái)1包括一供預(yù)先制備檢體的檢體預(yù)制裝置10、以及一與該檢體預(yù)制裝置10連接的一檢測(cè)裝置20，其中，該檢體預(yù)制裝置10包括相互連接的一供培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)單元11、一供保養(yǎng)品及核酸濃度配置的配置單元12、一進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的合成單元13，其中，當(dāng)取得一人類(lèi)檢體后，在進(jìn)行分析檢測(cè)前，通常是透過(guò)該培養(yǎng)單元11預(yù)先進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，并透過(guò)該配置單元12進(jìn)行生化組成物濃度的配置，再藉由該合成單元13將培養(yǎng)后的細(xì)胞與生化組成物合成，作為本實(shí)用新型檢測(cè)平臺(tái)所需的基因檢體，其中該人體檢體在本實(shí)施例中以人類(lèi)皮膚纖維母細(xì)胞CCD966SK(BCRC60153)為實(shí)施，并以培養(yǎng)基(MinimumEssentialMedium，MEM)培養(yǎng)，其中，該人體檢體添加10％胎牛血清(Fetalbovineserum，F(xiàn)BS)且培養(yǎng)條件為37℃、5％CO2及相對(duì)濕度95％，而后以磷酸鹽緩沖液(phosphate-bufferedsaline，PBS)輕輕沖洗細(xì)胞兩次后移除，并依照所需實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞量去調(diào)整細(xì)胞濃度并作為對(duì)照組。上述條件僅為說(shuō)明之用，并不用以限制本實(shí)用新型的范圍。關(guān)于本實(shí)用新型該檢測(cè)裝置20，請(qǐng)參閱圖2，該檢測(cè)裝置20包括一生物晶片(圖未示出)以及一基因模組(圖未示出)。其中，該生物晶片具有相鄰的一第一呈色區(qū)21及一第二呈色區(qū)22，該第一呈色區(qū)21具有至少一第一制備區(qū)211(本實(shí)施例設(shè)為四個(gè))及一第一評(píng)比區(qū)212，該第二呈色區(qū)22具有對(duì)應(yīng)該第一制備區(qū)211的至少一第二制備區(qū)221(即設(shè)為四個(gè))及對(duì)應(yīng)該第一評(píng)比區(qū)212的一第二評(píng)比區(qū)222。其中，該生物晶片可為薄膜式陣列晶片，可由尼龍膜、硝化纖維膜所鍵成。進(jìn)行分析時(shí)，透過(guò)本實(shí)用新型進(jìn)行制備該可為尼龍膜的薄膜式陣列生物晶片，首先，本實(shí)施例以該檢體預(yù)制裝置10在最后階段所形成的第二合成物的基因中，在該基因中挑選各兩項(xiàng)關(guān)于美白及抗老化的基因，即，本實(shí)施例的基因模組包括四項(xiàng)標(biāo)的基因，分別為MC1R、TYR、Mmp、以及TIMP1并將該個(gè)別的標(biāo)的基因分別以兩重復(fù)的方式分別打點(diǎn)于該生物晶片個(gè)別的第一制備區(qū)211及第二制備區(qū)221(如圖2所示)，又，該基因模組更包括一供作為控制組的評(píng)比基因，該評(píng)比基因?yàn)橐婚L(zhǎng)度約為40mer的β-actin，該評(píng)比基因亦以兩重復(fù)的方式分別打點(diǎn)于該生物晶片的該第一評(píng)比區(qū)212及該第二評(píng)比區(qū)222，藉此制備為呈色型的尼龍膜生物晶片，并再以XL-1000UV進(jìn)行附著固定(crosslink)反應(yīng)，并放入干燥箱內(nèi)備于基因分析之用。將制備好的生物晶片放置于反應(yīng)盒中，加入預(yù)熱的雜交反應(yīng)液；隨之，進(jìn)行前雜交反應(yīng)(pre-hybridization)。之后，將標(biāo)記(labeling)完成的互補(bǔ)去氧核醣核酸(cDNA)終止反應(yīng)，加入該反應(yīng)盒中，并置于42℃進(jìn)行雜交反應(yīng)(hybridization)至少16小時(shí)，之后，取出生物晶片，經(jīng)由一連串的洗滌試劑(Washbuffer)搖擺清洗后，加入固定反應(yīng)液(Blockingbuffer)反應(yīng)后，加入洗滌試劑清洗，加入抗標(biāo)記緩沖液(Anti-DIG-APbuffer)反應(yīng)后倒掉，加入偵測(cè)反應(yīng)液(Detectionbuffer)，反應(yīng)后倒掉；加入呈色劑(NBT-BCIP)進(jìn)行呈色反應(yīng)，最后進(jìn)行終止反應(yīng)。將尼龍膜晶片烘干后，即可使用高解析度(3000dpi×3000dpi)的EpsonPerfection1670flatbed掃描器(SELKOEPSONCorp，Nagano-ken，Japan)將呈色結(jié)果掃描，并且將圖片檔的儲(chǔ)存，并針對(duì)該圖片檔所呈現(xiàn)之生物晶片上的基因表現(xiàn)反應(yīng)以FC(AlphaInnotechCorp，SanLeandro，CA)分析軟體來(lái)分析其墨點(diǎn)密度比率(參照?qǐng)D3)，其實(shí)際操作先將圖片輸入該分析軟體中，再利用該分析軟體分析每個(gè)標(biāo)的基因和陽(yáng)性控制點(diǎn)(即圖中虛線框處、該評(píng)比基因β-actin)的墨點(diǎn)密度，再將數(shù)據(jù)輸出以進(jìn)行計(jì)算，計(jì)算方式為將二重覆基因點(diǎn)求得其平均值及標(biāo)準(zhǔn)偏差，并以該陽(yáng)性控制點(diǎn)為分母求得其比值(比值為基因表現(xiàn)值除以β-actin值，即Ratio＝GeneExpressionValue/β-actinvalue)即為此基因的表現(xiàn)量。進(jìn)一步詳述本實(shí)用新型該檢體預(yù)制裝置10的該合成單元13，即針對(duì)本實(shí)用新型生物晶片的檢測(cè)以人類(lèi)皮膚纖維母細(xì)胞CCD966SK為細(xì)胞模式，再以3種不同濃度的傳明酸處理0到6小時(shí)，進(jìn)行細(xì)胞型態(tài)與毒性的觀察，再以晶片測(cè)試確認(rèn)其美白能力。首先，細(xì)胞數(shù)以指數(shù)關(guān)系增加至48小時(shí)后達(dá)到上限，約有1.5×105cells，48小時(shí)后因生長(zhǎng)空間及養(yǎng)分不足的情況其生長(zhǎng)趨緩，甚至隨著時(shí)間的增加而逐漸死亡，在96小時(shí)后下降至5×104cells，藉由此結(jié)果可以確立細(xì)胞的生長(zhǎng)速度。再以傳明酸進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，觀察細(xì)胞型態(tài)的變化，可得知使用0.01％傳明酸經(jīng)過(guò)6小時(shí)后，細(xì)胞型態(tài)相較0小時(shí)時(shí)無(wú)顯著差異，0.1％傳明酸經(jīng)過(guò)6小時(shí)后，細(xì)胞型態(tài)差異不大，而細(xì)胞數(shù)量有增加的趨勢(shì)，而使用3％傳明酸處理細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞型態(tài)從4小時(shí)開(kāi)始可以觀察出細(xì)胞死亡所產(chǎn)生的碎片，且6小時(shí)細(xì)胞型態(tài)明顯與0小時(shí)時(shí)有所差異。經(jīng)由上述觀察試驗(yàn)后，便可得知細(xì)胞株經(jīng)由傳明酸處理后的結(jié)果如圖3所示，將此結(jié)果圖輸入FC軟體中，將此結(jié)果數(shù)值化如表1所示，并以β-actin基因作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析密度，進(jìn)一步定義數(shù)值大于β-actin為過(guò)表現(xiàn)，數(shù)值低于β-actin為低表現(xiàn)，以如前所述的方式，便可針對(duì)受試者的生理狀態(tài)進(jìn)行個(gè)人化的保養(yǎng)品、化妝品的適性分析。表1：本實(shí)用新型墨點(diǎn)密度與基因表現(xiàn)量的比對(duì)表?？刂平M墨點(diǎn)密度基因表現(xiàn)量actin0.7441321TIMP10.3020820.405952TYR0.3298340.443247MMP10.3407680.45794MC1R0.373180.501497對(duì)照組actin0.542331TIMP10.4148360.764914TYR0.344080.634448MMP10.229940.423985MC1R0.412950.7614373％傳明酸actin0.5501241TIMP10.367760.668504TYR0.3816960.693836MMP10.4114040.747839MC1R0.7411161.34718本實(shí)用新型人類(lèi)皮膚纖維母細(xì)胞(對(duì)照組)CCD966SK細(xì)胞株以傳明酸處理4及6小時(shí)其細(xì)胞存活率，可以得知細(xì)胞經(jīng)由傳明酸處理后，濃度0.01％和0.1％傳明酸與控制組相比其存活率上升，但經(jīng)由3％傳明酸處理后與控制組相比其存活率明顯下降，由此可以推論0.01％和0.1％的傳明酸可刺激細(xì)胞的生長(zhǎng)，但長(zhǎng)時(shí)間以3％傳明酸刺激細(xì)胞可能會(huì)對(duì)細(xì)胞造成傷害，因而導(dǎo)致細(xì)胞存活率下降。晶片檢測(cè)結(jié)果以3％傳明酸刺激細(xì)胞可使細(xì)胞的美白基因MC1R的mRNA表現(xiàn)量有上升的趨勢(shì)，與β-actin相比約增加34％的基因表現(xiàn)量，故建議使用高濃度的傳明酸美白肌膚，其作用時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)以免造成細(xì)胞損傷。綜上所述，本實(shí)用新型所使用的生物晶片是由細(xì)胞分離純化核酸片段后，經(jīng)由與晶片表面設(shè)計(jì)特定序列的寡核苷酸探針雜交、呈色后，將其結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析，并以單色模式所產(chǎn)生的顏色濃度來(lái)量化及評(píng)估在生理狀態(tài)為正?；蚣膊顟B(tài)下的mRNA表現(xiàn)量，呈色法不需要如雷射掃描器(laserscanner)的昂貴的儀器，較螢光法簡(jiǎn)易的操作步驟以及較低的操作成本，其靈敏度與螢光法接近且更容易解釋晶片結(jié)果。因此本實(shí)用新型的化學(xué)呈色型基因陣列晶片，藉由晶片可一次分析多個(gè)基因型特性，藉由分析經(jīng)保養(yǎng)品成份刺激后的細(xì)胞內(nèi)特定的核苷酸表現(xiàn)量變化，進(jìn)而確認(rèn)保養(yǎng)品成份的功效，提供標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)易且個(gè)人化的成分功效評(píng)估的平臺(tái)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3