本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種雷替曲塞的溶劑化一水合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

雷替曲塞，是由英國的royalmarsden醫(yī)院的癌癥研究署與zeneca共同合作發(fā)展的藥物。它是一種胸腺合成酶抑制劑，屬于葉酸的衍生物，用于治療晚期直腸結(jié)腸癌患者。1996年英國首次上市，商品名tomudex，其結(jié)構(gòu)式如下：

現(xiàn)階段，對于雷替曲塞晶型報道很少，更多的是集中在對于其制備以及精制方法的公開報道。

原研專利us4992550中公開了堿溶酸析的精制方法，最終制備得到了一種粉末狀固態(tài)物質(zhì)，為一水合物晶型，并提供了相關(guān)熔點數(shù)據(jù)180-184℃。目前工業(yè)上也大多采用這種堿溶酸析的精制方法，但是該制備方法容易在成品中導(dǎo)致氯化鈉的殘留。

專利cn201210260633.7、cn201110361869.5以及cn201410844732.9中均公開一種將雷替曲塞溶于有機溶劑后再進行洗滌的重結(jié)晶方法，其中，在cn201210260633.7中還提供了一種雷替曲塞的新晶型，但是上述精制方法所形成的中間體容易發(fā)粘或者形成凝膠，不利于進行下一步過濾工藝。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種雷替曲塞的溶劑化物，其作為精制反應(yīng)的中間產(chǎn)物，為制備高純度的雷替曲塞提供了另一種路徑，由該精制方法制備的目標產(chǎn)物，純度高、在長期穩(wěn)定性方面得到了顯著的提升，提升了雷替曲塞的藥用標準，且該精制工藝簡單，適合工業(yè)化大生產(chǎn)。

本發(fā)明提供一種雷替曲塞的溶劑化合物，其特征在于，結(jié)構(gòu)如下所示：

r＝c1-c10的烷基，其中優(yōu)選r為甲基、乙基中的一種；

優(yōu)選的雷替曲塞甲醇水合物ⅱ，其x射線粉末衍射圖在2θ值為7.9±0.2°、10.2±0.2°、12.9±0.2°、15.2±0.2°、17.0±0.2°°、20.4±0.2°、23.2±0.2°、24.00±0.2°、27.6±0.2°處具有特征峰。優(yōu)選地，2θ值在7.9±0.2°、10.2±0.2°、12.9±0.2°、15.2±0.2°、17.0±0.2°、18.9±0.2°、19.3±0.2°、20.4±0.2°、23.2±0.2°、24.00±0.2°、24.5±0.2°、25.3±0.2°、27.0±0.2°、27.6±0.2°、30.8±0.2°處具有特征峰。更優(yōu)選地，xrpd圖譜見圖1。

本發(fā)明提供的雷替曲塞甲醇水合物ⅱ其差示掃描量熱(dsc)曲線在48.2℃、98.2℃、178.5℃處有吸熱峰，其在48.2℃失去溶劑甲醇分子、98.2℃時失去溶劑水分子，178.5℃為溶化峰。dsc圖譜詳見圖2。

本發(fā)明經(jīng)卡爾費休水分儀測得水分含量在3.46％，約含有一分子水。

本發(fā)明提供的雷替曲塞甲醇水合物ⅱ其熱重(tg)曲線在加熱至110℃時，具有9.5％的失重，由熱重數(shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有一個水分子和一個甲醇分子。熱重分析圖如圖3所示。

進一步，本發(fā)明還提供雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的單晶，證明其晶型ⅱ中一分子雷替曲塞含有一分子水與一分子甲醇，將其單個晶體接受單晶x射線衍射分析，x單晶衍射圖譜如圖4，其為單斜晶系，軸長晶面夾角α＝90°，β＝91.12°，γ＝90°。

本發(fā)明還提供雷替曲塞乙醇水合物ⅲ，其x射線粉末衍射圖在2θ值為7.7±0.2°、10.1±0.2°、12.7±0.2°、14.9±0.2°、16.7±0.2°、19.0±0.2°、20.3±0.2°、22.9±0.2°、23.8±0.2°、24.0±0.2°、27.2±0.2°處具有特征峰。優(yōu)選地，2θ值在7.7±0.2°、8.1±0.2°、10.1±0.2°、10.4±0.2°、10.8±0.2°、12.7±0.2°、13.2±0.2°、14.9±0.2°、16.7±0.2°、17.5±0.2°、19.0±0.2°、19.8±0.2°、20.3±0.2°、22.9±0.2°、23.8±0.2°、24.0±0.2°、27.2±0.2°、30.6±0.2°、32.5±0.2°處具有特征峰。更優(yōu)選地，xrpd圖譜見圖5。

本發(fā)明提供雷替曲塞乙醇水合物ⅲ其差示掃描量熱法(dsc)曲線在50.0℃、98.2℃、173.5℃處有吸熱峰，在50.0℃失去溶劑乙醇分子、98.2℃時失去溶劑水分子，173.5℃為溶化峰。dsc圖譜見圖6。

本發(fā)明經(jīng)卡爾費休水分儀測得水分含量在3.50％，約含有一分子水。

本發(fā)明提供的雷替曲塞乙醇水合物ⅲ其熱重(tg)曲線在加熱至140℃時，具有12.33％的失重，由熱重數(shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有一個水分子和一個乙醇分子。熱重分析圖如圖7所示。

另一方面，本發(fā)明還提供了雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的制備方法，包括以下步驟：將雷替曲塞溶解于水和甲醇溶劑的混合體系中，加熱溶解，熱抽，緩慢降溫，加水析出，分離，干燥即得。其中，水和甲醇溶劑的體積比為1：1～1：6。

另一方面，本發(fā)明還提供了雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的制備方法，包括以下步驟：將雷替曲塞溶解于水和乙醇溶劑的混合體系中，加熱溶解，熱抽，緩慢降溫，加水析出，分離，干燥即得。其中，水和乙醇溶劑的體積比為1：3～1：7。

由于雷替曲塞粉末難溶于水，一般情況下，在有機溶劑中加入水，會使粗品的溶解度降低，這也是對比文件cn201210260633.7、cn201110361869.5中均采用無水的醇類或醚類溶劑對雷替曲塞粗品進行溶解的原因，但是發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)在醇類溶劑中加入一定比例的水后反而會顯著提升雷替曲塞的溶解度，水與醇類溶劑的比例對是否能夠得到固態(tài)的中間體也至關(guān)重要。

以下通過試驗來驗證水與醇的比例對雷替曲塞晶型的影響、以及對其溶解度的影響，該試驗在除水與醇的比例有差異外，其它試驗條件均相同的情況下開展，具體試驗結(jié)果詳見下表。

表1來自初步小規(guī)模結(jié)晶結(jié)果的概要

本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)以雷替曲塞溶劑化物ⅱ、ⅲ作為中間體，制備雷替曲塞一水合物的方法，通過該方法基本可以制備純的雷替曲塞一水合物，且通過該方法制備的一水合物在長期穩(wěn)定試驗中，表現(xiàn)出了更穩(wěn)定的特性。

以下是小規(guī)模穩(wěn)定性試驗的結(jié)果，雷替曲塞粗品可采用以n-[5-(n-甲胺基)-2-噻吩甲?；鵠-l-谷氨酸二乙酯和2-甲基-6-溴甲基-3-氫-喹唑啉-4-酮為原料，經(jīng)縮合、水解制備得雷替曲塞粗品或市場處購買雷替曲塞粗品，純度約95％，水分3％。

批次1：按照us4992550(簡稱‘550)中公開的方法進行制備雷替曲塞一水合物；

批次2：將雷替曲塞粗品，重結(jié)晶生成雷替曲塞甲醇水合物ⅱ，在40-60℃下真空干燥6-8h，得雷替曲塞一水合物。

批次3：將雷替曲塞粗品，重結(jié)晶生成雷替曲塞乙醇水合物ⅲ，在50-65℃下真空干燥6-8h，得雷替曲塞一水合物。

以下對‘550方法和本申請的方法進行了比較分析，其具體區(qū)別詳見下表

表2精制方法比較分析

從上述表中可以看出，本精制方法與‘550中公開的方法相比直接避免了nacl產(chǎn)生，而氯離子超標是該品種生產(chǎn)質(zhì)量控制的難點。因此本發(fā)明操作簡單，更加適合工業(yè)化操作。

與此同時，按照本申請制備的方法與‘550中公開制備方法相比，得到的成品的穩(wěn)定性更高,以下通過穩(wěn)定性試驗來驗證上述結(jié)論。

將上述3個批次的產(chǎn)品，在恒溫恒濕的箱中進行30天的穩(wěn)定性考察，試驗條件：60℃/92.5％相對濕度(rh)，在光照4000lx的條件下，放置10天，分別于0天，5天，10天，取樣，進行產(chǎn)品純度以及雜質(zhì)檢驗。

表3批次1-3的穩(wěn)定性試驗的結(jié)果

由以上數(shù)據(jù)可知，以溶劑化物為中間體，直接干燥得精制品制備的雷替曲塞一水合物，在長期穩(wěn)定性中更勝一籌。

附圖說明

圖1雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的xrpd圖譜；

圖2雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的dsc圖譜；

圖3雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的tga圖譜；

圖4雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的單晶空間結(jié)構(gòu)圖；

圖5雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的xrpd圖譜；

圖6雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的dsc圖譜；

圖7雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的tga圖譜；

圖8雷替曲塞無定型的xrpd圖譜；

圖9實施例9制備的雷替曲塞一水合物的hplc圖譜；

圖10實施例10制備的雷替曲塞一水合物的hplc圖譜。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例進一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但并不限定本發(fā)明。

雷替曲塞粗品可采用以n-[5-(n-甲胺基)-2-噻吩甲?；鵠-l-谷氨酸二乙酯和2-甲基-6-溴甲基-3-氫-喹唑啉-4-酮為原料，經(jīng)縮合、水解制備得雷替曲塞粗品或市場處購買雷替曲塞粗品，純度約95.0％，水分3％。

本發(fā)明檢測藥物晶型結(jié)構(gòu)及其性能的儀器如下：

1.單晶結(jié)構(gòu)由x射線單晶衍射儀測定，制造商荷蘭enrafnoius&enrafnoius公司，儀器型號：cad4/pc。

2.粉末衍射儀是由制造廠商瑞士arl公司生產(chǎn)的，儀器型號：x'tra，cu-kα管電壓40kv，管電流30ma，掃描速度8°/min。

3.差示掃描量熱曲線和熱重曲線由美國perkinelmer公司生產(chǎn)，儀器型號：pyris1dsc，采用氮氣氣氛，升溫速率10℃/min。

4.卡爾費休水分測試儀型號：mettlertoledov30volumetrickftitrator

實施例1制備雷替曲塞甲醇一水合物ⅱ的粉末

將1g雷替曲塞溶解于40ml甲醇與10ml的水的混合溶劑中，加熱至50℃溶清，熱抽，自然緩慢降溫至35℃，有晶體析出，緩慢滴加水110ml，低溫5℃析晶2h，過濾干燥即得晶型ⅱ的白綠色晶體粉末。用xrpd、dsc、tg對其進行表征，結(jié)果如圖1～3。

實施例2制備雷替曲塞甲醇一水合物ⅱ的單晶

將1g雷替曲塞粉末溶于水：甲醇(體積比＝1：3)的混合溶劑中，通過0.45μm的濾紙將未溶解的固體過濾掉，將得到的飽和濾液用扎孔的薄膜封住，緩慢揮發(fā)至固體析出，過濾，真空干燥，收集固體即得晶型ⅱ。對單個晶體進行x射線單晶衍射，結(jié)果如圖4。

實施例3制備雷替曲塞乙醇一水合物ⅲ的粉末

將1g雷替曲塞溶解于60ml乙醇與10ml的水的混合溶劑中，加熱至50℃溶清，熱抽，自然緩慢降溫至40℃，加入雷替曲塞乙醇一水合物ⅲ晶種，有晶體析出，自然降溫至35℃，緩慢滴加水170ml，低溫5℃析晶2h，過濾干燥即得晶型ⅲ的晶體粉末。

實施例4純有機溶劑中制備無定形

將1g雷替曲塞溶解于40ml甲醇中，加熱至50℃溶清，熱抽，自然緩慢降溫至35℃，有晶體析出，緩慢滴加水110ml，低溫5℃析晶2h，過濾干燥即得黃綠粉末，其xrd粉末衍射如圖8所示，為無定形。

實施例5按照cn201110001785.0中公開的方法進行制備

將0.20g(0.38mmol)n-[5-[n-[(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代-6-喹唑啉基)甲基]-n-甲基氨基]-2-噻吩甲酰]-l-谷氨酸二乙酯溶于10ml乙醇和10ml丙酮中，加入3mol·l-1氫氧化鈉水溶液14ml，室溫攪拌反應(yīng)3h。減壓蒸餾蒸除乙醇和丙酮，用2mol·l-1鹽酸調(diào)ph＝4，過濾，得棕黃色固體，用甲醇-無水乙醚重結(jié)晶，得淺黃色固體雷替曲塞0.14g，收率80.1％。經(jīng)檢測其為無定形粉末。

實施例6按照cn201210260633.7中公開的方法進行制備

溫度為0℃，往480ml1nnaoh溶液中加入分次加入52.8gn-[5-[n-甲基-n-(2-甲基-4-氧代-3，4-二氫喹唑啉基-6-甲基)氨基]噻吩-2-甲酰基]-l-谷氨酸二乙酯(約0.1mol)純度在97％，繼續(xù)攪拌2小時，過濾。濾液用二氯甲烷(500ml×2)萃取掉有機相雜質(zhì)，再用乙酸乙酯(500ml×2)再萃取掉剩余的有機相雜質(zhì)，在攪拌下(0--5℃)水層用1n鹽酸調(diào)ph值至3.0左右，有大量固體析出。0℃下攪拌1小時，過濾，產(chǎn)物用純化水洗滌，洗至濾液無cl^-離子殘留用0.1nagno3測定)，盡量抽干，得雷替曲塞粗濕品138克，取該雷替曲塞粗產(chǎn)物13.8g加入到600ml無水甲醇中，室溫攪拌0.5小時，試制品有少量不溶物，室溫下過濾，濾液28-35℃下濃縮析晶，置4℃冰箱中冷藏3小時，過濾，產(chǎn)物用少量純化水洗滌，室溫真空干燥10小時，得幾近白色的結(jié)晶固體3.2g，經(jīng)檢測其為無定型粉末。

實施例7按照cn201410844732.9中公開的方法進行制備

往反應(yīng)瓶中加入5g雷替曲塞粗品，再加入15ml甲醇，水浴加熱，回流攪拌，使其全部溶解，回流0.5h，將溶液降溫至40℃，于40℃保溫靜置1h，過濾去掉雜質(zhì)，再將溶液在4小時內(nèi)緩慢降溫至15℃，保溫7h，固體析出。經(jīng)檢測其為無定形粉末。

實施例8按照cn20110361869.5中公開的方法進行制備

粗品置于1000ml反應(yīng)瓶中，加入600ml甲醇加熱回流至澄清，過濾，濾液冷卻至5-10℃，慢慢加入約4200ml純化水攪拌析晶，過濾，固體用純化水洗滌，得淡黃色固體。40℃真空干燥24小時，得淺黃色精品30.3g，摩爾收率85％。hplc純度99.8％。經(jīng)檢測其為無定形粉末。

實施例9對無定型、一水合物、溶劑化合物進行長期穩(wěn)定試驗考察。

將雷替曲塞無定型、一水合物、溶劑化物ⅱ、ⅲ在恒溫恒濕箱中進行6個月的穩(wěn)定性試驗。試驗條件為：25℃/75％相對濕度(rh)，分別于0、1、2、3、6個月取樣，進行純度和雜質(zhì)檢驗。

表4不同晶型穩(wěn)定性試驗結(jié)果

從上表數(shù)據(jù)可知，雷替曲塞的甲醇水合物以及乙醇水合物在長期穩(wěn)定性試驗中，表現(xiàn)出了比無定型更高的穩(wěn)定性，并且其穩(wěn)定性并不劣于一水合物的穩(wěn)定性。

實施例10

取實施例1所得雷替曲塞甲醇水合物2g，在40-60℃下真空干燥6-8小時后即得雷替曲塞一水合物，收率為86％，其純度為99.94％，最大單雜0.04％，其hplc圖譜詳見圖9。

實施例11

取實施例3所得雷替曲塞乙醇水合物3g，在50-65℃下真空干燥6-8h后，即得雷替曲塞一水合物，收率為83％，純度為99.84％，最大單雜為0.06％，其hplc圖譜詳見圖10。