本發(fā)明涉及檢測
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種奶牛乳房炎檢測試劑盒。
背景技術(shù)：
：奶牛乳房炎(Mastitis)是奶牛乳腺受到物理、化學(xué)、微生物等因素刺激所引起的奶牛乳房的炎癥，表現(xiàn)為乳汁發(fā)生理化性質(zhì)及細(xì)胞學(xué)性質(zhì)的變化、乳腺組織發(fā)生病理學(xué)變化，是奶牛的常發(fā)病之一。根據(jù)乳房和乳汁有無臨床可見的變化將乳房炎分為臨床型乳房炎(ClinicalMastitis)和隱性型乳房炎(SubclinicalMastitis)。隱性乳房炎表現(xiàn)為患牛的乳房和乳汁肉眼觀察無異常，需要通過體細(xì)胞計(jì)數(shù)或借助其他診斷方法才能發(fā)現(xiàn)的乳房炎癥。據(jù)國際奶牛聯(lián)合會(huì)統(tǒng)計(jì)，20世紀(jì)70年代，奶牛臨床型乳房炎患病率約2％，隱性乳房炎病牛高達(dá)50％；美國飼養(yǎng)的1100萬頭奶牛中，半數(shù)患有各種類型乳房炎；日本全國平均乳房炎患病率為45.1％。我國乳房炎的發(fā)生率更高，一般在20％-70％。中國農(nóng)科院中獸醫(yī)研究所對(duì)西北、華北、東北、華南地區(qū)22個(gè)城市32個(gè)奶牛場1037頭成年泌乳牛進(jìn)行臨床型乳房炎病因及發(fā)病情況調(diào)查，并對(duì)其中5個(gè)地區(qū)20個(gè)奶牛場3384頭泌乳牛用蘭州乳房炎實(shí)驗(yàn)進(jìn)行隱性乳房炎調(diào)查，結(jié)果表明臨床型乳房炎發(fā)病率為33.41％，隱性乳房炎奶牛頭陽性率為73.91％，陽性乳區(qū)檢出率為44.74％。據(jù)報(bào)道，北京和天津地區(qū)的隱性乳房炎陽性率為50％-80.9％；蘭州和太原的隱性乳房炎的發(fā)病率為50％左右。青海省某奶牛場隱性乳房炎的乳頭患病率和乳區(qū)患病率分別為54.08％和25.89％。綜上所述，奶牛乳房炎在世界范圍內(nèi)感染率都很高，在我國奶牛乳房炎的感染情況也相當(dāng)嚴(yán)重，乳房炎感染類型主要以隱性型為主。乳房炎對(duì)奶牛養(yǎng)殖業(yè)、牛奶的營養(yǎng)價(jià)值和食品安全帶來巨大的危害。首先乳房炎引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，國外對(duì)奶牛乳房炎引起的經(jīng)濟(jì)損失的傳統(tǒng)估計(jì)是根據(jù)奶產(chǎn)量的降低、奶的丟失、藥費(fèi)開支、獸醫(yī)費(fèi)用和勞動(dòng)力費(fèi)用等的增加來統(tǒng)計(jì)。據(jù)報(bào)道，英國每年治療奶牛乳房炎的平均花費(fèi)為每頭奶牛187英鎊，美國每年用于每頭奶牛乳房炎的花費(fèi)為177-182美元，芬蘭、挪威、瑞典每年因乳房炎問題淘汰的奶牛占淘汰奶牛的35％、19％和22％，可見乳房炎的發(fā)生給奶牛養(yǎng)殖業(yè)帶來的經(jīng)濟(jì)損失巨大。在這些經(jīng)濟(jì)損失中，由于產(chǎn)奶量的降低引起的損失占70％，由于患病而使奶牛提早淘汰占14％，廢棄乳汁占7％，治療及獸醫(yī)費(fèi)用占8％等，而且經(jīng)濟(jì)損失主要來自于隱性乳房炎，其造成的損失占母牛每年總生產(chǎn)能力的10-11％。其次，乳房炎使乳的品質(zhì)大大下降，乳中含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪和糖類，在乳房炎疾病期間，致病菌損害乳腺的分泌細(xì)胞，引起乳腺組織損傷，某些營養(yǎng)成分丟失，使?fàn)I養(yǎng)成分不全而降低牛奶的保健作用。隱性乳房炎乳汁中氨基酸總量也由平均2.2387g/100mL降低了21％，其中蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸5種必需氨基酸及組氨酸、精氨酸顯著降低；乳糖、酪蛋白、脂肪、Ca2+、P3-、K+等有益成分的含量均降低或明顯降低；而免疫球蛋白、酯酶、炎性因子、致病菌及其產(chǎn)生的毒素等有害成分的含量則增加，熱穩(wěn)定性降低。此外，奶?；加腥榉垦准膊『笏a(chǎn)的乳汁中含有大量的炎性因子、致病菌及其產(chǎn)生的毒素，如果飲用了消毒不嚴(yán)或攙雜了含有致病菌的牛奶，則會(huì)使人感到身體不適，嚴(yán)重者可誘發(fā)疾病。在治療乳房炎疾病過程中出現(xiàn)濫用抗生素，有些經(jīng)營者不淘汰治療期間的患牛乳汁，造成抗生素在牛奶中殘留，引起食用者發(fā)生過敏反應(yīng)，尤其對(duì)老年人和嬰幼兒危害會(huì)更大。因此，及時(shí)地、準(zhǔn)確地對(duì)奶牛乳房炎疾病做出診斷極為重要。臨床型奶牛乳房炎主要通過臨床癥狀來進(jìn)行診斷，隱性乳房炎則主要通過輔助診斷方法進(jìn)行監(jiān)測。乳房炎的發(fā)病率非常高，尤其隱性乳房炎，養(yǎng)牛場要隨時(shí)監(jiān)測，及時(shí)作出診斷，以便整群預(yù)防。根據(jù)奶牛患乳房炎有乳汁中細(xì)胞增多的特征而建立了直接檢測法和間接檢測法。直接檢測法主要有體細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法、電子計(jì)數(shù)法、熒光電子細(xì)胞計(jì)數(shù)法等，在國內(nèi)目前最常采用的為體細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法。病理學(xué)研究證實(shí)，乳房感染發(fā)炎后，大量白細(xì)胞進(jìn)入乳腺，部分上皮細(xì)胞脫落，使乳汁中體細(xì)胞數(shù)顯著升高。根據(jù)這一原理，計(jì)算每毫升乳汁中的體細(xì)胞數(shù)，此法檢測結(jié)果最為準(zhǔn)確，這是診斷隱性乳房炎的基準(zhǔn)，也是其他診斷方法作對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)。間接法是目前臨床上最常用的方法，其分為化學(xué)檢測法和物理檢測法，其中目前在臨床上以化學(xué)檢測法最為常用?；瘜W(xué)檢測法是間接測定乳汁細(xì)胞數(shù)和乳汁pH值的方法。房炎發(fā)生時(shí)，乳汁的pH值上升，通過測定乳汁pH值便可以達(dá)到判定的目的。但這些檢測方法均需要專門的檢測儀器，操作復(fù)雜，對(duì)操作人員要求高。因此，需要提供一種操作簡單、快速準(zhǔn)確的奶牛乳房炎檢測方法。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明提供了一種奶牛乳房炎檢測試劑盒。該奶牛乳房炎檢測試劑盒可快速準(zhǔn)確檢測奶牛乳房炎，不需要借助特殊儀器，肉眼就可以直接判斷結(jié)果，技術(shù)人員很容易掌握，同時(shí)可以批量檢測。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：本發(fā)明提供了一種奶牛乳房炎檢測試劑盒，包括：革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基、革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基和腸球菌金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基；革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基包括第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第一牛肉粉基；第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基為法國科瑪嘉革蘭氏陰性菌培養(yǎng)基；革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基包括第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基、第二牛肉粉和氯化鈉；第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基為法國科瑪嘉革蘭氏陽性菌培養(yǎng)基；腸球菌金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基包括腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基和金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基。作為優(yōu)選，革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基中，第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度為10～20g/L，第一牛肉粉的濃度為2～4g/L；革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基中，第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度為10～20g/L，第二牛肉粉的濃度為1～3g/L，氯化鈉的濃度為1～2g/L。優(yōu)選地，革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基中，第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度為15g/L，第一牛肉粉的濃度為3g/L；革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基中，第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度為15g/L，第二牛肉粉的濃度為2g/L，氯化鈉的濃度為1.5g/L。作為優(yōu)選，革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基的pH值為7.0±0.2。作為優(yōu)選，革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基的pH值為6.9±0.2。作為優(yōu)選，腸球菌金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基的pH值為7.0±0.2。在本發(fā)明提供的實(shí)施例中，以重量份計(jì)，第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基中：瓊脂15份，蛋白胨7份，酵母粉10份，色素1.2份。在本發(fā)明提供的實(shí)施例中，以重量份計(jì)，第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基中：瓊脂15份，蛋白胨8份，酵母粉12份，鹽類5份，色素4.4份，增補(bǔ)劑2.0份。在本發(fā)明提供的實(shí)施例中，以重量份計(jì)，腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括：營養(yǎng)物質(zhì)40.1份，吐溫801份，顯色劑0.25份，瓊脂15份。該培養(yǎng)基購買于青島海博生物腸球菌顯色培養(yǎng)基。在本發(fā)明提供的實(shí)施例中，以重量份計(jì)，金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括：營養(yǎng)物質(zhì)25份，吐溫801份，顯色物質(zhì)40.3份，瓊脂15份，抑菌成分6份。該培養(yǎng)基購買于青島海博生物腸球菌顯色培養(yǎng)基。作為優(yōu)選，腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基與金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基的質(zhì)量比為(10～15)：(1～5)。優(yōu)選地，腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基與金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基的質(zhì)量比為(11～12)：(4～5)。作為優(yōu)選，奶牛乳房炎檢測試劑盒還包括三分格培養(yǎng)皿。本發(fā)明提供了一種奶牛乳房炎檢測試劑盒。該奶牛乳房炎檢測試劑盒包括：革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基、革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基和腸球菌金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基；革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基包括第一基礎(chǔ)培養(yǎng)基和第一牛肉粉基；革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基包括第二基礎(chǔ)培養(yǎng)基、第二牛肉粉和氯化鈉；腸球菌金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基包括腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基和金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基。本發(fā)明具有如下有益效果：1、本發(fā)明提供的奶牛乳房炎檢測試劑盒可快速準(zhǔn)確檢測隱性型奶牛乳房炎，不需要借助特殊儀器，肉眼就可以直接判斷結(jié)果，技術(shù)人員很容易掌握，操作簡便，18h～24h內(nèi)可出結(jié)果，同時(shí)可以批量檢測，成本低；2、本發(fā)明提供的奶牛乳房炎檢測試劑盒中，革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基和革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基經(jīng)過改良后，可顯著促進(jìn)細(xì)菌的生長，可縮短檢測時(shí)間；3、腸球菌金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基中，腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基與金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基按特定比例組合后，可同時(shí)檢測腸球菌和金黃色葡萄球菌。附圖說明圖1示本發(fā)明制備的包括乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基、乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基和腸球菌金黃色葡萄球共顯色培養(yǎng)基的三分格培養(yǎng)皿；圖2示采用本發(fā)明培養(yǎng)基對(duì)奶牛乳房炎的病菌檢測結(jié)果；圖3示采用本發(fā)明培養(yǎng)基檢測飛鶴乳液牧場采集的乳液的檢測結(jié)果；圖4示本發(fā)明革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基與改良前的檢測效果的比較；圖5示本發(fā)明革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基與改良前的檢測效果的比較；圖6示本發(fā)明腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基的檢測效果。具體實(shí)施方式本發(fā)明公開了一種奶牛乳房炎檢測試劑盒，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。術(shù)語解釋：1、奶牛乳房炎奶牛乳房在產(chǎn)乳過程中受到機(jī)械性刺激、病原微生物浸入及化學(xué)物理性損傷所引起的乳房病理變化，分為漿液性乳房炎、纖維素性卡他乳房炎、化膿性乳房炎、出血性乳房炎、壞疽性乳房炎和隱性乳房炎。2、病原體感染由寄生蟲或微生物引起的感染，目前為止，人們已從奶牛乳腺組織中分離出了150種病原微生物，最常見的有23種，其中細(xì)菌14種，支原體2種，真菌和病毒7種。其中發(fā)病率最高的是金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌，近年來支原體、真菌引起的乳房炎發(fā)病率逐年上升。3、微生物培養(yǎng)基供微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。一般，在液體培養(yǎng)基加入瓊脂來制得瓊脂固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基有不同的配方一般都含有碳源、氮源和無機(jī)鹽。本發(fā)明提供的奶牛乳房炎檢測試劑盒中所用培養(yǎng)基原料均可由市場購得。下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：實(shí)施例11.乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基配制本發(fā)明改良后的革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基配方為：15g/L基礎(chǔ)培養(yǎng)基+3g/L牛肉粉。其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基：瓊脂15.0g/L，蛋白胨7g/L，酵母粉10g/L，色素1.2g/L，pH值7.0±0.2，購買于法國科瑪嘉革蘭氏陰性菌培養(yǎng)基。制備方法如下：(1)按上述配方稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基和牛肉粉，溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中。也可根據(jù)需要按照比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。(2)加熱至100℃，不停攪拌，使其完全溶解。切勿加熱超過100℃。若使用微波爐加熱，應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀荩敝镣耆芙饧纯?。切勿使培養(yǎng)基溢出。(3)將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至45℃～50℃，輕輕混勻，傾注平皿，使其凝固，晾干備用。2.乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基配制本發(fā)明改良后的革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基配方為：15g/L基礎(chǔ)培養(yǎng)基+2g/L牛肉粉+1.5g/L氯化鈉。其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基：瓊脂15.0g/L，蛋白胨8g/L和酵母粉12g/L，鹽類5.0g/L，色素4.4g/L；增補(bǔ)劑：2.0g/L；pH值6.9±0.2，購買于法國科瑪嘉革蘭氏陽性菌培養(yǎng)基。制備方法如下：(1)按上述配方稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基、牛肉粉和氯化鈉，溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中，充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。(2)加熱至100℃，不停攪拌，使其完全溶解。切勿加熱超過100℃。若使用微波爐加熱，應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?，直至完全溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。(3)將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至45℃～50℃，輕輕混勻，傾注平皿，使其凝固，晾干備用。3.腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基配制(1)腸球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基：營養(yǎng)物質(zhì)40.1g/L；吐溫801.0g/L；顯色劑0.25g/L；瓊脂15.0g/L；pH值7.0±0.2，購買于青島海博生物腸球菌顯色培養(yǎng)基。(2)金黃色葡萄球菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基：營養(yǎng)物質(zhì)25g/L；吐溫801.0g/L；顯色物質(zhì)40.3g/L；瓊脂15.0g/L；抑菌成分6.0g/L；pH值7.0±0.2，購買于青島海博生物腸球菌顯色培養(yǎng)基。(3)腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基配制：250mL培養(yǎng)基：腸球菌培養(yǎng)基11.28g+4.315金黃色葡萄培養(yǎng)基。(2)稱取培養(yǎng)基，水浴加熱溶解于250mL蒸餾水，冷至45-50℃時(shí)，傾入無菌平皿，備用。4.制備奶牛乳房炎檢測培養(yǎng)皿將乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基、乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基和腸球菌金黃色葡萄球共顯色培養(yǎng)基分別倒在90mm的三分格培養(yǎng)皿中，并且標(biāo)記(圖1)。將制備好的檢測皿用封口膜封好，避光低溫保存(4-8℃)。5.奶牛乳房炎檢測步驟(1)用無菌采乳杯子采集乳液；(2)用無菌棉花棒將乳液均勻涂在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基上；(3)倒扣培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)24小時(shí)；(4)菌種判斷(參照表1)。表1不同區(qū)菌種判斷顏色1區(qū)菌種顏色大腸桿菌紅色克雷伯氏菌深藍(lán)色變形桿菌棕色暈環(huán)假單胞菌奶油狀，半透明白色念珠菌白色，不透明，小菌落2區(qū)菌種顏色無乳鏈球菌藍(lán)綠色乳房鏈球菌深藍(lán)色金黃色葡萄球菌淡紫色帶有淡紫色暈環(huán)3區(qū)菌種顏色腸球菌紅色至紫色菌落金黃色葡萄球菌淡藍(lán)色至藍(lán)色(5)圖2為檢測結(jié)果。通過本方法檢測到6種引起奶牛乳房炎的病菌。分別是大腸桿菌(紅色)、克雷伯氏菌(深藍(lán))、變形桿菌(棕色暈環(huán))、無乳鏈球菌(藍(lán)綠)、乳房鏈球菌(深藍(lán))、腸球菌(紫色)。(6)本方法與體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較從飛鶴乳液牧場采集乳液進(jìn)行檢測。試驗(yàn)結(jié)果如下：體細(xì)胞檢測儀顯示奶液中細(xì)胞數(shù)量為60萬個(gè)/mL，奶牛有乳房炎感染。本方法檢測，經(jīng)過乳液涂板，培養(yǎng)，檢測到細(xì)菌4種(圖3)?？死撞暇?深藍(lán))、無乳鏈球菌(藍(lán)綠)、乳房鏈球菌(深藍(lán))、腸球菌(紫色)。通過比較發(fā)現(xiàn)，本方法能簡便、快捷的檢測出奶牛乳房炎引起的致病菌類型，為精確治療乳房炎奠定了基礎(chǔ)。(7)本方法革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基與改良前比較將采集新鮮牛奶均勻涂在兩種培養(yǎng)板上，倒置于37℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24小時(shí)。一種培養(yǎng)板采用改良前的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(瓊脂15.0g/L，蛋白胨和酵母粉17.0g/L，色素1.2g/L，pH值7.0±0.2)，另一種培養(yǎng)板采用本發(fā)明改良后的革蘭氏陰性菌培養(yǎng)基。試驗(yàn)結(jié)果見圖4、表2。通過上述試驗(yàn)結(jié)果可以看出，革蘭氏陰性菌區(qū)域改良后，紅色大腸桿菌生長明顯。表2改良前后革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基的比較(8)本方法革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基與改良前比較將采集新鮮牛奶均勻涂在兩種培養(yǎng)板上，倒置于37℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24小時(shí)。一種培養(yǎng)板采用改良前的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(瓊脂15.0g/L，蛋白胨和酵母粉20.0g/L，鹽類5.0g/L，色素4.4g/L；增補(bǔ)劑：2.0g/L；pH值6.9±0.2)，另一種培養(yǎng)板采用本發(fā)明改良后的革蘭氏陽性菌培養(yǎng)基。試驗(yàn)結(jié)果見圖5、表3。通過上述試驗(yàn)結(jié)果可以看出，革蘭氏陽性菌區(qū)域改良后，淡紫色金色葡萄球菌生長明顯。表3改良前后革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基的比較(9)腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基的檢測效果將采集新鮮牛奶均勻涂在培養(yǎng)板(本發(fā)明腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基)上，倒置于37℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24小時(shí)。試驗(yàn)結(jié)果如圖6。由圖6可以看出，本發(fā)明腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基可同時(shí)檢測腸球菌和金黃色葡萄球菌，其中，淡紫色菌落為腸球菌，淡藍(lán)色或藍(lán)色菌落為金黃色葡萄球菌。注意事項(xiàng)：保證涂板使用棉花棒為無菌。請?jiān)诠饩€明亮地方判斷菌落顏色。請將產(chǎn)品低溫(4℃)避光保存。實(shí)施例21.乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基配制本發(fā)明改良后的革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基配方為：10g/L基礎(chǔ)培養(yǎng)基+4g/L牛肉粉。其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基與實(shí)施例1革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基相同。制備方法同實(shí)施例1。2.乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基配制本發(fā)明改良后的革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基配方為：10g/L基礎(chǔ)培養(yǎng)基+3g/L牛肉粉+1g/L氯化鈉。其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基與實(shí)施例1革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基相同。制備方法同實(shí)施例1。3.腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基配制配方與制備方法同實(shí)施例1。4.制備奶牛乳房炎檢測培養(yǎng)皿將乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基、乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基和腸球菌金黃色葡萄球共顯色培養(yǎng)基分別倒在90mm的三分格培養(yǎng)皿中，并且標(biāo)記。將制備好的檢測皿用封口膜封好，避光低溫保存(4-8℃)。5.奶牛乳房炎檢測步驟(1)用無菌采乳杯子采集乳液；(2)用無菌棉花棒將乳液均勻涂在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基上；(3)倒扣培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)24小時(shí)；(4)菌種判斷(參照表1)。(5)試驗(yàn)結(jié)果見表4、5。表4本發(fā)明革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基檢測結(jié)果表5本發(fā)明革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基檢測結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果顯示，本實(shí)施例革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基上紅色大腸桿菌生長明顯，本實(shí)施例革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基上淡紫色金色葡萄球菌生長明顯。實(shí)施例31.乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基配制本發(fā)明改良后的革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基配方為：20g/L基礎(chǔ)培養(yǎng)基+2g/L牛肉粉。其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基與實(shí)施例1革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基相同。制備方法同實(shí)施例1。2.乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基配制本發(fā)明改良后的革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基配方為：20g/L基礎(chǔ)培養(yǎng)基+1g/L牛肉粉+2g/L氯化鈉。其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基與實(shí)施例1革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基相同。制備方法同實(shí)施例1。3.腸球菌和金色葡萄球菌共顯色培養(yǎng)基配制配方與制備方法同實(shí)施例1。4.制備奶牛乳房炎檢測培養(yǎng)皿將乳腺炎革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基、乳腺炎革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基和腸球菌金黃色葡萄球共顯色培養(yǎng)基分別倒在90mm的三分格培養(yǎng)皿中，并且標(biāo)記。將制備好的檢測皿用封口膜封好，避光低溫保存(4-8℃)。5.奶牛乳房炎檢測步驟(1)用無菌采乳杯子采集乳液；(2)用無菌棉花棒將乳液均勻涂在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基上；(3)倒扣培養(yǎng)皿，37℃培養(yǎng)24小時(shí)；(4)菌種判斷(參照表1)。(5)試驗(yàn)結(jié)果見表6、7。表6本發(fā)明革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基檢測結(jié)果表7本發(fā)明革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基檢測結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果顯示，本實(shí)施例革蘭氏陰性菌顯色培養(yǎng)基上紅色大腸桿菌生長明顯，本實(shí)施例革蘭氏陽性菌顯色培養(yǎng)基上淡紫色金色葡萄球菌生長明顯。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3