本發(fā)明涉及生物實(shí)驗(yàn)工具技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)標(biāo)尺劃痕裝置。

背景技術(shù)：

傷口愈合實(shí)驗(yàn)是體外研究細(xì)胞遷移的一個(gè)常用的實(shí)驗(yàn)。原理是人為的在鋪板的單層細(xì)胞中制造一個(gè)空白的無細(xì)胞的地帶，然后對(duì)這個(gè)無細(xì)胞地帶邊緣細(xì)胞進(jìn)行觀察；這些邊緣的細(xì)胞會(huì)開始進(jìn)行遷移活動(dòng)，并且最終覆蓋整個(gè)無細(xì)胞的區(qū)域，重新互相融合在一起。

傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法

細(xì)胞在培養(yǎng)皿內(nèi)貼壁后，使用移液槍的槍頭在貼壁細(xì)胞的中間劃過，人為造成一道傷口(劃痕)，之后定時(shí)測(cè)量劃痕的寬度，進(jìn)而得到傷口愈合的細(xì)胞遷移數(shù)據(jù)。這種方式存在的缺點(diǎn)：不能保證每次劃痕的一致性，傳統(tǒng)的傷口愈合方法總是重復(fù)性不佳，且劃痕的形狀多為鋸齒狀，不規(guī)整。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在提供用于創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)標(biāo)尺劃痕裝置，能夠保證每次劃痕的一致性，提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種用于創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)標(biāo)尺劃痕裝置，包括條形的劃痕導(dǎo)向塊，所述劃痕導(dǎo)向塊具有貫穿其頂面和底面的導(dǎo)向槽，所述導(dǎo)向槽的導(dǎo)向面為豎直平面；所述劃痕導(dǎo)向塊長(zhǎng)邊的外側(cè)壁上安裝有支撐臂，所述支撐臂與劃痕導(dǎo)向塊的底面之間留有間隙，所述支撐臂與水平方向平行；支撐臂有兩個(gè)，兩個(gè)支撐臂在一條直線上。

進(jìn)一步的，所述劃痕導(dǎo)向塊包括2個(gè)導(dǎo)向板，2個(gè)導(dǎo)向板正對(duì)，2個(gè)導(dǎo)向板相對(duì)的兩端通過連接部固接。

進(jìn)一步的，所述支撐臂與劃痕導(dǎo)向塊的側(cè)壁相互垂直。

進(jìn)一步的，所述支撐臂設(shè)于劃痕導(dǎo)向塊側(cè)壁的中心，兩個(gè)支撐臂自由端端面之間的距離與劃痕導(dǎo)向塊的長(zhǎng)度相同。

進(jìn)一步的，所述連接部為粘膠。

進(jìn)一步的，所述連接部為板狀，連接部的高度與導(dǎo)向板的高度相同，連接部的底面與導(dǎo)向板的底面齊平。

進(jìn)一步的，還包括培養(yǎng)板，所述培養(yǎng)板上有培養(yǎng)孔，所述培養(yǎng)孔的內(nèi)徑與劃痕導(dǎo)向塊的長(zhǎng)度相等。

進(jìn)一步的，還包括劃痕器，所述劃痕器為條形板狀，劃痕器的厚度小于導(dǎo)向槽的寬度，劃痕器的長(zhǎng)度大于導(dǎo)向槽的深度。

進(jìn)一步的，所述導(dǎo)向槽的寬度為1.8mm～2.2mm。

進(jìn)一步的，所述劃痕導(dǎo)向塊長(zhǎng)度為34.6mm～35mm；所述導(dǎo)向槽側(cè)壁的厚度為1～1.2mm。

進(jìn)一步的，所述連接部為粘膠。

進(jìn)一步的，所述導(dǎo)向槽的寬度為2mm，所述劃痕導(dǎo)向塊側(cè)壁的厚度為1.1mm。劃痕器厚度為1.85mm，劃痕器長(zhǎng)度為48mm。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

1.本發(fā)明利用導(dǎo)向槽能夠保證每次劃痕的一致性，提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性；

2.導(dǎo)向槽搭配劃痕器，能夠保證劃痕邊緣的筆直和規(guī)整，不產(chǎn)生鋸齒狀；

3.傳統(tǒng)方法劃細(xì)胞的同時(shí)容易刮壞一片細(xì)胞，對(duì)劃痕的邊緣細(xì)胞造成機(jī)械損傷；本發(fā)明的劃痕導(dǎo)向塊對(duì)被劃和其他正常細(xì)胞的阻擋隔絕作用，在進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)時(shí)，不會(huì)連帶起劃痕邊緣細(xì)胞，造成邊緣細(xì)胞機(jī)械損傷。

附圖說明

圖1是實(shí)施例1的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2是實(shí)施例2的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖3是培養(yǎng)板的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖4是劃痕導(dǎo)向塊放在培養(yǎng)板中的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖5是劃痕器的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖6a：使用本發(fā)明的創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果效果圖；

圖6b：使用移液槍的創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果效果圖；

圖7a：使用本發(fā)明的創(chuàng)傷愈合細(xì)胞劃痕圖；

圖7b：使用移液槍的創(chuàng)傷愈合細(xì)胞劃痕圖；

圖中：1-劃痕導(dǎo)向塊、2-導(dǎo)向槽、3-支撐臂、4-培養(yǎng)板、5-培養(yǎng)孔、6-劃痕器、11-導(dǎo)向板、12-連接部。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

如圖1所示，本實(shí)施例公開的用于創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)標(biāo)尺劃痕裝置，包括條形的劃痕導(dǎo)向塊1，劃痕導(dǎo)向塊1具有貫穿其頂面和底面的導(dǎo)向槽2，導(dǎo)向槽2的導(dǎo)向面為豎直平面。作為優(yōu)選，導(dǎo)向槽2為矩形通槽。

本實(shí)施例還公開與劃痕導(dǎo)向塊1配套使用的培養(yǎng)板4和劃痕器6，培養(yǎng)板4上有培養(yǎng)孔5，培養(yǎng)孔5的內(nèi)徑與劃痕導(dǎo)向塊1的長(zhǎng)度相等。劃痕器6為條形板狀，劃痕器6的厚度小于導(dǎo)向槽2的寬度，劃痕器6的長(zhǎng)度大于導(dǎo)向槽2的深度。當(dāng)然也可以用6孔板代替本發(fā)明的培養(yǎng)板4。劃痕器6的末端為平整的光滑面，便于劃痕。導(dǎo)向槽搭配劃痕器，能夠保證劃痕邊緣的筆直和規(guī)整，不產(chǎn)生鋸齒狀。

現(xiàn)以傳統(tǒng)6孔板為例對(duì)本發(fā)明的使用方法進(jìn)行說明：

1.先用記號(hào)筆在6孔板背后，用直尺均勻地劃出十字形標(biāo)記；

2.等量接種約6×105W細(xì)胞于培養(yǎng)板具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，培養(yǎng)24h后，細(xì)胞數(shù)量占據(jù)孔板90％以上；

3.將6孔板放入37℃，5％CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)至細(xì)胞單層融合；

4.將劃痕導(dǎo)向塊1水平卡在6孔板的培養(yǎng)孔中，即選擇的劃痕導(dǎo)向塊1的長(zhǎng)度應(yīng)與培養(yǎng)孔的直徑相等；

5.使用劃痕器沿導(dǎo)向槽在細(xì)胞層垂直劃痕，建立體外細(xì)胞創(chuàng)傷模型。

為了防止在劃痕過程中，劃痕導(dǎo)向塊1在培養(yǎng)孔中打轉(zhuǎn)，所以本實(shí)施例在劃痕導(dǎo)向塊1長(zhǎng)邊的外側(cè)壁上安裝有支撐臂3，支撐臂3與劃痕導(dǎo)向塊1的底面之間留有間隙，支撐臂3與水平方向平行；支撐臂3有兩個(gè)，兩個(gè)支撐臂3在一條直線上。支撐臂3設(shè)于劃痕導(dǎo)向塊1側(cè)壁的中心，兩個(gè)支撐臂3自由端端面之間的距離與劃痕導(dǎo)向塊1的長(zhǎng)度相同。支撐臂3與劃痕導(dǎo)向塊1的側(cè)壁相互垂直。

進(jìn)一步的，導(dǎo)向槽2的寬度為1.8mm～2.2mm，導(dǎo)向槽2的高度16mm～18mm。劃痕器6厚度為1.85mm，劃痕器6長(zhǎng)度為48mm。劃痕導(dǎo)向塊1長(zhǎng)度為34.6mm～35mm；導(dǎo)向槽2側(cè)壁的厚度為1～1.2mm。作為優(yōu)選導(dǎo)向槽2的寬度為2mm，劃痕導(dǎo)向塊1側(cè)壁的厚度為1.1mm，支撐臂3的長(zhǎng)度為15.3mm。

將本發(fā)明用于實(shí)際創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)標(biāo)尺劃痕操作，與使用移液槍劃痕的常規(guī)操作進(jìn)行對(duì)比，對(duì)比數(shù)據(jù)結(jié)果如圖6所示。同時(shí)，在得到的劃痕性狀也有較大差別，如圖7所示，傳統(tǒng)方法進(jìn)行創(chuàng)傷愈合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)得到的劃痕的寬度不一，與之對(duì)比，使用本發(fā)明得到的劃痕寬度距離具有穩(wěn)定的重現(xiàn)性，而且劃痕邊緣筆直且規(guī)整。

實(shí)施例2

本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于：劃痕導(dǎo)向塊1包括2個(gè)導(dǎo)向板11，2個(gè)導(dǎo)向板11正對(duì)，2個(gè)導(dǎo)向板11相對(duì)的兩端通過連接部12固接。本實(shí)施例中，連接部12為板狀，連接部12的高度與導(dǎo)向板11的高度相同，連接部12的底面與導(dǎo)向板11的底面齊平。

作為優(yōu)選，劃痕導(dǎo)向塊1一體制造。為了減少人為因素的影響，連接部12的高度與導(dǎo)向板11的高度相同，連接部12的底面與導(dǎo)向板11的底面齊平，以保證每次劃出來的長(zhǎng)度就是相同的。導(dǎo)向板11長(zhǎng)度為34.6mm～35mm；導(dǎo)向板11的厚度為1～1.2mm，兩個(gè)導(dǎo)向板11間隔距離為1.8mm～2.2mm，導(dǎo)向板11高度16mm～18mm。作為優(yōu)選兩個(gè)導(dǎo)向板11間隔距離為2mm，導(dǎo)向板11的厚度為1.1mm。導(dǎo)向板11的材質(zhì)為石英，連接部12的材質(zhì)也為石英。連接部12的厚度與導(dǎo)向板11的厚度相同，利用設(shè)計(jì)模型兩塊玻璃板之間的距離以及用于劃痕的配套小工具的固定寬度。

實(shí)施例3

本實(shí)施例與實(shí)施例2的區(qū)別在于：劃痕導(dǎo)向塊1不是一體制造，而是通過粘膠將兩個(gè)導(dǎo)向板11連接，即連接部12為粘膠。

本發(fā)明利用導(dǎo)向槽能夠保證每次劃痕的一致性，提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。

當(dāng)然，本發(fā)明還可有其它多種實(shí)施方式，在不背離本發(fā)明精神及其實(shí)質(zhì)的情況下，熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員可根據(jù)本發(fā)明作出各種相應(yīng)的改變和變形，但這些相應(yīng)的改變和變形都應(yīng)屬于本發(fā)明所附的權(quán)利要求的保護(hù)范圍。