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MERS?CoV特異性多肽及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):11124280閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種MERS-CoV特異性多肽,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;或如SEQ ID NO.2所示,或如SEQ ID NO.3所示。

2.權(quán)利要求1所述特異性多肽的衍生物,其特征在于,在權(quán)利要求1所述多肽的氨基酸序列上取代、或缺失,或添加一個(gè)或幾個(gè)氨基酸,且具有與權(quán)利要求1所述多肽相同抗原性的多肽衍生物。

3.一種多肽-MHC四聚體,其特征在于,由生物素化的MHC-I與權(quán)利要求1所述特異性多肽結(jié)合,或由生物素化的MHC-I與權(quán)利要求2所述特異性多肽衍生物結(jié)合。

4.權(quán)利要求3所述多肽-MHC四聚體的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)用大腸桿菌表達(dá)MHC輕鏈和MHC重鏈;(2)稀釋復(fù)性,制備多肽/MHC復(fù)合物;(3)制備生物素化的多肽/MHC復(fù)合物;(4)生物素化的多肽/MHC復(fù)合物與帶標(biāo)記的鏈親和素反應(yīng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述MHC重鏈C端連接生物素。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述步驟(3)是在BirA酶的催化下,將多肽/MHC復(fù)合物與D-biotin結(jié)合。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述步驟(4)是按照摩爾比5:1的比例將生物素化的多肽/MHC復(fù)合物與帶標(biāo)記的鏈親和素反應(yīng)。

8.一種疫苗,其特征在于,活性成分含有權(quán)利要求1所述的多肽和/或權(quán)利要求2所述的多肽衍生物。

9.MERS-CoV特異性細(xì)胞免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,含有權(quán)利要求1所述的多肽和/或權(quán)利要求2所述的多肽衍生物。

10.權(quán)利要求3所述多肽-MHC四聚體在T細(xì)胞免疫評(píng)價(jià),對(duì)MERS-CoV感染或疫苗接種后生物體組織切片的原位染色,特異性T細(xì)胞的分離與克隆,分離特異性TCR、作為T(mén)細(xì)胞激活試劑中的應(yīng)用。

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