本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物制備工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體的說，是采用枸杞根部提取甜菜堿的制備方法。

背景技術(shù)：

地骨皮，別名：枸杞皮，為茄科、枸杞屬植物，是枸杞Lycium chinense Mill.的根皮。可入藥，具有退熱除蒸之效，涼血除蒸、清肺降火等功效。

枸杞植株，多分枝灌木，高0.5-1米，栽培時可達(dá)2米多；枝條細(xì)弱，弓狀彎曲或俯垂，淡灰色，有縱條紋，棘刺長0.5-2厘米，生葉和花的棘刺較長，小枝頂端銳尖成棘刺狀。葉紙質(zhì)或栽培者質(zhì)稍厚，單葉互生或2-4枚簇生，卵形、卵狀菱形、長橢圓形、卵狀披針形，頂端急尖，基部楔形，長1.5-5厘米，寬0.5-2.5厘米，栽培者較大，可長達(dá)10厘米以上，寬達(dá)4厘米；葉柄長0.4-1厘米。

花在長枝上單生或雙生于葉腋，在短枝上則同葉簇生；花梗長1-2厘米，向頂端漸增粗?；ㄝ嚅L3-4毫米，通常3中裂或4-5齒裂，裂片多少有緣毛；花冠漏斗狀，長9-12毫米，淡紫色，筒部向上驟然擴(kuò)大，稍短于或近等于檐部裂片，5深裂，裂片卵形，頂端圓鈍，平展或稍向外反曲，邊緣有緣毛，基部耳顯著；雄蕊較花冠稍短，或因花冠裂片外展而伸出花冠，花絲在近基部處密生一圈絨毛并交織成橢圓狀的毛叢，與毛叢等高處的花冠筒內(nèi)壁亦密生一環(huán)絨毛；花柱稍伸出雄蕊，上端弓彎，柱頭綠色。

漿果紅色，卵狀，栽培者可成長矩圓狀或長橢圓狀，頂端尖或鈍，長7-15毫米，栽培者長可達(dá)2.2厘米，直徑5-8毫米。種子扁腎臟形，長2.5-3毫米，黃色。花果期6-11月。

枸杞根皮含桂皮酸（Cinnamic acid）和多量酚類物質(zhì)、甜菜堿（Betaine）．尚分離得柯堿A（地骨皮甲素，Kukoamine A）、枸杞素A （Lyciumin A）、枸杞素B（Lyciumin B）、β-谷甾醇（β-Sitosterol）、亞油酸（Linoleic acid）、亞麻酸（Linolenic acid）、卅一酸等。

枸杞根皮含生物堿：甜菜堿（betaine)，苦可胺（kukoamine)A及用于免疫調(diào)節(jié)，劑，殺病毒劑，腫瘤抑制劑等的1，2，3，4，7，-五羥基-6-氮雜雙環(huán)[3。3。0]辛烷（1，2，3，4，7-pen-tahydroxy-6nitro-bicycol[3,3,0]-octane)和1，4，7，8-四羥基-6-氮雜雙環(huán)[3，3，0]辛烷（1，4，7，8-tetrahydroxy-6-nitrobicycol[3,3,0]-octane)。又含抗腎素作用兼抗血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)變酶活性作用的枸杞環(huán)八肽（lyciumin)A和B。還含具抗血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)變酶活性作用的有機(jī)酸：（S）-9-羥基-10E，12Z-十八碳二烯酸[（S）-9-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic acid]和（S）9-羥基10E，12Z，15Z-十八碳三烯酸[（S）-9-hydroxy-10E,12Z,15Z-octadecatrienoic acid]。尚含枸杞酰胺（lyciumamide)即是乙酸橙黃胡椒酰胺酯（aurantiamideacetae)，亞油酸（linoleic acid)。亞麻酸（linollenic acid)，蜂花酸（melissic acid)，桂皮酸（cinnamic acid），柳杉酚（sugiol)，5α-豆甾烷-3，6-二酮（5α-stig-mastane-3,6-dine)，東莨菪素（scopoletin)，β-谷甾醇葡萄糖甙（β-sitosterol glucoside)，東莨菪素（scopoletin),β-谷甾醇葡萄糖甙（β-sitoserol glucosde)等。根含以正二十三烷（n-tricosane)和正三十三烷（n-trtriaconetane)為主的具15-33個碳原子的正烷烴；具18-31個碳原子的長鏈醇；膽甾醇（cholesterol),菜油甾醇（campesterol)，豆甾醇（stigmasterol)，谷甾醇（sitosterol)以及硬脂酸（steraric acid)，棕櫚酸（palmitic acid)，油酸（oleic acid)。

同屬植物寧古枸杞根含生物堿：阿托品（atropine)和天仙子胺（hyoscyamine)。

甜菜堿是一種生物堿，具有強(qiáng)烈的吸濕性能，所以在制作工藝中經(jīng)常會使用抗結(jié)塊劑處理，其分子結(jié)構(gòu)、應(yīng)用效果與天然甜菜堿無明顯差別，屬于化學(xué)合成的天然物等同物；別名Glycine betaine,Glycocoll betaine,Lycine,Oxyneuyine 甜菜素，三甲銨乙內(nèi)酯，甘氨酸三甲胺內(nèi)鹽Carboxymethyl)trimethylammonium inner salt、Oxyneurine。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供采用枸杞根部提取甜菜堿的制備方法，將枸杞植株的根部作為原材料，采用浸提、吸附、洗脫、濃縮等技術(shù)相結(jié)合的方式進(jìn)行甜菜堿的制備，具有成本低廉、提取效率高等特點(diǎn)。

本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：采用枸杞根部提取甜菜堿的制備方法，包括以下步驟：

1）將野生枸杞植株的根部洗凈，陽光下暴曬1~2h后，自然通風(fēng)條件下陰干，得含水量為0.1~0.2%的枸杞根干樣；

2）將枸杞根干樣切塊并粉碎，過80~280目篩，得到枸杞根粉；

3）采用浸提、吸附、洗脫、濃縮技術(shù)對枸杞葉粉進(jìn)行枸杞根甜菜堿的制備，得枸杞根甜菜堿濃縮液；

4）將枸杞根甜菜堿濃縮液真空干燥得甜菜堿粉末。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述眼光下暴曬1~2h為在夏季有陽光的天氣里，且為每天的12:00~16:00時間區(qū)間內(nèi)。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟3）包括以下具體步驟：

3-1）將枸杞根粉與去離子水按1：20~80的料液質(zhì)量體積比混合，在功率為100w~600w的條件下進(jìn)行微波提取，1~4h后過濾即得浸提液；

3-2）將浸提液在20~180MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)，經(jīng)離心分離，得到上清液和濾渣；

3-3）將上清液以2~8t/h的流速經(jīng)孔徑為0.05~5μm的陶瓷膜在溫度為30~45℃、壓力為0.2~2MPa的條件下除雜，得到過濾液；

3-4）將過濾液經(jīng)中性大孔吸附樹脂或弱堿性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用10~40倍床層體積的乙醇-水-醋酸溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞根甜菜堿，得到含有枸杞根甜菜堿的洗脫液；所述乙醇-水-醋酸溶液中乙醇、水、醋酸三者之間的體積比為7~9：1~4：1~2.5；

3-5）將所述含有枸杞根甜菜堿的洗脫液經(jīng)真空減壓濃縮后，得到枸杞根甜菜堿濃縮液。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述浸提液或采用下述制備方法制備：將枸杞根粉與質(zhì)量濃度為40~89.50％的甲醇按1∶40~90的料液體積比浸提30~240h后既得。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述浸提液或采用下述制備方法制備：將枸杞根粉與質(zhì)量濃度為40~89.50％的乙醇按1∶20~80的料液體積比在37.5~60℃溫度下進(jìn)行水浴加熱，經(jīng)回流提取8~48h后過濾即得。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述浸提液或采用下述制備方法制備：將枸杞根粉與質(zhì)量濃度為40~89.50％的乙醇按1∶20~80的料液體積比在37.5~50℃溫度下進(jìn)行超聲提取，12~42h后過濾即得。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟3-2）中離心分離時的離心速度為10000~11000r/min，離心時間為4~8min。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟3-5）中的真空減壓濃縮的條件是真空度為0.012~0.020MPa，溫度為37.8~40℃。

進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟4）中的真空干燥的條件是真空度為0.01~0.1MPa，干燥溫度為80~100℃。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果：

本發(fā)明將枸杞植株的根部作為原材料，采用浸提、吸附、洗脫、濃縮等技術(shù)相結(jié)合的方式進(jìn)行甜菜堿的制備，具有成本低廉、提取效率高等特點(diǎn)。

本發(fā)明采用陶瓷膜分離技術(shù)，不但有效去除上清液中的鞣質(zhì)、粘液質(zhì)、細(xì)菌等雜質(zhì)，而且有效地降低了設(shè)備投資，降低了能耗，同時也使工藝簡單化。

本發(fā)明使用高壓均質(zhì)機(jī)，不但保證了枸杞根部的有效成分的均一、性質(zhì)穩(wěn)定，可以顯著地縮短提取時間和提高提取率。

本發(fā)明儀器設(shè)備操作簡便，技術(shù)參數(shù)易于控制，適應(yīng)范圍廣，可用于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，形成生物產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)鏈。

本發(fā)明所得的枸杞根甜菜堿提取物為棕褐色粉末，有甜味，得率≥30％，經(jīng)高效液相色譜檢測，其中甜菜堿含量≥20％。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)說明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。

實(shí)施例1：

采用枸杞根部提取甜菜堿的制備方法，將枸杞植株的根部作為原材料，采用浸提、吸附、洗脫、濃縮等技術(shù)相結(jié)合的方式進(jìn)行甜菜堿的制備，具有成本低廉、提取效率高等特點(diǎn)，特別采用下述設(shè)置方式：包括以下步驟：

1）將野生枸杞植株的根部洗凈，陽光下暴曬1~2h后，自然通風(fēng)條件下陰干，得含水量為0.1~0.2%的枸杞根干樣；

2）將枸杞根干樣切塊并粉碎，過80~280目篩，得到枸杞根粉；

3）采用浸提、吸附、洗脫、濃縮技術(shù)對枸杞葉粉進(jìn)行枸杞根甜菜堿的制備，得枸杞根甜菜堿濃縮液；

4）將枸杞根甜菜堿濃縮液真空干燥得甜菜堿粉末。

實(shí)施例2：

本實(shí)施例是在上述實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述眼光下暴曬1~2h為在夏季有陽光的天氣里，且為每天的12:00~16:00時間區(qū)間內(nèi)。

實(shí)施例3：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟3）包括以下具體步驟：

3-1）將枸杞根粉與去離子水按1：20~80的料液質(zhì)量體積比混合，在功率為100w~600w的條件下進(jìn)行微波提取，1~4h后過濾即得浸提液；

3-2）將浸提液在20~180MPa壓力下進(jìn)行均質(zhì)，經(jīng)離心分離，得到上清液和濾渣；

3-3）將上清液以2~8t/h的流速經(jīng)孔徑為0.05~5μm的陶瓷膜在溫度為30~45℃、壓力為0.2~2MPa的條件下除雜，得到過濾液；

3-4）將過濾液經(jīng)中性大孔吸附樹脂或弱堿性大孔吸附樹脂吸附后，先用去離子水洗脫至無糖，再用10~40倍床層體積的乙醇-水-醋酸溶液洗脫吸附在大孔樹脂上的枸杞根甜菜堿，得到含有枸杞根甜菜堿的洗脫液；所述乙醇-水-醋酸溶液中乙醇、水、醋酸三者之間的體積比為7~9：1~4：1~2.5；

3-5）將所述含有枸杞根甜菜堿的洗脫液經(jīng)真空減壓濃縮后，得到枸杞根甜菜堿濃縮液。

實(shí)施例4：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述浸提液或采用下述制備方法制備：將枸杞根粉與質(zhì)量濃度為40~89.50％的甲醇按1∶40~90的料液體積比浸提30~240h后既得。

實(shí)施例5：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述浸提液或采用下述制備方法制備：將枸杞根粉與質(zhì)量濃度為40~89.50％的乙醇按1∶20~80的料液體積比在37.5~60℃溫度下進(jìn)行水浴加熱，經(jīng)回流提取8~48h后過濾即得。

實(shí)施例6：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述浸提液或采用下述制備方法制備：將枸杞根粉與質(zhì)量濃度為40~89.50％的乙醇按1∶20~80的料液體積比在37.5~50℃溫度下進(jìn)行超聲提取，12~42h后過濾即得。

實(shí)施例7：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟3-2）中離心分離時的離心速度為10000~11000r/min，離心時間為4~8min。

實(shí)施例8：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟3-5）中的真空減壓濃縮的條件是真空度為0.012~0.020MPa，溫度為37.8~40℃。

實(shí)施例9：

本實(shí)施例是在上述任一實(shí)施例的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，進(jìn)一步的為更好的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，特別采用下述設(shè)置方式：所述步驟4）中的真空干燥的條件是真空度為0.01~0.1MPa，干燥溫度為80~100℃。

以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非對本發(fā)明做任何形式上的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、等同變化，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。