1.雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)工具，其特征在于：包括孵育盒、盒蓋和細(xì)胞培養(yǎng)小室，所述細(xì)胞培養(yǎng)小室包括桶形的體部，所述體部的底部設(shè)有Biopore膜，所述體部的頂部設(shè)有伸向外周的懸掛齒，所述孵育盒上設(shè)有正置凹洞和倒置凹洞，所述正置凹洞的半徑大于細(xì)胞培養(yǎng)小室的體部半徑且小于懸掛齒最外端至體部中心的半徑；所述倒置凹洞半徑大于懸掛齒最外端至體部中心的半徑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)工具，其特征在于：所述孵育盒上的正置凹洞和倒置凹洞分別設(shè)有若干個(gè)。
3.雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)方法，該方法包括以下步驟：
A.EPCs的培養(yǎng)；
B.HSCs的培養(yǎng)；
C.孵育盒預(yù)處理；
D.種植EPCs：將EGM-2完全培養(yǎng)液、0.25％胰蛋白酶和1×PBS置于37℃水浴槽預(yù)熱，預(yù)熱后用酒精消毒轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)；將預(yù)處理好后的孵育盒置于超凈臺(tái)中，孵育盒中加入適量EGM-2完全培養(yǎng)液；吸取0.25％胰蛋白酶加入EPCs培養(yǎng)瓶中進(jìn)行消化，30秒后倒掉胰蛋白酶，顯微鏡下觀察細(xì)胞呈單個(gè)分離狀態(tài)時(shí)轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)，加EGM-2完全培養(yǎng)液終止消化，吹打至鏡下觀察細(xì)胞全部與培養(yǎng)瓶分離后，將EPCs細(xì)胞均勻接種到細(xì)胞培養(yǎng)小室的Biopore膜的底面；
E.在超凈臺(tái)中，將種植好EPCs的細(xì)胞培養(yǎng)小室倒置于孵育盒的倒置凹洞中，封閉孵育盒，靜置30分鐘；
F.種植HSCs：將細(xì)胞培養(yǎng)小室取出，將其正置于孵育盒的正置凹洞中；用DMEM高糖和EGM-2完全培養(yǎng)液吹打HSCs培養(yǎng)瓶中的HSCs細(xì)胞，將懸浮的HSCs細(xì)胞接種在細(xì)胞培養(yǎng)小室的Biopore膜的正面，蓋上盒蓋封閉孵育盒，靜置30分鐘；
G.將共培養(yǎng)EPCs和HSCs細(xì)胞的孵育盒作通氣處理后，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)；每天觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況，2-3天后換液；
F.換液后，顯微鏡下觀察共培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況，達(dá)到細(xì)胞集落相對(duì)密集，形態(tài)典型，細(xì)胞生長(zhǎng)良好的要求時(shí)，將共培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)小室取出，固定于流槽上，置于雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下流6-24小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)方法，該方法中步驟A.EPCs的培養(yǎng)包括以下步驟：
A1.EPCs原代培養(yǎng)；
A2.EPCs細(xì)胞傳代。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)方法，該方法中步驟A1.EPCs原代培養(yǎng)包括以下步驟：
A1.1.SD大鼠頸椎脫臼處死，置入1000ml大燒杯內(nèi)，以75％的酒精浸泡15分鐘；
A1.2.將大鼠從酒精中取出置于托盤上，用高壓消毒處理好的剪刀、止血鉗無(wú)菌條件下取大鼠四肢，將取下的大鼠四肢置于含75％酒精的玻璃平皿內(nèi)浸泡后將其轉(zhuǎn)移入超凈臺(tái)內(nèi)；
A1.3.將用錫紙包裹的蛙板于超凈臺(tái)內(nèi)打開(kāi)，大鼠四肢置于蛙板上；用剪刀、手術(shù)刀將大鼠四肢肌肉組織剔除，將四肢長(zhǎng)骨放入含1×PBS的玻璃平皿內(nèi)；
A1.4.去除四肢長(zhǎng)骨兩端骨骺，置于另一玻璃平皿內(nèi)；
A1.5.用刻度吸管吸取PBS沖洗骨頭，后用注射器插入骨髓腔反復(fù)沖洗，直至骨髓腔變白；
A1.6.將沖洗出的液體用膠頭滴管吹打混勻，置離心機(jī)1100rpm/min離心5分鐘；
A1.7.棄上清，加PBS吹打均勻，置離心機(jī)1100rpm/min離心5分鐘；
A1.8.棄上清，加3mlPBS吹打均勻，吹打成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液；
A1.9.取15ml離心管，底層加入梯度離心液4ml；將細(xì)胞懸液3ml加在梯度離心液上層，形成雙層液，兩層液體不能混合；置離心機(jī)梯度離心700g 23℃,離心25分鐘；
A1.10.取培養(yǎng)瓶，以Fn液打底后放于含5％CO2的37℃培養(yǎng)箱內(nèi)；
A1.11.梯度離心結(jié)束后，吸取中間云霧狀乳白色層液體，置于離心管內(nèi)，加入PBS吹打均勻清洗兩次，第一次吹打清洗后置離心機(jī)1300rpm/min，離心5分鐘，第二次1100rpm/min，離心5分鐘；
A1.12.從培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)瓶吸走Fn；在培養(yǎng)瓶側(cè)壁上標(biāo)明細(xì)胞名稱、傳代時(shí)間及操作者；
A1.13.將上述清洗離心結(jié)束后所得EPCs細(xì)胞用EGM-2培養(yǎng)液重懸后置入培養(yǎng)瓶，每瓶約4ml重懸液，放于培養(yǎng)箱內(nèi)孵育；
A1.14.培養(yǎng)4天后觀察換液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)方法，該方法中步驟A2.EPCs細(xì)胞傳代包括以下步驟：
觀察EPCs細(xì)胞鋪滿至細(xì)胞培養(yǎng)瓶底面積的90％時(shí)進(jìn)行傳代：
A2.1.將EGM-2完全培養(yǎng)液、0.25％胰蛋白酶和1×PBS置于37℃水浴槽預(yù)熱，預(yù)熱后用酒精消毒，然后轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)；
A2.2.取出EPCs培養(yǎng)瓶，擰緊瓶蓋轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)內(nèi)，棄培養(yǎng)液，用膠頭滴管吸取1×PBS入培養(yǎng)瓶，輕晃培養(yǎng)瓶后倒掉，重復(fù)兩次；
A2.3.吸取0.25％胰蛋白酶進(jìn)行消化，30秒后倒掉胰蛋白酶，顯微鏡下觀察EPCs細(xì)胞呈單個(gè)分離狀態(tài)時(shí)，轉(zhuǎn)移至超凈臺(tái)，加EGM-2完全培養(yǎng)液終止消化；
A2.4.吹打直至鏡下觀察EPCs細(xì)胞全部與培養(yǎng)瓶分離；
A2.5.將EPCs細(xì)胞均勻接種到培養(yǎng)瓶里；
A2.6.在培養(yǎng)瓶側(cè)壁上標(biāo)明細(xì)胞名稱、傳代時(shí)間及操作者；
A2.7.擰松瓶蓋放入含5％CO2的37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)；
A2.8.待EPCs細(xì)胞鋪滿至細(xì)胞培養(yǎng)瓶底面積的90％時(shí)再次傳代。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)方法，該方法中步驟B.HSCs的培養(yǎng)包括以下步驟：
B1.從液氮中復(fù)蘇的HSC-T6細(xì)胞株，將其取出后立即放置在37攝氏度水中待其融化；
B2.置離心機(jī)1000rpm/min，離心5分鐘，離心細(xì)胞取沉淀，加1×PBS洗1-2次；
B3.用DMEM高糖輕柔吹打細(xì)胞；
B4.將懸浮的細(xì)胞放置在HSCs培養(yǎng)瓶，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)；2-3天后換液或傳代。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雙層流動(dòng)腔系統(tǒng)力學(xué)微環(huán)境下HSCs與EPCs分層共培養(yǎng)方法，該方法中步驟C.孵育盒預(yù)處理包括以下步驟：
用流動(dòng)的水將孵育盒洗凈，泡酸，按常規(guī)清洗步驟清洗后，置于75％酒精中，使用前取出，紫外線照1-2小時(shí)，備用。