序列表的引用本申請包含計算機可讀形式的序列表。該計算機可讀形式通過引用結合在此。發(fā)明領域本發(fā)明涉及用于從液化淀粉生產(chǎn)包含高％dx葡萄糖糖漿的方法，并且涉及包含其中使用的酶的組合物。本發(fā)明的背景淀粉通常由約80％支鏈淀粉和20％直鏈淀粉組成。支鏈淀粉是分支多糖，其中直鏈α-1,4d-葡萄糖殘基由α-1,6糖苷鍵連接。支鏈淀粉被水解1,4-α-糖苷鍵以產(chǎn)生支鏈和直鏈寡糖的α-淀粉酶部分地降解。α-淀粉酶在商業(yè)上用于各種用途，如在淀粉加工(例如，液化)的初始階段中。支鏈淀粉由α-淀粉酶的延長降解導致所謂的α-極限糊精的形成，α-極限糊精不易被α-淀粉酶進一步水解。α-淀粉酶(1,4-α-d-葡聚糖葡聚糖水解酶，ec3.2.1.1)構成一組催化淀粉和其他直鏈和支鏈1,4-葡糖苷寡-和多糖水解的酶。支鏈寡糖可以被去分支酶水解為直鏈寡糖。剩余的支鏈寡糖可以被葡糖淀粉酶解聚為d-葡萄糖，將直鏈寡糖水解為d-葡萄糖。可攻擊支鏈淀粉的去分支酶被分成兩類：分別是異淀粉酶(e.c.3.2.1.68)和普魯蘭酶(e.c.3.2.1.41)。異淀粉酶水解支鏈淀粉和β-極限糊精中的α-1,6-d-支鏈糖苷鍵，并可通過異淀粉酶不能攻擊普魯蘭的特性以及通過它們對于α-極限糊精的有限作用而與普魯蘭酶相區(qū)別。本領域眾所周知在淀粉轉化過程中添加異淀粉酶或普魯蘭酶。普魯蘭酶是具有普魯蘭6-葡聚糖-水解酶活性(ec3.2.1.41)的淀粉去分支酶，該酶催化普魯蘭中α-1,6-糖苷鍵的水解，從而釋放具有還原碳水化合物端的麥芽三糖。通常，普魯蘭酶與α-淀粉酶和/或葡糖淀粉酶組合使用。葡糖淀粉酶(1,4-α-d-葡聚糖葡糖水解酶，ec3.2.1.3)是催化從淀粉或相關寡糖和多糖分子的非還原端釋放d-葡萄糖的一種酶。在商業(yè)上，葡糖淀粉酶被用于將已通過α-淀粉酶和例如，普魯蘭酶部分地水解的淀粉材料轉化成糖漿形式的葡萄糖。在酶處理前，該淀粉材料(如全谷物)可以例如經(jīng)過碾磨減少粒度，以便展開結構并且允許進一步加工。在干式研磨中，整個谷粒被研磨并且使用。濕磨使胚芽與粗粉(淀粉顆粒和蛋白質)很好分離并且時常應用于在例如糖漿的生產(chǎn)中使用淀粉水解物的場所。干式和濕式碾磨兩者是本領域中眾所周知的淀粉加工法并且可以用于本發(fā)明的方法中。在研磨后，典型地將淀粉材料進行液化。在α-淀粉酶的存在下進行液化。在液化過程中，α-淀粉酶將長鏈淀粉降解為支鏈和直鏈的較短單元(麥芽糊精)。針對葡萄糖糖漿的生產(chǎn)，將液化淀粉材料進行糖化。在典型糖化過程中，通過添加葡糖淀粉酶以及去分支酶，如異淀粉酶(美國專利號4,335,208)或普魯蘭酶，來將液化期間產(chǎn)生的麥芽糊精轉化成右旋糖。添加葡糖淀粉酶以及去分支酶之前使溫度降低至60℃。糖化過程進行24-72小時。在添加糖化酶之前，使ph降低至低于4.5，同時維持高溫(高于95℃)，以便使液化α-淀粉酶失活。針對糖漿生產(chǎn)，所使用的酶組合物應至少包括葡糖淀粉酶和普魯蘭酶，然而，通常α-淀粉酶活性還將存在，例如，當使用黑曲霉葡糖淀粉酶時，來自生產(chǎn)宿主的該黑曲霉α-淀粉酶還將存在于該組合物中。通常，α-淀粉酶的存在是所希望的，因為它增加糖化速度；然而由于潘糖的形成，它還降低糖化產(chǎn)物中的右旋糖百分比(％dx)。潘糖是被葡糖淀粉酶緩慢降解的三糖，并且因此它的形成負面地影響著峰值％dx。從實用和經(jīng)濟的角度，在糖化反應中技術人員應該優(yōu)選使用具有干固體(％ds)的高百分比的液化淀粉作為起始材料。不幸的是，在％ds和％dx之間存在著權衡：為了實現(xiàn)具有非常高％dx的糖化產(chǎn)物，技術人員將通常需要從具有相對低％ds的液化淀粉開始。在％dx方面優(yōu)化產(chǎn)量對于許多目的是重要的：例如，如果所希望的終產(chǎn)物是結晶右旋糖，當dx增加1％，結晶右旋糖的產(chǎn)量可能增加高達3％。甚至出于多個目的，在較低％dx是可接受的情況下，仍然希望的是使用具有更高％ds的液化淀粉來達到那一％dx。因此，存在用于改進針對液化淀粉糖化技術的需要。發(fā)明概述本發(fā)明提供了組合物和用于產(chǎn)生改進的糖化產(chǎn)物的方法，在該糖化產(chǎn)物中有可能獲得較高的葡萄糖百分比/轉化率，甚至即使使用具有高干固體含量的液化淀粉來進行該糖化過程。特別地，本發(fā)明提供了一種組合物，該組合物包括葡糖淀粉酶和普魯蘭酶，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率高于6。本發(fā)明進一步提供了用于產(chǎn)生葡萄糖糖漿的方法，該方法包括：i)提供含有液化淀粉的組合物，并且向所述組合物添加葡糖淀粉酶(amg)和普魯蘭酶；ii)使該組合物在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育，并且隨后；iii)向所述組合物中添加α-淀粉酶，并且使該組合物在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育。另外，本發(fā)明提供了用于從液化淀粉產(chǎn)生葡萄糖糖漿的方法，該方法包括使該液化淀粉與根據(jù)本發(fā)明的組合物相接觸。附圖簡述圖1示出了在比較研究中作為時間函數(shù)的轉化率(％dx)，在該研究中液化淀粉使用以下各項經(jīng)受糖化：(a)用于糖化的常規(guī)酶共混物包括葡糖淀粉酶、普魯蘭酶、和α-淀粉酶；(b)根據(jù)本發(fā)明的組合物，包括葡糖淀粉酶(0.25agu/gds)、普魯蘭酶(2.25npun(x)/gds)、且不含α-淀粉酶；以及(c)根據(jù)本發(fā)明的組合物，包括葡糖淀粉酶(0.25agu/gds)、普魯蘭酶(2.25npun(x)/gds)，在24小時添加α-淀粉酶(0.0225fau(f)/gds)。發(fā)明詳述定義α-淀粉酶：α-淀粉酶(1,4-α-d-葡聚糖葡聚糖水解酶，e.c.3.2.1.1)是催化淀粉以及其他直鏈以及支鏈1,4糖苷鍵寡糖以及多糖的水解的一組酶。根據(jù)本發(fā)明所使用的α-淀粉酶可以從真菌或細菌來源獲得。出于本發(fā)明的目的，可以使用以下段落中所描述的α-淀粉酶測定，將真菌α-淀粉酶活性確定為fau(a)。可以根據(jù)下文段落“kilonovoα-淀粉酶單位(knu)(kilonovoalpha-amylaseunits(knu))”，將細菌α-淀粉酶的活性確定為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)。酸性α-淀粉酶單位(fau(a))：可按fau(a)(酸性真菌α-淀粉酶單位)來測量酸性α-淀粉酶活性。1個fau(a)定義為在下表“第一反應，淀粉降解”中所指定的標準條件下每小時降解5.260mg淀粉干物質所需的酶量。酸性α-淀粉酶是一種內(nèi)-α-淀粉酶(1,4-α-d-葡聚糖-葡聚糖水解酶，e.c.3.2.1.1)，它水解該淀粉分子內(nèi)部區(qū)域中的α-1,4-糖苷鍵以形成具有不同鏈長度的糊精和寡糖。與碘形成的顏色的強度跟淀粉的濃度成正比。使用反向比色法將酶活性測定為在指定的分析條件下淀粉濃度的減小。根據(jù)以下描述確定fau(a)，即酸性α-淀粉酶活性。該反應的原理是基于兩個步驟。在第一步中，該酶酸性α-淀粉酶水解淀粉成不同寡糖。在第二步中，碘與淀粉一起形成藍色復合物，但不與其降解產(chǎn)產(chǎn)物形成藍色復合物。因此，顏色的強度與淀粉的濃度成正比。使用反向比色法在指定分析條件下確定該活性為淀粉濃度的減少。kilonovoα-淀粉酶單位(knu)可釆用馬鈴薯淀粉作為底物來確定α-淀粉酶活性。該方法基于溶液中的淀粉通過淀粉酶的分解以及在碘存在下淀粉給出藍黑色顏色。當酶反應進行時，提取該反應的等分試樣并且針對其淀粉含量通過與碘溶液混合來分析。當?shù)矸鄯纸鈺r，在碘存在下，藍黑色顏色變淡并且逐漸變成紅褐色顏色。將其與有色的玻璃標準品相比較。當該顏色匹配玻璃標準品時，到達終點。將一個kilonovoα-淀粉酶單位(knu)定義為在如下“knu”表中定義的標準條件下(即，在37℃+/-0.05℃；0.0003mca2+；和ph5.6下)糊精化5260mg/小時淀粉干物質(merck可溶性淀粉(merckamylumsolubile))的酶量。葡糖淀粉酶(amg)：術語葡糖淀粉酶(1,4-α-d-葡聚糖葡聚糖水解酶，ec3.2.1.3)被定義為催化d-葡萄糖從淀粉或相關寡糖和多糖分子的非還原端釋放的一種酶。出于本發(fā)明的目的，根據(jù)以下段落中所述的程序將葡糖淀粉酶活性確定為agu。葡糖淀粉酶活性(agu)：將該葡糖淀粉酶單位(agu)定義為酶的量，該酶的量每分鐘在0.1m乙酸鹽緩沖液中，在37℃孵育溫度、4.3的ph、100mm的麥芽糖起始濃度、以及6分鐘的反應時間下，水解1微摩爾麥芽糖，從而產(chǎn)生α-d-葡萄糖。該定義適用于0.5-4.0agu/ml的酶工作范圍。在孵育后，該反應可以使用naoh來停止，并且使用以下兩步顯色反應方法測量葡萄糖的量：在由己糖激酶催化的一個反應中，葡萄糖被atp磷酸化。形成的葡萄糖-6-磷酸被葡萄糖-6-磷酸脫氫酶氧化成6-磷酸葡萄糖酸。在這個相同的反應中，等摩爾量的nad+被還原成nadh，導致在340nm處的吸光度增加。反應條件是如下表中所指定的：普魯蘭酶：術語“普魯蘭酶”意指是具有支鏈淀粉6-葡聚糖-水解酶活性(ec3.2.1.41)的淀粉去分支酶，該酶催化支鏈淀粉中α-1,6-糖苷鍵的水解，從而釋放具有還原碳水化合物端的麥芽三糖。出于本發(fā)明的目的，根據(jù)以下段落中所述的程序將普魯蘭酶活性確定為npun。普魯蘭酶活性(npun)：該npun(諾維信新普魯蘭酶單位(newpullulanaseunitnovozymes))是在以下程序中所測量的內(nèi)切普魯蘭酶活性的單位。1npun＝一個普魯蘭酶單位(npun)定義為酶量，該酶量在下表“第一反應，普魯蘭降解”中所指定的標準條件下每分鐘釋放相當于0.35μmol葡萄糖還原端。在第一反應中，該底物在主要樣品和空白樣品中同樣存在。然而，在ph5.0下進行主要樣品的反應，同時在ph9.6下在空白樣品中不存在反應，其中普魯蘭酶或淀粉葡糖苷酶(葡糖淀粉酶)都不具有酶活性。在第二反應中，將該ph調整到約9.6，并且將樣品中的葡萄糖通過葡糖激酶磷酸化成非還原的d-葡萄糖-6-磷酸鹽，其在這個范圍具有最佳的活性和穩(wěn)定性并且在ph9下對葡萄糖具有特異性(參考高厄德(goward)，生物化學雜志(biochem.j.)1986，237，第415-420頁)。該步驟取決于主要樣品和空白樣品中的相同ph，以在二者中去除等量的葡萄糖。將該第二反應通過包含pahbah(對羥基苯甲酸酰肼)的堿性試劑(>ph11)和鉍來停止，鉍與還原糖復合以產(chǎn)生在405nm下檢測的顏色。所產(chǎn)生的顏色與普魯蘭酶活性成比例。成熟多肽：術語“成熟多肽”意指在翻譯和任何翻譯后修飾如n-端加工、c-端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后處于其最終形式的多肽。根據(jù)一些實施例，seqidno:2的成熟多肽基本上由seqidno:2的氨基酸18至573組成，seqidno:3的成熟多肽基本上由seqidno:3的氨基酸18至573組成，seqidno:4的成熟多肽基本上由seqidno:4的氨基酸18至573組成，seqidno:5的成熟多肽基本上由seqidno:5的氨基酸18至573組成，seqidno:6的成熟多肽基本上由seqidno:6的氨基酸18至573組成，seqidno:7的成熟多肽基本上由seqidno:7的氨基酸18至573組成，seqidno:8的成熟多肽基本上由seqidno:8的氨基酸18至573組成，seqidno:9的成熟多肽基本上由seqidno:9的氨基酸18至576組成，seqidno:10的成熟多肽基本上由seqidno:10的氨基酸18至576組成，seqidno:11的成熟多肽基本上由seqidno:11的氨基酸21至618組成，seqidno:12的成熟多肽基本上由seqidno:12的氨基酸1至559組成，seqidno:13的成熟多肽基本上由seqidno:13的氨基酸1至928組成，seqidno:14的成熟多肽基本上由seqidno:14的氨基酸1至828組成，seqidno:15的成熟多肽基本上由seqidno:15的氨基酸1至928組成，seqidno:16的成熟多肽基本上由seqidno:16的氨基酸1至928組成，seqidno:17的成熟多肽基本上由seqidno:17的氨基酸1至484組成，seqidno:18的成熟多肽基本上由seqidno:18的氨基酸1至583組成，seqidno:19的成熟多肽基本上由seqidno:19的氨基酸22至471組成，seqidno:20的成熟多肽基本上由seqidno:20的氨基酸1至514組成，seqidno:21的成熟多肽基本上由seqidno:21的氨基酸1至483組成，seqidno:22的成熟多肽基本上由seqidno:22的氨基酸1至483組成，seqidno:23的成熟多肽基本上由seqidno:23的氨基酸1至483組成，seqidno:24的成熟多肽基本上由seqidno:24的氨基酸1至483組成，seqidno:25的成熟多肽基本上由seqidno:25的氨基酸1至483組成，seqidno:26的成熟多肽基本上由seqidno:26的氨基酸21至607組成，和/或seqidno:27的成熟多肽基本上由seqidno:27的氨基酸19至640組成。在進一步的實施例中，seqidno:2的成熟多肽由seqidno:2的氨基酸18至573組成，seqidno:3的成熟多肽由seqidno:3的氨基酸18至573組成，seqidno:4的成熟多肽由seqidno:4的氨基酸18至573組成，seqidno:5的成熟多肽由seqidno:5的氨基酸18至573組成，seqidno:6的成熟多肽由seqidno:6的氨基酸18至573組成，seqidno:7的成熟多肽由seqidno:7的氨基酸18至573組成，seqidno:8的成熟多肽由seqidno:8的氨基酸18至573組成，seqidno:9的成熟多肽由seqidno:9的氨基酸18至576組成，seqidno:10的成熟多肽由seqidno:10的氨基酸18至576組成，seqidno:11的成熟多肽由seqidno:11的氨基酸21至618組成，seqidno:12的成熟多肽由seqidno:12的氨基酸1至559組成，seqidno:13的成熟多肽由seqidno:13的氨基酸1至928組成，seqidno:14的成熟多肽基本上由seqidno:14的氨基酸1至828組成，seqidno:15的成熟多肽由seqidno:15的氨基酸1至928組成，seqidno:16的成熟多肽由seqidno:16的氨基酸1至928組成，seqidno:17的成熟多肽由seqidno:17的氨基酸1至484組成，seqidno:18的成熟多肽由seqidno:18的氨基酸1至583組成，seqidno:19的成熟多肽由seqidno:19的氨基酸22至471組成，seqidno:20的成熟多肽由seqidno:20的氨基酸1至514組成，seqidno:21的成熟多肽由seqidno:21的氨基酸1至483組成，seqidno:22的成熟多肽由seqidno:22的氨基酸1至483組成，seqidno:23的成熟多肽由seqidno:23的氨基酸1至483組成，seqidno:24的成熟多肽由seqidno:24的氨基酸1至483組成，seqidno:25的成熟多肽由seqidno:25的氨基酸1至483組成，seqidno:26的成熟多肽由seqidno:26的氨基酸21至607組成，seqidno:27的成熟多肽由seqidno:27的氨基酸19至640組成。成熟多肽序列的預測可以基于signalp程序(尼耳森(nielsen)等人，1997，蛋白質工程(proteinengineering)10:1-6)，該程序預測seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4、seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7、seqidno:8、seqidno:9和seqidno:10的氨基酸1至17是信號肽。同樣，預測seqidno:11的氨基酸1至20、seqidno:19的氨基酸1至21、seqidno:26的氨基酸1至20、以及seqidno:27的氨基酸1-18是信號肽。由seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4、seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7、或seqidno:8的氨基酸19至474(具體地19至471)或者seqidno:9或seqidno:10的氨基酸19至471所定義的序列是催化結構域。由seqidno:2、seqidno:3、seqidno:4、seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7、或seqidno:8的氨基酸480至573或者seqidno:9或seqidno:10的氨基酸483至576所定義的序列是淀粉結合結構域。序列一致性:兩個氨基酸序列之間或兩個核苷酸序列之間的相關性由參數(shù)“序列一致性”描述。出于本發(fā)明的目的，使用如在emboss包(emboss：歐洲分子生物學開放軟件套件(theeuropeanmolecularbiologyopensoftwaresuite)，賴斯(rice)等人，2000，遺傳學趨勢(trendsgenet.)16:276-277)(優(yōu)選5.0.0版或更新版本)的尼德爾(needle)程序中所實施的尼德爾曼-翁施(needleman-wunsch)算法(尼德爾曼(needleman)和翁施(wunsch)，1970，分子生物學雜志(j.mol.biol.)48:443-453)來確定兩個氨基酸序列之間的序列一致性。所使用的參數(shù)是空位開放罰分10，空位延伸罰分0.5，以及eblosum62(blosum62的emboss版本)取代矩陣。將標記為“最長一致性”的needle輸出(使用-nobrief選項獲得)用作百分比一致性并且是如下計算的：(相同殘基x100)/(比對的長度-在比對中的空位總數(shù))聚合度(dp)：dp是指給出的糖中脫水吡喃葡萄糖單元的數(shù)量(n)。dp1的實例是單糖，如葡萄糖和果糖。dp2是二糖，如麥芽糖和蔗糖。ds和％ds：如本文所使用的，“ds”是術語“干固體”的縮寫。在本發(fā)明的上下文中，除非另有說明，將液化淀粉的固體含量(包括淀粉漿料或部分水解的淀粉)提供為干固體的百分比(％ds)?；谥亓?w/w％)計算干固體的百分比。％dx：在本發(fā)明的上下文中，右旋糖百分比(％dx)用作糖化過程中或糖化過程完成后獲得的右旋糖的量的測量。基于重量(w/w％)計算該右旋糖百分比。本發(fā)明的方面和實施例本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)出人意料地發(fā)現(xiàn)液化淀粉的糖化過程中α-淀粉酶的延遲添加或階段性添加具有若干益處：維持了α-淀粉酶對糖化速度的積極作用，并且另外，該峰值％dx大大改進。即使當糖化過程中在相對晚的時期添加該α-淀粉酶時，也會觀察到該有益效果。另外，諸位發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在糖化過程開始添加的酶共混物中普魯蘭酶與葡糖淀粉酶的比率的增加還有助于實現(xiàn)糖化產(chǎn)物中較高的％dx。在第一個方面，本發(fā)明提供了一種組合物，該組合物包括葡糖淀粉酶和普魯蘭酶，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率高于6，例如高于7，高于8，高于9，或在6-20的范圍內(nèi)，例如在6-19的范圍內(nèi)、在6-18的范圍內(nèi)、在6-17的范圍內(nèi)、在6-16的范圍內(nèi)、在6-15的范圍內(nèi)、在6-14的范圍內(nèi)、在6-13的范圍內(nèi)、在6-12的范圍內(nèi)、在6-11的范圍內(nèi)、在7-20的范圍內(nèi)、在7-19的范圍內(nèi)、在7-18的范圍內(nèi)、在7-17的范圍內(nèi)、在7-16的范圍內(nèi)、在7-15的范圍內(nèi)、在7-14的范圍內(nèi)、在7-13的范圍內(nèi)、在7-12的范圍內(nèi)、在7-11的范圍內(nèi)、在8-20的范圍內(nèi)、在8-19的范圍內(nèi)、在8-18的范圍內(nèi)、在8-17的范圍內(nèi)、在8-16的范圍內(nèi)、在8-15的范圍內(nèi)、在8-14的范圍內(nèi)、在8-13的范圍內(nèi)、在8-12的范圍內(nèi)、在8-11的范圍內(nèi)、在9-20的范圍內(nèi)、在9-19的范圍內(nèi)、在9-18的范圍內(nèi)、在9-17的范圍內(nèi)、在9-16的范圍內(nèi)、在9-15的范圍內(nèi)、在9-14的范圍內(nèi)、在9-13的范圍內(nèi)、在9-12的范圍內(nèi)，或例如在9-11的范圍內(nèi)。應理解的是在糖化過程中延遲α淀粉酶的添加時，令人希望的是在糖化過程的開始添加的包含葡糖淀粉酶和普魯蘭酶的組合物不含有或含有至少極少的α-淀粉酶活性：因此，在本發(fā)明的一些實施例中，該組合物不包含α-淀粉酶活性。可替代地，如果所述組合物確實包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000、或例如高于5000。如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilono-voα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000，或例如高于5000。在一些具體的實施例中，本發(fā)明提供了一種組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率高于6，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100，如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。在其他具體的實施例中，本發(fā)明提供了一種組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在6-20的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100，如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。在進一步具體的實施例中，本發(fā)明提供了一種組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在6-20的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500。如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500。在甚至另外具體的實施例中，本發(fā)明提供了一種組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率是在7-15的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。本發(fā)明的其他具體的實施例提供了一種組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在7-15的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500。如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500。包括在該組合物中的或用于根據(jù)本發(fā)明的方法的葡糖淀粉酶可以來源于任何合適的來源，例如，來源于微生物或植物。優(yōu)選的葡糖淀粉酶是真菌或細菌起源的，選自下組，該組由以下各項組成：曲霉屬葡糖淀粉酶，特別是黑曲霉g1或g2葡糖淀粉酶(博埃爾(boel)等人，1984，歐洲分子生物學學會雜志(emboj.)3(5):1097-1102)，或其變體，例如披露于wo92/00381、wo00/04136和wo01/04273中的那些(來自諾維信，丹麥)；披露于wo84/02921中的泡盛曲霉葡糖淀粉酶，米曲霉葡糖淀粉酶(農(nóng)業(yè)、生物學與化學(agric.biol.chem.)，1991,55(4):941-949)，或其變體或片段。其他曲霉屬葡糖淀粉酶變體包括具有增強的熱穩(wěn)定性的變體：g137a和g139a(陳(chen)等人，1996，蛋白質工程(prot.eng.)9:499-505)；d257e和d293e/q(陳等人，1995，蛋白質工程8:575-582)；n182(陳等人，1994，生物化學雜志(biochem.j.)301:275-281)；二硫鍵，a246c(費艾洛伯(fierobe)等人，1996，生物化學(biochemistry)35:8698-8704)；以及在位置a435和s436中引入pro殘基(李(li)等人，1997，蛋白質工程(proteineng.)10:1199-1204)。其他葡糖淀粉酶包括羅耳阿太菌(以前命名為羅爾伏革菌)葡糖淀粉酶(參見美國專利號4,727,026和長坂(nagasaka)等人，1998，“來自羅爾伏革菌的生淀粉降解葡糖淀粉酶的純化和特性”(“purificationandpropertiesoftheraw-starch-degradingglucoamylasesfromcorticiumrolfsii”)應用微生物學與生物技術(appl.microbiol.biotechnol.)50:323-330)，籃狀菌屬葡糖淀粉酶，特別是來源于埃默森籃狀菌(wo99/28448)、talaromycesleycettanus(美國專利登記號32,153)、和talaromycesduponti、以及嗜熱籃狀菌(美國專利號4,587,215)?？紤]的真菌葡糖淀粉酶包括瓣環(huán)栓菌，披露于wo2006/069289中。在一個實施例中，該葡糖淀粉酶來源于密孔菌屬的菌株，具體地如wo2011/066576中所描述的密孔菌屬菌株(seqidno2、4或6)；或來源于褐褶菌屬的菌株，具體地如wo2011/068803中所描述的褐褶菌屬的菌株(seqidno:2、4、6、8、10、12、14或16)或黑層孔屬的菌株，具體地如wo2012/064351中所披露的黑層孔屬的菌株(seqidno:2)(所有參考文獻通過引用并入本文)或青霉屬菌株，具體地是wo2011/127802(seqidno:2)或wo2013/036526中所披露的草酸青霉菌。還考慮了以下葡糖淀粉酶，該葡糖淀粉酶展現(xiàn)與上述葡糖淀粉酶的任一種的高一致性，即，與上述酶序列的成熟部分中的任一個具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、例如100％的一致性。在一個實施例中，該葡糖淀粉酶來源于木霉屬的菌株，具體地是如wo2009/048487、wo2009/048488、wo2008/045489、wo2011/022465、wo2012/001139中所描述的?？缮藤彽钠咸堑矸勖附M合物包括amg200l；amg300l；santmsu-per，santmextral，spirizymetmplus，spirizymetmfuel，spirizymetmb4u，spirizymeultratm，spirizymeexceltm和amgtme(來自諾維信公司，丹麥)；optidextm300，gc480tm和gc147tm(來自杰能科國際公司(genencorint.)，美國)；amigasetm和amigasetmplus(來自dsm)；g-zymetmg900，g-zymetm和g990zr(來自杜邦-杰能科公司)根據(jù)具體的實施例中，所述葡糖淀粉酶選自下組，該組由以下各項組成：黑曲霉葡糖淀粉酶、埃默森籃狀菌葡糖淀粉酶、瓣環(huán)栓菌葡糖淀粉酶、密粘褶菌葡糖淀粉酶、里氏木霉葡糖淀粉酶、特異腐質霉葡糖淀粉酶、和煙曲霉葡糖淀粉酶，及其雜交體和變體。原則上，任何普魯蘭酶可以在本發(fā)明的方法中使用。在一個實施例中，該普魯蘭酶是一種來自脫支芽孢桿菌的普魯蘭酶，例如，us6,074,854和us5,817,498中所披露的，或者是衍生自嗜酸性普魯蘭芽孢桿菌的普魯蘭酶，例如，wo2009/075682中所披露的(seqid4；geneseqp：axb71624)。該普魯蘭酶還可以是這些普魯蘭酶的任何雜交體或變體。可商購的普魯蘭酶包括可以從諾維信公司，巴格斯瓦德，丹麥獲得的promozymed2、novozym26062(諾維信公司)和optimaxl1000(杜邦-杰能科公司)。根據(jù)以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該普魯蘭酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成i)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；ii)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列；iii)變體氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，例如至少99.5％序列一致性；其中當相對于“普魯蘭酶活性(npun)”的定義如以上所闡述的來測試時，當所述普魯蘭酶包括如在ii)中定義的子序列或如在iii)中定義的變體氨基酸序列時，它優(yōu)選地具有i)中所定義的各氨基酸(其中它是子序列或變體)的至少80％，例如至少90％的普魯蘭酶活性。在根據(jù)本發(fā)明的組合物中，該葡糖淀粉酶可以特別地包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：i)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；ii)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列；iii)變體氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，例如至少99.5％序列一致性其中當相對于“葡糖淀粉酶活性(agu)”的定義如以上所闡述的來測試時，當所述葡糖淀粉酶包括如在ii)中定義的子序列或如在iii)中定義的氨基酸序列時，它優(yōu)選地具有在i)中所定義的各氨基酸(其中它是子序列或變體)的至少80％，例如至少90％的葡糖淀粉酶活性。具體地，根據(jù)本發(fā)明的該組合物可以包括：i)葡糖淀粉酶，其包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：seqidno:12中闡述的氨基酸序列或其成熟多肽，ii)seqidno:12中闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列，和iii)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，例如至少99.5％序列一致性；其中當相對于“葡糖淀粉酶活性(agu)”的定義如以上所闡述的來測試時，當所述葡糖淀粉酶是如在ii)中定義的子序列或如在iii)中定義的變體氨基酸序列時，它優(yōu)選地具有在i)中所定義的各氨基酸(其中它是子序列或變體)的至少80％，例如至少90％的葡糖淀粉酶活性。與一種普魯蘭酶組合iv)該普魯蘭酶包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽，v)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列，和vi)氨基酸序列，其與iv)和v)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、例如至少99.5％序列一致性；其中當相對于“普魯蘭酶活性(npun)”的定義如以上所闡述的來測試時，當所述普魯蘭酶包括如在v)中定義的子序列或如在vi)中定義的變體氨基酸序列時，它優(yōu)選地具有iv)中所定義的各氨基酸(其中它是子序列或變體)的至少80％，例如至少90％的普魯蘭酶活性。在相關實施例中，該葡糖淀粉酶基本上由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在其他相關的實施例中，該葡糖淀粉酶由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在以上權利要求中任一項所述的組合物中，該α-淀粉酶可以包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成i)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；ii)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列；iii)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。當相對于“酸性α-淀粉酶單位(fau(a))”或“α-淀粉酶活性(knu)”的定義如以上所闡述而測試時，當以上定義的α-淀粉酶是子序列或變體時，它優(yōu)選地具有選自seqidno:1和17-26或其成熟多肽的各α-淀粉酶(其中它是子序列或變體)的至少80％，如至少90％的α-淀粉酶活性。在本上下文中，α-淀粉酶(包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：seqidno:1、17-19和26或其成熟多肽)被認為是真菌α-淀粉酶，并且活性如相對于“酸性α-淀粉酶單元(fau(a))”的以上定義所提供的來進行測試。α-淀粉酶(包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：seqidno:20-25或其成熟多肽)被認為是細菌α-淀粉酶，并且活性如相對于“kilonovoα-淀粉酶單元(knu)”的以上定義所提供的來進行測試。在相關實施例中，該α-淀粉酶基本上由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在其他相關的實施例中，該α-淀粉酶由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。根據(jù)本發(fā)明提供的組合物可以是液體或固體組合物。在目前優(yōu)選的實施例中，它是液體組合物。本發(fā)明的另一方面提供了用于生產(chǎn)葡萄糖糖漿的方法。在根據(jù)本發(fā)明的方法中，α淀粉酶是在糖化反應開始時添加葡糖淀粉酶和普魯蘭酶的意義上進行添加的，然而將α-淀粉酶的添加延遲至少直到顯著的或相當大部分的液化淀粉已經(jīng)被糖化。因此，本發(fā)明的方法包括，i)提供含有液化淀粉的組合物，并且向所述組合物添加葡糖淀粉酶(amg)和普魯蘭酶；ii)使該組合物在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育，并且隨后iii)向所述組合物中添加α-淀粉酶，并且使該組合物在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育。本方法的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量可以特別地對應于0.05-0.5agu/gds，例如0.05-0.4agu/gds、0.05-0.35agu/gds、0.05-0.3agu/gds、0.075-0.5agu/gds、0.075-0.4agu/gds、0.075-0.35agu/gds、0.075-0.3agu/gds、0.075-0.5agu/gds、0.1-0.5agu/gds、0.1-0.4agu/gds、0.1-0.35agu/gds、0.1-0.3agu/gds、0.125-0.5agu/gds、0.125-0.4agu/gds、0.125-0.35agu/gds、0.125-0.3agu/gds、0.15-0.5agu/gds、0.15-0.4agu/gds、0.15-0.35agu/gds、0.15-0.3agu/gds、0.175-0.5agu/gds、0.175-0.4agu/gds、0.175-0.35agu/gds、0.175-0.3agu/gds、0.2-0.5agu/gds、0.2-0.4agu/gds、0.2-0.35agu/gds、0.2-0.3agu/gds、0.24-0.5agu/gds、0.24-0.4agu/gds、0.24-0.35agu/gds，或例如0.24-0.26agu/gds。本方法的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量可以特別地對應于0.05-5npun(x)/gds，例如0.05-4.5npun(x)/gds、0.05-4npun(x)/gds、0.05-3.5npun(x)/gds、0.05-3npun(x)/gds、0.05-2.5npun(x)/gds、0.1-5npun(x)/gds、0.1-4npun(x)/gds、0.1-3.5npun(x)/gds、0.1-3npun(x)/gds、0.1-2.5npun(x)/gds、0.25-5npun(x)/gds、0.25-4.5npun(x)/gds、0.25-4npun(x)/gds、0.25-3.5npun(x)/gds、0.25-3npun(x)/gds、0.5-5npun(x)/gds、0.5-4.5npun(x)/gds、0.5-4npun(x)/gds、0.5-3.5npun(x)/gds、0.05-3npun(x)/gds、0.5-2.5npun(x)/gds、1.0-5npun(x)/gds、1.0-4.5npun(x)/gds、1.0-4npun(x)/gds、1.0-3.5npun(x)/gds、1.0-3npun(x)/gds、1.0-2.5npun(x)/gds、1.5-5npun(x)/gds、1.5-4.5npun(x)/gds、1.5-4npun(x)/gds、1.5-3.5npun(x)/gds、1.5-3npun(x)/gds、1.5-2.5npun(x)/gds、2-5npun(x)/gds、2-4.5npun(x)/gds、2-4npun(x)/gds、2-3.5npun(x)/gds、2-3npun(x)/gds、2-5npun(x)/gds、2-2.5npun(x)/gds、2.25-5npun(x)/gds、2.25-4.5npun(x)/gds、2.25-4npun(x)/gds、2.25-3.5npun(x)/gds、2.25-3npun(x)/gds、2.25-2.5npun(x)/gds，或例如2.50-2.54npun(x)/gds。根據(jù)本發(fā)明，在本方法的步驟iii)中添加的α-淀粉酶是真菌α-淀粉酶，該α-淀粉酶的量可以特別地對應于0.0005-0.025fau(a)/gds，例如0.0005-0.0225fau(a)/gds、0.0005-0.02fau(a)/gds、0.0005-0.0175fau(a)/gds、0.0005-0.015fau(a)/gds、0.0005-0.0125fau(a)/gds、0.001-0.025fau(a)/gds、0.001-0.0225fau(a)/gds、0.001-0.02fau(a)/gds、0.001-0.0175fau(a)/gds、0.001-0.015fau(a)/gds、0.001-0.0125fau(a)/gds、0.0025-0.025fau(a)/gds、0.0025-0.0225fau(a)/gds、0.0025-0.02fau(a)/gds、0.0025-0.0175fau(a)/gds、0.0025-0.015fau(a)/gds、0.0025-0.0125fau(a)/gds、0.005-0.025fau(a)/gds、0.005-0.0225fau(a)/gds、0.005-0.02fau(a)/gds、0.005-0.0175fau(a)/gds、0.005-0.015fau(a)/gds、0.005-0.0125fau(a)/gds、0.0075-0.025fau(a)/gds、0.0075-0.0225fau(a)/gds、0.0075-0.02fau(a)/gds、0.0075-0.0175fau(a)/gds、0.0075-0.015fau(a)/gds、0.0075-0.0125fau(a)/gds、0.008-0.025fau(a)/gds、0.008-0.0225fau(a)/gds、0.008-0.02fau(a)/gds、0.008-0.0175fau(a)/gds、0.008-0.015fau(a)/gds、0.008-0.0125fau(a)/gds、0.009-0.01fau(a)/gds，或例如0.0095fau(a)/gds。根據(jù)本發(fā)明，在本方法的步驟iii)中添加的α-淀粉酶是細菌α-淀粉酶，該α-淀粉酶的量可以特別地對應于0.0005-0.025knu/gds，例如0.0005-0.0225knu/gds、0.0005-0.02knu/gds、0.0005-0.0175knu/gds、0.0005-0.015knu/gds、0.0005-0.0125knu/gds、0.001-0.025knu/gds、0.001-0.0225knu/gds、0.001-0.02knu/gds、0.001-0.0175knu/gds、0.001-0.015knu/gds、0.001-0.0125knu/gds、0.0025-0.025knu/gds、0.0025-0.0225knu/gds、0.0025-0.02knu/gds、0.0025-0.0175knu/gds、0.0025-0.015knu/gds、0.0025-0.0125knu/gds、0.005-0.025knu/gds、0.005-0.0225knu/gds、0.005-0.02knu/gds、0.005-0.0175knu/gds、0.005-0.015knu/gds、0.005-0.0125knu/gds、0.0075-0.025knu/gds、0.0075-0.0225knu/gds、0.0075-0.02knu/gds、0.0075-0.0175knu/gds、0.0075-0.015knu/gds、0.0075-0.0125knu/gds、0.008-0.025knu/gds、0.008-0.0225knu/gds、0.008-0.02knu/gds、0.008-0.0175knu/gds、0.008-0.015knu/gds、0.008-0.0125knu/gds、0.009-0.01knu/gds，或例如0.0095knu/gds。在一些實施例中，本發(fā)明提供了一種方法，其中在該方法的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量對應于0.05-0.5agu/gds，在該方法的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于0.05-5npun(x)/gds，并且在該方法的步驟iii)中添加的真菌α-淀粉酶的量對應于0.0005-0.025(fau)(a)/gds，或在該方法的步驟iii)中添加的細菌α-淀粉酶的量對應于0.0005-0.025knu/gds。在又其他的實施例中，本發(fā)明提供了一種方法，其中在該方法的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量對應于0.175-0.3agu/gds，在該方法的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于2-4npun(x)/gds，并且在該方法的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.0025-0.02(fau)(a)/gds，或在該方法的步驟iii)中添加的細菌α-淀粉酶的量對應于0.0025-0.02knu/gds。在進一步的實施例中，本發(fā)明涉及一種方法，其中在該方法的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量對應于0.2-0.3agu/gds，在該方法的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于2-3npun(x)/gds，并且在該方法的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.008-0.0125(fau)(a)/gds，或在該方法的步驟iii)中添加的細菌α-淀粉酶的量對應于0.008-0.0125knu/gds。當在糖化過程中延遲添加α淀粉酶時，令人希望的是在糖化過程的開始將無或至少極少的α-淀粉酶活性與葡糖淀粉酶和普魯蘭酶一起增加。因此，在一些實施例中，該方法包括向含有液化淀粉的所述組合物中添加含有葡糖淀粉酶和普魯蘭酶的配制品，其中如果所述配制品包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是細菌來源的，那么在所述組合物中表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000，或例如高于5000。如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000，或例如高于5000。根據(jù)一些實施例，在該方法的步驟ii)中添加的葡糖淀粉酶和普魯蘭酶是處于如上述定義的根據(jù)本發(fā)明的組合物中。在該方法的步驟ii)中的孵育可以具有從2-35小時，例如從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從18-35小時、從18-30小時、從18-28小時、從18-26小時、從18-24小時、從18-22小時、從18-20小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從22-35小時、從22-30小時、從22-28小時、從22-26小時、從22-24小時的持續(xù)時間，或例如24小時的持續(xù)時間。本方法的步驟iii)中的孵育可以具有從2-94小時，例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-94小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-94小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-94小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-94小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-94小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-94小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在具體的實施例中，本方法的步驟ii)中的孵育具有從2-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-94小時，例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-94小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-94小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-94小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-94小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-94小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-94小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在其他具體的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從2-20小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-94小時、例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-94小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-94小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-94小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-94小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-94小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-94小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在又其他的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從4-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-92小時、例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-92小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-92小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-92小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-92小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-92小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-92小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-92小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-92小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在進一步的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從4-22小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-92小時，例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-92小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-92小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-92小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-92小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-92小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-92小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-92小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-92小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在又進一步的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從10-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-86小時，例如從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-86小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-86小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-86小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-86小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-86小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-86小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-86小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在甚至另外實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從10-24小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-86小時，例如從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-86小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-86小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-86小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-86小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-86小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-86小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-86小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在又另外的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從14-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-70小時，例如從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-94小時、從25-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在甚至另外實施例中，本方法的步驟ii)中的孵育具有從14-26小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-70小時，例如從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-94小時、從25-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在其他實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從18-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-78小時，例如從2-74小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-78小時、從4-74小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-74小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-78小時、從14-74小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-78小時、從20-74小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-78小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-78小時、從30-74小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-74小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-78小時、從50-74小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在另外的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從18-28小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-78小時，例如從2-74小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-78小時、從4-74小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-74小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-78小時、從14-74小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-78小時、從20-74小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-78小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-78小時、從30-74小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-74小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-78小時、從50-74小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在甚至另外的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從20-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-76小時，例如從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-76小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-76小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-76小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-76小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在又進一步的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從20-30小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-76小時，例如從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-76小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-76小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-76小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-76小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。在甚至另外的實施例中，本方法的步驟ii)中的所述孵育具有從22-35小時的持續(xù)時間，并且本方法的步驟iii)中的所述孵育具有從2-74小時，例如從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-74小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-74小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-74小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-74小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-94小時、從25-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-74小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-74小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-74小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間?？梢栽试S進行權利要求14的步驟iii)中的孵育直到該組合物中葡萄糖(％dx)的量達到對應于95％(w/w)或更高，例如95.5％(w/w)或更高、95.75％(w/w)或更高、96％(w/w)或更高、96.25％(w/w)或更高、或例如96.75％(w/w)或更高的水平。在一些實施例中，從向該含有液化淀粉的組合物中添加所述葡糖淀粉酶(amg)和所述的普魯蘭酶直到該淀粉水解/糖化中止的過程的持續(xù)時間是從24-96小時，例如從24-72小時、從24-64小時、從24-48小時、從24-36小時、從24-32小時、從32-96小時、從32-72小時、從32-64小時、從32-48小時、從32-36小時、從36-96小時、從36-72小時、從36-64小時、從36-48小時、從48-96小時、例如從48-72小時、從48-64小時、從56-96小時、例如從56-72小時、或例如從56-64小時，在根據(jù)本發(fā)明的方法中，該淀粉水解/糖化可以具體發(fā)生在3.5-5.0范圍內(nèi)的ph(如在4.0-4.5范圍內(nèi)的ph)下、和在59℃-70℃范圍內(nèi)的溫度(如在59℃-65℃范圍內(nèi)或如在59℃-62℃范圍內(nèi))下。針對根據(jù)本發(fā)明的糖化方法，該用作底物的液化淀粉可以是淀粉漿料或部分地水解的淀粉(液化物或麥芽糊精)。具體地而言，該淀粉漿料或部分水解的淀粉可以具有在5-42范圍內(nèi)的右旋糖當量(de)，如在5-30范圍內(nèi)、在8-18范圍內(nèi)或如在9-14范圍內(nèi)。該淀粉可以來自任何來源，具體地是來自玉米、小麥或木薯。該淀粉漿料或部分水解的淀粉可以具有來自存在的液化過程的剩余的α-淀粉酶活性，或者可以將其失活，如通過將ph降低至低于4.5，同時維持高溫(高于95℃)，來失活該液化的α-淀粉酶。所述的淀粉漿料或部分水解的淀粉的電導率可以具體地是在0-500mi-cros/cm/cm范圍內(nèi)。根據(jù)一些實施例，該鈣含量對應于0-200ppm游離鈣。在根據(jù)本發(fā)明的方法中，該淀粉水解/糖化可以具體發(fā)生在3.5-5.0范圍內(nèi)的ph(如在4.0-4.7范圍內(nèi)的ph)下、和在58℃-70℃范圍內(nèi)的溫度(如在58℃-65℃范圍內(nèi)、在59℃-65℃范圍內(nèi)或如在59℃-62℃范圍內(nèi))下。作為起始材料提供的包括液化淀粉的組合物；即，包括提供于本方法的步驟i)中的液化淀粉的組合物可以包含從25％-45％干固體(％ds)，例如從25％-40％ds、從30％-38％ds、從32％-38％ds、或例如從34％-36％ds。在根據(jù)本發(fā)明的方法中有用的真菌α-淀粉酶包括來源于曲霉屬的菌株的α-淀粉酶，諸如米曲霉、黑曲霉和白曲霉α-淀粉酶。優(yōu)選的酸性真菌α-淀粉酶是一種真菌淀粉樣(fungamyl-like)α-淀粉酶，該α-淀粉酶來源于米曲霉菌株。根據(jù)本發(fā)明，術語“真菌淀粉樣α-淀粉酶”指與wo96/23874中seqidno:10中示出的氨基酸序列的成熟部分呈現(xiàn)高一致性的α-淀粉酶，即呈現(xiàn)多于70％、多于75％、多于80％、多于85％、多于90％、多于95％、多于96％、多于97％、多于98％、多于99％或甚至100％的一致性。另一種優(yōu)選的酸性α-淀粉酶來源于黑曲霉菌株。在一個優(yōu)選實施例中，酸性真菌α-淀粉酶是來自在swiss-prot/teembl數(shù)據(jù)庫中在主入藏號p56271下披露為“amya_aspng”并且在wo89/01969(實例3)中進行描述的黑曲霉的α-淀粉酶。其他考慮到的野生型α-淀粉酶包括那些來源于根毛霉屬和多孔菌屬(meripilus)的菌株，優(yōu)選微小根毛霉(通過引用并入的wo2004/055178)或大型多孔菌(meripilusgiganteus)的菌株。在一個優(yōu)選實施例中，α-淀粉酶是來源于白曲霉并且是由金子(kaneko)等人，1996，發(fā)酵與生物工程雜志(j.ferment.bioeng.)81:292-298：“編碼來自白曲霉的酸穩(wěn)定的α-淀粉酶的一種基因的核苷酸序列的分子克隆和測定(molecular-cloninganddeterminationofthenucleotide-sequenceofageneencodinganacid-stablealpha-amylasefromaspergilluskawachii)”所披露；并且進一步被披露為embl：#ab008370。真菌α-淀粉酶還可以是包含淀粉結合域(sbd)和α-淀粉酶催化域的野生型酶(即，非雜合體)，或其變體。在一個實施例中，該野生型α-淀粉酶來源于一種白曲霉菌株。在進一步的實施例中，該α淀粉酶是真菌酸性α-淀粉酶是雜合α-淀粉酶。真菌雜合α-淀粉酶的優(yōu)選的實例包括wo2005/003311或美國申請公開案號2005/0054071(諾維信公司)或美國申請?zhí)?0/638,614(諾維信公司)(特此通過引用結合)中所披露的α-淀粉酶。雜合α-淀粉酶可以包括α-淀粉酶催化結構域(cd)和糖結合域/模塊(cbm)，例如淀粉結合域和任選的接頭?？紤]的雜合α-淀粉酶的具體實例包括披露于美國申請?zhí)?0/638,614中的實例的表1至5中的那些，包括具有催化結構域ja118和羅耳阿太菌(atheliarolf-sii)sbd的真菌淀粉酶變體(us60/638,614中的seqidno:100)、具有羅耳阿太菌amg接頭和sbd的微小根毛霉α-淀粉酶(us60/638,614中的seqidno:101)、具有黑曲霉葡糖淀粉酶接頭和sbd的微小根毛霉α-淀粉酶(將其在美國申請?zhí)?1/316,535的表5中披露為氨基酸序列seqidno:20、seqidno:72和seqidno:96的組合)或作為wo2006/069290的表5中的v039、以及具有羅耳阿太菌葡糖淀粉酶接頭和sbd的大型亞灰樹花菌α-淀粉酶(美國申請?zhí)?0/638,614中的seqidno:102)。其他確切考慮的雜合α-淀粉酶是列于美國申請?zhí)?1/316,535和wo2006/069290(通過引用結合在此)中的實例4中的表3、4、5和6中的任何α-淀粉酶?？紤]的雜合α-淀粉酶的其他具體實例包括披露于美國專利申請?zhí)?005/0054071中的那些，包括披露于15頁表3中的那些，例如具有白曲霉接頭和淀粉結合域的黑曲霉α-淀粉酶。根據(jù)本發(fā)明所述的方法中有用的細菌α-淀粉酶包括源自芽孢桿菌屬的菌株的α-淀粉酶，如地衣芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌。還考慮了呈現(xiàn)出與以上提及的α-淀粉酶的高一致性，即，與成熟酶序列具有多于70％、多于75％、多于80％、多于85％、多于90％、多于95％、多于96％、多于97％、多于98％、多于99％、或甚至100％一致性的α-淀粉酶。含有α-淀粉酶的優(yōu)選的商用組合物包括mycolasetm(dsm)、bantm、termamyltmsc、fungamyltm、liquozymetmx、liquozymetmsc、和santmsuper、santmextral(諾維信公司)以及clarasetml-40,000、dex-lotm、spezymetmfred、spezymetmaa、spezymetmα、spezymetmdeltaaa、gc358、gc980、spezymetmcl、和spezymetmrsl(杜邦-杰能科公司)、fuelzymetm(來自范恩尼姆公司(vereniumcorp)，美國)。如必要，這些α淀粉酶還可以按如以上所闡述的非常低的量被包括在根據(jù)本發(fā)明的組合物中。在根據(jù)本發(fā)明的方法中有用的葡糖淀粉酶和普魯蘭酶包括相對于根據(jù)本發(fā)明的組合物的如以上披露的那些。因此，在本發(fā)明的具體的實施例中，該α淀粉酶選自黑曲霉、土曲霉、或微小根毛酶α淀粉酶，該葡糖淀粉酶選自黑曲霉、煙曲霉、埃默森籃狀菌、瓣環(huán)栓菌、里氏木霉、特異腐質霉、和密粘褶菌葡糖淀粉酶，并且該普魯蘭酶選自脫支芽孢桿菌或嗜酸性普魯蘭芽孢桿菌普魯蘭酶。具體地，該葡糖淀粉酶可以包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成i)seqidno:2-12和27中闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；ii)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列；iii)變體氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。在相關實施例中，該葡糖淀粉酶基本上由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在其他相關實施例中，該葡糖淀粉酶由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在根據(jù)本發(fā)明的方法中使用的α-淀粉酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成i)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；ii)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列；iii)變體氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。在相關實施例中，該α-淀粉酶基本上由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在其他相關的實施例中，該α-淀粉酶由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在具體實施例中，包括或由iii)中所定義的氨基酸序列組成的α-淀粉酶是一種α-淀粉酶的變體，該變體包括或由seqidno:20中定義的氨基酸序列或其成熟多肽組成，其中已做出以下突變：i181*/g182*/n193f(使用seqidno:20中的氨基酸編號)。根據(jù)其他實施例，包括或由iii)中所定義的氨基酸序列組成的α-淀粉酶是一種α-淀粉酶的變體，該變體包括或由seqidno:23中定義的氨基酸序列或其成熟多肽組成，其中已做出以下突變：h156y+a181t+n190f+a209v+q264s(使用seqidno:21中的氨基酸編號)。在甚至另外實施例中，包括或由iii)中所定義的氨基酸序列組成的α-淀粉酶是一種α-淀粉酶的變體，該變體包括或由seqidno:23中定義的氨基酸序列或其成熟多肽組成，其中已做出以下突變：g48a+t49i+g107a+h156y+a181t+n190f+i201f+a209v+q264s(使用seqidno:21中的編號)。在根據(jù)本發(fā)明的方法中使用的普魯蘭酶可以包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成i)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；ii)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列；iii)變體氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。在相關實施例中，該普魯蘭酶基本上由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。在其他相關實施例中，該普魯蘭酶由如上項目i)-iii)中任一項所闡述的氨基酸序列組成。本發(fā)明范圍內(nèi)是多個實施例，其中該葡糖淀粉酶包括或由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成：i)seqidno:12中闡述的氨基酸序列或其成熟多肽，ii)seqidno:12中闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列，和iii)變體氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，例如至少99.5％序列一致性；其中該普魯蘭酶包括或由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成：iv)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列或其成熟多肽；v)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列，和vi)變體氨基酸序列，其與iv)和v)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，例如至少99.5％序列一致性；并且其中該α-淀粉酶包括或由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成：vii)seqidno:18中闡述的氨基酸序列或其成熟多肽，viii)seqidno:18中闡述的氨基酸序列的子序列或其所述成熟多肽的子序列，和iv)變體氨基酸序列，其與vii)和viii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，例如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，例如至少99.5％序列一致性。當相對于“葡糖淀粉酶活性(agu)”的定義如以上所闡述的來測試時，當所述葡糖淀粉酶是如上述所定義的子序列或變體氨基酸序列時，它優(yōu)選地具有各氨基酸(其中它是子序列或變體)的至少80％，例如至少90％的葡糖淀粉酶活性。當相對于“普魯蘭酶活性(npun)”的定義如以上所闡述的來測試時，當所述普魯蘭酶是如上述所定義的子序列或變體氨基酸序列時，它優(yōu)選地具有各氨基酸(其中它是子序列或變體)的至少80％，例如至少90％的普魯蘭酶活性。當相對于“酸性α-淀粉酶單位(fau(a))”或“α-淀粉酶活性(knu)”的定義如以上所闡述而測試時，當以上定義的α-淀粉酶是子序列或變體時，它優(yōu)選地具有選自seqidno:1和17-26或其成熟多肽的各α-淀粉酶(其中它是子序列或變體)的至少80％，如至少90％的α-淀粉酶活性。在本上下文中，α-淀粉酶(包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：seqidno:1、17-19和26或其成熟多肽)被認為是真菌α-淀粉酶，并且活性如相對于“酸性α-淀粉酶單元(fau(a))”的以上定義所提供的來進行測試。α-淀粉酶(包括選自下組的氨基酸序列，該組由以下各項組成：seqidno:20-25或其成熟多肽)被認為是細菌α-淀粉酶，并且活性如相對于“α-淀粉酶活性(knu)”的以上定義所提供的來進行測試。在進一步的方面，本發(fā)明提供了用于從液化淀粉生產(chǎn)葡萄糖糖漿的方法。該方法包括使液化淀粉與在上文描述的根據(jù)本發(fā)明的組合物相接觸。該液化淀粉可以具體地包含從25％-45％干固體(％ds)(w/w％)，例如從25％-40％ds(w/w％)、從30％-38％ds、從32％-38％ds，或例如從34％-36％ds。在進一步的實施例中，該方法包括使液化淀粉在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育。項目1.含有葡糖淀粉酶和普魯蘭酶的組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率高于6，例如高于7，高于8，高于9，或在6-20的范圍內(nèi)，例如在6-19的范圍內(nèi)、在6-18的范圍內(nèi)、在6-17的范圍內(nèi)、在6-16的范圍內(nèi)、在6-15的范圍內(nèi)、在6-14的范圍內(nèi)、在6-13的范圍內(nèi)、在6-12的范圍內(nèi)、在6-11的范圍內(nèi)、在7-20的范圍內(nèi)、在7-19的范圍內(nèi)、在7-18的范圍內(nèi)、在7-17的范圍內(nèi)、在7-16的范圍內(nèi)、在7-15的范圍內(nèi)、在7-14的范圍內(nèi)、在7-13的范圍內(nèi)、在7-12的范圍內(nèi)、在7-11的范圍內(nèi)、在8-20的范圍內(nèi)、在8-19的范圍內(nèi)、在8-18的范圍內(nèi)、在8-17的范圍內(nèi)、在8-16的范圍內(nèi)、在8-15的范圍內(nèi)、在8-14的范圍內(nèi)、在8-13的范圍內(nèi)、在8-12的范圍內(nèi)、在8-11的范圍內(nèi)、在9-20的范圍內(nèi)、在9-19的范圍內(nèi)、在9-18的范圍內(nèi)、在9-17的范圍內(nèi)、在9-16的范圍內(nèi)、在9-15的范圍內(nèi)、在9-14的范圍內(nèi)、在9-13的范圍內(nèi)、在9-12的范圍內(nèi)，或例如在9-11的范圍內(nèi)。2.根據(jù)項目1所述的組合物，其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000、或例如高于5000，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000、或例如高于5000。3.根據(jù)項目1或2所述的組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率高于6，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。4.根據(jù)項目1或2所述的組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在6-20的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。5.根據(jù)項目1或2所述的組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在6-20的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500。6.根據(jù)項目1或2所述的組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在7-15的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。7.根據(jù)項目1或2所述的組合物，其中表示為npun/g的普魯蘭酶活性與表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性的比率在7-15的范圍內(nèi)，并且其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于500，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于100。8.根據(jù)以上項目中任一項所述的組合物，其中所述葡糖淀粉酶選自下組，該組由以下各項組成：黑曲霉葡糖淀粉酶、埃默森籃狀菌葡糖淀粉酶、瓣環(huán)栓菌葡糖淀粉酶、密粘褶菌葡糖淀粉酶、里氏木霉葡糖淀粉酶、特異腐質酶葡糖淀粉酶、和煙曲霉葡糖淀粉酶，及其雜交體和變體。9.根據(jù)以上項目中任一項所述的組合物，其中所述普魯蘭酶選自下組，該組由以下各項組成：脫支芽孢桿菌普魯蘭酶、嗜酸性普魯蘭芽孢桿菌普魯蘭酶，及其雜交體和變體。10.根據(jù)以上項目中任一項所述的組合物，其中該葡糖淀粉酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成i)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列；ii)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列的子序列；iii)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。11.根據(jù)以上項目中任一項所述的組合物，其中該α-淀粉酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成i)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列；ii)是seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列的子序列；iii)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。12.根據(jù)以上項目中任一項所述的組合物，其中該普魯蘭酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成i)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列；ii)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列的子序列；iii)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。13.根據(jù)以上項目中任一項所述的組合物，所述組合物是液體或固體組合物。14.一種用于生產(chǎn)葡萄糖糖漿的方法，該方法包括，i)提供含有液化淀粉的組合物，并且向所述組合物添加葡糖淀粉酶(amg)和普魯蘭酶；ii)使該組合物在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育，并且隨后iii)向所述組合物中添加α-淀粉酶，并且使該組合物在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育。15.根據(jù)項目14所述的方法，其中項目14的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量對應于0.05-0.5agu/gds，例如0.05-0.4agu/gds、0.05-0.35agu/gds、0.05-0.3agu/gds、0.075-0.5agu/gds、0.075-0.4agu/gds、0.075-0.35agu/gds、0.075-0.3agu/gds、0.075-0.5agu/gds、0.1-0.5agu/gds、0.1-0.4agu/gds、0.1-0.35agu/gds、0.1-0.3agu/gds、0.125-0.5agu/gds、0.125-0.4agu/gds、0.125-0.35agu/gds、0.125-0.3agu/gds、0.15-0.5agu/gds、0.15-0.4agu/gds、0.15-0.35agu/gds、0.15-0.3agu/gds、0.175-0.5agu/gds、0.175-0.4agu/gds、0.175-0.35agu/gds、0.175-0.3agu/gds、0.2-0.5agu/gds、0.2-0.4agu/gds、0.2-0.35agu/gds、0.2-0.3agu/gds、0.24-0.5agu/gds、0.24-0.4agu/gds、0.24-0.35agu/gds，或例如0.24-0.26agu/gds。16.根據(jù)項目14-15中任一項所述的方法，其中項目14的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于0.05-5npun(x)/gds，例如0.05-4.5npun(x)/gds、0.05-4npun(x)/gds、0.05-3.5npun(x)/gds、0.05-3npun(x)/gds、0.05-2.5npun(x)/gds、0.1-5npun(x)/gds、0.1-4npun(x)/gds、0.1-3.5npun(x)/gds、0.1-3npun(x)/gds、0.1-2.5npun(x)/gds、0.25-5npun(x)/gds、0.25-4.5npun(x)/gds、0.25-4npun(x)/gds、0.25-3.5npun(x)/gds、0.25-3npun(x)/gds、0.5-5npun(x)/gds、0.5-4.5npun(x)/gds、0.5-4npun(x)/gds、0.5-3.5npun(x)/gds、0.05-3npun(x)/gds、0.5-2.5npun(x)/gds、1.0-5npun(x)/gds、1.0-4.5npun(x)/gds、1.0-4npun(x)/gds、1.0-3.5npun(x)/gds、1.0-3npun(x)/gds、1.0-2.5npun(x)/gds、1.5-5npun(x)/gds、1.5-4.5npun(x)/gds、1.5-4npun(x)/gds、1.5-3.5npun(x)/gds、1.5-3npun(x)/gds、1.5-2.5npun(x)/gds、2-5npun(x)/gds、2-4.5npun(x)/gds、2-4npun(x)/gds、2-3.5npun(x)/gds、2-3npun(x)/gds、2-5npun(x)/gds、2-2.5npun(x)/gds、2.25-5npun(x)/gds、2.25-4.5npun(x)/gds、2.25-4npun(x)/gds、2.25-3.5npun(x)/gds、2.25-3npun(x)/gds、2.25-2.5npun(x)/gds，或例如2.50-2.54npun(x)/gds。17.根據(jù)項目14-16中任一項所述的方法，其中在項目14的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.0005-0.025(fau)(a)/gds，例如0.0005-0.0225(fau)(a)/gds、0.0005-0.02(fau)(a)/gds、0.0005-0.0175(fau)(a)/gds、0.0005-0.015(fau)(a)/gds、0.0005-0.0125(fau)(a)/gds、0.001-0.025(fau)(a)/gds、0.001-0.0225(fau)(a)/gds、0.001-0.02(fau)(a)/gds、0.001-0.0175(fau)(a)/gds、0.001-0.015(fau)(a)/gds、0.001-0.0125(fau)(a)/gds、0.0025-0.025(fau)(a)/gds、0.0025-0.0225(fau)(a)/gds、0.0025-0.02(fau)(a)/gds、0.0025-0.0175(fau)(a)/gds、0.0025-0.015(fau)(a)/gds、0.0025-0.0125(fau)(a)/gds、0.005-0.025(fau)(a)/gds、0.005-0.0225(fau)(a)/gds、0.005-0.02(fau)(a)/gds、0.005-0.0175(fau)(a)/gds、0.005-0.015(fau)(a)/gds、0.005-0.0125(fau)(a)/gds、0.0075-0.025(fau)(a)/gds、0.0075-0.0225(fau)(a)/gds、0.0075-0.02fau(a)/gds、0.0075-0.0175fau(a)/gds、0.0075-0.015fau(a)/gds、0.0075-0.0125fau(a)/gds、0.008-0.025(fau)(a)/gds、0.008-0.0225(fau)(a)/gds、0.008-0.02(fau)(a)/gds、0.008-0.0175(fau)(a)/gds、0.008-0.015(fau)(a)/gds、0.008-0.0125(fau)(a)/gds、0.009-0.0125(fau)(a)/gds，或例如0.01fau(a)/gds，并且如果所述α-淀粉酶是細菌α-淀粉酶，在項目14的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.0005-0.025knu/gds，例如0.0005-0.0225knu/gds、0.0005-0.02knu/gds、0.0005-0.0175knu/gds、0.0005-0.015knu/gds、0.0005-0.0125knu/gds、0.001-0.025knu/gds、0.001-0.0225knu/gds、0.001-0.02knu/gds、0.001-0.0175knu/gds、0.001-0.015knu/gds、0.001-0.0125knu/gds、0.0025-0.025knu/gds、0.0025-0.0225knu/gds、0.0025-0.02knu/gds、0.0025-0.0175knu/gds、0.0025-0.015knu/gds、0.0025-0.0125knu/gds、0.005-0.025knu/gds、0.005-0.0225knu/gds、0.005-0.02knu/gds、0.005-0.0175knu/gds、0.005-0.015knu/gds、0.005-0.0125knu/gds、0.0075-0.025knu/gds、0.0075-0.0225knu/gds、0.0075-0.02knu/gds、0.0075-0.0175knu/gds、0.0075-0.015knu/gds、0.0075-0.0125knu/gds、0.008-0.025knu/gds、0.008-0.0225knu/gds、0.008-0.02knu/gds、0.008-0.0175knu/gds、0.008-0.015knu/gds、0.008-0.0125knu/gds、0.009-0.01knu/gds，或例如0.0095knu/gds。18.根據(jù)項目14-17中任一項所述的方法，其中在項目14的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量對應于0.05-0.5agu/gds，在項目14的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于0.05-5npun(x)/gds，并且如果該α-淀粉酶是真菌α-淀粉酶，在項目14的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.0005-0.025(fau)(a)/gds，并且如果所述α-淀粉酶是細菌α-淀粉酶，添加的α-淀粉酶的量對應于0.0005-0.025knu/gds。19.根據(jù)項目14-17中任一項所述的方法，其中在項目14的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶對應于0.125-0.35agu/gds，在項目14的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于1.5-3.5npun(x)/gds，并且如果該α-淀粉酶是真菌α-淀粉酶，在項目14的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.0025-0.02(fau)(a)/gds，并且如果所述α-淀粉酶是細菌α-淀粉酶，添加的α-淀粉酶的量對應于0.0025-0.02knu/gds。20.根據(jù)項目14-17中任一項所述的方法，其中在項目14的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶對應于0.175-0.3agu/gds，在項目14的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于2-4npun(x)/gds，并且如果該α-淀粉酶是真菌α-淀粉酶，在項目14的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.0075-0.0175fau(a)/gds，并且如果所述α-淀粉酶是細菌α-淀粉酶，添加的α-淀粉酶的量對應于0.0075-0.0175knu/gds。21.根據(jù)項目14-17中任一項所述的方法，其中在項目14的步驟i)中添加的葡糖淀粉酶的量對應于0.2-0.3agu/gds，在項目14的步驟i)中添加的普魯蘭酶的量對應于2-3npun(x)/gds，并且如果該α-淀粉酶是真菌α-淀粉酶，在項目14的步驟iii)中添加的α-淀粉酶的量對應于0.008-0.0125(fau)(a)/gds，并且如果所述α-淀粉酶是細菌α-淀粉酶，添加的α-淀粉酶的量對應于0.008-0.0125knu/gds。22.根據(jù)項目14-21中任一項所述的方法，該方法包括向含有液化淀粉的所述組合物中添加含有葡糖淀粉酶和普魯蘭酶的配制品，其中如果所述配制品包括具有α-淀粉酶活性的多肽，其中如果所述組合物包括具有α-淀粉酶活性的多肽，并且該多肽是真菌來源的，那么在所述組合物中表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為真菌α-淀粉酶單位fau(a)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000、或例如高于5000，并且其中如果該具有α-淀粉酶活性的多肽是細菌來源的，那么表示為agu/g的葡糖淀粉酶活性與表示為kilonovoα-淀粉酶單位(knu)/g的α-淀粉酶活性的比率高于29，例如高于50、高于100、高于200、高于300、高于400、高于500、高于600、高于800、高于1000、高于2000、高于3000、高于4000、或例如高于5000。23.根據(jù)項目14-21中任一項所述的方法，其中在步驟ii)中添加的葡糖淀粉酶和普魯蘭酶處于如在項目1-13中任一項所定義的組合物中。24.根據(jù)項目14-23中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從2-35小時，例如從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從18-35小時、從18-30小時、從18-28小時、從18-26小時、從18-24小時、從18-22小時、從18-20小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從22-35小時、從22-30小時、從22-28小時、從22-26小時、從22-24小時的持續(xù)時間，或例如24小時的持續(xù)時間。25.根據(jù)項目14-24中任一項所述的方法，其中項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-94小時，例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-94小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-94小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-94小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-94小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-94小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-94小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。26.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從2-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-94小時、例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-94小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-94小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-94小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-94小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-94小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-94小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。27.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從2-20小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-94小時、例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-94小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-94小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-94小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-94小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-94小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-94小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。28.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從4-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-92小時、例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-92小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-92小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-92小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-92小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-92小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-92小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-92小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-92小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。29.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從4-22小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-92小時，例如從2-90小時、從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-92小時、從4-90小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-92小時、從10-90小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-92小時、從14-90小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-92小時、從20-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小孩、從20-22小時、從24-92小時、從24-90小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-92小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-92小時、從40-90小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-92小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。30.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從10-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-86小時，例如從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-86小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-86小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-86小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小孩、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-86小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-86小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-86小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-86小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。31.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從10-24小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-86小時，例如從2-80小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-86小時、從4-80小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-86小時、從10-80小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-86小時、從14-80小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-86小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小孩、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-86小時、從24-80小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-86小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-86小時、從40-80小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-86小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。32.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從14-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-70小時、例如從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-94小時、從25-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。33.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從14-26小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-70小時、例如從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-94小時、從25-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。34.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從18-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-78小時、例如從2-74小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-78小時、從4-74小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-74小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-78小時、從14-74小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-78小時、從20-74小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-78小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-78小時、從30-74小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-74小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-78小時、從50-74小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。35.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從18-28小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-78小時、例如從2-74小時、從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-78小時、從4-74小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-74小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-78小時、從14-74小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-78小時、從20-74小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-78小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-78小時、從30-74小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-74小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-78小時、從50-74小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。36.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從20-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-76小時、例如從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-76小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-76小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-76小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-76小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。37.根據(jù)項目14-22中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從20-30小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-76小時、例如從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-76小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-76小時、從10-70小時、從10-60、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-76小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-76小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-76小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-76小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-76小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-76小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-94小時、從60-90小時、從60-80小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。38.根據(jù)項目14-25中任一項所述的方法，其中項目14的步驟ii)中的所述孵育具有從22-35小時的持續(xù)時間，并且項目14的步驟iii)中的所述孵育具有從2-74小時，例如從2-70小時、從2-60小時、從2-55小時、從2-50小時、從2-45小時、從2-40小時、從2-35小時、從2-30小時、從2-28小時、從2-26小時、從2-24小時、從2-22小時、從2-20小時、從2-18小時、從2-16小時、從2-14小時、從2-12小時、從2-10小時、從2-8小時、從4-74小時、從4-70小時、從4-60小時、從4-55小時、從4-50小時、從4-45小時、從4-40小時、從4-35小時、從4-30小時、從4-28小時、從4-26小時、從4-24小時、從4-22小時、從4-20小時、從4-18小時、從4-16小時、從4-14小時、從4-12小時、從4-10小時、從4-8小時、從10-74小時、從10-70小時、從10-60小時、從10-55小時、從10-50小時、從10-45小時、從10-40小時、從10-35小時、從10-30小時、從10-28小時、從10-26小時、從10-24小時、從10-22小時、從10-20小時、從10-18小時、從10-16小時、從10-14小時、從10-12小時、從14-74小時、從14-70小時、從14-60小時、從14-55小時、從14-50小時、從14-45小時、從14-40小時、從14-35小時、從14-30小時、從14-28小時、從14-26小時、從14-24小時、從14-22小時、從14-20小時、從14-18小時、從14-16小時、從20-74小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從25-94小時、從25-90小時、從20-80小時、從20-70小時、從20-60小時、從20-55小時、從20-50小時、從20-45小時、從20-40小時、從20-35小時、從20-30小時、從20-28小時、從20-26小時、從20-24小時、從20-22小時、從24-74小時、從24-70小時、從24-60小時、從24-55小時、從24-50小時、從24-45小時、從24-40小時、從24-35小時、從24-30小時、從24-28小時、從24-26小時、從30-94小時、從30-90小時、從30-80小時、從30-70小時、從30-60小時、從30-55小時、從30-50小時、從30-45小時、從30-40小時、從30-35小時、從40-74小時、從40-70小時、從40-60小時、從40-55小時、從40-50小時、從40-45小時、從50-94小時、從50-90小時、從50-80小時、從50-70小時、從50-60小時、從60-74小時的持續(xù)時間，或例如從60-70小時的持續(xù)時間。39.根據(jù)項目14-38中任一項所述的方法，其中允許進行項目14的步驟iii)中的孵育直到所述組合物中葡萄糖(％dx)的量達到對應于95％(w/w)或更高、例如95.5％(w/w)或更高、95.75％(w/w)或更高、96％(w/w)或更高、96.25％(w/w)或更高、或例如96.75％(w/w)或更高的水平。40.根據(jù)項目14-39中任一項所述的方法，其中從向該含有液化淀粉的組合物中添加所述葡糖淀粉酶(amg)和所述的普魯蘭酶直到該淀粉水解/糖化中止的過程的持續(xù)時間是從24-96小時，例如從24-72小時、從24-64小時、從24-48小時、從24-36小時、從24-32小時、從32-96小時、從32-72小時、從32-64小時、從32-48小時、從32-36小時、從36-96小時、從36-72小時、從36-64小時、從36-48小時、從48-96小時、例如從48-72小時、從48-64小時、從56-96小時、例如從56-72小時，或例如從56-64小時，41.根據(jù)項目14-40中任一項所述的方法，其中該淀粉水解/糖化發(fā)生在3.5-5.0范圍內(nèi)的ph(例如在4.0-4.5范圍內(nèi)的ph)下，以及在59℃-70℃范圍內(nèi)的溫度(例如在59℃-65℃范圍內(nèi)，或例如在59℃-62℃范圍內(nèi))下。42.根據(jù)項目14-41中任一項所述的方法，其中在項目14的步驟i)中提供的該含有液化淀粉的組合物含有從25％-45％干固體(％ds)，例如從25％-40％ds、從28％-38％ds、從30％-38％ds、或例如從33％-36％ds。43.根據(jù)項目14-42中任一項所述的方法，其中該α淀粉酶選自地衣芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌、黑曲霉、土曲霉、或微小根毛酶α淀粉酶，該葡糖淀粉酶選自黑曲霉、煙曲霉、埃默森籃狀菌、瓣環(huán)栓菌、里氏木霉、特異腐質霉、和密粘褶菌葡糖淀粉酶，并且該普魯蘭酶選自脫支芽孢桿菌、或嗜酸性普魯蘭芽孢桿菌普魯蘭酶。44.根據(jù)項目14-43中任一項所述的方法，其中該葡糖淀粉酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成iv)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列；v)seqidno:2-12和27中任一項闡述的氨基酸序列的子序列；vi)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。45.根據(jù)項目14-44中任一項所述的方法，其中該α-淀粉酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成iv)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列；v)seqidno:1和17-26中任一項闡述的氨基酸序列的子序列；vi)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。46.根據(jù)項目14-45中任一項所述的方法，其中該普魯蘭酶包括/基本上由/由選自下組的氨基酸序列組成，該組由以下各項組成iv)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列；v)seqidno:13-16中任一項闡述的氨基酸序列的子序列；vi)氨基酸序列，其與i)和ii)中闡述的氨基酸序列中任一項具有至少70％，如至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，如至少99.5％序列一致性。47.一種從液化淀粉生產(chǎn)葡萄糖糖漿的方法，該方法包括使該液化淀粉與根據(jù)項目1-13中任一項所述的組合物相接觸。48.根據(jù)項目47所述的方法，其中所述液化淀粉含有從25％-45％的干固體(％ds)，例如從25％-40％ds、從30％-38％ds、從32％-38％ds、或例如從34％-36％ds。49.根據(jù)項目47-48中任一項所述的方法，所述方法包括使該液化淀粉在允許淀粉水解/糖化的條件下經(jīng)受孵育。通過以下實例對本發(fā)明進行進一步描述，但不應將其理解為對本發(fā)明范圍的限制。實例實例1將來自玉米淀粉液化的麥芽糊精粉末溶解于水中，同時加熱使?jié){料處于34.2％干固體。使用顯示1.39221的折射指數(shù)度量來測量漿料的固體含量。使用1m鹽酸溶液將漿料調節(jié)至ph為4.3。將該漿料的18克等分試樣添加到具有隔膜帽閉合的18個玻璃反應閃爍管中，并且將其插入加熱器中加熱至61℃的溫度。每個管給出基于下表的酶加料量，并且將另外的水添加到各管中以達到33％的目標干固體。在不同的時間點(36小時和48小時)從各管中經(jīng)由針通過隔膜取1.5ml樣品，并且在105℃下失活5分鐘。將1ml的各失活樣品用4ml去離子水進行稀釋。使用hplc方法dp1-4評估稀釋的樣品，用于測量右旋糖純度(％dp1或％dx、％dp2、％dp3和％dp4+)。來自表1的結果示出了npun/agu比率越高，右旋糖百分比越高。表1示出了0.25agu/gds的恒定agu劑量，在該共混物中，當npun與agu的比率(npun/agu)從10.1增加至30.2，觀察到在峰值處％dx的增加(96.7％至97.0％dx)。具有npun/agu是9或更高的新創(chuàng)建的共混物示出了優(yōu)于商業(yè)產(chǎn)品的0.7％至1％dx的提高。當npun/gds劑量在共混物中保持為恒定時，通過改變agu/gds劑量，沒有觀察到更高的％dx，僅反應速度受到了影響。在具有npun/agu>9的共混物中的％dx的益處不僅僅歸因于形成在36小時顯示較低的2.1％-2.2％dp2的amg(jga98)的低級異麥芽糖的使用，而且還歸因于在36小時較低的％dp3和dp4+。表1.右旋糖含量實例2將來自玉米淀粉液化的麥芽糊精粉末溶解于水中，同時加熱使?jié){料淀粉漿料處于37.8％干固體。使用示出1.39964的折射指數(shù)度量來測量漿料的固體含量。使用1m鹽酸溶液將漿料調節(jié)至ph為4.3。將該漿料的18克等分試樣添加到具有隔膜帽閉合的18個玻璃反應閃爍管中，并且將其插入加熱器中加熱至61℃的溫度。每個管給出基于下表的酶加料量，并且將另外的水添加到各管中以達到30％、33％、或36％的目標干固體。在不同時間點從各管中經(jīng)由針通過隔膜取1.5ml樣品，并且在105℃下失活5分鐘。將1ml的各失活樣品用4ml去離子水進行稀釋。使用hplc方法dp1-4評估稀釋的樣品，用于測量右旋糖純度(％dp1或％dx)。表2示出了在三種不同的固體中，在48小時的右旋糖純度。在所有經(jīng)測試的固體中，新的酶共混物示出了優(yōu)于商業(yè)酶共混物0.8％-0.9％dx的提高。該結構顯示用新的酶共混物在相同的固體上，可以實現(xiàn)較高的dx(0.8％-0.9％dx增加)。還可以在更高的固體上實現(xiàn)相似的右旋糖純度。例如，使用96.5％dx的％dx的新的酶共混物，可以實現(xiàn)36％ds來替代使用dextrozymedx2x的30％ds。表2.右旋糖純度實例3評估由酶共混物與延遲加料的真菌α-淀粉酶(seqidno:15)的糖化，以觀察α-淀粉酶的延遲加料是如何影響dx和糖化速度的。材料與方法使用吉爾森(gilson)液體處理器進行糖化測試，其中經(jīng)由利可來耐高溫淀粉酶(liquozymesupra)制備36％ds的de11麥芽糖糊精，將ph調節(jié)至4.3，并且在60℃下進行糖化。在糖化之前，通過加熱處理將麥芽糖糊精中的任何殘余α-淀粉酶活性失活。在不同的時間點，通過hplc分析漿料的dx(葡萄糖)、dp2、dp3和dp4+的比率。將最初的酶加料量示出在表1中?！盎鶞饰铩笔怯糜谔腔某Ｒ?guī)酶共混物，含有葡糖淀粉酶、普魯蘭酶、和α-淀粉酶，后者具有葡糖淀粉酶的副活性(副活性)。“amg+pul”是葡糖淀粉酶(無α-淀粉酶副活性)和普魯蘭酶的共混物。該樣品體積由于α-淀粉酶摻入僅增加了0.2％，因此在ds中的變化是可以忽略的。用amg+pul共混物孵育24h后，將經(jīng)純化的α-淀粉酶(seqidno:15)以0.01fau(a)/gds加料，并且與基準酶作比較。將酶的加料量和給藥時間示出在表1中。表3.酶加料量結果來自兩個實驗的dx曲線(圖1)和匯總表(表2)示出了相比amg+pul共混物，α-淀粉酶在24h的摻入提高了糖化速度，并且顯著增加了峰值dx。當相比在48h(由許多植物利用的糖化階段)時，由該摻入引起的dx的增加高達0.4％-0.6％。表4.與基準物相比，摻入aa的amg+pul共混物的峰值dx、峰值時間、和在48h的dx結論上述呈現(xiàn)的結果證實了將α-淀粉酶延遲加料至葡糖淀粉酶和普魯蘭酶的共混物可以進一步增加dx和糖化速度兩者。實例4將來自玉米淀粉液化的麥芽糊精粉末溶解于水中，同時加熱使?jié){料淀粉漿料處于37.2％干固體。使用示出1.3982的折射指數(shù)度量來測量漿料的固體含量。使用1m鹽酸溶液將漿料調節(jié)至ph為4.3。將該漿料的18克等分試樣添加到具有隔膜帽閉合的18個玻璃反應閃爍管中，并且將其插入加熱器中加熱至61℃的溫度。每個管給出基于下表的酶加料量，并且將另外的水添加到各管中以達到36％的目標干固體。在不同時間點從各管中經(jīng)由針通過隔膜取1.5ml樣品，并且在105℃下失活5分鐘。將1ml的各失活樣品用4ml去離子水進行稀釋。使用hplc方法dp1-4評估稀釋的樣品，用于測量右旋糖純度(％dp1或％dx)。表5示出了在不同小時處的漿料的右旋糖純度。這些結果示出了當npun/knut高于60時，細菌α淀粉酶的添加對速度和％dx具有積極的效應。使用吉爾森(gilson)液體處理器進行糖化測試，其中經(jīng)由利可來耐高溫淀粉酶(liquozymesupra)制備36％ds的de11麥芽糖糊精，將ph調節(jié)至4.3，并且在60℃下進行糖化。在糖化之前，通過加熱處理將麥芽糖糊精中的任何殘余α-淀粉酶活性失活。最初，將不含有α-淀粉酶副活性的葡糖淀粉酶(seqidno:12)和普魯蘭酶(seqidno:13)的共混物(amg+pul共混物)針對葡糖淀粉酶添加為0.194agu/gds，并且針對普魯蘭酶添加為2.25npun/gds。同時，由通過酶添加導致的稀釋，麥芽糖糊精漿料的ds變成33％。在孵育的不同時期(0-24h)后，將經(jīng)純化的α-淀粉酶(seqidno:18)加料至15μg/gds(對應于0.01fau(a)/gds)，并且與無α-淀粉酶加料(“無aa添加”)的對照相比較。該樣品體積由于α-淀粉酶摻入僅增加了0.2％，因此在ds中的變化是可以忽略的。從用amg+pul共混物孵育開始36h后，取出0.75ml整分試樣，并且通過hplc分析漿料的dx(葡萄糖)、dp2、dp3和dp4+的比率。將α-淀粉酶加料的時間和在36h的dx示出在表6中。表6.α-淀粉酶(seqidno:18)加料的時間以及在36h生成的dx在相同的實驗批次中，替代在0h和24h在seqidno:18中闡述的α淀粉酶，摻入另一種純化自土曲霉(seqidno:26的成熟多肽)的經(jīng)純化的真菌α-淀粉酶am4279至15μg/gds。將α-淀粉酶加料的時間和在36h的dx示出在表7中。表7.α-淀粉酶(seqidno:26的成熟多肽)加料的時間和在36h生成的dx。在相同的實驗批次中，針對葡糖淀粉酶，將另一種amg+pul與代替seqidno:12中闡述的葡糖淀粉酶的來自黑曲霉(seqidno:27的成熟多肽)的葡糖淀粉酶共混物最初加料至0.18agu/gds，同時將普魯蘭酶的加料量保持為2.25npun/gds。將α-淀粉酶(seqidno:18)加料的時間和在36h的dx示出在表8中。表8.α-淀粉酶(seqidno:18)加料的時間以及在36h生成的dx在此描述并且要求保護的本發(fā)明不局限于在此披露的特定方面的范圍，因為這些方面旨在作為本發(fā)明若干方面的說明。任何等同方面預期處于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。實際上，除在此所示和描述的那些之外，對于本領域普通技術人員而言本發(fā)明的不同修改將從前述描述變得清楚。這樣的修改也旨在落入所附權利要求的范圍內(nèi)。在發(fā)生沖突的情況下，以包括定義的本披露為準。序列表<110>諾維信公司（novozymesa/s）<120>葡萄糖糖漿的改進的生產(chǎn)<130>12997-wo-pct<160>27<170>patentin3.5版<210>1<211>616<212>prt<213>黑曲霉（aspergillusniger）<400>1alathrleuaspsertrpleuserasnglualathrvalalaargthr151015alaileleuasnasnileglyalaaspglyalatrpvalserglyala202530aspserglyilevalvalalaserproserthraspasnproasptyr354045phetyrthrtrpthrargaspserglyleuvalleulysthrleuval505560aspleupheargasnglyaspthrserleuleuserthrilegluasn65707580tyrileseralaglnalailevalglnglyileserasnprosergly859095aspleuserserglyalaglyleuglygluprolyspheasnvalasp100105110gluthralatyrthrglysertrpglyargproglnargaspglypro115120125alaleuargalathralametileglypheglyglntrpleuleuasp130135140asnglytyrthrserthralathraspilevaltrpproleuvalarg145150155160asnaspleusertyrvalalaglntyrtrpasnglnthrglytyrasp165170175leutrpglugluvalasnglyserserphephethrilealavalgln180185190hisargalaleuvalgluglyseralaphealathralavalglyser195200205sercyssertrpcysaspserglnalaprogluileleucystyrleu210215220glnserphetrpthrglyserpheileleualaasnpheaspserser225230235240argserglylysaspalaasnthrleuleuglyserilehisthrphe245250255aspproglualaalacysaspaspserthrpheglnprocysserpro260265270argalaleualaasnhislysgluvalvalaspserpheargserile275280285tyrthrleuasnaspglyleuseraspserglualavalalavalgly290295300argtyrprogluaspthrtyrtyrasnglyasnprotrppheleucys305310315320thrleualaalaalagluglnleutyraspalaleutyrglntrpasp325330335lysglnglyserleugluvalthraspvalserleuaspphephelys340345350alaleutyrseraspalaalathrglythrtyrserserserserser355360365thrtyrserserilevalaspalavallysthrphealaaspglyphe370375380valserilevalgluthrhisalaalaserasnglysermetserglu385390395400glntyrasplysseraspglygluglnleuseralaargaspleuthr405410415trpsertyralaalaleuleuthralaasnasnargargasnserval420425430valproalasertrpglygluthrseralaserservalproglythr435440445cysalaalathrseralaileglythrtyrserservalthrvalthr450455460sertrpproserilevalalathrglyglythrthrthrthralathr465470475480prothrglyserglyservalthrserthrserlysthrthralathr485490495alaserlysthrserthrserthrserserthrsercysthrthrpro500505510thralavalalavalthrpheaspleuthralathrthrthrtyrgly515520525gluasniletyrleuvalglyserileserglnleuglyasptrpglu530535540thrseraspglyilealaleuseralaasplystyrthrserserasp545550555560proleutrptyrvalthrvalthrleuproalaglygluserpheglu565570575tyrlyspheileargilegluseraspaspservalglutrpgluser580585590aspproasnargglutyrthrvalproglnalacysglythrserthr595600605alathrvalthraspthrtrparg610615<210>2<211>573<212>prt<213>籬邊粘褶菌（gloeophyllumsepiarium）<400>2mettyrargpheleuvalcysalaleuglyleualaalaservalleu151015alaglnservalaspsertyrvalsersergluglyproilealalys202530alaglyvalleualaasnileglyproasnglyserlysalasergly354045alaseralaglyvalvalvalalaserproserthrseraspproasp505560tyrtrptyrthrtrpthrargaspserserleuvalphelysserleu65707580ileaspglntyrthrthrglyileaspserthrserserleuargthr859095leuileaspaspphevalthralaglualaasnleuglnglnvalser100105110asnproserglythrleuthrthrglyglyleuglygluprolysphe115120125asnvalaspgluthralaphethrglyalatrpglyargproglnarg130135140aspglyproalaleuargserthralaleuilethrtyrglyasntrp145150155160leuleuserasnglyasnthrsertyrvalthrserasnleutrppro165170175ileileglnasnaspleuglytyrvalvalsertyrtrpasnglnser180185190thrtyraspleutrpglugluvalaspserserserphephethrthr195200205alavalglnhisargalaleuarggluglyalaalaphealathrala210215220ileglyglnthrserglnvalsersertyrthrthrglnalaaspasn225230235240leuleucyspheleuglnsertyrtrpasnproserglyglytyrile245250255thralaa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