本文提供了海兔脯氨酸-海兔異亮氨酸(dolaproine-dolaisoleuine)肽類似物，包含這類化合物的藥物組合物，以及用這類化合物治療癌癥的方法。

背景

癌癥是僅次于冠狀動脈疾病的導(dǎo)致人類死亡的第二主要病因。在美國，癌癥占近四分之一的死亡。全球每年有上百萬人死于癌癥。根據(jù)美國癌癥協(xié)會(americancancersociety)所報道，僅在美國，癌癥引起的死亡每年超過五十萬人，并且每年新增確診病例超過150萬。雖然由心臟病引起的死亡已顯著下降，但由癌癥引起的死亡總體呈上升趨勢。除非發(fā)現(xiàn)新藥，預(yù)計到下世紀(jì)早期，癌癥將成為主要死因。

全球有數(shù)種癌癥明顯成為主要?dú)⑹帧Ｌ貏e是肺癌、前列腺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌和膀胱癌代表了癌癥死亡的主要原因。鮮有例外，轉(zhuǎn)移性癌癥是致命的。此外，即使那些患者最初在原發(fā)性癌中存活下來，但一般經(jīng)驗(yàn)表明他們的生活發(fā)生極大改變。許多癌癥患者經(jīng)歷由于顧慮到可能會復(fù)發(fā)或治療失敗導(dǎo)致的嚴(yán)重焦慮。許多患者在治療后經(jīng)歷身體虛弱。此外，許多癌癥患者會經(jīng)歷復(fù)發(fā)。

有前景的新癌癥療法包括尾海兔素和合成尾海兔素類似物如奧瑞他汀(美國專利號5,635,483、5,780,588、6,323,315、和6,884,869；shnyder等，(2007)int.j.oncol.31：353-360；otani，m.等，jpn.j.cancerres.2000，91，837-844；pct國際公開號wo01/18032a3、wo2005/039492、wo2006/132670、和wo2009/095447；fennell，b.j.等，j.antimicrob.chemther.2003，51，833-841)。尾海兔素和奧瑞他汀已顯示干擾微管動力學(xué)，由此破壞細(xì)胞分裂(woyke等(2001)antimicrob.agentsandchemother.45(12)：3580-3584)并具有抗癌(美國專利號5,663,149)和抗真菌活性(pettit等(1998)antimicrob.agentschemother.42∶2961-2965)。不幸的是，盡管初期熱度很高，但在ii期臨床試驗(yàn)中作為單一試劑，尾海兔素10顯示不佳結(jié)果(shnyder(2007)，同上)。奧瑞他汀家族中的某些化合物已經(jīng)顯示作為具有比尾海兔素改善的功效和藥物特性的臨床候選物的更大前景(pettit等，(1995)anti-cancerdrugdes.10：529-544；pettit等，(1998)anti-cancerdrugdes.13：243-277；shnyder(2007)，同上)。已經(jīng)描述了這種結(jié)構(gòu)類型的各種合成類似物(美國專利號6,569,834；美國專利號6,124,431；和pettit等，(2011)j.nat.prod.74：962-968)。

奧瑞他汀具有多種性質(zhì)，使得它們對于藥物開發(fā)而言有吸引力。首先，這些化合物是效力極高。其次，由于肽支架，它們的制備是直接的。第三，它們與一般的肽，或者其他具體癌癥藥物類別相比具有良好的藥物動力學(xué)和代謝概況。

盡管具有顯著的優(yōu)勢，仍然需要具有所需藥物性質(zhì)的新癌癥療法。

概述

本文提供了新海兔脯氨酸-海兔異亮氨酸肽類似物。因此，本文提供了式(i)的化合物：

其中

r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或烷基；

x是-o-，-nr^z-，-s-，或不存在；

其中r^z是-h或烷基；

r³是下式基團(tuán)：

其中r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、或-烷基-n3；

r⁴是下式基團(tuán)：

其中r¹⁷和r¹⁸各自獨(dú)立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h

r⁵是仲丁基或異丁基；

r⁶是-h或烷基；

r⁷和r⁸各自獨(dú)立地是-h、烷基、-co2r^a、conr^br^c、取代或未取代的苯基、或取代或未取代的雜環(huán)；

其中r^a是-h或烷基；

r^b和r^c各自獨(dú)立地是h或烷基；

r⁹是-h或烷基；或者r⁹與r⁴及它們連接的原子一起形成取代或未取代的雜環(huán)烷基環(huán)；

r¹⁰是-h或烷基；

r¹¹是-h或烷基；

r¹²是-h或烷基；

r¹³是-h或烷基；并且

r¹⁴是-h、-oh或烷基；

前提是，當(dāng)x不存在并且r¹⁵、r¹⁶、r¹⁷和r¹⁸各自是甲基時，r⁸不是取代或未取代的苯基、或取代或未取代的雜環(huán)；

或其藥學(xué)上可接受的鹽。

本文還提供了包含有效量的至少一種式(i)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽，和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。

本文還提供了治療患有或診斷患有癌癥的對象的方法，包括向需要這種治療的對象給予有效量的至少一種式(i)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽。

本文還提供了至少一種式(i)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽用于治療需要這種治療的對象中癌癥的用途。

本文還提供了至少一種式(i)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療需要這種治療的對象中癌癥的藥物中的用途。

本文還提供了含有至少一種式(i)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽用于治療需要這種治療的對象中的癌癥，以及使用說明的試劑盒。

本文還提供了包含至少一種式(i)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽的制品，其用于治療需要這種治療的對象中的癌癥。

附圖的簡要說明

圖1顯示了用實(shí)施例2、實(shí)施例4和實(shí)施例6處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖2顯示了用實(shí)施例1、實(shí)施例3和實(shí)施例5處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖3顯示了用實(shí)施例8、實(shí)施例9和實(shí)施例12處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖4顯示了用實(shí)施例7、實(shí)施例10和實(shí)施例11處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖5顯示了用實(shí)施例19、實(shí)施例20和實(shí)施例21處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖6顯示了用實(shí)施例13、實(shí)施例16和實(shí)施例22處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖7顯示了用實(shí)施例14、實(shí)施例15、實(shí)施例18、實(shí)施例20和實(shí)施例23處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖8顯示了用實(shí)施例17、實(shí)施例19、實(shí)施例25和實(shí)施例26處理的微管蛋白的體外微管蛋白聚合數(shù)據(jù)。未處理的(緩沖劑)微管蛋白顯示基線水平的微管蛋白聚合。微管蛋白穩(wěn)定劑(紫杉醇)和微管蛋白去穩(wěn)定劑(對照)用作對照。所有的化合物以10μm的終濃度使用。

圖9顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例1、2、3和紫杉醇的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖10顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hct15細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例1、2、3和紫杉醇的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖11顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例1、2、3和紫杉醇的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖12顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例4、5和6的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖13顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hct15細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例4、5和6的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖14顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例4、5和6的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖15顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例7、8和9的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖16顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hct15細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例7、8和9的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖17顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例7、8和9的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖18顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例10、11和12的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖19顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hct15細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例10、11和12的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖20顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例10、11和12的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖21顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例13、14和15的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖22顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例13、14和15的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖23顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例16、21和22的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖24顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例16、21和22的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖25顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例17、18和19的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖26顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例17、18和19的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖27顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例20和23的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖28顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例20和23的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖29顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用pc3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例25和26的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

圖30顯示了如實(shí)施例b1中所述，在使用hcc-1954細(xì)胞的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中實(shí)施例25和26的結(jié)果。數(shù)據(jù)繪制成與未處理的對照孔相比，存活百分比對比測試化合物濃度。

發(fā)明詳述

為簡便起見，該說明書中引用的出版物的內(nèi)容(包括專利)通過引用納入本文。

本文所用術(shù)語“包含”、“含有”和“包括”以其開放、非限定的含義使用。

為提供更簡明的描述，本文中的一些定量表達(dá)前不使用術(shù)語“約”。應(yīng)理解無論是否明確地使用術(shù)語“約”，本文中的每個含量均表示實(shí)際給定的數(shù)值，且其還表示基于本領(lǐng)域普通技術(shù)所能合理推斷的給定數(shù)值的近似值，包括由于實(shí)驗(yàn)和/或測量條件產(chǎn)生的這類給定數(shù)值的等同值和近似值。

術(shù)語“烷基”其本身或作為其他術(shù)語的部分，是指含有正、仲、叔或環(huán)碳原子的飽和c1-c12烴。具體的烷基是具有1-8個碳原子、1-6個碳原子、或1-4個碳原子的那些。烷基的示例包括但不限于，甲基(me)、乙基(et)、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基(tbu)、正戊基、異戊基、叔戊基、和正己基、異己基。在一些實(shí)施方式中，烷基具有正、仲、或叔碳原子并且沒有環(huán)碳原子。

術(shù)語“烯基”本身或作為其他術(shù)語的部分，是指含有正、仲、叔或環(huán)碳原子的c2-c12烴，其在至少一個位置不飽和，即碳-碳，sp²雙鍵。具體的烯基是具有2-8個碳原子、2-6個碳原子、或2-4個碳原子的那些。示例包括但不限于：乙烯基(-ch＝ch2)、烯丙基(-ch2ch2＝ch2)、環(huán)戊烯基(-c5h7)、和5-己烯基(-ch2ch2ch2ch2ch＝ch2)。在一些實(shí)施方式中，烯基具有正、仲、或叔碳原子并且沒有環(huán)碳原子。

術(shù)語“炔基”本身或作為其他術(shù)語的部分，是指含有正、仲、叔或環(huán)碳原子的c2-c12烴，其具有至少一個不飽和位點(diǎn)，即碳-碳，sp三鍵。具體的炔基是具有2-8個碳原子、2-6個碳原子、或2-4個碳原子的那些。示例包括但不限于：乙炔基(-c≡ch)和2-丙炔基(-ch2c≡ch)。在一些實(shí)施方式中，炔基具有正、仲、或叔碳原子并且沒有環(huán)碳原子。

術(shù)語“烷氧基”是指-o-烷基，其中o是與分子的其他部分的連接點(diǎn)，并且烷基如上定義。

術(shù)語“雜環(huán)烷基”表示飽和或部分飽和的單環(huán)、或稠合、橋連、或螺環(huán)多環(huán)環(huán)結(jié)構(gòu)且每個環(huán)結(jié)構(gòu)含有3至12個選自碳原子和至多三個雜原子(選自氮、氧和硫)的環(huán)原子。特定雜環(huán)烷基是每個環(huán)結(jié)構(gòu)具有3-8個環(huán)原子或5-7個環(huán)原子的那些。該環(huán)結(jié)構(gòu)可任選地含有多至2個碳或硫環(huán)原子上的氧代基團(tuán)。適當(dāng)連接部分形式的示范性實(shí)體包括：

術(shù)語“雜芳基”表示單環(huán)、稠合雙環(huán)或稠合多環(huán)的芳族雜環(huán)(環(huán)結(jié)構(gòu)含有選自碳原子和至多四個雜原子(選自氮、氧和硫)的環(huán)原子)，每個雜環(huán)含有3至12個環(huán)原子。特定雜芳基是每個環(huán)結(jié)構(gòu)具有3-8個環(huán)原子或5-7個環(huán)原子的那些。雜芳基基團(tuán)的示范性示例包括以下實(shí)體(以適當(dāng)連接部分的形式)：

本文所用的術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)的”或“雜環(huán)基”包括上述定義的“雜環(huán)烷基”和“雜芳基”基團(tuán)。

本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識到上文所列或所示的雜環(huán)基、雜芳基和雜環(huán)烷基的種類不是窮舉性的，也可選擇這些定義的術(shù)語范圍內(nèi)的其他種類。

術(shù)語“鹵素”指氯、氟、溴或碘。術(shù)語“鹵代”指氯、氟、溴或碘。

術(shù)語“取代的”表示特定基團(tuán)或部分帶有一個或多個取代基。術(shù)語“未取代的”表示特定基團(tuán)不帶有取代基。術(shù)語“任選取代的”表示特定基團(tuán)是未取代的或被一個或多個取代基取代。在使用術(shù)語“取代的”描述結(jié)構(gòu)系統(tǒng)時，取代可發(fā)生在系統(tǒng)上任意價態(tài)允許的位置上。

本文所述的任何式旨在表示具有該結(jié)構(gòu)式所示結(jié)構(gòu)的化合物及某些變體或形式。具體地，任何本文所示的式的化合物可具有不對稱中心并且因此以不同的對映體形式存在。通式化合物的所有光學(xué)異構(gòu)體和對映異構(gòu)體，及其混合物均被認(rèn)為在該式的范圍內(nèi)。因此，本文所述的任何式旨在表示外消旋體，一種或多種對映體形式、一種或多種非對映異構(gòu)體形式、一種或多種阻旋異構(gòu)體形式，及其混合物。此外，某些結(jié)構(gòu)可以幾何異構(gòu)體(即，順式和反式異構(gòu)體)、互變異構(gòu)體、或阻旋異構(gòu)體存在。另外，任何本文所示的式也旨在表示這類化合物的水合物、溶劑合物、以及無定形和多晶型形式中的任一種，及其混合物，即使這類形式?jīng)]有明確列出。在一些實(shí)施方式中，溶劑是水并且溶劑合物是水合物。

本文給出的任何化學(xué)式也旨在代表化合物的未標(biāo)記的形式以及同位素標(biāo)記形式。同位素標(biāo)記的化合物具有本文給定化學(xué)式所描述的結(jié)構(gòu)，不同之處在于一個或多個原子被具有選擇的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子代替?？蓳饺氡疚乃龌衔锏耐凰氐氖纠洹⑻?、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，分別例如²h、³h、¹¹c、¹³c、¹⁴c、¹⁵n、¹⁸o、¹⁷o、³¹p、³²p、³⁵s、¹⁸f、³⁶cl和¹²⁵i。這類同位素標(biāo)記的化合物可用于代謝研究(優(yōu)選使用¹⁴c)、反應(yīng)動力學(xué)研究(使用例如²h或³h)、包括檢測或成像技術(shù)(如正電子發(fā)射斷層成像術(shù)(pet)或單光子發(fā)射計算體層成像術(shù)(spect))的藥物或底物組織分布試驗(yàn)、或?qū)颊叩姆派湫灾委熤?。具體而言，¹⁸f或¹¹c標(biāo)記的化合物對于pet或spect研究是特別優(yōu)選的。另外，用重同位素如氘(即²h)取代能提供因代謝穩(wěn)定性較高(例如體內(nèi)半衰期延長或劑量要求降低)而產(chǎn)生的某些治療優(yōu)勢。本文所述同位素標(biāo)記化合物及其前藥通?？赏ㄟ^進(jìn)行下面方案或?qū)嵤├椭苽渲泄_的方法來制備，所述方法是用易于獲得的同位素標(biāo)記的試劑取代非同位素標(biāo)記的試劑。

當(dāng)指代任何本文所示的式時，針對特定變量從可能物質(zhì)中選擇特定部分并不旨在限定針對他處出現(xiàn)的變量選擇相同物質(zhì)。換而言之，除非另有說明，在出現(xiàn)超過一種變量的情況中，從特定列表中選擇物質(zhì)獨(dú)立于針對式中他處相同變量選擇物質(zhì)。

在本文中對一類取代基使用時，命名法“ci-j”(其中j＞i)表示獨(dú)立地實(shí)現(xiàn)從i至j(包括i和j)的每一個碳原子數(shù)目的本文所述任意組合物、用途或方法的實(shí)施方式。例如，術(shù)語c1-3獨(dú)立地表示含有一個碳原子(c1)的實(shí)施方式、含有兩個碳原子(c2)的實(shí)施方式和含有三個碳原子(c3)的實(shí)施方式。

術(shù)語cn-m烷基是指脂族鏈，無論是直鏈或支鏈，鏈中碳的總數(shù)n滿足n≤n≤m，其中m＞n。

使用autonom^tm軟件生成本文所列的化學(xué)名。如果化學(xué)結(jié)構(gòu)和該結(jié)構(gòu)所列名稱之間存在差異，則以結(jié)構(gòu)為準(zhǔn)。

根據(jù)對分配和命名的上述解釋性考慮，應(yīng)理解本文明示引用組暗示，在化學(xué)上有意義并且除非另外說明，獨(dú)立引用該組的實(shí)施方式，并且引用明示的該組的亞組的可能實(shí)施方式中的每一個。

在一些實(shí)施方式中，r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或烷基，例如c1-6烷基。在一些實(shí)施方式中，r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹和r²各自獨(dú)立地是烷基。在一些實(shí)施方式中，r¹和r²都是甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹和r²都是-h。

在一些實(shí)施方式中，x是不存在。在其它實(shí)施方式中，x是-o-。在一些實(shí)施方式中，r¹和r²各自獨(dú)立地是烷基，并且x不存在。在一些實(shí)施方式中，r¹和r²都是甲基，并且x不存在。在其他實(shí)施方式中，r¹和r²都是-h，并且x是-o-。在一些實(shí)施方式中，x是-nr^z-，其中r^z是-h或烷基。在一些實(shí)施方式中，r^z是-h。在一些實(shí)施方式中，x是r^z是烷基，例如c1-6烷基或甲基。

在某些實(shí)施方式中，r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、或-烷基-n3。在其他實(shí)施方式中，r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、烷基、-(ch2)0-6c≡ch、-(ch2)0-6ch＝ch2、-(ch2)0-6oh、-(ch2)0-6nh2、-(ch2)0-6sh、或-(ch2)0-6n3。在一些實(shí)施方式中，r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh、或烷基。在一些實(shí)施方式中，r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh、或甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹⁵是-oh，且r¹⁶是氫。在一些實(shí)施方式中，r¹⁵是-oh，且r¹⁶是甲基。

在某些實(shí)施方式中，r³相對于分子的其他部分處于r立體化學(xué)構(gòu)型。在其他實(shí)施方式中，r³相對于分子的其他部分處于s立體化學(xué)構(gòu)型。在某些實(shí)施方式中，r³基團(tuán)本身含有一個或多個手性中心，并且這些立體中心各自獨(dú)立地處于r或s構(gòu)型。

在某些實(shí)施方式中，r⁴是其中r¹⁷和r¹⁸各自獨(dú)立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h。在其他實(shí)施方式中，r⁴是其中r¹⁷是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h，并且r¹⁸是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h。在其他實(shí)施方式中，r¹⁷和r¹⁸各自獨(dú)立地是-h、烷基、-(ch2)0-6c≡ch、-(ch2)0-6ch＝ch2、-(ch2)0-6oh、-(ch2)0-6nh2、-(ch2)0-6sh、或-(ch2)0-6n3。在一些實(shí)施方式中，r¹⁷和r¹⁸各自獨(dú)立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、-烷基-nh2，或-烷基-n3。在一些實(shí)施方式中，r¹⁷和r¹⁸各自獨(dú)立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、甲基、-ch2nh2，或-ch2n3。

在某些實(shí)施方式中，r⁴與r⁹及它們連接的原子一起形成取代或未取代的雜環(huán)烷基環(huán)。在某些實(shí)施方式中，r⁴與r⁹及它們連接的原子一起形成5至7元雜環(huán)烷基環(huán)，其可以是未取代的或被一個或多個選自-oh、-nh2、-sh、和-n3的基團(tuán)取代。在某些實(shí)施方式中，雜環(huán)烷基環(huán)是吡咯環(huán)，其可以是未取代的或被一個或多個選自-oh、-nh2、-sh和-n3的基團(tuán)取代。

在某些實(shí)施方式中，r⁴相對于分子的其他部分處于r立體化學(xué)構(gòu)型。在其他實(shí)施方式中，r⁴相對于分子的其他部分處于s立體化學(xué)構(gòu)型。在某些實(shí)施方式中，r⁴基團(tuán)本身含有一個或多個手性中心，并且這些立體中心各自獨(dú)立地處于r或s構(gòu)型。

在某些實(shí)施方式中，r⁵是仲丁基。在其它實(shí)施方式中，r⁵是異丁基。在某些實(shí)施方式中，r⁵相對于分子的其他部分處于r立體化學(xué)構(gòu)型。在其他實(shí)施方式中，r⁵相對于分子的其他部分處于s立體化學(xué)構(gòu)型。在一些實(shí)施方式中，r⁵基團(tuán)內(nèi)的手性中心處于r構(gòu)型，并且在其他實(shí)施方式中，該中心處于s構(gòu)型。

在某些實(shí)施方式中，r⁶是-h。在其他實(shí)施方式中，r⁶是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。

在一些實(shí)施方式中，r⁷和r⁸各自獨(dú)立地是-h、烷基、-co2r^a或-conr^br^c；其中r^a是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r^b和r^c各自獨(dú)立地是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基。

在某些實(shí)施方式中，r⁷和r⁸各自獨(dú)立地是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的雜環(huán)，其中苯基或雜環(huán)可被一個或多個選自鹵素、氧代、羥基、氨基、烷基和烷氧基的基團(tuán)取代。在某些其他實(shí)施方式中，r⁷是未取代的3至8元雜環(huán)。在某些其他實(shí)施方式中，r⁷是取代的3至8元雜環(huán)。在某些其他實(shí)施方式中，r⁸是任選地被鹵素取代的苯基。

在某些實(shí)施方式中，r⁷相對于分子的其他部分處于r立體化學(xué)構(gòu)型。在其他實(shí)施方式中，r⁷相對于分子的其他部分處于s立體化學(xué)構(gòu)型。

在某些實(shí)施方式中，r⁸相對于分子的其他部分處于r立體化學(xué)構(gòu)型。在其他實(shí)施方式中，r⁸相對于分子的其他部分處于s立體化學(xué)構(gòu)型。

在一些實(shí)施方式中，r⁷是-co2r^a-conr^br^c；四唑基或噻唑基，其中r^a是-h或烷基，例如c1-6烷基或甲基；并且r^b和r^c各自獨(dú)立地是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r⁸是任選地被鹵素取代的苯基。

在一些實(shí)施方式中，r⁹是-h。在其他實(shí)施方式中，r⁹是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些實(shí)施方式中，r⁹是-h或甲基。在一些實(shí)施方式中，r⁹是甲基。

在一些實(shí)施方式中，r¹⁰是-h。在其他實(shí)施方式中，r¹⁰是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些實(shí)施方式中，r¹⁰是-h或甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹⁰是甲基。

在一些實(shí)施方式中，r¹¹是-h。在其他實(shí)施方式中，r¹¹是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些實(shí)施方式中，r¹¹是-h或甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹¹是甲基。

在一些實(shí)施方式中，r¹²是-h。在其他實(shí)施方式中，r¹²是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些實(shí)施方式中，r¹²是-h或甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹²是甲基。

在一些實(shí)施方式中，r¹³是-h。在其他實(shí)施方式中，r¹³是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基或乙基。在一些實(shí)施方式中，r¹³是-h或甲基。在一些實(shí)施方式中，r¹³是甲基。

在一些實(shí)施方式中，r¹⁴是-h。在一些實(shí)施方式中，r¹⁴是烷基，例如，c1-6烷基、甲基、或乙基。在一些實(shí)施方式中，r¹⁴是-oh。

在某些實(shí)施方式中，r¹⁴相對于分子的其他部分處于r立體化學(xué)構(gòu)型。在其他實(shí)施方式中，r¹⁴相對于分子的其他部分處于s立體化學(xué)構(gòu)型。

在一些實(shí)施方式中，r⁷是-co2r^a，其中r^a是-h或烷基，例如c1-6烷基或甲基；r⁸是苯基；并且r¹⁴是-h。在一些實(shí)施方式中，r⁷是-conr^br^c，其中r^b和r^c各自獨(dú)立地是-h或烷基，例如c1-6烷基或甲基；r⁸是苯基；并且r¹⁴是-h。在一些實(shí)施方式中，r⁷是烷基，例如c1-6烷基或甲基；r⁸是苯基；并且r¹⁴是-oh。在一些實(shí)施方式中，r⁷是甲基、r⁸是苯基，并且r¹⁴是-oh。在一些實(shí)施方式中，r⁷和r¹⁴都是-h，并且r⁸是吡啶基、哌啶基、未取代的苯基、或被鹵素例如氟、氯或溴取代的苯基。在一些實(shí)施方式中，r⁷是-co2r^a，其中r^a是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；r⁸是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r¹⁴是烷基，例如，c1-6烷基、甲基，或乙基。在一些實(shí)施方式中，r⁷是-co2r^a，其中r^a是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；r⁸是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r¹⁴是-oh。

在某些實(shí)施方式中，

r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或c1-6烷基；

x是-o-，或不存在；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh、或c1-6烷基；

r⁴是其中r¹⁷是-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、-c1-6烷基-nh2、炔基、烯基、或-c1-6烷基-n3；并且r¹⁸是-h或c1-6烷基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、c1-6烷基、-co2r^a、-conr^br^c、四唑基或噻唑基；其中r^a是-h或c1-6烷基；并且r^b和r^c各自是-h或c1-6烷基；

r⁸是-h、c1-6烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的雜環(huán)；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²、和r¹³各自獨(dú)立地是c1-6烷基；并且

r¹⁴是h、c1-6烷基或-oh。

在某些實(shí)施方式中，

r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或甲基；

x是-o-，或不存在；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh，或甲基；

r⁴是其中r¹⁷是-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、氨基甲基、炔基、烯基、或疊氮甲基；并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、甲基、-co2r^a、或-conr^br^c；其中r^a是-h或甲基；并且r^b和r^c各自是-h或甲基；

r⁸是-h、甲基、乙基、吡啶基、哌啶基、未取代的苯基、被鹵素取代的苯基；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自是甲基；并且

r¹⁴是-h、甲基或-oh。

在某些實(shí)施方式中，

r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或c1-6烷基；

x不存在；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh或c1-6烷基；

r⁴是其中r¹⁷是-n3，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、c1-6烷基、-co2r^a、-conr^br^c、四唑基或噻唑基；其中r^a是-h或c1-6烷基；并且r^b和r^c各自是-h或c1-6烷基；

r⁸是-h、c1-6烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的雜環(huán)；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自獨(dú)立地是c1-6烷基；并且

r¹⁴是h、c1-6烷基或-oh。

在某些實(shí)施方式中，

r¹和r²各自獨(dú)立地是-h或c1-6烷基；

x是-o-；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自獨(dú)立地是-h、-oh或c1-6烷基；

r⁴是其中r¹⁷是-n3，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、c1-6烷基、-co2r^a、-conr^br^c、四唑基或噻唑基；其中r^a是-h或c1-6烷基；并且r^b和r^c各自是-h或c1-6烷基；

r⁸是-h、c1-6烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的雜環(huán)；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自獨(dú)立地是c1-6烷基；并且

r¹⁴是h、c1-6烷基或-oh。

在式(i)的一些實(shí)施方式中，其中，

r¹和r²各自獨(dú)立是甲基；

x不存在；

r³是下式基團(tuán)：

其中r¹⁵和r¹⁶各自是甲基；

r⁴是下式基團(tuán)：

其中r¹⁷是-n3、-nh2、-oh、-sh，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-co2r^a或conr^br^c，

其中r^a是-h或c1-6烷基；

r^b和r^c各自獨(dú)立地是h或c1-6烷基；

r⁸是苯基；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自獨(dú)立地是甲基；并且

r¹⁴是-h。

在式(i)的一些實(shí)施方式中，其中，

r¹和r²各自是-h；

x是-o-；

r³是下式基團(tuán)：

其中r¹⁵和r¹⁶各自是甲基；

r⁴是下式基團(tuán)：

其中r¹⁷是-n3，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-co2r^a或conr^br^c，

其中r^a是-h或c1-6烷基；

r^b和r^c各自獨(dú)立地是h或c1-6烷基；

r⁸是苯基；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自獨(dú)立地是甲基；并且

r¹⁴是-h。

應(yīng)理解，本文提供的任意可變基團(tuán)定義可與本文提供的任意其他可變基團(tuán)定義組合使用，從而考慮化學(xué)上可行的本文提供的可變基團(tuán)的所有可能組合和置換。

在某些實(shí)施方式中，所述式(i)的化合物選自下組：

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-(二甲基氨基)-n-((s)-3-羥基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺；

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-((3r，4s5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s)-2-(二甲基氨基)-n-((2s)-3-羥基-1-(((3r，4s5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺；

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-((3r，4s5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-n-((s)-3-氨基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰胺；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((s)-2-(氨基氧基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n，3-二甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺；

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巰基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巰基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基戊-4-炔酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-纈氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-6-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基己酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，4s)-4-疊氮基-1-(二甲基-l-纈氨酰基)-n-甲基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯；

(s)-3-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-4-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-3-(((s)-1-甲氧基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁酸；

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-絲氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-異亮氨酸甲酯；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯；

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺；

((2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯；

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺；

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸叔丁酯；

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；和

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

及其藥學(xué)上可接受的鹽。

本發(fā)明還提供式(i)的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，優(yōu)選上文所述的那些以及本文所示的特定化合物，以及包括所述鹽的藥學(xué)組合物，以及使用所述鹽的方法。

“藥學(xué)上可接受的鹽”旨在表示本文所示化合物的游離酸或堿的鹽，其沒有毒性、生物學(xué)上可以容忍或者生物學(xué)上適于向?qū)ο蠼o藥。通常參見，s.m.berge等，“pharmaceuticalsalts(《藥用鹽》)”j.pharm.sci.，1977，66，1-19。優(yōu)選的藥學(xué)上可接受的鹽是藥學(xué)上有效并且適于接觸對象組織而沒有過多的毒性、刺激、或過敏反應(yīng)的那些。本文所述的化合物可具有足夠酸性的基團(tuán)、足夠堿性的基團(tuán)，或兩種類型的官能團(tuán)，并且因此與多種無機(jī)或有機(jī)堿，以及無機(jī)和有機(jī)酸反應(yīng)以形成藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽的示例包括酸加成鹽如硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、1，4-丁炔二酸鹽、1，6-己炔二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、甲基磺酸鹽、丙基磺酸鹽、苯磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、和扁桃酸鹽，以及與無機(jī)堿如鈉、鉀、鎂、鈣、鋁等或有機(jī)堿如甲基胺、乙基胺、乙醇胺、賴氨酸、鳥氨酸等的鹽，與各種氨基酸或氨基酸衍生物如乙酰基亮氨酸等的鹽，銨鹽等。

為治療目的，包括本文所述化合物的藥物組合物還可包括一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。藥學(xué)上可接受的賦形劑指沒有毒性且生物學(xué)上適于向?qū)ο蠼o藥的物質(zhì)。這類賦形劑促進(jìn)本文所述化合物的配制和給藥過程且與活性成分相容。藥學(xué)上可接受的賦形劑的示例包括穩(wěn)定劑、潤滑劑、表面活性劑、稀釋劑、抗氧化劑、粘結(jié)劑、著色劑、乳化劑或調(diào)味劑。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，藥物組合物是無菌組合物。

根據(jù)本領(lǐng)域中用于多種劑型制備的常規(guī)方法，本文所述藥物組合物可配制為適當(dāng)藥物溶劑或載劑中的溶液劑、乳劑、混懸劑或分散劑，或者丸劑、片劑、錠劑、栓劑、用于重建的粉末劑或連同固態(tài)載劑的膠囊劑。對于局部使用，優(yōu)選將本文所述的化合物配制為乳膏或軟膏或適用于局部給藥的類似載劑。本文所述的藥物組合物和化合物可在本發(fā)明的方法中通過合適的遞送途徑，例如，口服、經(jīng)鼻、胃腸外、直腸、局部、眼部，或通過吸入給藥。

本文所用術(shù)語“治療”或“處理”旨在指代處于產(chǎn)生治療益處的目的向?qū)ο蠼o予本文所述的化合物。治療包括逆轉(zhuǎn)、緩解、減輕、抑制疾病、紊亂或病癥、或癌癥的一種或多種癥狀的發(fā)展，或降低其嚴(yán)重性。術(shù)語？對象？指需要該治療的哺乳動物患者，例如人。

在本文所述的治療方法中，“有效量”指足以使需要這類治療的對象獲得所需治療益處的量或劑量。本文所述的化合物的有效量或劑量可通過常規(guī)方法(如建模、劑量遞增或臨床試驗(yàn))確定，其中考慮常規(guī)因素，例如給藥或藥物遞送的模式或途徑、試劑的藥代動力學(xué)、感染的嚴(yán)重程度和過程、對象的健康狀態(tài)、病情和體重以及主治醫(yī)生的判斷。示例性劑量的范圍為每天每千克對象體重約1μg至2mg活性化合物，優(yōu)選約0.05至100mg/kg/天、或約1至35mg/kg/天、或約0.1至10mg/kg/天。總劑量可以單個或分開的劑量單元(例如bid、tid、qid)給予。

本文所述的化合物可在藥物組合物或方法中與癌癥治療中的其他活性成分聯(lián)用。其他活性成分可與本文所述的化合物分開給予或者可與本文所述的化合物一起包含在本文所述的藥物組合物中。例如，其他活性成分是已知或發(fā)現(xiàn)有效治療癌癥，包括針對與癌癥相關(guān)的其他靶標(biāo)有活性的那些，諸如但不限于萬珂、利妥昔單抗、氨甲蝶呤、賀賽汀、長春新堿、潑尼松、伊立替康等或其組合。這類組合可用于增加效力、減少一種或多種副作用或減少所需的本發(fā)明化合物劑量。

本文所述的化合物可與癌癥治療中的其他活性成分聯(lián)用，用于藥物組合物或方法。其他活性成分可與本文所述的化合物分開給予或者可與本文所述的化合物一起包含在本文所述的藥物組合物中。例如，其他活性成分是已知或發(fā)現(xiàn)有效治療癌癥，包括針對與癌癥相關(guān)的其他靶標(biāo)有活性的那些，諸如但不限于萬珂、利妥昔單抗、氨甲蝶呤、賀賽汀、長春新堿、潑尼松、伊立替康等或其組合。這類組合可用于增加效力、減少一種或多種副作用或減少所需的本發(fā)明化合物劑量。

現(xiàn)在，通過參考用于本文中通用制備方法的示意性合成方案和之后的具體實(shí)施例來描述式(i)的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識到，為獲得本文中的多種化合物，可對起始材料進(jìn)行適當(dāng)選擇，從而通過適當(dāng)?shù)貛в谢虿粠в斜Ｗo(hù)的反應(yīng)方案使用最終所需的取代基以生成所需的產(chǎn)物?；蛘?，可能需要或想要在最終所需的取代基位置上采用可通過反應(yīng)方案攜帶并在適當(dāng)時可被所需取代基替代的合適基團(tuán)。另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，可使用保護(hù)基團(tuán)來保護(hù)某些官能基團(tuán)(氨基、羧基或側(cè)鏈基團(tuán))免于反應(yīng)條件，并且可在合適時在標(biāo)準(zhǔn)條件下去除這類基團(tuán)。方案a中描述的各反應(yīng)均優(yōu)選在約室溫至所用有機(jī)溶劑的回流溫度的溫度下進(jìn)行。除非另有說明，變量如上文所定義，可參考式(i)。

方案a

參考方案a，式(i)的化合物的制備從海兔異亮氨酸(dil)標(biāo)記的(a)的受保護(hù)酸形式開始(參見pettit等，(1994)j.org.chem.59∶1796-1800)?；衔?a)顯示帶有叔丁基酯保護(hù)基團(tuán)，但本領(lǐng)域技術(shù)人員可選擇合適的替代方式。在標(biāo)準(zhǔn)肽偶聯(lián)條件下實(shí)現(xiàn)與氮保護(hù)的纈氨酸或異亮氨酸衍生物(b)偶聯(lián)，其中pg是合適的氨基保護(hù)基團(tuán)，如boc(叔丁氧基羰基)或芴基甲氧羰基(fmoc)基團(tuán)。例如，反應(yīng)在氰基膦酸二乙酯(depc)、pybrop、pybop、bop、二異丙基碳二亞胺(dic)、二環(huán)己基碳二亞胺(dcc)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(edci)、1-羥基苯并三唑(hobt)、1-羥基-7-氮雜-苯并三唑(hoat)、hbtu(o-苯并三唑-1-基-n，n，n’，n’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)、hatu(o-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)等或其組合存在下進(jìn)行。反應(yīng)一般在叔胺堿，如二異丙基乙基胺存在下進(jìn)行。合適的溶劑包括二氯甲烷、n，n-二甲基甲酰胺(dmf)、二甲亞砜(dmso)、乙酸乙酯等。通過在合適條件下的去保護(hù)去除所得二肽(c)上的氨基保護(hù)基團(tuán)。例如，在pg是boc基團(tuán)的情況中，用三氟乙酸處理化合物(c)以形成游離胺(d)。在pg是fmoc基團(tuán)的情況中，用哌啶或二乙基胺處理化合物(c)以產(chǎn)生化合物(d)。在上述的肽偶聯(lián)條件下，化合物(d)然后偶聯(lián)至氨基酸衍生物(e)(如果需要，以保護(hù)形式)以生成三肽(f)。用酸處理去除羧基保護(hù)基團(tuán)以提供游離酸(g)。

方案b

參考方案b，在上述肽偶聯(lián)條件下，命名為(h)的氨基保護(hù)海兔脯氨酸(dap)(參見pettit等，(1994)j.org.chem.59∶6287-6295)與胺(j)(其使用本領(lǐng)域已知的方法制備)偶聯(lián)。如方案a所述，所得的二肽(k)受保護(hù)以提供化合物(l)。

方案c

參考方案c，酸(g)和胺(l)在上述肽偶聯(lián)條件下偶聯(lián)以提供式(i)的化合物。在反應(yīng)產(chǎn)物是式(i)的保護(hù)形式的情況中，采用合適的去保護(hù)條件以得到目標(biāo)化合物。

實(shí)施例

提供以下實(shí)施例以顯示，但不限制本文提供的組合物、用途和方法。使用上述通用方法制備化合物。

在實(shí)施例中使用以下化學(xué)縮寫：dov(海兔纈氨酸)；abu(2-氨基丁酸)；dil(海兔異亮氨酸)；dpr(2，3-二氨基丙酸)；su(琥珀酰亞胺基)；dab(2，4-二氨基丁酸)；dap(海兔脯氨酸)；bzl(芐基)；和tr(三苯甲基)。

在40℃下使用以下方法之一(所示)，在aquityuplcbehc81.7μm2.1x50mm柱上獲取lcms停留時間：

方法a：0-0.50分鐘：等度80水/10乙腈/10水中1％甲酸；0.50-3.50分鐘：線性梯度80水/10乙腈/10水中1％甲酸至0水/90乙腈/10水中1％甲酸；3.50-3.99分鐘等度0水/90乙腈/10水中1％甲酸；3.99-4.00分鐘線性梯度0水/90乙腈/10水中1％甲酸至80水/10乙腈/10水中1％甲酸。

方法b：0-0.50分鐘：等度85水/5乙腈/10水中1％甲酸；0.50-1.60分鐘：線性梯度85水/5乙腈/10水中1％甲酸至0水/98乙腈/2水中1％甲酸；1.60-1.80分鐘等度0水/98乙腈/2水中1％甲酸；1.80-1.90分鐘線性梯度0水/98乙腈/10水中1％甲酸至85水/10乙腈/5水中1％甲酸；1.90-2.00分鐘等度85水/5乙腈/10水中1％甲酸。

實(shí)施例1

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(8.00g，17.1mmol)和h-phe-omehcl鹽(4.42g，20.5mmol)的攪拌的室溫懸液中添加二異丙基乙基胺(diea；9.13ml，51.3mmol)，之后添加焦碳酸二乙酯(depc；5.15ml，34.2mmol)。10小時后，通過液相色譜/質(zhì)譜(lcms)的分析顯示反應(yīng)完成。使用ch2cl2中2％至10％meoh作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離boc-dap-phe-ome。獲得總共7.45g的boc-dap-phe-ome(16.61mmol，97％產(chǎn)率)。

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-phe-ome(4.67g，10.4mmol)的攪拌的室溫溶液添加三氟乙酸(tfa；10ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.52g的h-dap-phe-ome的tfa鹽(6.23mmol，59％)。

向乙酸乙酯(etoac；15ml)中fmoc-ser(bzl)-oh(2.82g，6.76mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(2.00g，6.76mmol)的攪拌的室溫溶液中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷卻至(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷卻至(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加2-氯-1-甲基碘化吡啶鎓(cmpi；2.76g，10.8mmol)并且使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(150mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。使用己烷中18％至90％etoac作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離fmoc-ser(bzl)-dil-otbu。獲得總共3.75g的fmoc-ser(bzl)-dil-otbu(5.69mmol，84％產(chǎn)率)。

向mecn(5ml)中fmoc-ser(bzl)-dil-otbu(1.79g，2.72mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(4ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-ser(bzl)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-ser(bzl)-dil-otbu和dov(0.790g，5.44mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.45ml，8.16mmol)，之后添加hatu(2.07g，5.44mmol)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.882g的dov-ser(bzl)-dil-otbu的tfa鹽(1.30mmol，48％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-otbu(0.288g，0.425mmol)的室溫溶液中添加tfa(4ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa鹽和h-dap-phe-ometfa鹽(0.163g，0.467mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.45ml，1.70mmol)，之后添加hatu(0.323g，0.850mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.217g的dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ome的tfa鹽(0.228mmol，54％)。

在回流條件下，對meoh(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ometfa鹽(0.217g，0.228mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，0.174g)的攪拌室溫懸液進(jìn)行氫化。48小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且將濾液濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.104g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.121mmol，47％)。lcmsrt＝2.32分鐘(方法a)；esi-msm/z748.72[m+h]⁺；hrmsm/z748.4846[c39h65n5o9+h]⁺.

實(shí)施例2

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(15ml)中fmoc-thr(bzl)-oh(2.92g，6.76mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(2.00g，6.76mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加cmpi(2.76g，10.8mmol)并且使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。使用己烷中18％至90％etoac作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離fmoc-thr(bzl)-dil-otbu。獲得總共3.71g的fmoc-thr(bzl)-dil-otbu(5.51mmol，82％產(chǎn)率)。

向mecn(5ml)中fmoc-thr(bzl)-dil-otbu(3.71g，5.51mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(4ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-thr(bzl)-dil-otbu。

向dmf(20ml)中粗h-thr(bzl)-dil-otbu和dov(1.60g，11.0mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(2.95ml，16.5mmol)，之后添加hatu(4.19g，11.0mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共1.09g的dov-ser(bzl)-dil-otbu的tfa鹽(1.58mmol，29％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-otbutfa鹽(0.331g，0.478mmol)的室溫溶液中添加tfa(4ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa鹽和h-dap-phe-ometfa鹽(0.183g，0.526mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.341ml，1.92mmol)，之后添加hatu(0.364g，0.957mmol)。24小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.290g的dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ome的tfa鹽(0.300mmol，63％)。

對meoh(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ometfa鹽(0.290g，0.300mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，0.232g)的攪拌室溫懸液進(jìn)行氫化。24小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.129g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.147mmol，43％)。lcmsrt＝2.40分鐘(方法a)；esi-msm/z762.75[m+h]⁺；hrmsm/z762.5009[c40h67n5o9+h]⁺.

實(shí)施例3

(s)-2-(二甲基氨基)-n-((s)-3-羥基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(10.0g，21.4mmol)和2-(2-吡啶基)乙基胺(3.83ml，32.0mmol)的攪拌的室溫懸液中添加diea(11.4ml，64.1mmol)，之后添加depc(4.83ml，32.0mmol)。過夜攪拌后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。使用ch2cl2中2％至10％meoh/1％net3作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺。獲得總共7.42g的boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(19.0mmol，89％產(chǎn)率)。

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(7.42g，19.0mmol)的攪拌室溫溶液添加tfa(10ml)。過夜攪拌后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共4.50g的h-dap-(2-吡啶基)乙基胺的tfa鹽(11.1mmol，59％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-otbu(0.287g，0.423mmol)的室溫溶液中添加tfa(4ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa鹽和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.136g，0.466mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.302ml，1.70mmol)，之后添加hatu(0.322g，0.847mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.258g的dov-ser(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺的tfa鹽(0.288mmol，68％)。

對meoh(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.258g，0.330mmol)、甲酸銨(0.062g，0.991mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，0.100g)的攪拌室溫懸液進(jìn)行氫化。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.014g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.017mmol，5％)。lcmsrt＝1.76分鐘(方法a)；esi-msm/z691.56[m+h]⁺；hrmsm/z691.4755[c36h62n6o7+h]⁺.

實(shí)施例4

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-otbu(0.357g，0.618mmol)的室溫溶液中添加tfa(4ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa鹽和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.198g，0.680mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.441ml，2.47mmol)，之后添加hatu(0.470g，1.24mmol)和hobt(0.189g，1.24mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.356gdov-thr(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺的tfa鹽(0.392mmol，63％)。

meoh(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.356g，0.392mmol)、甲酸銨(0.085g，1.35mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，0.175g)的攪拌室溫懸液經(jīng)氫化。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.010g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.012mmol，3％)。lcmsrt＝1.72分鐘(方法a)；esi-msm/z705.56[m+h]⁺；728.33[m+na]⁺；hrmsm/z705.4917[c37h64n6o7+h]⁺.

實(shí)施例5

(2s)-2-(二甲基氨基)-n-((2s)-3-羥基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺

標(biāo)題化合物作為實(shí)施例3中氫化反應(yīng)的副產(chǎn)物獲得。獲得總共0.010g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.001mmol)。lcmsrt＝1.83分鐘(方法a)；esi-msm/z697.76[m+h]⁺；hrmsm/z697.5226[c36h68n6o7+h]⁺.

實(shí)施例6

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

標(biāo)題化合物作為實(shí)施例4中氫化反應(yīng)的副產(chǎn)物獲得。獲得總共0.010g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.012mmol)。lcmsrt＝1.81分鐘(方法a)；esi-msm/z711.43[m+h]⁺；hrmsm/z711.5389[c37h70n6o7+h]⁺.

實(shí)施例7

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中(2s，3s)-fmoc-abu(3-n3)-oh(1.00g，2.74mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(0.810g，2.74mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.880ml，4.93mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加diea(0.880ml，4.93mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加cmpi(1.12g，4.38mmol)并且使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗fmoc-abu(3-n3)-dil-otbu(1.12g，1.84mmol)。

向mecn(10ml)中fmoc-abu(3-n3)-dil-otbu(1.00g，1.65mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(2ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-abu(3-n3)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-abu(3-n3)-dil-otbu和dov(0.478g，3.29mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.880ml，4.94mmol)，之后添加hatu(1.25g，3.29mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.670g的dov-abu(3-n3)-dil-otbu的tfa鹽(1.07mmol，65％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-abu(3-n3)-dil-otbutfa鹽(0.289g，0.425mmol)的室溫溶液中添加tfa(5ml)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中粗dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(1.04g，1.82mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(1.59g，3.44mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.18g，1.60ml，9.11mmol)，之后添加hatu(1.74g，4.56mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共935mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(1.12mmol，49％)。lcmsrt＝1.09分鐘(方法a)；esi-msm/z787.53[m+h]⁺；hrmsm/z787.5072[c40h66n8o8+h]⁺.

實(shí)施例8

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中fmoc-dpr(boc)-oh(1.44g，3.38mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(1.00g，3.38mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(1.08ml，6.08mmol)。溶液冷卻至(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加另外的diea(1.08ml，6.08mmol)并且0℃溶液攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加cmpi(1.38g，5.41mmol)并且使反應(yīng)混合物升溫至室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。使用己烷中18％至90％etoac作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離fmoc-dpr(boc)-dil-otbu。獲得總共1.27g的fmoc-dpr(boc)-dil-otbu(1.90mmol，56％產(chǎn)率)。

向mecn(10ml)中fmoc-thr(bzl)-dil-otbu(1.27g，1.90mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(2ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-dpr(boc)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-dpr(boc)-dil-otbu和dov(0.552g，3.80mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.02ml，5.70mmol)，之后添加hatu(1.45g，3.80mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.598g的dov-dpr(boc)-dil-otbu的tfa鹽(0.871mmol，46％)。

向ch2cl2(10ml)中dov-dpr(boc)-dil-otbutfa鹽(1.52g，2.65mmol)的室溫溶液中添加tfa(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-dpr-dil-ohtfa鹽。

向ch2cl2(10ml)中dov-dpr-dil-ohtfa鹽(1.00g，1.89mmol)和fmoc-osu(0.891g，2.64mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.460ml，2.64mmol)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共1.49g的富集dov-dpr(fmoc)-dil-oh的甲酸鹽。

向dmf(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-oh甲酸鹽(1.20g，1.75mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.982g，2.13mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.970g，1.30ml，7.514mmol)，之后添加hatu(1.43g，3.76mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共1.01g的dov-dpr(fmoc)-dil-dap-phe-ome(1.04mmol，56％)。

向乙腈(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-dap-phe-ome(1.01g，1.04mmol)的攪拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。3小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)溶液中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共413g的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.521mmol，50％)。lcmsrt＝2.10分鐘(方法a)；esi-msm/z747.84[m+h]⁺；hrmsm/z747.5008[c39h66n6o8+h]⁺.

實(shí)施例9

(s)-n-((s)-3-氨基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰胺

向dmf(10ml)中粗dov-dpr(fmoc)-dil-oh和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.230g，0.789mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.511ml，2.87mmol)，之后添加hatu(0.545g，1.43mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(25mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.150gdov-dpr(fmoc)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺的tfa鹽(0.146mmol，20％)。

向mecn(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.150g，0.146mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(2ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.089g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.111mmol，75％)。lcmsrt＝1.52分鐘(方法a)；esi-msm/z690.67[m+h]⁺；hrmsm/z690.4917[c36h63n7o6+h]⁺.

實(shí)施例10

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中n-boc-4-疊氮基-丙氨酸二環(huán)己基胺鹽(1.02g，2.47mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(0.730g，2.74mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.792ml，4.44mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加diea(0.792ml，4.44mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加cmpi(1.01g，3.95mmol)并且使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗n-boc-4-疊氮基-ala-dil-otbu(1.08g，2.29mmol)。

向ch2cl2(5ml)中n-boc-4-疊氮基-ala-dil-otbu(1.08g，2.29mmol)的室溫溶液中添加tfa(3ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-4-疊氮基-ala-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中dov(0.739g，5.09mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.36ml，7.63mmol)，之后添加hatu(1.95g，5.09mmol)。在10分鐘后，向反應(yīng)混合物中添加粗h-4-疊氮基-ala-dil-oh。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.130gdov-4-疊氮基-ala-dil-oh的tfa鹽(0.261mmol，10％)。

向dmf(10ml)中粗dov-4-疊氮基-ala-dil-ohtfa鹽(0.130g，0.261)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.205g，0.588mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.140ml，0.783mmol)，之后添加hatu(0.198g，0.522mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.015g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.017mmol，7％)。lcmsrt＝2.36分鐘(方法a)；esi-msm/z773.48[m+h]⁺；hrmsm/z773.4916[c39h64n8o8+h]⁺.

實(shí)施例11

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中n-boc-4-疊氮基-高丙氨酸二環(huán)己基胺鹽(1.01g，2.37mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(0.700g，2.37mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.759ml，4.26mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加diea(0.759ml，4.26mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加cmpi(0.967g，3.79mmol)并且使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗n-boc-4-疊氮基-高ala-dil-otbu(1.09g，2.25mmol)。

向ch2cl2(5ml)中n-boc-4-疊氮基-高ala-dil-otbu(1.09g，2.25mmol)的室溫溶液中添加tfa(3ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-4-疊氮基-高ala-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中dov(0.652g，4.49mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.20ml，6.73mmol)，之后添加hatu(1.71g，4.49mmol)。在10分鐘后，向反應(yīng)混合物中添加粗h-4-疊氮基-高ala-dil-ohtfa鹽。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.127g的dov-4-疊氮基-高ala-dil-oh的tfa鹽(0.223mmol，10％)。

向dmf(10ml)中粗dov-4-疊氮基-高ala-dil-ohtfa鹽(0.127g，0.223)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.198mmol，0.568mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.140ml，0.783mmol)，之后添加hatu(0.198g，0.522mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.015g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.017mmol，7％)。lcmsrt＝2.38分鐘(方法a)；esi-msm/z787.49[m+h]⁺；hrmsm/z787.5078[c40h66n8o8+h]⁺.

實(shí)施例12

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中fmoc-dab(boc)-oh(1.54g，3.38mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(1.00g，3.38mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(1.08ml，6.08mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加另外的diea(1.08ml，6.08mmol)并且0℃溶液攪拌20分鐘。然后，向反應(yīng)混合物中添加cmpi(1.38g，5.41mmol)并且使反應(yīng)混合物升溫至室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。使用己烷中18％至90％etoac作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離fmoc-dab(boc)-dil-otbu。獲得總共1.18g的fmoc-dpr(boc)-dil-otbu(1.73mmol，51％產(chǎn)率)。

向mecn(10ml)中fmoc-dab(boc)-dil-otbu(1.18g，1.73mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(2ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-dab(boc)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-dab(boc)-dil-otbu和dov(0.502g，3.46mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.925ml，5.19mmol)，之后添加hatu(1.32g，3.46mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.410g的dov-dab(boc)-dil-otbu的tfa鹽(0.583mmol，34％)。

向ch2cl2(10ml)中dov-dab(boc)-dil-otbutfa鹽(0.240g，0.419mmol)的室溫溶液中添加tfa(2ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-dab-dil-ohtfa鹽。

向ch2cl2(5ml)中dov-dab-dil-ohtfa鹽(0.175g，0.406mmol)和fmoc-osu(0.151g，0.447mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.080ml，0.447mmol)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。粗反應(yīng)混合物溶于etoac并用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-dab(fmoc)-dil-oh。

向dmf(10ml)中粗dov-dab(fmoc)-dil-oh(0.363g，0.556mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.194g，0.420mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.291ml，1.67mmol)，之后添加hatu(0.424g，1.11mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(30mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.2％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共449mg的富集dov-dab(fmoc)-dil-dap-phe-ome的甲酸鹽。

向mecn(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-phe-ome甲酸鹽(0.449g)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexgemininxc1810μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共43.0g的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.053mmol，13％)。lcmsrt＝1.24分鐘(方法b)；esi-msm/z761.57[m+h]⁺；hrmsm/z761.5165[c40h68n6o8+h]⁺.

實(shí)施例13

(s)-2-((s)-2-(氨基氧基)-3-甲基丁酰氧基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n，3-二甲基丁酰胺

向在etoac(3ml)中攪拌的h-dil-otbu鹽酸鹽(0.60g。2.03mmol)和fmoc-val-oh(0.829g，2.44mmol)的溶液中添加diea(0.65ml，3.7mmol)。反應(yīng)冷卻至0℃并攪拌20分鐘，之后添加diea(0.65ml，3.7mmol)。反應(yīng)混合物再冷卻(0℃)20分鐘，之后添加cmpi(0.83g，3.7mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用1mhcl(150mlx2)和鹽水(50ml)洗滌反應(yīng)混合物。有機(jī)相在na2so4上干燥，過濾并真空濃縮。使用己烷中18％至90％etoac作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離fmoc-val-dil-otbu。獲得總共1.1g的fmoc-val-dil-otbu(1.9mmol，93％產(chǎn)率)。

向ch2cl2(10ml)中fmoc-val-dil-otbu(0.883g，1.52mmol)和boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(0.451g，1.52mmol)的攪拌室溫懸液添加tfa(5ml)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生粗fmoc-val-dil-oh和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽，其使用不需要進(jìn)一步純化。

向etoac(2ml)中粗h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽和fmoc-val-dil-oh的攪拌室溫懸液中添加diea(1.10ml，6.08mmol)，之后添加depc(0.92ml，6.08mmol)。15小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。反應(yīng)用飽和nahco3溶液(50ml)，之后用水(50mlx2)洗滌。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上過濾并真空濃縮。使用ch2cl2中5％至10％meoh作為洗脫液，痛過硅膠(硅膠40μm，23x123mm)上的快速色譜來純化所得粘稠油狀物。獲得總共0.888g的fmoc-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(1.11mmol，73％產(chǎn)率)。

向ch2cl2(5ml)中fmoc-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(1.75g，2.19mmol)的攪拌室溫溶液添加哌啶(5ml)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生粗h-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺，其使用不需要進(jìn)一步純化。

向dmf(5ml)中粗h-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺和n-boc-n-羥基val-oh(0.390g，1.67mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.797ml，5.02mmol)，之后添加hatu(1.28g，3.34mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(50mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌，在硫酸鎂墊上干燥，過濾并真空濃縮以產(chǎn)生0.563g的粗n-boc-n-羥基val-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(0.712mmol，43％)，其使用不需要進(jìn)一步純化。

向dmf(2ml)中n-boc-n-羥基val-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(0.563g，0.712mmol)的室溫溶液添加tfa(2ml)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.209g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.302mmol，43％)。lcmsrt＝1.70分鐘(方法a)；esi-msm/z691.53[m+h]⁺；hrmsm/z691.4755[c36h62n6o7+h]⁺.

實(shí)施例14

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸

向meoh(10ml)中h-ser(bzl)-oh(0.500g，2.56mmol)和多聚甲醛(1.15g，38.4mmol)的攪拌室溫溶液中添加hco2nh4(0.808g，12.8mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，0.250g)。72小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.168g的n，n-二甲基ser(bzl)-oh的tfa鹽(0.498mmol，19％)。

向ch2cl2(20ml)中fmoc-val-dil-otbu(13.3g，22.8mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(15ml)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-val-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-val-dil-otbu和n，n-二甲基ser(bzl)-ohtfa鹽(0.780g，3.49mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.25ml，6.99mmol)，之后添加hatu(1.77g，4.66mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.220g的n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-otbu的tfa鹽(0.325mmol，14％)。

向ch2cl2(5ml)中n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-otbutfa鹽(0.220g，0.325mmol)的室溫溶液中添加tfa(2ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-ohtfa鹽。

向dmf(5ml)中粗n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-ohtfa鹽(0.166g，0.477mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.207ml，1.30mmol)，之后添加hatu(0.330g，0.868mmol)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.201g的n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-dap-phe-ome的tfa鹽(0.211mmol，49％)。

向meoh(6ml)和水(1.0ml)中n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-dap-phe-ometfa鹽(0.201g，0.211mmol)和nh4hco2(2.00g，31.7mmol)的攪拌室溫懸液中添加10％pd/c(10mg)。在室溫下劇烈攪拌該溶液。10小時后，通過lcms分析顯示反應(yīng)完全，和苯丙氨酸甲酯的水解。反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共63.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.074mmol，31％)。lcmsrt＝2.01分鐘(方法a)；esi-msm/z734.61[m+h]⁺；hrmsm/z734.4715[c38h63n5o9+h]⁺.

實(shí)施例15

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸

向meoh(40ml)中h-thr(bzl)-oh(2.00g，9.56mmol)和多聚甲醛(9.87g，95.6mmol)的攪拌室溫溶液中添加hco2nh4(3.01g，47.8mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，1.00g)。72小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共1.54g的n，n-二甲基thr(bzl)-oh的tfa鹽(4.38mmol，19％)。

向dmf(20ml)中粗h-val-dil-otbu和n，n-二甲基thr(bzl)-ohtfa鹽(1.21g，5.10mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.82ml，10.2mmol)，之后添加hatu(2.59g，6.80mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(15ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.161g的n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-otbu的tfa鹽(0.234mmol，7％)。

向ch2cl2(5ml)中n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-otbutfa鹽(0.220g，0.325mmol)的室溫溶液中添加tfa(2ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-ohtfa鹽。

向dmf(5ml)中粗n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-ohtfa鹽(0.118g，0.339mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.147ml，0.927mmol)，之后添加hatu(0.235g，0.618mmol)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.186g的n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-dap-phe-ome的tfa鹽(0.193mmol，62％)。

向meoh(6ml)和水(1.0ml)中n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-dap-phe-ometfa鹽(0.186g，0.193mmol)和nh4hco2(2.00g，31.7mmol)的攪拌室溫懸液中添加10％pd/c(100mg)。在室溫下劇烈攪拌該溶液。72小時后，通過lcms分析顯示反應(yīng)完全，和苯丙氨酸甲酯的水解。反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共63.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.073mmol，38％)。lcmsrt＝2.04分鐘(方法a)；esi-msm/z748.58[m+h]⁺；hrmsm/z748.4854[c39h65n5o9+h]⁺.

實(shí)施例16

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，55)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向meoh(0.1ml)和thf(0.1ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ometfa鹽(60mg，0.067mmol)的攪拌室溫溶液中添加水(0.1ml)中一水合氫氧化鋰(9.6mg，0.229mmol)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共55.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.062mmol，93％)。lcmsrt＝2.25分鐘(方法a)；esi-msm/z773.45[m+h]⁺；hrmsm/z773.49119[c39h64n8o8+h]⁺.

實(shí)施例17

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺

向ch2cl2(10ml)中n，n-二甲基thr-val-dil-dap-phe-ohtfa鹽(40mg，0.053mmol)的攪拌室溫溶液中加入氯化銨(5.72mg，0.107mmol)、diea(28.6μl，0.160mmol)和edci(30.3mg，0.107mmol)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共28.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.037mmol，70％)。lcmsrt＝2.14分鐘(方法a)；esi-msm/z747.61[m+h]⁺；hrmsm/z747.5017[c39h66n6o8+h]⁺.

實(shí)施例18

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺

向ch2cl2(10ml)中n，n-二甲基ser-val-dil-dap-phe-ohtfa鹽(12mg，0.016mmol)的攪拌室溫溶液中加入氯化銨(1.00mg，0.019mmol)、diea(3.21μl，0.018mmol)和edci(5.09mg，0.018mmol)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共10.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.014mmol，83％)。lcmsrt＝2.07分鐘(方法a)；esi-msm/z733.63[m+h]⁺；hrmsm/z733.4866[c38h64n6o8+h]⁺.

實(shí)施例19

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巰基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(15ml)中fmoc-cys(trt)-oh(3.96g，6.76mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(2.00g，6.76mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷卻(0℃)并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中添加另外的diea(2.17ml，12.2mmol)并且0℃溶液攪拌20分鐘。然后向反應(yīng)混合物中添加cmpi(2.76g，10.8mmol)并且使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。使用己烷中18％至90％etoac作為洗脫液，通過硅膠(硅膠40μm，3.0x17.0cm)上的快速色譜來分離fmoc-cys(trt)-dil-otbu。獲得總共4.73g的fmoc-cys(trt)-dil-otbu(5.72mmol，85％產(chǎn)率)。

向mecn(10ml)中fmoc-cys(trt)-dil-otbu(2.61g，3.16mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(5ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用己烷萃取粗反應(yīng)混合物并且mecn層經(jīng)真空濃縮以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗h-cys(trt)-dil-otbu。

向dmf(15ml)中粗h-cys(trt)-dil-otbu和dov(0.916g，6.31mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(1.69ml，9.47mmol)，之后添加hatu(2.40g，6.31mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共1.40gdov-cys(trt)-dil-otbu的tfa鹽(1.66mmol，52％)。

向ch2cl2(10ml)中dov-cys(trt)-dil-otbutfa鹽(1.40g，1.66mmol)的室溫溶液中添加tfa(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-cys(trt)-dil-ohtfa鹽。

向dmf(10ml)中dov-cys(trt)-dil-ohtfa鹽(0.225g，285mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.139mmol，0.301mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.237ml，1.33mmol)，之后添加hobt(0.102g，0.666mmol)和hatu(0.253g，0.666mmol)。過夜攪拌后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(50mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮，并且使用不需要進(jìn)一步純化。

向dov-cys(trt)-dil-dap-phe-ometfa鹽(0.568g，0.507mmol)的室溫溶液中添加tfa(10ml)。60℃下12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共10.0mg的標(biāo)題化合物的二硫橋二聚體tfa鹽(0.011mmol，3％)。lcmsrt＝2.50分鐘(方法a)；esi-msm/z764.60[m+h]⁺；hrmsm/z763.4547z＝2.

實(shí)施例20

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巰基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向dcm(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(6.47g，13.8mmol)和h-phe-otbuhcl鹽(3.91g，15.2mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(8.78ml，55.2mmol)，之后添加depc(3.12ml，20.7mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-phe-otbu(5.25g，10.7mmol)的攪拌室溫溶液添加tfa(10ml)。12小時后，通過lcms分析顯示反應(yīng)完全，其是游離苯丙氨酸羧酸和tbu酯的混合物。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得2.85g的h-dap-phe-otbutfa鹽的琥珀色油狀物(5.65mmol)并且獲得總共2.01g的h-dap-phe-ohtfa鹽的黃色油狀物(4.49mmol)。

向dmf(10ml)中粗dov-cys(trt)-dil-ohtfa鹽(0.208g)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.144g，0.369mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.219ml，1.23mmol)，之后添加hatu(0.234g，0.615mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.509g的富集dov-cys(trt)-dil-dap-phe-otbu的tfa鹽。

向富集dov-cys(trt)-dil-dap-phe-otbutfa鹽(0.509)的室溫溶液中添加tfa(5ml)。溶液加熱至60℃并攪拌24小時。24小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共56.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.065mmol，25％)。lcmsrt＝2.32分鐘(方法a)；esi-msm/z750.60[m+h]⁺；hrmsm/z750.4460[c38h63n5o8s+h]⁺.

實(shí)施例21

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向dmf(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa鹽(0.232g)和h-dap-phe-otbutfa鹽(0.196g，0.389mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.326ml，1.83mmol)，之后添加hatu(0.348，0.914mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.378gdov-ser(bzl)-dil-dap-phe-otbu的tfa鹽(0.380mmol，98％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-otbutfa鹽(0.455g，0.517mmol)的室溫溶液中添加tfa(2ml)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa鹽。

meoh(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa鹽和活性炭載鈀(10％pd基，10.0mg)的攪拌室溫懸液經(jīng)氫化。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.115g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.136mmol，28％)。lcmsrt＝2.10分鐘(方法a)；esi-msm/z734.61[m+h]⁺；hrmsm/z734.4708[c38h63n5o9+h]⁺.

實(shí)施例22

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羥基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向dmf(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa鹽(0.180g)和h-dap-phe-otbutfa鹽(0.148g，0.294mmol)的攪拌室溫懸液中添加diea(0.246ml，1.38mmol)，之后添加hatu(0.262，0.690mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.298gdov-thr(bzl)-dil-dap-phe-otbu的tfa鹽(0.296mmol，78％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-otbutfa鹽(0.298g，0.296mmol)的室溫溶液中添加tfa(2ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)以產(chǎn)生不需要進(jìn)一步純化使用的粗dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa鹽。

meoh(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa鹽和活性炭載鈀(10％pd基，10.0mg)的攪拌室溫懸液經(jīng)氫化。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共0.120g的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.139mmol，47％)。lcmsrt＝2.22分鐘(方法a)；esi-msm/z748.62[m+h]⁺；hrmsm/z748.4842[c39h65n5o9+h]⁺.

實(shí)施例23

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

meoh(10ml)中n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-dap-phe-ometfa鹽(50.0mg，0.053mmol)和活性炭載鈀(10％pd基，10mg)的攪拌室溫懸液經(jīng)氫化。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾并且濾液經(jīng)濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共8.00mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.009mmol，18％)。lcmsrt＝2.38分鐘(方法a)；esi-msm/z748.57[m+h]⁺；hrmsm/z748.4849[c39h65n5o9+h]⁺.

實(shí)施例24

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羥基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

使用與通用合成方案和實(shí)施例中所述的那些方法類似的方法制備標(biāo)題化合物。

實(shí)施例25

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向thf(0.10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ometfa鹽(10mg，0.011mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.022ml，0.022mmol)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全并且向反應(yīng)混合物中添加h2o(0.05ml)。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共6.00mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.007mmol，62％)。lcmsrt＝2.12分鐘(方法a)；esi-msm/z761.63[m+h]⁺；hrmsm/z761.5159[c40h68n6o8+h]⁺.

實(shí)施例26

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向thf(0.10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ohtfa鹽(10mg，0.011mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.022ml，0.022mmol)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全并且向反應(yīng)混合物中添加h2o(0.05ml)。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共2.00mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.002mmol，21％)。lcmsrt＝2.02分鐘(方法a)；esi-msm/z747.65[m+h]⁺；hrmsm/z747.5008[c39h66n6o8+h]⁺.

實(shí)施例27

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(6.47g，13.8mmol)和苯乙胺(3.914g，15.19mmol)的攪拌25℃溶液中添加diea(8.76ml，55.2mmol)，之后添加depc(3.12ml，20.7mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共4.04g的boc-dap-苯乙胺(10.3mmol)。lcmsrt＝3.00分鐘(方法a)；esi-msm/z391.37[m+h]⁺.

向ch2cl2(15.0ml)中boc-dap-苯乙胺(4.04g，10.3mmol)的攪拌25℃溶液添加tfa(15.0ml)。14小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)并且通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.51g的h-dap-苯乙胺的tfa鹽(6.21mmol)。lcmsrt＝1.72分鐘(方法a)；esi-msm/z291.29[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.300g，0.526mmol)和h-dap-苯乙胺tfa鹽(0.191g，0.471mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.343ml，1.97mmol)，之后添加hatu(0.501g，1.31mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共196mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.233mmol，49％)。lcmsrt＝2.45分鐘(方法a)；esi-msm/z729.55[m+h]⁺；hrmsm/z729.5030[c38h64n8o6+h]⁺.

實(shí)施例28

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(10.0g，0.021mol)和(1r，2s)-(-)-降麻黃堿(3.87g，0.026mol)的攪拌室溫溶液中添加diea(11.4ml，0.064mol)和depc(6.44ml，0.043mol)。14小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)混合物中添加0.1mhcl(20.0ml)。有機(jī)層經(jīng)分離、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物。獲得總共7.92g的boc-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿(18.8mmol，88％)。lcmsrt＝2.25分鐘(方法a)；esi-msm/z421.31[m+h]⁺.

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿(7.92g，18.8mmol)的攪拌室溫溶液添加tfa(10ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。制備總共5.00g的h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿的tfa鹽(11.5mmol，61％)。lcmsrt＝1.10分鐘(方法a)；esi-msm/z321.33[m+h]⁺.

向dmf(5ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.300g，0.526mmol)和h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿tfa鹽(0.211g，0.486mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.351ml，1.97mmol)，之后添加hatu(0.501g，1.31mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共128mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.147mmol，30％)。lcmsrt＝1.95分鐘(方法a)；esi-msm/z759.65[m+h]⁺；hrmsm/z759.5121[c39h66n8o7+h]⁺.

實(shí)施例29

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(5.00g，10.7mmol)和2-(4-氯苯基)乙基胺(1.85g，11.7mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(6.78ml，42.7mmol)和depc(2.41ml，16.0mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共4.25g的boc-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺(10.0mmol，94％)。lcmsrt＝3.10分鐘(方法a)；esi-msm/z425.32[m+h]⁺.

向ch2cl2(15ml)中boc-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺(4.25g，10.0mmol)的攪拌室溫溶液添加tfa(15ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。制備總共2.27g的h-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺的tfa鹽(5.18mmol，52％)。lcmsrt＝2.05分鐘(方法a)；esi-msm/z325.24[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.526g，0.923mmol)和h-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺tfa鹽(0.347g，0.792mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.602ml，3.46mmol)，之后添加hatu(0.878g，2.30mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共596mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.680mmol，85％)。lcmsrt＝2.38分鐘(方法a)；esi-msm/z763.71[m+h]⁺；hrmsm/z763.4633[c38h63n8o6cl+h]⁺.

實(shí)施例30

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(5.00g，10.7mmol)和2-(2-氯苯基)乙基胺(1.85g，11.7mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(4.76ml，26.7mmol)和depc(2.41ml，16.0mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共3.98g的boc-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺(9.37mmol，88％)。lcmsrt＝3.04分鐘(方法a)；esi-msm/z425.23[m+h]⁺.

向ch2cl2(5ml)中boc-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺(3.98g，9.37mmol)的攪拌室溫溶液添加tfa(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。制備總共2.87g的h-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺的tfa鹽(6.55mmol，70％)。lcmsrt＝1.83分鐘(方法a)；esi-msm/z325.22[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.450g，0.789mmol)和h-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺tfa鹽(0.320g，0.731mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.515ml，2.96mmol)，之后添加hatu(0.751g，1.97mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共253mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.289mmol，32％，基于rsm)。lcmsrt＝1.26分鐘(方法b)；esi-msm/z763.60[m+h]⁺；hrmsm/z763.4632[c38h63n8o6cl+h]⁺.

實(shí)施例31

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氧基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.5ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-petfa鹽(25mg，0.030mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.045ml，0.045mmol)。1小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共9.0mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.012mmol，41％)。lcmsrt＝1.02分鐘(方法b)；esi-msm/z703.71[m+h]⁺；hrmsm/z703.5117[c38h66n6o6+h]⁺.

實(shí)施例32

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.3ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-降麻黃堿tfa鹽(27mg，0.031mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.046ml，0.046mmol)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性三氟乙酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共6.8mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.008mmol，26％)。lcmsrt＝1.95分鐘(方法b)；esi-msm/z733.72[m+h]⁺；hrmsm/z733.5227[c39h68n6o7+h]⁺.

實(shí)施例33

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.3ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺tfa鹽(117mg，0.133mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.2ml，0.2mmol)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共9.0mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.011mmol，9％)。lcmsrt＝0.97分鐘(方法b)；esi-msm/z737.51[m+h]⁺；hrmsm/z737.4731[c38h65n6o6cl+h]⁺.

實(shí)施例34

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(1.0ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺甲酸鹽(46mg，0.057mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.085ml，0.085mmol)。1小時后，通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共13.6mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.017mmol，30％)。lcmsrt＝1.03分鐘(方法b)；esi-msm/z737.57[m+h]⁺；hrmsm/z737.4731[c38h65n6o6cl+h]⁺.

實(shí)施例35

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(15ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa鹽(0.450g，0.587mmol)和h-dap-苯乙胺tfa鹽(0.200g，0.495mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.360ml，2.07mmol)，之后添加hatu(0.526g，1.38mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共276mg的富集dov-dab(fmoc)-dil-dap-苯乙胺的甲酸鹽(0.266mmol，54％)。lcmsrt＝1.37分鐘(方法b)；esi-msm/z925.48[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-dap-苯乙胺(0.276g，0.266mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)混合物中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共98.0mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.120mmol，45％)。lcmsrt＝1.02分鐘(方法b)；esi-msm/z703.78[m+h]⁺；hrmsm/z703.5117[c38h66n6o6+h]⁺.

實(shí)施例36

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(15ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa鹽(0.459g，0.599mmol)和h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿tfa鹽(0.225g，0.518mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.376ml，2.11mmol)，之后添加hatu(0.536g，1.41mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共449mg的富集dov-dab(fmoc)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿的甲酸鹽(0.420mmol，81％)。lcmsrt＝1.35分鐘(方法b)；esi-msm/z955.74[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿甲酸鹽(0.449g，0.420mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)混合物中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共53.0mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.068mmol，14％)。lcmsrt＝0.79分鐘(方法b)；esi-msm/z733.71[m+h]⁺；hrmsm/z733.5227[c39h68n6o7+h]⁺.

實(shí)施例37

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa鹽(0.255g，0.333mmol)和h-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺tfa鹽(0.127g，0.290mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.204ml，1.17mmol)，之后添加hatu(0.298g，0.781mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共190mg的dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺的甲酸鹽(0.177mmol，61％)。lcmsrt＝1.49分鐘(方法b)；esi-msm/z959.62[m+h]⁺.

向乙腈(5ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺甲酸鹽(0.190g，0.177mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(5ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)混合物中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共118mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.151mmol，85％)。lcmsrt＝1.06分鐘(方法b)；esi-msm/z737.55[m+h]⁺；hrmsm/z737.4729[c38h65n6o6cl+h]⁺.

實(shí)施例38

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(5ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa鹽(0.306g，0.399mmol)和h-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺tfa鹽(0.170g，0.388mmol)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.300g，400μl，2.29mmol)，之后添加hatu(360mg，0.944mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(10mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemini10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共115mg的dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺的白色固體(0.120mmol，26％)。lcmsrt＝1.40分鐘(方法b)；esi-msm/z959.75[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺(0.115g，0.120mmol)的攪拌室溫溶液中添加哌啶(2ml)。3小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)混合物中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共30.0mg的標(biāo)題化合物的白色固體(0.041mmol，34％)。lcmsrt＝1.15分鐘(方法b)；esi-msm/z737.68[m+h]⁺；hrmsm/z737.4729[c38h65n6o6cl+h]⁺.

實(shí)施例39

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基戊-4-炔酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯

向etoac(10ml)中boc-炔丙基gly-oh(1.00g，4.69mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(1.15g，3.90mmol)的攪拌25℃溶液中添加diea(1.49ml，9.38mmol)。溶液冷卻至(0℃)并且攪拌20分鐘，并且添加額外部分的diea(1.49ml，9.38mmol)并且反應(yīng)混合物在0℃下攪拌20分鐘。然后向反應(yīng)混合物中添加cmpi(1.80g，7.04mmol)，其升溫至室溫并且攪拌12小時。用0.1mhcl(20mlx2)，之后用鹽水(20mlx2)洗滌粗反應(yīng)混合物。有機(jī)餾分在無水硫酸鎂上干燥，過濾，并真空濃縮以得到粗產(chǎn)物。獲得總共2.05g的boc-炔丙基gly-dil-otbu(4.50mmol，96％)。lcmsrt＝3.46分鐘(方法a)；esi-msm/z455.42[m+h]⁺.

向ch2cl2(6ml)中boc-炔丙基gly-dil-otbu(2.05g，4.50mmol)的攪拌25℃溶液添加tfa(6ml)。14小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空濃縮以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共1.30gh-炔丙基gly-dil-oh的tfa鹽(3.16mmol，70％)。

向dmf(10ml)中dov(1.27g，8.71mmol)的攪拌25℃溶液中添加diea(2.33ml，13.1mmol)，之后添加hatu(3.32g，8.71mmol)。10分鐘后，向反應(yīng)中添加dmf中h-炔丙基gly-dil-ohtfa鹽(1.30g，3.16mmol)的溶液。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共455mg的dov-炔丙基gly-dil-oh的tfa鹽(0.844mmol，27％產(chǎn)率)。lcmsrt＝1.65分鐘(方法a)；esi-msm/z425.95[m+h]⁺.

向dmf(15ml)中dov-炔丙基gly-dil-ohtfa鹽(0.198g，0.367mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.156g，0.338)的攪拌室溫溶液中添加diea(0.222ml，1.40mmol)，之后添加hatu(0.355g，0.931mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、用硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共10.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.012mmol，3％)。lcmsrt＝2.50分鐘(方法a)；esi-msm/z756.44[m+h]⁺；hrmsm/z756.4902[c41h65n5o8+h]⁺.

實(shí)施例40

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh甲酸鹽(42.1mg，0.051mmol)、氯化銨(7.9mg，0.148mmol)、tbtu(52.5mg，0.163mmol)的攪拌室溫溶液中添加胡尼堿(0.045ml，0.258mmol)。16小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的使用0.1％水性氫氧化銨中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共13.4mg的標(biāo)題化合物(0.017mmol，33％)。lcmsrt＝1.05分鐘(方法b)；esi-msm/z772.61[m+h]⁺；hrmsm/z772.5078[c39h65n9o7+h]⁺.

實(shí)施例41

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.300g，0.526mmol)和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa鹽(0.287g，0.709mmol)的攪拌23℃溶液中添加diea(343μl，1.97mmol)，之后添加hatu(0.501g，1.31mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共139mg的標(biāo)題化合物(0.190mmol，29％)。lcmsrt＝0.916分鐘(方法b)；esi-msm/z730.64[m+h]⁺；hrmsm/z730.4985[c37h63n9o6+h]⁺.

實(shí)施例42

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh甲酸鹽(24.0mg，0.029mmol)、叔丁基胺鹽酸鹽(7.9mg，0.072mmol)、hatu(24.5mg，0.064mmol)的攪拌室溫溶液中添加胡尼堿(0.022ml，0.124mmol)。18小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氫氧化銨中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共15.4mg的標(biāo)題化合物(0.017mmol，59％)。lcmsrt＝1.27分鐘(方法b)；esi-msm/z828.8[m+h]⁺；hrmsm/z828.5671[c39h66n6o8+h]⁺.

實(shí)施例43

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-纈氨酸甲酯

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(4.00g，8.54mmol)和h-val-omehcl鹽(1.80g，10.7mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(4.44g，6.00ml，34.4mmol)，之后添加hatu(2.15g，2.00ml，0.013mol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共6.80g的無色油狀物的boc-dap-val-ome(17.0mmol，80％)。lcmsrt＝1.33分鐘(方法b)；esi-msm/z401.6[m+h]⁺.

攪拌二噁烷(20ml)中4.0mhcl中boc-dap-val-ome(6.80g，17.0mmol)的23℃懸液。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共4.57g的h-dap-val-ome的鹽酸鹽(13.6mmol，80％)。lcmsrt＝0.726分鐘(方法b)；esi-msm/z301.45[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.144g，0.253mmol)和h-dap-val-omehcl鹽(0.332g，0.985mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.222g，0.300ml，1.72mmol)，之后添加hatu(0.240g，0.631mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共129mg的淡黃色固體的標(biāo)題化合物(0.175mmol，55％)。lcmsrt＝1.15分鐘(方法b)；esi-msm/z739.75[m+h]⁺；hrmsm/z739.5074[c36h66n8o8+h]⁺.

實(shí)施例44

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-6-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)1-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基己酰氨基1-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯

向etoac(20ml)中boc-lys(fmoc)-oh(5.60g，12.0mmol)和h-dil-otbu鹽酸鹽(3.06g，10.9mmol)的攪拌23℃溶液中添加diea(4.44g，6.00ml，34.4mmol)。溶液冷卻至0℃并攪拌0.5小時。0.5小時后，向反應(yīng)混合物中添加其他diea(4.44g，6.00ml，34.4mmol)并且0℃反應(yīng)攪拌0.5小時。然后向反應(yīng)混合物中添加cmpi(4.20g，16.4mmol)，其緩慢升溫至室溫并且攪拌10小時。用1mhcl(30mlx2)，之后用鹽水(25mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。獲得總共7.38g的淡黃色固體的boc-lys(fmoc)-dil-otbu(10.4mmol，86％)。lcmsrt＝1.85分鐘(方法b)；esi-msm/z710.1[m+h]⁺.

攪拌二嗯烷(10.0ml)中4.0mhcl中boc-lys(fmoc)-dil-otbu(7.38g，10.4mmol)的23℃懸液。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共7.05g的淡黃色的h-lys(fmoc)一dil-oh的hcl鹽(0.012mol，89％)。lcmsrt＝1.20分鐘(方法b)；esi-msm/z554.54[m+h]⁺.

向dmf(20ml)中dov-oh(2.50g，17.2mmol)的攪拌23?！鎽乙褐刑砑觗iea(4.44g，6.00ml，0.034mol)，之后添加hatu(4.82g，12.6mmol)。5分鐘后，向反應(yīng)混合物中添加h-lys(fmoc)-dil-ohhcl鹽(7.05g，0.012mol)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810u柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共4.45g的淡黃色固體的dov-lys(fmoc)-dil-oh(6.54mmol，78％)。lcmsrt＝1.21分鐘(方法b)；esi-msm/z681.68[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-lys(fmoc)-dil-oh(2.17g，3.19mmol)和h-dap-ometfa鹽(1.78g，3.85mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(1.65g，2.20ml，12.7mmol)，之后添加hatu(1.94g，5.10mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemini10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.25g的淡黃色固體的dov-lys(fmoc)-dil-dap-phe-ome(2.23mmol，70％)。lcmsrt＝1.29分鐘(方法b)；esi-msm/z1011.77[m+h]⁺.

向乙腈(20ml)中dov-lys(fmoc)-dil-dap-phe-ome(2.25g，2.23mmol)的攪拌23℃懸液中添加哌啶(5ml)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)溶液中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共898mg的白色固體的標(biāo)題化合物(1.14mmol，51％)。lcmsrt＝0.840分鐘(方法b)；esi-msm/z789.5[m+h]⁺；hrmsm/z789.5482[c42h72n6o8+h]⁺.

實(shí)施例45

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，4s)-4-疊氮基-1-(二甲基-l-纈氨酰基)-n-甲基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯

向etoac(20ml)中順式-fmoc-pro(4-n3)-oh(2.00g，5.27mmol)和h-dil-otbuhcl(1.49g，5.27mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(2.22g，3.0ml，17.2mmol)。溶液冷卻至0℃并攪拌0.5小時。向冷卻的反應(yīng)混合物中添加額外的diea(2.22g，3.0ml，17.2mmol)并且0℃反應(yīng)混合物攪拌0.5小時。然后向反應(yīng)混合物中添加cmpi(2.03g，7.93mmol)，其緩慢升溫至室溫并且攪拌10小時。用1mhcl(30mlx2)，之后用鹽水(25mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。該粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可使用。獲得總共3.13g的黃色油狀物的順式-fmoc-pro(4-n3)-dil-otbu(5.05mmol，76％)。lcmsrt＝1.73分鐘(方法b)；esi-msm/z621.46[m+h]⁺.

向乙腈(20ml)中順式-fmoc-pro(4-n3)-dil-otbu(3.13g，4.04mmol)的攪拌23℃溶液中添加哌啶(10ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)混合物中添加己烷。乙腈層經(jīng)真空濃縮，并且不需要進(jìn)一步純化使用粗產(chǎn)物。獲得總共1.57g的澄清油的h-pro(4-n3)-dil-otbu(3.95mmol，88％)。lcmsrt＝1.19分鐘(方法b)；esi-msm/z398.50[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-oh(1.03g，7.12mmol)和h-pro(4-n3)-dil-otbu(1.57g，3.56mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(1.84g，2.50ml，0.014mol)，之后添加hatu(2.03g，5.33mmol)。3小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共817mg的白色固體的dov-pro(4-n3)-dil-otbu(1.56mmol，44％)。lcmsrt＝1.21分鐘(方法b)；esi-msm/z525.28[m+h]⁺.

攪拌3.0hcl中dov-pro(4-n3)-dil-otbu(0.817g，1.56mmol)的23℃懸液。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共704mg的dov-pro(4-n3)-dil-oh的hcl鹽(1.39mmol，89％)。lcmsrt＝0.676分鐘(方法b)；esi-msm/z469.44[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-pro(4-n3)-dil-ohhcl鹽(0.120g，0.256mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(0.143g，0.310mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.132g，0.200ml，1.02mmol)，之后添加hatu(0.156g，0.410mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共37.0mg的黃色固體的標(biāo)題化合物(0.046mmol，18％)。lcmsrt＝1.13分鐘(方法b)；esi-msm/z799.43[m+h]⁺；hrmsm/z799.5064[c41h66n8o8+h]⁺.

實(shí)施例46

(s)-3-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-4-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-3-(((s)-1-甲氧基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基-4-氧代丁酸

向etoac(20ml)中boc-asp(obzl)-oh(5.00g，15.5mmol)和h-dil-otbutfa鹽(4.36g，15.5mmol)的攪拌23℃溶液中添加diea(6.00g，8.10ml，46.41mmol)。反應(yīng)混合物冷卻至0℃并攪拌0.5小時。0.5小時后，向反應(yīng)混合物中添加其他diea(6.00g，8.01ml，46.4mmol)并且攪拌0.5小時。然后向反應(yīng)混合物中添加cmpi(5.93g，23.2mmol)，其緩慢升溫至室溫并且攪拌10小時。用1mhcl(30mlx2)，之后用鹽水(25mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在無水硫酸鈉上干燥，過濾并真空濃縮。該粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可使用。獲得總共7.85g的棕色油狀物的boc-asp(obzl)-dil-otbu(13.9mmol，90％)。lcmsrt＝1.72分鐘(方法b)；esi-msm/z565.3[m+h]⁺.

攪拌二噁烷(20ml)中4.0mhcl中boc-asp(obzl)-dil-otbu(7.85g，13.9mmol)的23℃溶液。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共7.85g的富集h-asp(obzl)-dil-oh的鹽酸鹽。lcmsrt＝0.951分鐘(方法b)；esi-msm/z409.40[m+h]⁺.

向dmf(20ml)中dov-oh(3.00g，20.7mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(6.96g，9.40ml，0.054mol)和hatu(7.60g，19.9mmol)，之后添加富集h-asp(obzl)-dil-ohhcl鹽(7.85g)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.00g的白色固體的dov-asp(obzl)-dil-oh(3.74mmol，28％)。lcmsrt＝1.10分鐘(方法b)；esi-msm/z536.5[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-asp(obzl)-dil-oh(1.00g，1.87mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(1.04g，2.25mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.970g，1.30ml，7.47mmol)，之后添加hatu(1.14g，2.99mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共1.25g的橙色固體的dov-asp(obzl)-dil-dap-phe-ome(1.44mmol，77％)。lcmsrt＝1.21分鐘(方法b)；esi-msm/z866.6[m+h]⁺.

向meoh(10ml)中dov-asp(obzl)-dil-dap-phe-ome(0.525g，0.606mmol)的攪拌23℃懸液中添加10％pd/c(50mg)，之后添加氫氣氛。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物在硅藻土墊上過濾，之后蒸發(fā)揮發(fā)性有機(jī)物。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共6.00mg的白色固體的標(biāo)題化合物(0.008mmol，1％)。lcmsrt＝1.04分鐘(方法b)；esi-msm/z776.43[m+h]⁺；hrmsm/z776.4794[c40h65n5o10+h]⁺.

實(shí)施例47

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氧基)-3-羥基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羥基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(20ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa鹽(561mg，0.883mmol)和h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿tfa鹽(345mg，0.794mmol)的攪拌23℃溶液中添加diea(417mg，562μl，3.23mmol)，之后添加hatu(820mg，2.15mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共326mg的白色固體的dov-thr(bzl)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿(0.396mmol，37％)。lcmsrt＝1.20分鐘(方法b)；esi-msm/z824.76[m+h]⁺.

將meoh(10ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黃堿(326mg，0.396mmol)的攪拌23℃懸液加載到使用rani(catcart)以及升高的溫度(120℃)和壓力(80巴)的連續(xù)流氫化反應(yīng)器中。洗脫后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到粗產(chǎn)物，其通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化。獲得總共15mg的白色固體的標(biāo)題化合物(0.020mmol，5％)。lcmsrt＝1.17分鐘(方法b)；esi-msm/z734.5[m+h]⁺；hrmsm/z734.5053[c39h67n5o8+h]⁺.

實(shí)施例48

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-絲氨酸甲酯

向dmf(10ml)中dov-val-dil-ohtfa鹽(583mg，1.07mmol)和h-dap-ser-ometfa鹽(783mg，1.97mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(223mg，0.324ml，1.72mmol)，之后添加hatu(1.03g，2.71mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共704mg的淡黃色固體的標(biāo)題化合物(1.01mmol，74％)。lcmsrt＝0.917分鐘(方法b)；esi-msm/z700.43[m+h]⁺；hrmsm/z700.4843[c35h65n5o9+h]⁺.

實(shí)施例49

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-異亮氨酸甲酯

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(6.62g，14.1mmol)和h-ile-ome(3.08g，21.2mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(7.30g，9.90ml，56.5mmol)，之后添加hatu(3.44g，3.20ml，0.021mol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共8.56g的棕色油狀物的boc-dap-ile-ome(20.7mmol，88％)。lcmsrt＝1.51分鐘(方法b)；esi-msm/z415.16[m+h]⁺.

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-ile-ome(6.62g，16.0mmol)的攪拌23℃懸液添加tfa(10ml)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共3.55g的黃色固體的h-dap-ile-ome(8.29mmol，52％)。lcmsrt＝0.691分鐘(方法b)；esi-msm/z315.16[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(150mg，0.329mmol)和h-dap-ile-ome(207mg，0.657mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(170mg，0.220ml，1.31mmol)，之后添加hatu(251mg，0.657mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共148mg的淡黃色固體的標(biāo)題化合物(0.197mmol，60％)。lcmsrt＝1.43分鐘(方法b)；esi-msm/z753.48[m+h]⁺；hrmsm/z753.5224[c37h68n8o8+h]⁺.

實(shí)施例50

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.1ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nh2(13.4mg，0.017mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.035ml，0.035mmol)。3小時后，添加額外的三甲基膦(1m，0.020ml，0.020mmol)。另外1小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。溶液用水和dmf稀釋并放置30分鐘。通過用phenomenexgemini-nx10μc18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氫氧化銨中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共5.8mg的標(biāo)題化合物(0.008mmol，45％)。lcmsrt＝0.85分鐘(方法b)；esi-msm/z746.6[m+h]⁺；hrmsm/z746.5173[c39h67n7o7+h]⁺.

實(shí)施例51

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.1ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nht-bu(15.4mg，0.019mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.037ml，0.037mmol)。3小時后，添加額外的三甲基膦(1m，0.020ml，0.020mmol)。另外1小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。反應(yīng)溶液用水和dmf稀釋并放置30分鐘。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氫氧化銨中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共2.7mg的標(biāo)題化合物(0.003mmol，18％)。lcmsrt＝0.85分鐘(方法b)；esi-msm/z746.6[m+h]⁺；hrmsm/z802.5799[c43h75n7o7+h]⁺.

實(shí)施例52

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯

向dmf(10ml)中fmoc-meval-oh(1.03g，2.90mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(1.35ml，7.74mmol)，之后添加hatu(1.11g，2.90mmol)。在5分鐘后，向反應(yīng)混合物中添加h-4-疊氮基-ala-dil-oh(0.610g，2.90mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(15ml)稀釋，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共348mgfmoc-meval-4-疊氮基-ala-dil-oh的黃色油狀物(0.535mmol，28％)。lcmsrt＝1.80分鐘(方法b)；esi-msm/z651.3[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中fmoc-meval-4-疊氮基-ala-dil-oh(348.00mg，0.535mmol)和h-dap-phe-ome(372.66mg，1.07mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(276mg，0.400ml，2.14mmol)，之后添加hatu(408mg，1.07mmol)。10小時后，通過lcms分析顯示反應(yīng)完全，同時出現(xiàn)fmoc基團(tuán)去保護(hù)。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共5.00mg的標(biāo)題化合物(0.006mmol，1％)。lcmsrt＝1.08分鐘(方法b)；esi-msm/z759.5[m+h]⁺；hrmsm/z759.4753[c38h62n8o8+h]⁺.

實(shí)施例53

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸甲酯

向dmf(10ml)中fmoc-meval-oh(2.46g，6.96mmol)和h-abu(3-n3)-dil-otbu(2.46g，6.38mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(3.30g，4.5ml，25.5mmol)，之后添加hatu(3.65g，9.57mmol)。6小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共3.16g的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-otbu的甲酸鹽(4.12mmol，65％)。lcmsrt＝2.08分鐘(方法a)；esi-msm/z722.7[m+h]⁺.

向ch2cl2(5.0ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-otbu甲酸鹽(3.16g，4.12mmol)的攪拌23℃懸液中添加tfa(10.0ml)。14小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)得到油。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.26g的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-oh的tfa鹽(2.90mmol，66％)。lcmsrt＝1.80分鐘(方法b)；esi-msm/z665.3[m+h]⁺.

向dmf(2ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(80.0mg，0.103mmol)和h-dap-phe-ometfa鹽(83.9mg，0.182mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.083mmol，0.481mmol)，之后添加hatu(91.8mg，0.241mmol)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用dmf稀釋并通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化。獲得總共97.0mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ome的甲酸鹽(0.093mmol，77％)。lcmsrt＝1.90分鐘(方法b)；esi-msm/z995.6[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ome(97.0mg，0.093mmol)的攪拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)溶液中添加己烷(25mlx3)以萃取非極性副產(chǎn)物。乙腈層經(jīng)真空濃縮并且通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共74.0mg的白色固體的標(biāo)題化合物(0.096mmol，103％)。lcmsrt＝1.09分鐘(方法b)；esi-msm/z773.5[m+h]⁺；hrmsm/z773.4911[c39h64n8o8+h]⁺.

實(shí)施例54

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺

向ch2cl2(20.0ml)中bod-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(10.0g，21.3mmol)和h-phe-nh2hcl鹽(6.42g，32.0mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(11.0g，14.9ml，85.3mmol)，之后添加depc(5.19g，4.80ml，0.032mol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用h2o(25mlx2)，之后用鹽水(25mlx2)洗滌粗反應(yīng)。有機(jī)餾分在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。使用ch2cl2中2％至10％甲醇作為洗脫劑，通過快速色譜(硅膠40μm，尺寸)純化粗制橙色油狀物。獲得總共7.25g的boc-dap-phe-nh2的黃色油(16.7mmol，78％)。lcmsrt＝1.28分鐘(方法b)；esi-msm/z434.19[m+h]⁺.

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-phe-nh2(7.25g，16.7mmol)的攪拌23℃懸液添加tfa(10ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共6.00g的黃色固體的h-dap-phe-nh2(13.4mmol，80％)。lcmsrt＝0.691分鐘(方法b)；esi-msm/z334.17[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(456mg，0.586mmol)和h-dap-phe-nh2tfa鹽(457mg，1.02mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.350g，0.500ml，2.74mmol)，之后添加hatu(0.520g，1.37mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)。獲得總共526mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nh2的甲酸鹽(0.513mmol，75％)。lcmsrt＝1.81分鐘(方法b)；esi-msm/z980.39[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nh2(525mg，0.513mmol)的攪拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)中添加己烷(15mlx3)。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共354mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.406mmol，79％)。lcmsrt＝1.15分鐘(方法b)；esi-msm/z758.24[m+h]⁺；hrmsm/z758.4915[c38h63n9o7+h]⁺.

實(shí)施例５５

((2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺

向dmf(1.0ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh(111mg，0.113mmol)、叔丁基胺鹽酸鹽(31.5mg，0.287mmol)、hatu(92.0mg，0.242mmol)的攪拌室溫溶液中添加胡尼堿(0.079ml，0.454mmol)。1小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用乙酸乙酯稀釋粗反應(yīng)混合物并且用1nhcl和鹽水洗滌有機(jī)餾分。有機(jī)餾分在硫酸鎂上干燥，過濾，并減壓濃縮。粗制黃色油狀物溶于哌啶(2.0ml)和乙腈(5.0ml)。1小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。乙腈層用乙烷(2x)萃取并且乙腈層經(jīng)減壓濃縮。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氫氧化銨中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共50.3mg的標(biāo)題化合物(0.062mmol，55％)。lcmsrt＝1.29分鐘(方法b)；esi-msm/z814.1[m+h]⁺；hrmsm/z814.5541[c42h71n9o7+h]⁺.

實(shí)施例56

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸叔丁酯

向dcm(20ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(6.47g，13.8mmol)和h-phe-otbu(3.91g，15.2mmol)的攪拌25℃溶液中添加diea(8.76ml，55.2mmol)，之后添加depc(3.12ml，20.7mmol)。8小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共5.35g的boc-dap-phe-otbu(10.9mmol，79％)。lcmsrt＝2.89分鐘(方法a)；esi-msm/z491.48[m+h]⁺.

向ch2cl2(10.0ml)中boc-dap-phe-otbu(5.25g，10.7mmol)的攪拌室溫溶液添加tfa(10.0ml)。12小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.85g的h-dap-phe-otbu的tfa鹽(5.65mmol，68％)。lcmsrt＝1.82分鐘(方法a)；esi-msm/z391.02[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(410mg，0.527mmol)和h-dap-phe-otbutfa鹽(482mg，0.956mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(319mg，430μl，2.47mmol)，之后添加hatu(470mg，1.23mmol)。10小時后，通過lcms分析顯示反應(yīng)完全，同時去除10％的fmoc基團(tuán)。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共26.0mg的標(biāo)題化合物的白色甲酸鹽(0.030mmol，5％)。lcmsrt＝1.41分鐘(方法b)；esi-msm/z815.33[m+h]⁺；hrmsm/z815.5383[c42h70n8o8+h]⁺.

實(shí)施例57

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸

向dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(410mg，0.527mmol)和h-dap-phe-otbutfa鹽(482mg，0.956mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(319mg，430μl，2.47mmol)，之后添加hatu(470mg，1.23mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共648mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-otbu的白色甲酸鹽(0.598mmol，97％)。lcmsrt＝1.41分鐘(方法b)；esi-msm/z1037.41[m+h]⁺.

向ch2cl2(5.00ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-otbu甲酸鹽(648mg，0.598mmol)的攪拌23℃懸液中添加tfa(5.00ml)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)得到棕色油狀物。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共502mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh的tfa鹽(0.458mmol，77％)。lcmsrt＝1.81分鐘(方法b)；esi-msm/z981.22[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ohtfa鹽(392mg，0.382mmol)的攪拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)中添加己烷(15mlx3)。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共360mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽。lcmsrt＝1.19分鐘(方法b)；esi-msm/z759.13[m+h]⁺；hrmsm/z759.4755[c38h62n8o8+h]⁺.

實(shí)施例58

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚?；?吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(327mg，0.574mmol)和h-dap-phe-otbutfa鹽(0.340g，0.675mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.370g，0.500ml，2.87mmol)，之后添加hatu(0.550g，1.43mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)。獲得總共453mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.518mmol，72％)。lcmsrt＝1.42分鐘(方法b)；esi-msm/z828.94[m+h]⁺；hrmsm/z829.5536[c43h72n8o8+h]⁺.

實(shí)施例59

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20.0ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(2.48g，5.29mmol)和(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺(1.00g，5.29mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(2.73g，3.7ml，21.1mmol)，之后添加depc(1.29g，1.20ml，7.93mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共2.52g的boc-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺的甲酸鹽(4.99mmol，94％)。lcmsrt＝1.35分鐘(方法b)；esi-msm/z459.2[m+h]⁺.

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺(2.52g，4.99mmol)的攪拌23℃懸液添加tfa(5.00ml)。5小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物經(jīng)真空蒸發(fā)以得到不需要進(jìn)一步純化使用的粗產(chǎn)物。獲得總共2.43g的h-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺的tfa鹽(5.14mmol，84％)。lcmsrt＝0.575分鐘(方法b)；esi-msm/z359.2[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(305mg，0.668mmol)和h-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺tfa鹽(0.36g，1.002mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.35g，0.5ml，2.67mmol)，之后添加hatu(509mg，1.34mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共47.0mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.056mmol，8％)。lcmsrt＝1.24分鐘(方法b)；esi-msm/z797.3[m+h]⁺；hrmsm/z797.5139[c39h64n12o6+h]⁺.

實(shí)施例60

(2s，3s)-3-疊氮基-n-((3r，4s，s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺

同dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(0.491g，0.631mmol)和h-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺tfa鹽(0.532g，1.13mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.381g，0.500ml，2.97mmol)，之后添加hatu(0.57g，1.486mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共125mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺的甲酸鹽(0.119mmol，16％)。lcmsrt＝1.94分鐘(方法b)；esi-msm/z1005.35[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺(525mg，0.499mmol)的攪拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。向粗反應(yīng)溶液中添加己烷(x3)。乙腈層經(jīng)真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共20.0mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.022mmol，5％)。lcmsrt＝1.37分鐘(方法b)；esi-msm/z783.42[m+h]⁺；hrmsm/z783.4979[c38h62n12o6+h]⁺.

實(shí)施例61

(2s，3s)-3-疊氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20.0ml)中boc-dap-oh二環(huán)己基胺鹽(1.95g，4.154mmol)和(s)-2-苯基-1-(2-四唑2-基)乙基胺(1.00g，4.154mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(2.15g，2.9ml，16.615mmol)，之后添加depc(1.01g，0.9ml，0.006mol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。用h2o(25mlx2)，之后用鹽水(25mlx2)洗滌粗反應(yīng)混合物。有機(jī)餾分在mgso4墊上干燥、過濾并真空濃縮。獲得總共1.65g的黃色油狀物的boc-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺(3.48mmol，84％)。lcmsrt＝1.59分鐘(方法b)；esi-msm/z475.2[m+h]⁺.

向ch2cl2(10.0ml)中boc-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺(1.65g，3.49mmol)的攪拌23℃懸液添加tfa(10.0ml)。4小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。揮發(fā)性有機(jī)物真空蒸發(fā)。粗制油狀物溶于dmf(5ml)和三乙基胺(1ml)以實(shí)現(xiàn)ph8。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共935mg的h-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺的tfa鹽(1.92mmol，55％)。lcmsrt＝1.04分鐘(方法b)；esi-msm/z375.0[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa鹽(302mg，0.661mmol)和h-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺tfa鹽(247mg，0.661mmol)的攪拌23℃懸液中添加diea(0.34g，0.5ml，2.65mmol)，之后添加hatu(504mg，1.32mmol)。10小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。粗反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉(10ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有機(jī)餾分用鹽水洗滌、在硫酸鎂墊上干燥、過濾并真空濃縮。通過用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中10％至90％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗制油狀物。獲得總共111mg的標(biāo)題化合物的tfa鹽(0.120mmol，18％)。lcmsrt＝1.33分鐘(方法b)；esi-msm/z812.2[m+h]⁺；hrmsm/z812.4835[c41h65n9o6s+h]⁺.

實(shí)施例62

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙?；?-l-苯丙氨酸叔丁酯

向dmf(1.0ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ot-bu甲酸鹽(102.5mg，0.117mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.350ml，0.350mmol)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共70.1mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.083mmol，70％)。lcmsrt＝1.22分鐘(方法b)；esi-msm/z803.3[m+h]⁺；hrmsm/z803.5642[c43h74n6o8+h]⁺.

實(shí)施例63

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-四唑甲酸鹽(19.4mg，0.023mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.068ml，0.068mmol)。2小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共9.9mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.012mmol，53％)。lcmsrt＝1.07分鐘(方法b)；esi-msm/z771.2[m+h]⁺；hrmsm/z771.5233[c39h66n10o8+h]⁺.

實(shí)施例64

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-噻唑甲酸鹽(37.2mg，0.043mmol)的攪拌室溫溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.090ml，0.090mmol)。1小時后，通過lcms的分析顯示反應(yīng)完全。通過用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作為洗脫液的制備型rp-hplc純化粗反應(yīng)混合物。獲得總共16.8mg的標(biāo)題化合物的甲酸鹽(0.020mmol，47％)。lcmsrt＝1.15分鐘(方法b)；esi-msm/z786.2[m+h]⁺；hrmsm/z786.4940[c41h67n7o6s+h]⁺.

實(shí)施例b1

體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)

通過評價化合物對各種癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒性活性測量它們的體外效力。在用透明組織培養(yǎng)處理的96-孔板中進(jìn)行該試驗(yàn)。使用的細(xì)胞系是pc3(人前列腺癌)、hcc-1954(人乳腺導(dǎo)管癌)、和hct15(人結(jié)直腸腺癌，pgp-表達(dá))。細(xì)胞以約1,000-1,500個細(xì)胞/孔接種到50μl的生長培養(yǎng)基(rpmi-1640+10％熱滅活胎牛血清)中并在37℃和5％co2下過夜孵育使它們貼壁。第二天，一式三份向各孔中添加50μl的載劑對照(dmso)的2x母液或不同濃度的化合物。另外，使用沒有細(xì)胞或僅未處理細(xì)胞的對照孔。在添加化合物之后，板在37℃下5％co2的加濕組織培養(yǎng)孵育器中孵育4-6天以測量細(xì)胞毒性。在4-6天后，每孔添加20μl的prestoblue^tm細(xì)胞活力試劑(生命技術(shù)公司(lifetechnologies)#a13261)。板在37℃下孵育1-2小時。使用bioteksynergy^tmh4酶標(biāo)儀記錄540ex/590em下的熒光。代表性數(shù)據(jù)繪制為與未處理的對照孔相比的存活百分比。該試驗(yàn)中測試的化合物的數(shù)據(jù)繪制為與未處理的對照孔相比的存活百比分，如圖9-30所示。

實(shí)施例b2

微管蛋白聚合的測定

在牛腦微管蛋白上評價本文所述的化合物對微管蛋白聚合的抑制。為了評價化合物的活性，以約400μg/孔在100μl通用微管蛋白緩沖液中接種微管蛋白，然后在試驗(yàn)開始時一式兩份用10μm終濃度的化合物處理。在添加測試化合物之后，通常在37℃下進(jìn)行微管蛋白聚合試驗(yàn)持續(xù)60分鐘。通過利用340nm處的光學(xué)密度值的吸光度光譜分析確定微管蛋白聚合。為了測試聚合的微管蛋白的量，在添加測試化合物之后，獲取每分鐘的340nm處的光學(xué)密度值。對于分析，化合物處理的微管蛋白的微管蛋白聚合程度與對照的程度相比，對照是緩沖液處理的微管蛋白。具體地，使用hts-微管蛋白聚合試驗(yàn)試劑盒(細(xì)胞骨架公司(cytoskeletoninc.)；目錄號bk004p)進(jìn)行微管蛋白抑制研究，采用以下取樣方案：

1.在試驗(yàn)開始之前，預(yù)熱光度計和96-孔板至37℃持續(xù)30分鐘。熱板對于高聚合活性和可重復(fù)結(jié)果而言是必要的。

2.輸入所有的酶標(biāo)儀參數(shù)(340nm處吸光度，37℃，每分鐘一個讀數(shù))使光度計備用。一旦微管蛋白分裝到37℃孔中，必須立即開始讀取。

3.使500μl的通用微管蛋白緩沖液升溫至室溫。微管蛋白配體稀釋需要溫?zé)峋彌_液。

4.包括紫杉醇作為對照。使用10μl的紫杉醇/孔，其使終濃度最終達(dá)到10μm。

5.制備冷試驗(yàn)緩沖液：通用微管蛋白緩沖液，1mmgtp，10％甘油。

6.用1ml的冷試驗(yàn)緩沖液重懸4mg的微管蛋白以使最終蛋白質(zhì)濃度達(dá)到4mg/ml。將管放在冰上并且使蛋白質(zhì)完全重懸3分鐘。

7.在試驗(yàn)緩沖液中制備10x濃度的選擇化合物。

8.移取10μl的10x濃縮化合物到預(yù)熱板的所需數(shù)量的孔中。在37℃下孵育板2分鐘。

9.移取10μl的僅試驗(yàn)緩沖液到2的對照孔中(緩沖液處理的微管蛋白)。

10.移取100μl的微管蛋白到所需數(shù)量的孔中(2個孔應(yīng)該是零化合物對照，其經(jīng)緩沖液處理)。

11.立即將板放入37℃的光度計中，并且開始讀取每分鐘的340nm處的光密度。340nm處增加的光密度等同于增加的微管蛋白聚合。

該試驗(yàn)中測試的化合物的數(shù)據(jù)如圖1-8所示。

實(shí)施例b3

測試化合物體外效力的測定：在icrscid小鼠中植入的皮下建立的人膀胱癌細(xì)胞系sw780中的效力評價

對于動物體內(nèi)研究，用20mm組氨酸，5％蔗糖，ph6和15％dmso稀釋測試化合物。雄性icrscid小鼠(紐約州哈德遜的塔科尼農(nóng)場(taconicfarm，hudson，ny))飼養(yǎng)在標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類微隔離器籠中。動物室的環(huán)境控制設(shè)為維持溫度20-24℃，相對濕度30％至70％，和大約12小鼠光/12小時黑暗循環(huán)。自由提供水和食物。在72小時順應(yīng)后，用在與pbs(吉布可公司(gibco))混合的50％完全培養(yǎng)混合物(艾美捷(trevigen，inc.))中懸浮的sw780人膀胱癌細(xì)胞(2x10⁶個細(xì)胞/小鼠)植入小鼠，并且監(jiān)測腫瘤生長速率。當(dāng)平均腫瘤體積達(dá)到約200mm³時，腫瘤經(jīng)尺寸匹配并且小鼠隨機(jī)分成治療組(n＝8或10)。在qw劑量方案上用2或4mg/kg(mpk)的測試化合物或載劑靜脈內(nèi)處理荷瘤小鼠持續(xù)3周。使用卡尺測量腫瘤體積，每周2次。

雖然本發(fā)明中所述的化合物、用途和方法使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠制備并使用本文所述的化合物、用途和方法，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會理解并認(rèn)同存在本文的具體實(shí)施方式、方法和實(shí)施例的變化、組合和等同方式。因此，本文提供的化合物、用途和方法不應(yīng)受到上述實(shí)施方式、方法或?qū)嵤├南拗?，而是包括本文提供的化合物、用途和方法的范圍和精神?nèi)的所有實(shí)施方式和方法。