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一株粉狀側(cè)孢霉菌株及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號:11125847閱讀:842來源:國知局
一株粉狀側(cè)孢霉菌株及其應(yīng)用的制造方法與工藝

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域,具體涉及一株粉狀側(cè)孢霉菌株及其在農(nóng)業(yè)廢棄物轉(zhuǎn)化生物飼料上的應(yīng)用,屬于循環(huán)農(nóng)業(yè)中的廢物再利用技術(shù)范疇。



背景技術(shù):

農(nóng)業(yè)廢棄物是指人類在組織農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中所丟棄的有機(jī)類物質(zhì)的總稱,主要包括(1)植物性廢棄物,主要是指農(nóng)作物秸稈、林業(yè)枝條、雜草、落葉、果實(shí)外殼等,我國每年產(chǎn)生約10億噸左右的種植業(yè)廢棄物;(2)農(nóng)副產(chǎn)品加工產(chǎn)生的廢棄物,如果渣、土豆渣、屠宰污血等;(3)動物性廢棄物,如畜禽糞便等,我國每年產(chǎn)生約畜禽糞便26億噸;(4)農(nóng)村居民生活廢棄物,如人糞尿及生活垃圾等。隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的迅速發(fā)展和人口的增加,這些廢棄物以年均5%~10%的速度遞增。這其中大部分廢棄物被當(dāng)作垃圾丟棄或排放到環(huán)境中,造成可利用資源的浪費(fèi)和對生態(tài)環(huán)境的污染。因此如何合理利用農(nóng)業(yè)廢棄物資源,真正實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)廢棄物變“廢”為“寶”,對緩解我國糧食短缺問題、促進(jìn)生態(tài)環(huán)境保護(hù)以及促進(jìn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展等具有重要意義。

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株能在以農(nóng)業(yè)廢棄物為主要原料的培養(yǎng)基上生長,故而在工業(yè)生產(chǎn)上具有生產(chǎn)成本低廉,應(yīng)用范圍廣泛的特點(diǎn)。采用特殊微生物對農(nóng)業(yè)廢棄物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化與再利用是一個很好的選擇。本發(fā)明提供的這種特殊的能對農(nóng)業(yè)廢棄物進(jìn)行直接轉(zhuǎn)化的粉狀側(cè)孢霉QY-001菌株,涉及到的農(nóng)業(yè)廢棄物主要包括植物性廢棄物和農(nóng)副產(chǎn)品加工產(chǎn)生的廢棄物,這些廢棄物通過發(fā)酵處理,可以達(dá)到飼料化應(yīng)用的目的。 通常而言,采用獨(dú)特的微生物發(fā)酵方法可以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn),生產(chǎn)繁殖快,產(chǎn)物的營養(yǎng)價值高,而且可以利用的廢棄物種類也豐富,是一條廢物利用的良好途徑。這一舉措能大大降低飼喂動物的成本,提高經(jīng)濟(jì)效益,而且使飼料的利用也更完全,解決了日益突出的人畜共糧的矛盾問題,為我國短缺的飼料來源開辟新途徑;同時降低了農(nóng)業(yè)廢棄物對環(huán)境可能造成的危害。

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株的另外一個突出點(diǎn)是其新穎性與強(qiáng)效性。當(dāng)前利用纖維素資源轉(zhuǎn)化為飼料的研究比較多。概況而言,一方面是集中在菌種選擇或其組合上;另一方面是集中在廢棄物料的選擇及輔料的添加上。通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)與專利,發(fā)現(xiàn)在果渣固態(tài)發(fā)酵方面,現(xiàn)用菌種主要有酵母菌(啤酒酵母、熱帶假絲酵母、產(chǎn)朊假絲酵母)、細(xì)菌(嗜酸乳桿菌、植物性乳桿菌、長雙岐桿菌)和霉菌(木霉、曲霉、白地霉)。而且以提高粗蛋白為目的的果渣發(fā)酵大都是采用混合菌發(fā)酵,并且在添加了大量的含氮輔料下,才能使粗蛋白有一定的提高。例如發(fā)明專利CN 1663421A蘋果渣液固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)飼料蛋白的方法,利用產(chǎn)朊假絲酵母、綠色木霉、果酒酵母混合發(fā)酵,在添加20%麩皮、2%尿素、2%硫酸銨等含氮輔料基礎(chǔ)下,粗蛋白提高了78.62%。發(fā)明專利CN102028097A 蘋果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法,利用黑曲霉、熱帶假絲酵母和啤酒酵母混合發(fā)酵,在添加20~40%麩皮、1%~5%尿素等含氮輔料基礎(chǔ)下,粗蛋白才能達(dá)到30%。與目前已有的報道或?qū)@疾煌?,本發(fā)明篩選到的這株新型獨(dú)特的粉狀側(cè)孢霉,能同時高效分泌木質(zhì)素酶與纖維素酶,在不添加任何含氮輔料的情況下,該菌株能直接利用蘋果渣發(fā)酵,使多次提取的蘋果殘渣粗蛋白含量從8%提高至15.29%,增長了91%;粗纖維含量從52%降低至10%,減少了80%。若再添加少量含氮輔料,粗蛋白提高的幅度更大??梢?,與以往的報道或?qū)@啾龋景l(fā)明的粉狀側(cè)孢霉通過單菌發(fā)酵,在提高果渣粗蛋白、降解粗纖維方面具有明顯優(yōu)勢。此外,本發(fā)明的菌株在利用秸稈如小麥秸稈、玉米秸稈以及地瓜秧等為材料的轉(zhuǎn)化生物飼料方面也表現(xiàn)出類似作用,獲得了可喜的結(jié)果。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明的目的是提供了一株粉狀側(cè)孢霉菌株及其在農(nóng)業(yè)廢棄物固態(tài)發(fā)酵上的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一株粉狀側(cè)孢霉菌株,其具有序列表SEQ NO.1所示的18S rRNA基因序列,該菌株已于2015年04月 24 日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號,中國科學(xué)院微生物研究所),保藏編號為 :CGMCC No.10762,命名為粉狀側(cè)孢霉(Sporotrichum pulverulentum)QY-001。

為了達(dá)到上述目的,本發(fā)明采取以下技術(shù)措施:

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉 QY-001分離于山間腐殖質(zhì)土壤。

本發(fā)明提供了粉狀側(cè)孢霉QY-001的分離篩選方法。

本發(fā)明提供了粉狀側(cè)孢霉 QY-001的培養(yǎng)方法。

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉QY-001的培養(yǎng)溫度為20~50℃,最適溫度為25~40℃;

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉QY-001的培養(yǎng)pH為3.0~8.0,最適pH為5.0~6.5。

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株具有下述微生物學(xué)特征:

(1)在顯微鏡下觀察,該菌株菌絲多隔,多分枝。分生孢子梗簡單或總狀分枝,頂端產(chǎn)生芽生分生孢子,分生孢子近球形、橢圓形、倒梨形,無色,稍粗糙,7.5~10×4~6.5um,可見厚垣孢子,如圖1、圖2所示。

(2)菌落形態(tài)特征:

在PDA平板培養(yǎng)基上將粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株培養(yǎng)4~5天,菌落長滿平板,白色,氈狀,致密。在特制的麥芽汁平板培養(yǎng)基上,生長很快,1天即有菌落出現(xiàn),菌落呈擴(kuò)散狀生長,2~3天整個平板表面布滿了白色菌絲,菌落白色、氈狀、致密,菌絲向培養(yǎng)基內(nèi)伸入形成營養(yǎng)菌絲,在離表層約1mm厚的瓊脂區(qū)內(nèi)形成堅固的菌絲層。隨著培養(yǎng)時間的延長,4~7天菌絲向氣相伸展,產(chǎn)生大量的孢子,形成的白色絲狀物遍布全平板,如圖3所示。

(3)在液體培養(yǎng)基中,① 靜置培養(yǎng)時,接種之后萌發(fā)出菌絲,菌絲相互交織成網(wǎng),1~3天內(nèi)形成伸展充滿整個容器液面的白色薄膜,成為菌絲墊或菌墊,厚度約為1.0-1.5mm,位于氣液交界面,便于獲得氧。隨著培養(yǎng)時間的延長,4~7天菌墊與空氣接觸的表面會形成白色粉狀物—孢子。 ② 振蕩培養(yǎng)時,菌種接種后,萌發(fā)的菌絲在一定的搖速作用下相互纏繞成團(tuán),1-3天形成在容器里隨機(jī)碰撞的白色小球,成為菌絲團(tuán)或菌團(tuán),隨培養(yǎng)時間增長,菌絲團(tuán)或菌團(tuán)逐漸變大,如圖4所示。

本發(fā)明還提供了粉狀側(cè)孢霉QY-001菌株在農(nóng)業(yè)廢棄物固態(tài)發(fā)酵上的應(yīng)用,使農(nóng)業(yè)廢棄物中的粗纖維含量減少40~90%,同時能使粗蛋白含量增加30~300%。其中在不添加任何含氮輔料的情況下,能使農(nóng)業(yè)廢棄物的粗蛋白含量增加30~150%;在添加少量含氮輔料的情況下,能使農(nóng)業(yè)廢棄物的粗蛋白含量增加30~300%。

一株粉狀側(cè)孢霉QY-001 CGMCC No.10762在農(nóng)業(yè)廢棄物固態(tài)發(fā)酵上的應(yīng)用,包括下列內(nèi)容:

(1)種子制備,包括菌種活化、一級液體種子制備、二級固體種子制備。

(a)菌種活化:將粉狀側(cè)孢霉QY-001接種到麥芽汁平板上劃線活化,然后倒置于20~50℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行活化培養(yǎng)3~5天;所述的麥芽汁平板培養(yǎng)基配方為:大麥芽粉 300g中加入水700ml,30~40℃ 水浴30min,再65℃ 水浴3~4h,期間不斷攪拌,用兩層紗布過濾,制得7~12.5波美度的麥芽汁。麥芽汁500ml、水500ml、pH 5.5、瓊脂21g,滅菌溫度121℃,滅菌時間20~30min。

(b)一級液體種子制備:將麥芽汁平板中活化好的菌種接種至液體培養(yǎng)基中,于20~50℃靜置培養(yǎng)4~10天、裝液量20~30ml/250ml;或于20~50℃振蕩培養(yǎng)1~3天、轉(zhuǎn)速100~200r/min、裝液量40~50ml/250ml;所述的液體培養(yǎng)基配方為:硝酸鈉 7.0~10.0g,磷酸二氫鉀0.5~ 2g,七水硫酸鎂 0.1~1.5g,氯化鉀0.1~1.5g,七水硫酸亞鐵0.001~0.01g,葡萄糖5~40g,pH5.5~5.8,水1000ml,滅菌溫度121℃,滅菌時間30min。

(c)二級固體種子制備:將一級液體種子液,以5~15%的接種量接入裝有10~20g固體培養(yǎng)基的500ml三角瓶中,三角瓶采用紗布封口,20~50℃培養(yǎng)4~7天;當(dāng)培養(yǎng)至3~4天時,白菌絲布滿發(fā)酵料表面,進(jìn)行翻料,中間注意補(bǔ)水,維持物料濕度在50%左右。

所述的固體培養(yǎng)基:將農(nóng)業(yè)廢棄物烘干粉碎過15目篩,1份農(nóng)業(yè)廢棄物,2~3份營養(yǎng)液,固態(tài)培養(yǎng)基pH 3~8。營養(yǎng)液配方:硝酸鈉 2.0~3.0g,磷酸二氫鉀 1~3g,七水硫酸鎂 0.4~0.7g,七水硫酸亞鐵 0.001~0.003g,pH 5.5~5.8,水1000ml。滅菌溫度121℃,滅菌時間30min。

(2)農(nóng)業(yè)廢棄物發(fā)酵:先將農(nóng)業(yè)廢棄物烘干粉碎過15目篩,農(nóng)業(yè)廢棄物80~100% 、豆粕0~20%、麩皮 0~15%、無機(jī)氮0~5%,用堿調(diào)節(jié)發(fā)酵料pH 3~8,再加入營養(yǎng)液,營養(yǎng)液與發(fā)酵料比例為1:1~3:1,將培養(yǎng)基在攪拌機(jī)內(nèi)混合均勻,然后分裝到布袋中,121℃、30min,高壓濕熱滅菌,待培養(yǎng)基冷卻至25~35℃,將培養(yǎng)基倒入攪拌機(jī)中然后加入5~10%制備好的一級液體種子或二級固體種子攪拌均勻,然后放到發(fā)酵床中,平鋪均勻,厚度為3~10cm,最后蓋上濕布,開啟控溫開關(guān),控制溫度為20~50℃,發(fā)酵時間為4~12天,期間每隔2~3天進(jìn)行翻料及補(bǔ)水,維持物料濕度在50%左右,完成整個發(fā)酵過程,發(fā)酵結(jié)束,培養(yǎng)物在75℃烘干,粉碎后包裝,制得固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)品。

所述的農(nóng)業(yè)廢棄物包括植物性廢棄物,如農(nóng)作物秸稈、林業(yè)枝條、雜草、落葉、果實(shí)外殼;還包括農(nóng)副產(chǎn)品加工的廢棄物,如油渣、果渣,其中尤以蘋果渣、柑橘渣、梨渣居多。其固態(tài)發(fā)酵的主要原料為農(nóng)業(yè)廢棄物中的一種、任意兩種或以上的組合。

與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn):

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株能在以農(nóng)業(yè)廢棄物為主要原料的培養(yǎng)基上生長,生產(chǎn)成本低廉,應(yīng)用范圍廣泛。

本發(fā)明的粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株能高效分泌木質(zhì)素酶、纖維素酶,利用和降解農(nóng)業(yè)廢棄物中的木質(zhì)素、纖維素,這在農(nóng)業(yè)廢棄物飼料化方面表現(xiàn)出很強(qiáng)的優(yōu)勢。

附圖說明

圖1 粉狀側(cè)孢霉QY-001在400倍顯微鏡下的圖片。

圖2 粉狀側(cè)孢霉QY-001在1000倍顯微鏡下的圖片。

圖3 粉狀側(cè)孢霉QY-001在麥芽汁培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)圖片。

圖4 粉狀側(cè)孢霉QY-001在液體搖瓶培養(yǎng)7天的菌團(tuán)形態(tài)圖片。

具體實(shí)施方式

以下是本發(fā)明的實(shí)施例,但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。

實(shí)施例1菌株的分離篩選及鑒定。

1、分離篩選。

采用梯度稀釋法將山間腐殖質(zhì)土壤稀釋,取0.1ml均勻涂布于PDA~苯胺藍(lán)培養(yǎng)基的表面,置入恒溫培養(yǎng)箱,30℃下避光培養(yǎng)10天,每天記錄藍(lán)色培養(yǎng)基中有無褪色圈的形成及褪色圈直徑的大小,用接種環(huán)挑取褪色圈大的單菌落,進(jìn)行分離純化即為初篩菌株,共挑取32株單菌落,將其中褪色圈最大的命名為QY-001。所述的PDA苯胺藍(lán)培養(yǎng)基配方為馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、七水硫酸鎂1.5 g、水 1000ml、苯胺蘭 0.1g、pH 7.0。

2、鑒定。

(1)菌落形態(tài)特征:將粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5天,其菌落形態(tài)特征如下:菌落長滿平板,白色,氈狀,致密。

(2)鏡檢形態(tài)特征:該菌株菌絲多隔,多分枝。分生孢子梗簡單或總狀分枝頂端產(chǎn)生芽生分生孢子,分生孢子近球形、橢圓形、倒梨形,無色,稍粗糙,7.5~10×4~6.5um,可見后垣孢子。

(3)利用DNA提取試劑盒提取粉狀側(cè)孢霉QY-001的基因組DNA,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增其18S rRNA序列。通過BLAST比對分析發(fā)現(xiàn),粉狀側(cè)孢霉QY-001菌株與公布的黃孢原毛平革菌的18S rRNA序列相似度最高,而粉狀側(cè)孢霉是黃孢原毛平革菌的無性世代,結(jié)合鏡檢形態(tài),確定該菌種為粉狀側(cè)孢霉。

將該菌株命名為粉狀側(cè)孢霉(Sporotrichum pulverulentum)QY-001,于2015年04月 24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號CGMCC No.10762。

實(shí)施例2粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株的培養(yǎng)方法

1、固體平板培養(yǎng):將粉狀側(cè)孢霉 QY-001菌株接種到麥芽汁平板培養(yǎng)基上劃線活化,然后倒置于30℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行活化培養(yǎng),培養(yǎng)時間3~4天;

所述的麥芽汁平板培養(yǎng)基配方為:大麥芽粉 300g中加入水700ml,30~40℃ 水浴30min,再65℃ 水浴3~4h,期間不斷攪拌,用兩層紗布過濾,制得7~12.5波美度的麥芽汁。麥芽汁500ml、水500ml、pH5.5、瓊脂21g,滅菌溫度121℃,滅菌時間20~30min;

2、液體搖瓶培養(yǎng):將固體平板中活化好的菌種接種至液體培養(yǎng)基,于30℃靜置培養(yǎng)4~10天、裝液量20~30ml/250ml;或于30℃振蕩培養(yǎng)1~2天、轉(zhuǎn)速100~200r/min、裝液量40~50ml/250ml。

所述的液體培養(yǎng)基配方為:硝酸鈉 7.0~10.0g,磷酸二氫鉀0.5~2g,七水硫酸鎂 0.1~1.5g,氯化鉀0.1~1.5g,七水硫酸亞鐵0.001~0.01g,葡萄糖5~40g,pH5.5~5.8,水1000ml,滅菌溫度121℃,滅菌時間30min。

實(shí)施例 3 粉狀側(cè)孢霉QY-001在農(nóng)業(yè)廢棄物與少量含氮輔料混合固態(tài)發(fā)酵上的應(yīng)用。

整個流程包括固態(tài)發(fā)酵和檢測,固態(tài)發(fā)酵包括種子制備和農(nóng)業(yè)廢棄物發(fā)酵。

1、固態(tài)發(fā)酵。

(1)種子制備:菌種活化→一級液體種子制備→二級固體種子制備,具體步驟如下:

(a)菌種活化:將粉狀側(cè)孢霉QY-001接種到麥芽汁平板上劃線活化,然后倒置于30℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行活化培養(yǎng)3~5天;所述的麥芽汁培養(yǎng)基配方同實(shí)施例2中一致。

(b)一級液體種子制備:將麥芽汁平板中活化好的菌種接種至液體培養(yǎng)基中,于30℃靜置培養(yǎng)7天、裝液量20~30ml/250ml;或于30℃振蕩培養(yǎng)2~3天、轉(zhuǎn)速100~200r/min、裝液量40~50ml/250ml,所述的液體培養(yǎng)基配方與實(shí)施例2中的一致。

(c)二級固體種子制備:將一級液體種子液,以5~15%的接種量接入裝有10~20g固體培養(yǎng)基的500ml三角瓶中,三角瓶采用紗布封口,30℃培養(yǎng)4~7天;當(dāng)培養(yǎng)至3~4天時,白菌絲布滿發(fā)酵料表面,進(jìn)行翻料,中間注意補(bǔ)水,維持物料濕度在50%左右。

所述的固體培養(yǎng)基配方:將農(nóng)業(yè)廢棄物烘干粉碎過15目篩,1份農(nóng)業(yè)廢棄物,2~3份營養(yǎng)液,pH 3~8。其中營養(yǎng)液配方:硝酸鈉 2.0~3.0g,磷酸二氫鉀 1~3g,七水硫酸鎂 0.4~0.7g,七水硫酸亞鐵 0.001~0.003g,pH5.5~5.8,水1000ml。滅菌溫度121℃,滅菌時間30min。

(2)農(nóng)業(yè)廢棄物蘋果渣發(fā)酵:先將蘋果渣烘干粉碎過15目篩,蘋果渣80~100% 、豆粕0~20%、麩皮 0~15%、無機(jī)氮0~5%,用堿調(diào)節(jié)發(fā)酵料pH 5~6,再加入營養(yǎng)液,營養(yǎng)液與發(fā)酵料比例為1:1~3:1,將培養(yǎng)基在攪拌機(jī)內(nèi)混合均勻,然后分裝到布袋中,121℃、30min,高壓濕熱滅菌,待培養(yǎng)基冷卻至25~35℃,將培養(yǎng)基倒入攪拌機(jī)中然后加入5~10%制備好的一級液體種子或二級固體種子攪拌均勻,然后放到發(fā)酵床中,平鋪均勻,厚度適中,為3~5cm,最后蓋上濕布,開啟控溫開關(guān),控制溫度為30℃,發(fā)酵時間為8~12天,期間每隔2~3天進(jìn)行翻料及補(bǔ)水,維持物料濕度在50%左右,完成整個發(fā)酵過程,發(fā)酵結(jié)束,培養(yǎng)物在75℃烘干,粉碎后包裝,制得固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)品。

2、 檢測。

農(nóng)業(yè)廢棄物發(fā)酵前后檢測粗蛋白與粗纖維。粗蛋白檢測參照國標(biāo)GB/T6432-1994“飼料中粗蛋白含量的測定方法”,粗纖維檢測參照國標(biāo)GB/T 6434-2006“飼料中粗纖維的含量測定 過濾法”。

下面以上述農(nóng)業(yè)廢棄物蘋果渣為例,發(fā)酵原料不同配比的情況下,粗蛋白、粗纖維的變化。

1 農(nóng)業(yè)廢棄物蘋果渣與少量含氮輔料混合固態(tài)發(fā)酵的粗蛋白、粗纖維含量的變化

注:此蘋果渣是經(jīng)多次提取后的殘渣,其粗蛋白含量為8.0%,粗纖維含量為52.4%。

所述的農(nóng)業(yè)廢棄物包括植物性廢棄物,如農(nóng)作物秸稈、林業(yè)枝條、雜草、落葉、果實(shí)外殼;還包括農(nóng)副產(chǎn)品加工的廢棄物,如油渣、果渣,其中尤以蘋果渣、柑橘渣、梨渣居多。其固態(tài)發(fā)酵的主原料為農(nóng)業(yè)廢棄物中的一種、任意兩種或以上的組合。

其他農(nóng)業(yè)廢棄物固態(tài)發(fā)酵的方法與蘋果渣一致,但由于農(nóng)業(yè)廢棄物種類及發(fā)酵原料配方不同,使發(fā)酵后的粗纖維、粗蛋白有很大差異。由檢測結(jié)果可以看出,農(nóng)業(yè)廢棄物經(jīng)粉狀側(cè)孢霉QY-001的固態(tài)發(fā)酵,其粗纖維含量減少40~90%,粗蛋白含量增加30~300%。

實(shí)施例4 粉狀側(cè)孢霉在無含氮輔料的農(nóng)業(yè)廢棄物固態(tài)發(fā)酵上的應(yīng)用。

本實(shí)施例4與實(shí)施例3的區(qū)別在于發(fā)酵原料不同,本實(shí)施例4發(fā)酵原料為農(nóng)業(yè)廢棄物100%,無含氮輔料,其余步驟都一樣。

從檢測結(jié)果總結(jié)出,在無含氮輔料的情況下,農(nóng)業(yè)廢棄物經(jīng)粉狀側(cè)孢霉QY-001的固態(tài)發(fā)酵,其粗纖維含量減少40~90%,粗蛋白含量增加30~150%。下表列舉部分農(nóng)業(yè)廢棄物的發(fā)酵前后的粗蛋白含量及變化率。

2 在不添加任何含氮輔料的情況下,部分農(nóng)業(yè)廢棄物發(fā)酵前后粗蛋白含量變化

注:地瓜秧+花生秧固態(tài)發(fā)酵的添加比例為各占50%。

SEQUENCE LISTING

<110> 煙臺啟元微生物技術(shù)研究院有限公司

<120> 一株粉狀側(cè)孢霉菌株及其應(yīng)用

<130> 2015

<160> 1

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 1300

<212> DNA

<213> 粉狀側(cè)孢霉(Sporotrichum pulverulentum)

<400> 1

gctcattaaa tcagttatag tttatttgat ggtgctttgc tacatggata actgtggtaa 60

ttctagagct aatacatgca atcaagcccc gacttctgga aggggtgtat ttattagata 120

aaaaaccaac gcggttcgcc gctccattgg tgattcataa taacttctcg aatcgcatgg 180

ccttgtgccg gcgatgcttc attcaaatat ctgccctatc aactttcgat ggtaggatag 240

aggcctacca tggtttcaac gggtaacggg gaataagggt tcgattccgg agagggagcc 300

tgagaaacgg ctaccacatc caaggaaggc agcaggcgcg caaattaccc aatcccgaca 360

cggggaggta gtgacaataa ataacaatat agggctcttt cgggtcttat aattggaatg 420

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cggtaattcc agctccaata gcgtatatta aagttgttgc agttaaaaag ctcgtagttg 540

aacttcaggc ctggctgggc ggtctgcctc acggtatgta ctgtctggct gggtcttacc 600

tcttggtgag ccggcatgcc cttcactggg tgtgtcgggg aaccaggact tttaccttga 660

gaaaattaga gtgttcaaag caggcttatg cccgaataca ttagcatgga ataataaaat 720

aggacgtgcg gttctatttt gttggtttct agagtcgccg taatgattaa tagggatagt 780

tgggggcatt agtattccgt tgctagaggt gaaattcttg gatttacgga agactaacta 840

ctgcgaaagc atttgccaag gatgttttca ttaatcaaga acgaaggtta ggggatcgaa 900

aacgatcaga taccgttgta gtcttaacag taaactatgc cgactaggga tcgggcgaac 960

tcaatttgat gtgtcgctcg gcaccttacg agaaatcaaa gtctttgggt tctgggggga 1020

gtatggtcgc aaggctgaaa cttaaaggaa ttgacggaag ggcaccacca ggtgtggagc 1080

ctgcggctta atttgactca acacggggaa actcaccagg tccagacatg actaggattg 1140

acagattgat agctctttca tgattttatg ggtggtggtg catggccgtt cttagttggt 1200

ggagtgattt gtctggttaa ttccgataac gaacgagacc ttaacctgct aaatagccag 1260

gccggctttt gctggtcgcc ggcatcttag agggacagtc 1300

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