技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了屬于生物技術(shù)領(lǐng)域的一種高效穿梭表達(dá)載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用。本發(fā)明是在E.?coli-B.?subtilis穿梭載體pHT315的基礎(chǔ)上構(gòu)建的,通過將枯草芽孢桿菌Bs168的木糖啟動子序列與來自E.?coli表達(dá)載體pET21b的T7表達(dá)區(qū)序列融合,構(gòu)建了一個高效穿梭表達(dá)載體pHTL,以gfp,gus和lipa為報告基因,檢測載體的表達(dá)能力和遺傳穩(wěn)定性;同時,將來自納豆芽孢桿菌的堿性蛋白酶信號肽序列代替載體pHTL上的T7肽編碼區(qū),構(gòu)建成高效分泌型穿梭表達(dá)載體pHTZ,以gus,tgl1和lipa為報告基因,檢測載體的表達(dá)能力。兩種載體均可以正確表達(dá)相應(yīng)蛋白并具有生物學(xué)活性,具有廣泛的應(yīng)用前景。
技術(shù)研發(fā)人員:檀建新;李志輝;張瑩瑩;申培立;張?zhí)N哲;任蓓蕾;亢春雨;于宏偉;盧海強(qiáng);馬雯;張偉;陳中義
受保護(hù)的技術(shù)使用者:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
文檔號碼:201510199070
技術(shù)研發(fā)日:2015.04.24
技術(shù)公布日:2016.11.23