本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定貯存微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺發(fā)酵液酶活性的方法，主要用于微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺的生物催化劑的貯存工藝過程。
背景技術(shù)：
：微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺發(fā)酵液酶活性很不穩(wěn)定，其酶為腈水合酶，隨著貯存時間的延長而酶活性降低。微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺發(fā)酵液酶活性為保持穩(wěn)定，通常采用將微生物腈水合酶發(fā)酵液進(jìn)行乙二醇間接冷卻貯存。貯存溫度通常4±1℃，貯存時間≤72小時，經(jīng)過超濾后用于微生物生產(chǎn)丙烯酰胺的生物催化劑。CN1572871A公開了一種保持或提高腈水合酶的方法，對于含有腈水合酶的細(xì)胞或該細(xì)胞的處理物，在不伴有細(xì)胞增殖的條件下，通過與氧化劑的接觸，保持或提高腈水合酶的活性。而加入的氧化劑，給丙烯酰胺生產(chǎn)聚丙烯酰胺帶來了很大的影響。因?yàn)樯a(chǎn)聚丙烯酰胺的引發(fā)體系是氧化還原體系，在原料丙烯酰胺中應(yīng)避免使用氧化劑、還原劑等影響聚丙烯酰胺聚合的物質(zhì)，因此該酶活性穩(wěn)定方法對丙烯酰胺的應(yīng)用具有很大的局限性。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定貯存微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺發(fā)酵液酶活性的方法，通過在含有腈水合酶細(xì)胞的發(fā)酵液貯存過程中，加入發(fā)酵培養(yǎng)基原料中的pH值調(diào)節(jié)劑、酶活性促進(jìn)劑、緩沖劑三種物質(zhì)中的一種，從而達(dá)到穩(wěn)定貯存腈水合酶液的方法。采用本方法，能有效地穩(wěn)定腈水合酶的活性，有利于延長生物催化劑腈水合酶液的貯存時間，從而降低了在催化水合反應(yīng)中發(fā)酵液的使用量，降低了發(fā)酵培養(yǎng)基原料的消耗。由于在催化水合反應(yīng)中發(fā)酵液的使用量較少，水合反應(yīng)液中氨基氮總量降低，丙烯酰胺水劑質(zhì)量提高，從而降低了后工序精制處理負(fù)荷，降低了精制再生劑鹽酸、氫氧化鈉的消耗。有利于微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺。有益效果本發(fā)明的目的是建立一種穩(wěn)定貯存微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺發(fā)酵液酶活性的方法，采用本發(fā)明能有效提高貯存微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺發(fā)酵液酶活性，有利于生物催化劑腈水合酶液的貯存，有利于微生物法生產(chǎn)丙烯酰胺，有利于后序聚丙烯酰胺的生產(chǎn)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1、在5m3發(fā)酵液貯罐中，有4m3含有腈水合酶細(xì)胞2360萬單位的發(fā)酵液，貯存溫度通常5~10℃，通微量空氣攪拌，其酶活性變化結(jié)果如下：實(shí)施例2、在5m3發(fā)酵液貯罐中，有4m3含有腈水合酶細(xì)胞2250萬單位的發(fā)酵液，貯存溫度通常5~10℃，通微量空氣攪拌，加入氫氧化鈉來調(diào)節(jié)發(fā)酵液的pH值為8.60，其酶活性變化結(jié)果如下：實(shí)施例3、在5m3發(fā)酵液貯罐中，有4m3含有腈水合酶細(xì)胞2130萬單位的發(fā)酵液，貯存溫度通常5~10℃，通微量空氣攪拌，加入氯化鈷220克，其酶活性變化結(jié)果如下：實(shí)施例4、在5m3發(fā)酵液貯罐中，有4m3含有腈水合酶細(xì)胞2180萬單位的發(fā)酵液，貯存溫度通常5~10℃，通微量空氣攪拌，加入磷酸氫二鉀2000克和磷酸二氫鉀2000克，其酶活性變化結(jié)果如下：時間（天）01234567貯存溫度（5~10℃）57567778酶活性（萬單位）21802450249025122438238623002250當(dāng)前第1頁1 2 3