pct國(guó)內(nèi)申請(qǐng)，說(shuō)明書(shū)已公開(kāi)。

技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
一種核酸的雙接頭單鏈環(huán)狀文庫(kù)的構(gòu)建方法和試劑，該方法包括：將核酸打斷成核酸片段；連接第一接頭序列；擴(kuò)增得到兩端具有第一接頭序列的第一產(chǎn)物，其中引物序列上具有U堿基；用USER酶酶切第一產(chǎn)物，環(huán)化產(chǎn)生缺口；或引物序列上還具有切口酶識(shí)別序列，用USER酶酶切第一產(chǎn)物，環(huán)化并使用切口酶酶切產(chǎn)生切口；從切口或缺口處進(jìn)行限制性切口/缺口平移反應(yīng)；消化除去未發(fā)生限制性切口/缺口平移反應(yīng)的部分；連接第二接頭序列；擴(kuò)增得到兩端具有第二接頭序列的第二產(chǎn)物；變性第二產(chǎn)物，并使用介導(dǎo)序列對(duì)單鏈核酸分子進(jìn)行環(huán)化。該方法能夠提高文庫(kù)插入片段長(zhǎng)度，并且無(wú)需切膠回收；單鏈核酸分子熱變性后可以直接進(jìn)行環(huán)化。

技術(shù)研發(fā)人員：江媛;趙霞;阿萊克謝耶夫·安德烈;徳馬納克·拉多杰;章文蔚;蔣慧
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳華大基因研究院;深圳華大基因科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：2014.11.26
技術(shù)公布日：2017.08.01