一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:A、將啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,配成懸浮液a,加入氫氧化鈉、微生物蛋白酶制劑后抽提1h~10h,再進行離心分離,取沉淀a;B、將沉淀a用水洗滌后配成懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑后抽提2h~12h,然后進行離心分離,取沉淀b;C、將沉淀b洗滌后干燥,即得到酵母葡聚糖粉;與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明方法不僅操作簡單,而且葡聚糖的提取純度高,還可以避免資源的浪費,節(jié)約成本,降低啤酒工業(yè)中啤酒廢酵母殘渣的排放對環(huán)境的不利影響,為啤酒廢酵母的綜合利用開辟了一條新的途徑,實現(xiàn)啤酒廢酵母的增值增效,產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益。
【專利說明】
一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提取堿不溶性葡聚糖的方法,尤其涉及一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]酵母多糖是酵母細胞壁的主要成分,占細胞干重的30%左右,啤酒酵母細胞壁有三層結(jié)構(gòu),外層是D-甘露聚糖,中間是蛋白質(zhì),內(nèi)層是D-葡聚糖,其中葡聚糖占30%?40%。啤酒酵母細胞壁中的堿不溶酸不溶葡聚糖是以i3-(l,3)-D-葡聚糖為主鏈、含有β_(1,6)分支的葡聚糖,能提高免疫力的物質(zhì)就是β-(1,3)-?-葡聚糖,具有較強生物活性的葡聚糖分子量為100?200KDa。
[0003]葡聚糖能夠增強動物的非特異性免疫系統(tǒng),激活巨噬細胞的活性,通過吞噬作用吸收、破壞和清除體內(nèi)的病原微生物,提高動物的免疫功能。例如葡聚糖在水產(chǎn)養(yǎng)殖中可以減少水產(chǎn)動物尤其是魚、蝦的病害。因此在動物的飼料中添加葡聚糖會大大增加水產(chǎn)動物對疾病的抵抗力,促進動物生長發(fā)育。此外,葡聚糖還能促進動物胃腸蠕動,吸附腸道內(nèi)的有害物質(zhì),例如真菌毒素;也能促進腸內(nèi)有益菌的增殖。
[0004]由于酵母葡聚糖獨特的免疫活性,目前已作為一種飼料添加劑而得到廣泛的應(yīng)用。國內(nèi)外對酵母細胞壁葡聚糖的提取方法較多,主要有酸法提取、堿法提取、酸堿一體法、有機溶劑提取、自溶-酶-堿法、超聲波提取、酶法等。在工業(yè)生產(chǎn)中,根據(jù)不同的生產(chǎn)目的可以采用不同的工藝方法從酵母細胞中提取葡聚糖,但是這些方法多采用純凈的酵母細胞為原料,操作復(fù)雜,成本較高。
[0005]啤酒廢酵母是啤酒生產(chǎn)的副產(chǎn)物,是啤酒生產(chǎn)過程中歷經(jīng)主發(fā)酵和后發(fā)酵的釀造工序之后所產(chǎn)生的,含有豐富的營養(yǎng)成分及功能性成分。目前工業(yè)上已經(jīng)開始利用啤酒廢酵母提取核糖核酸,以提高啤酒廢酵母的利用價值,但是在此過程中,啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣卻沒有得到有效利用,該啤酒廢酵母殘渣的主要成分為破碎的啤酒酵母細胞壁,含有豐富的葡聚糖,其直接排放是對資源的浪費。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明的目的旨在克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足,提供一種操作簡單、提純率高、避免資源浪費的從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法。
[0007]為解決上述的技術(shù)問題,本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0008]一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0009]A、酶-堿法提純
[0010]將啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成懸浮液a,加入氫氧化鈉、微生物蛋白酶制劑,并在溫度為30°C?70°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提Ih?10h,再對抽提物進行離心分離,取沉淀a ;
[0011]B、酶法再提純
[0012]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,并在溫度為30°C?70°C、pH為6.0?10.0的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提2h?12h,再對抽提物進行離心分離,取沉淀b ;
[0013]C、干燥
[0014]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,進行干燥,即得到酵母葡聚糖粉;
[0015]作為優(yōu)選,在步驟A中,將啤酒廢酵母進行過篩、脫苦、脫臭處理后配制成酵母濃度以重量計為1%?20%的懸浮液,再加入氯化鈉,使懸浮液中的氯化鈉濃度以重量計為I %?20%,然后使用氫氧化鈉將該懸浮液的pH值調(diào)節(jié)至7.5,接著使用不銹鋼反應(yīng)釜在溫度50°C?100°C的條件下抽提2h?12h,將得到的抽提物迅速冷卻至室溫,再用板框壓濾機過濾,得到的濾渣即為啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣;
[0016]作為優(yōu)選,在步驟A中,所述懸浮液a中啤酒廢酵母殘渣的濃度以重量計為5%?15%、氫氧化鈉的濃度以重量計為5%?10% ;
[0017]作為優(yōu)選,在步驟A中,所述微生物蛋白酶制劑為枯草芽孢桿菌蛋白酶,酶活力與底物濃度之比為1000U/g?10000U/g ;
[0018]作為優(yōu)選,步驟A、步驟B中的離心分離均采用碟片離心機,轉(zhuǎn)速為5000r/min,分離時間為20min ;
[0019]作為優(yōu)選,在步驟B中,將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為5%?15%的懸浮液b,所述胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為500U/g?5000U/g ;
[0020]作為優(yōu)選,步驟C中的干燥方式為滾筒干燥,進水溫度為100°C?200°C,出水溫度為50°C?90°C,滾筒轉(zhuǎn)速為lr/min?50r/min ;
[0021]根據(jù)上述方法所得到的酵母葡聚糖粉具有下述特性:性狀為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量< 7 %,水分含量< 7 %,總糖含量> 80%。
[0022]本發(fā)明是以啤酒廠生產(chǎn)啤酒后的啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣為原料,采用兩次酶法抽提得到酵母葡聚糖。第一次用酶-堿法抽提除去堿溶性甘露聚糖,第二次用酶法抽提除去細胞壁上的蛋白。酵母細胞壁主要是由內(nèi)層的葡聚糖和外層的甘露聚糖組成,中間夾雜著胞壁蛋白質(zhì),這些蛋白還以共價鍵與甘露聚糖連接著,而大部分的葡聚糖是不溶于堿性溶液的,但甘露聚糖則是堿溶性的。本發(fā)明采用氫氧化鈉溶液對酵母細胞壁進行抽提,并且在抽提時加入蛋白酶,水解與甘露聚糖連接的蛋白質(zhì),使得細胞壁上的甘露聚糖抽提得更徹底,實現(xiàn)兩種多糖的完全分離,大大提高沉淀中葡聚糖的純度。同時在第二次抽提中,也加入蛋白酶,將附著在細胞壁上剩余的蛋白水解成肽和氨基酸,釋放到水溶液中,使得沉淀中葡聚糖的純度進一步提高。
[0023]本發(fā)明在第一次用抽提時加入微生物蛋白酶試劑是因為這種蛋白酶純化得不完全,還帶有纖維素酶以及葡聚糖酶的活性,它不僅能水解連接著甘露聚糖的蛋白質(zhì),使得甘露聚糖更容易從細胞壁上釋放出來,使甘露聚糖抽提更徹底,而且還能水解葡聚糖和甘露聚糖之間的連接鍵,使得甘露聚糖和葡聚糖能更徹底的分開。
[0024]本發(fā)明在第二次抽提時加入胰蛋白酶制劑進行水解是因為它具有很強的酶活力以及針對酵母細胞壁蛋白的特異水解能力,能將細胞壁上的蛋白水解干凈,從而釋放到溶液中,進一步提高沉淀中葡聚糖的純度。
[0025]啤酒酵母是啤酒生產(chǎn)的工業(yè)副產(chǎn)品,其作為飼料原料,安全而可靠,根據(jù)本發(fā)明方法所得到的酵母葡聚糖粉純度較高,而且提取率> 36 %,可以直接用于飼料加工。
[0026]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:
[0027]本發(fā)明方法采用兩次酶解法從啤酒廢酵母殘渣中提取堿葡聚糖,不僅操作簡單,而且葡聚糖的提取純度高,還可以避免資源的浪費,節(jié)約成本,降低啤酒工業(yè)中啤酒廢酵母殘渣的排放對環(huán)境的不利影響;同時,本發(fā)明方法可以與用啤酒廢酵母提取核糖核酸的方法結(jié)合使用,為啤酒廢酵母的綜合利用開辟了一條新的途徑,實現(xiàn)啤酒廢酵母的增值增效,延長拓寬產(chǎn)業(yè)鏈條,產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益。
【具體實施方式】
[0028]為了能更好地對本發(fā)明的技術(shù)方案進行理解,下面通過具體的實施例進行詳細地說明:
[0029]實施例一
[0030]一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0031]A、酶-堿法提純
[0032]將啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成以重量計濃度為10%的懸浮液a,加入氫氧化鈉、枯草芽孢桿菌蛋白酶,懸浮液a中氫氧化鈉的濃度以重量計為7.5%,枯草芽孢桿菌蛋白酶的酶活力與底物濃度之比為5500U/g,然后在溫度為50°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提5.5h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀a ;
[0033]B、酶法再提純
[0034]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為10%的懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,懸浮液b中胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為2500U/g,然后在溫度為50°C、pH為8.0的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提7h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀b ;
[0035]C、干燥
[0036]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,在進水溫度為150°C、出水溫度為70°C、滾筒轉(zhuǎn)速為25r/min的條件下進行滾筒干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
[0037]根據(jù)本方法得到的酵母葡聚糖粉為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量為5.6%,水分含量為5.1%,總糖含量(以葡萄糖計)為 84.7%0
[0038]實施例二
[0039]一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0040]A、酶-堿法提純
[0041]將啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成以重量計濃度為15%的懸浮液a,加入氫氧化鈉、微生物蛋白酶試劑,懸浮液a中氫氧化鈉的濃度以重量計為10%,微生物蛋白酶試劑的酶活力與底物濃度之比為10000U/g,然后在溫度為70°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提lh,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀a ;
[0042]B、酶法再提純
[0043]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為15%的懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,懸浮液b中胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為5000U/g,然后在溫度為70°C、pH為10.0的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提2h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀b ;
[0044]C、干燥
[0045]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,在進水溫度為200°C、出水溫度為90°C、滾筒轉(zhuǎn)速為50r/min的條件下進行滾筒干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
[0046]根據(jù)本方法得到的酵母葡聚糖粉為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量為6.9 %,水分含量為6.3%,總糖含量(以葡萄糖計)為 82.1%。
[0047]實施例三
[0048]一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0049]A、酶-堿法提純
[0050]將啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成以重量計濃度為5%的懸浮液a,加入氫氧化鈉、枯草芽孢桿菌蛋白酶,懸浮液a中氫氧化鈉的濃度以重量計為5%,枯草芽孢桿菌蛋白酶的酶活力與底物濃度之比為1000U/g,然后在溫度為30°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提10h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀a ;
[0051]B、酶法再提純
[0052]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為5%的懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,懸浮液b中胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為500U/g,然后在溫度為30°C、pH為6.0的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提12h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀b ;
[0053]C、干燥
[0054]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,在進水溫度為100°C、出水溫度為50°C、滾筒轉(zhuǎn)速為lr/min的條件下進行滾筒干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
[0055]根據(jù)本方法得到的酵母葡聚糖粉為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量為7 %,水分含量為7%,總糖含量(以葡萄糖計)為80%。
[0056]實施例四
[0057]一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0058]A、酶-堿法提純
[0059]將啤酒廢酵母進行過篩、脫苦、脫臭處理后配制成酵母濃度以重量計為1%的懸浮液,再加入氯化鈉,使懸浮液中的氯化鈉濃度以重量計為I %,然后使用氫氧化鈉將該懸浮液的PH值調(diào)節(jié)至7.5,接著使用不銹鋼反應(yīng)釜在溫度50°C V的條件下抽提12h,將得到的抽提物迅速冷卻至室溫,再用板框壓濾機過濾,得到的濾渣即為啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣;
[0060]再將得到的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成以重量計濃度為6%的懸浮液a,加入氫氧化鈉、微生物蛋白酶試劑,懸浮液a中氫氧化鈉的濃度以重量計為5%,微生物蛋白酶試劑的酶活力與底物濃度之比為5000U/g,然后在溫度為60°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)爸抽提1h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀a ;
[0061]B、酶法再提純
[0062]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為10%的懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,懸浮液b中胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為1000U/g,然后在溫度為55°C、pH為8.5的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提12h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀b ;
[0063]C、干燥
[0064]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,在進水溫度為150°C、出水溫度為70°C、滾筒轉(zhuǎn)速為20r/min的條件下進行滾筒干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
[0065]根據(jù)本方法得到的酵母葡聚糖粉為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量為5.5%,水分含量為7%,總糖含量(以葡萄糖計)為83.4%。
[0066]實施例五
[0067]一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0068]A、酶-堿法提純
[0069]將啤酒廢酵母進行過篩、脫苦、脫臭處理后配制成酵母濃度以重量計為10%的懸浮液,再加入氯化鈉,使懸浮液中的氯化鈉濃度以重量計為10%,然后使用氫氧化鈉將該懸浮液的PH值調(diào)節(jié)至7.5,接著使用不銹鋼反應(yīng)釜在溫度75°C的條件下抽提7h,將得到的抽提物迅速冷卻至室溫,再用板框壓濾機過濾,得到的濾渣即為啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣;
[0070]再將得到的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成以重量計濃度為8%的懸浮液a,加入氫氧化鈉、枯草芽孢桿菌蛋白酶,懸浮液a中氫氧化鈉的濃度以重量計為6%,枯草芽孢桿菌蛋白酶的酶活力與底物濃度之比為3000U/g,然后在溫度為60°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)爸抽提1h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀a ;
[0071]B、酶法再提純
[0072]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為13%的懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,懸浮液b中胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為2000U/g,然后在溫度為55°C、pH為8.5的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提10h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀b ;
[0073]C、干燥
[0074]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,在進水溫度為140°C、出水溫度為50°C、滾筒轉(zhuǎn)速為30r/min的條件下進行滾筒干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
[0075]根據(jù)本方法得到的酵母葡聚糖粉為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量為5.9%,水分含量為6.4%,總糖含量(以葡萄糖計)為 81.7%。
[0076]實施例六
[0077]—種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,它包括以下步驟:
[0078]A、酶-堿法提純
[0079]將啤酒廢酵母進行過篩、脫苦、脫臭處理后配制成酵母濃度以重量計為20%的懸浮液,再加入氯化鈉,使懸浮液中的氯化鈉濃度以重量計為20%,然后使用氫氧化鈉將該懸浮液的PH值調(diào)節(jié)至7.5,接著使用不銹鋼反應(yīng)釜在溫度100°C的條件下抽提2h,將得到的抽提物迅速冷卻至室溫,再用板框壓濾機過濾,得到的濾渣即為啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣;
[0080]再將得到的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成以重量計濃度為12%的懸浮液a,加入氫氧化鈉、枯草芽孢桿菌蛋白酶,懸浮液a中氫氧化鈉的濃度以重量計為9%,枯草芽孢桿菌蛋白酶的酶活力與底物濃度之比為7000U/g,然后在溫度為45°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)爸抽提8h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀a ;
[0081]B、酶法再提純
[0082]將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為8%的懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,懸浮液b中胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為4000U/g,然后在溫度為60°C、pH為8.0的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提6h,再用碟片離心機以5000r/min的轉(zhuǎn)速對抽提物進行離心分離20min,取沉淀b ;
[0083]C、干燥
[0084]將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,在進水溫度為160°C、出水溫度為60°C、滾筒轉(zhuǎn)速為35r/min的條件下進行滾筒干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
[0085]根據(jù)本方法得到的酵母葡聚糖粉為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量為6.2 %,水分含量為6.6%,總糖含量(以葡萄糖計)為 80.7%。
[0086]盡管這里參照本發(fā)明的解釋性實施例對本發(fā)明進行了描述,上述實施例僅為本發(fā)明較佳的實施方式,本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制,應(yīng)該理解,本領(lǐng)域技術(shù)人員可以設(shè)計出很多其他的修改和實施方式,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種從啤酒廢酵母殘渣中提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于它包括以下步驟: A、酶-堿法提純 將啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣用水洗滌,然后配成懸浮液a,加入氫氧化鈉、微生物蛋白酶制劑,并在溫度為30°C?70°C的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提Ih?10h,再對抽提物進行離心分離,取沉淀a ; B、酶法再提純 將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成懸浮液b,加入胰蛋白酶制劑,并在溫度為30°C?70°C、pH為6.0?10.0的條件下使用不銹鋼反應(yīng)釜抽提2h?12h,再對抽提物進行離心分離,取沉淀b ; C、干燥 將步驟B得到的沉淀b用水洗滌后,進行干燥,即得到酵母葡聚糖粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于在步驟A中,將啤酒廢酵母進行過篩、脫苦、脫臭處理后配制成酵母濃度以重量計為1%?20%的懸浮液,再加入氯化鈉,使懸浮液中的氯化鈉濃度以重量計為1%?20%,然后使用氫氧化鈉將該懸浮液的PH值調(diào)節(jié)至7.5,接著使用不銹鋼反應(yīng)釜在溫度50°C?100°C的條件下抽提2h?12h,將得到的抽提物迅速冷卻至室溫,再用板框壓濾機過濾,得到的濾渣即為啤酒廢酵母提取細胞內(nèi)容物后剩余的啤酒廢酵母殘渣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于在步驟A中,所述懸浮液a中啤酒廢酵母殘渣的濃度以重量計為5 %?15 %、氫氧化鈉的濃度以重量計為5 %?10%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于在步驟A中,所述微生物蛋白酶制劑為枯草芽孢桿菌蛋白酶,酶活力與底物濃度之比為1000U/g?10000U/g。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于步驟A、步驟B中的離心分離均采用碟片離心機,轉(zhuǎn)速為5000r/min,分離時間為20min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于在步驟B中,將步驟A得到的沉淀a用水洗滌后配成以重量計濃度為5%?15%的懸浮液b,所述胰蛋白酶制劑的酶活力與底物濃度之比為500U/g?5000U/g。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法,其特征在于步驟C中的干燥方式為滾筒干燥,進水溫度為100°C?200°C,出水溫度為50°C?90°C,滾筒轉(zhuǎn)速為lr/min?50r/mino
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項所述的提取堿不溶性葡聚糖的方法所得到的酵母葡聚糖粉,其特征在于它具有下述特性:性狀為干燥無定型粉,均勻一致,顏色為灰白色,無味,難溶于水,以重量計,其灰分含量< 7%,水分含量< 7%,總糖含量> 80%。
【文檔編號】C08B37/02GK104403023SQ201410643328
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月13日
【發(fā)明者】郝剛 申請人:成都天屹生物科技有限公司