專利名稱：一種枸杞多糖的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種植物多糖的提取方法，尤其是涉及一種從中藥材枸杞中提取多糖的方法。
背景技術(shù)：
常規(guī)提取植物多糖的方法為溶劑提取法，超聲波提取法及微波提取法。其中溶劑提取法一般采用熱水、酸的水溶液或堿的水溶液等作為溶劑，而尤以熱水浸提法在多糖提取中應(yīng)用最為廣泛。溶劑提取法工藝比較簡(jiǎn)單，易于操作。然而，其提取效率低，同時(shí)較高的提取溫度以及酸堿的存在容易破壞多糖的結(jié)構(gòu)，降低多糖的生物活性。超聲波提取法是一種物理破碎過(guò)程，可以有效提高提取率，縮短提取時(shí)間，保護(hù)多糖活性結(jié)構(gòu)，但雜質(zhì)會(huì)與有效成分溶出，所以選擇性較差，同時(shí)需要較大的超聲功率，成本較聞。微波提取法的優(yōu)點(diǎn)在于加熱迅速，高效節(jié)能，且選擇性好，然而微波對(duì)人體有傷害，微波泄漏的問(wèn)題成為制約微波技術(shù)在天然藥物有效成分浸提領(lǐng)域大規(guī)模應(yīng)用的關(guān)鍵性問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種提取條件溫和，提取率高，浸提時(shí)間短，同時(shí)還可以較好的保持天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和生物活性的枸杞多糖的提取方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種枸杞多糖的提取方法，包括如下步驟(I)將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)8(Γ120目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入12(Γ180質(zhì)量份的石油醚萃取1 3次，每次2 4h，干燥，得脫脂粉末；(2)將纖維素酶溶于pH為4飛的緩沖液中配制成濃度為1. 59Γ2. 5%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；(3 )將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于25 30質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在55飛O V，超聲功率為6(Tl00W下進(jìn)行浸提l(T30min ；(4)將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱l(Tl5min滅酶,冷卻至室溫后,抽濾除去固體，得到提取液；(5)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于5(T70°C下濃縮至所述提取液體積的1/5 1/4，得濃縮液；(6)向所述濃縮液中加入3飛倍體積的無(wú)水乙醇，于2 6°C靜置l(Tl2h醇沉；(7)對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌2 4次，凍干，得粗枸杞多糖。步驟(I)優(yōu)選為將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)100目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入160質(zhì)量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脫脂粉末。
步驟(2)優(yōu)選為將纖維素酶溶于pH為4. 6的緩沖液中配制成濃度為2. 15%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。步驟(3)優(yōu)選為將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于30質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在55. 790C，超聲功率為78. 6W下進(jìn)行浸提20. 29min。步驟(4)優(yōu)選為將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱IOmin滅酶,冷卻至室溫后，抽濾除去固體，得到提取液。步驟(5)優(yōu)選為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于60°C下濃縮至所述提取液體積的1/5，得濃縮液。步驟(6)優(yōu)選為向所述濃縮液中加入4倍體積的無(wú)水乙醇，于4°C靜置I !醇沉。步驟(7)優(yōu)選為對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌3次，凍 干，得粗枸杞多糖。本發(fā)明的方法獲得的枸杞多糖的收率高，得率可達(dá)到6. 32%，較傳統(tǒng)熱水浸提法提高了 62. 6% ;顯著縮短了浸提時(shí)間，是熱水浸提法所需浸提時(shí)間的1/9，因而其浸提效率大大提高；降低了浸提溫度，浸提條件溫和，可以有效保護(hù)枸杞多糖的立體結(jié)構(gòu)及生物活性。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。下面的實(shí)施例是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠更好地理解本發(fā)明，并不對(duì)本發(fā)明作任何限制。本發(fā)明所采用的藥材枸杞子為茄科植物寧夏枸杞的干燥成熟果實(shí)。實(shí)施例1一種枸杞多糖的提取方法，包括如下步驟(I)將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)100目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入160質(zhì)量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脫脂粉末；(2)將纖維素酶溶于pH為4. 6的緩沖液中配制成濃度為2. 15%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；(3)將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于30質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在在55. 79°C，超聲功率為78. 6W下進(jìn)行浸提20. 29min ；(4)將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱IOmin滅酶,冷卻至室溫后,抽濾除去固體，得到提取液；(5)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于60°C下濃縮至所述提取液體積的1/5，得濃縮液；(6)向所述濃縮液中加入4倍體積的無(wú)水乙醇，于4°C靜置12h醇沉；(7)對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌3次，凍干，得粗枸杞多糖。收率6. 32%。實(shí)施例2一種枸杞多糖的提取方法，包括如下步驟(I)將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)80目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入160質(zhì)量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脫脂粉末；(2)將纖維素酶溶于pH為4的緩沖液中配制成濃度為2. 5%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；(3)將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于25質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在55°C，超聲功率為100W下進(jìn)行浸提IOmin ；(4)將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱IOmin滅酶,冷卻至室溫后,抽濾除去固體，得到提取液；(5)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于50°C下濃縮至所述提取液體積的1/4，得濃縮液；(6)向所述濃縮液中加入3倍體積的無(wú)水乙醇，于4°C靜置Ilh醇沉；(7)對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌2次，凍干，得粗枸杞多糖。收率5. 35%。
實(shí)施例3一種枸杞多糖的提取方法，包括如下步驟(I)將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)100目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入180質(zhì)量份的石油醚萃取I次，時(shí)間4h，干燥，得脫脂粉末；(2)將纖維素酶溶于pH為4. 6的緩沖液中配制成濃度為2. 0%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；(3)將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于28質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在58°C，超聲功率為80W下進(jìn)行浸提20min ；(4)將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱13min滅酶,冷卻至室溫后,抽濾除去固體，得到提取液；(5)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于60°C下濃縮至所述提取液體積的1/4，得濃縮液；(6)向所述濃縮液中加入4倍體積的無(wú)水乙醇，于6°C靜置IOh醇沉；(7)對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌3次，凍干，得粗枸杞多糖。收率5. 96%。實(shí)施例4一種枸杞多糖的提取方法，包括如下步驟(I)將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)120目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入120質(zhì)量份的石油醚萃取3次，每次2h，干燥，得脫脂粉末；(2)將纖維素酶溶于pH為5的緩沖液中配制成濃度為1. 5%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液；(3)將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于30質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在60°C，超聲功率為60W下進(jìn)行浸提30min ；(4)將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱15min滅酶,冷卻至室溫后,抽濾除去固體，得到提取液；(5)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于70°C下濃縮至所述提取液體積的1/5，得濃縮液；(6)向所述濃縮液中加入5倍體積的無(wú)水乙醇，于2°C靜置12h醇沉；(7)對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌4次，凍干，得粗枸杞多糖 。收率4. 51%。
權(quán)利要求
1.一種枸杞多糖的提取方法，其特征是包括如下步驟 (1)將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)8(Γ120目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，力口入120^180質(zhì)量份的石油醚萃取3次，每次2 4h，干燥，得脫脂粉末； (2)將纖維素酶溶于pH為Γ5的緩沖液中配制成濃度為1.59Γ2. 5%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液； (3)將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于25 30質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在55飛(TC，超聲功率為6(Tl00W下進(jìn)行浸提l(T30min ； (4)將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱l(Tl5min滅酶，冷卻至室溫后，抽濾除去固體，得到提取液； (5)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于5(T70°C下濃縮至所述提取液體積的1/5 1/4，得濃縮液； (6)向所述濃縮液中加入3飛倍體積的無(wú)水乙醇，于2 6°C靜置l(Tl2h醇沉； (7)對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌2 4次，凍干，得粗枸杞多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(I)為將20質(zhì)量份經(jīng)真空干燥、粉碎并過(guò)100目篩獲得的枸杞粉末置于提取器中，加入160質(zhì)量份的石油醚萃取2次，每次3h，干燥，得脫脂粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(2)為將纖維素酶溶于pH為4.6的緩沖液中配制成濃度為2. 15%的纖維素酶溶液，所述緩沖液為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(3)為將I質(zhì)量份所述脫脂粉末溶于30質(zhì)量份所述纖維素酶溶液中，在55. 79°C，超聲功率為78. 6W下進(jìn)行浸提20. 29min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(4)為將步驟(3)反應(yīng)后的液體置于沸水浴中加熱IOmin滅酶，冷卻至室溫后，抽濾除去固體，得到提取液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(5)為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)步驟(4)得到的提取液，于60°C下濃縮至所述提取液體積的1/5，得濃縮液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(6)為向所述濃縮液中加入4倍體積的無(wú)水乙醇，于4°C靜置12h醇沉。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述步驟(7)為對(duì)步驟(6)得到的醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌3次，凍干，得粗枸杞多糖。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種枸杞多糖的提取方法，包括如下步驟(1)將枸杞粉置于提取器中，加入石油醚萃取，干燥，得脫脂粉末；(2)將纖維素酶配制纖維素酶溶液；(3)將脫脂粉末溶于纖維素酶溶液中，超聲浸提；(4)加熱滅酶，冷卻至室溫后，抽濾除去固體，得到提取液；(5)蒸發(fā)提取液，濃縮，得濃縮液；(6)醇沉；(7)對(duì)醇沉液離心，取沉淀，以無(wú)水乙醇洗滌，凍干，得粗枸杞多糖。本發(fā)明的方法獲得的枸杞多糖的收率高，得率可達(dá)到6.32%，較傳統(tǒng)熱水浸提法提高了62.6%；顯著縮短了浸提時(shí)間，是熱水浸提法所需浸提時(shí)間的1/9，因而其浸提效率高；降低了浸提溫度，浸提條件溫和，可以有效保護(hù)枸杞多糖的立體結(jié)構(gòu)及生物活性。
文檔編號(hào)C08B37/00GK103012612SQ20121054322
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者賈紹義, 鞏貴麗, 張嬌, 劉勇, 任海濤 申請(qǐng)人:天津大學(xué)