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儲(chǔ)存穩(wěn)定的含有蛋白酶和淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑的制作方法與工藝

文檔序號(hào):11990944閱讀:463來(lái)源:國(guó)知局
儲(chǔ)存穩(wěn)定的含有蛋白酶和淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑本發(fā)明屬于液體洗滌劑和清潔劑的領(lǐng)域。本發(fā)明尤其涉及液體的,含有酶的洗滌劑(washingagent)和清潔劑(cleaningagent),其包含定義的蛋白酶與淀粉酶的組合,此外,本發(fā)明還提供使用這類物質(zhì)(agent)的方法。本發(fā)明還涉及定義的蛋白酶在包含淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑中的用途??莶輻U菌蛋白酶類型的蛋白酶是優(yōu)選用于洗滌劑和清潔劑中的。現(xiàn)有技術(shù)中已知摻入到洗滌劑或清潔劑中的蛋白酶或者初始起源于微生物,例如芽孢桿菌屬(Bacillus)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、腐質(zhì)霉屬(Humicola)或假單胞菌屬(Pseudomonas),和/或是使用合適的微生物,根據(jù)已知的生物技術(shù)方法生產(chǎn)的,例如通過(guò)芽孢桿菌屬或絲狀真菌的轉(zhuǎn)基因表達(dá)宿主?,F(xiàn)代的液體洗滌劑尤其日益增加的包括添加的酶,其中尤其是淀粉酶。淀粉酶是催化(尤其是在多糖例如淀粉中)糖苷鍵水解的酶。在淀粉酶中,水解直鏈淀粉的α(1-4)-糖苷鍵的α-淀粉酶經(jīng)常被摻入到洗滌劑和清潔劑中。在酶的EC分類(酶的數(shù)字分類系統(tǒng))中,α-淀粉酶具有EC號(hào)(“酶學(xué)委員會(huì)編號(hào)”)3.2.1.1,因此屬于6大類酶中的第3類——水解酶(E.C.3.-.-.-)下的糖基化酶(E.C.3.2.-.-)下的糖苷酶(E.C.3.2.1.-),即,水解O-和/或S-糖基化合物的酶。通過(guò)α-淀粉酶降解淀粉提供了糊精以及之后麥芽糖、葡萄糖和支鏈寡糖。因此,淀粉酶特別有效地針對(duì)洗滌中含淀粉的殘余物,并催化其水解。在國(guó)際專利申請(qǐng)WO95/23221中,公開了來(lái)自遲緩芽孢桿菌(Bacilluslentus)DSM5483的枯草桿菌蛋白酶型蛋白酶或蛋白酶變體,其適用于洗滌劑或清潔劑。在這些蛋白酶中,一種可以具有氨基酸改變R99E、A、S或G。還公開了洗滌劑可以包括其他的酶,其中也有淀粉酶。洗滌劑可以是固體或液體。然而,該文獻(xiàn)沒有直接或明確的公開包含淀粉酶與蛋白酶的組合的液體洗滌劑,所述蛋白酶在第99位具有氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)或氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)或氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或絲氨酸(S)。對(duì)于歐洲專利申請(qǐng)EP1921147也是同樣的情況?,F(xiàn)有技術(shù)中含蛋白酶-和含淀粉酶-的液體洗滌劑和清潔劑的缺點(diǎn)是不能夠足夠穩(wěn)定的儲(chǔ)存,因此即使在短時(shí)間后,也會(huì)丟失相當(dāng)量的淀粉分解和/或蛋白水解活性,尤其是淀粉分解活性。蛋白酶的存在通常導(dǎo)致淀粉分解活性的丟失,因?yàn)榈鞍酌甘Щ畹矸勖?。之后,洗滌劑或清潔劑不能表現(xiàn)出最佳的清潔能力。本發(fā)明基于克服上述缺點(diǎn),并提供含蛋白酶-和含淀粉酶-的液體洗滌劑或清潔劑的目的,所述液體洗滌劑或清潔劑可以足夠或更好的穩(wěn)定儲(chǔ)存,特別是相對(duì)于其淀粉分解活性而言。因此,本發(fā)明的主題是液體洗滌劑或清潔劑,含有(a1)含有與SEQIDNO:1所示氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,且在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位具有氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)的蛋白酶,或(a2)含有與SEQIDNO:1所示氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,且在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位具有氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)的蛋白酶,或(a3)含有與SEQIDNO:1所示氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,且在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位具有氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或絲氨酸(S)的蛋白酶,和(b)淀粉酶。令人驚訝的發(fā)現(xiàn),包含上述蛋白酶和淀粉酶組合的液體洗滌劑或清潔劑是有利的能夠穩(wěn)定儲(chǔ)存的。特別是在儲(chǔ)存之后,相比僅在相應(yīng)物質(zhì)中存在的蛋白酶與本發(fā)明物質(zhì)有區(qū)別的洗滌劑或清潔劑,本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑表現(xiàn)出更高的淀粉分解活性,其中,在開始儲(chǔ)存時(shí),相對(duì)于活性酶,比較時(shí)在所述物質(zhì)中蛋白酶以相同濃度存在。因此,本發(fā)明上下文中提供的蛋白酶導(dǎo)致降低的淀粉酶失活。但是,本發(fā)明上下文中提供的蛋白酶對(duì)淀粉酶降低的失活作用不是由于不夠的蛋白酶活性。在這一方面,對(duì)于蛋白酶敏感型污漬,根據(jù)本發(fā)明的物質(zhì)具有并優(yōu)選的仍然具有良好的(尤其是有利的)清潔能力。尤其在低溫時(shí),例如10℃至50℃,優(yōu)選10℃至40℃,或20℃至40℃,該類型對(duì)于至少一種蛋白酶敏感型污漬的清潔能力也存在。因此,這類物質(zhì)能夠充分或改良的去除織物和/或硬表面(例如盤碟)上的至少一種,優(yōu)選多種蛋白酶敏感型污漬。關(guān)于在導(dǎo)言中提及的國(guó)際專利申請(qǐng)WO95/23221,本發(fā)明因此涉及特別有利的選擇,所述選擇提供了高生產(chǎn)且穩(wěn)定儲(chǔ)存的液體洗滌劑,特別是關(guān)于所述物質(zhì)的蛋白水解和/或淀粉分解活性,或所述物質(zhì)在儲(chǔ)存后的剩余活性。在本發(fā)明的上下文中,清潔能力理解為意指使一種或多種污漬變淡的能力,尤其是洗滌污漬。這類污垢的例子是棉上的血-乳/墨水、棉上的全卵/色素、棉上的巧克力-乳/墨水、聚酯/棉上的花生油-色素/墨水、棉上的草或棉上的可可,尤其是下文列舉的類型。在本發(fā)明的上下文中,不僅含有蛋白酶和淀粉酶的洗滌劑或清潔劑、或由該物質(zhì)形成的洗滌液或清潔液,而且蛋白酶或淀粉酶本身,都具有特定的清潔能力。因此,酶的清潔能力有助于所述物質(zhì)和由所述物質(zhì)形成的洗滌液或清潔液的清潔能力。優(yōu)選如下所示確定清潔能力?!跋礈煲夯蚯鍧嵰骸崩斫鉃橐庵高@樣的溶液,所述溶液包含作用于紡織品或織物(洗滌液)或硬表面(清潔液)上的洗滌劑或清潔劑,從而與存在于紡織品和/或織物或硬表面上的污垢接觸。洗滌液或清潔液通常形成于開始洗滌或清潔過(guò)程以及用水溶解或稀釋洗滌劑或清潔劑時(shí),例如在洗衣機(jī)或另一合適的容器中。在本發(fā)明的上下文中,如果在儲(chǔ)存后,根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑表現(xiàn)出比對(duì)照組合物更高的淀粉酶活性,則存在儲(chǔ)存穩(wěn)定性,所述對(duì)照組合物僅在包含于對(duì)照組合物中的蛋白酶上不同于根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑。因此,在儲(chǔ)存后,根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑表現(xiàn)出比對(duì)照更高的剩余淀粉酶活性。因此,在開始儲(chǔ)存時(shí),待比較的兩種物質(zhì)表現(xiàn)出相同的淀粉酶量或濃度和/或初始淀粉分解活性。此外,在開始儲(chǔ)存時(shí),基于活性酶,兩種物質(zhì)具有相同的蛋白酶濃度,并且兩種物質(zhì)都以相同的方式處理,特別是儲(chǔ)存條件和酶活性測(cè)定。儲(chǔ)存按遞增的優(yōu)先度發(fā)生至少24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、5天、1周、2周、3周、4周或8周。此外,儲(chǔ)存優(yōu)選發(fā)生在20℃、25℃或30℃,特別優(yōu)選30℃的溫度下。在這一方面,可以使用與特定酶類型匹配的標(biāo)準(zhǔn)方法,確定酶活性。用于確定酶活性的方法是酶技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員普遍已知的并常規(guī)使用的。例如,用于測(cè)量蛋白酶活性的方法公開在Tenside,第7卷(1970),第125-132頁(yè)。還可以根據(jù)從底物suc-L-Ala-L-Ala-L-Pro-L-Phe-對(duì)硝基苯酰胺(suc-AAPF-pNA)釋放的生色團(tuán)對(duì)硝基苯胺(pNA),確定蛋白水解活性。蛋白酶切割底物并釋放pNA。釋放的pNA導(dǎo)致410nm的消光增加;消光的改變作為時(shí)間的函數(shù)是酶活性的測(cè)量(參見DelMar等人,1979)。測(cè)量在溫度25℃、pH6和410nm波長(zhǎng)下進(jìn)行。測(cè)量時(shí)間是5分鐘,測(cè)量間隔是20s至60s。蛋白酶活性優(yōu)選按PU(蛋白酶單位)給出。使用標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量淀粉酶活性。優(yōu)選如下確定淀粉酶活性。淀粉酶將淀粉轉(zhuǎn)化為葡萄糖。用0.67%淀粉(可溶,根據(jù)Zulowsky預(yù)處理(用甘油在190℃處理))孵育測(cè)試下的樣品,在定義的反應(yīng)條件下(tris-馬來(lái)酸鹽緩沖液,pH6.5,50℃,15min)。通過(guò)添加二硝基水楊酸和在堿性條件下加熱至100℃,用葡萄糖將酸還原并且另外將糖還原以提供橙-紅染料,其在反應(yīng)結(jié)束時(shí)在540nm被光度法測(cè)量。與顯色相對(duì)應(yīng)的釋放的糖量是酶活性的量度(參見Sumner等人,J.Biol.Chem.,1921,47&1924,62)。在本發(fā)明的上下文中,使用在30℃的溫度下儲(chǔ)存了8周的含蛋白酶-和含淀粉酶-的液體洗滌劑或清潔劑,如上所述特別優(yōu)選確定酶穩(wěn)定性的存在,其中根據(jù)從底物suc-AAPF-pNA釋放的對(duì)硝基苯胺生色團(tuán)(pNA)確定蛋白水解活性,并且如上所述確定淀粉分解活性。包含在根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑中的蛋白酶含有與SEQIDNO:1列出的氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,并在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位上具有氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)或氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)或氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或絲氨酸(S)。按遞增的優(yōu)先度,氨基酸序列與SEQIDNO:1列出的氨基酸序列至少81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%同一,相當(dāng)特別優(yōu)選是99%同一。SEQIDNO:1是遲緩芽孢桿菌DSM5483的成熟堿性蛋白酶的序列,公開在國(guó)際專利申請(qǐng)WO92/21760中,本文中明確的涉及其公開內(nèi)容。本發(fā)明證實(shí):通過(guò)向包含淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑添加這類蛋白酶,獲得了特別穩(wěn)定儲(chǔ)存的液體洗滌劑,尤其是對(duì)于儲(chǔ)存后的剩余淀粉分解活性,尤其是按遞增的優(yōu)先度儲(chǔ)存至少24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、5天、1周、2周、3周、4周或8周的時(shí)期之后。包含在根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑中的蛋白酶表現(xiàn)出蛋白水解活性,即,能夠水解多肽或蛋白質(zhì)的肽鍵。因此其是催化肽鍵水解,并且因此能夠切割肽或蛋白質(zhì)的酶。特別地,其是枯草桿菌酶(subtilase),特別優(yōu)選的是枯草桿菌蛋白酶(subtilisin)。淀粉酶是導(dǎo)言中描述的酶。可以使用淀粉酶的同義術(shù)語(yǔ),例如1,4-α-D-葡聚糖-葡聚糖水解酶或糖原酶。本發(fā)明的可適用(conditionable)淀粉酶優(yōu)選是α-淀粉酶。在本發(fā)明的上下文中,酶是否是α-淀粉酶的決定性因子是其水解直鏈淀粉中的α(1-4)-糖苷鍵的能力。根據(jù)本發(fā)明可適用的實(shí)例是來(lái)自地衣芽胞桿菌(Bacilluslicheniformis)、來(lái)自解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)或來(lái)自嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)的α-淀粉酶,以及特別是它們用于洗滌劑或清潔劑的改善的其它改進(jìn)體(development)。來(lái)自地衣芽孢桿菌的酶可以從Novozymes公司在商標(biāo)名和從Danisco/Genencor公司在名稱下獲得。該α-淀粉酶的其它改進(jìn)產(chǎn)品可以從Novozyme公司在商標(biāo)名和下獲得,以及從Danisco/Genencor公司在名稱下獲得,以及從DaiwaSeikoInc.,Tokyo,Japan作為獲得。來(lái)自解淀粉芽胞桿菌的α-淀粉酶是通過(guò)Novozymes公司在名稱下商品化,并且來(lái)自嗜熱脂肪芽胞桿菌的α-淀粉酶的衍生變體在商標(biāo)名和下,也來(lái)自Novozymes公司。此外,為該目的,嘗試來(lái)自芽孢桿菌屬物種(Bacillussp)A7-7(DSM12368)的α-淀粉酶和來(lái)自Bacillusagaradherens(DSM9948)的環(huán)糊精葡聚糖基轉(zhuǎn)移酶(CGTase)。也可以使用所有上述分子的融合產(chǎn)物。此外,來(lái)自黑曲霉(Aspergillusniger)和米曲霉(A.oryzae)的α-淀粉酶的其它改進(jìn)物體(從Novozymes公司獲得,商標(biāo)名)是適合的??梢杂欣厥褂玫钠渌缮藤?gòu)的產(chǎn)品例如是和或Stainzyme或Stainzyme最后一個(gè)也來(lái)自Novozymes公司。通過(guò)點(diǎn)突變獲得的這些酶的變體也可以被本發(fā)明摻入。特別優(yōu)選的淀粉酶公開在國(guó)際申請(qǐng)WO00/60060、WO03/002711、WO03/054177和WO07/079938,因此明確引用上述申請(qǐng)的公開內(nèi)容參考,或在該領(lǐng)域中,因此它們公開的內(nèi)容明確摻入到本專利申請(qǐng)中。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中,洗滌劑或清潔劑中的蛋白酶還包含根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的至少一個(gè)下列氨基酸:(a)第3位的蘇氨酸(3T),(b)第4位的異亮氨酸(4I),(c)第61位的丙氨酸、蘇氨酸或精氨酸(61A、61T或61R),(d)第154位的天冬氨酸或谷氨酸(154D或154E),(e)第188位的脯氨酸(188P),(f)第193位的甲硫氨酸(193M),(g)第199位的異亮氨酸(199I),(h)第211位的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸(211D、211E或211G),(i)氨基酸(a)至(h)的多種組合。因此,除上述第99位的所述氨基酸之一外,蛋白酶還具有一個(gè)或多個(gè)位于相應(yīng)位置上的上述氨基酸。這些氨基酸可以產(chǎn)生其他有利特性,和/或甚至強(qiáng)化已經(jīng)存在的特性。特別的是,上述氨基酸產(chǎn)生液體洗滌劑或清潔劑中或由該洗滌劑或清潔劑形成的洗滌液中的蛋白水解活性和/或蛋白酶穩(wěn)定性的增加。通過(guò)向包含淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑中添加這類蛋白酶,可能獲得儲(chǔ)存特別穩(wěn)定的液體洗滌劑或清潔劑,尤其是在儲(chǔ)存后的其剩余淀粉分解活性方面,還優(yōu)選的在儲(chǔ)存后的其剩余蛋白水解活性方面,尤其是按遞增的優(yōu)先度,儲(chǔ)存至少24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、5天、1周、2周、3周、4周或8周后。這類物質(zhì)還表現(xiàn)出對(duì)蛋白酶-敏感型和/或淀粉酶-敏感型污漬改善的清潔能力。從而通過(guò)比對(duì)將要添加的蛋白酶的氨基酸序列與遲緩芽孢桿菌的蛋白酶的氨基酸序列(如SEQIDNO:1列出的),定義氨基酸位置。因?yàn)檫t緩芽孢桿菌的蛋白酶代表了現(xiàn)有技術(shù)中描述蛋白酶和氨基酸修飾的重要參照分子,因此在說(shuō)明氨基酸位置時(shí),有利的參照遲緩芽孢桿菌的蛋白酶(SEQIDNO:1)計(jì)數(shù)。此外,計(jì)數(shù)與成熟的蛋白質(zhì)相符合。即使要加入的蛋白酶的氨基酸序列含有比根據(jù)SEQIDNO:1的遲緩芽孢桿菌蛋白酶更大數(shù)量的氨基酸殘基,也應(yīng)當(dāng)使用該分類。從遲緩芽孢桿菌蛋白酶的氨基酸序列的所述位置起,要被本發(fā)明加入的蛋白酶的氨基酸位置是在比對(duì)中歸為這些相同位置的那些位置。除第99位之外,特別有利的位置因而是在與SEQIDNO:1的比對(duì)中認(rèn)定的第3、4、61、154、188、193、199和211位,因此是根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的。在所述位置上發(fā)現(xiàn)了遲緩芽孢桿菌蛋白酶的野生型分子中的下列氨基酸殘基:S3、V4、G61、S154、A188、V193、V199和L211。氨基酸3T、4I、61A、154D、154E、211D、211G和211E是特別優(yōu)選的,只要待被本發(fā)明加入的蛋白酶的相應(yīng)位置尚未被上述優(yōu)選的氨基酸之一占據(jù)。例如,取代3T和4I使分子產(chǎn)生穩(wěn)定化效應(yīng),導(dǎo)致蛋白酶改善的儲(chǔ)存穩(wěn)定性和清潔能力,因而也導(dǎo)致包含所述蛋白酶的本發(fā)明的液體洗滌劑或清潔劑改善的清潔能力。如果在相應(yīng)位置上認(rèn)識(shí)到一個(gè)或多個(gè)上述氨基酸,那么除第99位,與SEQIDNO:1的其他序列差異跟著發(fā)生,因?yàn)镾EQIDNO:1在相應(yīng)位置上具有另一個(gè)氨基酸。根據(jù)與SEQIDNO:1的序列差異的數(shù)目,導(dǎo)致本發(fā)明要添加的蛋白酶可以與SEQIDNO:1具有不同的最大同一性值,即使在所有其他氨基酸上與SEQIDNO:1一致。在每種情形下,都需要考慮對(duì)于每種可能的假定氨基酸組合的這一情況,此外該情況還取決于蛋白酶的氨基酸序列長(zhǎng)度。例如,對(duì)于長(zhǎng)度為269個(gè)氨基酸的氨基酸序列而言,具有1、2、3、4、5、6、7、8或9處序列修飾的最大同一性是99.63%、99.26%、98.88%、98.51%、98.14%、97.77%、97.40%、97.03%或96.65%,而對(duì)于長(zhǎng)度為275個(gè)氨基酸的氨基酸序列而言,是99.64%、99.27%、98.91%、98.55%、98.18%、97.82%、97.45%、97.09%或96.73%。通過(guò)序列比較確定核酸或氨基酸序列的同一性。這一比較是通過(guò)相互比對(duì)核苷酸序列或氨基酸序列中的相似序列進(jìn)行的。該序列比較優(yōu)選是基于現(xiàn)有技術(shù)中確立和經(jīng)常使用的BLAST算法進(jìn)行的(參見例如Altschul,S.F.,Gish,W.,Miller,W.,Myers,E.W.&Lipman,DJ.(1990)″Basiclocalalignmentsearchtool.″J.Mol.Biol.215:403-410和Altschul,StephanF.,ThomasL.Madden,AlejandroA.Schaffer,JinghuiZhang,HhengZhang,WebbMiller,和DavidJ.Lipman(1997):″GappedBLASTandPSI-BLAST:anewgenerationofproteindatabasesearchprograms″;NucleicAcidsRes.,25,第3389-3402頁(yè)),原則上是通過(guò)相互比對(duì)核苷酸序列或氨基酸序列中的相似核苷酸或氨基酸序列進(jìn)行。位置的列表式排列被稱為比對(duì)?,F(xiàn)有技術(shù)中可獲得的另一種算法是FASTA算法。序列比對(duì),特別是多重序列比對(duì),通常是用計(jì)算機(jī)程序生成的。通常使用Clustal系列(參見例如Chenna等人(2003):MultiplesequencealignmentwiththeClustalseriesofprograms,NucleicAcidResearch31,3497-3500)、T-Coffee(參見例如Notredame等人(2000):T-Coffee:Anovelmethodformultiplesequencealignments.J.Mol.Biol.302,205-217)或基于上述程序或算法的程序。在本發(fā)明的上下文中,優(yōu)選使用計(jì)算機(jī)程序VectorSuite10.3(InvitrogenCorporation,1600FaradayAvenue,Carlsbad,California,USA)和標(biāo)準(zhǔn)的默認(rèn)參數(shù)生成序列比較和比對(duì)。該類型的比較允許對(duì)比較序列相互之間的相似性進(jìn)行說(shuō)明。通常以百分比同一性表示,即,在自身或相互比對(duì)中,相應(yīng)位置上的相同核苷酸或氨基酸基團(tuán)的分?jǐn)?shù)。廣義術(shù)語(yǔ)氨基酸序列的“同源性”考慮了保守氨基酸改變,即,具有相似化學(xué)活性的氨基酸,因?yàn)樗霭被嵩诘鞍踪|(zhì)內(nèi)行使絕大部分相似的活性或功能。因此,比較序列的相似性也可以表示為百分比同源性或百分比相似性??梢允占瘜?duì)于完整的多肽或基因、或僅對(duì)于單個(gè)區(qū)域的同一性和/或同源性數(shù)據(jù)。因此,通過(guò)匹配序列,定義各個(gè)核酸或氨基酸序列的同源或相同區(qū)域。它們通常具有相同或相似的功能。它們可以是小的區(qū)域,僅包括若干個(gè)核苷酸或氨基酸。通常是這樣的情況,即,這些小的區(qū)域執(zhí)行對(duì)于蛋白質(zhì)總活性而言關(guān)鍵的功能。因此,獲得僅對(duì)于單個(gè)區(qū)域,任選的小區(qū)域的序列匹配,是有價(jià)值的。然而,當(dāng)不另外說(shuō)明時(shí),本申請(qǐng)中的同一性或同源性數(shù)據(jù)涉及相關(guān)的列舉核酸或氨基酸序列的總長(zhǎng)度。在本發(fā)明主題的另一個(gè)實(shí)施方案中,洗滌劑或清潔劑中的蛋白酶含有與上述SEQIDNO:1列出的氨基酸序列相同的氨基酸序列,并且是通過(guò)一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸取代從根據(jù)SEQIDNO:1的蛋白酶獲得或能夠獲得的,其中蛋白酶的第99位仍然具有上述對(duì)于該位置指定的氨基酸之一。術(shù)語(yǔ)“保守氨基酸取代”意指一個(gè)氨基酸殘基被改變(取代)為另一個(gè)氨基酸殘基,其中該取代不導(dǎo)致被改變氨基酸位置上的極性或電荷變化,例如,非極性氨基酸殘基取代另一個(gè)非極性氨基酸殘基。在本發(fā)明的上下文中,保守氨基酸取代包括例如:G=A=S、I=V=L=M、D=E、N=Q、K=R、Y=F、S=T、G=A=I=V=L=M=Y(jié)=F=W=P=S=T。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中,根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑是其中其清潔能力還至少與包括這樣的蛋白酶的洗滌劑或清潔劑相當(dāng),所述蛋白酶含有與SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8,特別優(yōu)選的是SEQIDNO:2中列出的氨基酸序列對(duì)應(yīng)的氨基酸序列。在包含劑量在2.0至9.0克/升洗滌液的含淀粉酶-洗滌劑以及蛋白酶的洗滌系統(tǒng)中,確定清潔能力,其中加入了相同濃度的待比較的蛋白酶(基于活性蛋白質(zhì)),并針對(duì)一種或多種污漬棉上的血-乳/墨水、棉上的全蛋/色素、聚酯/棉上的花生油-色素/墨水和棉上的草漬,尤其是針對(duì)一種或多種下述污漬,確定清潔能力:-棉上的血-乳/墨水:可獲得自CFT(CenterForTestmaterials)B.V.Vlaardingen,Netherlands的產(chǎn)品No.C-05-棉上的全蛋/色素(全蛋/煙灰):可獲得自公司wfkTestgewebeGmbH;Brüggen-Bracht,Germany的產(chǎn)品No.10N,或可獲得自CFT(CenterForTestmaterials)B.V.Vlaardingen,Netherlands的產(chǎn)品C-S-37-聚酯/棉上的花生油-色素/墨水:可獲得自CFT(CenterForTestmaterials)B.V.Vlaardingen,Netherlands的產(chǎn)品No.PC-10-棉上的草漬:可獲得自Material-undPrüfanstalt(EMPA)TestmaterialienAG,St.Gallen(Switzerland)的產(chǎn)品No.164,這是通過(guò)測(cè)量洗滌織物上的白度,其中洗滌過(guò)程持續(xù)至少30分鐘,任選60分鐘,溫度20℃,水的水硬度在15.5至16.5(德國(guó)硬度)之間。洗滌系統(tǒng)的洗滌劑是液體洗滌劑,配制如下(所有數(shù)值都是重量百分比):0.3-0.5%蒼耳烷(xanthane)、0.2-0.4%消泡劑、6-7%甘油、0.3-0.5%乙醇、4-7%FAEOS(脂肪醇醚硫酸鹽)、24-28%非離子型表面活性劑、1%硼酸、1-2%檸檬酸鈉(二水合物)、2-4%蘇打、14-16%椰子脂肪酸、0.5%HEDP(1-羥基乙烷-(1,1-二膦酸))、0-0.4%PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、0-0.5%熒光增白劑、0-0.001%著色劑、0.0001-0.04%淀粉酶(活性蛋白質(zhì)),優(yōu)選(Novozymes公司的淀粉酶制品)、其余是軟化水。洗滌劑中摻入的蛋白酶濃度是0.001-0.1%,優(yōu)選0.01至0.06%,基于活性蛋白質(zhì)。液體洗滌劑優(yōu)選的劑量在2.0至9.0之間,優(yōu)選3.0至8.2,4.0至7.5之間,特別優(yōu)選4.7克/升洗滌液。優(yōu)選在pH8至pH10.5,優(yōu)選pH8至pH9之間的pH范圍進(jìn)行洗滌。在開始洗滌時(shí),洗滌液中的蛋白酶活性和淀粉酶活性都不等于0。用光學(xué)測(cè)量方法,優(yōu)選光度法確定白度,即,作為清潔能力量度的污漬的增亮。用于其中的合適裝置是例如MinoltaCM508d分光計(jì)。通常用白色標(biāo)準(zhǔn),優(yōu)選用隨裝置的白色標(biāo)準(zhǔn)校正用于測(cè)量的裝置。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中,根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑的儲(chǔ)存穩(wěn)定性還至少與包括蛋白酶的洗滌劑或清潔劑的儲(chǔ)存穩(wěn)定性相當(dāng),所述蛋白酶含有與SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8,特別優(yōu)選SEQIDNO:2中列出的氨基酸序列對(duì)應(yīng)的氨基酸序列。當(dāng)在30℃儲(chǔ)存8周后,本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑表現(xiàn)出與用于比較的洗滌劑或清潔劑相等或更高的淀粉酶活性,則存在上述儲(chǔ)存穩(wěn)定性,其中本發(fā)明的物質(zhì)與用于比較的洗滌劑或清潔劑僅在所含蛋白酶上有區(qū)別。比較的材料涉及特別優(yōu)選的液體洗滌劑,其具有下列組成(所有數(shù)據(jù)以重量百分比):摻入在洗滌劑中的蛋白酶濃度為0.001-0.1%,優(yōu)選0.01至0.06%,基于活性蛋白質(zhì)。在開始儲(chǔ)存時(shí),所比較的兩種物質(zhì)都表現(xiàn)出相同的初始淀粉分解活性,包含相對(duì)于活性酶而言相同濃度的蛋白酶,且以相同的方式處理兩種物質(zhì)?;趶牡孜飐uc-AAPF-pNA釋放的生色團(tuán)對(duì)硝基苯胺(pNA),確定物質(zhì)的蛋白水解活性,如前所述確定其淀粉分解活性。每種物質(zhì)的蛋白酶和淀粉酶的初始活性都不等于0。相對(duì)于活性蛋白質(zhì),添加相等活性的淀粉酶和相等濃度的蛋白酶,確保了即使在活性物質(zhì)(substance)與總蛋白質(zhì)比例(比活值)任何可能的偏差條件下,也比較真實(shí)的酶特性。除非另外說(shuō)明,在本發(fā)明的上下文中,參照都是針對(duì)液體洗滌劑的重量的,即,數(shù)據(jù)是基于其重量的。多種蛋白酶,尤其是枯草桿菌蛋白酶都以所謂的前蛋白質(zhì)的形式形成,即與原肽和信號(hào)肽一起,其中,信號(hào)肽的功能通常在于確保從生產(chǎn)蛋白酶的細(xì)胞中排除蛋白酶至周質(zhì)或細(xì)胞周圍的培養(yǎng)基中,原肽通常是蛋白酶的正確折疊所需的。信號(hào)肽和原肽一般位于前蛋白質(zhì)的N-端部分。在天然條件下,通過(guò)信號(hào)肽酶將信號(hào)肽從剩余的蛋白酶上切割下來(lái)。然后,原肽支持發(fā)生蛋白酶的正確最終折疊。然后,蛋白酶處于自身的活性形式,并切割原肽本身。在切割原肽后,成熟的蛋白酶(尤其是枯草桿菌蛋白酶)在缺少原始存在的N-端氨基酸的條件下實(shí)施其催化活性。為了一般性的尤其是在本發(fā)明的上下文中的技術(shù)應(yīng)用,成熟的蛋白酶,即,在其生產(chǎn)后加工過(guò)的酶,比前蛋白質(zhì)更優(yōu)選。此外,可以在生產(chǎn)多肽鏈后,在生產(chǎn)蛋白酶的細(xì)胞中修飾蛋白酶,例如通過(guò)連接糖分子、通過(guò)甲?;?、氨基化等。這類修飾是翻譯后修飾,可以但不必然對(duì)蛋白酶功能產(chǎn)生影響。此外,成熟的蛋白酶的N-端和/或C-端也可以被截短,使得根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑中包含比SEQIDNO:1或SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8截短的蛋白酶(即,片段)。在此情況下,所有的同一性數(shù)據(jù)都涉及這樣的區(qū)域,在所述區(qū)域中,所討論的片段在比對(duì)SEQIDNO:1中是匹配的。然而,在各種情況下,所討論的片段都含有與SEQIDNO:1比對(duì)中的第99位匹配的位置,并在該位置具有相應(yīng)的氨基酸。有利的,還含有一個(gè)或多個(gè)其他上述位置,并在該處具有相應(yīng)的氨基酸。此外,這類片段是蛋白水解活性的。在這一方面,其他優(yōu)選的片段含有這樣的氨基酸序列,所述序列在長(zhǎng)度為至少50個(gè),或至少60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、265、266、267或268個(gè)相連的氨基酸位置上,與SEQIDNO:1或SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8匹配,條件是對(duì)于第99位,以及還任選的對(duì)于第3和/或4和/或61和/或154和/或188和/或193和/或199和/或211位有上述氨基酸。具有這類片段的本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑的清潔能力和/或儲(chǔ)存穩(wěn)定性,至少與包括這樣的蛋白酶的洗滌劑或清潔劑相當(dāng),所述蛋白酶含有與SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8列出的氨基酸序列對(duì)應(yīng)的氨基酸序列,所有序列均如上文所確定。本發(fā)明的另一個(gè)主題是液體洗滌劑或清潔劑,含有(a)選自下列的蛋白酶a.含有根據(jù)SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8的氨基酸序列的蛋白酶;b.在SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8的至少一個(gè)位置上含有改變的氨基酸序列的蛋白酶,其中根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的改變選自:i.第3位的蘇氨酸(3T),ii.第4位的異亮氨酸(4I),iii.第61位的丙氨酸、蘇氨酸或精氨酸(61A、61T或61R),iv.第154位的天冬氨酸或谷氨酸(154D或154E),v.第188位的脯氨酸(188P),vi.第193位的甲硫氨酸(193M),vii.第199位的異亮氨酸(199I),viii.第211位的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸(211D、211E或211G),ix.氨基酸(i)至(viii)的多種組合;(b)淀粉酶。這些蛋白酶尤其特別優(yōu)選摻入到本發(fā)明的液體洗滌劑或清潔劑中。所述蛋白酶從SEQIDNO:1開始,是通過(guò)用氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)或氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)或氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或絲氨酸(S)取代在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位上的氨基酸精氨酸而獲得的。這些氨基酸序列列出在如SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7和SEQIDNO:8的序列錄中。此外,除為第99位提供的氨基酸外,這些蛋白酶可以具有一個(gè)或多個(gè)第3、4、61、154、188、193、199和211位的上述氨基酸,與SEQIDNO:1的比對(duì)匹配和并且因此根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)。這些位置的所述氨基酸還產(chǎn)生其他有利的特性,和/或甚至強(qiáng)化了這些蛋白酶已存在的特性。特別是在液體洗滌劑或清潔劑或通過(guò)該洗滌劑或清潔劑形成的洗滌液中,它們產(chǎn)生蛋白酶的蛋白水解活性和/或穩(wěn)定性的增加。(如果可行)所有上述實(shí)施方案都相應(yīng)的應(yīng)用這些特別優(yōu)選的蛋白酶。本發(fā)明的物質(zhì)按遞增的優(yōu)先度包含基于活性蛋白質(zhì)的1x10-8至5wt%、0.0001至1wt%、0.0005至0.5wt%、0.001至0.1wt%和特別優(yōu)選的0.001至0.06wt%的量的蛋白酶。本發(fā)明的物質(zhì)按遞增的優(yōu)先度包含基于活性蛋白的1x10-8至5wt%、0.00001至1wt%、0.00005至0.5wt%、0.0001至0.1wt%和特別優(yōu)選的0.0001至0.05wt%的量的淀粉酶??梢允褂靡阎姆椒ù_定蛋白質(zhì)濃度,例如BCA法(雙金雞寧酸;2,2′-聯(lián)喹啉-4,4′-二羧酸)或雙縮脲法(A.G.Gornall,C.S.Bardawill和M.M.David,J.Biol.Chem.,177(1948),第751-766頁(yè))。在這一方面,通過(guò)在存在合適的不可逆抑制劑的條件下(對(duì)于蛋白酶,是例如苯甲基磺酰氟化物(PMSF))滴定活性中心并測(cè)量剩余活性(參見M.Bender等人,J.Am.Chem.Soc.88,24(1966),第5890-5913頁(yè)),確定活性蛋白質(zhì)濃度。蛋白酶和/或淀粉酶還可以吸附在載體上和/或包埋在密封劑中,從而保護(hù)其免受過(guò)早分解。在洗滌液中,即,在使用條件下,酶隨后釋放并產(chǎn)生催化活性。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中,洗滌劑或清潔劑另外包括選自以下的組分:i.陰離子型和/或多聚陰離子型物質(zhì),和/或ii.陽(yáng)離子型和/或多聚陽(yáng)離子型物質(zhì),和/或iii.具有羥基和/或多羥基的物質(zhì)。已確定,添加這類物質(zhì)進(jìn)一步改善了洗滌劑和清潔劑的清潔能力,特別是包含蛋白酶和淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑,尤其是上文所述的那些,特別是在比較低的溫度下,尤其是在10℃至50℃之間,10℃至40℃之間,10℃至30℃之間,和/或20℃至40℃之間。特別是當(dāng)與本發(fā)明的可摻入的蛋白酶組合時(shí),產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng),首先是對(duì)于去除至少一種蛋白酶-敏感型污漬,尤其是例如上文列舉的污漬。在上文i中列出的物質(zhì)涉及陰離子型或多聚陰離子型物質(zhì),即,這些物質(zhì)攜帶至少一個(gè),優(yōu)選復(fù)數(shù)個(gè)負(fù)電荷。它們優(yōu)選涉及含有至少一個(gè)帶負(fù)電荷單體,優(yōu)選復(fù)數(shù)個(gè)帶負(fù)電荷單體的聚合物。相應(yīng)的,本發(fā)明優(yōu)選的聚合物是帶負(fù)電荷的聚合物。示例性優(yōu)選的是有機(jī)酸或其鹽的聚合物,尤其是聚丙烯酸酯和/或多糖酸和/或聚丙烯酸酯共聚物和/或多糖共聚物。在這一方面,其他優(yōu)選的化合物是聚丙烯酸磺酸酯或聚羧酸酯及其鹽、共聚物或共聚物的鹽。示例性的特別優(yōu)選添加的物質(zhì)是Acusol587D(聚丙烯酸磺酸酯;Rohm&Haas/DowChemical)、Acusol445N(聚羧酸酯鈉鹽;Rohm&Haas/DowChemical)、Acusol590(聚丙烯酸酯共聚物;Rohm&Haas/DowChemical)、Acusol916(聚丙烯酸酯鈉鹽;Rohm&Haas/DowChemical)、SokalanCP42(修飾的聚羧酸酯鈉鹽;BASF)、SokalanPA30CL(聚羧酸酯鈉鹽;BASF)、DequestP9000(聚馬來(lái)酸;Thermphos)、褐藻酸、聚-2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙烷磺酸、聚-4-苯乙烯磺酸共-馬來(lái)酸鈉鹽、聚丙烯酰胺共-丙烯酸鈉鹽、聚甲基丙烯酸鈉鹽、聚甲基乙烯基醚-alt-馬來(lái)酸或聚乙烯磺酸鈉鹽。ii中列出的物質(zhì)涉及陽(yáng)離子型或多聚陽(yáng)離子型物質(zhì),即,這些物質(zhì)攜帶有至少一個(gè),優(yōu)選復(fù)數(shù)個(gè)正電荷。它們優(yōu)選涉及含有至少一個(gè)帶正電荷單體,優(yōu)選復(fù)數(shù)個(gè)帶正電荷單體的聚合物。因此,本發(fā)明優(yōu)選的聚合物是帶正電荷的聚合物。在這一方面,示例性優(yōu)選化合物是聚胺的鹽、聚乙烯亞胺或其共聚物、聚烯丙胺的鹽、聚二烯丙基二甲基銨化合物或聚(丙烯酰胺-共-二烯丙基二甲基銨)化合物的鹽。iii中列出的物質(zhì)涉及攜帶有至少一個(gè)羥基和/或多羥基,優(yōu)選具有復(fù)數(shù)個(gè)羥基和/或多羥基的物質(zhì)。在這一方面,例如聚乙烯醇是優(yōu)選的,例如可以商標(biāo)名Mowiol獲得的(KremerPigmenteGmbH&Co.KG)那些。就這一點(diǎn)而言,明確的指出實(shí)際的物質(zhì)可以屬于上述組i至iii中的一個(gè)或多個(gè)。例如可以涉及具有一個(gè)或多個(gè)羥基和/或多羥基的陰離子型聚合物。該類型的物質(zhì)因此屬于組i和iii。同樣的,具有一個(gè)或多個(gè)羥基和/或多羥基的陽(yáng)離子型聚合物屬于組ii.和iii。在本發(fā)明的上下文中,同樣也可以添加屬于上述i、ii.或iii的物質(zhì)的衍生物。在本申請(qǐng)的上下文中,衍生物被理解為意指自上述物質(zhì)之一開始,通過(guò)例如側(cè)鏈轉(zhuǎn)化或在物質(zhì)上共價(jià)結(jié)合另一種化合物而化學(xué)修飾的物質(zhì)。這類化合物可以涉及例如低分子量化合物,例如脂類或單糖、寡糖或多糖、或胺類或胺化合物。此外,物質(zhì)可以被糖酵解、水解、氧化、N-甲基化、N-甲?;-乙?;虬谆?、甲?;⒁一?、乙酰基、叔丁基、茴香基、苯甲基、三氟乙酰基、N-羥基琥珀酰亞胺、叔丁氧羰基、苯甲酰基、4-甲基苯甲基、thioanicyl、thiocresyl、苯甲基氧基甲基、4-硝基苯基、苯甲基氧基羰基、2-硝基苯甲酰基、2-硝基苯基氧硫基(2-nitrophenylsulfenyl)、4-甲苯磺?;?、五氟苯基、二苯甲基、2-氯苯甲基氧基羰基、2,4,5-三氯苯基、2-溴苯甲基氧基羰基、9-芴甲氧羰基、三苯基甲基、2,2,5,7,8-五甲基-苯并二氫吡喃-6-磺?;?。同樣的,衍生物被理解為意指與大分子載體的共價(jià)或非共價(jià)鍵合的物質(zhì),也正如合適的大分子籠狀結(jié)構(gòu)內(nèi)的非共價(jià)內(nèi)含物。也可以進(jìn)行與其他大分子化合物例如聚乙二醇的偶聯(lián)。其他優(yōu)選的化學(xué)修飾是一個(gè)或多個(gè)化學(xué)基團(tuán)-COOH、-OH、=NH、-NH2-SH成為-COOR、-OR、-NHR、-NR2、-NHR、-NR、-SR的修飾;其中:R是-CH=CH-R2、-C=C-R2、-C(R2)=CH2、-C(R2)=C(R3)、-CH=NR2、-C(R2)=N-R3、有或無(wú)取代的4-7元碳環(huán)體系、有或無(wú)取代的4-7元氮雜環(huán),或具有選自R1、R2或R3的取代的含1至5個(gè)雙鍵或三鍵的C2至C8碳鏈,其中-R1是H、-R、-NO2、-CN、鹵素取代基、-N3、-C1-8烷基、-(CH2)nCO2R2、-C2-8烯基-CO2R2、-O(CH2)nCO2R2、-C(O)NR2R3、-P(O)(OR2)2、烷基取代四唑-5-基、-(CH2)nO(CH2)n芳基、-NR2R3、-(CH2)nOR2、-(CH2)nSR2、-N(R2)C(O)R3、-S(O2)NR2R3、-N(R2)S(O2)R3、-(CHR2)nNR2R3、-C(O)R3、(CH2)nN(R3)C(O)R3、-N(R2)CR2R3、取代或未取代的(CH2)n-環(huán)烷基、取代或未取代的(CH2)n-苯基或-環(huán);其中n是大于1的數(shù);-R2是H、鹵素取代基、-烷基、-鹵代烷基、-(CH2)n-苯基、-(CH2)1-3-二苯基、-(CH2)1-4-Ph-N(SO2-C1-2-烷基)2、-CO(CHR1)n-OR1、-(CHR1)n-雜環(huán)、-(CHR1)n-NH-CO-R1、-(CHR1)n-NH-SO2R1、-(CHR1)n-Ph-N(SO2-C1-2-烷基)2、-(CHR1)n-C(O)(CHR1)-NHR1、-(CHR1)n-C(S)(CHR1)-NHR1、-(CH2)nO(CH2)nCH3、-CF3、-C2-C5?;?(CHR1)nOH、-(CHR1)nCO2R1、-(CHR1)n-O-烷基、-(CHR1)n-O-(CH2)n-O-烷基、-(CHR1)n-S-烷基、-(CHR1)n-S(O)-烷基、-(CHR1)n-S(O2)-烷基、-(CHR1)n-S(O2)-NHR3、-(CHR3)n-N3、-(CHR3)nNHR4、具有1至5個(gè)雙鍵的C2至C8鏈烯烴鏈、具有1至5個(gè)三鍵的C2至C8鏈炔烴鏈、取代或未取代的-(CHR3)n雜環(huán)、取代或未取代的飽和或不飽和-(CHR3)n環(huán)烷基;其中n是大于1的數(shù),R1和R3可以相同或不同;-R3是H、-OH、-CN、取代烷基、-C2至C8烯基、取代或未取代的環(huán)烷基、-N(R1)R2、飽和或不飽和的C5至C7雜環(huán)或4至7個(gè)碳原子的雜二環(huán)、由飽和或不飽和的雜環(huán)或4至7個(gè)碳原子的雜二環(huán)組成的-NR1、-NR2、-NR1R2;-R4是H、-(CH2)nOH、-C(O)OR5、-C(O)SR5、-(CH2)nC(O)NR6R7、-O-C(O)-O-R6、氨基酸或肽;其中n是0至4之間的數(shù);-R5是H,-R6是-C(R7)-(CH2)n-O-C(O)-R8、-(CH2)n-C(R7)-O-C(O)R8、-(CH2)n-C(R7)-O-C(O)-O-R8、或-C(R7)-(CH2)n-O-C(O)-O-R8;其中n是0至4之間的數(shù);和-R7和R8分別是H、烷基、取代烷基、芳基、取代芳基、烯基、取代烯基、炔基、取代炔基、雜環(huán)、取代雜環(huán)、烷基芳基、取代烷基芳基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基或CH2CO2烷基,其中R7和R8可以相同或不同。本發(fā)明還可以應(yīng)用上述屬于i.、ii.或iii.和/或其衍生物的物質(zhì)所有可能的組合。根據(jù)本發(fā)明的液體洗滌劑或清潔劑可直接使用,或在用水稀釋后使用,尤其是用于清潔織物和/或硬表面。這類稀釋可以輕易的產(chǎn)生,只要按定義的物質(zhì)∶水的重量比,將測(cè)定的物質(zhì)量稀釋在額外量的水中,為了確保物質(zhì)在水中的均勻分布,任選伴有振蕩。用于稀釋的可能的重量或體積比是1∶0物質(zhì)∶水至1∶10000或1∶20000物質(zhì)∶水,優(yōu)選從1∶10至1∶2000物質(zhì)∶水。所有的液體或自由流動(dòng)的劑型都可用作液體洗滌劑或清潔劑。在本申請(qǐng)的上下文中,“自由流動(dòng)”理解為意指是可傾倒的制品,并可具有高達(dá)若干10000mPas的粘度。可以使用標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量粘度(例如使用Brookfield-ViscosimeterLVT-II,20rpm和20℃,spindle3),優(yōu)選處于5至10000mPas的范圍內(nèi)。優(yōu)選的物質(zhì)具有10至8000mPas,特別優(yōu)選120至3000mPas的粘度。在本發(fā)明的上下文中,液體洗滌劑或清潔劑因此也可以是凝膠形式或糊狀形式,可以是均質(zhì)溶液或懸浮液,可以是例如可噴霧的或包裝在其他常見劑量形式中。洗滌劑包括所有可以想到的洗滌劑類型,尤其是用于織物、毯子或天然纖維的洗滌劑。其可供手工和/或自動(dòng)化用途。洗滌劑還包括洗滌助劑,其在手工或自動(dòng)化織物洗滌過(guò)程中按計(jì)量加入到實(shí)際的洗滌劑中,從而實(shí)現(xiàn)另一種效應(yīng)。清潔劑包括所有的物質(zhì),同時(shí)是任何所述劑量形式,用于清潔和/或消毒硬表面,手工和自動(dòng)化洗碗機(jī)去垢劑、毯子清潔劑、沖刷劑(scouringagent)、玻璃清潔劑、WC-芳香清洗劑等。在織物前-和后-調(diào)節(jié)劑一方面是在實(shí)際洗滌前與洗滌劑接觸的那些材料,從而例如部分溶解頑固型污漬,另一方面是在實(shí)際的織物洗滌之后的步驟中使洗滌產(chǎn)生其他理想特性的材料,例如愉悅的觸感、沒有皺痕或低靜電荷殘余。后一提及的物質(zhì)尤其包括織物軟化劑等。消毒劑是例如手消毒劑、表面消毒劑和設(shè)備消毒劑,也都可以是任何上述劑量形式。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,洗滌劑或清潔劑含有至少一種其他成分,特別是選自膦酸鹽/酯、表面活性劑、助洗劑、非水性溶劑、酸、水溶性鹽、增稠劑及其組合的成分。膦酸鹽/酯是膦酸的鹽和有機(jī)化合物,尤其是酯。鹽作為一級(jí)膦酸鹽(M′H2PO3或HP(O)(OH)(OM′))和二級(jí)膦酸鹽(M′2HPO3或HP(O)(OM′)2)存在,其中M′代表單價(jià)金屬。這些無(wú)機(jī)膦酸鹽也被稱為一級(jí)亞膦酸鹽或二級(jí)亞膦酸鹽。無(wú)機(jī)膦酸鹽是通過(guò)例如膦酸HP(O)(OH)2,特別是穩(wěn)定的互變異構(gòu)形態(tài)的亞磷酸,與一(一級(jí))或二(二級(jí))當(dāng)量的堿(例如堿金屬氫氧化物)反應(yīng)獲得的。在本發(fā)明的上下文中,具有磷-碳鍵的有機(jī)P-取代膦酸酯是優(yōu)選的(有機(jī)磷化合物)。其通式結(jié)構(gòu)為R1P(O)(OR2)2(R1和/或R2=烷基、芳基或H),其中烷基或芳基是進(jìn)一步取代的,或者可以攜帶其他的化學(xué)基團(tuán)。例如通過(guò)Michaelis-Arbusov反應(yīng),形成有機(jī)P-取代膦酸酯。許多這類膦酸酯是可溶于水的。一些工業(yè)上重要的膦酸酯攜帶了NR-(CH2)x-PO(OH)2(R=烷基,芳基或H)類型的額外氨基。一些這類氨基膦酸酯與配位劑(如EDTA、NTA或DTPA)是結(jié)構(gòu)上相似的,并具有相似的功能。在本發(fā)明的上下文中,特別優(yōu)選的膦酸酯尤其包括有機(jī)膦酸酯,例如1-羥基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、氨基三(甲叉膦酸)(ATMP,也被稱為氨基-tris(甲叉膦酸)或硝基三(甲叉膦酸)(NTMP))、二乙烯三胺五(甲叉膦酸)(DTPMP或DETPMP或DTPNT)、乙烯二胺四(甲叉膦酸)(EDTMP,也被稱為乙烯二胺四(甲叉膦酸))和2-膦?;⊥?1,2,4-三羧酸(PBS-AM,也被稱為2-膦?;⊥?1,2,4-三羧酸或3-羧基-3-膦?;憾?,它們主要是以其銨鹽或堿金屬鹽的形式添加。二乙烯三胺五(甲叉膦酸)鈉鹽是特別優(yōu)選的。這類膦酸鹽可獲得自例如商標(biāo)名2066(Thermphos公司)。包含在洗滌劑或清潔劑中的膦酸鹽/酯的量?jī)?yōu)選是0.01至2.5wt%,按遞增的優(yōu)先度依次是0.02至2wt%、0.03至1.5wt%,特別是0.05至1wt%.陰離子型、非離子型、兩性離子型和/或兩性表面活性劑可以作為表面活性劑添加。從工業(yè)應(yīng)用的觀點(diǎn)來(lái)看,陰離子型和非離子型表面活性劑的混合物是優(yōu)選的。液體洗滌劑或清潔劑的總表面活性劑含量?jī)?yōu)選低于60wt%,特別優(yōu)選低于45wt%,基于總液體洗滌劑或清潔劑。合適的非離子型表面活性劑包括烷氧基化脂肪醇、烷氧基化脂肪酸烷基酯、脂肪酸酰胺、烷氧基化脂肪酸酰胺、聚羥基脂肪酸酰胺、烷基苯酚聚乙二醇醚、氧化胺、烷基聚葡萄糖苷及其混合物。優(yōu)選的非離子型表面活性劑是烷氧基化的,有利的乙氧基化的,特別是伯醇,其優(yōu)選含有8至18個(gè)碳原子,每摩爾醇含平均1至12摩爾環(huán)氧乙烷(EO),其中醇基可以是線性的,或優(yōu)選在2-位甲基-分支的,或者可以以通常存在于Oxo醇?xì)堅(jiān)械幕旌衔锏男问胶欣缇€性和甲基-分支基團(tuán)。然而特別的是,具有天然來(lái)源的線性醇基(有12至18個(gè)碳原子)的醇乙氧基化物,例如源自可可醇、棕櫚醇、動(dòng)物脂醇或油醇,平均2至8EO/摩爾醇是優(yōu)選的。示例性的優(yōu)選的乙氧基化醇包括具有3EO或4EO的C12-14醇、具有7EO的C9-11醇、具有3EO、5EO、7EO或8EO的C13-15醇、具有3EO、5EO或7EO的C12-18醇,及其混合物,例如具有3EO的C12-14醇與具有5EO的C12-18醇的混合物。對(duì)于特定產(chǎn)品而言,上述乙氧基化程度構(gòu)成可以是整數(shù)或分?jǐn)?shù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)平均值。優(yōu)選的醇乙氧基化物具有狹窄的同源物分布(窄范圍乙氧基化物,NRE)。除上述非離子型表面活性劑外,也可以使用具有超過(guò)12EO的脂肪醇。其實(shí)例是具有14EO、25EO、30EO或40EO的動(dòng)物脂脂肪醇(tallowfattyalcohol)。分子中同時(shí)包含EO和PO基的非離子型表面活性劑也可根據(jù)本發(fā)明使用。其他合適的還有(高)分支的乙氧基化脂肪醇和線性乙氧基化脂肪醇的混合物,例如具有7EO的C16-18脂肪醇和具有7EO的2-丙基庚醇的混合物。洗滌劑、清潔劑、后處理劑或洗滌助劑特別優(yōu)選的包含具有7EO的C12-18脂肪醇,或具有7EO的C13-15Oxo醇作為非離子型表面活性劑。洗滌劑或清潔劑中的非離子型表面活性劑的含量?jī)?yōu)選是3至40wt%,有利的5至30wt%,特別是7至20wt%,在各種情況下都基于總洗滌劑或清潔劑。除非離子型表面活性劑外,洗滌劑或清潔劑還可以包含陰離子型表面活性劑。磺酸鹽、硫酸鹽、皂類、烷基磷酸鹽、陰離子型硅-表面活性劑,及其混合物優(yōu)選作為陰離子型表面活性劑使用?;撬猁}類的合適的表面活性劑有利的是C9-13烷基苯磺酸鹽、烯屬磺酸鹽,即烯烴和羥基烷烴磺酸鹽和二磺酸鹽的混合物,獲得自例如通過(guò)用氣態(tài)三氧化硫?qū)哂心┒嘶騼?nèi)部雙鍵的C12-18單烯烴的磺化作用,和之后磺化產(chǎn)物的堿水解或酸水解。C12-18烷基磺酸鹽的酯和α-磺基脂肪酸的酯(磺酸酯)同樣也是合適的,例如氫化可可酸、棕櫚仁酸(palmnut)或動(dòng)物脂酸(tallowacid)的α-磺酸化甲基酯。優(yōu)選的烷基(烯基)硫酸鹽是源自C12-C18脂肪醇的硫酸半酯的堿金屬鹽,尤其是鈉鹽,例如源自椰油醇(coconutbutteralcohol)、動(dòng)物脂醇、月桂醇、肉豆蔻醇、鯨蠟醇或硬脂醇,或源自C10-C20Oxo醇的,和具有上述鏈長(zhǎng)度的二級(jí)醇的半酯。就洗滌性能而言,C12-C16烷基硫酸鹽、C12-C15烷基硫酸鹽以及C14-C15烷基硫酸鹽是優(yōu)選的。2,3-烷基硫酸鹽也是合適的陰離子型表面活性劑。用1至6摩爾環(huán)氧乙烷乙氧基化的、源自直鏈或分支的C7-21醇的硫酸單酯也是合適的,例如具有平均3.5摩爾環(huán)氧乙烷(EO)的2-甲基-分支C9-11醇,或具有1至4EO的C12-18脂肪醇。皂類也是優(yōu)選的陰離子型表面活性劑。飽和和不飽和的脂肪酸皂類是合適的,例如月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、(氫化)芥子酸和山崳酸的鹽,尤其是源自天然脂肪酸的皂類混合物,例如椰子油脂肪酸、棕櫚仁油脂肪酸、橄欖油脂肪酸或動(dòng)物脂脂肪酸。陰離子型表面活性劑(包括皂類)可以以其鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽或銨鹽的形式存在。陰離子型表面活性劑優(yōu)選以其鈉鹽的形式存在。陰離子型表面活性劑的其他優(yōu)選的反荷離子還是質(zhì)子化形式的膽堿(choline)、三乙胺或甲基乙基胺。洗滌劑或清潔劑中的陰離子型表面活性劑的含量是1至40wt%,有利的是5至30wt%,尤其特別優(yōu)選的是10至25wt%,在各種情況下都基于總洗滌劑或清潔劑??梢蕴貏e提及硅酸鹽、硅酸鋁類(特別是沸石類)、碳酸鹽、有機(jī)二羧酸和聚羧酸的鹽,以及這些材料的混合物,作為包含在洗滌劑或清潔劑中的助洗劑。可以存在于洗滌劑或清潔劑中的有機(jī)助洗劑是例如可以其鈉鹽形式使用的聚羧酸,在本上下文中的聚羧酸理解為具有一個(gè)以上酸官能團(tuán)的羧酸。這些包括例如檸檬酸、己二酸、琥珀酸、戊二酸、蘋果酸、酒石酸、馬來(lái)酸、富馬酸、糖酸、氨基羧酸、氨三乙酸(NTA)、甲基甘氨酸乙酰乙酸(MGDA),及其衍生物,及其混合物。優(yōu)選的鹽是聚羧酸的鹽,所述聚羧酸例如檸檬酸、己二酸、琥珀酸、戊二酸、酒石酸、糖酸,及其混合物。聚合型聚羧酸酯也適合作為助洗劑。它們是例如聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸的堿金屬鹽,例如具有600至750000g/mol的相對(duì)分子量的那些。特別合適的聚合物是聚丙烯酸酯,其優(yōu)選具有1000至15000g/mol的分子量。鑒于其優(yōu)秀的溶解性,該類型優(yōu)選的代表例子再次可以是短鏈聚丙烯酸酯,其具有1000至10000g/mol,特別優(yōu)選1000至5000g/mol的分子量。其他合適的共聚型聚羧酸酯特別是丙烯酸與甲基丙烯酸的酯,和丙烯酸或甲基丙烯酸與馬來(lái)酸的酯。為了改善水溶性,聚合物還可以包含烯丙基磺酸作為單體,例如烯丙氧基苯磺酸和甲代烯丙基磺酸。然而,可溶性助劑是優(yōu)選的,例如優(yōu)選向液體洗滌劑或清潔劑中添加檸檬酸或分子量為1000至5000g/mol的丙烯酸聚合物。在本說(shuō)明書上下文中關(guān)于聚合的聚羧酸酯/鹽所提及的分子量是特定酸類型的重量平均分子量Mw,是使用UV檢測(cè)儀通過(guò)凝膠滲透色譜(GPC)的手段基礎(chǔ)測(cè)定的。測(cè)量針對(duì)外部的聚丙烯酸標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,由于與所討論的聚合物的結(jié)構(gòu)相似性,所述聚丙烯酸標(biāo)準(zhǔn)提供了真實(shí)的分子量值。這些值與用聚苯乙烯磺酸作為標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量的分子量顯著不同。用聚苯乙烯磺酸測(cè)量的分子量一般顯著高于本說(shuō)明書中提及的分子量。需要時(shí),可以下述量包含這類型的有機(jī)助洗劑,所述量多達(dá)40wt%,特別是多達(dá)25wt%,優(yōu)選1wt%至8wt%。優(yōu)選在糊狀或液體,特別是含水組合物中摻入接近所述上限的量。本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑是液體,優(yōu)選包括水作為主要溶劑。此外,洗滌劑或清潔劑中可以添加非水性溶劑。合適的非水性溶劑包括一元醇或多元醇、烷醇胺或乙二醇醚,只要它們?cè)诙x的濃度范圍內(nèi)可與水混溶。溶劑優(yōu)選的選自乙醇、正丙醇、異丙醇、丁醇、乙二醇、丙二醇、丁二醇、甘油、二甘醇、丙基二甘醇、丁基二甘醇、己二醇、乙二醇甲醚、乙二醇乙醚、乙二醇丙醚、乙二醇單正丁醚、二乙二醇甲基醚、二乙二醇乙基醚、丙二醇甲基醚、丙二醇乙基醚、丙二醇丙基醚、二丙二醇單甲基醚、二丙二醇單乙基醚、二異丙二醇單甲基醚、二異丙二醇單乙基醚、甲氧基三甘醇、乙氧基三甘醇、丁氧基三甘醇、1-丁氧基乙氧基-2-丙醇、3-甲基-3-甲氧基丁醇、丙二醇叔丁醚、二正辛醚,以及上述溶劑的混合物。然而,洗滌劑或清潔劑優(yōu)選的包括多元醇作為非水性溶劑。特別的是,多元醇可以包括丙三醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、乙二醇、二乙二醇和/或二丙二醇。洗滌劑或清潔劑特別優(yōu)選包含多元醇和一元醇的混合物。洗滌劑或清潔劑中添加的非水性溶劑的量可以在0.5至15wt%之間,然而優(yōu)選低于12wt%。為了調(diào)節(jié)混合常見組分后的pH至理想水平,物質(zhì)可以包含與系統(tǒng)和環(huán)境相容的酸,特別是檸檬酸、乙酸、酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙醇酸、琥珀酸、戊二酸和/或己二酸,以及礦物酸(特別是硫磺酸)或堿(特別是氫氧化銨或堿金屬的氫氧化物)。包含在物質(zhì)中的這些類型的pH調(diào)節(jié)劑的量?jī)?yōu)選不超過(guò)20wt%,特別是1.2wt%至17wt%。在本發(fā)明的上下文中,物質(zhì)可以額外的包含一種或多種水溶性鹽,用于例如調(diào)節(jié)粘度。在這一方面,可以是無(wú)機(jī)或有機(jī)的鹽。在本文中,可以摻入的無(wú)機(jī)鹽優(yōu)選選自下述組,所述組包括無(wú)色的水溶性鹵化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、磷酸鹽和/或堿金屬的、堿土金屬的、鋁的和/或過(guò)渡金屬的氧化物;此外,可以摻入銨鹽。在這一方面,鹵化物和堿金屬的硫酸鹽是特別優(yōu)選的;因此,無(wú)機(jī)鹽優(yōu)選選自下述組,所述組包括氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀,及其混合物??梢該饺氲氖纠缘挠袡C(jī)鹽是無(wú)色的水溶性堿金屬、堿土金屬、銨、鋁和/或過(guò)渡金屬的羧酸鹽。鹽優(yōu)選選自下述組,所述組包括甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、檸檬酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、丙二酸鹽、草酸鹽、乳酸鹽,及其混合物。根據(jù)本發(fā)明的物質(zhì)可以包含一種或多種使其增稠的增稠劑。增稠劑優(yōu)選的選自下述組,所述組包括黃原膠、瓜爾膠(guar)、角叉菜聚糖、瓊脂、瓊脂、gellan、果膠、刺槐豆粉(locustbeanflours)及其混合物。在存在無(wú)機(jī)鹽時(shí),這些化合物也是有效的增稠劑。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中,洗滌劑或清潔劑包含黃原膠作為增稠劑,因?yàn)榧词乖诖嬖诟啕}濃度的條件下,黃原膠也可有效增稠,并阻止連續(xù)相的肉眼可見的分離。此外,增稠劑使連續(xù)的低表面活性劑相穩(wěn)定,阻止肉眼可見的相分離。可選的,(甲基)丙烯酸(共)聚合物也可以用作增稠劑。示例性的合適的丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物包括高分子量的丙烯酸同聚物,其與聚烯基聚醚,特別是與蔗糖、季戊四醇或丙烯的烯丙醚基交聯(lián)(根據(jù)“化妝品、盥洗用品和香料協(xié)會(huì)(TheCosmetic,ToiletryandFragranceAssociation(CTFA))”的“國(guó)際化妝品成分名錄(InternationalDictionaryofCosmeticIngredients)”的INCI名稱:卡波姆(Carbomer)),也被稱為羧基乙烯聚合物。該類型的多聚丙烯酸尤其可以商標(biāo)名和等獲得。此外,下列丙烯酸共聚物是合適的,例如:(i)兩個(gè)或多個(gè)丙烯酸、甲基丙烯酸及其簡(jiǎn)單酯的基團(tuán)的單體的共聚物,優(yōu)選與C1-4鏈烷醇形成(INCI丙烯酸鹽共聚物),其可以商標(biāo)名例如或聚合物獲得;(ii)交聯(lián)的高分子量丙烯酸共聚物,屬于這類共聚物的是例如C10-30烷基丙烯酸鹽與一個(gè)或多個(gè)丙烯酸、甲基丙烯酸及其簡(jiǎn)單酯的基團(tuán)的單體的共聚物(優(yōu)選與C1-4鏈烷醇形成),與蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交聯(lián)(INCI丙烯酸鹽/C10-30烷基丙烯酸鹽交聯(lián)聚合物),其可以商標(biāo)名獲得。其他合適的聚合物是型的(甲基)丙烯酸(共)聚合物。本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑優(yōu)選的可包含(甲基)丙烯酸(共)聚合物與另一種增稠劑,優(yōu)選黃原膠的組合。洗滌劑或清潔劑可以包含0.05至1.5wt%,優(yōu)選0.1至1wt%增稠劑,分別基于總洗滌劑或清潔劑。在這一方面,添加的增稠劑的量取決于增稠劑的類型和需要的增稠程度。一般通過(guò)簡(jiǎn)單的混合成分,制備在標(biāo)準(zhǔn)溶劑中溶液形式的液體或糊狀的本發(fā)明物質(zhì),其可以直接添加或作為溶液添加到自動(dòng)化混合器中。本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑可以專門包含上述蛋白酶和淀粉酶。可選的,它們還可以包含濃度適合物質(zhì)活性的其他水解酶或其他酶。本發(fā)明的另一個(gè)主題由還含有一種或多種其他酶的物質(zhì)所示例,其中原則上可以添加現(xiàn)有技術(shù)中發(fā)現(xiàn)的用于這類目的的所有酶。在根據(jù)本發(fā)明的物質(zhì)中可以出現(xiàn)催化活性的所有酶都可以優(yōu)選的作為其他酶摻入,特別是蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、半纖維素酶、甘露聚糖酶、鞣酸酶、木聚糖酶、黃原膠酶(xanthanase)、β-葡萄糖苷酶、果膠酶、角叉菜聚糖酶(carrageenase)、perhydrolase、氧化酶、氧化還原酶或脂肪酶,及其混合物。物質(zhì)中包含的其他酶的總量基于活性蛋白質(zhì)分別有利的是1x10-8至5wt%。根據(jù)本發(fā)明的物質(zhì)中包含的各種其他酶的量按遞增的優(yōu)先度是基于活性蛋白質(zhì)的1x10-7至3wt%、0.00001至1wt%、0.00005至0.5wt%、0.0001至0.1wt%,和特別優(yōu)選的0.0001至0.05wt%。酶特別優(yōu)選的對(duì)某些污漬或污垢表現(xiàn)出協(xié)同清潔能力,即,包含在物質(zhì)組合物中的酶在其清潔能力上彼此相互支持。這類協(xié)同作用尤其特別優(yōu)選的存在于本發(fā)明包含的蛋白酶和本發(fā)明物質(zhì)的另一種酶之間,特別是在所述蛋白酶和淀粉酶和/或脂肪酶和/或甘露聚糖酶和/或纖維素酶和/或果膠酶之間。協(xié)同效應(yīng)不僅可以出現(xiàn)在各種酶之間,而且也可以出現(xiàn)在一種或多種酶與本發(fā)明物質(zhì)的其他成分之間。本發(fā)明的另一個(gè)主題是由本發(fā)明物質(zhì)的用途代表的,用于去除織物或硬表面上的污漬,特別是蛋白酶-敏感型和/或淀粉酶-敏感型污漬,即,用于清潔織物或硬表面。特別是由于包含蛋白酶和淀粉酶的組合,本發(fā)明的物質(zhì)可以有利的用于該目的,從而從織物或硬表面上消除相應(yīng)的污染物。通過(guò)手洗,從織物或硬表面上手工去除污垢,或與自動(dòng)化方法關(guān)聯(lián)的使用是本發(fā)明的這一主題的示例性的實(shí)施方案。關(guān)于本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑描述的所有事實(shí)、主題和實(shí)施方案也可用于本發(fā)明的這一主題。因此,對(duì)于恰當(dāng)位置提及的公開內(nèi)容所明確引入在本文的參考,該公開內(nèi)容對(duì)于根據(jù)本發(fā)明的前述用途也是有效的。本發(fā)明的另一個(gè)主題是由清潔織物或硬表面的方法代表的,其中在至少一個(gè)工藝步驟中使用了本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑。這些方法包括手工和自動(dòng)化的方法,自動(dòng)化的方法是優(yōu)選的,因其對(duì)于例如添加量和接觸時(shí)間更精確的可控性。清潔織物的方法一般是在復(fù)數(shù)個(gè)工藝步驟中向待清潔的材料應(yīng)用各種清潔-活性物質(zhì),在接觸時(shí)間之后洗去,或用洗滌劑或該物質(zhì)的溶液或稀釋液以任何其他方式處理待清潔的材料。清潔織物以外的所有材料的方法也是如此,尤其是硬表面??梢栽谒锌上氲降南礈旎蚯鍧嵎椒ǖ闹辽僖粋€(gè)工藝步驟中添加本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑;相應(yīng)的,這些方法也成為本發(fā)明的實(shí)施方案。關(guān)于本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑描述的所有事實(shí)、主題和實(shí)施方案也可用于本發(fā)明的這一主題。因此,對(duì)于恰當(dāng)位置提及的公開內(nèi)容所明確引入在本文的參考,該公開內(nèi)容對(duì)于根據(jù)本發(fā)明的前述用途也是有效的。在優(yōu)選的實(shí)施方案中,方法是其中洗滌液中存在的淀粉酶濃度是0.0000003至0.0004wt%,優(yōu)選0.0000005至0.0003wt%,和/或洗滌液中存在的蛋白酶濃度是0.00009至0.0005wt%,優(yōu)選0.00015至0.00035wt%,其中數(shù)據(jù)是基于洗滌液中的活性蛋白質(zhì)的。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,可以在10℃至50℃,優(yōu)選10℃至40℃,特別優(yōu)選20℃至40℃之間的溫度下,進(jìn)行根據(jù)本發(fā)明的方法。與上述實(shí)施方案相對(duì)應(yīng),摻入在根據(jù)本發(fā)明的物質(zhì)中的蛋白酶可以有利的用于根據(jù)本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑中,以及方法中,尤其是洗滌和清潔方法中。因此可以有利的使用它們,從而為相應(yīng)物質(zhì)提供蛋白水解活性。因此,所形成的另一個(gè)主題是蛋白酶的用途,所述蛋白酶(a1)含有與SEQIDNO:1列出的氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,并在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位上具有氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D),或(a2)含有與SEQIDNO:1列出的氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,并在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位上具有氨基酸天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q),或(a3)含有與SEQIDNO:1列出的氨基酸序列至少80%同一的氨基酸序列,并在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的第99位上具有氨基酸丙氨酸(A)或甘氨酸(G)或絲氨酸(S),用于為還含有淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑提供蛋白水解活性。在另一個(gè)實(shí)施方案中,該用途是其中蛋白酶在根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)時(shí)還包含至少一個(gè)下列氨基酸:(a)第3位的蘇氨酸(3T),(b)第4位的異亮氨酸(4I),(c)第61位的丙氨酸、蘇氨酸或精氨酸(61A、61T或61R),(d)第154位的天冬氨酸或谷氨酸(154D或154E),(e)第188位的脯氨酸(188P),(f)第193位的甲硫氨酸(193M),(g)第199位的異亮氨酸(199I),(h)第211位的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸(211D、211E或211G),(i)氨基酸(a)至(h)的多種組合。本發(fā)明形成的另一個(gè)主題是由蛋白酶的用途形成的,所述蛋白酶選自a.含有根據(jù)SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8的氨基酸序列的蛋白酶;b.在SEQIDNO:2或SEQIDNO:3或SEQIDNO:4或SEQIDNO:5或SEQIDNO:6或SEQIDNO:7或SEQIDNO:8的至少一個(gè)位置上含有改變的氨基酸序列的蛋白酶,其中根據(jù)SEQIDNO:1計(jì)數(shù)的改變選自:i.第3位的蘇氨酸(3T),ii.第4位的異亮氨酸(4I),iii.第61位的丙氨酸、蘇氨酸或精氨酸(61A、61T或61R),iv.第154位的天冬氨酸或谷氨酸(154D或154E),v.第188位的脯氨酸(188P),vi.第193位的甲硫氨酸(193M),vii.第199位的異亮氨酸(199I),viii.第211位的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸(211D、211E或211G),ix.(i)至(viii)的氨基酸的多種組合;用于為還含有淀粉酶的液體洗滌劑或清潔劑提供蛋白水解活性。關(guān)于本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑所描述的所有事實(shí)、主題和實(shí)施方案也可用于所述用途。因此,對(duì)于恰當(dāng)位置提及的公開內(nèi)容所明確引入在本文的參考,該公開內(nèi)容對(duì)于根據(jù)本發(fā)明的前述用途也是有效的。實(shí)施例:確定根據(jù)本發(fā)明的液體洗滌劑的儲(chǔ)存穩(wěn)定性洗滌劑基礎(chǔ)配方是a)下列組成的第一液體洗滌劑(所有數(shù)據(jù)都是wt%):0.3-0.5%蒼耳烷、0.2-0.4%消泡劑、6-7%甘油、0.3-0.5%乙醇、4-7%FAEOS(脂肪醇醚硫酸鹽)、24-28%非離子型表面活性劑、1%硼酸、1-2%檸檬酸鈉(二水合物)、2-4%蘇打、14-16%椰子脂肪酸、0.5%HEDP(1-羥基乙烷-(1,1-二膦酸))、0-0.4%PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、0-0.5%熒光增白劑、0-0.001%著色劑,其余是軟化水。所包含的淀粉酶是0.44wt%12L(來(lái)自Novozymes公司的淀粉酶制品)。b)下列組成的第二液體洗滌劑:向洗滌劑基礎(chǔ)配方中加入下列用于各種實(shí)驗(yàn)的蛋白酶,其中數(shù)據(jù)是基于活性蛋白質(zhì)的:方案1:根據(jù)WO95/23221來(lái)自遲緩芽孢桿菌的蛋白酶性能改善的變體F49(第99位為Arg(99R)):0.4mg/ml(0.04wt%),加入到根據(jù)a)和b)的液體洗滌劑中。方案2:公開在圖2或國(guó)際專利申請(qǐng)WO03/057713的SEQIDNO:3中的蛋白酶(第99位為Ser(99S);與SEQIDNO:1的同一性<80%):0.4mg/ml(0.04wt%),加入到根據(jù)a)的液體洗滌劑中;0.3mg/ml(0.03wt%),加入到根據(jù)b)的液體洗滌劑中。方案3:含有根據(jù)SEQIDNO:2的氨基酸序列的蛋白酶(第99位為Glu(99E)):0.4mg/ml(0.04wt%),加入到根據(jù)a)的液體洗滌劑中;0.3mg/ml(0.03wt%),加入到根據(jù)b)的液體洗滌劑中。測(cè)試根據(jù)方案1、2和3的各種洗滌劑的儲(chǔ)存穩(wěn)定性。將洗滌劑儲(chǔ)存在30℃的溫度下相關(guān)的時(shí)間,確定各自剩余的淀粉分解活性。用0.67%淀粉(可溶,根據(jù)Zulowsky預(yù)處理(用甘油在190℃處理))孵育測(cè)試下的樣品,在定義的反應(yīng)條件下(tris-馬來(lái)酸鹽緩沖液,pH6.5,50℃,15min)。通過(guò)添加二硝基水楊酸和在堿性條件下加熱至100℃,用葡萄糖將酸還原并且另外將糖還原以提供橙-紅染料,其在反應(yīng)結(jié)束時(shí)在540nm被光度法測(cè)量。與顯色相對(duì)應(yīng)的釋放的糖量是酶活性的量度(參見Sumner等人,J.Biol.Chem.,1921,47&1924,62)。下表1列出了所測(cè)量的剩余的淀粉分解活性(n.d.=未測(cè)定)。表1:相比方案1和2的洗滌劑,本發(fā)明的洗滌劑明顯表現(xiàn)出顯著改善的剩余淀粉分解活性,以及因此改善的儲(chǔ)存穩(wěn)定性。
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