專利名稱：地喹氯銨-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共軛化合物及其修飾的白藜蘆醇脂質(zhì)體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種地喹氯銨-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共軛化合物及其制備方法，以及以該共軛化合物修飾的白藜蘆醇脂質(zhì)體
背景技術(shù)：
腫瘤的多藥耐藥性是化療失敗的主要原因，可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)治療的耐藥、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，尤其是內(nèi)源性的多藥耐藥。腫瘤細(xì)胞可通過改變前凋亡及凋亡基因編碼的蛋白質(zhì)(如Be 1-2家族蛋白、凋亡信號(hào)通路中的Caspase蛋白等)的功能來引起遺傳及表觀遺傳的改變，從而造成內(nèi)源性的多藥耐藥。癌癥的化療主要采取兩種基本方式來消除腫瘤細(xì)胞一是通過將化療藥直接作用·于腫瘤細(xì)胞將其殺死，二是通過激活腫瘤細(xì)胞的凋亡基因，從而展開程序化殺傷腫瘤細(xì)胞。線粒體是一種絕大多數(shù)真核細(xì)胞中都存在的膜封閉的細(xì)胞器，是細(xì)胞的能量工廠。線粒體除了可以供應(yīng)細(xì)胞能量，也是細(xì)胞命運(yùn)的調(diào)控中心，參與著細(xì)胞分化、細(xì)胞死亡，控制著細(xì)胞的周期和生長(zhǎng)。腫瘤細(xì)胞的線粒體在結(jié)構(gòu)和功能上都與正常細(xì)胞有所不同，其表現(xiàn)出更廣泛的代謝能力，對(duì)作用于線粒體的藥物也更加敏感。抗癌藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡效應(yīng)主要包括兩種獨(dú)立的上游起始通路一，通過與死亡受體的配體交聯(lián)，從而激活上游的Caspase ;二，通過觸發(fā)各種形式的細(xì)胞應(yīng)激，釋放凋亡因子。這兩種通路都集中于在線粒體水平，繼而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。因此，直接作用于腫瘤細(xì)胞的線粒體并誘導(dǎo)其凋亡為克服化療中的內(nèi)源性耐藥問題提供了策略。綜上，線粒體靶向性治療是一種選擇性消除腫瘤細(xì)胞的有效手段。越來越多的線粒體作用的藥物被開發(fā)用來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，例如葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑、線粒體通透性轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)劑、線粒體外膜滲透性調(diào)節(jié)劑等。但是這些藥物常因不利的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)不能達(dá)到預(yù)期的治療效果，增大了藥物的毒性。人們已經(jīng)開發(fā)了許多線粒體藥物遞送系統(tǒng)來解決這一問題，如將線粒體靶向性分子磷酸三甲苯酯(TPP)、地喹氯銨(DQA)或線粒體靶向性信號(hào)蛋白(MTSs)修飾到脂質(zhì)載體上，從而達(dá)到將藥物靶向線粒體的目的。白藜蘆醇是一種多酚化合物，在植物類食物中普遍存在。白藜蘆醇是一種很有潛力的抗癌劑，可抑制癌變的三個(gè)主要階段啟動(dòng)、促進(jìn)和演進(jìn)，并啟動(dòng)線粒體凋亡通路，誘導(dǎo)多種癌癥細(xì)胞凋亡。但是，由于白藜蘆醇的水溶性低、穩(wěn)定性差及治療指數(shù)差，在臨床中的應(yīng)用十分有限。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種地喹氯銨-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DqA-PEG2000-DSPE)共軛化合物及其制備方法。本發(fā)明所提供的dqa-peg2_-dspe共軛化合物的結(jié)構(gòu)式如式I所示
權(quán)利要求
1.式I所示的化合物
2.式I所示的化合物的制備方法，包括下述步驟使式II所示的地喹氯銨與式III所示的羧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺進(jìn)行酰胺縮合反應(yīng)，得到式I所示化合物；
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述酰胺縮合反應(yīng)中所用的反應(yīng)縮合劑為二環(huán)己基碳二亞胺和I-羥基苯并三唑；所述酰胺縮合反應(yīng)中所用的催化劑為4- 二甲氨基吡啶。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于所述方法還包括將式I所示化合物在水中進(jìn)行透析純化，并將透析后的液體凍干的步驟。
5.一種線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體,其組成包括白藜蘆醇和脂材,所述白藜蘆醇和脂材的質(zhì)量比為I : 20至I : 40;所述脂材由蛋黃卵磷脂、膽固醇和式I所示的化合物組成，三者的摩爾比依次為(63-67) (18-22) (2-4.35)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體，其特征在于所述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體中所述白藜蘆醇和脂材的質(zhì)量比為I : 20;所述脂材中蛋黃卵磷脂、膽固醇和式I所示的化合物的摩爾比依次為65 20 4. 35； 所述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體的平均粒徑為68. 82±0. 43nm,包封率為96. 79±0. 26%。
7.制備權(quán)利要求5或6所述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體的方法，包括下述步驟將權(quán)利要求5或6中所述白藜蘆醇和脂材溶于有機(jī)溶劑中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去所述有機(jī)溶劑，得到脂膜；將所述脂膜用甘露醇溶液水化，再將得到的懸液用超聲或高壓勻質(zhì)處理，最后用微孔濾膜過濾，即得到所述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體。
8.權(quán)利要求5或6所述的線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體在下述I)或2)中的應(yīng)用1)制備預(yù)防和/或治療腫瘤藥物；2)制備真核生物腫瘤細(xì)胞增殖的抑制劑；3)制備真核生物腫瘤細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑；4)制備真核生物腫瘤細(xì)胞的線粒體內(nèi)細(xì)胞色素C釋放誘導(dǎo)劑；5)制備真核生物腫瘤細(xì)胞內(nèi)caspase 9和/或caspase 3活化誘導(dǎo)劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述腫瘤為癌，所述癌優(yōu)選為肺癌，更優(yōu)選為內(nèi)源性耐藥肺癌； 所述真核生物為哺乳動(dòng)物；所述腫瘤細(xì)胞為癌細(xì)胞；所述癌細(xì)胞為肺癌細(xì)胞，優(yōu)選人肺腺癌A549細(xì)胞或多藥耐藥肺癌A549/cDDP細(xì)胞。
10.一種抗腫瘤藥物組合物，含有權(quán)利要求5或6所述的線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體和重酒石酸長(zhǎng)春瑞賓脂質(zhì)體。
全文摘要
本發(fā)明公開了DQA-PEG2000-DSPE共軛化合物及其修飾的白藜蘆醇脂質(zhì)體。該化合物的結(jié)構(gòu)式如式I所示。所述白藜蘆醇脂質(zhì)體，其組成包括白藜蘆醇和脂材，所述白藜蘆醇和脂材的質(zhì)量比為1∶20至1∶40；所述脂材由蛋黃卵磷脂、膽固醇和式I所示的化合物組成，三者的摩爾比依次為(63-67)∶(18-22)∶(2-4.35)。經(jīng)藥效試驗(yàn)證明，線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體在人肺腺癌A549細(xì)胞及其耐藥A549/cDDP細(xì)胞的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、腫瘤球模型及體內(nèi)移植瘤模型中都具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒作用，可以穿透到腫瘤球的核心。將其與長(zhǎng)春瑞濱脂質(zhì)體聯(lián)用可顯著提高長(zhǎng)春瑞濱脂質(zhì)體對(duì)耐藥性A549/cDDP細(xì)胞的抗腫瘤效果。(式I)。
文檔編號(hào)C08G65/48GK102757555SQ201110123878
公開日2012年10月31日 申請(qǐng)日期2011年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月29日
發(fā)明者于洋, 呂萬良, 姚紅娟, 居瑞軍, 張亮, 張燕, 李若婧, 李陽冰, 王小星 申請(qǐng)人:北京大學(xué)