一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法，具體涉及一種酶-連續(xù)逆流超聲協(xié)同提取水飛薊素的方法。該方法以干燥水飛薊籽為原料，壓榨去油，于60℃烘干，粉碎，乙醇浸泡并加入復(fù)合酶酶解，連續(xù)逆流超聲提取，過(guò)濾，濾液上預(yù)處理后的大孔吸附樹脂純化，溶劑洗脫，濃縮，得水飛薊素。本發(fā)明采用生物酶破壁和連續(xù)逆流超聲協(xié)同作用，增加了有效成分的溶出率，具有無(wú)毒性、反應(yīng)條件溫和、提取率高、提取時(shí)間短、提取成本低的優(yōu)點(diǎn)，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，涉及一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法，尤其涉及一種利用酶-連續(xù)逆流超聲協(xié)同提取水飛薊素的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]水飛薊素是從水飛薊果實(shí)水中提取得到的黃酮木質(zhì)素類化合物，外觀呈淡黃色粉末，不溶于水、氯仿，溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮等溶劑，主要分布于種殼中，種仁中含量極微，主要包括水飛薊賓、異水飛薊賓、水飛薊亭、水飛薊寧等化合物。具有抗肝中毒、保護(hù)肝細(xì)胞膜、改善肝功能的藥理活性，臨床用于治療肝炎、膽囊炎等。近年來(lái)水飛薊素又?jǐn)U展應(yīng)用到抗衰老和美容化妝品領(lǐng)域，市場(chǎng)需求巨大。
目前，國(guó)內(nèi)傳統(tǒng)的提取水飛薊素多采用有機(jī)溶媒滲漉和熱回流等方法，但這些方法普遍存在能耗高、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、產(chǎn)率低等問(wèn)題。此外，有專利報(bào)道使用超臨界二氧化碳萃取法提取水飛薊素，但是高溫高壓生產(chǎn)難度大，危險(xiǎn)性高，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種節(jié)能、對(duì)設(shè)備要求低、原料利用率高、產(chǎn)品含量高、工藝簡(jiǎn)單的提取水飛薊素的新方法。
本發(fā)明的步驟如下:
a.將干燥水飛薊籽，壓榨去油，于60°C烘干，粉碎，備用；
b.將上述粉碎的水飛薊籽中加入5?10倍的6(Γ80%的乙醇，再加入原料重量0.5^2%的復(fù)合酶，攪拌均勻，于5(Γ60?、6(Γ80ΚΗΖ連續(xù)逆流超聲提取2?3h，過(guò)濾；
c.上述濾液加入預(yù)處理過(guò)的大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗樹脂柱，再加入5?10BV的6(Γ80%的乙醇洗脫有效成分，收集洗脫液；
d.減壓濃縮，干燥得水飛薊素。
步驟b中所述的復(fù)合酶為纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶按0.5:0.3:0.2混合(重量比)。
步驟c中所述的大孔吸附樹脂為AB-8、NKA-9、D-101等。
步驟c中所述的大孔吸附樹脂的預(yù)處理方法為乙醇濕法裝柱，繼續(xù)用乙醇在柱上流動(dòng)清洗，當(dāng)流出的乙醇液與水混合不呈現(xiàn)白色乳濁現(xiàn)象即可，然后以大量的蒸餾水洗去乙醇，至無(wú)醇味止。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:使用復(fù)合酶酶解構(gòu)成植物細(xì)胞壁的纖維素、半纖維素及細(xì)胞質(zhì)中的果膠，從而破壞植物細(xì)胞壁，有利于水飛薊素的溶出，從而提高水飛薊素的提取率；再加以超聲波的空化效應(yīng)、機(jī)械振動(dòng)以及熱效應(yīng)來(lái)增大物質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，加速了水飛薊素的溶出，大大提高了水飛薊素在溶劑中的溶解度；最后以大孔吸附樹脂的技術(shù)進(jìn)行純化,得到了高含量的水飛薊素。本發(fā)明不僅收率高,含量高,而且工藝簡(jiǎn)單,生產(chǎn)成本低。下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
實(shí)施例1
將干燥水飛薊籽，壓榨去油，于60°c烘干，粉碎，在Ikg粉碎的水飛薊籽中加入5倍的80%的乙醇，再加入原料重量0.5%的復(fù)合酶(纖維素酶:半纖維素酶:果膠酶為
0.5:0.3:0.2)，攪拌均勻，于60°C、60KHz連續(xù)逆流超聲提取2h，過(guò)濾，濾液加入預(yù)處理過(guò)的A8-8大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗樹脂柱，再加入5BV的60%的乙醇洗脫有效成分，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥得18.1g水飛薊素，經(jīng)UV檢測(cè)，總黃酮含量為80.3%。
實(shí)施例2
將干燥水飛薊籽，壓榨去油，于60°C烘干，粉碎，在Ikg粉碎的水飛薊籽中加入8倍的70%的乙醇，再加入原料重量1.0%的復(fù)合酶(纖維素酶:半纖維素酶:果膠酶為
0.5:0.3:0.2)，攪拌均勻，于55°C、80KHz連續(xù)逆流超聲提取2.5h，過(guò)濾，濾液加入預(yù)處理過(guò)的NKA-9大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗樹脂柱，再加入8BV的70%的乙醇洗脫有效成分，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥得20.4g水飛薊素，經(jīng)UV檢測(cè)，總黃酮含量為84.7%。
實(shí)施例3
將干燥水飛薊籽，壓榨去油，于60°C烘干，粉碎，在Ikg粉碎的水飛薊籽中加入10倍的60%的乙醇，再加入原料重量1.5%的復(fù)合酶(纖維素酶:半纖維素酶:果膠酶為
0.5:0.3:0.2)，攪拌均勻，于50°C、70KHz連續(xù)逆流超聲提取3h，過(guò)濾，濾液加入預(yù)處理過(guò)的D-101大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗樹脂柱，再加入1BV的80%的乙醇洗脫有效成分，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥得19.Sg水飛薊素，經(jīng)UV檢測(cè)，總黃酮含量為81.9%。
【權(quán)利要求】
1.一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法，其特征在于，包括如下步驟: a.將干燥水飛薊籽，壓榨去油，于60°C烘干，粉碎，備用； b.將上述粉碎的水飛薊籽中加入5?10倍的6(Γ80%的乙醇，再加入原料重量0.5^2%的復(fù)合酶，攪拌均勻，于5(Γ60?、6(Γ80ΚΗΖ連續(xù)逆流超聲提取2?3h，過(guò)濾； c.上述濾液加入預(yù)處理過(guò)的大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗樹脂柱，再加入5?10BV的6(Γ80%的乙醇洗脫有效成分，收集洗脫液； d.減壓濃縮，干燥得水飛薊素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法，其特征在于，步驟b中所述的復(fù)合酶為纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶按0.5:0.3:0.2混合(重量比)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法，其特征在于，步驟c中所述的大孔吸附樹脂為AB-8、NKA-9、D-101等。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從水飛薊中提取水飛薊素的新方法，其特征在于，步驟c中所述的大孔吸附樹脂的預(yù)處理方法為乙醇濕法裝柱，繼續(xù)用乙醇在柱上流動(dòng)清洗，當(dāng)流出的乙醇液與水混合不呈現(xiàn)白色乳濁現(xiàn)象即可，然后以大量的蒸餾水洗去乙醇，至無(wú)醇味止。
【文檔編號(hào)】C07D407/04GK104230906SQ201410446404
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】張金芳, 楊存 申請(qǐng)人:南京標(biāo)科生物科技有限公司