一種二氫噁唑類抗生素及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種二氫噁唑類抗生素，其化學(xué)分子式為C10H11NO3，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示：進一步地，本發(fā)明涉及制備該化合物的生物合成方法以及兩種化學(xué)合成方法。進一步地，本發(fā)明還涉及該化合物抑制多種人畜病原細(xì)菌和農(nóng)作物病原細(xì)菌的用途。該化合物是國內(nèi)外未報道過的新化合物，具有全新的分子結(jié)構(gòu)。其可以通過微生物發(fā)酵制備，也可以通過人工化學(xué)合成制備。
【專利說明】一種二氫噁唑類抗生素及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于抗生素領(lǐng)域，具體涉及一種抗生素及其制備方法。
技術(shù)背景
[0002]無論是醫(yī)藥工業(yè)還是農(nóng)藥工業(yè)都迫切需要篩選開發(fā)新型抗生素。日本的YukiInahashi 等人以及中國的 Weiming Zhu 等人分別從 Streptosporangium oxazolinicumK07-0460T和Nocardiopsis dassonvillei HR10-5 發(fā)酵產(chǎn)物中得到化合物(II) (R)_2_(鄰羥基苯基)-4-羥甲基-4，5- 二氫噁唑，但是都不具有抗菌活性。2013年吳文君等人申請的國家發(fā)明專利“一種苯并氮氧雜卓類抗生素及其制造方法”(專利申請?zhí)?01310028444.1)述及從雅加達(dá)鏈霉菌(Sereptomyces djakartensis)發(fā)酵產(chǎn)物中分離出一種抗生素2_輕甲基-3，4-二氫-1，4-苯并氮氧雜卓-5 (IH)酮(III);所述式(II)和式(III)化合物的
結(jié)構(gòu)式如下:
[0003]
【權(quán)利要求】
1.一種二氫噁唑類抗生素，其特征在于:其化學(xué)分子式為CltlH11NO3，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式⑴所示:
2.一種生物合成如權(quán)利要求1所述的二氫噁唑類抗生素的方法，其特征在于:所述方法包括如下步驟: 步驟一:發(fā)酵 (1)發(fā)酵菌種:發(fā)酵菌株是在中國山東半島農(nóng)藥污染地區(qū)采集土樣，在實驗室分離培養(yǎng)獲得，鑒定為雅加達(dá)鏈霉菌(Sereptomyces djakartensis);該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏日期為2012年11月13日，保藏登記號為CGMCCN0.6817 ； (2)斜面培養(yǎng):采用淀粉酪素培養(yǎng)基于IXlO5帕下滅菌30min，接菌后28-32°C培養(yǎng)4-5d ;所述淀粉酪素培養(yǎng)基由如下組分組成:可溶性淀粉10.0g，磷酸氫二鉀2.0g，硝酸鉀2.0g,氯化鈉2.0g,酪蛋白0.3g，7水硫酸鎂0.05g,碳酸鈣0.02g, 7水硫酸亞鐵0.01g,瓊脂20.0g,蒸餾水 1000ml，PH 值 7.2-7.4 ； (3)種子培養(yǎng):將種子培養(yǎng)基分裝于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于IX IO5帕下滅菌30min ;用無菌水將斜面上的孢子洗下制成孢子懸浮液，使其濃度為I X IO6-X IO7個/ml ；每瓶加0.5-2.0ml孢子懸浮液，置于轉(zhuǎn)速為150-180r/min的搖床上，28_32°C培養(yǎng)24_36h ；所述種子培養(yǎng)基由如下組分組成:小米10_30g加蒸懼水1000ml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖15-30g，氯化鈉2-5g，蛋白胨2-10g，碳酸鈣0.2-0.8g，硫酸銨0.5-2.5g，PH值7.2-7.4 ； (4)液體發(fā)酵:將發(fā)酵培養(yǎng)基分裝于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于IX IO5帕下滅菌30min ;接種步驟(3)的種子培養(yǎng)物，接種量10% (V/V)，置于轉(zhuǎn)速為150_240r/min的搖床上，28-32°C培養(yǎng)4-6d ;所述發(fā)酵培養(yǎng)基為小米10-30g加蒸餾水1000ml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖15-30g，氯化鈉2-5g，蛋白胨2-10g，碳酸鈣0.5_2.5g，硫酸銨l_3g，PH值 7.2-7.4 ； 步驟二:抗生素的分離 (1)將步驟一制得的發(fā)酵液經(jīng)100-200目篩網(wǎng)過濾后，用HH)大孔吸附樹脂吸附，甲醇-水梯度洗脫； (2)將甲醇洗脫液濃縮后進行硅膠柱層析，以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9: 1、8: 2、7: 3、6: 4和純甲醇依次洗脫，收集以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9: I的流分，濃縮后放置過夜，析出抗生素粗結(jié)晶； (3)將上述粗結(jié)晶用制備高效液相色譜純化，得到式(I)所示的抗生素純品。
3.一種化學(xué)合成如權(quán)利要求1所述的二氫噁唑類抗生素的方法，其特征在于:所述方法的化學(xué)反應(yīng)式如下:
4.一種化學(xué)合成如權(quán)利要求1所述的二氫噁唑類抗生素的方法，其特征在于:所述方法的化學(xué)反應(yīng)式如下:
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的二氫噁唑類抗生素用于抑制人畜病原細(xì)菌的用途，所述人畜病原細(xì)菌為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、糞腸球菌(E.faecalis)、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)、豬鏈球菌(Swine streptococcal)、結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)、乳酸乳桿菌(Bacteriumlactis)、牛分枝桿菌(Mycobacterium boyis)、錯狀芽抱桿菌(Bacillus cereus)、大腸埃氏菌(Escherichiacoil)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methici11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，所述人畜病原細(xì)菌為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methici11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的二氫噁唑類抗生素用于抑制農(nóng)作物病原細(xì)菌的用途，所述農(nóng)作物病原細(xì)菌為白菜軟腐病菌(Erwina carotovora)、稻白葉枯黃單胞桿菌(Xanthomanas oryzae pv.0ryzal(Ishiyama)Dye) Λ 棉角斑病菌(Xanthomonascampestris pv.malvacearum(E.F.Smith)Dowson) Λ 柑橘潰痕病菌(XanthomonasCampestris pv.citri)、柑橘黃梢病菌(Candidatus liberobacter asiaticus)、青枯假單胞桿菌(Pseudomonas solanacearum)、黃瓜角斑病病菌(Pseudomonas syringaepv.lachrymans)、馬鈴薯環(huán)腐病菌(Clavibactermichiganensissubsp.sepedonicus)、稱猴桃潰痕病菌(Pseudomonas syringaePv.actinidiae)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，所述農(nóng)作物病原細(xì)菌為白菜軟腐病菌(Erwinacarotovora)、水稻白葉枯病菌(Xanthomanas oryzaepv.0ryzal (Ishiyama) Dye)、稱猴桃潰痕病菌(Pseudomonas syringae Pv.actinidiae)。
【文檔編號】C07D263/14GK103923029SQ201410095161
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】吳文君, 張繼文 申請人:吳文君, 張繼文