利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，包括將蛹蟲草子實(shí)體粉碎、用水提取，將提取液濃縮，然后加入乙醇靜置析出蟲草多糖并得到上清液，將上清液過大孔吸附樹脂柱得洗脫液，將洗脫液濃縮干燥得蟲草素浸膏。本發(fā)明方法所得產(chǎn)品有害溶劑殘留少，該方法步驟簡單，成本低，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食用藥用真菌的深加工領(lǐng)域，具體涉及一種從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蟲草素在野生冬蟲夏草中的含量極微，現(xiàn)在研究所用的蟲草素一般均是從蛹蟲草中提取的。有抗病毒、抗腫瘤作用。蟲草素作為一種新型的廣譜抗菌素，以其特有的抗菌抗病毒活性，已引起全球科技發(fā)達(dá)國家的高度重視。它能抑制腫瘤細(xì)胞的DNA和RNA合成；對枯草桿菌和鳥結(jié)核桿菌均有抑制作用JtHIV-1型病毒也有殺傷作用；尤其對多種實(shí)體惡性腫瘤有很強(qiáng)的抑制作用。因此，將其作為一種用途廣泛的新藥來開發(fā)是必然趨勢。
[0003]提取蟲草素的方法有大孔樹脂提取法、超臨界法、陰陽離子交換樹脂提取法等。但超臨界法對于設(shè)備的投資巨大，陰陽離子交換法需要用HCl和氨水等調(diào)節(jié)pH值，極易殘留， 不利于食品安全，同時(shí)得率太低；另外，現(xiàn)有的方法大多步驟復(fù)雜，成本高，對原材料造成很大的浪費(fèi)，不能用于工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種步驟簡單，成本低，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，無有害溶劑殘留的從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法。
[0005]本發(fā)明提 供的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，包括將蛹蟲草子實(shí)體粉碎、用水提取，將提取液濃縮，然后加入乙醇靜置析出蟲草多糖并得到上清液，將上清液過大孔吸附樹脂柱得洗脫液，將洗脫液濃縮干燥得蟲草素浸膏。
[0006]作為改進(jìn)，上述粉碎粒度為10-30目。
[0007]作為改進(jìn)，上述用水提取料水比為1:5-20，提取溫度50-701:。
[0008]作為改進(jìn)，上述將提取液濃縮，溫度控制在50-70°C，將提取液濃縮為比重
1.1-1.5g/cm3 的稠膏。
[0009]作為改進(jìn)，上述過大孔吸附樹脂柱，洗脫溶劑為20-50%的乙醇水溶液、洗脫流速 2-5BV/h0
[0010]作為改進(jìn)，上述將洗脫液濃縮，控制溫度為50-70°C，將洗脫液濃縮為稠膏。
[0011]作為改進(jìn)，上述將洗脫液濃縮干燥，得到蟲草素含量在15%以上的浸膏。
[0012]本發(fā)明得到的蟲草素干膏可以直接制作成品，除了蟲草素含量大幅提高外，其他有效成分如蛋白質(zhì)、氨基酸和微量元素也得以保留；得到的蟲草素干膏如果再進(jìn)行精制，雖然可得純度98%以上的蟲草素，但得率極低，只有10%左右，對原材料造成浪費(fèi)。
[0013]本發(fā)明以蛹蟲草子實(shí)體為原料，利用大孔樹脂吸附蟲草素的效果好，減少了蟲草素的流失，提高了得率；沒有使用HC1、氨水等化學(xué)試劑，保證了所提蟲草素產(chǎn)品的綠色、健康；能生產(chǎn)出具有生理活性蟲草素的蟲草素產(chǎn)品，所得產(chǎn)品有害溶劑殘留少；該方法具有適合工業(yè)化生產(chǎn)的明確的工藝條件，步驟簡單，成本低，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]附圖1為實(shí)施例1的蟲草素洗脫液HPLC檢測圖。
【具體實(shí)施方式】[0015]本發(fā)明方法將蛹蟲草子實(shí)體(蟲草素含量在0.2-0.5%)干燥至5%以下的含水量， 用10-30目的篩網(wǎng)進(jìn)行粉碎，其中粉碎粒度以20目最佳。
[0016]將粉碎后的原料，以水為提取溶劑，料水比是1:5-20，提取溫度50_70°C，每次提取時(shí)間是2_10h。
[0017]將得到的提取液用濃縮到比重為1.1-1.5g/cm3的稠膏，其中濃縮溫度控制在 50-70°C，真空度在-0.005至-0.009 Mpa，加2_5倍稠膏體積的乙醇，靜置過夜取上清液備用，得醇沉物，干燥即粗蟲草多糖。
[0018]對上清液進(jìn)行稀釋處理，以備進(jìn)行大孔吸附樹脂純化。上柱時(shí)控制上樣溶液蟲草素質(zhì)量濃度為0.6-2.0mg/mL、上樣體積2-10BV、上樣流速l_3BV/h ;解吸溶劑為20-50%乙醇水溶液(優(yōu)選25%)、洗脫流速2-5BV/h、所用解吸溶劑體積4-10BV。
[0019]將洗脫下來的洗脫液在壓力為-0.005Mpa至-0.009Mpa、溫度為50_70°C的狀態(tài)下進(jìn)行濃縮，將其濃縮至稠膏狀態(tài)，然后將其干燥后得到蟲草素含量15%以上的蟲草素干膏。 下面以具體實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的說明:
實(shí)施例一
按下述步驟從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖:
(1)粉碎:把人工蛹蟲草子實(shí)體在50°C烘至水分在5%以下，過10目篩網(wǎng)粉碎；
(2)用水提取:將150kg粉碎的蛹蟲草子實(shí)體投到3噸的提取罐中，注入純化水 3000kg，料液比1:20，并開啟攪拌，溫度控制在65-70°C，每次浸泡提取時(shí)間為2小時(shí)，重復(fù)浸泡提取三次；
(3)濃縮醇沉:將三次的提取液混合并，打入真空濃縮罐減壓濃縮至160kg的稠膏(t匕重為1.5g/cm3)，其中濃縮溫度50-70°C，濃縮壓力-0.005至-0.009Mpa。在稠膏中加入5 倍稠膏體積的95%乙醇，靜置過夜取上清液備用，得醇沉物，干燥即粗蟲草多糖；
(4)大孔吸附樹脂洗脫:取上清液進(jìn)行稀釋處理，控制上樣溶液蟲草素質(zhì)量濃度
0.6mg/mL、上樣體積10BV、上樣流速3BV/h ;洗脫溶劑為50%乙醇水溶液、洗脫流速2BV/h、 洗脫體積4BV。洗脫液取樣用HPLC檢測，波長260nm，見附圖1。
[0020](5)濃縮干燥:將洗脫下來的洗脫液打入真空濃縮罐，在壓力為_0.005Mpa 至-0.009Mpa、溫度為50-70°C的狀態(tài)下進(jìn)行濃縮，將其濃縮至稠膏。然后將其轉(zhuǎn)入微波干燥箱，溫度和壓力都和濃縮時(shí)一樣，干燥后得到含量在17%的蟲草素干膏，得率63%。
[0021]實(shí)施例二
按下述步驟從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖:
(1)粉碎:把人工蛹蟲草子實(shí)體在50°C烘至水分在5%以下，過30目篩網(wǎng)粉碎；
(2)用水提取:將150kg粉碎的蛹蟲草子實(shí)體投到3噸的提取罐中，注入純化水750kg， 料液比1:5，并開啟攪拌，溫度控制在50-55°C，每次浸泡提取時(shí)間為10小時(shí)，重復(fù)浸泡提取三次；
(3)濃縮醇沉:將三次的提取液混合并，打入真空濃縮罐減壓濃縮至150kg的稠膏(t匕重為1.lg/cm3)，其中濃縮溫度50-70°C，濃縮壓力-0.005至-0.009Mpa。在稠膏中加入2 倍稠膏體積的95%乙醇，靜置過夜取上清液備用，得醇沉物，干燥即粗蟲草多糖；
(4)大孔吸附樹脂洗脫:取上清液進(jìn)行稀釋處理，控制上樣溶液蟲草素質(zhì)量濃度
2.0mg/mL、上樣體積2BV、上樣流速lBV/h ;洗脫溶劑為20%乙醇水溶液、洗脫流速5BV/h、洗脫體積10BV。
[0022](5)濃縮干燥:將洗脫下來的洗脫液打入真空濃縮罐，在壓力為_0.005Mpa 至-0.009Mpa、溫度為50-70°C的狀態(tài)下進(jìn)行濃縮，將其濃縮至稠膏。然后將其轉(zhuǎn)入微波干燥箱，溫度和壓力都和濃縮時(shí)一樣，干燥后得到含量在15.3%的蟲草素干膏，得率65%。`
【權(quán)利要求】
1.一種利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，包括將蛹蟲草子實(shí)體粉碎、用水提取，將提取液濃縮，然后加入乙醇靜置析出蟲草多糖并得到上清液，將上清液過大孔吸附樹脂柱得洗脫液，將洗脫液濃縮干燥得蟲草素浸膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，其特征在于所述粉碎粒度為10-30目。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，其特征在于所述用水提取料水比為1:5-20，提取溫度50-70°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，其特征在于所述將提取液濃縮，溫度控制在50-70°C，將提取液濃縮為比重1.1-1.5g/ cm3的稠膏。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之一所述的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，其特征在于所述過大孔吸附樹脂柱，洗脫溶劑為20-50%的乙醇水溶液、洗脫流速 2-5BV/h0
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，其特征在于所述將洗脫液濃縮，控制溫度為50-70°C，將洗脫液濃縮為稠膏。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4之一或6所述的利用大孔吸附樹脂從蛹蟲草中提取蟲草素及蟲草多糖的方法，其特征在于所述將洗脫液濃縮干燥，得到蟲草素含量在15%以上的浸 膏。
【文檔編號】C07H19/16GK103601812SQ201310592568
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月22日
【發(fā)明者】寇克明, 彭艷梅 申請人:寧波廣發(fā)文博生物科技有限公司