專利名稱：一種葉下珠斯泰丁a的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種葉下珠斯泰丁 A的制備工藝。
背景技術(shù)：
葉下珠斯泰丁 A (Phyllanthostatin A)為木脂素類化合物,分子式為C29H3tlO13,分子量為586.55，為無定性固體，mp.127_130°C。葉下珠斯泰丁 A主要來源于大戟科植物漸突Phyllanthus acuminatus Vahl.的根。藥理學(xué)研究表明，葉下珠斯泰丁具有細(xì)胞抑制活性，體外抑制PS白血病細(xì)胞生長，ED50為4 μ g/mL。目前對(duì)葉下珠斯泰丁A的研究較少，因此提供一種葉下珠斯泰丁 A的制備工藝對(duì)含有葉下珠斯泰丁 A的藥材資源開發(fā)及藥理研究具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種葉下珠斯泰丁 A的制備工藝。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種葉下珠斯泰丁 A的制備工藝，其特征在于包括以下步驟:取漸尖葉下珠的干燥根，粉碎至40目，投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，獲得萃取物，將萃取物用乙醚萃取多次，所得萃取液濃縮后得乙醚浸膏，乙醚浸膏通過硅膠柱層析，正己烷-乙酸乙酯梯度洗脫，洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得葉下珠斯泰丁 A產(chǎn)品。所述超臨界CO2萃取條件為:萃取溫度為38 55°C、壓力為25 32MPa、時(shí)間為2 3h，CO2流量為18 26L/h，以95%乙醇為夾帶劑，夾帶劑的用量為原料量的15 30%，解析溫度30 40°C、壓力 8 9MPa 。所述硅膠柱徑高比為1:10-15，正己烷-乙酸乙酯混合溶劑按體積比1: 1、1: 5、1:8
進(jìn)行梯度洗脫。本發(fā)明的優(yōu)勢(shì)在于:本發(fā)明采用超臨界CO2萃取，清潔無污染，硅膠柱層析，分離效率聞，可提聞廣品純度。
具體實(shí)施方式
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實(shí)施例1:
將漸尖葉下珠的干燥根粉碎，過40目篩，取5kg投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù):萃取溫度38°C，壓力為25MPa，通入CO2流量為18L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入1500ml95%乙醇作為夾帶劑參與萃取，萃取2h后，解析，解析溫度35°C、壓力8.5MPa，從分離釜中收集萃取物，將萃取物用乙醚反復(fù)萃取4次，合并乙醚萃取液，濃縮后得到乙醚浸膏。將乙醚浸膏與適量硅膠混合拌勻，用浸膏5倍量的硅膠裝柱(柱徑高比1:10)，將拌樣硅膠置于柱頂，用正己烷-乙酸乙酯按體積比1:1、1:5、1:8進(jìn)行梯度洗脫，薄層跟蹤監(jiān)測(cè)，收集葉下珠斯泰丁 A的流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、干燥即得葉下珠斯泰丁 A產(chǎn)品，HPLC檢測(cè)，純度為62.3%。實(shí)施例2:將漸尖葉下珠的干燥根粉碎，過40目篩，取5kg投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù):萃取溫度45°C，壓力為28MPa，通入CO2流量為20L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入750ml95%乙醇作為夾帶劑參與萃取，萃取3h后，解析，解析溫度35°C、壓力8.5MPa，從分離釜中收集萃取物，將萃取物用乙醚反復(fù)萃取5次，合并乙醚萃取液，濃縮后得到乙醚浸膏。將乙醚浸膏與適量硅膠混合拌勻，用浸膏4倍量的硅膠裝柱(柱徑高比1:8)，將拌樣硅膠置于柱頂，用正己烷-乙酸乙酯按體積比1:1、1:5、1:8進(jìn)行梯度洗脫，薄層跟蹤監(jiān)測(cè)，收集葉下珠斯泰丁 A的流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、干燥即得葉下珠斯泰丁 A產(chǎn)品，HPLC檢測(cè)，純度為67.9%。實(shí)施例3:
將漸尖葉下珠的干燥根粉碎，過40目篩，取5kg投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù):萃取溫度55°C，壓力為29MPa，通入CO2流量為26L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入1000ml95%乙醇作為夾帶劑參與萃取，萃取2.5h后，解析，解析溫度40°C、壓力9MPa，從分離釜中收集萃取物，將萃取物用乙醚反復(fù)萃取4次，合并乙醚萃取液，濃縮后得到乙醚浸膏。將乙醚浸膏與適量硅膠混合拌勻，用浸膏6倍量的硅膠裝柱(柱徑高比1:15)，將拌樣硅膠置于柱頂，用正己烷-乙酸乙酯按體積比1:1、1:5、1:8進(jìn)行梯度洗脫，薄層跟蹤監(jiān)測(cè)，收集葉下珠斯泰丁 A的流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、干燥即得葉下珠斯泰丁 A產(chǎn)品，HPLC檢測(cè)，純度為66.4%。實(shí)施例4:
將漸尖葉下珠的干燥根粉碎，過40目篩，取5kg投入萃取釜中，通入處于超臨界狀態(tài)的CO2進(jìn)行萃取，設(shè)定萃取釜參數(shù):萃取溫度55°C，壓力為32MPa，通入CO2流量為22L/h，待萃取罐內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定后，通入750ml95%乙醇作為夾帶劑參與萃取，萃取3h后，解析，解析溫度30°C、壓力8MPa，從分離釜中收集萃取物，將萃取物用乙醚反復(fù)萃取3次，合并乙醚萃取液，濃縮后得到乙醚浸膏。將乙醚浸膏與適量硅膠混合拌勻，用浸膏5倍量的硅膠裝柱(柱徑高比1:15)，將拌樣硅膠置于柱頂，用正己烷-乙酸乙酯按體積比1:1、1:5、1:8進(jìn)行梯度洗脫，薄層跟蹤監(jiān)測(cè)，收集葉 下珠斯泰丁 A的流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、干燥即得葉下珠斯泰丁 A產(chǎn)品，HPLC檢測(cè)，純度為57.9%。
權(quán)利要求
1.一種葉下珠斯泰丁 A的制備工藝，其特征在于包括以下步驟:取漸尖葉下珠的干燥根，粉碎至40目，投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，獲得萃取物，將萃取物用乙醚萃取多次，所得萃取液濃縮后得乙醚浸膏，乙醚浸膏通過硅膠柱層析，正己烷-乙酸乙酯梯度洗脫，洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得葉下珠斯泰丁 A產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種葉下珠斯泰丁A的制備工藝，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為:萃取溫度為38 55°C、壓力為25 32MPa、時(shí)間為2 3h，CO2流量為18 26L/h，以95%乙醇為夾帶劑，夾帶劑的用量為原料量的15 30%，解析溫度3(T40°C、壓力8 9MPa。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種葉下珠斯泰丁A的制備工藝，其特征在于所述硅膠柱徑高比為1:10- 15，正己烷-乙酸乙酯混合溶劑按體積比1:1、1:5、1:8進(jìn)行梯度洗脫。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種葉下珠斯泰丁A的制備工藝，方法步驟是取漸尖葉下珠的干燥根，粉碎至40目，投入萃取釜，通入液態(tài)CO2和夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，獲得萃取物，將萃取物用乙醚萃取多次，所得萃取液濃縮后得乙醚浸膏，乙醚浸膏通過硅膠柱層析，正己烷-乙酸乙酯梯度洗脫，洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得葉下珠斯泰丁A產(chǎn)品。本方法具有高效、低污染的優(yōu)點(diǎn)，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07H1/08GK103232496SQ20131019465
公開日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月23日
發(fā)明者蘇劉花, 萬冬梅 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司