專利名稱：具有神經(jīng)保護(hù)作用的石蒜倫堿類化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及四個(gè)新穎的石蒜科生物堿類化合物(石蒜倫堿A、石蒜倫堿B、石蒜倫堿C和石蒜倫堿D)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用及在防治阿爾茨海默癥方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默癥(Alzheimer’ s disease,AD)是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性退行性疾病，全世界超過(guò)3650萬(wàn)人罹患此癥。該病主要表現(xiàn)為進(jìn)行性智力、記憶力及認(rèn)知力的降低，患者在逐步喪失思考、說(shuō)話及活動(dòng)能力的同時(shí)邁向死亡。我國(guó)現(xiàn)有AD患者約有800萬(wàn)之多。由于晚期AD患者生活不能自理，并常伴有嚴(yán)重的精神、神經(jīng)癥狀，不但嚴(yán)重降低了老年人的生活質(zhì)量，還給家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。AD作為老年期癡呆的主要類型，是繼心臟病、癌癥、中風(fēng)之后的第四位死因。因此，對(duì)AD的防治已引起醫(yī)藥學(xué)界乃至全社會(huì)的廣泛關(guān)注。針對(duì)AD進(jìn)行的新型先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)及其作用機(jī)理的研究，已成為中西醫(yī)藥學(xué)工作者致力研究的重要課題。目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)根治AD的理想藥物?？晒┡R床使用的AD治療藥物的多為乙酰膽喊酶抑制劑(acetylcholinesterase inhibitor, AChEI):如美國(guó) FDA 批準(zhǔn)的 5 個(gè) AD 治療藥物中有4個(gè)是AChEI ;由我國(guó)首創(chuàng)的AD治療藥物石杉?jí)A甲(huperzine A)也是AChEI。AChEI僅能抑制阿爾茨海默癥患者乙酰膽堿神經(jīng)傳遞的減少?gòu)亩徑釧D癥狀，使患者短期內(nèi)能夠正常生活，但并不能逆轉(zhuǎn)其病理過(guò)程，從而不能解決引發(fā)疾病的根本原因。理想的AD治療藥物除了補(bǔ)償神經(jīng)退行性病變所影響的神經(jīng)遞質(zhì)外，還應(yīng)能阻止甚至逆轉(zhuǎn)AD發(fā)病的各個(gè)環(huán)節(jié)如Αβ的異常產(chǎn)生和沉積，從而對(duì)AD起到根治作用。由于傳統(tǒng)中藥具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多方式的作用機(jī)制，在AD治療中，起到越來(lái)越重要的作用?；谥兴幒椭参锼幓A(chǔ)上的新型抗AD藥物的研究和開(kāi)發(fā)正顯示出巨大的應(yīng)用前景。石蒜科石蒜屬(Lycoris)植物全世界有20多種，主要分布于中國(guó)和日本，我國(guó)有16種，占全屬植物的75%。該屬植物在我國(guó)主要分布于長(zhǎng)江以南地區(qū)，尤以溫暖濕潤(rùn)地區(qū)種類較多。石蒜始載于《圖經(jīng)本草》，主要用于“敷貼腫毒”。《本草綱目拾遺》記載，石蒜能“治喉風(fēng)、痰核、白火丹、肺癰，煎酒服”。該屬植物在民間主要用于治療老年性癡呆，目前FDA批準(zhǔn)上市的治療阿爾茨海默癥的5種藥物中就包括了從石蒜中提取的加蘭他敏(galantamine, Reminyl)。石蒜屬植物的鱗莖主要含有生物堿及多糖等類成分。早在60年代，我國(guó)學(xué)者洪山海等對(duì)紅花石蒜、紫花石蒜、黃花石蒜中生物堿進(jìn)行了系統(tǒng)分離，從中得到12種生物堿單體成分。但在60-70年代之后，對(duì)石蒜屬植物生物堿的研究處于停滯狀態(tài)。目前對(duì)石蒜屬植物的研究主要集中在染色體的結(jié)構(gòu)與核型進(jìn)化，而對(duì)該屬其它植物的化學(xué)成分及藥理活性等研究鮮有報(bào)道。目前，由于AD致病機(jī)制尚不明確，故AD的治療藥物均只能改善AD患者的癥狀，而沒(méi)有能夠?qū)ζ洳∫蜻M(jìn)行治療，所以沒(méi)有達(dá)到很好的治療效果。天然藥物具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多方式的作用機(jī)制，能夠改善AD患者的癥狀，調(diào)理腦功能，在AD治療和預(yù)防中，起到越來(lái)越重要的作用。許多具有抗癡呆、抗炎癥、抗氧化作用的天然藥物都具有治療AD的潛力，且天然藥物多經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期臨床使用，其療效已被肯定，使用安全性較高。如石杉?jí)A甲、人參皂苷、遠(yuǎn)志皂苷、姜黃素、白藜蘆醇、銀杏提取物、蛇床子素、丹酚酸等已被證實(shí)具有不同程度的抗AD活性。從石蒜科植物中分離得到的加蘭他敏已開(kāi)發(fā)成為治療AD的首選藥物之一，已經(jīng)報(bào)道的石蒜科生物堿有100多種，有豐富的生物活性。如抗菌抗炎抗病毒、抗癌、抗焦慮、抗驚厥、免疫激活、鎮(zhèn)痛等活性。因此基于石蒜科生物堿基礎(chǔ)上的新型抗AD藥物的研究和開(kāi)發(fā)正顯示出巨大的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種石蒜倫堿類化合物，使其具有神經(jīng)保護(hù)及防治阿爾茨海默癥方面的作用。本發(fā)明還提供這種石蒜倫堿類化合物的制備方法。本發(fā)明進(jìn)一步還提供了以這種石蒜倫堿類化合物為活性成分的用于神經(jīng)保護(hù)或防治阿爾茨海默癥的藥物。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案是:本發(fā)明提供的這種石蒜倫堿類化合物具有以下式(I)所示的化學(xué)結(jié)構(gòu):
權(quán)利要求
1.具有以下式(I)所示結(jié)構(gòu)的化合物:
2.權(quán)利要求1所述的化合物在制備用于神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述的化合物在制備用于預(yù)防和治療阿爾茨海默癥的藥物中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1所述化合物的制備方法，包括以下步驟: 步驟一:用有機(jī)溶劑提取石蒜科植物的鱗莖，提取液減壓濃縮得浸膏； 步驟二:將所得浸膏均勻分散于水中，先用二氯甲烷萃取以除去中性成分；然后以鹽酸調(diào)節(jié)水相pH值至2 5，用二氯甲烷萃取除去其它非生物堿成分；再以飽和氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水相PH值至9 12，用二氯甲烷萃取得到生物堿部位浸膏； 步驟三:將所得生物堿部位浸膏經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析、反相色譜層析及凝膠色譜層析得到權(quán)利要求1所述的化合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備權(quán)利要求1所述化合物的方法，其特征在于，步驟一所述的有機(jī)溶劑為10% -100%含I至4個(gè)碳原子的低級(jí)醇中的I種或2種以上的醇，或丙酮。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備權(quán)利要求1所述化合物的方法，其特征在于，步驟一所述的石蒜科植物可以是黃花石蒜(Lycorisaurea)、雜交石蒜(Hybridized lycoris)或換錦花(Lycorissprengeri)。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟一所述的石蒜科植物是黃花石蒜(Lycorisaurea)，步驟三所述的將所得生物堿部位浸膏經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析、反相色譜層析及凝膠色譜層析得到權(quán)利要求1所述的化合物具體方法是:取黃花石蒜生物堿總浸膏，甲醇溶解后進(jìn)行S^hadex LH-20凝膠色譜層析，按薄層板上的色譜行為合并洗脫液，得1-1V四個(gè)部位，將部位II進(jìn)行硅膠柱層析，以二氯甲烷:甲醇的混合溶劑按體積比I: 0-0: I洗脫，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測(cè)后，按薄層板上的色譜行為合并洗脫液，得F1-F7七個(gè)部位，將其中的第3個(gè)部位F3進(jìn)行硅膠柱層析，以二氯甲烷:甲醇的混合溶劑按體積比1: 0-0: I洗脫，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測(cè)后，按薄層板上的色譜行為合并洗脫液，得F3^1 F3_4四個(gè)部位，將部位F3_4以甲醇:水為8.5: 1.5進(jìn)行反相半制備高效液相柱層析分離，在保留時(shí)間為20.2分鐘時(shí)得到一種白色針晶為對(duì)應(yīng)權(quán)利要求1之式(I)中R1 = R2=CH3, R3 = n-C4H9, R4 = H的化合物，即石蒜倫堿B ;或/和 將部位III進(jìn)行硅膠柱層析，以二氯甲烷:甲醇的混合溶劑按體積比1: O至O:1梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測(cè)后，按薄層板上的色譜行為合并，得A-D四個(gè)部位，將部位A以甲醇:水為7: 3進(jìn)行反相半制備高效液相柱層析分離，在保留時(shí)間為50.3分鐘時(shí)得到一種白色針晶得到一種白色針晶為對(duì)應(yīng)權(quán)利要求1之式(I)中RJR2 = CH2,R3 = n-C4H9,R4=OH的化合物，即石蒜倫堿A。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟一所述的石蒜科植物是雜交石蒜(Hybridized Lycoris),步驟三所述的將所得生物堿部位浸膏經(jīng)反復(fù)娃膠柱層析、反相色譜層析及凝膠色譜層析得到權(quán)利要求1所述的化合物具體方法是:取雜交石蒜PH12部位生物堿總浸膏，進(jìn)行硅膠柱層析，二氯甲烷:甲醇1: O至O:1梯度洗脫，經(jīng)薄層層析檢測(cè)后，按薄層板上的色譜行為合并洗脫液，得1-XII12個(gè)部位；將部位V，即二氯甲烷:甲醇19: I洗脫部分，進(jìn)行MCI柱層析分離純化，甲醇:水O:1至1: O梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層層析板檢測(cè)后，合并洗脫液，得Fiv6六個(gè)子部位，將部位Fr-3，即甲醇:水8: 2洗脫部分，進(jìn)行反相半制備高效液相柱層析，甲醇:水7.5: 2.5洗脫，在保留時(shí)間為18分鐘時(shí)得一種白色針晶為對(duì)應(yīng)權(quán)利要求1之式⑴中RJR2 = CH2,R3 = C2H5,R4 = OCH3的化合物，即石蒜倫堿C。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟一所述的石蒜科植物是換錦花(Lycorissprengeri),步驟三所述的將所得生物堿部位浸膏經(jīng)反復(fù)娃膠柱層析、反相色譜層析及凝膠色譜層析得到權(quán)利要求1所述的化合物具體方法是:取換錦花生物堿部位浸膏進(jìn)行硅膠柱層析，以二氯甲烷:甲醇的混合溶劑按體積比1: O至O:1梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測(cè)后，按薄層板上的色譜行為合并洗脫液，得1-VII7個(gè)部位，將部位IV進(jìn)行硅膠柱層析，二氯甲烷:甲醇1: O至O:1梯度洗脫，洗脫液經(jīng)薄層層析板檢測(cè)后合并，得A-H8個(gè)子部位，將子部位D甲醇溶解后進(jìn)行凝膠柱色譜，得部位D1-D4,將D3部位進(jìn)行反相半制備高效液相層析，甲醇:水8: 2洗脫，在保留時(shí)間為11分鐘時(shí)得一種白色針晶為對(duì)應(yīng)權(quán)利要求1之式⑴中R1 = R2 = R3 = CH3, R4 = OCH3的化合物，即石蒜倫堿D。
10.一種組合物，含有權(quán)利要求1所述的化合物。
11.一種用于神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)或/和防治療阿爾茨海默癥的藥物制劑，其特征在于含有權(quán)利要求1中式(I)所示結(jié)構(gòu)化合物中的一種或兩種以上，以及藥學(xué)上可以接受的載體。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物制劑，其特征在于，所述的藥物制劑是口服用片劑、粉齊U、粒劑、膠囊、懸浮劑、糖漿劑或注射用的溶液、水或油性懸浮劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及石蒜科生物堿，具體提供了一種由黃花石蒜、雜交石蒜(黃花石蒜和石蒜的雜交品)、換錦花等石蒜科植物中提取的石蒜倫堿類化合物，該類化合物對(duì)神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)作用，對(duì)阿爾茨海默癥具有預(yù)防和治療作用，可用于制備神經(jīng)保護(hù)劑和防止阿爾茨海默癥的藥物。
文檔編號(hào)C07D491/052GK103193787SQ201310076468
公開(kāi)日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月11日
發(fā)明者阮漢利, 李雪, 金岸, 吳文明 申請(qǐng)人:華中科技大學(xué)