賴氨酰氧化酶樣2分析法及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種檢測(cè)和/或定量個(gè)體中循環(huán)的賴氨酰氧化酶樣2（LOXL2）多肽的分析法。本發(fā)明還公開(kāi)了該分析法能夠用于診斷和預(yù)后應(yīng)用。
【專利說(shuō)明】賴氨酰氧化酶樣2分析法及其使用方法
[0001]相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002]本申請(qǐng)要求2011年6月I日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)N0.61/492，210、2011年10月24日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)N0.61/550，895和2011年12月21日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)N0.61/578,813的權(quán)益，這些申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容出于所有目的通過(guò)引用合并入本申請(qǐng)中。
[0003]通過(guò)EFS-WEB提交的序列列表的引用
[0004]根據(jù)MPEP § 1730I1.B.2 (a) (C)中所授權(quán)并規(guī)定，通過(guò)USPTO EFS-WEB服務(wù)器電子提交的序列列表的全部?jī)?nèi)容，在此出于所有目的通過(guò)引用合并入本申請(qǐng)中。在電子提交的文本文件中所鑒別的序列列表如下:
[0005]
【權(quán)利要求】
1.一種檢測(cè)、預(yù)測(cè)或監(jiān)測(cè)疾病或病癥的方法，所述方法包括: a)將從個(gè)體獲得的液體樣品與賴氨酰氧化酶樣2(L0XL2)特異性抗體接觸；和 b)檢測(cè)所述抗體與液體樣品中存在的L0XL2的結(jié)合，從而檢測(cè)液體樣品中L0XL2的水平， 其中L0XL2的檢出水平指示了所述個(gè)體中疾病或病癥的存在與否或是所述個(gè)體對(duì)疾病或病癥治療產(chǎn)生反應(yīng)的可能性。
2.一種疾病或病癥的預(yù)后方法，所述方法包括: a)將從患有所述疾病或病癥的個(gè)體獲得的液體樣品與賴氨酰氧化酶樣2(L0XL2)特異性抗體接觸；和 b)檢測(cè)所述抗體與液體樣品中存在的L0XL2的結(jié)合，從而檢測(cè)液體樣品中的L0XL2， 其中檢出的L0XL2水平指示了所述疾病或病癥的結(jié)果、事件或終點(diǎn)的可能性。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中: 所述個(gè)體正在進(jìn)行所述疾病或病癥治療；和 步驟(b)中的L0XL2檢出水平低于所述個(gè)體在較早時(shí)間點(diǎn)測(cè)定的水平表明了所述治療的有效性。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中在較早時(shí)間點(diǎn)測(cè)定的水平是治療前水平。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述液體樣品是血液、血液組分、尿、唾液、痰或支氣管肺泡灌洗液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述L0XL2特異性抗體包含可檢測(cè)的標(biāo)記物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的方法，還包括將所述液體樣品中存在的L0XL2固定在不溶性支架上，其中所述固定是通過(guò)將所述液體樣品與L0XL2特異性第二抗體接觸以形成第二抗體-L0XL2復(fù)合物來(lái)進(jìn)行的，其中所述第二抗體被固定在所述不溶性支架上。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述固定在步驟(a)之前進(jìn)行。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中當(dāng)L0XL2與抑制L0XL2酶活性的藥劑結(jié)合時(shí)，步驟(a)中的抗體能夠與L0XL2結(jié)合。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述藥劑是LOXL2酶活性的別構(gòu)抑制劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述別構(gòu)抑制劑是抗LOXL2單克隆抗體。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述抗LOXL2單克隆抗體與LOXL2的SRCR3-4結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位結(jié)合。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的方法，還包括: c)比較所述檢出水平和正常對(duì)照值，其中高于正常對(duì)照值的檢出水平是所述疾病或病癥存在與否或是所述個(gè)體是否將對(duì)所述疾病或病癥的治療產(chǎn)生反應(yīng)的可能性的指征。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述疾病或病癥是纖維化疾病或癌癥。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述疾病或病癥是纖維化疾病且LOXL2循環(huán)水平高于正常對(duì)照值表明所述個(gè)體可能對(duì)所述纖維化疾病的治療顯示出有利的臨床反應(yīng)。
16.根據(jù)權(quán)利要求14或15所述的方法，其中所述疾病或病癥是肺纖維化、肝纖維化、腎纖維化、心肌纖維化或骨髓纖維化、肝硬化、慢性病毒性肝炎、丙型肝炎病毒(HCV)或乙型肝炎病毒(HBV)。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述疾病或病癥是特發(fā)性肺纖維化(IPF)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中檢出水平表明了所述個(gè)體中IPF疾病結(jié)果、終點(diǎn)或事件的可能性。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中所述IPF疾病結(jié)果、終點(diǎn)或事件是IPF疾病發(fā)展、肺功能下降、呼吸系統(tǒng)住院治療、移植后生存、死亡或?qū)χ委煹姆磻?yīng)性。
20.根據(jù)權(quán)利要求17-19中任一項(xiàng)所述的方法，還包括檢測(cè)所述個(gè)體中IPF疾病嚴(yán)重程度或功能狀態(tài)的指標(biāo)，所述指標(biāo)選自由預(yù)測(cè)的用力肺活量(FVC)的百分比、預(yù)測(cè)的一氧化碳彌散量(DLaj)的百分比、6分鐘步行距離(6MWD)、平均肺動(dòng)脈壓(mPAP)、最低休息血氧飽和度(Sp02)、復(fù)合生理指標(biāo)(CPI )、圣喬治呼吸問(wèn)卷評(píng)分(SGRQ)、過(guò)渡性呼吸困難指數(shù)(TDI)評(píng)分、對(duì)治療的反應(yīng)性以及IPF疾病的生物標(biāo)志物組成的組中。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)所述的方法，還包括使用預(yù)測(cè)模型分析LOXL2水平。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的方法，還包括開(kāi)始、改變或中斷對(duì)所述個(gè)體進(jìn)行的所述疾病或病癥的治療。
23.根據(jù)權(quán)利 要求1-22中任一項(xiàng)所述的方法，還包括對(duì)所述個(gè)體進(jìn)行一項(xiàng)或多項(xiàng)其他診斷試驗(yàn)。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中所述一項(xiàng)或多項(xiàng)其他診斷試驗(yàn)是肺功能檢查或肝功能檢查。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-24中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述檢出水平表明了所述個(gè)體患有活動(dòng)性纖維化疾病或晚期纖維化疾病。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述活動(dòng)性纖維化疾病是METAVIRFl或F2肝纖維化，或所述晚期纖維化疾病是METAVIR F4肝纖維化。
27.一種用于檢測(cè)從個(gè)體獲得的液體生物樣品中賴氨酰氧化酶樣2 (LOXL2)多肽水平的分析裝置，所述裝置包括:界定了軸向流路的基質(zhì)，所述基質(zhì)包含: i)位于接收液體樣品的流路上游末端的樣品接收區(qū)； ?)位于所述流路內(nèi)且在所述樣品接收區(qū)下游的一個(gè)或多個(gè)檢測(cè)區(qū)，每個(gè)所述一個(gè)或多個(gè)檢測(cè)區(qū)中均包含LOXL2特異性抗體，其中每個(gè)所述LOXL2特異性抗體均能夠與液體樣品中存在的LOXL2多肽結(jié)合以形成抗LOXL2/LOXL2復(fù)合物；和 iii)位于所述流路內(nèi)部且在所述樣品接收區(qū)下游的一個(gè)或多個(gè)對(duì)照區(qū)。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的分析裝置，其中當(dāng)所述一個(gè)或多個(gè)檢測(cè)區(qū)包含至少兩個(gè)檢測(cè)區(qū)時(shí)，所述一個(gè)或多個(gè)對(duì)照區(qū)中至少一個(gè)位于兩個(gè)檢測(cè)區(qū)之間。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的分析裝置，其中所述至少兩個(gè)檢測(cè)區(qū)和至少一個(gè)對(duì)照區(qū)以交替形式位于所述流路內(nèi)，由位于任意對(duì)照區(qū)上游的檢測(cè)區(qū)開(kāi)始。
30.根據(jù)權(quán)利要求28或29所述的分析裝置，其中一個(gè)或多個(gè)所述抗LOXL2抗體被固定在所述檢測(cè)區(qū)的基質(zhì)上。
31.根據(jù)權(quán)利要求27-30中任一項(xiàng)所述的分析裝置，還包括標(biāo)記物區(qū)，所述標(biāo)記物區(qū)包含特異于LOXL2特異性抗體的標(biāo)記抗體，其中: 所述標(biāo)記抗體能夠與抗LOXL2抗體/LOXL2復(fù)合物中存在的抗LOXL2抗體結(jié)合，以形成標(biāo)記的抗LOXL2抗體/LOXL2，且所述標(biāo)記抗體在存在液體樣品時(shí)是可活動(dòng)的。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的分析裝置，其中所述標(biāo)記抗體包含標(biāo)記成分，所述標(biāo)記成分選自由化學(xué)發(fā)光試劑、微粒標(biāo)記物、比色劑、能量轉(zhuǎn)移試劑、酶、熒光試劑和放射性同位素組成的組。
33.根據(jù)權(quán)利要求27-32中任一項(xiàng)所述的分析裝置，其中所述基質(zhì)位于外殼內(nèi)，所述外殼包括支架和可選的封蓋，其中所述外殼含有施用孔和一個(gè)或多個(gè)觀察口。
34.根據(jù)權(quán)利要求28-33中任一項(xiàng)所述的分析裝置，其中所述裝置是試紙條。
35.根據(jù)權(quán)利要求28-34中任一項(xiàng)所述的分析裝置，其中所述裝置是浸潰片分析裝置。
36.一種測(cè)定從個(gè)體獲得的生物樣品中的賴氨酰氧化酶樣2 (L0XL2)多肽水平的試劑盒，所述試劑盒包含: a)L0XL2特異性的第一抗體；和 b)L0XL2特異性的第二抗體。
37.根據(jù)權(quán)利要求36所述的試劑盒，還包含用于生成標(biāo)準(zhǔn)曲線的純化L0XL2。
38.根據(jù)權(quán)利要求36或37所述的試劑盒，其中至少一個(gè)所述抗體包含可檢測(cè)的標(biāo)記物。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的所述試劑盒，其中所述可檢測(cè)的標(biāo)記物包含化學(xué)發(fā)光試劑、微粒標(biāo)記物、比色劑、能量轉(zhuǎn)移試劑、酶、熒光試劑和放射性同位素。
40.根據(jù)權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述接觸和檢測(cè)是使用權(quán)利要求27-35中任一項(xiàng)所述的分析裝置或權(quán)利要求36-39中任一項(xiàng)所述的試劑盒進(jìn)行的。
【文檔編號(hào)】C07K16/40GK103946241SQ201280037235
【公開(kāi)日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2012年6月1日 優(yōu)先權(quán)日:2011年6月1日
【發(fā)明者】維多利亞·史密斯, 喬安妮·I.·阿達(dá)姆科維茲, 蘇珊·K.·萊曼, 詹森·錢, 李曉明, 邵立新, 杰弗瑞·D.·伯恩斯坦 申請(qǐng)人:吉利德生物制劑有限公司