專利名稱：一種櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，是涉及一種櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法。
背景技術(shù)：
櫛山香內(nèi)酯為δ -內(nèi)酯類化合物，主要從唇形科植物櫛山香Hyptispectinuta (L.) Poit.地上部分分離得到，包括櫛山香內(nèi)酯A、櫛山香內(nèi)酯B和櫛山香內(nèi)酯C，這三種單體成分均具有一定的抗菌作用，對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的MIC ( μ g/ml)分別為12. 5和6. 25、100和25、100和12. 5，另外這三種化合物還具有細(xì)胞毒活性，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的ED5tl均< 4 μ g/ml ο通過文獻(xiàn)檢索，國(guó)內(nèi)尚未見從櫛山香地上部分制備櫛山香內(nèi)酯提取物的方法報(bào) 道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法，該方法具有工藝簡(jiǎn)單、提率高、安全等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的
a.取櫛山香地上部分粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑，在萃取壓力21-28MPa、溫度44-56 °C的條件下，通入液態(tài)CO2萃取60_180min，在壓力7-10MPa，溫度28-40°C條件下解析得萃取物；
b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集含有櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮、低溫干燥，得櫛山香內(nèi)酯提取物。步驟a中所述CO2流量為2. 5-4. 0ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10-16%。步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5_7bar，柱徑高比為1:10-12，石油醚-甲醇體積比為20:1-1:1。本發(fā)明的有益效果是
1.采用超臨界CO2萃取，高效無(wú)溶劑殘留，對(duì)環(huán)境無(wú)污染；
2.采用氧化鎂中低壓柱層析純化，操作簡(jiǎn)單，分離效果好。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例I :
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力21. 2MPa、溫度44°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3. 5ml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%，動(dòng)態(tài)萃取90min，在壓力8MPa、溫度30°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為5bar，柱徑高比為1:12)，按石油醚-甲醇體積比20:1、10:1、5:1、3:1、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 25的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯73%的櫛山香內(nèi)酯提取物。實(shí)施例2:
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力
24.5MPa、溫度48°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3. 2ml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10%，動(dòng)態(tài)萃取60min，在壓力7MPa、溫度28°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為7bar，柱徑高比為1:10)，按石油醚-甲醇體積比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 23的稠膏，低溫干燥，即得到 含內(nèi)酯75%的櫛山香內(nèi)酯提取物。實(shí)施例3:
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力26. 8MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3. 0ml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的14%，動(dòng)態(tài)萃取120min，在壓力8MPa、溫度36°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:11)，按石油醚-甲醇體積比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 22的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯76%的櫛山香內(nèi)酯提取物。實(shí)施例4:
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力28. OMPa、溫度46°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為2. 5ml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的16%，動(dòng)態(tài)萃取lOOmin，在壓力lOMPa、溫度32°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為7bar，柱徑高比為1:12)，按石油醚-甲醇體積比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 26的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯81%的櫛山香內(nèi)酯提取物。實(shí)施例5
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力22. 6MPa、溫度52°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為2. 8ml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的13%，動(dòng)態(tài)萃取180min，在壓力9MPa、溫度40°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為5bar，柱徑高比為1:10)，按石油醚-甲醇體積比20:1、10:1、5:1、3:1、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 18的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯68%的櫛山香內(nèi)酯提取物。實(shí)施例6:
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力
25.7MPa、溫度56°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為4. Oml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%，動(dòng)態(tài)萃取70min，在壓力7MPa、溫度31°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:10)，按石油醚-甲醇體積比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 20的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯72%的櫛山香內(nèi)酯提取物。實(shí)施例7:
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力27. IMPa、溫度54°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3. 8ml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的16%，動(dòng)態(tài)萃取140min，在壓力lOMPa、溫度35°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為7bar，柱徑高比為1:12)，按石油醚-甲醇體積比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度1.21的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯74%的櫛山香內(nèi)酯提取物。·實(shí)施例8:
將櫛山香地上部分粉碎，取5kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力23. 3MPa、溫度45°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3. Oml/g生藥/min，乙酸乙酯為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10%，動(dòng)態(tài)萃取160min，在壓力9MPa、溫度38°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱(柱壓為5bar，柱徑高比為1:11)，按石油醚-甲醇體積比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶劑梯度洗脫，收集含櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮成相對(duì)密度I. 24的稠膏，低溫干燥，即得到含內(nèi)酯78%的櫛山香內(nèi)酯提取物。
權(quán)利要求
1.一種櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于以下步驟 a.取櫛山香地上部分粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑，在萃取壓力21-28MPa、溫度44-56 °C的條件下，通入液態(tài)CO2萃取60_180min，在壓力7-10MPa，溫度28-40°C條件下解析得萃取物； b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集含有櫛山香內(nèi)酯的高濃度流分，減壓濃縮、低溫干燥，得櫛山香內(nèi)酯提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于步驟a中所述CO2流量為2. 5-4. 0ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10_16%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法，其特征在于步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5-7bar，柱徑高比為1:10-12，石油醚-甲醇體積比為20:1-1: I。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種櫛山香內(nèi)酯提取物的制備方法。方法步驟如下a.取櫛山香地上部分粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界CO2萃??；b.萃取物采用中性氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮、低溫干燥得櫛山香內(nèi)酯提取物。采用本發(fā)明制備櫛山香內(nèi)酯提取物，工藝簡(jiǎn)單、效率高，所得產(chǎn)品含量高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D309/32GK102850312SQ20121036315
公開日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2012年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月26日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司