專(zhuān)利名稱：一種提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法。
背景技術(shù)：
長(zhǎng)葉松酸(Palustricacid),分子式為 C2tlH3tlO2,分子量為 302. 46, CAS 號(hào)為1945-53-5，是二萜酸類(lèi)化合物，mp. 162-167 °C。藥理研究表明，長(zhǎng)葉松酸具有拒食作用，對(duì)鋸角葉鋒等有強(qiáng)的拒食作用。長(zhǎng)葉松酸還可抗血小板聚集，可抑制兔血小板由PAF、ADP和隹丐離子甾體誘導(dǎo)的血小板聚集。長(zhǎng)葉松酸廣泛存在于柏科植物刺檜Juniperus axycedrusL.和松科植物馬尾松massoniana Lamb.和長(zhǎng)葉松ZY/ws palustris Mill.中。 現(xiàn)有文獻(xiàn)中還沒(méi)有檢索到從馬尾松樹(shù)脂中提取制備高純度長(zhǎng)葉松酸的工藝報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法，以填補(bǔ)目前高純度長(zhǎng)葉松酸提取制備技術(shù)的空白。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法，其特征在于包括以下步驟
1)乙醇提取將馬尾松樹(shù)脂粉碎，投入提取罐，加入體積百分比55-75%的乙醇，采用回流提取或連續(xù)提取等方法提取2-4小時(shí)，收集提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇得到浸膏；
2)大孔樹(shù)脂吸附將所得浸膏用去離子水稀釋?zhuān)?jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱純化，先用去離子水，再用50-70%乙醇洗脫，減壓回收乙醇得到提取物；
3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進(jìn)一步純化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，得到純度95%以上的長(zhǎng)葉松酸。步驟3)所述溶劑系統(tǒng)為甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水，其體積比為(15-17):(20-24)(3-6) : (12-15)。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明以大孔吸附樹(shù)脂為載體，乙醇為溶劑，經(jīng)高速逆流色譜進(jìn)一步分離純化，得到純度大于95%的長(zhǎng)葉松酸產(chǎn)品，所用試劑為安全無(wú)毒試劑，可回收重復(fù)利用。本發(fā)明方法工序簡(jiǎn)單、綠色環(huán)保，產(chǎn)品純度高。
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例I:
將馬尾松樹(shù)脂藥材粉碎，取5kg加入20L70%乙醇溶液加熱回流提取2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加入12L70%乙醇溶液回流提取I. 5小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過(guò)預(yù)處理好的DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再用70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(17:24:3. 5:14)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集長(zhǎng)葉松酸流分，回收溶劑得到長(zhǎng)葉松酸，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為96. 8%。實(shí)施例2
將馬尾松樹(shù)脂藥材粉碎，取5kg加入22L60%乙醇溶液加熱回流提取3小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加入18L60%乙醇溶液回流提取2小時(shí)，過(guò)濾，藥渣再加入12L60%乙醇回流提取I. 5小時(shí)，過(guò)濾，合并三次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過(guò)預(yù)處理好的DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再用65%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(15:20:6:12)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集長(zhǎng)葉松酸流分，回收溶劑得到長(zhǎng)葉松酸，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為96. 4%。實(shí)施例3
將馬尾松樹(shù)脂藥材粉碎，取5kg加入18L55%乙醇溶液加熱回流提取4小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加入14L55%乙醇溶液回流提取2. 5小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過(guò)預(yù)處理好的DlOl大孔吸附樹(shù)脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再用50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(16:23:5:15)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集長(zhǎng)葉松酸流分，回收溶劑得到長(zhǎng)葉松酸，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為97. 2%。實(shí)施例4:
將馬尾松樹(shù)脂藥材粉碎，取5kg加入24L65%乙醇溶液加熱回流提取3. 5小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加入18L65%乙醇溶液回流提取I. 5小時(shí)，過(guò)濾，藥渣再加入15L65%乙醇提取I. 5小時(shí)，過(guò)濾，合并三次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過(guò)預(yù)處理好的AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再用60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(17:21:4:13)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集長(zhǎng)葉松酸流分，回收溶劑得到長(zhǎng)葉松酸，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為98. 1%。實(shí)施例5:
將馬尾松樹(shù)脂藥材粉碎，取5kg加入25L75%乙醇溶液加熱回流提取2小時(shí)，過(guò)濾，濾渣再加入20L75%乙醇溶液回流提取I. 5小時(shí)，過(guò)濾，合并兩次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過(guò)預(yù)處理好的HPD100大孔吸附樹(shù)脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無(wú)色，再用55%乙醇洗脫，收集55%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進(jìn)行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(15:22:3:14)為溶劑系統(tǒng)，下相為流動(dòng)相，上相為固定相，收集長(zhǎng)葉松酸流分，回收溶劑得到長(zhǎng)葉松酸，經(jīng)HPLC法測(cè)定，其純度為97. 6%。
權(quán)利要求
1.一種提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法，其特征在于包括以下步驟 1)乙醇提取將馬尾松樹(shù)脂粉碎，投入提取罐，加入體積百分比55-75%的乙醇，采用回流提取或連續(xù)提取等方法提取2-4小時(shí)，收集提取液，用2%藥用活性炭脫色，過(guò)濾，回收乙醇得到浸膏； 2)大孔樹(shù)脂吸附將所得浸膏用去離子水稀釋?zhuān)?jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱純化，先用去離子水，再用50-70%乙醇洗脫，減壓回收乙醇得到提取物； 3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進(jìn)一步純化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，得到純度95%以上的長(zhǎng)葉松酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法，其特征在于，步驟3)所述溶劑系統(tǒng)為甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水，其體積比為(15-17) :(20-24) :(3-6) :(12-15)。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然藥物的分離，具體的說(shuō)是一種提取制備長(zhǎng)葉松酸的方法，將馬尾松樹(shù)脂粉碎后，用乙醇提取、脫色、過(guò)濾、濃縮得到浸膏，再用去離子水稀釋?zhuān)?jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱純化、洗脫、濃縮，干燥得粗品，粗品用高速逆流色譜法進(jìn)一步純化，結(jié)晶干燥得到純度95%以上的長(zhǎng)葉松酸。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)后與傳統(tǒng)工藝相比，具有簡(jiǎn)便、快速、制備量大、產(chǎn)品純度高等優(yōu)點(diǎn)，易于推廣使用。
文檔編號(hào)C07C61/29GK102875365SQ201210360010
公開(kāi)日2013年1月16日 申請(qǐng)日期2012年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月25日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司