專利名稱：一種從茶葉中提取茶黃素和茶氨酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物化學(xué)的技術(shù)領(lǐng)域，主要涉及一種提取茶黃素和茶氨酸的方法，更加具體地說涉及一種茶葉中提取茶黃素和茶氨酸的方法。
背景技術(shù)：
茶葉是我國(guó)重要經(jīng)濟(jì)作物和出口創(chuàng)匯產(chǎn)品之一，主要以傳統(tǒng)的粗加工產(chǎn)品為主，并且近年來(lái)茶葉粗產(chǎn)品供過于求，每年有十幾萬(wàn)噸左右的低檔茶積壓，嚴(yán)重阻礙了我國(guó)茶產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。茶葉深加工作為茶產(chǎn)業(yè)的新興領(lǐng)域，有利于茶產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，并有著巨大的增值潛力和市場(chǎng)需求。隨著茶葉深加工研究不斷深入以及和醫(yī)學(xué)研究的交叉和滲透，已經(jīng) 證實(shí)茶葉中多種活性成分具有抗菌、抗氧化、防衰老、增免疫等保健功能，其中以茶黃素和茶氨酸優(yōu)為顯著。茶黃素具有比茶多酚更強(qiáng)的抗氧化作用，具有調(diào)節(jié)血脂、預(yù)防心血管疾病的功效，而且無(wú)毒副作用。茶黃素被譽(yù)為茶葉中“軟黃金”的茶黃素有降血脂的獨(dú)特功能，茶黃素不但能與腸道中的膽固醇結(jié)合減少食物中膽固醇的吸收，還能抑制人體自身膽固醇的合成。通過調(diào)節(jié)體內(nèi)的生物酶系的活性、直接消除自由基、與金屬離子絡(luò)合、以及防止低密度脂蛋白的氧化等途徑實(shí)現(xiàn)抗氧化作用。茶氨酸具有既不催眠，又可以解消疲勞、降低血壓和提高學(xué)習(xí)記憶能力，茶氨酸是茶葉中特有的游離氨基酸，也是茶葉中含量最高的氨基酸，約占游離氨基酸總量的50%以上，占茶葉干重的1%_2%。茶氨酸為白色針狀體,易溶于水。具有甜味和鮮爽味，是茶葉的滋味的組分。具有調(diào)節(jié)腦內(nèi)神經(jīng)傳達(dá)物質(zhì)的變化、鎮(zhèn)靜作用、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、降低血壓的作用和增強(qiáng)抗癌藥物的療效。公開號(hào)為CN1074618的中國(guó)專利介紹了一種茶色素及其生產(chǎn)方法涉及一種茶萃取物及茶葉中水溶性茶成分的提取方法，具體地說，是一種從茶葉中提取的由茶褐素、茶黃素、茶紅素三者構(gòu)成，且三者有恒定比例的藥用茶色素及其生產(chǎn)方法。本發(fā)明所得的茶色素中茶褐素重量含量為13 —16%，茶黃素的重量含量為I一4%，茶紅素的重量含量為4一7%。茶色素的生產(chǎn)過程為，茶葉經(jīng)煎煮取汁，堿化，濃縮，酸化，加入乙醇回流，乙醇回流液再堿化得到茶色素結(jié)晶，茶色素結(jié)晶經(jīng)真空干燥，即得該茶色素。公開號(hào)為CN1285152的中國(guó)專利介紹了一種高活性茶色素及其生產(chǎn)方法利用鮮茶葉本身的酶系，在較佳的氧化聚合條件下，使外加的茶葉提取物——茶多酚或鮮茶葉本身榨出的渣漿汁中的茶多酚氧化聚合成以茶黃素、茶紅素為主的茶色素。其生產(chǎn)過程為鮮茶葉搗碎后，加入緩沖溶液，可向其中加入茶葉提取物或不加，通入O2或空氣，保溫、攪拌，在酶促氧化聚合反應(yīng)下生成以茶紅素、茶黃素為主的茶色素，然后經(jīng)萃取，純化，濃縮，干燥，得到高活性茶色素。公開號(hào)為CN101565724的中國(guó)專利介紹了一種極細(xì)枝孢霉生物合成茶黃素粗提物的方法通過極細(xì)枝孢霉生物合成茶黃素粗提物的方法，獲得多酚氧化酶的高產(chǎn)菌株極細(xì)枝孢霉，在優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)基中于pH為4. 5-5. 3、搖床轉(zhuǎn)速為110-130r/min、溫度為22-25°C的條件下恒溫培養(yǎng)該菌株合成多酚氧化酶，取得多酚氧化酶粗酶液，并通入氧氣進(jìn)行體外模擬氧化兒茶素40-50分鐘制備茶黃素。公開號(hào)為CN101190909的中國(guó)專利介紹了一種制備四種茶黃素單體的方法將茶黃素提取物溶液緩慢通過裝有聚酰胺材料的層析柱；用洗脫溶劑對(duì)層析柱進(jìn)行洗脫，依次收集分別含茶黃素、茶黃素-3-沒食子酸酯、茶黃素_3’ -沒食子酸酯和茶黃素雙沒食子酸酯單體的四種洗脫液，所述的洗脫溶劑為由酯或酮、醇和有機(jī)酸組成的混合溶劑；將四種洗脫液分別濃縮，采用弱堿性水溶液分別將四種濃縮液的PH值調(diào)至中性后，用有機(jī)溶劑萃取得萃取液，干燥萃取液得茶黃素的四種單體。公開號(hào)為CN101250566的中國(guó)專利介紹了一種極細(xì)枝孢霉生物合成茶黃素粗提物的方法通過極細(xì)枝孢霉生物合成茶黃素粗提物的方法，通過對(duì)大量微生物進(jìn)行篩選，獲得多酚氧化酶的高產(chǎn)菌株極細(xì)枝孢霉，在優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)基中于PH為4. 5-5. 3、搖床轉(zhuǎn)速 為110-130r/min、溫度為22_25°C的條件下恒溫培養(yǎng)該菌株合成多酚氧化酶，取得多酚氧化酶粗酶液，并通入氧氣進(jìn)行體外模擬氧化兒茶素40-50分鐘制備茶黃素。公開號(hào)為CN1626668的中國(guó)專利介紹了一種生產(chǎn)茶色素的方法將鮮茶葉搗碎成渣和汁，加入市場(chǎng)購(gòu)買的酶后，然后加到茶多酚與有機(jī)溶劑的混合溶液中，再加入酸性水溶液，攪拌通風(fēng)反應(yīng)，在酶促氧化聚合反應(yīng)下生成以茶黃素、茶紅素為主的茶色素，然后經(jīng)分離、純化、濃縮、干燥得到茶色素。公開號(hào)為CN1699358的中國(guó)專利介紹了一種茶黃素提取方法將鮮茶葉經(jīng)揉捻后加水磨漿，然后進(jìn)行發(fā)酵氧化得到含有茶黃素的溶液，通過離心除渣得到離心液，離心液經(jīng)陶瓷膜超濾后所得濾液采用溶劑萃取法或膜分離法進(jìn)行處理得到茶黃素。公開號(hào)為CN1729807的中國(guó)專利介紹了一種高茶黃素、茶紅素工夫紅茶的制備方法一種高茶黃素、茶紅素工夫紅茶的制備方法，以一芽二葉或者一芽二、三葉鮮葉為原料，其制備方法包括選擇、萎凋、冰凍處理、揉捻、解塊分級(jí)、發(fā)酵和烘干。公開號(hào)為CN1826921的中國(guó)專利介紹了一種微生物液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)茶色素的方法將茶粉碎至60-80目，按I-IOg 100-200ml加入蒸餾水，在121°C的溫度下滅菌10分鐘，再按O. I克/IOOml蒸餾水計(jì)接種微生物；進(jìn)行搖床發(fā)酵，發(fā)酵溫度為20-35°C，搖床轉(zhuǎn)速為110r/min，培養(yǎng)時(shí)間15天；吸取IOOml發(fā)酵液，加入IOOml醋酸乙酯，在500ml的分液漏斗中振蕩10分鐘分層后，將上層的醋酸乙酯和下層的水層分別置于200ml三角瓶中；吸取醋酸乙酯萃取液50ml，加入2. 5% NaHCO3水溶液50ml，在轉(zhuǎn)速為300r/min下振蕩30秒，分層后，將醋酸乙酯層蒸干即為茶黃素；將水層蒸干，得到茶紅素；吸取50ml澄清的發(fā)酵液和50ml正丁醇放入分液漏斗中，搖振5分鐘，取下層濃縮蒸干后即為茶褐素。公開號(hào)為CN1989851的中國(guó)專利介紹了一種食品級(jí)高純度茶色素生產(chǎn)方法以兒茶素為主體的多酚類物質(zhì)為原料，以獨(dú)特而嚴(yán)格的工藝要求和國(guó)家及行業(yè)相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)為產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。采用氧化聚合縮合技術(shù)，按照優(yōu)化的生產(chǎn)工藝和加工方法，生產(chǎn)食品級(jí)高純度達(dá)標(biāo)茶色素。公開號(hào)為CN101081844的中國(guó)專利介紹了一種大批量分離制備高純度茶黃素單體的方法采用了凝膠柱層析和高速逆流色譜相結(jié)合的方法，將凝膠色譜柱層析制備量大的特點(diǎn)和高速逆流色譜分離效率高的特點(diǎn)結(jié)合起來(lái)，二者優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，實(shí)現(xiàn)了紅茶提取物中四種主要的茶黃素單體茶黃素(TF)、茶黃素-3-沒食子酸酯(TF-3-MG)、茶黃素-3'-沒食子酸酯(TF-3, -MG)、茶黃素-3，3'-雙沒食子酸酯(TFDG)高純度分離制備。該方法可用于從茶黃素粗提物中分離制備十克至幾十克高純度的茶黃素單體，單體純度可達(dá)97%以上。公開號(hào)為CN102226211A的中國(guó)專利介紹了一種固定化多酚氧化酶動(dòng)態(tài)連續(xù)氧化制備茶黃素的方法以茶多酚為底物，固定化多酚氧化酶為催化媒介，控制反應(yīng)溫度，在填充床反應(yīng)器上實(shí)現(xiàn)底物與氧氣連續(xù)進(jìn)入，完成茶多酚的氧化、聚合形成茶黃素類物質(zhì)并由恒流泵連續(xù)泵出。公開號(hào)為CN102286565A的中國(guó)專利介紹了一種茶黃素單體的制備方法以茶多酚為原料，由靈芝真菌通過液體發(fā)酵培養(yǎng)得到的含有漆酶的粗酶液以I : 20-30的體積比加入質(zhì)量百分濃度1-3%茶多酚乙酸乙酯溶液中，以空氣作為催化氧化的氧氣來(lái)源，30-60°C水浴振蕩10-40min，然后超聲振蕩l_2min，反應(yīng)結(jié)束后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)乙酸乙酯，加入萃取劑4-甲基-2-戊酮得到萃取液，脫去萃取劑得到茶黃素單體TF-3-G。
發(fā)明者李蘭嵐, 李光鋒, 代洪波, 黃生有 申請(qǐng)人:向華