專利名稱：超臨界二氧化碳提取喜樹種子中喜樹堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物有效成分提取領(lǐng)域，特別是一種利用超臨界CO2萃取技術(shù)提取喜樹種子中喜樹堿的工藝。
背景技術(shù)：
喜樹(Camptothecaacuminata Decne)是珙桐科(Nyssaceae)喜樹屬(Camptotheca)多年生亞熱帶落葉闊葉喬木,是我國特有樹種，國家II級保護植物，天然分布于我國長江流域和西南各省(區(qū))，具有生長速度快、病蟲害少等特點，是我國南方主要綠化樹種。喜樹堿(Camptothecin，CPT)是從喜樹中分離得到的一種生物堿，具有廣譜抗腫
瘤活性，是迄今為止發(fā)現(xiàn)的唯--種拓撲異構(gòu)酶I (Topoisomerase I)抑制劑。但喜樹堿 本身細胞毒性較大，難以克服，因此各國科學家一直致力于利用喜樹堿為母體合成高效低毒的喜樹堿衍生物，以臨床用于治療癌癥。八十年代以來，一系列喜樹堿衍生物如CPT-11、TPT、9-NC、CZ-48等在抗癌藥理試驗中表現(xiàn)出高效低毒的優(yōu)良性能，且效果遠勝于從紫杉(Taxus)中提取得到的紫杉醇(Taxol)，引起了人們對喜樹堿的極大關(guān)注，喜樹也因此成為繼紅豆杉之后第二個重要的木本抗癌藥用植物，被譽為二十一世紀抗癌首選植物。查新發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)外對從喜樹中提取喜樹堿的文獻如下堿法提取喜樹堿工藝的研究(植物研究，2000，20 (4) :433-437)、從喜樹葉中堿法提取喜樹堿新工藝(中草藥，2001，32 (10) :882-884)、應用均勻設計法優(yōu)化喜樹果乙醇滲漉工藝條件(中國實驗方劑學雜志，2004,10 (2):12-14)從喜樹果實中提取喜樹堿工藝研究(沈陽農(nóng)業(yè)大學學報，2005，36 (I)101-103)、喜樹堿的堿水法提取新工藝(天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18 :302_303)、喜樹堿提取方法研究(成都大學學報(自然科學版)，2008，27 (2):89-91)、喜樹果中喜樹堿和10-羥基喜樹堿的勻漿提取工藝(天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2008，20 (6): 1088-1090)、勻漿法提取喜樹果和喜樹葉中喜樹堿的研究(林產(chǎn)化學與工業(yè)，2009，29( 1):79-82)、喜樹堿和10-羥基喜樹堿提取方法的比較與優(yōu)化(湖北農(nóng)業(yè)科學，2011，50(21):4459-4462)。已授權(quán)和公開的相關(guān)專利如下一種喜樹堿的生產(chǎn)方法(專利號99112767. 6)、喜樹堿、10-羥基喜樹堿的生產(chǎn)工藝方法(專利號01138943. 5)、喜樹堿的生產(chǎn)工藝(專利號01128211. 8)、喜樹堿的制備方法(專利號01807016. 7)、喜樹堿高效生產(chǎn)工藝(專利號02132721. I)、喜樹堿的生產(chǎn)工藝(專利號200310111050. 9)、喜樹堿的分離提取方法(公開號200810073781. I)、一種喜樹堿的提取方法(公開號201010529441. 2)等，上述文獻及已授權(quán)和公開的專利，從喜樹中提取喜樹堿的相關(guān)方法主要是有機溶劑提取，均消耗大量有機溶劑，不僅工序復雜、費工、費時、污染環(huán)境，而且純度和提取率不高，也解決不了產(chǎn)品中有機殘留和重金屬問題，且不符合目前對中藥開發(fā)的技術(shù)要求，而且均沒有涉及利用超臨界二氧化碳萃取從喜樹種子中提取喜樹堿。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于克服上述不足之處，提供一種萃取溫度低、速度快，萃取率高、所得產(chǎn)品喜樹堿含量高的超臨界二氧化碳萃取喜樹種子喜樹堿的方法。該方法具有低能耗、操作簡單、參數(shù)易控、無溶劑殘留等優(yōu)點。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是將喜樹種子烘干，粉碎后樣品投入超臨界CO2提取裝置中，以85% - 95%乙醇為夾帶劑，調(diào)節(jié)萃取溫度45 — 55°C、萃取壓力20 —30MPa、CO2流量15 — 25L/h，在分離釜出口收集喜樹堿萃取物。CO2循環(huán)使用，整個萃取時間為90 - 150分鐘。與有機溶劑提取法相比，該方法具有低能耗、操作簡單、萃取條件溫和，提取時間短，無溶劑殘留等優(yōu)點，而且環(huán)境友好，易于后續(xù)處理。
具體實施例方式、實施例I取喜樹種子200g，在50°C下烘干7小時后粉碎過40目篩，投入超臨界CO2萃取釜中，萃取條件為萃取溫度45°C、萃取壓力20MPa、C02流量15kg/h，85%乙醇為夾帶劑，萃取時間90分鐘，得到超臨界萃取物645ml，萃取率為42. 56%，萃取物中喜樹堿含量為40. 28%。實施例2取喜樹種子200g，在50°C下烘干5小時后粉碎過50目篩，投入超臨界CO2萃取釜中，萃取條件為萃取溫度45°C、萃取壓力25MPa、C02流量20kg/h，90%乙醇為夾帶劑，萃取時間90分鐘，得到超臨界萃取物630ml，萃取率為43. 48%，萃取物中喜樹堿含量為41. 37%。實施例3取喜樹種子200g，在60°C下烘干6小時后粉碎過60目篩，投入超臨界CO2萃取釜中，萃取條件為萃取溫度50°C、萃取壓力30MPa、C02流量25kg/h，95%乙醇為夾帶劑，萃取時間120分鐘，得到超臨界萃取物675ml，萃取率為45. 26%，萃取物中喜樹堿含量為42. 46%。實施例4取喜樹種子200g，在70°C下烘干6小時后粉碎過50目篩，投入超臨界CO2萃取釜中，萃取條件為萃取溫度50°C、萃取壓力20MPa、C02流量15kg/h，90%乙醇為夾帶劑，萃取時間150分鐘，得到超臨界萃取物710ml，萃取率為45. 82%，萃取物中喜樹堿含量為42. 61%。實施例5取喜樹種子200g，在60°C下烘干7小時后粉碎過60目篩，投入超臨界CO2萃取釜中，萃取條件為萃取溫度55°C、萃取壓力25MPa、C02流量25kg/h，95%乙醇為夾帶劑，萃取時間120分鐘，得到超臨界萃取物680ml，萃取率為44. 75%，萃取物中喜樹堿含量為43. 29%。實施例6取喜樹種子200g，在70°C下烘干5小時后粉碎過40目篩，投入超臨界CO2萃取釜中，萃取條件為萃取溫度55°C、萃取壓力30MPa、C02流量20kg/h，85%乙醇為夾帶劑，萃取時間150分鐘，得到超臨界萃取物720ml，萃取率為44. 18%，萃取物中喜樹堿含量為42. 93%。
權(quán)利要求
1.一種超臨界CO2提取喜樹中喜樹堿的工藝，其特征在于，工藝步驟如下 (O原料喜樹種子。
(2)種子烘干 (3)粉碎將干燥的喜樹種子粉碎，過篩 (4)超臨界CO2提取將上述粉碎后樣品投入超臨界CO2提取裝置中，以85%- 95%乙醇為夾帶劑，調(diào)節(jié)萃取溫度45 - 55°C、萃取壓力20 - 30MPa、C(V流量15 — 25L/h，萃取時間90 - 150分鐘。直接在分離釜出口收集喜樹堿提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的超臨界CO2提取喜樹中喜樹堿的工藝，其特征在于，所用原料為喜樹種子。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的超臨界CO2提取喜樹中喜樹堿的工藝，其特征在于，喜樹種烘干溫度為50 - 70°C，烘干時間為5 — 7小時
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的超臨界CO2提取喜樹中喜樹堿的工藝，其特征在于，烘干后的喜樹種子粉碎粒度為40 — 60目。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的超臨界CO2提取喜樹中喜樹堿的工藝，其特征在于，將喜樹種子粉投入超臨界萃取裝置的萃取罐中，以二氧化碳為溶劑，85% - 95%乙醇做夾帶劑，在壓力20 — 30MPa、溫度45 — 55°C XO2流量15 — 25L/h下，進行超臨界CO2萃取，萃取時間為90 150分鐘。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用超臨界二氧化碳提取喜樹種子中喜樹堿的方法，以二氧化碳為溶劑，85%－95%乙醇做夾帶劑，在壓力20－30MPa、溫度45－55℃、CO2流量15－25L/h下，進行超臨界CO2萃取，萃取時間為90~150分鐘。本發(fā)明具有萃取溫度低，速度快、萃取率高、無溶劑殘留，所得產(chǎn)品喜樹堿含量高品質(zhì)好，提取溶劑CO2可循環(huán)使用，對人和環(huán)境無不良影響。
文檔編號C07D491/22GK102731520SQ20121023992
公開日2012年10月17日 申請日期2012年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月12日
發(fā)明者周志強, 張玉紅, 王洋 申請人:東北林業(yè)大學, 張玉紅