專利名稱：一種景洪哥納香甲素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種景洪哥納香甲素的制備方法。
背景技術(shù)：
景洪哥納香甲素(Cheliensisin A)，化學(xué)名稱6 (7、8—環(huán)氧一苯乙烯基)一5—乙酰氧基一5、6—二氫一2—吡喃酮，分子式C15H14O5,分子量274，白色結(jié)晶，熔點152_153°C。景洪哥納香甲素是從番荔枝科植物景洪哥納香葉中提取的一種藥用成分，在抗腫瘤活性篩選有顯示活性強，對人體白血病、胃腺癌和小白鼠肝腹水有作用。文獻“景洪哥納香甲素誘導(dǎo)人早幼粒白血病細胞凋亡及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究”和專利“景洪哥納香甲素及其制備方法和應(yīng)用”都報道了景洪哥納香甲素的顯著抗腫瘤作用?，F(xiàn)有純化景洪哥納香甲素的方法為景洪哥納香葉或莖稈，用乙醇冷浸提取，減壓回收乙醇，濃縮液加水調(diào)均，用萃取，回收氯仿，得氯仿提取物，該提取物經(jīng)硅膠進行柱層析，依次用石油醚，乙酸乙酯-石油醚梯洗脫，得景洪哥納香甲素(cheliensisin A)。文獻 “景洪哥納香中一個新的抗癌活性成分”和專利“景洪哥納香甲素及其制備方法和應(yīng)用”公開的方法均是此種方法。該種操作復(fù)雜，工業(yè)化程度低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種景洪哥納香甲素的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)解決方案來實現(xiàn)的
一種景洪哥納香甲素的制備方法，其特征在于以景洪哥納香葉為原料，粉碎，加5-10 倍量80-90%甲醇溶液回流提取2-3次，提取液減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入大孔樹脂柱吸附，甲醇水梯度洗脫，收集有效成分，減壓濃縮至小體積，加氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加入適量石油醚，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素產(chǎn)品。所述的大孔樹脂型號可選AB-8、DlOl、HPD100或HZ-816中的一種。所述的梯度洗脫為10-15倍量水一4-6倍量40-50%甲醇水一4-5倍量70-80%甲醇水。本方法的優(yōu)勢是工藝采用大孔樹脂純化富集純化，和現(xiàn)有的萃取硅膠柱分離技術(shù)比較，具有操作簡單、生產(chǎn)成本低、易于批量生產(chǎn)等特點；后續(xù)的萃取結(jié)晶，工藝操作也較為簡單，極易重現(xiàn)和放大，為新的抗腫瘤藥物生產(chǎn)提供了工業(yè)化保障。下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1:
取景洪哥納香葉干燥，粉碎，取^g，加50L80%甲醇溶液回流1小時，過濾液體再加25L80%甲醇提取2次，合并提取液過濾，減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入AB-8大孔樹脂柱吸附，依次用10倍量水一6倍量40%甲醇水一4倍量80%甲醇洗脫，收集80%甲醇洗脫液，減壓濃縮至1/20體積，加等體積氯仿溶液充分?jǐn)嚢瑁o置，收集氯仿層加石油醚至有沉淀物析出止，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素白色結(jié)晶 6. 6g。實施例2:
取景洪哥納香葉干燥，粉碎，取^g，加40L90%甲醇溶液回流1小時，提取2次，合并提取液過濾，減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入DlOl大孔樹脂柱吸附，依次用15倍量水 —4倍量50%甲醇水一5倍量70%甲醇洗脫，收集70%甲醇洗脫液，減壓濃縮至1/30體積， 加1. 5倍體積的氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加石油醚至有沉淀物析出止，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素白色結(jié)晶5. Sg。實施例3:
取景洪哥納香葉干燥，粉碎，取^g，加40L85%甲醇溶液回流1小時，提取2次，合并提取液過濾，減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入HPD100大孔樹脂柱吸附，依次用10倍量水一4倍量45%甲醇水一5倍量75%甲醇洗脫，收集75%甲醇洗脫液，減壓濃縮至1/20體積，加等體積的氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加入石油醚至有沉淀物析出止，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素白色結(jié)晶6. 3g。實施例4:
取景洪哥納香葉干燥，粉碎，取^g，加40L80%甲醇溶液回流1小時，提取2次，合并提取液過濾，減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入HZ-816大孔樹脂柱吸附，依次用10倍量水 —4倍量50%甲醇水一5倍量70%甲醇洗脫，收集70%甲醇洗脫液，減壓濃縮至1/30體積， 加等體積的氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加石油醚至有沉淀物析出止，冷藏結(jié)晶， 結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素白色結(jié)晶7. 4g。實施例5:
取景洪哥納香葉干燥，粉碎，取10kg，加80L80%甲醇溶液回流1小時，提取2次，合并提取液過濾，減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入HPD100大孔樹脂柱吸附，依次用10倍量水 —4倍量50%甲醇水一4倍量75%甲醇洗脫，收集75%甲醇洗脫液，減壓濃縮至1/30體積， 加等體積的氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加石油醚至有沉淀物析出止，冷藏結(jié)晶， 結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素白色結(jié)晶13. 6g。實施例6:
取景洪哥納香葉干燥，粉碎，取20kg，加150L80%甲醇溶液回流1小時，提取2次，合并提取液過濾，減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入HZ-816大孔樹脂柱吸附，依次用10倍量水一4倍量50%甲醇水一4倍量75%甲醇洗脫，收集75%甲醇洗脫液，減壓濃縮至1/30體積，加等體積的氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加石油醚至有沉淀物析出止，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素白色結(jié)晶26. lg。
權(quán)利要求
1.一種景洪哥納香甲素的制備方法，其特征在于以景洪哥納香葉為原料，粉碎，加 5-10倍量80-90%甲醇溶液回流提取2-3次，提取液減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入大孔樹脂柱吸附，甲醇水梯度洗脫，收集有效成分，減壓濃縮至小體積，加氯仿溶液充分?jǐn)嚢瑁?靜置，收集氯仿層加入適量石油醚，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述景洪哥納香甲素的制備方法，其特征在于所述的大孔樹脂型號可選 AB-8、DlOl、HPD100 或 HZ-816 中的一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述景洪哥納香甲素的制備方法，其特征在于所述的梯度洗脫為 10-15倍量水一4-6倍量40-50%甲醇溶液一4-5倍量70-80%甲醇溶液。
全文摘要
本發(fā)明提供一種景洪哥納香甲素的制備方法，方法是以景洪哥納香葉為原料，粉碎，加5-10倍量80-90%甲醇溶液回流提取2-3次，提取液減壓回收甲醇，濃縮液加水分散，加入大孔樹脂柱吸附，甲醇水梯度洗脫，收集有效成分，減壓濃縮至小體積，加氯仿溶液充分?jǐn)嚢?，靜置，收集氯仿層加入適量石油醚，冷藏結(jié)晶，結(jié)晶物濾出再用甲醇重結(jié)晶，干燥得景洪哥納香甲素產(chǎn)品。本發(fā)明采用大孔樹脂富集純化，工藝簡單易操作，生產(chǎn)成本低，易于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D407/04GK102329310SQ20111021062
公開日2012年1月25日 申請日期2011年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月26日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司