專利名稱：一種^99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥類配合物、其制備分離純化方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種99mTcO核標(biāo) 記的苯丁酸氮芥類配合物、其制備分離純化方法及其用途，屬于放射性藥物制備及應(yīng)用領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康和生命的常見(jiàn)病和多發(fā)病，已成為人類死亡的第二位原因，僅次于心腦血管疾病，有些地方已上升為第一位原因(鄭虎等.藥物化學(xué).[M]，北京人民衛(wèi)生出版社，2001，第四版)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，發(fā)達(dá)國(guó)家中約有三分之一的人會(huì)在他們生命歷程的不同階段患上癌癥，其中近四分之一的患者最終死于癌癥。它對(duì)人類構(gòu)成了巨大的威脅，是人類最難對(duì)付的頑癥之一。氮芥衍生物抗腫瘤作用的發(fā)現(xiàn)被認(rèn)為是腫瘤化療發(fā)展的里程碑之一(Pratt W. B. , The Anticancer Drugs. Oxford University Press, 1979)。其后，為了尋找副作用小，選擇性高的類似物，先后合成了 3000余種衍生物，但臨床常用的只有10余種。苯丁酸氮芥便是其中之一。氮芥衍生物作用原理的研究表明，氮芥的烷化作用是由于它在生理溫度及PH為中性或堿性條件下環(huán)化成乙烯亞胺的結(jié)果，后者與核酸組份的親核基團(tuán)烷化而發(fā)揮其生物學(xué)作用。前期的研究證明苯丁酸氮芥有抗腫瘤作用，預(yù)計(jì)它在腫瘤細(xì)胞中被選擇性的活化，并證明具有較低的毒性和較高的活性而成為后來(lái)臨床上應(yīng)用較多的一種烷化藥物。將苯丁酸氮芥和其他的活性基團(tuán)相連接，可以降低苯丁酸氮芥本身的毒性，而且特異性也會(huì)增強(qiáng)。于是人們?cè)O(shè)想把兩種藥物結(jié)合在一個(gè)分子中可能會(huì)取得較好的活性。 如2005年Beatrece Coggila等合成的苯丁酸氮芥衍生物的生理活性較兩種藥物混合使用好(Coggiola B. , Pagliai F. , et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. , 2005, 15:3551)。 2005年P(guān)arker L. L.等合成了環(huán)狀大分子多功能烷化劑，生理活性測(cè)試表明它與DNA交聯(lián)接能力是苯丁酸氮芥的IO4倍，是美法侖的2000倍，它的細(xì)胞毒性和臨床藥物相當(dāng)(Parker L. L. , Anderson F. Μ. , et al. Bioorg. Med. Chem., 2005，13:2389)。2006年Su Τ· L等人將DNA嵌入劑和氮芥相連后生物學(xué)活性得到不同程度提高(Su Τ. L.，Lin Y. W. et al. J. Med. Chem. 2006, 49 3710)。本專利中我們將苯丁酸氮芥和雙功能螯合劑N2S2通過(guò)酰胺化反應(yīng)連接，希望得到對(duì)腫瘤作用靈敏度高、特異性強(qiáng)的標(biāo)記前體，進(jìn)而與99mTc完成標(biāo)記后通過(guò)乙酸乙酯萃取分離純化，標(biāo)記物的最終放化純達(dá)到99%以上。目前，如何提前檢測(cè)癌癥的發(fā)生，是有效的提高癌病患者的生活質(zhì)量著重解決的問(wèn)題。但是很多癌癥患者在發(fā)病前期并不能察覺(jué)自己的癥狀，耽誤了最佳的治療時(shí)間，也為后期的治療帶來(lái)了很多困難。所以尋找一種靈敏度高、特異性強(qiáng)診斷癌癥患者的藥物也成為了一種必然趨勢(shì)。放射性核素在醫(yī)學(xué)上主要有兩方面的應(yīng)用一是核醫(yī)學(xué)成像，用于疾病診斷；二是腫瘤的放射治療。核醫(yī)學(xué)就是利用核技術(shù)來(lái)診斷、治療和研究疾病的一門(mén)新興學(xué)科。而核醫(yī)學(xué)成像作為近代臨床醫(yī)學(xué)影像診斷中重要組成部分也得到迅速的發(fā)展，和CT、核磁共振、超聲技術(shù)等相互補(bǔ)充，彼此印證，極大的提高了對(duì)疾病的診療和研究水平。其中放射性核素99mTc在顯像中應(yīng)用的非常廣泛，首先，99mTc的γ射線能量適中(140 KeV)，半衰期較短 (6.02 h)，適合于顯像；其次，99mTc在血液中的清除較快，并且該核素由反應(yīng)堆生產(chǎn)，價(jià)格便宜，便于推廣使用。苯丁酸氮芥本身作為一種抗腫瘤藥物已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，與99mTc標(biāo)記后可作為一種具有潛在應(yīng)用前景的腫瘤顯像劑。99fflTcO-N2S2-CLB是我們 設(shè)計(jì)的一種新型腫瘤單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像 (Single-Photon Emission Computed Tomography, SPECT)顯像劑，在 CA 上沒(méi)有登記號(hào)，而且國(guó)內(nèi)外也沒(méi)有相關(guān)報(bào)道。期望通過(guò)苯丁酸氮芥中引入雙功能螯合劑N2S2并與同位素99mTc 形成穩(wěn)定的配合物，為進(jìn)一步的生物學(xué)性質(zhì)研究和腫瘤(惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌等)SPECT顯像奠定基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物，將其應(yīng)用于后期生物學(xué)性質(zhì)的研究和核醫(yī)學(xué)診斷顯像，并提供了其制備和分離純化方法。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案 一種結(jié)構(gòu)式5所示的99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物
M7 YrOOCH2CH2CH2 「9%< 1
L4、J Q
τ °凡.
CIH2CH2C CH2CH2CI
5將含N2S2-LCB 70-200ug 的 N2S2-LCB 的乙醇溶液 0. 1 mL,含 EDTA_2Na 1. 50-3. 50 mg 的 EDTA-2Na 水溶液 250 uL，10-30 mg GH 固體以及含 0. 1-0. 6 mg SnCl2WSnCl2 ·2Η20 鹽酸溶液0. 1 mL加入到反應(yīng)容器中，再加入37-55. 5 MBq新鮮的"mTc04_淋洗液，用磷酸鹽緩沖液調(diào)至PH為5-7，并控制總反應(yīng)體積為1.5-2 mL，充分震蕩混勻，80-100 °C反應(yīng)30 min-1. 5 h，即得標(biāo)記率大于81%的99mTcO標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物。所述磷酸鹽緩沖液pH 約等于 6，由 0. 2 mol/L 的 NaH2PO4 (如 87. 7 mL)與 0. 2 mol/L 的 Na2HPO4 (如 12. 3 mL) 混合而成，并調(diào)至PH為5-7。上述標(biāo)記率大于81% 99mTcO標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物的分離純化方法是 將上述所得標(biāo)記液冷卻，加入乙酸乙酯萃取，上層為含標(biāo)記物99mTcO-N2S2-CLB的乙酸乙
酯有機(jī)層，分離出乙酸乙酯有機(jī)層，再通氮?dú)馊コ宜嵋阴ト軇?，加入體積比為1:1的生理鹽水和乙醇溶解即可99mTcO標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物，HPLC放化純大于99%。99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物在核醫(yī)學(xué)腫瘤診斷顯像制劑制備中的應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果=99mTcO-N2S2-CLB是我們?cè)O(shè)計(jì)的一種新型腫瘤SPECT顯像劑，在 CA上沒(méi)有登記號(hào)，而且國(guó)內(nèi)外也沒(méi)有相關(guān)報(bào)道。我們成功地在抗腫瘤藥物苯丁酸氮芥中引入N2S2螯合劑，并與放射性核素99mTc形成穩(wěn)定的配合物。通過(guò)一種簡(jiǎn)易的純化方法將放化純由81%提升為99%，足以滿足臨床對(duì)放射性藥物的要求(放化純大于90%)。為進(jìn)一步的生物學(xué)性質(zhì)研究和腫瘤(惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌等)顯像應(yīng)用奠定了基石出。


附圖用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說(shuō)明書(shū)的一部分，與本發(fā)明的實(shí)施例一起用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。在附圖中
圖1是實(shí)施例1的所得化合物2的質(zhì)譜圖； 圖2是實(shí)施例1的所得化合物3的質(zhì)譜圖3是實(shí)施例1的所得99mTcO-N2S2-CLB放化純的HPLC測(cè)定圖譜，a為游離锝的HPLC圖譜，b為標(biāo)記物純化前水相HPLC圖譜，c為標(biāo)記物乙酸乙酯萃取純化后的HPLC圖譜。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說(shuō)明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。)制備 99mTcO-N2S2-CLB 實(shí)施例1
合成路線如下
權(quán)利要求
1.一種結(jié)構(gòu)式5所示的99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物 (/ ^nXOCH2CH2CH2
2.權(quán)利要求1所述的99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物的合成方法，其特征在于將含 N2S2-LCB 70-200 Ug 的 N2S2-LCB 的乙醇溶液 0. 1 mL,含 EDTA_2Na 1. 50-3. 50 mg 的 EDTA-2Na 水溶液 250 uL, 10-30 mg GH 固體以及含 0. 1-0. 6 mg SnCl2 的 SnCl2 · 2H20 鹽酸溶液0.1 mL加入到反應(yīng)容器中，再加入37-55. 5 MBq新鮮的99mTc04_淋洗液，用磷酸鹽緩沖溶液，并控制總反應(yīng)體積為1.5-2 mL，充分震蕩混勻，80-100 °C反應(yīng)30 min-1. 5 h，即得標(biāo)記率大于81 %的99mTcO標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物的合成方法，其特征在于 所述標(biāo)記率大于81% 99mTcO標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物的分離純化方法是，將權(quán)利要求2所得標(biāo)記液冷卻，加入乙酸乙酯萃取，上層為含標(biāo)記物99mTcO-N2S2-CLB的乙酸乙酯有機(jī)層，分離出乙酸乙酯有機(jī)層，再通氮?dú)馊コ宜嵋阴ト軇尤塍w積比為1:1的生理鹽水和乙醇溶解即可99mTcO標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物，HPLC放化純大于99%。
4.權(quán)利要求1-3所述的99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物在核醫(yī)學(xué)腫瘤診斷顯像制劑制備中的應(yīng)用。
全文摘要
一種99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥類配合物、其制備分離純化方法及其用途，屬于放射性藥物標(biāo)記合成及應(yīng)用領(lǐng)域。其配合物的制備方法是，將配體N2S2-CLB、還原劑、EDTA、GH、磷酸緩沖液和高锝酸鈉(Na99mTcO4)溶液混合反應(yīng)，即得到99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物。標(biāo)記物用乙酸乙酯萃取純化，HPLC測(cè)其放化純可達(dá)到99%以上。本發(fā)明99mTcO核標(biāo)記的苯丁酸氮芥配合物制備方法簡(jiǎn)單易操作、條件溫和，通過(guò)分離純化后放化純高，其為后續(xù)的核醫(yī)學(xué)腫瘤顯像的研究奠定了優(yōu)秀的基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)C07F13/00GK102311458SQ20111014542
公開(kāi)日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2011年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月31日
發(fā)明者林建國(guó), 程文, 羅世能, 薛麗, 邱玲 申請(qǐng)人:江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所