專利名稱：：用作流感病毒神經氨酸酶抑制劑的多取代五元環(huán)小分子化合物的制作方法用作流感病毒神經氨酸酶抑制劑的多取代五元環(huán)小分子化合物
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種具有多取代五元環(huán)骨架的小分子化合物，尤其是一種用作流感病毒神經氨酸酶抑制劑的多取代五元環(huán)小分子化合物。
背景技術：
：2003和2005年相繼爆發(fā)的禽流感嚴重地影響了人們的正常生活，特別是新近發(fā)現的HPAIH5N1是一類高度變異和迅速繁殖的病毒，導致了禽流感病毒快速變異，變成可感染不同禽類種屬的病毒。由于HPAIH5N1禽流感病毒可以感染人類，有可能發(fā)展成為一種危AA類生命的病原體。因此，HPAIH5N1禽流感的出現引起世界范圍內的恐慌和各國政府的極大關注。盡管禽流感疫苗在一定范圍內可以有效地控制禽流感的傳播，但任何一種有效疫苗的開發(fā)周期至少需要一年以上的時間。由于禽流感病毒的高度變異性，對于由基因突變所產生的突發(fā)性新型禽流感病毒來說，在短時間內開發(fā)出有效疫苗在大面積范圍內控制禽流感的傳播顯然是不現實的。因此，建立起一套系統(tǒng)、快速地預防和控制禽流感病毒的傳播體系對于保護人類和國家的安全是十分關鍵的，特別是對我國這樣以農業(yè)為主的大國尤為重要。當前，作為抗流感病毒抑制劑的藥物有四種上市。其中兩種針對M2蛋白抑制劑的藥物僅對流感病毒A起作用，并且出現了不良的CNS副作用，另外發(fā)現病毒對這兩種藥物已經出現抗藥性。其余兩種，以oseltamivir(Tamiflu)和zanamivir(Rdenza⑧)為K表的Neuraminidase(NA、神經氤酸酶)抑制劑為控制禽流感的傳播建立了一條有效的防線。GileadSciences公司和F.Hoffman-LaRoche公司的合成Tamiflu是從ShikimicAcid或GuinicAcid為起始原料的。合成路線較長，作為天然產物的起始原料價格貴，不易得到。起始原料是六員環(huán)，環(huán)上的取代物都有固定的手性，這就降低了制備結構多樣性的Tamiflu衍生物的可能性。但禽流感病毒可以通過不同病毒間的基因重組或自身的基因突變來進行變異，這樣就可能導致現存的NA抑制劑失去作用。近來出現的抗Tamiflu的流感病毒抹正說明了這個問題。從化學生物學角度看，NA抑制劑失去作用的原因是由于NA的基因在特定區(qū)域發(fā)生變化而所引起NA空間構象發(fā)生變化造成的。因此，系統(tǒng)地建立起以NA為靶點的結構多樣性的小分子庫是尋找新一代NA抑制劑的快速和有效的途徑。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種用作流感病毒神經氨酸酶抑制劑具有多取代五元環(huán)骨架的小分子化合物，以構造出結構多樣性的小分子抑制劑。為達到上述發(fā)明目的，本發(fā)明提出以下的技術方案一種通式i的化合物其中，R4是氫或曱基；R2是氫、節(jié)基、四氫吡喃或2-乙基丁基。本發(fā)明所提供的通式i的化合物是4-乙酰胺基-3-氨基-5-羥基環(huán)戊基-l-烯酸，4-乙酰胺基-3-氨基-5-羥基環(huán)戊基-1-烯酸甲酯，4-乙酰胺基-3-氨基-5-千氧基環(huán)戊基-l-烯酸，4-乙酰胺基-3-氨基-5-千氧基環(huán)戊基-1-烯酸曱酯，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(四氫-2H-吡喃-2-氧基)環(huán)戊基-l-烯酸，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(四氬-2H-吡喃-2-氧基)環(huán)戊基-1-烯酸甲酯，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(2-乙基丁氧基)環(huán)戊基-l-烯酸，或，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(2-乙基丁IL&)環(huán)戊基-1-烯酸曱酯；本發(fā)明所提供的通式i的化合物，具有三個手性中心3i,^Ui,m,w,m、3尺必,5i、3尺俗認、m，^s;55"、^s;狄,5s、^s;^s:5i或^s:狄,5及。本發(fā)明還提供一種制備通式I化合物的方法，包括以下步驟51、取原料化合物1:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>經PDC氧化反應生成醛，然后將生成的醛經Homer-Wadsworth-Emmons反應得到a、p不飽和酯，再在還原劑的還原作用下將所述不飽和酯還原為具有烯丙醇結構的中間化合物2:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>52、將化合物2經過熱的aza-Claisen重排得到鄰二氨基化合物的中間體，然后在強堿條件下脫掉新生成的酰胺的三氯乙?；Ｗo，再在弱堿條件下將該氨基用千氧羰基保護，最后在對曱基苯磺酸的催化下脫掉羥基的四氫-2H-吡喃保護基團得到中間化合物3:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>53、中間化合物3經由Dess-Martin氧化劑(C13H13I08)氧化成為醛，再將醛經由Baylis-Hillman反應得到具有雙烯結構的中間化合物4:S4、以二氯甲烷作溶劑，在Grubbs二代催化劑(1992年美國加州理工學院的RobertGrubbs發(fā)現的用作催化劑的釘卡賓絡合物，在此基礎上于1999年開發(fā)出的第二代Grubbs催化劑)催化下將中間化合物4經過關環(huán)的烯烴復分解反應構建出具有五元環(huán)骨架的中間化合物5:1人，，OHS5、用氯化氫氣體的甲醇飽和溶液處理中間化合物5,脫掉其中一個氨基的Boc基團保護，然后在飽和碳酸鈉作用下，用乙?；Ｗo新生成的氨基而得到化合物6:1VteO、CbzHNNHAcS6、以乙腈作溶劑，在三曱基碘硅烷作用下將化合物6脫掉節(jié)氧羰基保護得到相應的氨基化合物1-1:IV!eO、乂JDNH2NHAc1-1,即曱基作為R!取代基、H作為R2取代基的通式I化合物；或S6，、保護化合物6中游離的羥基，導入千基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基，生成醚8:CbzHN然后在有機堿、氫化試劑和釔催化劑的存在下將醚8脫掉爺氧羰基保護得到相應的氨基化合物1-2:NH2MHAc12即甲基作為R4取代基，千基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基的通式I化合物；隨后將化合物1-2水解即得到相應的酸1-3:NH2NHAc1-3即H作為&取代基，節(jié)基、四氬吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基的通式I化合物。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，步驟Sl中所述的還原劑是DIBAL-H(二異丁基氫化鋁)或四氫鋁鋰。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，步驟S6，中所述的有機堿是有機胺類，優(yōu)選乙二胺、三乙胺、丙胺、三丙胺、丁胺。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，步驟S6，中所述的氬化試劑是至少有一個氫作為取代基的硅烷，優(yōu)選三乙基硅烷或叔丁基二曱基硅烷。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，步驟S6，中所述的把催化劑是醋酸鈀或氯化4巴。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，在步驟S6，中，導入芐基作為10R2取代基的過程是，在化合物6的干燥的N,N-二甲基甲酰胺溶液中加入氧化銀和溴化千進行反應而得。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，在步驟S6，中，導入四氬吡喃作為R2取代基的過程是，在化合物6的二氯曱烷溶液中加入對曱基苯磺酸和3,4-二氫吡喃進4于反應而4尋。本發(fā)明所提供的制備通式I化合物的方法，在步驟S6，中，導入2-乙基丁基作為R2取代基的過程是，將3-戊基三氯乙酰亞胺酯和三氟曱磺酸加入到化合物6的二氯曱烷溶液中進行反應而得。本發(fā)明還提供了所述通式I的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備治療流感藥物中的應用。圖1所示為本發(fā)明所提供的通式I化合物的合成路線圖；圖2和圖3所示為本發(fā)明所提供的具體實施例中化合物1-1的合成路線圖；圖4所示為本發(fā)明所提供的具體實施例中化合物1-2、1-3的合成路線圖；圖5所示是本發(fā)明所提供的具體化合物對流感病毒神經氨酸酶的抑制能力曲線圖。具體實施方式化合物種類本發(fā)明提供的通式I化合物的具體化合物包括4-乙酰胺基-3-氨基-5-羥基環(huán)戊基-l-烯酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>其三個手性中心分別為3尺4尺5及、3尺4尺5S、3尺必,5及、3尺45,5&、3S，^S，55"、3W線艱4尺化4-乙酰胺基-3-氨基-5-羥基環(huán)戊基-1-烯酸甲酯:乂OHNH2NHAc其三個手性中心分別為3尺4尺1R、3尺4尺5S、3尺必,5i、3尺45;55:、35^《5S、4-乙酰胺基-3-氨基-5-節(jié)氧基環(huán)戊基-1-烯酸NH2NHAc其三個手性中心分別為3尺W，5及、IRj/US,3尺必，5i、1R，必,5&、35^&5S、3，，或W尺化4-乙酰胺基-3-氨基-5-千氧基環(huán)戊基-1-烯酸曱酯NH2NHAc其三個手性中心分別為3及,^，5及，W，"，55"、W,^S;5/、3及,必,55;、^S,必，J51、認銀^、W，或W及,化4-乙酰胺基-3-氨基-5-(四氳-2H-吡喃-2-氧基)環(huán)戊基-1-烯酸NH2NHAc其三個手性中心分別為3尺^U/、3尺4尺5S、3尺必,5及、3尺必,M，、3S,^S,5S、3《伐、3S，仏5i或3《銀5化4-乙酰胺基-3-氨基-5-(四氫-2H-吡喃-2-氧基)環(huán)戊基-1-烯酸曱酯NH2NHAc其三個手性中心分別為3尺4i，5i、3尺4尺551、3尺^S,5及、3尺必,5S、M，^S，551、33Wi或，尺觀4-乙酰胺基-3-氨基-5-(2-乙基丁氧基)環(huán)戊基-l-烯酸NHAc其三個手性中心分別為_3尺4尺5/、3尺4尺551、3尺^S,5/、3尺必,:551,、M，必,5S、3S、或3，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(2-乙基丁氧基)環(huán)戊基-l-烯酸甲酯其三個手性中心分別為3i,狄，5及、WJiUS,3尺^S，5i、3i,必，5S、M,必,5S、化合物合成附圖1所示是通式I化合物的合成路線圖，參照圖1,通式I化合物的制備方法為Sl、取原料化合物1經PDC氧化反應生成醛，然后將生成的醛經Horner-Wadsworth-Emmons反應得到a、卩不飽和酯，再采用還原劑將13上述不飽和酯還原為具有烯丙醇結構的中間化合物2:52、將化合物2經過熱的aza-Claisen重排得到鄰二氨基化合物的中間體，然后在強堿條件下脫掉新生成的酰胺的三氯乙?；Ｗo，再在弱堿條件下將該氨基用節(jié)氧羰基保護，最后在對甲基苯磺酸的催化下脫掉羥基的四氬-2H-吡喃保護基團得到中間化合物3;53、中間化合物3經由Dess-Martin氧化成為醛，再將醛經由Baylis-Hillman反應得到具有雙烯結構的中間化合物4;54、以二氯甲烷作溶劑，在Grabbs二代催化劑催化下將中間化合物4經過關環(huán)的烯烴復分解反應構建出具有五元環(huán)骨架的中間化合物5;55、用氯化氫氣體的曱醇飽和溶液處理中間化合物5，脫掉其中一個氨基的Boc基團保護，然后在飽和碳酸鈉作用下，用乙?；Ｗo新生成的氨基而得到化合物I-1;56、以乙腈作溶劑，在三曱基》典硅烷作用下將化合物6脫掉千氧羰基保護得到相應的氨基化合物I-1，即曱基作為&取代基、H作為R2取代基的通式化合物I;或S6'、保護化合物6中游離的羥基，導入爺基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基，生成醚8;然后以三乙胺(或其它有機名咸，如乙二胺、丙胺、三丙胺、丁胺等)作堿、三乙基硅烷(或其它至少有一個氫作為取代基的硅烷)作氫化試劑，在醋酸把(或氯化鈀)作催化劑下將醚8脫掉千氧羰基保護得到相應的氨基化合物I-2,即曱基作為R4取代基，千基、四氬吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基的通式化合物I;或將化合物1-2水解得到相應的酸1-3,即H作為R,取代基，節(jié)基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基的通式化合物I。1.化合物I-1的合成附圖2、3分別示出了通式I化合物中的具有不同手性中心的化合物I-1的合成路線圖。下面參照附圖2對其中的部分手性化合物的合成進行詳述。7.i合成趟始必合參丄〃(^>/-,《-3-("歐蟲-27/-裙喊-2-我《？丙差-2-炎7"car6麵她乂'向0S)-2-氨基-3-羥基丙酸曱酯鹽酸鹽(25.6g，165mmol)在二氯曱烷(200mL)的懸浮液中加入三乙胺(25.2mL，181.5mmol)和二碳酸二叔丁酯(39.6g,181.5mmol)，在室溫攪拌8小時。反應通過加入碳酸氬鈉水溶液(lM,50mL)終止；反應體系用飽和氯化鈉溶液(2x30mL)清洗，有機相用二氯曱烷(3x30mL)萃??；合并有機相并用無水硫酸鈉干燥；向干燥后得到剩余物的二氯曱烷溶液中直接加入對曱基苯磺酸(3.2g，16.5mmol)和3,4-二氫吡喃(18.1mL，198mmol),在室溫攪拌4小時后，加入水(100mL)淬滅，水相用乙醚萃取(3xl00mL);合并有機相，用無7jO克酸鈉干燥；將溶液濃縮后得到的產物溶于干燥乙醚中，向該溶液中加入氫化鋁鋰(7.5g,198mmo1),反應體系在室溫攪拌2小時；反應通過緩慢加入乙酸乙酯(20mL)淬滅，然后加入酒石酸鉀鈉水溶液(10Q/。，lOOmL);得到的混合體系用乙酸乙酯(3xl00mL)進行萃取，合并有機相，用飽和氯化鈉溶液(2x20mL)清洗后，用無水石危酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=4/1)后以83%的收率得到固體狀產物醇L-1(37.7g)。&NMR(500MHz，CDC13)S5.22-5.16(m，1H)，4.55(s,1H)，3.93-3.80(m,4H),3.73-3.52(m,3H)，2.83-2.73(m，1H)，1.82-1.74(m，2H),1.62-1.55(m,4H)，1.45(s，9H);13CNMR(125MHz，CDC13)5155.8,99.6，99.0,98.6，79.2,67.3，66.9，66.7，62.9，62.4，61.9,51.4,32.2,30.5，30.4,30.2，29,2，28.1，25.2，25.0，22.2,19.7，19.3。丄2合成尹/《必合參"(72尺五>5-詹差-7<四產-2//-^漆2-真4)4差-3-雄-2-炎T教凝,ter/-Z啤/(2i,￡」-5-/^raxy-_/-(fe/ra/y^o-2/7-p_yra"-2-_y/ca^)首先，在0°C向吡啶(133mL，1.63mol)的二氯曱烷的溶液(lL)中加入三氧化鉻(81.5g，815mmo1)，反應體系在相同的溫度下攪拌30分鐘。再向該反應體系中逐滴加入醇L-l(37.4g,136mmol)溶于二氯甲烷的溶液(30mL)，然后在室溫攪拌1小時。反應通過移除二氯曱烷淬滅，將剩余物溶于乙醚中，在少量硅膠上過濾。濾液濃縮后直接將得到的產品用于下步反應無需進一步純化。氬化鈉(6.53g，60%在礦物油中)在氮氣氛下用正己烷(100mL)清洗，之后將正己烷層移除。直接在反應瓶中加入無水四氫呋喃(400mL),然后在0°C逐滴加入三曱基膦?；宜狨?23.5mL，163.2mmol)溶于四氫呋喃的溶液(30mL),將該反應體系在室溫下攪拌1小時。再在O。C時向其中緩慢加入上步產物溶于四氫呋喃的溶液(20mL)，滴加結束之后將反應體系升到室溫，攪拌過夜。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=10/1)后以68%的收率得到油狀產物酯L-2a(~尺^-4-炎T我瘋應-5-r四羞-2f-^喊-2-真差)A'差-2-雄凝f游，(銀巧-methyl4-(teW-butoxycarbonylamino)-5-(tetrahydro-2//-pyran-2-yloxy)pent-2-enoate)。在-78。C時，向酯L-2a(11.6g，35.3mmol)溶于二氯曱烷(200mL)的溶液中加入三氟化硼乙醚(5.34mL，42.3mmol)，在相同溫度下攪拌30分鐘。然后向反應體系中逐滴加入二異丁基氳化鋁(106mL,1.0M甲苯溶液)或四氳鋁鋰，再在-78。C攪拌6小時。通過在-78。C時緩慢加入曱醇(10mL)將反應淬滅，將反應體系升到室溫后，加入飽和酒石酸鐘鈉水溶液(100mL)，攪拌反應體系至澄清。用乙酸乙酯萃取(3xl00mL)，合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后，再用無水硫酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=2/1)后以85°/。的收率得到油狀產物醇L-2(9.1g)。&NMR(500MHz,CDC13)S5.86-5.82(m，1H),5.74-5.69(m,1H)，5.12(br，0.40H),4.99(br，0.55H)，4.59-4.54(m,1H)4,31-4.27(m，1H)，4.14-4.13(m,2H),3.87-3.69(m,2H)，3.52-3.49(m,2H)，1.82-1.68(m,2H),1.58-1.50(m，4H)，1.44(s,9H);13CNMR(125MHz，CDC13)5155.4,130.6,130.6，129.7，129.6，99.7,98.8,79.5，70.2，69.5，63.0,62.8，62.4，30.5，30.4,28.7，28.4，25.3，25.3,19.7，19.4.HR-ESI-MS，計算值C15H27N05(M+HO,302.1889;實測值302.1888。人3f河^合錄"-hZJ-2的^^4'丄3」尹河^合務""(Y2尺w」-3-f處瘋廢差小趁A'差誦^雄-2誦農:r瘋凝，在0°C下向氫化鈉(6.4g,159mmol,60%在礦物油中)懸浮于干燥四氫呋喃(300mL)的懸浮液中緩慢加入稀丙醇L-2(19.1g，63.5mmol)的四氫呋喃溶液(40mL)，在相同溫度下攪拌IO分鐘。然后向該反應體系中逐滴加入三氯乙腈(7.62mL,76.2mmol),之后將反應體系升到室溫攪拌2小時。反應通過在0。C下緩慢加入冰水(IOmL)進行淬滅，之后將反應體系用乙酸乙酯萃取(3x100mL)。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后，再用無水硫酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用少量的硅膠進行過濾。將濾液濃縮之后的剩余物溶于干燥四氫呋喃中(120mL)，再向溶液中加入二氯二乙腈鈀(1.64g，6.35mmol),反應在室溫攪拌12小時。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=10/1)后以65%的收率得到一對非對映體(18.3g)，基于四氬吡喃基團手性中心的存在。向上述三氯乙酰胺基化合物(10.3g，23.2mol)的乙醇溶液(95%，12mL)中加入氫氧化鈉水溶液(6N,12mL)，在室溫下攪拌24小時(TLC檢測無原料剩余)。之后在0。C時向該反應體系中緩慢加入氯曱酸千酯(1.5mL),然后將反應體系升溫到室溫攪拌12小時。反應結束后將乙醇移除，剩余體系用乙酸乙酯萃取(3x50mL)。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后，再用無水硫酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=10/1)后以76%的收率得到節(jié)氧羰基保護的酰胺(18.3g)基于四氫吡喃基團手性中心的存在為一對非對映體。向上述酰胺(1.87g，4.3mmol)的曱醇溶液(10mL)中加入對曱基苯磺酸(74mg,0.43mmol)后將該反應體系在室溫下攪拌l小時。反應結束后將曱醇移除，用色i普柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=4/1)后以80%的收率得到化合物L3-l(1.2g)。'HNMR(500MHz,CDC13)S7.36-7.33(m，5H)，5.90-5.80(m,1H),5.46(br,1H),5.31-5.23(m,2H)，5.13(br，1H),5.12(s，3H),4.31(br,1H),3.79-3.76(m，1H)，3.63(br,2H),3.04(br，1H)，1.43(s，9H);13CNMR(125MHz,CDC13)S156.8，155.9，136.2,135.0，128.5，128.4,128.1,128.1,128.0,117.3,79.7，67.1，62.1，54.9，54.7，28.3.HR-ESI-MS，計算值C18H26N205(M+if),351.1842;實測值351.1841。尹/《必合參"-2(Y2尺3》-3-卡處瘋麼差氺在4差-4-舉-2-炎T凝應，17car6a附她J好合成。在0。C下向氫化鈉(3g,75mmol,60%在礦物油中)的四氫呋喃溶液(150mL)中加入稀丙醇L-2(9.1g,!30.2mmol)溶于四氫呋喃的溶液(20mL)。在相同溫度下攪拌10分鐘后，向該反應體系中逐滴加入三氯乙腈(3.62mL，36.2mmol)，然后將反應體系升溫到室溫攪拌2小時。反應通過在0。C下緩慢加入水水(10mL)淬滅，用乙酸乙酯萃取(3x100mL)。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后，再用無水^琉酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用少量的硅膠過濾。將濾液濃縮之后的剩余物溶于干燥二曱苯(120mL)，回流24小時。反應結束后將反應體系冷卻到室溫，濃縮后用色語柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=10/1)，以91。/。的收率得到兩對非對映體(12.2g)基于新產生的稀丙胺基和四氫吡喃的手性中心的存在。向上述三氯乙酰胺基化合物(13.0g,30.0mol)的乙醇溶液(95°/o，12mL)中加入氫氧化鈉水溶液(6N，12mL)后在室溫下攪拌24小時(TLC^r測沒有原料剩余)。然后將乙醇移除，將剩余體系用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。然后在0。C時向該反應體系中逐滴加入氯曱酸千酯(1.5mL),再將反應體系升溫到室溫攪拌12小時。反應結束后停止攪拌兩相分層，分離有機相后，水相用乙酸乙酯萃取(3x50mL)。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液(2x10mL)清洗后，再用無水硫酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=25/1)后得到反式異構體(3.7g,28.5%)和順式異構體(3.6g，27.5%)。在室溫時，向順式異構體(1.95g，4.5mmol)的甲醇溶液(10mL)中加入對甲基苯磺酸(77mg，0.45mmol)后將該反應體系在室溫攪拌1小時。反應結束后將甲醇移除，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=4/1)后以86%的收率得到化合物L3-2(1.35g)。'HNMR(500MHz，CDC13)S7.36-7.30(m，5H)，5.85-5.78(m，iH)，5.53(br,0.55H)，5.29-5.20(m，2H),5.10(br，3H),4.43(br,1H),3.76-3.58(m,3H),3.19(br,0.7H),1.40(s，9H);13CNMR(125MHz，CDC13)5156.9，156.5,136.2，135.5，128.5,128,1，128.0,117.2，79.9，67.1，62.0，55.0,28.3.HR-ESI-MS，計算值C18H26N205(M+11")，351.1842;實測值351.1840。7.4哞/^/么合參丄4-7、Z4-2、Z^-3、187.《/丄4-/>Z4-2((35:^,5及入^f3尺4尺^"處瘋^^差匿4-炎T"秉應應亞f差羞差-(5-雄凝^#1=，卩S，4尺5"-0尺4尺5/^-me^;/在室溫時，向醇L3-l(1.2g，3.43mmol)的二氯曱烷溶液(15mL)中加入Dess-Martin氧化劑(2.9g，6.84mmol)后，再在室溫攪拌2小時。向反應體系中加入飽和碳酸氬鈉水溶液(30mL)和飽和碌u代硫酸鈉水溶液(30mL)將反應淬滅，然后用乙醚萃取(2x30mL)。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后，再用無水石克酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=4/1)，以98。/。的收率得到產物醛(1.17g)。將上述醛(U7g，3.36mmol)溶于丙烯酸曱酯(IOmL)中，加入DABCO(377mg,3.36mmol)，將反應混合物在室溫下攪拌36小時。將多余的丙烯酸曱酯移除后，剩余物通過色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=10/1)，以總收率39%得到化合物L4-l(270mg)和L4-2(297mg),回收原料530mg?；衔風4國l:&NMR(500MHz,CDC13)S7.34-7.32(m,5H),6.31(s,1H),5.95-5.88(m,2H),5.68(br,1H),5.30-5.21(m，2H)，5.15-5.08(m，2H)，4.97-4.95(m，1H)，4.79(s，1H),4.32(br，1H)，3.90-3.88(m,1H)，3.74(s,3H)，1.36(s，9H);13CNMR(125MHz，CDC13)5166.2,157.1，155.9，139.5,136.2,135.4,128.5,128.3，128.1，128.0,125.9，117.0，79.4，68.2，67.5，67.2,55,4,51.8,28.2.HR國ESI-MS，計算值C22H3oN207(M+H"")，435.2053;實測值435.2053?；衔風4-2:^NMR(500MHz,CDC13)57.36-7.32(m,5H)，6.32(s，1H),5.96-5.90(m,2H),5.52-5.51(m，1H),5.32-5.23(m,2H),5.14-5.08(m，2H),4.93-4.91(m,1H),4.79(s，1H)，4.31(br,1H)，3.卯國3.88(m，1H),3.76(s,3H),1.37(s,9H);13CNMR(125MHz，CDC13)S166.2,157.2，155.9，139,4，136.2，135.4，128.5,128.2,128.1,126.0,117.2,79.4，68.3，67.3，55.3，51.8,28.2.HR-ESI-MS，計算值C22H3oN207(M+H")，435.2053;實測值435.2049。/乂2丄4-3、廣0尺4尺5》-^Y3S,必，5^)-5-卡處教^^一-炎T處應絲畫3-賴-2-ff差顛-6-微f凝，0尺4尺5S」-隅必，5^督％/在室溫時，向醇L3-2(1.35g,3.86mmol)的二氯甲烷溶液(15mL)中加入Dess-Martin氧化劑(3.3g,7.78mmol)后，在室溫4覺拌2小時。在反應體系中加入々包和^友酸氫鈉水溶液(30mL)和飽和好u代》危酸鈉水溶液(30mL)將反應淬滅，然后用乙醚萃取(2x30mL)。合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后，再用無水硫酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=4/1)，以81%的收率得到產物醛(1.09g)。將上述醛(1.09g,3.13mmol)溶于丙烯酸曱酯(10mL)中，加入DABCO(350mg，3.13mmol),反應混合物在室溫下攪拌36小時。將多余的丙烯酸曱酯移除后，剩余物通過色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=10/1)，以總收率41%得到化合物L4-3(293mg)和L4-4(267mg)，回收原料500mg。化合物L4-3:&NMR(500MHz，CDC13)37.36-7.30(m,5H)，6.30(s,1H)，5.94-5.88(m,2H)，5.64(br,1H)，5.30-5.21(m,2H)，5.15-5.07(m,2H),4.95-4.93(m，1H),4.78(s,1H),4.31(br,1H),3.88(m,1H)，3.73(s，3H)，1.36(s，9H);13CNMR(125MHz,CDC13)S166.2，157.1，155.9,139.5,136.2,135.4，128.7,128.5,128.1，128.0,125.9，117.0,79.4，68.2,68.2，67.2，55.4，51.8，28.2.HR-ESI國MS，計算值C22H3。N207(M+H^，435.2053;實測值435.2053?；衔風4-4:&NMR(500MHz,CDC13)S7.40-7.32(m,5H),6.32(s，IH)，5.96-5.89(m,2H),5.52(br，IH)，5.37-5.23(m，2H),5.17-5.08(m，2H)，4.93-4.91(m，IH)，4.79(s,1H),4.31(br，IH)，3.90-3.87(m,IH)，3.76(s,3H)，1.37(s,9H);13CNMR(125MHz,CDC13)5166,2，157.2,155.9，139.4，136.2,135.4,128.8，128.5,128.4，128.2,128.0,126.0,117.2，79.4,68.3，67.5,67.3，55.3,51.8，28.2.HR-ESI-MS，計算值C22H3oN207(M+H"),435.2053;實測值435.2050。7.5^河必合參丄5-7、ZJ畫2、丄5-3^合4丄5-7(YlR,^UW-3-芐真教廢l-4-炎7"真教麼差-:5-在差豕/fe'差-,舉凝f游，(3尺4尺5及」-附e^y/3-f&e^y/ojc_ycar6o"iy/am/"o>)-4-在氮氣氛下向雙烯1^4-1(292mg，0.673mmol)的二氯甲烷溶液(75mL)中加入Grubbs-II催化劑(115mg,0.135mmol),將反應體系在室溫下攪拌24小時。反應結束將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=1/1)，以77%的收率得到化合物L5-l(210mg)。&NMR(500MHz，DMSO)S7.36-7.33(m，5H)，6.98-6,96(m,1H),6.57(s,1H),6,45-6.43(m，1H),5.36-5.34(m，1H),5.03(br，2H),4.87(s，1H),4.61(br，1H)，3.91(br，1H),3,68(s，3H)，1.36(s,9H);13CNMR(125MHz,DMSO)S163.9，155.5,155.1,143.0,138.8,136.7,128.2,127.7,127.6,78.0，77.4，65.5,60.1，54.9,51,3,28.0.HR-ESI-MS，計算值C20H26N2O7(M+H"),407.1740;實測值407.1739。丄5-2(Y3凡^U》-3-芐真教麼差羊炎7"真教麼差-5-身差i^4'差小雄在氮氣氛下向雙烯L4-2(300mg，0.691mmol)的二氯曱烷溶液(75mL)中加入Grubbs-II催化劑(117mg，0.138n皿ol)，將反應體系在室溫下攪拌24小時。反應結束將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=/1)，以80°/。的收率得到化合物L5-2(224mg)。&NMR(500MHz,CDC13)S7.35-7.33(m,5H)，6.63(m，1H),5.51(br,1H)，5.45(br,1H)，5.16-5.09(m，2H)，4.82(br，1H),4.60(br，1H)，4.27(br，1H)，3.79(br，4H)，1.45(s，9H);13CNMR(125MHz,DMSO)S164.2，155.8，155.4，141.7，137.7,137.1,128.3,127.8，127.7,77.8,75.0,66.5，65.3，57.2，51.4，28.3.HR國ESI-MS，計算值C20H26N2O7(M+if),407.1740;實測值407.1738。/.5.3Z^5-3<^5^尺5^-3-，真瘋應差-^炎7"處瘋麼差-5-趁差尿4;差-/-雄在氮氣氛下向雙烯L4-3(262mg,0.604mmol)的二氯甲烷溶液(75mL)中加入Grubbs-II催化劑(103mg,0.121mmol)后，將反應體系在室溫下攪拌24小時。反應結束將溶液濃縮后，用色語柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=1/1),以68%的收率得到化合物L5-3(167mg)。^NMR(500MHz,DMSO)S7,36-7,31(m，5H),6.98-6.96(m，1H),6.57(s,1H)，6.45-6.43(m，1H)，5.36-5.35(m，1H),5.03(br,2H),4.87(s,1H),4.61(br，1H)，3.91(br，1H)，3.68(s，3H),1.36(s,9H);13CNMR(125畫z,函SO)S163.9,155.5,155.1,143.0，138.9,136.7,128.2,127.7,127.6,78.0,77.4,65.5，60,1,54.9,51.3,28.0.HR-ESI-MS,計算值C20H26N2O7(ML+H")，407.1740;實測值407.1739。丄5-4(Y35^尺5》-3-，真應麼差-4-^7"真瘋^^差-5-秀差i5Qt'l-J-謬凝嚴凝，(3S伐鄧-附e鄉(xiāng)/3-(Z)e"^y/o;9^"r》o"^/"w/"o」-4-在氮氣氛下向雙烯L4-4(284mg，0.654mmol)的二氯甲烷溶液(75mL)中加入Grubbs-II催化劑(111mg，0.131mmol)后，將反應體系在室溫下攪拌24小時。反應結束將溶液濃縮后，用色譜柱層析法進行純化(正己烷/乙酸乙酯=1/1)，以71%的收率得到化合物L5-4(188mg)。&NMR(500MHz，CDC13)S7.35-7.33(m，5H),6.62(m，1H)，5.76(br,1H)，5.54(br,1H),5.14-5.07(m，2H)，4.80(br,1H)，4.59(br，1H)，4.33(br,1H),3.76(s,3H),1.43(s,9H);13CNMR(125MHz,DMSO)S164.1,155.8,155.4，141.7,137.7，137.1，128.3，127.8,127.7,77.8，75.0,66,5，65.3，57.2,51.4,28.3.HR-ESI-MS，計算值C20H26N2O7(M+tf),407.1740;實測值407.1733。^/《必合參丄6-7、￡6-4^合4'丄6JL6扁J(Y3尺^Ui^-4-乙凝應差畫3-，裒教麼差-5-身差豕A'差小雄磁f在室溫時，將酯L5-l(130mg，0.32mmol)用氯化氫氣體的甲醇飽和溶液處理(10mL),反應體系繼續(xù)在室溫攪1小時后，將氯化氫曱醇移除。然后將剩余物溶于曱醇(10mL)中，在0。C時向反應體系中加入飽和碳酸鈉水溶液(10mL),在劇烈攪拌條件下向反應體系中逐滴加入乙酰氯(lmL)，將該反應混合物在室溫攪拌30分鐘。反應結束將甲醇移除后，將剩余物溶于乙酸乙酯(30mL)，用飽和氯化鈉溶液(10mL)清洗后，用無7JC硫酸鈉千燥。將反應液濃縮，用色鐠柱層析法純化(乙酸乙酯)，以70%的收率得到化合物L6-l(78mg)。^NMR22(500MHz，CDC13)S7.39-7.35(m，5H),6.74(s,1H),6.60(s，1H)，5.50-5.49(m,1H),5.17-5.06(m,2H)，4.85-4.82(m，2H)，4.65-4.62(m,1H),3.94-3.89(br,1H),3.80(s,3H),2.05(s，3H);13CNMR(75畫z，CDC13)S172.7，164.1,156.8,139,5,138.2,135.8,128.6,128.4，128,1,77.9，67.4，61.1，57.9，52.1，23.0.HR-EI-MS，計算值forCnH2oN206(]VO,348.1321;實測值348.1322。丄6-2(Y3尺狄,5》-4-乙瘋麼U-f處凝廢i-5-身差^4'差-7腸雄邀^以同制備化合物L6-l相同的程序，由西旨L5-2(167mg，0.41mmol)以780/。的收率得到化合物L6-2(112mg)。'HNMR(500MHz,CDC13)S7.38-7.35(m，5H)，6.70(s，1H)，6.25-6.24(m,1H)，5.28-5.26(m，1H),5.13-5.05(m,3H)，4.83(br，1H)，4.20(br，1H)，3.79(s，3H),1.87(s,3H);13CNMR(125MHz，CDC13)S171.8，164.4，156.6,140.8,139.0,136.1，128.6,128.4,128.2,78.7,67.2，60.3，55.8，52.0，22.9.HR-EI-MS，計算值CnH2。N206(]Vr)，348.1321;實測值348.1324。L6-3(Y35WiUi^畫4-乙應麼崖-3-f真魔賡差-5-,Jt豕/iJ^-雄磁^以同制備化合物L6-l相同的程序，由酯L5-3(145mg，0.36mmol)以75%收率得到化合物L6-2(94mg)。NMR(500MHz，CDC13)S7.38-7.35(m，5H)，6.70(m，1H),6.16(br，1H)，5.14-5.06(m，4H)，4.83(m，1H),4.19-4.18(m，1H)，3.86(br,1H),3.80(s，3H)，1.87(s,3H);13CNMR(125MHz,CDC13)3171.8,164.3，156.6，140.6，139.1，136.1,128.6,128.4，128.2,78.7，67.2，60.4,55.8,52.0，22,9.HR-EI-MS，計算值CnH2。N206(M^，348.1321;實測值348.1331。丄64(Y35^尺5》羊乙瘋^^if處瘋應差-5-,^以同制備化合物L6-1相同的程序，由酯L5-4(65mg，0.16mmol)以70%收率得到化合物L6-4(39mg)。&NMR(500MHz，CDC13)57.36-7.33(m，5H)，6.96(m,IH),6.61(s,IH),5,97-5,95(m,IH),5,14-5.04(m,3H),4.82-4.79(m,IH),4.63-4.60(m,IH)，3.94-3.93(m,IH),3,76(s，3H)，2.01(s，3H);13CNMR(125MHz,CDC13)3171,4，164.2,156.8,140.2，137.8,136.0,128.6,128.5,128.0，78.6,68.4，67,3,58.1,51.9,22.9.HR-EI-MS，計算值forC17H20N2O6(M")，348.1321;實測值348.1322。/7必#參//-/、//-2、/7-3、//4^f^S^/.7.7("(3尺"，M,-^乙應應,-^^-5-^^^Qt'差-7-^"凝嚴在氮氣氛下，在室溫時向化合物L6-l(90mg，0.259mmol)的乙腈溶液(8mL)中滴加三甲基碘硅烷(73.70.518mmol),反應體系繼續(xù)在室溫攪拌1小時。^JS結束后加入曱醇(0.1mL)淬滅，將反應液濃縮后，用色譜柱層析法(三氯曱烷/曱醇=8/1)以88%的收率得到化合物Il畫l(49mg)。^NMR(500MHz,MeOD)S6.73-6.72(m,1H),5.05-5.04(br，1.55H)，4.60-4.58(m,1.39H),4.33-4.31(m，1.55H),3.82(s，3H)，2.06(br，4H);13CNMR(125MHz,MeOD)S175.1,164.8，144.8，138.0，77.9，62.3，56.3,52.6，22.6,HR-ESI誦MS，計算值C9H14N204(M+rf")，215.0954;實測值215.0954。厶7.2/A合參/7-2(Y3尺4尺5》-^乙凝應J^-我差-5-,差豕A'差小雄凝嚴在氮氣氛下，在室溫時向化合物L6-2(90mg，0.259mmol)的乙腈溶液(8mL)中滴加三曱基碘硅烷(73.7jiL，0.518mmol)，反應體系繼續(xù)在室溫攪拌1小時。反應結束后加入曱醇(O.lmL)淬滅，將反應液濃縮后，用色鐠柱層析法(三氯甲烷/曱醇=8/1)以76%的收率得到化合物11-2(42mg)。&NMR(500MHz,MeOD)S6.74(m，1H),5.08-5.07(m,1H)，4.60-4.59(m，1H)，4.35-4.32(m,1H)，3.82(s,3H),3.35(s，0.76H),2.07(s，3H);13CNMR(125MHz，MeOD)S175.1,164.8，144.8，137.9，77.9，60.3，56,2,52.6，22.7.HR-ESI國MS,計算值C9HmN204(M+KT),215.0954;實測值215.0958。247.7,3^+錄"-3(Y^W尺5i^4-乙凝應差-3-4差-5-,差豕4'差-/-#凝^在氮氣氛下，在室溫時向化合物L6-3(10mg,0.029mmol)的乙腈溶液(2mL)中滴加三曱基氯硅烷(8.3^L,0.058mmol)，反應體系繼續(xù)在室溫攪拌l小時。反應結束后加入曱醇(O,lmL)淬滅，將反應液移除后，用色譜柱層析法(三氯甲烷/甲醇=8/1)以81%的收率得到化合物11-3(5mg)。NMR(500MHz，MeOD)S6.70(br，1H)，5.03(br，1H),4.56-4.55(m，1H),4.30-4.29(m,1H)，3.78(s，3H)，3.27(s,2H),2.03(s，3H)，2.00(br，0.34H);13CNMR(125MHz，MeOD)5175.1,164.7,144.8,137.9,77.9,60.3,56.2,52.6,22.7.HR-ESI曙MS，計算值CVHwT^O^M+H^,215.0954;實測值215.0954。/.7.4必^參//4(Y化狄,5》羊乙應D-〖^^-5-^^豕4'《-7-謬凝嚴在氮氣氛下，在室溫時向化合物L6-4(10mg,0.029mmol)的乙腈溶液(2mL)中滴加三曱基碘硅烷(8.2nL,0.058mmol),反應體系繼續(xù)在室溫攪拌1小時。反應結束后加入甲醇(0.1mL)淬滅。將反應液濃縮后，用色譜柱層析法(三氯曱烷/曱醇=8/1)以81。/。的收率得到化合物Il-4(5mg)。^NMR(500MHz，MeOD)S6.63(m，1H)，4.97-4.96(m，1H)，4.20-4.19(m，1H),4.09-4.06(m，1H)，3.77(s，3H),3.27(s，1H),2.02(s，3H);13CNMR(125MHz,MeOD)S175.2，164.8，142.7，136.7,77.3,65.0，59.4，52.6,22.5.HR-ESI畫MS，計算值C9H14N204(M+H")，215.0954;實測值215.0953。2.化合物1-2的合成附圖4示出了本發(fā)明所提供的具體實施例中化合物1-2、1-3的合成路線圖。詐/《必合參丄SW合4Z/./必合務丄S"(Y36;^，5^^-ff25在氮氣氛保護下，在室溫時向化合物L6-3(30mg,0.086mmol)的DMF溶液(2mL)中加入氧化4艮(40mg,0.172mmol)，和溴化千(20.10.172mmol),反應體系在室溫攪拌過夜。反應結束后用少量硅藻土將固體過濾，濾液加水清洗。再將水相用乙酸乙酯(3x15mL)萃取，合并有機相，用飽和無水硫酸鈉干燥。然后將溶液濃縮，用色譜柱層析法(正己烷/乙酸乙酯=1/1)以79%的收率得到化合物L8a(30mg)。&NMR(500MHz,CDC13)S7.37-7.33(m,9H)，6,81(br,1H)，6.60(s，1H),5.68-5.66(m，1H)，5.16-5.08(m，3H),4.85-4.80(m,2H),4.64-4.61(m，1H)，3.93-3.90(m，1H)，3.79(s，3H),2.04(s，3H);13CNMR(125MHz，CDC13)S172.6，164.1,156.8,145.9,139.6，138.1,135,9，128.7，128.6,128.5,128.4，128.1,78.0,71.4，69.0，67.4，58.1，52.0，29.7,22.9。2丄2^6S、咖丄56(Y^，4^,5^1-4-f^^^-2//-論喊-2-真jJ豕A'差-J-雄^^游，(3&^Ui,-附^z;;//她j在氮氣氛下，在室溫時向化合物L6-3(100mg,0.287mmol)的二氯曱烷溶液(5mL)中加入對甲基苯石黃酸(5mg,0.0287mmol)，和3，4-二氬吡喃(52pL,0.575mmol)。將反應體系在室溫攪拌4小時后，加入飽和碳酸氬鈉水溶液(2mL)淬滅，水相用乙酸乙酯(3x15mL)萃取，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥。將溶液濃縮后，用色譜柱層析法(正己烷/乙酸乙酯=1/1)純化，以80%的收率得到化合物L8b(98mg)。&NMR(500MHz,CDC13)S7.71-7.66(m,1H),7.31(m，5H),7.09-7.07(m,1H),6.58(s，1H),6.07(br,1H),5.12-5.03(m,2H)，4.83(br,1H),4.61(br,1H),4.06(br,1H),3.72(s,3H)，3.63-3.57(m,2H)，2.05(s，3H),1.55(m,4H)，1.25-1.24(m，1H);13CNMR(75MHz，CDC13)S173.9，164.4，164.2，156.6，141.1，140.9，137.1,136.1，136.0，128.9，128.5，128.2,128.1,128.0，125.9，77.9,67.4，67.1，59.8,57.8，55.0,52.0，31.9,29.7,22.7,21.2。2丄5必合錄丄Sc(7^,^，5"羊乙魔凝差-3-，真瘋應差-5-"-乙差炎T歲差,尿4'差#^f游，(3S^,5/^-m"/4-ac"amVfo-3-3-戊基三氯乙酰亞胺酯的制備在氮氣氛保護下，向氫化鈉(0.4g,10mmol;60%在礦物油中，先用正己烷預處理)的乙醚懸浮液(IOmL)中滴加3-戊醇(8.815g，100mmol)溶于無水乙醚的溶液(14mL)。反應混合物在室溫攪拌10分鐘后，在20分鐘內在0。C時滴加三氯乙腈(15mL，150mmol)的乙醚溶液(20mL)。然后將反應體系升溫到室溫，繼續(xù)在室溫攪拌2小時。反應結束后將溶液濃縮，剩余物溶于甲醇/正己烷(l:19，10mL)中，強烈攪拌1分鐘后分層，將反應混合物過濾，并用冷的正己烷清洗濾渣。將濾液合并后濃縮，以70°/。收率得到3-戊基三氯乙酰亞胺酯(16g)。在氮氣氛保護下，將新制備的3-戊基三氯乙酰亞胺酯(117mg，0.474mmol)和三氟甲^黃酸(7nL,0.079mmol)力口入到L6-3(55mg,0.158mmol)的二氯曱烷溶液(5mL)中。將反應體系在室溫下攪拌24小時，反應結束后，用碳酸氬鈉水溶液(5%，2mL)淬滅。水相用乙酸乙酯(3x15mL)萃取，合并有機相，用飽和氯化鈉溶液清洗后將溶液濃縮，用色譜柱層析法(正己烷/乙酸乙酯=1/1)純化后以73°/。的收率得到化合物L8c(50mg)。&NMR(500MHz，CDC13)57.33(m,5H),7.05-7.02(m，1H)，6.61(s,1H)，6.05-6.03(m,1H)，5.13-5.05(m，3H),4.78-4.77(m,1H)，4.62-4.59(m，1H)，3.97(br，1H),3.74(s,3H)，2.37-2.23(m,1H)，2.00(s，3H),1.23-1.20(m，4H),1.02-0.81(m，6H);13CNMR(125MHz,CDC13)5172.8，164.3，156.8，146.0，140.6,137.4,136.0,128.6，128.5，128.3，128.0，128.0，77.9,71.3，68.1,67.3,60.3，58.0，52.0,31.9，29.7,29.6，22.9,22.6，21.0。2.2^合成22/(Y^S^尺5i^-4-乙瘋賡差-:5-瘋差-5-，真虞豕/^差-7-雄凝在0。C時，在氮氣氛保護下，向醋酸把(4mg,0.018mmol)的二氯甲烷(3mL)懸浮液中滴加三乙胺(8;wL，0.054mmol)和三乙基硅烷(22^L，0.137mmol)。反應體系在室溫攪拌15分鐘后，向其中滴加L8a(30mg，0.0685mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)。反應體系繼續(xù)在室溫攪拌2小時，結束后將溶液濃縮，用色譜柱層析法進行純化(乙酸乙酯)，以86%收率得到化合物I-2a(8mg)，回收原料16mg。！HNMR(500MHz，MeOD)S7.34-7.28(m,5H)，6.71(s,1H),5.10-5,03(m，3H),4.97-4.96(m，1H)，4.39-4.35(m，1H),4.19-4.15(m,1H),4,10-4.07(m,1H),3.76(s，3H),1.87(s,3H);13CNMR(125麗z,MeOD)S173.4,165.8,144.2，140.6,138.2，129.5，129.1,129.0,79.1,76.5，67.7,60.8,58.0，56.9，52.2，22.5。2Z)(Y35;^,5i」-4-乙瘋^^^-3-4差-5漏("四羞-2/-^喊-2-真差？豕/t'差-7-謬凝f，(OSW凡5i^畫me^y/^acetom/<io-3-awz>20-5-"欲<2/^￡^0-2//"/,朋-2-盧義力<^/0/^""-《"60^0^/她夕在0。C時，在氮氣保護下，向氯化鈀的二氯曱烷(3mL)懸浮液中滴加乙二胺(或丙胺、三丙胺、丁胺)和三乙基硅烷(92//L，0.578mmol)。將反應體系在室溫攪拌15分鐘后，向其中逐滴加入L8b(125mg，0.289mmol)的二氯曱烷溶液(4mL)。反應混合物繼續(xù)在室溫攪拌2小時。結束后將溶液濃縮，用色譜柱層析法進行純化(乙酸乙酯)，以880/。收率得到化合物I-2b(25mg)，回收原料84mg。&NMR(500MHz，MeOD)57.34(m，1H),6.73(s，0.5H)，6.66(s，0.5H)，5.00-4.96(m,2H)，4.17(m,1H),4.00(br，1H)，3.86-3.82(m，1H),3.79-3.78(m，3H),3.70-3.50(m，2H)，2.01(m，3H)，1.76-1.68(m，2H)，1.59-1.47(m，4H);13CNMR(125MHz，MeOD)S174.6,165.0，141.6,140.4，101.7，81.7,73.4，63.5,62.8,61.4,52.4，52.4,31,6，31.4,30.1，26.5，22.5，22.5，20.3，19.5。2.2.3必合參/-2c<Y35;^Ui>4-乙應^^J-3-減,-5-G-乙差炎T真差J環(huán)y^差-i-謬邀^游，(3iS,4i，5i)-附e//^/4一acefa附z'cfo-3-fl附z'"o層5一(2-ef/y;/6wfa)qv)在0。C時，在氮氣氛下，向醋酸釔(6mg，0.027mmol)的二氯曱烷(3mL)懸浮液中滴加三乙胺(11aL，0.08mmol)和叔丁基二曱基珪烷。將反產^系在室溫攪拌15分鐘后，向其中滴加L8c(30mg，0.069mmol)的二氯曱烷溶液(2mL)。反應混合物繼續(xù)在室溫攪拌2小時。結束后將溶液濃縮，用色譜柱層析法進行純化(乙酸乙酯)，以91%收率得到化合物I-2c(19mg)。&NMR(500MHz，MeOD)56.63(s，1H),4.98-4.89(m，2H)，4.39-4.29(m,1H),4.17(br,1H),3.87(s，3H),3.60-3.59(m,1H),2.04(s,3H),1.17-1.15(m,5H),0.87-0.83(m，6H);"CNMR(125MHz，MeOD)S173.0,164.7,142.7，136.6，77,1,72.3,65.0,61.5,59.4，52.6，40.1，23.6,22.9，22.5,20.9,14.4，14.4。3.化合物1-3的合成3.73"(Y35^尺5/」羊乙瘋麼差-3扁扇差-5-f真差豕4'差小謬邀，合4:在室溫向I-2a(9mg，0.03mmol)的甲醇溶液(3mL)中加入氫氧化鈉水溶液(lN,0,05mmol)，反應體系在室溫攪拌1小時后，用AmberliteIR-120酸化至pH5，用乙醇(95%)結晶，得到產物I-3a(6mg)。^NMR(500MHz,D20)S7.41-7.36(m,5H)，6.72(s,1H)，5.11-5.04(m，2H),4.87(br，1H)，4.35-4.31(m,1H)，4.13-4.12(br,1H)，3.92-3.89(m,1H),1.82(s,3H)，13CNMR(125MHz,D20)S175.9,159,1，144.2，141.2,138.1,130.4，130.0,129.3,79.1,76.0,68.6,60.5，57.5,55.9，23.3。3.2必么為U6,(3《^,5及>^乙應麼^-^^^-5-f四產-2iZ-必裙-2-處差,^"y^'差"J-雄凝，(3S,^R,5i)扁4-ace^ww攀cfo-3-。附i"o-5-(e化a/^c^o-2/f-pyn3"一2一Y/oxyj在室溫向I-2b(24.4mg,0.082mmol)的曱醇溶液(3mL)中加入氫氧化鈉水溶液(1N,0.05mmol)，反應體系在室溫攪拌1小時后，用AmberliteIR-120酸化至pH5，用乙醇(95%)結晶，得到產物I-3b(18mg)。&NMR(500MHz,D20)S7.48(br，0.5H)，6.91(s,0.5H),6.86(s，0.5H),5.12-5.03(m,1H),4.50-4.47(m,1H),4.29-4.27(m,1H),3.75-3.67(m，2H),2.04(m,3H)，1.76-1.68(m，2H),1,59-1.47(m,4H)。3.3(7^^尺5及」-4-乙瘋賡差-3-產差-5-(^-乙差T真差J豕A'差雄凝，(^S'^^J/^-^-acetow^do-i-am/wo-J-P-e^y/Z^toJ^^cyc/opewf-J-在室溫向I-2c(19mg，0.0625mmol)的甲醇溶液(3mL)中加入氫氧化鈉水29溶液(lN，0.05mmol)，反應體系在室溫攪拌1小時后，用AmberliteIR-120酸化至pH5，用乙醇(95%)結晶，得到產物I-3c(14mg)。^NMR(500MHz，D20)56.87(s，1H)，5.08-5.07(m，1H)，438-4.37(m，1H),4.34-4.32(m，1H),3.80-3.70(m，1H)，2.14(s，3H);13CNMR(75MHz,D20)S175.5,166.2,140.6,136.9，77.3，71.3,62.9,59.6，57.3,42.4,27.4，22.2，22.1，20.6,10.5。本發(fā)明所提供的通式I的化合物中的其它化合物(由D-絲氨酸為起始原料合成，即I-1、I-2a、I-2b、I-2c、I-3a、I-3b、I-3c所具有的不同手性中心的化合物)，本領域技術人員可以參照前述中間體(由L-絲氨酸為起始原料合成)制備例而予以制備，在此不——列舉。化合物性能測試1.對感病毒神經氨酸酶的抑制性測試U使用真核表達體系表達流感病毒神經氨酸酶使用果蠅卵巢細胞(Sf9)和構建有神經氨酸酶基因(A/Oklahoma/323/03Fujian/02strain)的桿狀病毒的蛋白質表達體系，在細胞膜上表達具有活性的流感神經氨酸酶。1.2純化流感病毒神經氨酸酶采用菠蘿蛋白酶(Bromelain)將神經氨酸酶的活性部分從細胞膜上切割下來，酶切條件為3mg/ml菠蘿蛋白酶，30mM二硫蘇糖醇(DTT)，5mMCaCl2，lOOmMKAcpH5.6，在室溫反應7-8小時；10000g離心IO分鐘，除去沉淀；上清進行陽離子交換純化，平衡緩沖溶液為100mMKAcpH5.6，3mM二硫蘇糖醇(DTT)，5mMCaCl2,洗脫緩沖溶液為lOOmMKAcpH5.6,3mM二疏蘇糖醇(DTT),5mMCaCl2，500mMKCl，線性洗脫收取有活性的組分進行凝膠遲滯層析進一步純化，凝膠遲滯層析緩沖溶液為100mMKAcpH5.6,3mM二硫蘇糖醇(DTT)，5mMCaCl2,200mMKCl。收集有活性的組分進行篩選實驗。1.3合成抑制劑的抑制性能測定使用純化后的流感病毒神經氨酸酶進行合成抑制劑的抑制性能測定。采用流感病毒神經氨酸酶5ug,反應體系為100mMKAcpH5.6,3mM二硫蘇糖醇30(DTT),5mMCaC12，IBX404150uM，不同濃度的合成抑制劑溶解于DMSO中。酶與合成抑制劑先在37度孵育30分鐘，然后加入IBX4041同樣在37度，反應45分鐘。加入反應終止液(42mMNa2C03,60mMNaCl,133mM甘氨酸，pH12)終止反應。在578nm檢測反應進行的程度。以比較不同合成抑制劑的抑制能力。將合成的化合物I-3a、I-3b、I-3c,分別測定其對流感病毒神經氨酸酶的抑制能力，測定的IC50值分別為化合物I-3a:1.7*10-4M，化合物I-3b:4.6*10-5M，化合物I-3c:1.8*10-5M,測定的抑制曲線圖見附圖5所示。2.急性毒性試-瞼為了測定試驗化合物的急性口服毒性，將含不同濃度待測化合物的溶液分別經口服以10mL/Kg的劑量施用給ICR雄性小鼠?？诜o藥后，7天內觀察致死率和癥狀，并按照Litchfield-Wilcoxon方法計算出LD50(mg/Kg)。其結果見下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。權利要求1.通式I的化合物其中，R1是氫或甲基；R2是氫、芐基、四氫吡喃或2-乙基丁基。2.根據權利要求1所述的通式化合物是4-乙酰胺基-3-氨基-5-羥基環(huán)戊基-l-烯酸，4-乙酰胺基-3-氨基-5-羥基環(huán)戊基-1-烯酸曱酯，4-乙酰胺基-3-氨基-5-卡氧基環(huán)戊基-1-烯酸，4-乙酰胺基-3-氨基-5-節(jié)氧基環(huán)戊基-1-烯酸曱酯，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(四氳-2H-吡喃-2-氧基)環(huán)戊基-l-烯酸，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(四氬-2H-吡喃-2-氧基)環(huán)戊基-l-烯酸曱酯，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(2-乙基丁氧基)環(huán)戊基-l-烯酸，或，4-乙酰胺基-3-氨基-5-(2-乙基丁氧基)環(huán)戊基-l-烯酸曱酯；3.根據權利要求1或2所述的通式化合物，其特征在于，所述化合物具有三個手性中心1R，^U^、3i^尺M、3及,必,5i,3尺必，5&、3S^S^S、M，4尺5S、4.制備權利要求1的通式I化合物的方法，包括以下步驟Sl、取原料化合物1:經PDC氧化反應生成醛，然后將生成的醛經Horner-Wadsworth-Emmons反應得到a、卩不飽和酯，再在還原劑的還原作用下將所述不飽和酯還原為具有烯丙醇結構的中間化合物2:、將化合物2經過熱的aza-Claisen重排得到鄰二氨基化合物的中間體，然后在強堿條件下脫掉新生成的酰胺的三氯乙酰基保護，再在弱堿條件下將該氨基用芐氧羰基保護，最后在對甲基苯磺酸的催化下脫掉羥基的四氫-2H-吡喃保護基團得到中間化合物3:、中間化合物3經由Dess-Martin氧化成為醛，再將醛經由Baylis-Hillman反應得到具有雙烯結構的中間化合物4:、以二氯曱烷作溶劑，在Grubbs二代催化劑催化下將中間化合物4經過關環(huán)的烯烴復分解反應構建出具有五元環(huán)骨架的中間化合物5:、用氯化氫氣體的甲醇飽和溶液處理中間化合物5,脫掉其中一個氨基的Boc基團保護，然后在飽和碳酸鈉作用下，用乙?；Ｗo新生成的氨基而得到化合物6:CbzHNNHAcS6、以乙腈作溶劑，在三曱基碘硅烷作用下將化合物6脫掉千氧羰基保護得到相應的氨基化合物1-1:人>。HNH2NHAc1-1,即曱基作為R!取代基、H作為R2取代基的通式I化合物；或S6'、保護化合物6中游離的羥基，導入節(jié)基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基，生成醚8:然后在有枳J威、氫化試劑和鈀催化劑的存在下將醚8脫掉節(jié)氧羰基保護得到相應的氨基化合物1-2:NH2NHAc12即曱基作為R!取代基，爺基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基的通式I化合物；隨后將化合物1-2水解即得到相應的酸1-3:CbzHNNHAc<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>即H作為RJ又代基，千基、四氫吡喃或2-乙基丁基作為R2取代基的通式I化合物。5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述的還原劑是DIBAL-H或四氫鋁鋰。6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟S6，中所述的有機堿是有機胺類，優(yōu)選乙二胺、三乙胺、丙胺、三丙胺、丁胺。7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟S6，中所述的氫化試劑是至少有一個氫作為取代基的硅烷，優(yōu)選三乙基硅烷或叔丁基二甲基硅烷。8.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟S6，中所述的鈀催化劑是醋酸鉈或氯化鈀。9.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，在步驟S6，中，導入芐基作為R2取代基的過程是，在化合物6的干燥的N,N-二甲基甲酰胺溶液中加入氧化銀和溴化爺進行反應而得。10.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，在步驟S6，中，導入四氫吡響作為R2取代基的過程是，在化合物6的二氯甲烷溶液中加入對曱基^酸和3，4-二氫吡喃進行反應而得。11.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，在步驟S6，中，導入2-乙基丁基作為R2取代基的過程是，將3-戊基三氯乙酰亞胺酯和三氟曱磺酸加入到化合物6的二氯曱烷溶液中進行反應而得。12.權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備治療流感的藥物中的應用。全文摘要本發(fā)明提供了具有通式I的用作流感病毒神經氨酸酶抑制劑的多取代五元環(huán)小分子化合物，其中，R₁是氫或甲基；R₂是氫、芐基、四氫吡喃或2-乙基丁基。本發(fā)明還提供了該化合物的合成路徑與制備方法，以及該化合物或其藥學上可接受的鹽在制備治療流感的藥物中的應用。文檔編號C07C233/06GK101486664SQ20081024178公開日2009年7月22日申請日期2008年12月31日優(yōu)先權日2008年12月31日發(fā)明者全軍民,毅崔,震楊,明羅申請人:北京大學深圳研究生院