專利名稱：尾葉香茶菜中萼西香茶菜甲素的制備新工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種以尾葉香茶菜ayc&e (Maxim.) Hara莖葉為原料 制備萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin)的新工藝，其純度達(dá)到98%以上。此種化合物為二話類物質(zhì)，結(jié)構(gòu) 類型屬于貝殼杉垸型，在其分子結(jié)構(gòu)內(nèi)存在環(huán)外亞甲基環(huán)戊酮的結(jié)構(gòu)，此類化合物可以作為抗腫瘤藥物的 前導(dǎo)化合物。
技術(shù)背景尾葉香茶菜Jsoob/ exci幼(Maxim.) Hara，又名龜葉草、狗日草、野蘇子，性涼味甘，為多年生 草本植物，分布于我國(guó)的吉林、山西、陜西、甘肅等省，在亞洲的朝鮮、蘇聯(lián)和日本也有一定的分布， 生長(zhǎng)海拔為550-1100m，大部分生長(zhǎng)于草叢、路邊、林中和林緣等陰生地帶，具有分布廣，產(chǎn)量大的特點(diǎn)。 作為香茶菜屬眾多植物中的一種，尾葉香茶菜同樣具有良好的生理活性，在我國(guó)民間很早就被用來(lái) 治療風(fēng)濕感冒、咽喉腫痛、胃炎、膀胱脹痛、關(guān)節(jié)疼痛、經(jīng)閉、乳腺炎、跌打損傷、蛇蟲(chóng)咬傷等，該 植物還具有明顯的抗癌生理作用，主要取決于其主要成分——二萜類化合物。此類二萜類化合物最大的一 個(gè)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)就是具有一個(gè)環(huán)外亞甲基環(huán)戊酮的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。已有大量的分子結(jié)構(gòu)與藥效關(guān)系研究實(shí)驗(yàn)證明， 大部分的香茶菜屬植物所具有的良好抗癌活性，其活性中心就是這個(gè)環(huán)外亞甲基環(huán)戊酮的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。對(duì)具有藥效的香茶菜屬植物的化學(xué)成分研究，始于日本學(xué)者八木等于1910年從延命草中分離得到結(jié) 晶苦味質(zhì)plectranthin。 1958年Takahashi等首次從延命草中(Zso必/ . j'a/ o/2/ca)中分離得到具有抗病 毒作用的的貝殼杉烯型二萜(e/ t-kaurene diterpene)類化合物延命素(enmein)，由于這些苦味二萜 化合物對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌呈現(xiàn)高度選擇的抗菌活性和抗腫瘤活性，因此，從二十世紀(jì)八十年代起唇形科香茶 菜植物化學(xué)成分的研究非?；钴S。到目前為止，人們從尾葉香茶菜中共分離鑒定了23個(gè)二砲類成分。目前獲得以上成分的手段均是應(yīng)用經(jīng)典的提取分離方法，即選擇不同極性的有機(jī)溶劑作為提取溶媒， 獲得不同極性的組分，不同組分再通過(guò)硅膠柱進(jìn)行單體化合物的分離。1、 二萜類化合物的提取甲醇或乙醇提取，醇提取液濃縮至一定體積，并調(diào)整適當(dāng)?shù)拇紳舛?，再用不同極性的親脂性有機(jī)溶劑 按極性由小到大的遞增順序依次萃取，得到不同脂溶性的萜類提取物。2、 二萜類化合物的分離(1) 柱色譜法分離常用的吸附劑為硅膠、中性氧化鋁，其中硅膠應(yīng)用最廣。常用的洗脫劑多以石油 醚、正己垸、環(huán)己烷等溶劑或用氯仿-乙醇洗脫。(2) 結(jié)晶法分離將其提取液濃縮，再用適當(dāng)溶劑或方法重結(jié)晶。采用上述提取方法獲得萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin)單體純品量較少，不能滿足生產(chǎn)和科研需要。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及一種以尾葉香茶菜/so6b/7 ezcke (Maxim.) Hara莖葉為原料制備萼西香茶菜甲素 (Kamebakaurin)的新工藝，其純度達(dá)到98%以上。此種化合物為二萜類物質(zhì)，結(jié)構(gòu)類型屬于貝殼杉烷型， 在其分子結(jié)構(gòu)內(nèi)存在環(huán)外亞甲基環(huán)戊酮的結(jié)構(gòu)，此類化合物可以作為抗腫瘤藥物的前導(dǎo)化合物。本發(fā)明的 目的是為滿足生產(chǎn)和科研上的需求量，提高收率，降低成本。(1) 本發(fā)明是將尾葉香茶菜莖葉中的雜物除去，然后烘干或曬干，粉碎成40目粉末，采取超聲波提 取法，提取頻率為100Hz，溫度為5(TC，提取時(shí)間為30min，提取3次，提取溶劑為70%的乙醇。(2) 將(1)中的70%的乙醇提取液合并，減壓濃縮至小體積，用石油醚脫脂后，加入2倍體積量的 水，放入冰箱內(nèi)12h后，離心，得上清液。(3) 將(2)中的上清液通過(guò)D血大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，先用水洗，去除部分色素和雜質(zhì)，然后再分 別用濃度為10%、 40%、 60%的乙醇溶液洗脫，分部收集乙醇洗脫液。(4) 將(3)中的60%乙醇洗脫液回收乙醇溶劑，獲得土黃色粉末。(5) 將(4)中的土黃色粉末拌入等量的反相樹(shù)脂，上JTY-1反相樹(shù)脂柱。用20%-30%乙醇溶液洗脫， 合并乙醇溶液，回收乙醇溶劑后，得白色粉末。(6) 將(5)中的白色粉末再進(jìn)行硅膠柱層析，用溶劑系統(tǒng)氯仿丙酮乙酸乙酯=3: 1: 1溶液洗脫，洗脫溶液放置，有結(jié)晶狀物質(zhì)析出。(7) 將(6)中的結(jié)晶狀物質(zhì)以95%乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin), 其純度達(dá)到98%以上。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中的"％"是重量百分比。
具體實(shí)施方式
下面的實(shí)施例可進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。 實(shí)施例l:(1) 取尾葉香茶菜莖葉2000g，除去其中的雜物，然后曬干，粉碎成40目粉末，采取超聲波提取 法，提取頻率為100Hz，溫度為5(TC，提取時(shí)間為30min，提取3次，提取溶劑為70%的乙醇。(2) 將(1)中的70%的乙醇提取液合并，減壓濃縮至小體積，用石油醚脫脂后，加入2倍體積量的 水，放入冰箱內(nèi)12h后，離心，得上清液。(3) 將(2)中的上清液通過(guò)D血大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，先用水洗，去除部分色素和雜質(zhì)，然后再分 別用濃度為10%、 40%、 60%的乙醇溶液洗脫，分部收集乙醇洗脫液。(4) 將(3)中的60%乙醇洗脫液回收乙醇溶劑，獲得土黃色粉末。(5) 將(4)中的土黃色粉末拌入等量的反相樹(shù)脂，上JTY-1反相樹(shù)脂柱。用20%-30%乙醇溶液洗脫， 合并乙醇溶液，回收乙醇溶劑后，得白色粉末。(6) 將(5)中的白色粉末再進(jìn)行硅膠柱層析，用溶劑系統(tǒng)氯仿丙酮乙酸乙酯=3: 1: 1溶液 洗脫,洗脫溶液放置，有結(jié)晶狀物質(zhì)析出。(7) 將(6)中的結(jié)晶狀物質(zhì)用95%的乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin) (61mg)，其純度達(dá)到98%以上。實(shí)施例2:(1) 取尾葉香茶菜莖葉2000g，除去其中的雜物，然后烘干，粉碎成40目粉末，采取超聲波提取法， 提取頻率為100Hz，溫度為50。C，提取時(shí)間為30min，提取3次，提取溶劑為70%的乙醇。(2) 將(1)中的70%的乙醇提取液合并，減壓濃縮至小體積，用石油醚脫脂后，加入2倍體積量的 水，放入冰箱內(nèi)12h后，離心，得上清液。(3) 將(2)中的上清液通過(guò)Dun大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，先用水洗，去除部分色素和雜質(zhì)，然后再分 別用濃度為10%、 40%、 60%的乙醇溶液洗脫，分部收集乙醇洗脫液。(4) 將(3)中的60%乙醇洗脫液回收乙醇溶劑，獲得土黃色粉末。(5) 將(4)中的土黃色粉末拌入等量的反相樹(shù)脂，上JTY-1反相樹(shù)脂柱。用20%-30%乙醇溶液洗脫. 合并乙醇溶液，回收乙醇溶劑后，得白色粉末。(6) 將(5)中的白色粉末再進(jìn)行硅膠柱層析，用溶劑系統(tǒng)氯仿丙酮乙酸乙酯=3: 1: 1溶液 洗脫,洗脫溶液放置，有結(jié)晶狀物質(zhì)析出。(7) 將(6)中的結(jié)晶狀物質(zhì)用95%的乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin) (59 mg),其純度達(dá)到98%以上。
權(quán)利要求
1. 一種以尾葉香茶菜莖葉為原料制備萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin)的新工藝，其純度達(dá)到98％以上。
2、 一種制備萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin)的新工藝，其特征在于該工 藝包括以下過(guò)程(1) 除去尾葉香茶菜莖葉中的雜物，然后烘干或曬干，粉碎成40目粉末， 采取超聲波提取法，提取頻率為100Hz,溫度為5(TC，提取時(shí)間為30min，提取 3次，提取溶劑為70%的乙醇。(2) 將(1)中的70%的乙醇提取液合并，減壓濃縮至小體積，用石油醚 脫脂后，加入2倍體積量的水，放入冰箱內(nèi)12h后，離心，得上清液。(3) 將(2)中的上清液通過(guò)D,。,大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，先用水洗，去除 部分色素和雜質(zhì)，然后再分別用濃度為10%、 40%、 60%的乙醇溶液洗脫，分部 收集乙醇洗脫液。(4) 將(3)中的60%乙醇洗脫液回收乙醇溶劑，獲得土黃色粉末。(5) 將(4)中的土黃色粉末拌入等量的反相樹(shù)脂，上JTY-1反相樹(shù)脂柱。 用20%-30%乙醇溶液洗脫，合并乙醇溶液，回收乙醇溶劑后，得白色粉末。(6) 將(5)中的白色粉末再進(jìn)行硅膠柱層析，用溶劑系統(tǒng)氯仿丙酮乙酸乙酯=3: 1: l溶液洗脫,洗脫溶液放置，有結(jié)晶狀物質(zhì)析出。(7) 將(6)中的結(jié)晶狀物質(zhì)進(jìn)行重結(jié)晶，得到化合物萼西香茶菜甲素 (Kamebakaurin),其純度均達(dá)到98%以上。
3、權(quán)利要求l-2所述的制備萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin)的原料為尾 葉香茶菜/sWo/ excisa ( Max in. ) Hara的莖葉。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域。本發(fā)明涉及以尾葉香茶菜Isodon excisa(Maxin.)Hara莖葉為原料制備萼西香茶菜甲素(Kamebakaurin)的新工藝。提取方法為超聲波提取法，提取頻率為100Hz，溫度為50℃，提取時(shí)間為30min，提取3次，提取溶劑為70％的乙醇；分離方法用D101型大孔吸附樹(shù)脂和JTY-1反相樹(shù)脂柱，再進(jìn)行硅膠柱層析，并結(jié)合重結(jié)晶得到化合物，其純度達(dá)到98％以上。此化合物為二萜類物質(zhì)，結(jié)構(gòu)類型屬于貝殼杉烷型，在其分子結(jié)構(gòu)內(nèi)存在環(huán)外亞甲基環(huán)戊酮的結(jié)構(gòu)，此類化合物可以作為抗腫瘤藥物的前導(dǎo)化合物。本發(fā)明的目的是為滿足生產(chǎn)和科研上的需求量，提高收率，降低成本。
文檔編號(hào)C07C45/78GK101274883SQ20081010025
公開(kāi)日2008年10月1日 申請(qǐng)日期2008年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月15日
發(fā)明者張崇禧 申請(qǐng)人:山東大學(xué)威海分校