專利名稱：卵泡刺激素受體b細(xì)胞表位及包含此表位的抗原肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位及包含此 表位的抗原肽。
背景技術(shù)：
人口爆炸和非計(jì)劃妊娠一直是世界范圍的公共衛(wèi)生問題。盡管現(xiàn)行有多種 避孕方法，但都有其局限性，如男性避孕只能使用避孕套或進(jìn)行輸精管結(jié)扎手 術(shù)，前者失敗率4交高，后者具有不可逆性，且可能產(chǎn)生意料不到的嚴(yán)重免疫學(xué) 后果。因此，開發(fā)一種高效、安全、作用持久、可逆、價(jià)廉的避孕方法成為迫 切需要。
卵泡刺激素(FSH)是人體內(nèi)最重要的生殖激素之一，其對(duì)男性生殖功能的 調(diào)節(jié)作用通過僅表達(dá)于睪丸支持細(xì)胞(Sertoli cell)膜表面的特異性受體即 卵泡刺激素受體(follicle-stimulating hormone receptor, FSHR )介導(dǎo)?？?FSHR抗體與FSHR結(jié)合后，可抑制或阻斷FSHR與FSH的特異性結(jié)合，從而使FSH的 生物學(xué)作用下降或消失，造成免疫性不育。1997年，Moudgal等用綿羊FSHR免疫 雄猴成功導(dǎo)致不育，表明FSHR可作為潛在的有效的男性避孕疫苗。但以天然蛋 白為抗原的避孕效果不理想，避孕率僅為70%左右，無法滿足臨床的避孕標(biāo)準(zhǔn)， 且未能克服采用天然蛋白抗原所帶來的共同問題，如免疫耐受等。
蛋白質(zhì)抗原通過表位體現(xiàn)其免疫特異性。就某一蛋白質(zhì)抗原而言，它不僅 含有B細(xì)胞表位、T輔助細(xì)胞(Th )表位、細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL )表位、自然 殺傷細(xì)胞(NK)表位、主要組織相容性復(fù)合物(MHC)限制位等與免疫識(shí)別密切 相關(guān)的結(jié)構(gòu)，同時(shí)還含有毒性表位、抑制性表位、交叉反應(yīng)性表位等不良表位， 這些不良表位可51起免疫偏移、免疫顛覆等不利的免疫反應(yīng)而導(dǎo)致免疫耐受。因此，為了提高蛋白質(zhì)抗原的保護(hù)性，須在表位水平上做出選擇，摒除后者， 保留或改善前者以得到更理想的疫苗分子。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供FSHR的B細(xì)胞表位，具有SEQ ID No. 1 所示氨基酸序列。
本發(fā)明的目的之二在于提供包含所述FSHR的B細(xì)胞表位的抗原肽，由T輔 助細(xì)胞表位與FSHR的B細(xì)胞表位串聯(lián)而成；所述T細(xì)胞表位具有SEQ ID No. 2 所示氨基酸序列。
進(jìn)一步，T輔助細(xì)胞表位通過柔性接頭與FSHR的B細(xì)胞表位串聯(lián)；
進(jìn)一步，所述柔性接頭選自由GGG、 GGS或KK組成的短肽。
本發(fā)明的目的之三在于提供包含免疫學(xué)有效量的所述包含F(xiàn)SHR的B細(xì)胞表 位的抗原肽的組合物。
進(jìn)一步，還包含藥學(xué)上可接受的載體；
進(jìn)一步，所述免疫學(xué)有效量為每劑每千克體重2-5毫克。
本發(fā)明的目的之四在于提供能夠與所述FSHR的B細(xì)胞表位特異性結(jié)合的抗
體
本發(fā)明的目的之五在于提供能夠與所述包含F(xiàn)SHR的B細(xì)胞表位的抗原肽特 異性結(jié)合的抗體。
本發(fā)明的目的之六在于提供所述包含F(xiàn)SHR的B細(xì)胞表位的抗原肽在制備男 性避孕疫苗中的應(yīng)用。
本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明公開了FSHR的優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位，具有SEQ ID No. l所示氨基酸序列，其成分單一、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、擺脫了天然蛋白抗原中不良表 位的影響，引發(fā)的免疫反應(yīng)針對(duì)性強(qiáng)；本發(fā)明還公開了包含此優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位的 抗原肽，由麻滲病毒融合蛋白的T輔助細(xì)胞表位與此優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位串聯(lián)而成； 此抗原肽中的T輔助細(xì)胞表位能刺激機(jī)體產(chǎn)生CD4十T細(xì)胞，從而輔助B細(xì)胞活化， 使其分泌高滴度的特異地靶向所述優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位的抗體，誘導(dǎo)高效、安全、可逆的抗生育作用，可用于制備男性避孕疫苗，為男性避孕的臨床主動(dòng)免疫治療 提供新的手段，具有重要的理論價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景，能夠產(chǎn)生重大的社會(huì) 效益和經(jīng)濟(jì)效益。


為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)
明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，其中
圖1為本發(fā)明抗原肽的HPLC鑒定圖； 圖2為本發(fā)明抗原肽的MS鑒定圖3為本發(fā)明抗原肽免疫雄鼠血清中特異性抗體生成曲線； 圖4為本發(fā)明抗原肽免疫雄鼠血清與人睪丸組織總蛋白提取液的ELISA反 應(yīng)結(jié)果；
圖5為本發(fā)明抗原肽首次免疫雄鼠后第7周雌雄小鼠合籠實(shí)驗(yàn)中雌鼠的產(chǎn) 仔情況；
圖6為本發(fā)明抗原肽首次免疫雄鼠后第26周雌雄小鼠合籠實(shí)驗(yàn)中雌鼠的產(chǎn) 仔情況。
具體實(shí)施例方式
配體FSH與受體FSHR的特異結(jié)合，要求兩個(gè)分子要充分接近并采取合適的取 向以使二者在必要的部位相互契合，發(fā)生相互作用，繼而通過適當(dāng)?shù)臉?gòu)象調(diào)整， 得到一個(gè)穩(wěn)定的復(fù)合物構(gòu)象。發(fā)明人采用分子對(duì)接(molecular docking)方法， 按照幾何互補(bǔ)、能量互補(bǔ)以及化學(xué)環(huán)境互補(bǔ)的原則，對(duì)FSH和FSHR的相互作用進(jìn) 行了研究，確定復(fù)合物中兩個(gè)分子正確的相對(duì)位置和取向，找出兩個(gè)分子的最 佳結(jié)合模式，從而從300多個(gè)候選表位中篩選出多個(gè)FSHR的優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位，并 以其中一個(gè)優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位(SEQ ID No. 1)為基礎(chǔ)，引入一個(gè)T輔助細(xì)胞表位， 構(gòu)建了抗原肽。B細(xì)胞表位成份單一，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，擺脫了抗原蛋白中不良表位的影響，引發(fā) 的免疫反應(yīng)針對(duì)性強(qiáng)，但當(dāng)B細(xì)胞表位是自身抗原時(shí)，其存在免疫原性低的缺陷。 以往多是用B細(xì)胞表位交聯(lián)外來載體蛋白(以提供和B細(xì)胞表位連接的新T輔助細(xì) 胞表位)的方法來刺激T輔助細(xì)胞，以提高其免疫原性。但是， 一些問題伴隨著 載體蛋白的使用而產(chǎn)生，即(1) B細(xì)胞表位與載體蛋白的化學(xué)偶聯(lián)可能會(huì)造 成目的決定簇的改變并且隨^L的反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致制品在大小和組成方面不均一；(2 ) 載體蛋白也許會(huì)導(dǎo)致不想要的免疫反應(yīng)；(3 ) B細(xì)胞表位-載體蛋白綴合物可能 會(huì)激發(fā)不相關(guān)的免疫反應(yīng)，錯(cuò)誤地針對(duì)載體蛋白而非B細(xì)胞表位。為了避免這些 問題，T輔助細(xì)胞表位被用于替換載體蛋白來引發(fā)T輔助細(xì)胞反應(yīng)。T輔助細(xì)胞表 位可以與B細(xì)胞表位串聯(lián)形成抗原肽。在本發(fā)明中，T輔助細(xì)胞表位選擇麻滲病 毒融合蛋白第288-302位氨基酸序列(SEQ ID No. 2 ),此T輔助細(xì)胞表位能刺激 機(jī)體產(chǎn)生CD4 + T細(xì)胞，從而輔助B細(xì)胞活化，使其分泌特異于FSHR的B細(xì)胞表位 的抗體。
在本發(fā)明中，T輔助細(xì)胞表位與B細(xì)胞表位串聯(lián)形成抗原肽，可以是T輔助 細(xì)胞表位的羧基(C-)端與B細(xì)胞表位的氨基(N-)端連接；也可以是T輔助 細(xì)胞表位的N-端與B細(xì)胞表位的C-端連接。本領(lǐng)域:技術(shù)人員應(yīng)該理解，連接順 序通常不會(huì)改變?cè)摪被嵝蛄械目乖禺愋浴輔助細(xì)胞表位與B細(xì)胞表位通過 柔性接頭連接，柔性接頭通常選自由GGG、 GGS或KK組成的短肽。柔性接頭在 物理上將T輔助細(xì)胞表位與B細(xì)胞表位分隔開來，使得B細(xì)胞表位與B細(xì)胞受 體、T輔助細(xì)胞表位與T細(xì)胞受體可以更好地實(shí)現(xiàn)結(jié)合，不受空間位阻的影響； 柔性接頭還可以打斷由T輔助細(xì)胞表位和B細(xì)胞表位串聯(lián)形成的人為二級(jí)結(jié)構(gòu)， 并由此消除對(duì)T輔助細(xì)胞或B細(xì)胞反應(yīng)可能照成的干擾；此外，柔性接頭還利 于使抗原肽經(jīng)蛋白酶降解后形成兩個(gè)完整表位，即T輔助細(xì)胞表位和B細(xì)胞表 位。
本發(fā)明還涉及包含免疫學(xué)有效量的所述抗原肽的組合物。本發(fā)明抗原肽的 免疫學(xué)有效量通常為每劑每千克體重2-5毫克，這一劑量可以分成多次施用；但_正如免疫和治療領(lǐng)域所熟知的，給藥劑量可以根據(jù)患者的年齡、健康狀況和個(gè)
體反應(yīng)等進(jìn)一步調(diào)整；安全有效量的抗原肽可以和藥學(xué)上可^"受的載體如弗氏 完全佐劑、弗氏不完全佐劑等制成疫苗等藥物形式；本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以 很容易地確定藥物劑型，包括速釋或/和緩釋制劑；所得藥物制劑可以通過任何 一種便利的途徑施用，包括皮下的、口服的、肌內(nèi)的、腹膜內(nèi)的，或其他腸胃 外的或腸道的途徑。
以下將參照附圖，對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。
實(shí)施例一
本實(shí)施例抗原肽由T輔助細(xì)胞表位的C-端與FS肌的B細(xì)胞表位的N-端通 過柔性接頭-GGG-連接而成，其^J^酸序列為L(zhǎng)SEIKGVIVHRLEGVGGGIELRFVLTKLRV I。
本實(shí)施例抗原肽的合成在固相多肽合成儀(ABI 431A型)上完成。采用標(biāo) 準(zhǔn)芴曱氧羰基(Fmoc)方案，起始選用0. 0125mmo1的聚苯乙稀(polystyrene, PS)樹脂(美國(guó)ABI公司)，按照設(shè)計(jì)的氨基*列使肽鏈從C-端逐個(gè)向N-端 延伸；各種Fmoc氨基酸用量為0. lmmol;每步縮合前用1-羥基苯并三唑(H0Bt) /N，N'-二環(huán)己基石友二亞胺(Dec)活化Fmoc氨基酸的羧基，縮合后用含有體積 百分濃度為20%的六氫吡啶的N-曱基吡咯烷酮(NMP)溶液去除Fmoc保護(hù)基； 肽鏈合成后，將含樹脂的肽鏈力口至處于冰浴條件下的裂解液[由結(jié)晶苯酚0. 75g、 酒石酸乙二胺(EDT)O. 25mL、苯硫基曱烷(Thionaisole)0. 5mL、去離子水0. 5mL、 三氟乙酸10mL組成]中，于室溫、攪拌條件下反應(yīng)4. 5小時(shí)，將肽鏈從樹脂上 裂解下來，同時(shí)去除多種保護(hù)基團(tuán)；將反應(yīng)后的混合液經(jīng)玻璃濾器過濾以濾掉 樹脂及保護(hù)基團(tuán)，并用三氟乙酸洗滌濾渣、反應(yīng)瓶和濾器，濾液于常溫下低壓 蒸發(fā)至l-2mL,加乙醚50mL使多肽沉淀后，再經(jīng)玻璃濾器過濾，收集沉淀，冷 凍干燥，即得抗原肽。所得抗原肽通過高效液相色譜(HPLC)法和質(zhì)鐠(MS) 法進(jìn)行鑒定，HPLC鑒定圖如圖1所示，所得抗原肽的純度為85%; MS鑒定圖如 圖2所示，證實(shí)所得抗原肽為目標(biāo)多肽。實(shí)施例二
本實(shí)施例抗原肽由FSHR的B細(xì)胞表位的C-端與T輔助細(xì)胞表位的N-端通 過柔性接頭-GGS-連接而成，其氨基酸序列為IELRFVLTKLRVIGGSLSEIKGVIVHRLEG V。
本實(shí)施例抗原肽的合成在固相多肽合成儀(ABI 431A型)上完成。采用標(biāo) 準(zhǔn)Fmoc方案，合成方法與實(shí)施例一所述方法相同。 實(shí)施例三
本實(shí)施例抗原肽由T輔助細(xì)胞表位的C-端與FSHR的B細(xì)胞表位的N-端通 過柔性接頭-KK-連接而成，其氨基酸序列為L(zhǎng)SEIKGVIVHRLEGVKKIELRFVLTKLRVI。
本實(shí)施例抗原肽的合成在固相多肽合成儀(ABI 431A型)上完成。采用標(biāo) 準(zhǔn)Fmoc方案，合成方法與實(shí)施例一所述方法相同。
本發(fā)明抗原肽的鑒定
方法(1 )實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組將80只體重為10-16 g的清潔級(jí)6-8周齡雄性Balb/c 小鼠(北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)隨機(jī)分成4組實(shí)驗(yàn)組(本發(fā)明 抗原肽)、PBS對(duì)照組(以磷酸鹽緩沖液PBS替代抗原肽)、無關(guān)肽對(duì)照組(以 氨基酸序列為L(zhǎng)SEIKGVIVHRLEGVGGG的多肽替代抗原肽)和空白對(duì)照組(以超純 水替代抗原肽)，每組20只；
(2 )免疫方案首次免疫，將純化的原核表達(dá)的重組FSHR截?cái)嗥蔚鞍?第 1位至第140位氨基酸)與弗氏完全佐劑等體積混合，充分乳化，制得免疫原， 于小鼠腹股溝皮下組織部位注射，每只50-80嗎；間隔1周，加強(qiáng)免疫，將抗原 肽與弗氏不完全佐劑等體積混合，充分乳化，制得免疫原，于小鼠腹股溝皮下 組織部位注射，每只50 再間隔2周，以同樣方法重復(fù)加強(qiáng)免疫l次；
(3 )免疫原性檢測(cè)一首次免疫前后，每間隔一定時(shí)間，小鼠尾靜脈采血， 分離血清，置溫度-2(TC保存，待測(cè)；釆用間接酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定 免疫后雄鼠血清中特異性抗體的滴度將抗原肽用包被稀釋液(即濃度為O. 05mol/L、 pH值為9. 6的碳酸鈉-碳酸氬鈉緩沖液)稀釋，制成濃度為IO ing/mL的包 被液；將包被液加至96孔反應(yīng)板中，每孔IOO iliL，置溫度37。C包被4小時(shí)，棄去 包被液，以洗滌液(在IOOO mL PBS中力口入O. 5 mL Tween-20和0. 1 g硫柳汞， 調(diào)節(jié)pH值至7. 4，即得)洗滌3次，再加入用PBS溶液稀釋至體積百分濃度為5。/。的 小牛血清(Hyclone公司)封閉液，每孔IOO pL，置溫度37。C封閉40分鐘，棄去 封閉液，以洗滌液洗滌3次，再加入按10倍連續(xù)稀釋的免疫后小鼠血清，每孔IOO iaL，置溫度37。C孵育1小時(shí)，以洗滌液洗滌3次，再加入辣根過氧化物酶(HRP) 標(biāo)記的羊抗小鼠IgG (稀釋度為l : 5000, Nordic公司)，每孔IOO 置溫度 37。C孵育40分鐘，以洗滌液洗滌3次，加入鄰苯二胺-過氧化氬(0PD-H202 )底物 液，每孔IOO (iL，置溫度37。C避光顯色40分鐘，終止反應(yīng)，測(cè)量492 nm波長(zhǎng)處 的光密度(OD)，以正常小鼠血清作陰性對(duì)照，結(jié)果以雙復(fù)孔OD值均值表示， 待測(cè)孔0D值大于或等于陰性對(duì)照2. l倍者判為陽(yáng)性，以判為陽(yáng)性的最高稀釋倍數(shù) 為抗體滴度。
(4)免疫原性檢測(cè)二首次免疫后第7周，小鼠尾靜脈采血，分離血清， 置溫度-2(TC保存，待測(cè)；取健康男性新鮮睪丸組織，于冰上剪碎，加入新制蛋 白提取液(取脲0. 3g，十二烷基硫酸鈉即SDS 0. 05 g, 二硫蘇糖醇即DTT 0. 125 g,加水5ml使溶解，即得)，振蕩10分鐘，再加入NP-40(Tergito1-typeNP-40, nonylphenoxylpolyethoxylethanol )至最終質(zhì)量百分濃度為10%,繼續(xù)振蕩IO 分鐘，于溫度4。C、 15000 r/min離心20分鐘，取上清，即得人睪丸組織總蛋白 提取液，待用；采用間接ELISA法檢測(cè)免疫后雄鼠血清與人睪丸組織總蛋白提取 液的反應(yīng)情況，具體步驟參照"(3)免疫原性;險(xiǎn)測(cè)一"所述方法以睪丸組織 總蛋白提取液為包被抗原，以免疫后雄鼠血清為一抗，以HRP標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 為二抗；同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組I [以抗FSHR多克隆抗體(Santa Cruz公司)為一 抗]、陽(yáng)性對(duì)照組II (以純化的重組FSHR截?cái)嗥蔚鞍酌庖咝凼笱鍨橐豢? 和陰性對(duì)照組(以PBS為一抗)；測(cè)量492 nm波長(zhǎng)處的OD值，結(jié)果以雙復(fù)孔OD值 均值表示，待測(cè)孔OD值大于或等于陰性對(duì)照2. l倍者判為陽(yáng)性。(5)抗生育能力檢測(cè)首次免疫后第7周，按雌雄比例l : 2行雌雄小鼠合 籠實(shí)驗(yàn)，記錄雌鼠產(chǎn)仔情況；首次免疫后第26周，再次按雌雄比例l : 2行雌雄 小鼠合籠實(shí)驗(yàn)，記錄雌鼠產(chǎn)仔情況。
結(jié)果(1)免疫雄鼠血清中特異性抗體生成曲線如圖3所示，首次免疫后 第2周，實(shí)驗(yàn)組雄鼠血清中即有特異性抗體產(chǎn)生，之后抗體滴度逐漸升高，于首 次免疫后第7周達(dá)到最高值，抗體滴度可一直維持在此水平至首次免疫后第15 周，之后抗體滴度逐漸下降，于首次免疫后第26周降至5000以下；PBS對(duì)照組、 無關(guān)肽對(duì)照組和空白對(duì)照組小鼠血清中無特異性抗體產(chǎn)生。
(2 )免疫雄鼠血清與人睪丸組織總蛋白提取液的ELISA反應(yīng)結(jié)果如圖4所 示，實(shí)驗(yàn)組反應(yīng)結(jié)果呈陽(yáng)性，顯示采用本發(fā)明抗原肽免疫的雄性小鼠血清中含 有特異性抗體，可以與人睪丸組織總蛋白提取液中的抗原蛋白FSHR結(jié)合。
(3)在首次免疫后第7周進(jìn)行的雌雄小鼠合籠實(shí)驗(yàn)中，雌鼠產(chǎn)仔情況如圖5 所示，實(shí)驗(yàn)組免疫雄鼠的生殖力受到抑制，雌鼠產(chǎn)仔率與PBS對(duì)照組、無關(guān)肽對(duì) 照組和空白對(duì)照組比較，均有顯著性差異(P<0. 05);
首次免疫后第26周，測(cè)得實(shí)驗(yàn)組免疫雄鼠血清中的特異性抗體滴度低于 5000，此時(shí)雌雄小鼠合籠實(shí)驗(yàn)中雌鼠產(chǎn)仔情況如圖6所示，實(shí)驗(yàn)組免疫雄鼠的生 殖力得到恢復(fù)，雌鼠產(chǎn)仔率與PBS對(duì)照組、無關(guān)肽對(duì)照組和空白對(duì)照組比較，均 無顯著性差異(P>0. 05)。
結(jié)論本發(fā)明抗原肽可以誘導(dǎo)高滴度的特異地靶向FSHR優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位的抗 體，并產(chǎn)生高效、安全、可逆的抗生育作用，可用于制備男性避孕疫苗。
最后說明的是，以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管 通過參照本發(fā)明的某些優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的普通 技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對(duì)其作出各種各樣的改變，而不偏 離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍。<110>中國(guó)人民解》文軍第三軍醫(yī)大學(xué)
< 12 0> 卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位及包含此表位的抗原肽
<160> 2
<210> 1
<211> 13
<212> PRT
<213〉 智人(H纖n)
<400> 1
lie Glu Leu Arg Phe Val Leu Thr Lys Leu Arg Val lie 1 5 10
<210〉 2 <211> 15 <212> PRT
<213> 麻滲病毒(morbillivirus ) <400> 2
Leu Ser Glu lie Lys Gly Val lie Val His Arg Leu Glu Gly Val 15 10 1權(quán)利要求
1、卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位，具有SEQ ID No.1所示氨基酸序列。
2、 包含權(quán)利要求1所述的卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗原肽，其特征在 于由T輔助細(xì)胞表位與卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位串聯(lián)而成；所述T細(xì)胞表 位具有SEQ ID No. 2所示氨基酸序列。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的包含卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗原肽，其特 征在于T輔助細(xì)胞表位通過柔性接頭與卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位串聯(lián)。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的包含卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗原肽，其特征 在于所述柔性接頭選自由GGG、 GGS或KK組成的短肽。
5、 包含免疫學(xué)有效量的權(quán)利要求2所述的包含卯泡刺激素受體B細(xì)胞表位的 抗原肽的組合物。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于還包含藥學(xué)上可接受的載體。
7、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于所述免疫學(xué)有效量為每劑 每千克體重2-5毫克。
8、 能夠與權(quán)利要求1所述的卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位特異性結(jié)合的抗體。
9、 能夠與權(quán)利要求2所述的包含卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗原肽特異性 結(jié)合的抗體。
10、 權(quán)利要求2所述的包含卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗原肽在制備男性 避孕疫苗中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位及包含此表位的抗原肽；本發(fā)明的卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位，具有SEQ ID No.1所示氨基酸序列，其成分單一、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、擺脫了天然蛋白抗原中不良表位的影響，引發(fā)的免疫反應(yīng)針對(duì)性強(qiáng)；本發(fā)明的包含卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗原肽，由T輔助細(xì)胞表位與卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位串聯(lián)而成，T細(xì)胞表位具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列；此抗原肽可以誘導(dǎo)高滴度的特異地靶向卵泡刺激素受體B細(xì)胞表位的抗體，并產(chǎn)生高效、安全、可逆的抗生育作用，可用于制備男性避孕疫苗，具有重要的理論價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景，能夠產(chǎn)生重大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)C07K16/28GK101362794SQ200810070280
公開日2009年2月11日 申請(qǐng)日期2008年9月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月11日
發(fā)明者畏 何, 吳玉章, 李晉濤, 梁志清, 萍 閻, 陳正瓊 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)