專利名稱：：丙型肝炎病毒的大環(huán)抑制劑的制作方法丙型肝炎病毒的大環(huán)抑制劑5本發(fā)明涉及對于丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus)(HCV)的復(fù)制具有抑制活性的大環(huán)化合物。本發(fā)明還涉及包含這些化合物作為活性組分的組合物，以及制備這些化合物和組合物的方法。在世界范圍內(nèi)，丙型肝炎病毒是慢性肝病的主要原因，并且已成是大量醫(yī)療研究的焦點。HCV是肝炎病毒科(/j印ac,Wn^)中的黃病毒10屬(f7awv/r/^3fe)的一員，與黃病毒科(/aWvz'nw)關(guān)系密切，黃病毒屬包括與人類疾病相關(guān)的多種病毒，例如登革熱病毒和黃熱病病毒，其與動物瘟病毒屬Oe勸v/m)家族也很相近，瘟病毒屬包括牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。HCV是正義單鏈RNA病毒，具有大約9,600個堿基的基因組。該基因組包括采用RNA二級結(jié)構(gòu)的5，和3，端非翻譯區(qū)，以15及編碼具有大約3，010-3,030個氨基酸的單一多蛋白的中央開放讀框。該多蛋白編碼十種基因產(chǎn)物，所述基因產(chǎn)物是通過協(xié)調(diào)結(jié)合系列的共翻譯和翻譯后內(nèi)切蛋白酶解切割從前體多蛋白產(chǎn)生的，所述切割是由宿主和病毒蛋白酶所介導的。病毒結(jié)構(gòu)蛋白包括核殼蛋白和兩個包被糖蛋白El和E2。非-結(jié)構(gòu)(NS)蛋白編碼一些必需病毒酶功能(解旋酶、20聚合酶、蛋白酶)，以及具有未知功能的蛋白。病毒基因組的復(fù)制通過由非結(jié)構(gòu)蛋白5b(NS5B)編碼的RNA-依賴性RNA聚合酶介導。除了聚合酶以外，在雙功能NS3蛋白中編碼的病毒解旋酶功能和蛋白酶功能也已經(jīng)顯示出是HCVRNA復(fù)制所必需的。除了NS3絲氨酸蛋白酶，HCV還在NS2區(qū)域編碼金屬蛋白酶。25初始急性感染之后，大部分感染的個體發(fā)展成慢性肝炎，因為HCV優(yōu)先在肝細胞中復(fù)制，但不是直接細胞病變的。特別是，缺少強有力的T-淋巴細胞反應(yīng)以及病毒對于突變的高傾向性，似乎促進了高比例的慢性感染。慢性肝炎可發(fā)展成肝纖維變性，導致肝硬化、晚期肝病和HCC(肝細胞癌)，從而使其成是肝移植的主要原因。存在6個主要的HCV基因型以及50個以上的亞型，它們在地理上的分布不同。1型HCV是歐洲和美國主要的基因型。HCV的廣5泛遺傳異質(zhì)性具有重要的診斷和臨床含義，也許解釋了在疫苗開發(fā)和缺少治療應(yīng)答方面的困難。HCV可通過4妻觸^皮污染的血液或血液制品進行傳播，例如在輸血或者靜脈內(nèi)使用藥物后。在血液篩查中使用的診斷試驗的？1入降低了輸血后HCV的發(fā)病率。然而，鑒于對晚期肝病的緩慢進展，現(xiàn)存10的感染在未來的數(shù)十年內(nèi)仍將繼續(xù)帶來嚴重的醫(yī)療和經(jīng)濟負擔。目前HCV的治療是基于(聚乙二醇化的(pegylated))a-干擾素(IFN-a)和利巴韋林的聯(lián)合治療。這種組合療法在感染了基因型1病毒的患者中產(chǎn)生了超過40%的持續(xù)病毒學應(yīng)答，在感染了基因型2和3病毒的患者中產(chǎn)生了大約80%的病毒學應(yīng)答。除了對于1型HCV的15有限效力，該組合療法還具有顯著的副作用，并且在很多患者中具有很差的耐受性。主要副作用包括流感樣癥狀、血液異常和神經(jīng)精神病癥狀。因此需要更有效、更方便和更好耐受性的療法。最近，兩種擬態(tài)HCV蛋白酶抑制劑已經(jīng)作為臨床候選對象而引起了注意，即公開在WO00/59929中的BILN-2061和公開在20WO03/87092中的VX-950。在學術(shù)和專利文獻中已經(jīng)公開了多種類似的HCV蛋白酶抑制劑。現(xiàn)已很明顯，持續(xù)給予BILN-2061或VX-950選擇了對于各自藥物具有抗藥性的HCV突變體，所謂的藥物逃逸突變體。這些藥物逃逸突變體在HCV蛋白酶基因組中具有特征性突變，尤其是D168V、D168A和/或A156S。因此，需要具有不同抗病毒模25式的另外的藥物來給治療失敗的患者提供治療選擇，并且具有多種藥物的組合治療在將來有可能成是標準，甚至是對于一線治療。用HIV藥物且特別是HIV蛋白酶抑制劑進行的實驗已進一步表明，欠佳的藥動學和復(fù)雜給藥方案迅速導致非故意配合性失敗。這是指，在HIV治療方案中，各藥物的24小時谷濃度(24hourtroughconcentration)(最小血漿濃度)在一天中大部分時間經(jīng)常^失至1〇90或ED9Q闞值之下。人們認是24小時谷值水平必須至少是ICso、更理想是IC90或ED90才可減緩藥物逃逸突變體的出現(xiàn)。獲得必需的藥動學5以及藥物代謝以達到這樣的谷值對于藥物設(shè)計提供了嚴格挑戰(zhàn)。具有多個肽鍵的現(xiàn)有技術(shù)HCV蛋白酶抑制劑的強擬態(tài)性質(zhì)給有效給藥方案帶來了藥動學障礙。需要這樣的HCV抑制劑，其可以克服目前HCV治療的缺點，例如副作用、有限的效力、出現(xiàn)抗藥性以及配合性不好。10WO04/094452涉及HCV的大環(huán)異唾啉肽抑制劑。還公開了包含用于抑制HCV的化合物的組合物及使用該化合物抑制HCV的方法。WO05/010029公開了氮雜-肽大環(huán)類丙型肝炎絲氨酸蛋白酶抑制劑；用于給予受HCV感染的受試者包含上述化合物的藥物組合物；以及通過給予包含本發(fā)明的化合物的藥物組合物來治療受HCV感染15的受試者的方法。本發(fā)明涉及HCV抑制劑，其在一個或多個以下藥理學相關(guān)性質(zhì)上高出一籌，即效能、降低的細胞毒性、改善的藥物動力學、改善的抗藥性、可接受的劑量和大用藥量。此外，本發(fā)明化合物具有相對較低分子量并易于合成，由市售或20通過本領(lǐng)域已知的合成方法易得的起始原料開始合成。本發(fā)明涉及HCV復(fù)制的抑制劑，所述抑制劑可由式(I)表示及其N-氧化物、鹽和立體異構(gòu)體，其中X是N、CH,當X帶有雙鍵時是C;R'是-OR5、-NH-S02R6;R2是氫，且當X是C或CH時，R2也可是d—6烷基；5R3是氫、Cw烷基、C！—6烷氧基C!—6烷基或Cw環(huán)烷基；R4是任選被1、2或3個各自獨立選自以下基團的取代基取代的異喹啉基C,—6烷基、Cw烷氧基、羥基、鹵素、多鹵代Cw烷基、多鹵代d—6烷氧基、氨基、單-或二-Cw烷基氨基、單-或二-Cw烷基氨基羰基、C—6烷基羰基-氨基、芳基及Het;10n是3、4、5或6;其中各條虛線(表示為一-)代表任選的雙鍵；RS是氫；芳基；Het;任選被(^_6烷基取代的(:3.7環(huán)烷基；或任選^皮C3—7環(huán)烷基、芳基或Het取代的Cw烷基；W是芳基；Het;任選被d-6烷基取代的C3.7環(huán)烷基；或任選被Cw15環(huán)烷基、芳基或Het取代的Cw烷基；作為基團或作為基團的一部分的各個芳基是任選被l、2或3個選自以下基團的取代基取代的苯基面素、羥基、硝基、IL&、羧基、d-6烷基、C-6烷氧基、C!-6烷氧基d-6烷基、Cw烷基羰基、氨基、單-或二-d-6烷基氨基、疊氮基、巰基、多卣代Cw烷基、多卣代CL6烷氧20基、C3—7環(huán)烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-Cw烷基哌嗪基、4-d-6烷基羰基哌嗪基和嗎啉基；且其中所述嗎啉基和哌啶基可任選,史1或2個Cw烷基取代；且作為基團或作為基團的一部分的各個Het是飽和、部分不飽和或完全不飽和的5或6元雜環(huán)，其含有l(wèi)-4個各自獨立選自氮、氧和硫25的雜原子，所述雜環(huán)任選被l、2或3個各自獨立選自以下基團的取代基取代卣素、羥基、硝基、氰基、羧基、Cw烷基、Cw烷氧基、C！—6烷氧基C"烷基、d—6烷基羰基、氨基、單-或二-C"烷基氨基、疊氮基、巰基、多囟代C]-6烷基、多卣代d—6烷氧基、C3.7環(huán)烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌"秦基、4-d-6烷基-哌。秦基、4-d，6烷基羰基-哌溱基和嗎啉基，且其中所述嗎啉基和哌"絲可任選被1或2個Cw烷基取代。本發(fā)明還涉及制備式(I)化合物、其N-氧化物、加成鹽、季胺、5金屬絡(luò)合物、立體化學異構(gòu)形式、其中間體的方法，以及所述中間體在制備式(I)化合物中的用途。本發(fā)明涉及式(I)化合物本身、其N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物、立體化學異構(gòu)形式用作藥物。本發(fā)明還涉及用于給予受HCV感染的受試者的包含上述化合物的藥物組合物。該藥物組合物10可包含上述化合物與其他抗-HCV藥物的組合。本發(fā)明還涉及式(I)化合物、其N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物或立體化學異構(gòu)形式在制備抑制HCV復(fù)制的藥物中的用途?；蛘弑景l(fā)明涉及一種在溫血動物中抑制HCV復(fù)制的方法，所述方法包括給予有效量的式(I)化合物、其N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬15絡(luò)合物或立體化學異構(gòu)形式。本說明書的前后文中，除非另有說明，否則使用以下定義。術(shù)語面素為氟、氯、溴和碘的上位概念。作為基團或作為基團的一部分(例如多由代Cw烷氧基)的術(shù)語"多鹵代Cw烷基"定義為單個-或多個鹵素取代的Cw烷基，特別是被20至多1、2、3、4、5、6或更多個鹵素原子取代的d—6烷基，例如帶有一個或多個氟原子的甲基或乙基(例如二氟甲基、三氟曱基、三氟乙基)。優(yōu)選是三氟曱基。還包括全氟d-6烷基，其是其中的所有氫原子均被氟原子置換的d-6烷基(例如五氟乙基)。在多囟代Cw烷基的定義中，當烷基連接多于一個的鹵素原子時，囟素原子可相同或不25同。作為基團或作為基團的一部分的文中所用"Cw烷基"定義為具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基，如甲基、乙基、l-丙基、2-丙基、l-丁基、2-丁基、2-曱基-l-丙基。"d-6烷基"包括d-4烷基和具有5或6個碳原子的更高級的同系物，如l-戊基、2-戊基、3-戊基、l-己基、2-己基、2-曱基-l-丁基、2-曱基-l-戊基、2-乙基-l-丁基、3-甲基-2-戊基等。最值得關(guān)注的d-6烷基是CM烷基。作為基團或作為基團的一部分的"C2-6烯基"定義為具有飽和的碳5-碳鍵和至少一個雙鍵且具有2至6個碳原子的直鏈或支鏈的烴基，如乙烯基、l-丙烯基、2-丙烯基(或烯丙基)、l-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-2-丙烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、2-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-戊烯基等。最值得關(guān)注的C2-6辟基是。2_4歸基。io作為基團或作為基團的一部分的"C2—6炔基"定義為具有飽和的碳-碳鍵和至少一個三鍵且具有2至6個碳原子的直鏈或支鏈烴基，如乙炔基、l-丙炔基、2-丙炔基、l-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基等。最值得關(guān)注的。2-6炔基是快基o15"。3.7環(huán)烷基"是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基的上位概念。Cw烷二基定義為具有1至6個碳原子的二價直鏈和支鏈的飽和烴基，如亞曱基、亞乙基、1,3-丙二基、1,4-丁二基、1,2-丙二基、2,3-丁二基、1,5-戊二基、1,6-己二基等。最值得關(guān)注的C—6烷二基是d-420烷二基。C"烷基是指其中Cw烷基如上定義的Cw烷基氧基。用于上文時，當術(shù)語(=0)或氧代與碳原子連接時形成羰基部分，與石危原子連"t妻時形成亞^l部分，當兩個所述術(shù)語與石危原子連接時形成磺酰基部分。當環(huán)或環(huán)系被氧代基取代時，與氧代連接的碳原子是飽25和的碳?；鶊FHet是如本說明書和權(quán)利要求指定的雜環(huán)。Het的實例包括例如吡咯烷基、哌咬基、嗎啉基、硫代嗎啉基、哌，秦基、吡咯基、、吡唑基、咪唑基、嚼唑基、異嗯唑基、噻溱基、異噻,基、噻唑基、異瘞唑基、嗯二唑基、噻二唑基、三唑基(包括1,2,3-三唑基、1,2,4-三哇基)、四唑基、呋喃基、p塞p分基、p比咬基、嘧"定基、p達p秦基、三溱基等。其中值得關(guān)注的Het基團是不飽和、特別是具有芳族特征的那些基團。更傻得關(guān).漆的是具有1或2個氮的Het基團。5在本段和以下段落述及的每個Het基團可被式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組的定義述及的數(shù)目和種類的取代基任選取代。在本段和以下段落述及的一些Het基團可被1、2或3個羥基取代基取代。此類羥基取代的環(huán)可作為其攜帶酮基的互變異構(gòu)形式存在。例如3-羥基噠溱部分可作為其互變異構(gòu)形式2H-噠"秦-3-酮存在。當Het是哌10溱基時，優(yōu)選在其4-位被取代基取代，所述取代基用碳原子連接到4-位氮，如4-C"烷基、4-多鹵代C!-6烷基、d-6烷氧基C,-6烷基、d-6烷基羰基、Cw環(huán)烷基。值得關(guān)注的Het基團包括例如吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、哌口秦基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、嗯唑基、異嗨唑基、噻15唑基、異噻唑基、嗯二唑基、噻二唑基、三唑基(包括1,2，3-三唑基、1,2,4-三峻基)、四唑基、呋喃基、漆吩基、p比咬基、嘧啶基、。達漆基、吡唑基、三溱基，或者與苯環(huán)縮合的任何此類雜環(huán)，如p引咮基、巧l唑基(特別是1H-吲唑基)、二氫吲哚基、喹啉基、四氫喹啉基(特別是1,2,3,4-四氫喹啉基)、異喹啉基、四氫異喹啉基(特別是l,2,3,4-四氫異20咬啉基)、會唑啉基、酞喚基、苯并咪唑基、苯并嗨唑基、苯并異嗯唑基、苯并噻唑基、苯并嗯二唑基、苯并噻二唑基、苯并呋喃基、苯并p塞p分基。Het基團吡咯烷基、哌咬基、嗎啉基、硫代嗎啉基、哌溱基、4-位取代的哌溱基優(yōu)選通過其氮原子連接(即l-吡咯烷基、l-哌啶基、254-硫代嗎啉基、4-嗎啉基、l-哌溱基、4-位取代的l-哌溱基)。除非另外指明，否則用于變量定義的基團包括所有可能的異構(gòu)體。例如吡啶基包括2-吡咬基、3-吡啶基和4-吡啶基；戊基包括1-戊基、2-戊基和3-戊基。當任何變量多于一次地出現(xiàn)在任何構(gòu)成部分中時，每次的定義為5獨立的。當用于下文時，術(shù)語"式(I)化合物"或"本發(fā)明化合物"或類似術(shù)語，意欲包括式(I)化合物、其亞組中的每一個或任一個、其前藥、N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物和立體化學異構(gòu)形式。一個實施方案包括本文指定的式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組及其N-氧10化物、鹽以及可能的立體異構(gòu)形式。另一個實施方案包括本文指定的式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組及其鹽以及可能的立體異構(gòu)形式。式(I)化合物具有幾個手性中心，并且以立體化學異構(gòu)形式存在。本文所用術(shù)語"立體化學異構(gòu)體形式，皮定義為式(I)化合物可以具有15的，由相同的原子通過相同的鍵合順序組成但具有不同的三維結(jié)構(gòu)且不可以互換的所有可能的化合物。至于用(巧或OS)標識取代基內(nèi)手性原子的絕對構(gòu)型時，該標識是指整個化合物，并非孤立地指取代基。除非另外敘迷或指明，否則化合物的化學名稱包括所述化合物可20具有的所有可能的立體化學異構(gòu)形式的混合物。所述混合物可包含所述化合物基本分子結(jié)構(gòu)的所有非對映體和/或?qū)τ丑w。本發(fā)明化合物的所有立體化學異構(gòu)形式(無論是純的形式還是彼此的混合物)都意欲包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。將本文敘述的化合物和中間體的純立體異構(gòu)形式限定l基本不25含所述化合物或中間體的相同基本分子結(jié)構(gòu)的其他對映體或非對映體形式的異構(gòu)體。具體來講，術(shù)語"立體異構(gòu)純"指立體異構(gòu)體過量是至少80%(即最少卯％—種異構(gòu)體和最多10%其他可能的異構(gòu)體)-立體異構(gòu)體過量是100%(即100%—種異構(gòu)體且無其他異構(gòu)體)的化合物或中間體，更特別是立體異構(gòu)體過量是90%-100%、甚至更特別是立體異構(gòu)體過量是94%-100%、最特別是立體異構(gòu)體過量是97%-100%的化合物或中間體。術(shù)語"對映體純"和"非對映體純"應(yīng)當理解是相似的含義，不過分別表示所述混合物中對映體過量和非對映體過量。5本發(fā)明化合物和中間體的純立體異構(gòu)體可通過應(yīng)用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法獲得。例如，可以通過用旋光性酸或堿選擇性地結(jié)晶其非對映體鹽來分離對映體。所述旋光性酸或堿的實例是酒石酸、二苯甲?；剖?、二甲苯甲?；剖岷驼聊X磺酸?；蛘撸衫檬中怨潭ㄏ嗤ㄟ^色譜技術(shù)來分離對映體。所述純立體異構(gòu)體形式還可以衍生自10適當起始原料的相應(yīng)純立體異構(gòu)體形式，條件是反應(yīng)以立體特異性方式發(fā)生。如果需要特異性的立體異構(gòu)體，優(yōu)選可通過立體特異性制備方法來合成所述化合物。這些方法將有利地使用對映體純的起始原料。式(I)化合物的非對映體的外消旋體可通過常規(guī)方法獲得?？梢苑?5便地應(yīng)用的適當?shù)奈锢矸蛛x方法是例如選擇性結(jié)晶和色譜法，例如柱色譜法。對于某些式(I)化合物、其N-氧化物、鹽、溶劑化物、季胺或金屬絡(luò)合物以及用于其制備的中間體，沒有通過實驗確定絕對立體化學構(gòu)型。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠使用本領(lǐng)域已知的方法例如x-射線衍射20方法來確定這樣的化合物的絕對構(gòu)型。本發(fā)明還意欲包括存在于本發(fā)明化合物上的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序數(shù)但不同質(zhì)量數(shù)的那些原子。舉一個常規(guī)性的例子但不限于此，氫的同位素包括氚和氖。碳的同位素包括C-13和C-14。25本文中使用的術(shù)語"前藥"是指藥理學可接受的衍生物，例如酯、酰胺和磷酸酯，使得所得的這種衍生物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物是在本發(fā)明式(I)化合物中定義的活性藥物。一般性地描述了前藥的GoodmanandGilman(ThePharmacologicalBasisofTherapeutics，第8版,McGraw-Hill,Int.Ed.1992,"BiotransformationofDrugs",p13—15)所著的參考文獻通過引用結(jié)合到本文中。前藥優(yōu)選具有優(yōu)良的水溶解度，提高的生物利用度，并且易于在體內(nèi)代謝成活性抑制劑。本發(fā)明化合物的前藥是通過修飾化合物的官能團而制備得到的，修飾物可通5過常規(guī)手段或者在體內(nèi)解離為母化合物。優(yōu)選藥學上可接受的酯前藥，其在體內(nèi)可水解，并且衍生自具有羥基或羧基的式(I)化合物。體內(nèi)可水解的酯為這樣的酯，其在人或動物體內(nèi)水解，生成母酸或醇。對于氛基，合適的藥學上可接受的酯包括d-6烷氧基甲基酯，例如甲氧基甲基酯，Cw鏈烷?；趸谆?例10如新戊酰基氧基甲基酯)，2-苯并[C]呋喃酮基酯，(33-8環(huán)烷氧基羰基氧基Cw烷基酯(例如l-環(huán)己基羰基氧基乙基酯)；1,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯(例如5-甲基-l,3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯)；和Cw烷氧基羰基氧基乙基酯(例如l-曱氧基羰基氧基乙基酯)，其可以在本發(fā)明化合物中的任何羧基上形成。15含有羥基的式(I)化合物的體內(nèi)可水解酯包括無機酯，例如磷酸酉旨，和a-酰氧基烷基醚以及相關(guān)化合物，作為體內(nèi)水解的結(jié)果，該酯裂解，生成母羥基。a-酰氧基烷基醚的實例包括乙酰氧基曱基醚和2，2-二曱基丙酰氧基甲基醚。與羥基形成體內(nèi)可水解的酯的基團包括烷?；?、苯甲?；?、苯基乙?；腿〈谋郊柞；捅交阴；?、烷M20羰基(以生成碳酸烷基酯)、二烷基氨基甲?；蚇-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(以生成氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙?；汪然阴；?。苯曱?；系娜〈膶嵗◤沫h(huán)氮原子上經(jīng)由亞曱基連接到苯甲酰基環(huán)的3-或4-位上的嗎啉代和哌溱子基。對于治療用途，式(I)化合物的鹽是其中反荷離子藥學上可4妄受的25那些。然而，非藥學上可沖妻受的酸和石成的鹽也可以應(yīng)用，例如，用于制備或純化發(fā)明藥學上可接受的化合物。所有的鹽，無論是藥學上可接受的還是非藥學上可接受的，都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。上文提及的藥學上可接受的酸和堿加成鹽包括式(I)化合物能夠形成的有治療活性的無毒的酸和^4加成鹽。藥學上可接受的酸加成鹽可以通過用合適的酸處理堿形式來方便地獲得。合適的酸包括例如無機酸，如氫面酸，例如鹽酸或氬溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等；或者有5;機酸例如乙酸、丙酸、羥乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、馬來酸、富馬酸、蘋果酸(即羥基丁二酸)、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、對氨基水楊酸、雙羥萘酸等。反之，所述鹽形式可以通過用合適的堿處理而轉(zhuǎn)化成游離堿形10式。包含酸性質(zhì)子的式(I)化合物經(jīng)由適當?shù)挠袡C或無機堿處理，還可以轉(zhuǎn)換成其無毒金屬或胺加成鹽形式。適當?shù)摹吠}形式包括，例如銨鹽，堿和堿土金屬鹽例如鋰、鈉、鉀、鎂、4丐鹽等，與有機堿例如千星、N-曱基-D-葡萄糖胺、海巴明形成的鹽，以及與氨基酸例如精氨15酸、賴氨酸形成的鹽等等。術(shù)語加成鹽還包括式(I)化合物及其鹽能夠形成的溶劑化物。這樣的溶劑化物是例如水合物、醇化物等等。上文中使用的術(shù)語"季胺"定義式(I)化合物能夠形成的季銨鹽，該季銨鹽通過式(I)化合物的堿性氮與合適的季胺化劑的反應(yīng)而形成，所20述季胺化劑例如是任選取代的烷基由、芳基囟或芳基烷基卣，例如甲基碘或千基碘。還可以使用具有良好離去基團的其他試劑，例如三氟甲磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯和對甲苯磺酸烷基酯。季胺具有帶正電荷的氮。藥學上可接受的反荷離子包括氯離子、溴離子、碘離子、三氟乙酸根和乙酸根。選擇的反荷離子可使用離子交換樹脂來引入。25本化合物的N-氧化物形式意欲包括其中一個或幾個氮原子被氧化為所謂N-氧化物的式(I)化合物。應(yīng)理解，式(I)化合物可具有金屬4定合、螯合、絡(luò)合物形成特性，因此可作為金屬絡(luò)合物或金屬螯合物存在。式(I)化合物的此類金屬化衍生物意欲包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。某些式(I)化合物還可以其互變異構(gòu)體形式存在。雖然在上式中沒5有明確指出這樣的形式，但是其也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。如上所述，式(I)化合物具有幾個不對稱中心。是了更有效地指出這些不對稱中心中的每一個，使用如在下面的結(jié)構(gòu)式中給出的編號系統(tǒng)。10不對稱中心位于大環(huán)的1、4和6位以及5元環(huán)的3'》友原子、2'碳原子(當W取代基是Cw烷基時)和l'碳原子(當X是CH時)。每個這些不對稱中心都可以其R或S構(gòu)型存在。1位的立體化學優(yōu)選相當于L-氨基酸即L-脯氨酸的構(gòu)型。當X是CH時，在環(huán)戊烷環(huán)l'和5'位取代的2個羰基優(yōu)選處于反15式構(gòu)型。5'位羰基取代基優(yōu)選處于相當于L-脯氨酸構(gòu)型的構(gòu)型。r和5'位取代的羰基優(yōu)選如以下結(jié)構(gòu)式所示式(I)化合物包括以下結(jié)構(gòu)片段代表的環(huán)丙基:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>其中C代表7位碳，4和6位-碳是環(huán)丙烷環(huán)的不對稱^碳原子。盡管在式(I)化合物的其他片段可能存在其他不對稱中心，但這兩個不對稱中心的存在意味著該化合物可以非對映體混合物的形式存在，如下文顯示的式(I)化合物的非對映體，其中7位碳與羰基呈順式構(gòu)型或與酰胺呈順式構(gòu)型。V卡C7與lt基呈順式構(gòu)型<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>C7與羰基呈順式構(gòu)型c步C7與酰胺呈順式構(gòu)型<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>C7與酰胺呈順式構(gòu)型一個實施方案涉及式(I)化合物，其中7位碳與羰基呈順式構(gòu)型。10另一個實施方案涉及其中4位碳的構(gòu)型是R的式(I)化合物。式(I)化合的式①化合物。式(I)化合物可包含脯氨酸殘基(當X是N時)或者環(huán)戊基或環(huán)戊烯基殘基(當X是CH或C時)。優(yōu)選其中l(wèi)(或5')位取代基與3'位-0-R415取代基處于反式構(gòu)型的式(I)化合物。特別值得關(guān)注的是其中1位具有相當于L-脯氨酸的構(gòu)型且-0-I^取代基處于1位的反式構(gòu)型的式(I)化合物。優(yōu)選具有下式(I-a)和(I-b)結(jié)構(gòu)所示立體化學的式(I)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>本發(fā)明的一個實施方案涉及式(I)或式(I-a)化合物或者式(I)化合物的任何亞組，其中適用一項或多項下列條件(a)R2是氫；5(b)X是氮；(c)碳原子7與8之間存在雙鍵。本發(fā)明的一個實施方案涉及式(I)或式(I-a)、(I-b)化合物或者式(I)化合物的任何亞組，其中適用一項或多項下列條件(a)R2是氫；10(b)X是CH;(c)碳原子7與8之間存在雙鍵。式(I)化合物的具體亞組由下列結(jié)構(gòu)式表示7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>在式(I-c)和(I-d)化合物中，特別值得關(guān)注的是分別具有式(I-a)和(I-b)化合物的立體化學構(gòu)型的化合物。在式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中碳原子7與8之間的雙鍵可處于順式或反式構(gòu)型。優(yōu)選碳原子7與8之間的雙鍵是順式構(gòu)型，5如式(I-c)和(I-d)所示。碳原子l'與2'之間的雙鍵可存在于式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中，如下式(I-e)所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>(i－e)另一種式(I)化合物的具體亞組由下列結(jié)構(gòu)式表示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>(I-h)在式(I-f)、(I-g)或(I-h)化合物中，特別值得關(guān)注的是具有式(I-a)和(I-b)化合物的立體化學構(gòu)型的化合物。在(I-a)、(I-b)、(I國c)、(I陽d)、(I畫e)、(I-f)、(I-g)和(I-h)中,在適用5時，X、n、R1、R2、113和114如本文指定的式(1)化合物或式(1)化合物任何亞組定義所指定。應(yīng)理解上文限定的式(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)或(I-h)化合物亞組以及本文限定的任何其他亞組，還包括此類化合物的任何前藥、N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物和立體化學異構(gòu)10形式。當n是2時，由"n"括弧的部分-CH2-相當于式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中的乙二基。當n是3時，由"n"括弧的部分-CH2-相當于式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中的丙二基。當n是4時，由"n，，括弧的部分-CH2-相當于式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中的丁二5基。當n是5時，由"n"括弧的部分-CH2-相當于式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中的戊二基。當n是6時，由"n"括弧的部分-CH2-相當于式(I)化合物或式(I)化合物任何亞組中的己二基。具體的式(I)化合物亞組是其中n是4或5的化合物。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中10(a)W是-OR5，特別是其中RS是d-6烷基(如甲基、乙基或叔丁基)，且最優(yōu)選其中RS是氫；或(b)W是-NHS—0)2R6,特別是其中R6是d-6烷基、任選被Cw烷基取代的CVC7環(huán)烷基或芳基，例如其中116是甲基、環(huán)丙基、甲基環(huán)丙基或苯基。15本發(fā)明的其他實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中(a)R2是氫；(b)W是d—6烷基，優(yōu)選曱基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中20(a)X是N、C(X通過雙鍵連接)或CH(X通過單鍵連接)，112是氫；(b)X是C(X通過雙鍵連接)，R"是Q-6烷基，優(yōu)選曱基。本發(fā)明的其他實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中25(a)R3是氫；(b)R3是Cw烷基；(c)R3是C-6烷氧基C！—6烷基或C3-7環(huán)烷基。本發(fā)明的優(yōu)選實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R"是氫或d-6烷基，更優(yōu)選氫或甲基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R"是任選被下述取代基單-、二-或三-取代的異喹啉-l-基d—6烷基、5Cw烷氧基、羥基、鹵素、三氟甲基、單-或二-Cw烷基氨基、單-或二-Cw烷基氨基羰基、芳基、Het;其中芳基或Het各自獨立地任選被選自以下的基團取代鹵素、Cw烷基、d—6烷氧基、多囟代Cw烷氧基、氨基、單-或二-d—6烷基氨基、C3—7環(huán)烷基(特別是環(huán)丙基)、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-d-6烷基哌"秦基(特別是4-甲基-哌。秦10基)或嗎啉基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R4是任選被下述取代基單-、二-或三-取代的異喹啉-l-基甲基、乙基、異丙基、叔丁基、曱氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟曱氧基、氟、氯、溴、單-或二-d—6烷基氨基、單-或二-d—6烷基氨基羰基、苯基、15曱氧基苯基、氰基苯基、卣代苯基、吡啶基、Cw烷基吡咬基、嘧啶基、嗎啉基、哌嗪基、C"烷基哌嗪基、吡咯烷基、吡唑基、C!-4烷基吡唑基、噻唑基、d-4烷基噻唑基、環(huán)丙基-P塞唑基或單-或二-CM烷基氨基噻唑基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中20R4是其中代表R"實例的該結(jié)構(gòu)式及隨后的結(jié)構(gòu)式中，R4a、R4b、R4b各自獨立為任何選自那些提及的R1的單環(huán)或雙環(huán)系上可能的取代基,具體而言，R"可以是氫、鹵素、d-6烷基、d-6烷氧基、單-或Cw烷基-氨基、氨基、芳基或Het;所述芳基或Het各自獨立任選被的取代基取代；或更具體地講，所述芳基或Het各自獨立任選被d.6烷基、Cw烷氧基、多卣代C-6烷氧基、氨基、單-或二-Cw烷基氨基、鹵素、嗎啉基、哌咬基、吡咯烷基、哌嗪基、4-(^.6烷基哌溱基(如4-甲基哌喚基)取代；且R樸和R4b'各自獨立是氫、Cw烷基、C-,-6烷氧基、單-或二-Cw烷基氨基、單-或二-C!—6烷基氨基羰基、羥基、鹵素、三氟甲基、芳基或Het;所述芳基或Het各自獨立任選被任何式(I)化合物或式(I)化講，所述芳基或Het各自獨立任選被C!-6烷基、C—6烷氧基、多卣代Cw烷氧基、氨基、單-或二-C"烷基氨基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、4-d-6烷基哌"秦基(如4-甲基哌口秦基)取代。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R"是下述的基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>或特別是，其中R"選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>其中，在可能的情況下，氮可帶有一個R"取代基或連接分子的其余部分的鍵；其中R化各自獨立是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組定義中提及的Het的取代基；或更具體地講，R"各自獨立是氫、鹵素、Cw烷基、氨基或單-或二-C"烷基氨基、嗎P林基、哌咬基、吡咯烷基、哌溱基、4-C^烷基哌。秦基(如4-曱基哌溱基)；且其中所述嗎啉基和哌啶基可任選被一個或兩個Cw烷基取代；5更具體地講，R"各自獨立是氫、鹵素、d—6烷基、氨基或是單-或二-C!—6烷基氨基；且在R"的氮原子被取代時，優(yōu)選將含碳取代基通過碳原子或其一個碳原子與氮連接；且其中在這種情況下R"優(yōu)選是d-6烷基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中10R4是R4d.其中R"和R"'各自獨立地如上定義；或更具體地講，R"和R"'各自獨立是氫、Cw烷基、Cw烷氧基、單-或二-C"6烷基氨基，或是單國或二-Cw烷基氨基羰基、羥基、鹵素、三氟甲基、芳基或Het;和15R"和R^'獨立為在式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組定義中所提及的任何芳基的取代基；或具體地講，R"或R^獨立是氫、6烷基、CL6烷氧基或卣素。本發(fā)明的另一實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中114是其中R"和R^'各自獨立如上定義；或更具體地講，R"和R4b'各自獨立是氫、C!-6烷基、Cw烷氧基、單-或二-C!.6烷基氨基或單-或二-Cw烷基氨基羰基、羥基、鹵素、三氟甲基、芳基或Het;和r)4e曰R_疋'任何芳基的取代基；或具體地講，R"是氫、Cw烷基、Q—6烷氧基或鹵素。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R4是:10其中各個R^及R"'如上定義；或更具體地講，R"和R^各自獨立是氫、Cw烷基、C!-6烷氧基、單-或二-d-6烷基氨基或是單-或二-Cw烷基氨基羰基、羥基、鹵素、三氟曱基；優(yōu)選R^是d-6烷氧基，更優(yōu)選是甲氧基；和15任何芳基的取代基；或更具體地講，R"是氫、d-6烷基、氨基、單-或二-Cw烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、哌漆基、4-d-6烷基哌溱基(特別是4-甲基-哌溱基)或嗎啉基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R4是1015其中各個R"及I^b'如上定義；或更具體地講，R"及R"'各自獨立是氫、C-6烷基、C-6烷氧基、單-或二-C!-6烷基氨基、單-或二-Cw烷基氨基羰基、羥基、卣素、三氟甲基；優(yōu)選R^b是d-6烷氧基，更優(yōu)選是曱氧基、鹵素或Cw烷基；和任何芳基的取k基；或具::也講，R^是氫、口d-6烷基、、氨基、單-或二-Cw烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-d-6烷基哌溱基(特別是4-甲基-哌。秦基)或嗎啉基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R4是其中各個R"和R"'如上定義；或更具體地講，R^及R^'各自獨立是氫、Cw烷基、d-6烷氧基、單-或二-d-6烷基氨基、單-或二-d-6烷基M羰基、羥基、卣素、三氟甲基；優(yōu)選R"是CV6烷氧基；最優(yōu)選是曱氧基、卣素或C]—3烷基；和R4h是一任何芳基的取代基；或更具體地講，R"是氫、Cw烷基、氨基、單-或二-Cw烷基氨基、吡咯烷基、哌咬基、哌嗪基、4-d—6烷基哌嗪基(特別是4-曱基-哌"秦基)或嗎啉基；且其中R"也可在吡唑環(huán)的一個氮原子上被取代，在該情況中優(yōu)選是d-6烷基。本發(fā)明的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，其中R4是其中各個R"及R^如上所述；或更具體地講，R"b及Ri各自獨立是氫、Cw烷基、Cw烷氧基、單-或二-Cw烷基氨基、單-或二-Cw烷基氨基羰基、羥基、卣素、三氟曱基；優(yōu)選R"是C!-6烷氧基；最優(yōu)選是曱氧基、卣素或Cw烷基；和任何芳基的取代基；或更具體地講，R"是氬、Cw烷基、氨基、單-或二-d—6烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-C!—6烷基哌溱基(特別是4-曱基-哌嗪基)或嗎啉基。本發(fā)明的優(yōu)選的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞15組，其中114是其中R&如在式(I)化合物或其亞組化合物中定義；和R"是氬、由素或三氟甲基。本發(fā)明的進一步優(yōu)選的實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的20任何亞組，其中114是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中R"是曱氧基、乙氧基或丙氧基；和R"是氫、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基或三氟甲基。本發(fā)明的其他實施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何亞組，5其中114是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中I^b是氫、鹵素或三氟甲基。式(I)化合物由三個構(gòu)造單元P1、P2、P3組成。構(gòu)造單元P1還包含P1'尾部。下式(I-c)化合物中以星號標示的羰基可為構(gòu)造單元P2或10構(gòu)造單元P3的一部分。由于化學上的原因，其中X是C的式(I)化合物的構(gòu)造單元P2引入了l'位上連接的羰基。構(gòu)造單元Pl與P2、P2與P3和Pl與Pl，(當R1是-NH畫S02R12時)的連接涉及形成酰胺鍵。單元P1與P3的連接涉及形成雙4建。構(gòu)造單元Pl、P2和P3可以任何指定順序連接來制備化合物(I-i)或(I-j)。其15中的一步涉及環(huán)化，從而形成大環(huán)。下面示例了化合物(I-i)(該化合物為其中碳原子C7與C8經(jīng)雙鍵經(jīng)單鍵連接的式(I)化合物)。式(I-j)的化合物可通過還原大環(huán)中的雙4定由相應(yīng)的式(I-i)化合物來制備。下文描述的合成過程也適用于外消旋體、立體化學純中間體或終產(chǎn)物或者任何立體異構(gòu)混合物。可在合成過程的任何階段將外消旋體或立體化學混合物分離為立體異構(gòu)形式。在一個實施方案中，中間體5和終產(chǎn)物具有上文式(I-a)和(I-b)化合物指定的立體化學。在一個實施方案中，如下制備化合物(I-i):首先形成酰胺鍵，接著在P3與Pl之間形成雙鍵連接，同時環(huán)化為大環(huán)。(1a)在優(yōu)選實施方案中，其中C7與C8之間的4泉是雙鍵的化合物(1)10即式(I-i)化合物(如上定義)可按照以下反應(yīng)流程所示制備可在合適的金屬催化劑存在下通過烯烴復(fù)分解反應(yīng)形成大環(huán)，所述催化劑如才艮道于下列文獻的Ru-基催化劑Miller，SJ.,Blackwell,H.E.,Grubbs,R.H.J.Am.Chem.Soc.118,(1996),9606-9614;Kingsbury,J.S.，Harrity,J.P.A.,Bonitatebus，P.J.,Hoveyda,A.H.,J.Am.Chem.Soc.121,(1999),791-799;和Huang等，J.Am.Chem.Soc.121,(1999),2674-2678;如Hoveyda國Grubbs催化劑?？墒褂每諝夥€(wěn)定性釕催化劑如氯化雙(三環(huán)己基膦)-3-苯基-lH-茚-l-亞基合釕(NeolystM^)或二氯化雙(三環(huán)己基膦)-[(苯硫基)亞甲基〗5合釕(IV)。其他可使用的催化劑是Grubbs—代和二代催化劑，即分別是二氯化亞千基-雙(三環(huán)己基膦)合釕和二氯化(l,3-雙-(2,4,6-三甲基苯基)-2-亞咪唑烷基)(苯基亞曱基)-(三環(huán)己基膦)合釕。特別值得關(guān)注的是Hoveyda-Gmbbs—代和二代催化劑，分別是二氯化(鄰異丙氧基苯基亞曱基)(三環(huán)己基膦)合釕(II)和二氯化1,3-雙-(2,4,6-三甲基苯10基)-2-亞咪唑烷基)(鄰異丙氧基苯基亞曱基)合釕。其他含有其他過渡金屬如Mo的催化劑也可用于該反應(yīng)。復(fù)分解反應(yīng)可在合適的溶劑中進行，例如醚(如THF、二氧六環(huán))、由代烴(如二氯曱烷、CHC13、1,2-二氯乙烷等)。這些反應(yīng)在增加的溫度和氮氣氣氛下進行。15可通過還原式(I-i)化合物的C7-C8雙鍵，用式(I-i)化合物制備其中大環(huán)內(nèi)C7與C8之間的連接是單鍵的式(I)化合物，即式(I-j)化合物。該還原在貴金屬催化劑如Pt、Pd、Rh、Ru或Raney鎳的存在下用氫催化氫化進行。值得關(guān)注的是Rh/鋁。氫化反應(yīng)優(yōu)選在溶劑如醇(如曱醇、乙醇)或者醚(如THF)或其混合物中進行。也可將水加入這些溶劑20或混合;容劑內(nèi)?？稍诤铣傻娜魏坞A段，即環(huán)化之前或之后或者上文描述的環(huán)化和還原之前和之后，使W基團與P1構(gòu)造單元連接?？赏ㄟ^在W基團與Pl之間形成酰胺鍵使兩部分連接，制備其中R1代表-NHS02R6的式(I)化合物，所述化合物由式(I-k-l)表示。同樣，可通過在R"基團與25Pl之間形成酯鍵連接制備其中R1代表-OR5的式(I)化合物即化合物(I-k-2)。在一個實施方案中，在化合物(1)合成的最后一步引入-0115基團，如以下反應(yīng)流程所示，其中G代表以下基團G-COOH+H2N-S02R6——(2a)(2b)G-COOH+HOR5--(2a)(2c)可通過酰胺形成反應(yīng)(如下文描述形成酰胺4定的任何過程)使中間體(2a)與胺(2b)偶合。具體來講，可在溶劑(如THF)或一種卣代烴(如5二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷)中，將(2a)用偶合劑如N，N'-羰基二咪唑(CDI)、EEDQ、IIDQ、EDCI或六氟磷酸苯并三唑-l-基-氧基-三-(吡咯烷-l-基)轔(購買商品名為？乂80@)處理，并優(yōu)選在(2a)與偶合劑反應(yīng)后與所需石黃酰胺(2b)反應(yīng)，該反應(yīng)在^成(如三烷基胺(如三乙胺或三異丙基乙胺)或1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU》的存在下進行。10還可將中間體(2a)轉(zhuǎn)化成活化的形式，例如通式G-CO-Z的活化形式(其中Z代表卣素)或活性酯的其余部分(其中Z是芳氧基，如苯氧基、對-硝基苯氧基、五氟苯氧基、三氯苯氧基、五氯苯氧基等)；或Z可為混合酸酐的其余部分。在一實施方案中，G-CO-Z是酰氯(G-CO-Cl)或混合酸酐(G-CO-O-CO-R或G-CO-O-CO-OR，后者中的R是例如15Cw烷基(如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、異丁基或苯甲基))。該活化形式G-CO-Z與磺酰胺(2b)反應(yīng)。上述反應(yīng)中所述的(2a)中羧酸的活化可導致內(nèi)部環(huán)化反應(yīng)形成下式的氮雜內(nèi)酯中間體其中X、R2、R3、R4、n如上定義且其中立構(gòu)中心可具有如上定5義的如(I-a)或(I-b)所示的立體化學構(gòu)型。中間體(2a-l)可使用常規(guī)方法從反應(yīng)混合物中分離，隨后將分離的中間體(2a-l)與(2b)反應(yīng)，或含(2a-l)的反應(yīng)混合物可不分出(2a-l)而進一步與(2b)反應(yīng)。在一個實施方案中，當在與水不溶混的溶劑中與偶合劑發(fā)生反應(yīng)時，該含(2a-l)的反應(yīng)混合物可用水或微堿性的水洗滌以除去所有水溶性副產(chǎn)物。隨10后如此得到的經(jīng)洗滌的溶液不經(jīng)進一步純化與(2b)反應(yīng)。另一方面，中間體(2a-l)的分離可提供一些優(yōu)點，因為在任選的進一步純化之后，將分離的產(chǎn)物與(2b)反應(yīng)，能生成較少的副產(chǎn)物，并且反應(yīng)更易于進行后處理。可通過酯形成反應(yīng)將中間體(2a)與醇(2c)偶合。例如，將(2a)與(2c)15—起反應(yīng)，采用物理手段除去水，例如通過共沸除去水，或通過使用脫水劑而化學除水。還可以將中間體(2a)轉(zhuǎn)化成活化形式G-CO-Z，例如上述活化形式，然后與醇(2c)反應(yīng)。酯形成反應(yīng)優(yōu)選在堿存在下進行，所述堿例如是堿金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，例如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，或叔胺，例如本文在有關(guān)酰胺形成反應(yīng)中所提及的胺，特別是20三烷基胺，例如三乙胺?？稍邗バ纬煞磻?yīng)中使用的溶劑包括醚，例如THF;囟代烴，例如二氯甲烷、CH2C12;烴例如甲苯；極性質(zhì)子惰性的溶劑例如DMF、DMSO、DMA;等溶劑。也可按照以下反應(yīng)流程，通過脫除保護基團PG,用相應(yīng)的氮保護中間體(3a)制備其中R3是氫的式(I)化合物，所述化合物由(1-1)表示。保護基團PG具體來講是下文述及的任何氮保護基團，還可用下文述及的操作脫除(3a)(w)以上反應(yīng)的原料(3a)可按照式(I)化合物的制備過程制備，但用其中基團W是PG的中間體。也可按照以下反應(yīng)流程通過使中間體(4a)與雜環(huán)(4b)反應(yīng)制備式(I)化合物，其中各基團具有上文規(guī)定的含義(4a)(I)10(4a)中的Y代表輕基或離去基團LG(例如囟化物，如溴化物或氯化物)或芳基磺酰基(如甲磺?；?、曱苯磺酰基等)。在一個實施方案中，(4a)與(4b)的反應(yīng)是0-芳基化反應(yīng)，Y代表離去基團。該反應(yīng)可采用E.M.Smith等在J.Med.Chem.(1988),31,15875-885中所述的方法進行。具體來講，該反應(yīng)在堿(優(yōu)選強石成)的存在下，在反應(yīng)惰性溶劑(如形成酰胺鍵的任何一種溶劑)中進行。在一個特別的實施方案中，在反應(yīng)惰性溶劑(例如偶極質(zhì)子惰性的溶劑，如DMA、DMF等)中，在強度足夠脫除羥基的氬的堿(例如堿金屬氫化物(如LiH或NaH)或者堿金屬醇鹽(如甲醇鈉或甲醇鉀或5乙醇鈉或乙醇鉀、叔丁醇鉀))存在下，使原料(4a)與(4b)反應(yīng)。使所得醇鹽與芳化劑(4b)反應(yīng)，其中Y是上述離去基團。用這種類型O-芳基化反應(yīng)將(4a)轉(zhuǎn)化為(I)不改變帶羥基的碳的立體化學構(gòu)型?；蛘撸?4a)與(4b)的反應(yīng)也可通過Mitsunobu反應(yīng)(Mitsunobu,1981,Synthesis,January,1-28;Rano等，TetrahedronLett.,1995,36,22,103779-3792;Krchnak等，TetrahedronLett.,1995,36,5,6193-6196;Richter等，TetrahedronLett,1994,35,27，4705-4706)進行。該反應(yīng)包括在三苯基膦和活化劑如偶氮羧酸二烷基酯(如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)、偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD)等)的存在下，用(4b)處理其中Y是羥基的中間體(4a)。Mitsunobu反應(yīng)改變攜帶羥基的碳的立體化學15構(gòu)型。或者，為了制備式(I)化合物，首先形成構(gòu)造單元P2與PI之間的第一酰胺鍵，接著使P3構(gòu)造單元與Pl-P2中的PI部分偶合，然后在P2-P1-P3中的P3與P2部分之間形成氨基甲酸酯或酯鍵，同時閉環(huán)。還有另一種備選合成方法是形成構(gòu)造單元P2與P3之間的酰胺204定，接著使構(gòu)造單元P1與P3-P2中的P3部分偶合，最后形成P1-P3-P2中的Pl與P2之間的酰胺4建，同時閉環(huán)。構(gòu)造單元P1與P3可連接為Pl-P3序列。如果需要，可還原連接Pl與P3的雙鍵。可使由此形成的Pl-P3序列(無論是否還原)與構(gòu)造單元P2偶合，然后通過形成酰胺^:將由此形成的序列Pl-P3-P2環(huán)化。25在上述任一方法中，可通過形成雙4A連接構(gòu)造單元P1與P3，如通過下文描述的烯烴復(fù)分解反應(yīng)，或Wittig型反應(yīng)。如果需要，可還原由此形成的雙4A,類似于上文所述(I-i)向(I-j)的轉(zhuǎn)化。也可在更晚階段還原雙4泉，即添加第三構(gòu)造單元之后或形成大環(huán)之后。構(gòu)造單元P2與Pl通過形成酰胺4定連接，P3與P2通過形成氨基甲酸酯或酯連接?？稍谑?I)化合物合成的任何階段使尾P1'與Pl構(gòu)造單元^t合，例如在構(gòu)造單元P2與Pl偶合之前或之后；P3構(gòu)造單元與Pl偶合之前5或之后；或者閉環(huán)之前或之后。可首先制備單個的構(gòu)造單元，然后偶合一起，或者可使構(gòu)造單元前體偶合一起，在稍后階段修飾為所需分子組成?？杀Ｗo每種構(gòu)造單元的官能團以避免副反應(yīng)。酰胺鍵的形成可用標準方法實施，如在肽合成中用于氨基酸偶合10的方法。肽合成包括一種反應(yīng)物的欺基與另一種反應(yīng)物的氨基進行脫水偶合形成連接的酰胺鍵。酰胺鍵的形成可通過在偶合劑存在下使原料反應(yīng)進行，或者將羧基官能團轉(zhuǎn)化為活性形式如活性酯、混合酸酐或羧酰氯或羧酰溴。本文使用的此類偶合反應(yīng)和試劑的綜合描述可參閱關(guān)于肽化學的通用教科書，如M.Bodanszky,"PeptideChemistry",15第2修訂版，Springer-Verlag,Berlin,Germany,(1993)。形成酰胺鍵的偶合反應(yīng)實例包括疊氮法、混合碳酸-羧酸酐(氯曱酸異丁酯)法、碳二亞胺(二環(huán)己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺或水溶性碳二亞胺如iV-乙基W-[(3-二甲基氨基)丙基]碳二亞胺)法、活性酯法(如對硝基苯基、對氯苯基、三氯苯基、五氯苯基、五氟苯基、20N-幾基琥珀酰亞胺等酯)、Woodward試劑K法、l,l-羰基二咪唑(CDI或N,N'-羰基-二咪唑)法、磷試劑或氧化-還原法。可加入合適的催化劑增強一些這樣的方法，如在碳二亞胺法加入1-輕基苯并三唑、DBU(1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯)或4-DMAP。更多偶合劑是六氟磷酸(苯并三唑-l-基氧基)三-(二甲基氨基)轔，其自身或者存在1-羥基苯25并三唑或4-DMAP;或者四氟硼酸2-(1//-苯并三唑-1-基)-^，7^^',〃'-四-甲基脲翁1鹽，或六氟磷酸0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-7V，WW-四曱基脲輸鹽。這些偶合反應(yīng)可在溶液(液體相)或固體相中進行。優(yōu)選用N-乙氧基羰基-2-乙氧基-l,2-二氫喹啉(EEDQ)或N-異丁基氧基-羰基-2-異丁基氧基-1,2-二氫喹啉(IIDQ)形成酰胺鍵。與經(jīng)典肝化操作不同，EEDQ和IIDQ既不需要堿也不需要低反應(yīng)溫度。通常，該操作包括在有機溶劑(可使用多種溶劑)中使等摩爾羧基與胺組分反5應(yīng)。然后加入過量EEDQ或IIDQ,在室溫下攪拌混合物。偶合反應(yīng)優(yōu)選在惰性溶劑中進行，所述惰性溶劑例如囟代烴(如二氯甲烷、氯仿)、偶極質(zhì)子惰性的溶劑(如乙腈、二曱基曱酰胺、二甲基乙酰胺、DMSO、HMPT)、醚(如四氫呋喃(THF》。在許多情況下，偶合反應(yīng)在合適的堿存在下進行，所述堿例如叔10胺如三乙胺、二異丙基乙胺(DIPEA)、N-甲基-嗎啉、N-曱基吡咯烷、4-DMAP或1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)。反應(yīng)溫度可在0QC-50QC范圍，反應(yīng)時間可在15分鐘-24小時范圍?？杀Ｗo連接在一起的構(gòu)造單元中的官能團，以避免形成不需要的鍵?？蒷吏用的適當4呆護基團列于如Greene,"ProtectiveGroupsin15OrganicChemistry",JohnWiley&Sons,NewYork(1999)和"ThePeptides:Analysis,Synthesis,Biology",3巻，AcademicPress,NewYork(1987)中。可將羧基保護為可解離得到羧酸的酯?？墒褂玫谋Ｗo基團包括l)烷基酯如甲酯、三曱基甲硅烷基酯和叔丁酯；2)芳基烷基酯如千酯20和取代的千酯；或3)可用弱堿或弱還原方法解離的酯如三氯乙酯和苯曱酰甲酯。可將氨基用各種N-保護基團保護，例如1)?；?，如曱?；?、三氟乙酰基、鄰苯二曱?；蛯妆交酋；?；2)芳族氨基曱酸酯基，如千氧基羰基(Cbz或Z)和取代的千氧基羰25基和9-芴基曱氧基羰基(Fmoc);3)脂族氨基甲酸酯基，如叔丁氧基羰基(Boc)、乙氧基羰基、二異丙基甲氧基羰基和烯丙氧基羰基；4)環(huán)烷基氨基曱酸酯基，如環(huán)戊氧基羰基和金剛烷氧基羰基；5)烷基基團，如三苯基曱基、千基或取代的節(jié)基如4-曱氧基千基；6)三烷基甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基；和7)含巰基基團，如苯硫基羰基和二硫雜琥珀酰基。5值得關(guān)注的氨基保護基團是Boc和Fmoc。優(yōu)選在下一步偶合之前解離氨基保護基團?？砂凑毡绢I(lǐng)域已知的方法脫除N-保護基團。當用Boc基團時，選擇的試劑是三氟乙酸(純的或在二氯曱烷中)或HC1(在二氧六環(huán)或在乙酸乙酯中)。然后將所得銨鹽在偶合前中和，或者用堿性溶液(如水性緩沖液或叔胺)在二氯甲10烷或乙腈或二甲基甲酰胺內(nèi)原位中和。當用Fmoc基團時，選擇的試劑是哌啶或取代的哌啶/二曱基曱酰胺，但可用任何仲胺。在0。C-室溫、通常約15-25GC或20-22GC的溫度實施脫保護。也可保護可能干擾構(gòu)造單元偶合反應(yīng)的其他官能團。例如可將羥基保護為千基或取代的芐基醚，如4-甲氧基芐基醚、苯甲?；蛉〈?5的苯甲酰酯(如4-硝基苯甲酰酯)，或者用三烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基或叔丁基二曱基甲硅烷基)保護?？蓪⑵渌被每梢赃x擇性解離的保護基團保護。例如，當用Boc作為a-氨基保護基團時，適合用下列側(cè)鏈保護基團可用于保護其他氨基的對曱苯磺?；糠?；可用于保護羥基的千基(Bn)醚；和可20用于保護其他羧基的千基酯?；蛘弋斶x擇Fmoc保護a-氨基時，通?？山邮芤允宥』鶠榛A(chǔ)的保護基團。例如，可將Boc用于其他氨基；叔丁基醚用于羥基；和叔丁酯用于其他羧基。雖然可在合成過程的任何階段脫除任何保護基團，但優(yōu)選在大環(huán)的構(gòu)建完成之后脫除不涉及反應(yīng)步驟的任何官能團的保護基團?？筛?5據(jù)選擇的保護基團以任何方式脫除保護基團，這些方式已為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知。在羰基引入劑的存在下，可通過與烯胺(5b)反應(yīng)，用中間體(5a)制備其中X是N的式(la)中間體，所述中間體由式(la-l)表示，如以下反應(yīng)流程所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>5羰基(CO)引入劑包括光氣或光氣衍生物如羰基二咪唑(CDI)等。在一個實施方案中，使(5a)與CO引入劑在合適的堿和溶劑(可以是用于上述酰胺形成反應(yīng)的堿和溶劑)的存在下反應(yīng)。在具體實施方案中，堿是碳酸氫鹽(如NaHCCb)或叔胺(如三乙胺)等，溶劑是醚或囟代爛(如THF、CH2C12、CHC13等)。然后，加入胺(5b)，得到上一流程的10中間體(la-l)。使用類似反應(yīng)條件的備選途徑包括首先使CO引入劑與胺(5b)反應(yīng)，然后使由此形成的中間體與(5a)反應(yīng)?；蛘呖扇缦轮苽渲虚g體(la-l):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage43</formula>PG'是0-保護基團，該基團可以是本文述及的任何基團，特別是苯甲?；蛉〈谋郊柞；?-硝基苯甲酰基。在后一種情況下，可與堿金屬氫氧化物(LiOH、NaOH、KOH)在含水和水溶性有機溶劑如鏈烷醇(甲醇、乙醇)和THF的水性介質(zhì)中反應(yīng)脫除該基團，特別是當PG1是4-硝基苯甲?；鶗r，則與LiOH反應(yīng)。按照上文描述，在羰基引入劑的存在下使中間體(6a)與(5b)反應(yīng)，該反應(yīng)得到中間體(6c)。將這些中間體脫保護，特別是用上述反應(yīng)條件脫保護?？蓪⒂纱说玫降拇?6d)通過Mitsunobu反應(yīng)直接轉(zhuǎn)化為目間體(4b)反應(yīng)，該反應(yīng)得到中間體(la-l)。用上述制備酰胺的反應(yīng)條件，可通過酰胺形成反應(yīng)使中間體(7a)與以下反應(yīng)流程顯示的胺(5b)反應(yīng)，制備其中X是C的式(la)中間體，所述中間體由式(la-2)表示?；蛘呖扇缦轮苽渲虚g體(la-l):Pd是上述0-保護基團?？墒褂蒙衔拿枋龅南嗤磻?yīng)條件如上文描述形成酰胺，脫除所述保護基團PG1,如(4a)與試劑(4b)反應(yīng)引入R4。式(2a)中間體可如下制備，首先使打開的酰胺(9a)環(huán)化為大環(huán)酯(9b)，該大環(huán)酯繼而轉(zhuǎn)化為(2a):PG"是羧基保護基團，如上述羧基保護基團其中之一，特別是Cm烷基酯或芐基酯，如曱酯、乙酯或叔丁酯。(9a)至(9b)的反應(yīng)是復(fù)分解反應(yīng)，如上文描述進行。也按照上文描述的操作脫除基團PG2。當5PG，是C^烷基酯時，在水性溶劑(如C!-4鏈烷醇/水混合物)中通過堿水解(如用NaOH或優(yōu)選LiOH)脫除?？赏ㄟ^催化氫化脫除千基。在備選合成中，中間體(2a)可如下制備(10c)選擇PG1基團使得選擇性解離更趨向于(selectivelycleavable10towards)PG2。PG可以是例如甲酯或乙酯，可通過在水性介質(zhì)中用石成金屬氫氧化物處理脫除，在這種情況下PG1是例如叔丁基或節(jié)基。PG2可以是在弱酸性條件下可脫除的丁酯或者PG1可以是用強酸或通過催化氫化脫除的千酯，在后兩種情況下PG1是例如苯曱酸酯如4-硝基苯甲酸酯。5首先，使中間體(10a)環(huán)化為大環(huán)酯(10b)，脫除P&基團使(10b)脫保護為(10c),使(10c)與中間體(4b)反應(yīng)，隨后脫除羧基保護基團PG2。按照上文描述進行環(huán)化、Pd和PGS脫保護和與(4b)偶合?？稍诤铣傻娜魏坞A段引入R1基團，要么如上文描述的最后一步，要么更早，在形成大環(huán)之前。在以下流程中引入為-NH-S02R6或10-0115(如上規(guī)定)的R'基團在以上流程中，PG^口上文限定，iJ是P3基團A3(b),其中n和RS如上文限定，當X是N時，lJ也可以是氮保護基團15(PG，如上文限定)，當X是C時，1^也可以M團-COOPG2其中基團PG^是類似于PGS的羧基保護基團，但其中選擇PG^基團以使得選擇性解離更趨向于PG2。在一個實施方案中，PG"是叔丁基，PG2是曱基或乙基。其中L代表基團(b)的中間體(llc)和(lld)相當于中間體(la)，可如上文指定進一步加工。Pl與P2構(gòu)造單元的偶合5按照上文描述的操作用酰胺形成反應(yīng)連接Pl與P2構(gòu)造單元。Pl構(gòu)造單元可具有羧基保護基團PG2(如在(12b)中)或者可以已經(jīng)與Pl'基團連接(如在(12c)中)。！^是N-保護基團(PG)或上文指定的基團(b)。!^是羥基、-001或上文指定的基團-0-114。在下列任何反應(yīng)流程中，當每個反應(yīng)步驟之前I^是羥基時，可將其保護為基團-OPG1，如果需10要，接著脫保護回游離羥基官能團。如上文所述，可將羥基官能團轉(zhuǎn)化為基團-O-R4。在以上流程的操作中，使環(huán)丙基氨基酸(12b)或(12c)與P2構(gòu)造單元(12a)的酸官能團偶合，按照上述操作形成酰胺連接。得到中間體is(12d)或(12e)。當在后者中！^是基團(b)時，所得產(chǎn)物是包含上一反應(yīng)流程的一些中間體(llc)或(lld)的P3-P2-P1序列。用適合所用保護基團的條件脫除(12d)的酸保護基團，然后與上文描述的胺H2N-S02R6(2b)或與HORS(2c)偶合，再得到中間體(12e),其中-COW是酰胺或酯基。當I^是N-保護基團時，可將其脫除得到中間體(5a)或(6a)。在一個實施方案中，該反應(yīng)的PG是BOC基團，PG"是甲基或乙基。另外當！^是羥基時，原料(12a)是Boc-L-羥基脯氨酸。在具體實施方案中，PG是BOC,PG2是甲基或乙基，L3是-0-R4。在一個實施方案中，1/是基團(b),這些反應(yīng)涉及P1與P2-P3偶合，得到上文述及的中間體(la-l)或(la)。在另一個實施方案中，L2是上文指定的N-保護基團PG，偶合反應(yīng)得到中間體(12d-l)或(12e-l)，可用上述反應(yīng)條件從中脫除基團PG，分別得到中間體(12-f)或(12g),這些中間體包括上文指定的中間體(5a)和(6a):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>10在一個實施方案中，以上流程中的基團l代表可引入原料(12a)上的基團-OPG1，其中l(wèi)^是羥基。在這種情況下，選擇PGW吏得選擇性解離更趨向于PG的基團L2。通過類似方法，如以下流程所列出，使其中X是C的P2構(gòu)造單元(為環(huán)戊烷或環(huán)戊烯衍生物)與Pl構(gòu)造單元連接，其中R1、R2、L315如上定義，PG2和PG2a是羧基保護基團。通常選擇PG2a使得選擇性解離更趨向PG2。脫除(13c)的PG^基團得到中間體(7a)或(8a)，可使其與上述(5b)反應(yīng)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>在一個具體實施方案中，當X是C時，W是H,當X與攜帶R2的碳通過單鍵連接(P2為環(huán)戊烷部分)時，PG"與1^結(jié)合一起形成鍵,P2構(gòu)造單元由下式代表類似于上述方法，使雙環(huán)酸(14a)分別與(12b)或(12c)反應(yīng)得到(14b)和(14c),其中內(nèi)酯打開得到中間體(14c)和(14e)。該內(nèi)酯可使用酯水解方法打開，例如使用上述用于i威脫除(9b)中P^基團的反應(yīng)條件，特別是使用堿性條件，例如堿金屬氫氧化物(如NaOH、KOH,10特別是LiOH)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula>可按照下文描述進一步處理中間體(14c)和(14e)P3與P2構(gòu)造單元的偶合對于具有吡咯烷部分的P2構(gòu)造單元，按照上文關(guān)于(5a)與(5b)偶合描述的操作，用氨基甲酸酯形成反應(yīng)連接P3與P2或者P3與P2-P1構(gòu)造單元。以下反應(yīng)流程表示具有吡咯烷部分的P2單元偶合的通用方法，其中l(wèi)7如上文指定，1^M團-0-PG2、基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula>或基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula>在一個實施方案中，(15a)中的L^狄團-OPG2,可脫除PGS基團，使所得酸與環(huán)丙基氨基酸(12a)或(12b)偶合，得到中間體(12d)或(12e)其中L2是基團(d)或(e)。以下流程顯示P3單元與P2單元或與P2-P1單元偶合的通用方法，其中P2是環(huán)戊烷或環(huán)戊烯。L^和L"如上定義。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>在一個特別的實施方案中，匸及1^一起可形成如(14a)中的內(nèi)酯橋，P3單元與P2單元的偶合如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>f14a、酰胺形成反應(yīng)10雙環(huán)內(nèi)酯(14a)與(5b)進行酰胺形成反應(yīng)，形成酰胺(16c),其中將內(nèi)酯橋開環(huán)成(16d)。酰胺形成及內(nèi)酯開環(huán)反應(yīng)的反應(yīng)條件如上下文所述。中間體(16d)可繼而如上述所述偶合至Pl基團。以上流程的反應(yīng)用上文所述關(guān)于(5a)、(7a)或(8a)與(5b)反應(yīng)的相同方法進行，特別是其中L"M團(d)或(e)的以上反應(yīng)相當于上文描15述的(5a)、(7a)或(8a)與(5b)的反應(yīng)。用于制備式(I)化合物的構(gòu)造單元Pl、Pl'、P2和P3可用本領(lǐng)域已知的中間體制備。下文更詳細地描述多種這樣的合成方法?？梢允紫戎苽鋯蝹€構(gòu)造單元然后偶合一起，或者可將構(gòu)造單元前體偶合一起，在較后階段修飾為所需分子組合物。20可保護每個構(gòu)造單元的官能團以避免副反應(yīng)。P2構(gòu)造單元的合成P2構(gòu)造單元包含被基團-0-114取代的吡咯烷、環(huán)戊烷或環(huán)戊烯部含吡咯烷部分的P2構(gòu)造單元可用市售獲得的羥基脯氨酸衍生。可按照以下流程所示制備包含環(huán)戊烷環(huán)的P2構(gòu)造單元。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>例如，可用3,4-雙(甲氧基羰基)-環(huán)戊酮(17a)制備雙環(huán)酸(17b),該方法例如描述于Rosenquist等，ActaChem.Scand.46(1992)101127-1129。該方法的第一步包括在溶劑(如甲醇)中用還原劑(如硼氬化鈉)還原酮基，接著水解酯，最后用內(nèi)酯形成方法(特別是在弱堿如吡啶的存在下用乙酸酐)閉環(huán)，得到雙環(huán)內(nèi)酯(17b)。然后可通過引入適當?shù)聂然Ｗo基團(如上文指定的基團PG"保護(17b)的羧酸官能團，由此得到雙環(huán)酯(17c)?；鶊FPG"對酸特別敏感(如叔丁基)，通過15例如在溶劑如二氯甲烷中，在路易士酸存在下用異丁烯處理，或者在堿(如叔胺，如二曱氨基吡，定或三乙胺)存在下用二碳酸二叔丁酯處理引入。用上文描述的反應(yīng)條件、特別是用氫氧化鋰將(17c)的內(nèi)酯開環(huán)，得到酸(17d),可使其再與Pl構(gòu)造單元偶合反應(yīng)。還可保護(17d)中的游離酸，優(yōu)選使得選擇性解離更趨向于PGZ的酸保護基團PG2a，可將輕基官能團轉(zhuǎn)化為基團-OPG1或基團-O-R4。脫除基團PG2后得到的產(chǎn)物是中間體(17g)和(17i)，相當于上文指定的中間體(13a)或(16a)。通過拆分以上反應(yīng)順序的中間體可制備具有特定立體化學的中間體。例如，可用本領(lǐng)域已知的方法拆分(17b)，如通過與旋光性^喊的5成鹽作用或者通過手性層析，可將所得立體異構(gòu)體按照上文描述進一步處理。(17d)中的OH和COOH基團處于順式位置。通過使用引入倒置立體化學的OPG1或-O-R4的反應(yīng)的特定試劑，使攜帶OH官能團的碳的立體化學倒置，可制備反式類似物，如用Mitsunobu反應(yīng)。在一個實施方案中，使中間體(17d)與Pl單元(12b)或(12c)偶合，10該偶合反應(yīng)相應(yīng)于(13a)或(16a)與相同Pl單元的偶合，使用相同條件。接著引入如上文描述的-0-R4取代基，然后脫除酸保護基團PG2，得到中間體(8a-l),該化合物是中間體(7a)的亞類或者中間體(16a)的部分?？墒姑摮齈GZ的反應(yīng)產(chǎn)物進一步與P3構(gòu)造單元偶合。在一個實施方案中，(17d)的PGS是可在酸性條件下(如用三氟乙酸)脫除的叔丁15基。(17d)可按照以下流程所示制備不飽和P2構(gòu)造單元，即環(huán)戊烯環(huán)。(17a)(19a>(19b>可按照Dolby等在J.Org.Chem.36(1971)1277-1285中的描述進加行3,4-雙(甲氧基羰基)環(huán)戊酮(17a)的溴化-清除反應(yīng)，接著用還原劑(如硼氫化鈉)還原酮官能團，得到環(huán)戊烯醇(19a)。在溶劑(如二氧六環(huán)和水的混合物)中用如氫氧化鋰進行選擇性酯水解，得到羥基取代的環(huán)戊烯醇單酯(19b)?？砂凑找韵铝鞒趟局苽淦渲蠷2還可不為氫的不飽和P2構(gòu)造單元。(20g)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>(20h)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>(20i)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>將市售獲得的3-甲基-3-丁烯-l-醇(20a)氧化，特別是用氧化劑如氯鉻酸吡啶鏡氧化，得到(20b),將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的甲酯，如在曱醇中用乙酰氯處理，然后用溴進行溴化反應(yīng)，得到a-溴酯(20c)。接著可使后者與通過(20d)的成酯反應(yīng)得到的鏈烯基酯(20e)縮合。(20e)的酯優(yōu)10選叔丁酯，所述叔丁酯可用相應(yīng)的市售獲得的酸(20d)制備，如在堿如二甲氨基吡啶的存在下用二碳酸二叔丁酯處理。在溶劑(如四氫呋喃)中，將中間體(20e)用堿(如二異丙基氨基鋰)處理，與(20c)反應(yīng)得到烯基二酯(20f)。通過上文描述的烯烴復(fù)分解反應(yīng)使(20f)環(huán)化，得到環(huán)戊烯衍生物(20g)。可用Jacobsen不對稱環(huán)氧化法使(20g)進行立體選擇15性環(huán)氧化，得到環(huán)氧化物(20h)。最后，在堿性條件(如加入堿特別是DBN(1,5-二氮雜雙環(huán)-[4.3.0]壬-5-烯))下進行環(huán)氧化物開環(huán)反應(yīng)，得到醇(20i)。可任選還原中間體(20i)的雙鍵，如用催化劑(如鈀/碳)催化氫化，得到相應(yīng)的環(huán)戊烷化合物。可脫除叔丁酯得到相應(yīng)的酸，接著使其與Pl構(gòu)造單元偶合?？稍诒景l(fā)明化合物合成的任何合適階段將-O-R4基團引入吡咯烷、環(huán)戊烷或環(huán)戊烯環(huán)上。一種方法是首先將-0-R"基團引入所述環(huán)上，接著加入其他所需構(gòu)造單元，即P1(任選包含P1'尾)和P3，接著形成大環(huán)。另一種方法是使不帶-0-114取代基的構(gòu)造單元P2與各Pl5和P3偶合，在大環(huán)形成之前或之后加入-0-114基團。在后一種操作中，可用羥基保護基團PG保護具有羥基的P2部分。通過類似于上述由(4a)開始合成式(I)的方法使羥基取代的中間體(21a)或(21b)與中間體(4b)反應(yīng)，可將114基團引入至構(gòu)造單元P2上。這些反應(yīng)如以下流程所示，其中I如前定義且L^和L"各自獨立代10表鞋基、羧基保護基團-OPG卩或-OPG2或LS也可代表P1基團如上定義的基團(d)或(e),或LSa也可代表P3基團如上定義的基團(b)?；鶊FPG2及PG2a如上定義。其中基團1/和L"是PG2或PG2a，選擇基團使得選擇性解離更趨向于另一者。例如，LS及L"中一個可為甲基或乙基且另一個是苯甲基或叔丁基。IS在一個實施方案中，(21a)中的1^是PG且lS是-OPG2，或(21d)中的L5a是-OPG2且L5是-OPG2且PG2基如上所述脫去。(21b-1)(21c>在另一個實施方案中，基團l^是BOC，1^是羥基，原料(21a)是市售獲得的BOC-羥基脯氨酸或其任何其他立體異構(gòu)形式，如BOC-L-羥基脯氨酸，特別是后者的反式異構(gòu)體。當(21b)的y是羧基保護基團時，可按照上文描述的操作脫除為(21c)。在另一個實施方案中，(21b-l)的PG是Boc，PG是低級烷基酯，特別是曱酯或乙酯?？赏ㄟ^標準方法將后一種酯水解為酸，如在甲醇中用鹽酸或者用堿金屬氫氧化物(如NaOH,特別是LiOH)進行酸解。在另一個實施方案中，可將羥基取代的環(huán)戊烷或環(huán)戊烯類似物(21d)轉(zhuǎn)化為(21e),其中！/和LSa是-OPGS或-OPG2、通過脫除基團PGZ可將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酸(21f)。脫除(21e-l)的PG"得到類似中間體。為異會啉衍生物的中間體(4b)可使用本領(lǐng)域已知的方法制備。例如，US2005/0143316提供了各種合成R4-OH或R4-LG中間體的異喹5啉的方法。合成這類異壹啉的方法在N.Briet等在Tetrahedron,2002,5761中有述并表示如下，其中R4a、R"b及R"'是異p奎啉部分上的具有R、基團上的取代基的文中定義的取代基。通過三個步驟將肉桂酸衍生物(22b)轉(zhuǎn)化成l-氯異喹啉。隨后可10將所得的氯異喹啉(22e)如文中所述與羥基吡咯烷、羥基環(huán)戊烷或輕基環(huán)戊烯衍生物偶合。第1步驟中，將肉桂酸(22b)中的羧基活化，例如通過在堿存在下用氯曱酸d-6烷基酯(特別是氯甲酸甲酯或氯曱酸乙酉旨)處理。隨后所得的混合酸酐用疊氮化鈉處理，制得?；B氮化物(22c)。數(shù)種其他的方法可用于從羧酸形成?；B氮化物，例如在質(zhì)子15惰性的溶劑(如二氯甲烷)中、堿存在下所述羧酸可用二苯基磷酰基疊氮化物(DPPA)處理。下一步驟中，特別是在高沸點的溶劑(如二苯醚)中通過加熱?；B氮化物將酰基疊氮化物(22c)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的異喹啉酮(22d)。起始的肉桂酸(22d)是市售或可由相應(yīng)的苯甲醛(22a)與丙二酸或其衍生物直接縮合，或使用Wittig反應(yīng)得到。通過用囟化劑(例如磷酰氯)處理該中間體異會啉酮(22d)，可轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的1-氯-異喹啉。為異喚啉的R、基團還可按照K.Hirao,R.Tsuchiya,Y.Yano,H.Tsue在Heterocycles42(1)1996,415-422中所述的方法制備廣、OMe(23c)(23d)(23e)另一用于合成異喚啉環(huán)系的方法是Pomeranz-Fritsh法。此方法首先將苯甲醛衍生物(23a)轉(zhuǎn)化為官能化的亞胺(23b),隨后在加熱下通過酸處理將其轉(zhuǎn)化成異壹啉環(huán)系。此方法特別用于制備星號標示的C8位上取代的異查啉中間體。在兩步法中可將中間體異喹啉(23c)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的l-氯喹啉(23e)。第一步包括通過在適當?shù)娜軇?如二氯甲烷)中用過氧化物(如間-氯過苯曱酸)處理異喹啉(23c)形成異喹啉N-氧化物(23d)。通過用卣化劑(如磷酰氯)處理，將中間體(23d)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的l-氯異喹啉。另一種用于合成異喹啉環(huán)系的方法如以下流程所示。-j一20(24a)o(24b)OH此方法中，通過在溶劑(如THF)中用強堿(如叔丁基鋰)處理，得到鄰-烷基苯曱酰胺衍生物(24a)的陰離子形式，隨后其與腈衍生物縮合，得到異喹啉(24b)。通過上述方法可將后者轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的1-氯異喹啉。(Ma)中的R，及R"是烷基，特別是Cw烷基(如曱基或乙基)。以下流程表示了合成異喹啉的另一種方法。使用如上所述的強堿將中間體(24a)脫質(zhì)子。R，及R"如上定義。所得的中間體陰離子與酯(25a)縮合，得到酮中間體(25b)。在隨后的反應(yīng)中，后一中間體(25b)與氨或銨鹽(如醋酸銨)在高溫下反應(yīng)，制得5異喹啉酮(24b)。各種具有通式(25a)的羧酸可用于上述合成。這些酸是市售或通過本領(lǐng)域已知的方法制備。采用由Berdikhina等在Chem.Heterocycl.Compd.(Engl.Tmnsl.)(1991),427-433中所述的方法來制備2-(取代的)氨基g-氨基噻唑衍生物(25a-1)的實例如以下反應(yīng)流程所示，該反10應(yīng)流程示例了2-羧基-4-異丙基噻唑(25a-l)的制備R4cR4c將硫代草氨酸乙酯(26a)與(3-溴酮(26b)反應(yīng)形成瘞唑基羧酸酯(26c),將其水解成相應(yīng)的酸(25a-l)。在這些中間體中的乙基酯可被其他的如上定義的羧基保護基團PGS替代。在以上流程中，R"如上定15義且特別是為d—4烷基，更特別是異丙基。在適當?shù)膲A(特別是LiHMDS)和溴存在下，溴酮(26b)可由3-甲基-丁-2-酮(MIK)與硅烷基化劑(如TMSC1)制備。另一羧酸(25a)、特別是取代的氨基蓉唑羧酸(25a-2)的合成如下所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>在堿(如二異丙基乙基胺)存在下、溶劑(如二氯曱烷)中，通過適當?shù)陌?27a)與異硫氰酸叔丁酯反應(yīng)，接著在酸性條件下除去叔丁基可形成具有各種取代基R，特別是Cw烷基)的硫脲(27c)。隨后硫脲衍生物(27c)與3-溴丙酮酸縮合，得到瘞唑甲酸(25a-2)。另一種制備異#啉的方法如下流程所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>本方法的第一步，將鄰-烷基芳基亞胺衍生物(28a)置于脫質(zhì)子條件下(如仲丁基鋰、THF中)，將所得的陰離子與活化的羧酸衍生物(如10Weinreb酰胺(28b))縮合。在加熱下所得的酮基亞胺(28c)通過與醋酸銨縮合轉(zhuǎn)化成異喚啉(28d)。將如此得到的異喚啉通過文中所述方法轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的l-氯異喹啉。文中所述異喹啉，可原樣官能化或可以結(jié)合至式(I)化合物或文中所提及的任何中間體中的羥基-吡咯烷、羥基環(huán)戊烷或羥基環(huán)戊烯部15分上進一步官能化。此類官能化反應(yīng)的實例如下所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>上述流程顯示通過用醇化鈉或醇化鉀在衍生該醇化物的醇溶劑中處理(29a)將l-氯-6-氟-異喹啉轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的l-氯-6-C-6烷氧基-異喹啉部分(29b)。上述流程中的1^代表卣素或基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>上述流程中的R代表d-6烷基，LG是離去基團。在一個實施方案中，LG是氟。L7和LS代表各種取代基，其可在P2部分的這些位置上連接，特別是如OLS的基團，或L8可是Pl基團且l7是P3基團，或17和LS—起可形成式(I)化合物的大環(huán)系統(tǒng)的其余部分。下述流程提供了通過Suzuki反應(yīng)修飾異會啉的實例?？蓪⑦@些偶合應(yīng)用于在環(huán)系的各位置上官能化異喹啉，前提條件是將所述環(huán)適當?shù)鼗罨蚬倌芑?，例如用氯活化?lt;formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>此反應(yīng)程序由l-氯異喹啉(30a)開始，隨后在用過氧化物(如間氯過苯甲酸)處理后將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的N-氧化物(30b)。通過用卣化劑(如磷酰氯)處理將后一中間體轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的1,3-二氯-異喹啉(30c)。使用5文中所述引入-0-R、基團的方法，可將中間體(30c)與中間體(30d)偶合，其中L6^^團PG(當X是N時)，或L6^&團-COOPG2(當X是C時)，制得中間體(30e)。在鈀催化劑和堿存在下、溶劑(如THF、甲苯或偶極性質(zhì)子惰性的溶劑如DMF)中，使用Suzuki偶合反應(yīng)與芳基硼酸偶合，將中間體(30e)衍生，得到C3-芳基異喹啉中間體(30f)。在10該偶合反應(yīng)中也可使用雜芳基硼酸，得到C3-雜芳基異喹啉。異喹啉系統(tǒng)與芳基或雜芳基的Suzuki偶合反應(yīng)也可在制備式(I)化合物的較后合成階段中使用。還可通過使用其他的鈀催化的反應(yīng)將該異喹啉環(huán)系官能化，例如US2005/1043316中所述的Heck、Sonogashira或Stille偶合反應(yīng)。15Pl構(gòu)造單元的合成用于制備Pl片段的環(huán)丙烷M酸可市售獲得或可用本領(lǐng)域已知的方法制備。具體來講可根據(jù)描述于WO00/09543的方法或按照以下流程所20示獲得氨基-乙烯基-環(huán)丙基乙酯(12b),其中PG"是上文指定的羧基保護基團(12b-1>(12b)在堿產(chǎn)物(produces)(31b)的存在下用1,4-二卣代-丁烯處理市售獲得或容易獲得的亞胺(31a),水解后得到具有與羧基處于順式的烯丙基取代基的環(huán)丙基氨基酸(12b)。拆分對映體混合物(12b),得到(12b-l)。5用本領(lǐng)域已知的方法進行拆分，如酶分離；用手性酸結(jié)晶；或化學衍生；或通過手性柱層析。可使中間體(12b)或(12b-l)與上文描述的適當?shù)腜2衍生物偶合。在形成酯或酰胺的標準條件下，通過使氨基酸(32a)分別與適當?shù)拇蓟虬贩磻?yīng)，可制備P1構(gòu)造單元，所述構(gòu)造單元用于制備其中W是10-ORS或-NH-S02RS的通式(I)化合物。通過引入N-保護基團PG和脫除PG2制備環(huán)丙基氨基酸(32a)，按照以下反應(yīng)流程將氨基酸(32a)轉(zhuǎn)化為酰胺(12c-l)或酯(12c-2),這是中間體(12c)的亞組，其中PG如上文指定。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>(32a)與胺(2b)的反應(yīng)是酰胺形成過程。與(2c)的類似反應(yīng)是酯形成反應(yīng)。兩者都可按照上文描述的方法進行。該反應(yīng)得到中間體(32b)或(32c),通過如上文描述的標準方法從中脫除氨基保護基團。這樣繼而得到所需中間體(12c-l)。原料(32a)可用上文述及的中間體(12b)通過5首先引入N-保護基團PG然后脫除基團PG"制備。在一個實施方案中，使(32a)與(2b)反應(yīng)，做法是，在溶劑(如THF)中用偶合劑(如N,N'-羰基二咪唑(CDI)等)處理氨基酸，然后在堿(如1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU》的存在下與(2b)反應(yīng)。或者可在堿(如二異丙基乙胺)的存在下用(2b)處理氨基酸，然后用偶合劑(如10六氟磷酸苯并三唑-l-基-氧基-三-(吡咯烷-l-基)轔(市售獲得的乂80@)處理以引入磺酰胺基團。然后可使中間體(12c-l)或(12c-2)與上文描述的適當?shù)母彼?、環(huán)戊烷或環(huán)戊烯衍生物偶合。P3構(gòu)造單元的合成P3構(gòu)造單元可市售獲得或者可用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。以下流程顯示這些方法中的一種，該方法使用單酰化胺，如三氟乙酰胺或Boc-保護的胺。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>在以上流程中，R與CO基團一起形成N-保護基團，特別是R是叔丁氧基、三氟甲基；E和n如上文限定，LG是離去基團，特別是面素，如氯或溴。將單酰化胺(33a)用強堿如氬化鈉處理，接著與試劑LG-Cs-s鏈烯基(33b)特別是卣代C5-8鏈烯基反應(yīng)，形成相應(yīng)被保護的胺(33c)。使(33c)脫保護得到(5b)，其是構(gòu)造單元P3。脫保護將取決于官能團R，因此如果11是#又丁氧基，則可用酸處理如三氟乙酸完成相應(yīng)的Boc-保護的胺的脫保護?；蛘撸擱是例如三氟曱基時，則用堿如氫氧化鈉完成R基團的脫除。以下流程說明還有另一種制備P3構(gòu)造單元的方法，也就是伯C5-8烯基胺的Gabriel合成，可用堿(如NaOH或KOH)和上文指定的(33b)處理鄰苯二甲酰亞胺(34a)，接著水解中間體N-烯基酰亞胺，得到伯Cs-8烯基胺(5b-l)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage65</formula>例如，可將氨基N-烷基化，硝基還原為氨基，卣原子交換為另一種鹵原子。按照本領(lǐng)域已知將三價氮轉(zhuǎn)化為其N-氧化物形式的方法，可將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的N-氧化物形式。所述N-氧化反應(yīng)通?？赏?5過使式(I)原料與適當?shù)挠袡C或無機過氧化物反應(yīng)進行。適當?shù)臒o才幾過氧化物包括例如過氧化氫、堿金屬或堿土金屬過氧化物(如過氧化鈉、過氧化鉀)；適當?shù)挠袡C過氧化物可包括過氧酸例如過氧苯甲酸或卣素取代的過氧苯甲酸如3-氯過氧苯曱酸、過氧鏈烷酸(如過氧乙酸)、烷基過氧化氫(如叔丁基過氧化氫)。合適的溶劑是例如水、低級醇(如20乙醇等)、烴(如甲苯)、酮(如2-丁酮)、卣代烴(如二氯甲烷)及此類溶劑的混合物。通過應(yīng)用本領(lǐng)域已知的方法，可得到式(I)化合物的純立體化學異構(gòu)形式?？蓪⒎菍τ丑w用物理方法分離，例如選擇性結(jié)晶和層析技術(shù)，如逆流分配、液相層析等。在以上流程中，n如上文限定。按照本領(lǐng)域已知的官能團轉(zhuǎn)化反應(yīng)，可將式(I)化合物相互轉(zhuǎn)化。獲得的式(I)化合物可能是對映體的外消旋混合物，可將所述混合物用本領(lǐng)域已知的拆分方法彼此分離。通過分別與合適的手性酸或手性堿反應(yīng)，可將足夠堿性或酸性的外消旋式(I)化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的非對映體鹽形式。然后將所述非對映體鹽形式分離，例如通過選擇性或5分步結(jié)晶，用堿或酸從中釋;^文對映體。分離式(I)化合物對映體形式的備選方法包括液相層析，特別是用手性固定相的液相層析。所述純立體化學異構(gòu)形式也可衍生自適當原料的相應(yīng)的純立體化學異構(gòu)形式，前提是立體特異性地發(fā)生反應(yīng)。優(yōu)選如果需要特異性立體異構(gòu)體，可通過立體特異性制備方法合成所述化合物。這些方法可有利地應(yīng)用對10映體純的原料。在又一個方面，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的本文指定的式(I)化合物，或本文指定的式(I)化合物的任何亞組的化合物，以及藥學上可接受的載體。在本文中治療有效量是在受感染患者或面臨感染危險的患者中，足夠預(yù)防性對抗、穩(wěn)定或15減少病毒感染特別是HCV病毒感染的量。在還有又一方面，本發(fā)明涉及制備本文指定的藥物組合物的方法，所述方法包括使藥學上可接受的載體與治療有效量的本文指定的式(I)化合物或者本文指定的式(I)化合物的任何亞組的化合物均勻混合。因此，可將本發(fā)明化合物或其任何亞組配制為用于給藥的各種藥20物形式。適當?shù)慕M合物是指通常用于全身給藥的藥物的所有組合物。為了制備本發(fā)明的藥物組合物，使有效量的任選呈加成鹽形式或金屬絡(luò)合物的特定化合物作為活性成分，與藥學上可接受的載體緊密均勻混合，根據(jù)給藥所需的制劑形式，所述載體可采用多種形式。這些藥物組合物優(yōu)選采用合適的單位劑型，特別是適合口服、直腸、經(jīng)皮或25胃腸外注射給藥。例如，制備口服劑型的組合物時，可用任何常用的藥用介質(zhì)，例如在口服液體制劑如混懸液、糖漿劑、酏劑、乳劑和;容液的情況下如用水、二醇、油、醇等；或在散劑、丸劑、膠嚢劑和片劑的情況下用固體載體如淀粉、糖、高嶺土、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。因為容易給藥，所以片劑和膠嚢劑代表最優(yōu)選的口服劑量單位形式，在這種情況下顯然用固體藥用載體。對于胃腸外組合物，盡管例如為了幫助溶解可包括其他成分，但載體將通常包括無菌水(至少大部分)。例如可制備注射液，其中載體包括鹽水溶液、糖溶液或鹽5水和糖溶液混合物。也可制備注射混懸液，在這種情況下可用適當?shù)囊后w載體、懸浮劑等。還包括意欲在使用前即時轉(zhuǎn)化為液體形式制劑的固體形式制劑。在適合經(jīng)皮給藥的組合物中，載體任選包括滲透增強劑和/或合適的濕潤劑，任選與比例較小的任何性質(zhì)的合適添加劑合并，所述添加劑對皮膚無顯著的有害效應(yīng)。10也可通過本領(lǐng)域所用通過經(jīng)口吸入或吹入給藥的方法和制劑通過這種途徑給予本發(fā)明化合物。因此，通常可將本發(fā)明化合物以溶液、混懸液或干粉劑的形式給予肺，優(yōu)選溶液。為了通過經(jīng)口吸入或吹入傳遞溶液、混懸液或干粉劑而開發(fā)的任何系統(tǒng)都適合本發(fā)明化合物的給藥。15因此，本發(fā)明還提供適合通過經(jīng)口吸入或吹入給藥的藥物組合物，所述藥物組合物包含式(I)化合物和藥學上可接受的載體。優(yōu)選通過吸入噴霧或霧化給藥的溶液給予本發(fā)明化合物。為了便于給藥和劑量的均勻性，特別優(yōu)選將上述藥物組合物配制為單位劑型。用于本文的單位劑型指適合作為單一劑量的物理離散單20位，各單位包含與所需藥用載體結(jié)合的經(jīng)計算可產(chǎn)生所需治療效應(yīng)的預(yù)定量活性成分。此類單位劑型的實例是片劑(包括刻痕片或包衣片)、膠嚢劑、丸劑、栓劑、散劑包(powderpackets)、糯米紙嚢劑、注射溶液或混懸液等及其分隔的多劑量形式(segregatedmultilples)。式(I)化合物顯示抗病毒特性?？捎帽景l(fā)明化合物和方法治療的病25毒感染及其相關(guān)疾病包括由HCV及其他致病黃病毒引起的感染，所述病毒如黃熱病病毒、登革熱(l-4型)病毒、圣路易士腦炎病毒、日本腦炎病毒、墨累谷腦炎病毒、西尼羅病毒和庫京病毒。HCV相關(guān)性疾病包括進行性肝纖維化、導致肝硬化的炎癥和壞死、末期肝病和HCC;與其他致病黃病毒有關(guān)的疾病包括黃熱病、登革熱、出血熱和腦炎。而且大量本發(fā)明化合物具有抗HCV突變4^的活性。此外，許多本發(fā)明化合物顯示良好的藥動學分布曲線，在生物利用度方面具有吸引人的特性，包括可接受的半衰期、AUC(曲線下面積)和峰值，不5存在如不能迅速起效和組織停留不充分的不良現(xiàn)象。在基于Lohmann等人(1999)Science285:110-113的細胞HCV復(fù)制子系統(tǒng)中，并且按照Krieger等人(2001)JournalofVirology75:4614-4624(引入本文以供參考)的描述做進一步改進，測試式(I)化合物的抗HCV的體外抗病毒活性，在實施例部分中對此進一步舉10例說明。該模型雖然不是完全的HCV感染模型，但是已經(jīng)被廣泛接受為目前可使用的最有力和高效的自主HCVRNA復(fù)制才莫型。在該細胞模型中表現(xiàn)出抗-HCV活性的化合物視為候選物，來用于治療哺乳動物中HCV感染的進一步開發(fā)。應(yīng)當理解，區(qū)別開以下兩類化合物是很重要的特異性地干擾HCV功能的化合物，以及在HCV復(fù)制子15模型中表現(xiàn)細胞毒性或細胞抑制作用，并從而引起HCVRNA或相關(guān)報道基因酶濃度下降的化合物。在本領(lǐng)域中，用于評估細胞毒性的試驗是已知的，其基于例如線粒體酶的活性，使用產(chǎn)生熒光的氧化還原染料例如刃天青。此外，用細胞計數(shù)篩選來評估相關(guān)報道基因活性，例如螢火蟲熒光素酶的非選擇性抑制。可通過其表達依賴于構(gòu)成型活20性基因啟動子的熒光素酶報道基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染來裝配合適的細胞類型，并且這樣的細胞可用作計數(shù)篩選以消除非選擇性抑制劑。由于具有抗病毒特性、特別是抗HCV特性，所以式(I)化合物或其任何亞組、其前藥、N-氧化物、加成鹽、季胺、金屬絡(luò)合物和立體化學異構(gòu)形式，可用于治療受病毒感染特別是HCV感染的個體，并25用于預(yù)防這些感染。一般而言，本發(fā)明化合物可用于治療,皮病毒特別是黃病毒如HCV感染的溫血動物。因此本發(fā)明化合物或其任何亞組可作為藥物使用。所述作為藥物的用途或治療方法包括以有效對抗與病毒感染特別是HCV感染有關(guān)的疾病的量全身性給予病毒感染的患者或易感染病毒的患者。本發(fā)明還涉及本化合物或其任何亞組在制備用于治療或預(yù)防病5毒感染特別是HCV感染的藥物中的用途。本發(fā)明還涉及治療被病毒感染或面臨被病毒特別是HCV感染的危險的溫血動物的方法，所述方法包括給予抗病毒有效量的本文指定的式(I)化合物，或者本文指定的式(I)化合物任何亞組的化合物。而且，可將目前已知的抗HCV化合物如干擾素-a(IFN-a)、聚乙10二醇化干擾素-a和/或利巴韋林與式(I)化合物的組合用作聯(lián)合療法的藥物。術(shù)語"聯(lián)合療法"涉及必須包含(a)式(I)化合物和(b)任選另一種抗HCV化合物的產(chǎn)物，作為組合制劑同時、單獨或按順序用于治療HCV感染，特別是治療HCV感染?？笻CV化合物包括選自下列的藥物HCV聚合酶抑制劑、HCV15蛋白酶抑制劑、HCV生命周期中另一靶位的抑制劑和免疫調(diào)節(jié)劑、抗病毒劑及其組合。HCV聚合酶抑制劑包括但不限于NM283(valopicitabine)、R803、JTK-109、JTK國003、HCV-371、HCV-086、HCV-796和R隱1479。HCV蛋白酶抑制劑(NS2-NS3抑制劑和NS3-NS4A抑制劑)包括20但不限于WO02/18369的化合物(如參閱273頁笫9-22行和274頁第4行-276頁第11行)；BILN-2061、VX-950、GS-9132(ACH-806)、SCH-503034和SCH-6。可使用的其他藥物公開于WO-98/17679、WO-00/056331(Vertex);WO98/22496(Roche);WO99/07734(BoehringerIngelheim)、WO2005/073216、WO2005073195(Medivir)25和結(jié)構(gòu)上相似的藥物。HCV生命周期中其他靶位的抑制劑，包括NS3解旋酶；金屬蛋白酶抑制劑；反義寡核苦酸抑制劑，如ISIS-14803、AVI-4065等；siRNA's如SIRPLEX-140-N等；載體編碼的短發(fā)夾RNA(shRNA);DNAzymes;HCV特異性核酶，如heptazymeRPI.13919等；侵入抑制劑，如HepeX-C、HuMax-HepC等；a糖普酶抑制劑，如西戈斯韋、UT-231B等；KPE-02003002;和BIVN401。免疫調(diào)節(jié)劑包括但不限于天然和重組干擾素同種型化合物，包5括a-干擾素、P-干擾素、y-干擾素、co-干擾素等，例如IntronA㊣、Roferon-A、Canferon-A300、Advaferon、Infergen、Humoferon、SumiferonMP、Alfaferone、IFN-beta、Feron⑧等；聚乙二醇衍生的(聚乙二醇化)干擾素化合物，例如PEG干擾素-a-2a(Pegasys)、PEG干擾素-a-2b(PEG-Intron)、聚乙二醇化IFN-a-conl等；干擾素10化合物長效制劑和衍生物，例如白蛋白融合的干擾素albuferona等；刺激干擾素在細胞內(nèi)合成的化合物，例如瑞喹莫德等；白介素類；增強1型輔助T細胞反應(yīng)產(chǎn)生的化合物，如SCV-07等；TOLL樣受體激動劑如CpG-10101(actilon)、艾沙托立賓等；胸腺肽a-l;ANA-245;ANA-246;二鹽酸組胺；丙帕4者；tetrachlorodecaoxide;15聚肌胞；IMP-321;KRN-7000;抗體，如civacir、XTL-6865等；以及預(yù)防和治療疫苗，如InnoVacC、HCVE1E2/MF59等。其他抗病毒藥包括但不限于利巴韋林、金剛烷胺、病毒唑(viramidine)、硝哇尼特；替比夫定；NOV-205;taribavirin;內(nèi)核糖體侵入抑制劑；廣譜病毒抑制劑，如IMPDH抑制劑(如US5，807，876、20US6,498,178、US6，344,465、US6,054,472、W097觸28、WO98/40381、WO00/56331的化合物和霉酚酸及其衍生物，包括但不限于VX-950、美泊地布(VX-497)、VX-148和/或VX-944);或者上述任何藥物的組合。因此，為了對抗或治療HCV感染，可將式(I)化合物與其他藥物25—起聯(lián)合給藥，所述藥物例如為干擾素-a(IFN-a)、聚乙二醇化干擾素-a和/或利巴韋林，以及基于靶向抗HCV表位抗體、小干擾RNA(SiRNA)、核酶、DNAzymes、反義RNA的治療劑，如NS3蛋白酶、NS3解旋酶和NS5B聚合酶的小分子拮抗劑。因此，本發(fā)明涉及如上文限定的式(I)化合物或其任何亞組在制備用于抑制感染HCV病毒的哺乳動物的HCV活性的藥物中的用途，其中所述藥物用于聯(lián)合療法，所述聯(lián)合療法優(yōu)選包含式(I)化合物和另一種HCV抑制化合物，如(聚乙二醇化)IFN-a和/或利巴韋林。5在還有另一方面，提供本文指定的式(I)化合物與抗HIV化合物的組合。后一種化合物優(yōu)選對藥物代謝和/或藥動學具有改善生物利用度的積極作用的HIV抑制劑。此類HIV抑制劑的實例是利托那韋。這樣，本發(fā)明還提供一種組合，所述組合包含(a)式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其藥學上可接受的鹽；和(b)利托那韋或其藥10學上可接受的鹽?；衔锢心琼f及其藥學上可接受的鹽以及其制備方法描述于W094/14436。關(guān)于利托那韋的優(yōu)選劑型，參閱US6,037,157和本文引用的文件US5,484，801、US08/402,690、WO95/07696和WO95/09614。利托那韋具有下式在又一個實施方案中，包含(a)式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其藥學上可接受的鹽和(b)利托那韋或其藥學上可接受的鹽的組合還包^St自本文描述的化合物的其他抗HCV化合物。本發(fā)明的一個實施方案提供了制備本文描述的組合的方法，所述20方法包括將式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其藥學上可接受的鹽與利托那韋或其藥學上可接受的鹽合并。本發(fā)明的備選實施方案提供一種方法，其中所述組合包含一種或多種本文描述的其他藥物。本發(fā)明的組合可作為藥物使用。所述作為藥物的用途或治療方法包括以有效對抗與HCV及其他致病黃病毒和鼠疫病毒有關(guān)的疾病的量全身性給予HCV感染的患者。結(jié)果是，可將本發(fā)明的組合用于制備藥物，所述藥物用于治療、預(yù)防或?qū)共溉閯游锱cHCV感染有關(guān)5的感染或疾病，特別是治療與HCV及其他致病黃病毒和鼠疫病毒有關(guān)的疾病。本發(fā)明的一個實施方案提供了包含本文描述的任何一個實施方案的組合與藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物。具體來講，本發(fā)明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含(a)治療有效量的式(I)的10HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其藥學上可接受的鹽，(b)治療有效量的利托那韋或其藥學上可接受的鹽，和(c)藥學上可接受的賦形劑。藥物組合物還任選包含選自HCV聚合酶抑制劑、HCV蛋白酶抑制劑、HCV生命周期中另一靶位的抑制劑和免疫調(diào)節(jié)劑、抗病毒劑及其組合的其他藥物。15可將組合物配制為合適的藥物劑型，如上文描述的那些劑型。可單獨配制每種活性成分，聯(lián)合給予各種制劑或者包含兩種成分的一種制劑，如果需要可提供更多活性成分。用于本文時，術(shù)語"組合物，，意欲包括包含指定成分的產(chǎn)物，以及由指定成分的組合直接或間接得到的任何產(chǎn)物。20在一個實施方案中，也可將本文提供的組合配制為同時、單獨或按順序用于fflV療法的組合制劑。在這種情況下，將通式(I)化合物或其任何亞組配制為包含其他藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物，將利托那韋單獨配制為包含其他藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物。將這兩種單獨的藥物組合物作為藥劑盒的一部分方便地同時、單25獨或按順序使用。因此，可將本發(fā)明組合的各個組分在治療過程的不同時間單獨給藥或者以分開或單一組合形式同時給藥。因此應(yīng)理解本發(fā)明包括所有這樣的同時或交替治療方案，由此理解術(shù)語"給藥"。在優(yōu)選實施方案中，大約同時給予單獨劑型。在一個實施方案中，本發(fā)明的組合包含一定量的利托那韋或其藥學上可接受的鹽，其量足以在臨床上使式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑5制劑的生物利用度優(yōu)于所述式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑單獨給藥時的生物利用度，在另一個實施方案中，本發(fā)明的組合包含一定量的利托那韋或其藥學上可接受的鹽，相對于單獨給予式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑時至少一種藥動學變量(選自t1/2、C皿、Cmax、Css、12小時AUC或10者24小時AUC)而言，該量足以增加式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的所述至少一種藥動學變量。又一個實施方案涉及改善HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑生物利用度的方法，所述方法包括給予需要這樣改善的個體包含治療有效量的所述組合各組分的本文限定的組合。15在又一個實施方案中，本發(fā)明涉及利托那韋或其藥學上可接受的鹽作為至少一種藥動學變量改善劑的用途，所述變量是式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的變量，選自t1/2、Cmin、Cmax、Css、12小時AUC或24小時AUC;前提是所述用途并非在人或動物體內(nèi)實施。用于本文的術(shù)語"個體"指動物，優(yōu)選哺乳動物，最優(yōu)選人，是治20療、觀察或?qū)嶒灥膶ο?。生物利用度的定義為到達體循環(huán)的給藥量分數(shù)。t1/2代表半衰期或者血漿濃度下降至其起始值一半所用時間。Css是穩(wěn)態(tài)濃度，即給藥速率等于消除速率時的濃度。Cmm的定義為給藥間隔期測定的谷(最小)濃度。C謹代表給藥間隔期測定的峰(最大)濃度。AUC的定義為25在限定時間的血漿濃度-時間曲線下的面積。圍向人體給藥。可一起或單獨給予所述組合包含的組分。式(I)的NS3/4a蛋白酶抑制劑或其任何亞組和利托那韋或其藥學上可接受的鹽或酯可具有0.02-5.0克/天的劑量水平。當聯(lián)合給予式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑和利托那韋時，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比優(yōu)選在約40:1-5約1:15范圍，或者約30:1-約1:15,或者約15:1-約1:15,通常約10:1-約1:10，更通常約8:l-約1:8。式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比也可以在約6:l-約1:6范圍，或者約4:1-約1:4，或者約3:l-約1:3，或者約2:l-約1:2，或者約1.5:1-約1:1.5。在一方面，式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑的重量等于或大于利托那韋的重10量，其中式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比優(yōu)選在約l:l-約15:1范圍，通常約l:l-約10:1，更通常約l:l-約8:1。式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑與利托那韋的重量比也可以在約1:1-約6:1范圍，或者約1:1-約5:1，或者約1:1-約4:1，或者約3:2-約3:l，或者約l:l-約2:1或者約l:l-約1.5:1。15用于本文的術(shù)語"治療有效量"指在組織、系統(tǒng)、動物或人中引起生物學或醫(yī)學效應(yīng)的活性化合物或組分或藥物的量，根據(jù)本發(fā)明所迷效應(yīng)為研究者、獸醫(yī)、醫(yī)學博士或其他臨床醫(yī)生所尋求，包括受治療疾病癥狀的緩解。因為本發(fā)明涉及包含兩種或多種藥物的組合，所以"治療有效量"是結(jié)合一起以便聯(lián)合作用產(chǎn)生所需生物學或醫(yī)學效應(yīng)20的藥物的量。例如，包含(a)式(I)化合物和(b)利托那韋的組合物的治療有效量將是結(jié)合一起具有有效治療的聯(lián)合作用的式(I)化合物的量和利托那韋的量。通常考慮有效抗病毒的日劑量將為0.01mg/kg-500mg/kg體重，更優(yōu)選0.1mg/kg-50mg/kg體重。適當?shù)卦谝惶熘幸赃m當間隔以1、2、253、4或多種(亞-)劑量給予所需劑量?？蓪⑺?亞-)劑量配制為單位劑型，如每單位劑型包含1-1000mg、特別是5-200mg活性成分。精確劑量和給藥頻率取決于所用具體式(I)化合物、受治療的具體疾病、受治療疾病的嚴重度、具體患者的年齡、體重、性別、疾病程度和一般健康狀況以及個體可能攝入的其他藥物，這點如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。而且，顯然可根據(jù)受治療患者的反應(yīng)和/或根據(jù)給出本發(fā)明化合物處方的醫(yī)生的評估降低或增加所述有效日劑量。因此上文敘述的有效日劑量范圍只具指導性。5根據(jù)一個實施方案，可以每天1次或2次聯(lián)合給予式(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑和利托那韋，優(yōu)選口服給藥，其中每劑量式(I)化合物的量為約1-約2500mg，每劑量利托那韋的量為1-約2500mg。在另一個實施方案中，每天1次或2次聯(lián)合給予的每劑量的量為約50-約1500mg式(I)化合物和約50-約1500mg利托那韋。在還有另一10個實施方案中，每天1次或2次聯(lián)合給予的每劑量的量為約100-約1000mg式(I)化合物和約100-約800mg利托那韋。在還有另一個實施方案中，每天l次或2次聯(lián)合給予的每劑量的量為約150-約800mg式(I)化合物和約100-約600mg利托那韋。在還有另一個實施方案中，每天1次或2次聯(lián)合給予的每劑量的量為約200-約600mg式(I)化合15物和約100-約400mg利托那韋。在還有另一個實施方案中，每天l次或2次聯(lián)合給予的每劑量的量為約200-約600mg式(I)化合物和約20-約300mg利托那韋。在還有另一個實施方案中，每天1次或2次聯(lián)合給予的每劑量的量為約100-約400mg式(I)化合物和約40-約100mg利托那韋。20每天1次或2次給藥的式(I)化合物(mg)/利托那韋(mg)的示例性劑量組合包括50/100、100/100、150/100、200/100、250/100、300/100、350/100、400/100、450/100、50/133、100/133、150/133、200/133、250/133、300/133、50/150、100/150、150/150、200/150、250/150、50/200、100/200、150/200、200/200、250/200、300/200、50/300、80/300、25150/300、200/300、250/300、300/300、200/600、400/600、600/600、800/600、1000/600、200/666、400/666、600/666、800/666、1000/666、1200/666、200/800、400/800、600/800、800/800、1000/800、1200/800、200/1200、400/1200、600/1200、800/1200、1000/1200和1200/1200。每天1次或2次給藥的式(I)化合物(mg)/利托那韋(mg)的其他例示性劑量組合包括1200/400、800/400、600/400、400/200、600/200、600/100、500/100、400/50、300/50和200/50。本發(fā)明的一個實施方案提供了制品，所述制品包括有效治療HCV5感染或抑制HCVNS3蛋白酶的組合物；和包括標明所述組合物可用于治療丙型肝炎病毒感染的標簽的包裝材料；其中所述組合物包含式(I)化合物或其任何亞組或本文描述的組合。本發(fā)明的另一個實施方案涉及一種藥劑盒或容器，所述藥劑盒或容器裝有本發(fā)明的式(I)化合物或其任何亞組或者組合，所述組合將式10(I)的HCVNS3/4a蛋白酶抑制劑或其藥學上可"l矣受的鹽與利托那韋或其藥學上可接受的鹽組合，其量可有效用作測定潛在藥物抑制HCVNS3/4a蛋白酶、HCV生長或兩者的能力測試或分析的標準或試劑。本發(fā)明這方面可用于藥物開發(fā)程序。本發(fā)明的化合物和組合可用于高通量靶向分析物(target-analyte)15試驗，例如用于測定所述組合在HCV治療中的效力的那些試驗。實施例以下實施例旨在闡述本發(fā)明而非限制于此。實施例l:代表性中間體的制備20合成1-羥基-3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉(6)往攪拌的3-曱基-2-丁酮(27.0g，313mmol)在甲醇(150mL)中的溶液中加入溴(SOg,3Bmmo1)。在低于10。C下進行反應(yīng)(脫色)。在室溫25下繼續(xù)攪拌30分鐘，隨后加入水(100mL)。在15分鐘后，該混合物用水(300mL)稀釋，隨后用Et20(乙醚)萃取4次。醚萃取物依次用10%步驟ANa2C03溶液、水、鹽水洗滌，隨后干燥(Na2S04),得到42g(81。/。)液狀的目標產(chǎn)物。步驟B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage77</formula>往沸騰的硫代草氨酸乙酯(13.3g,100g,100mmol)在乙醇(100mL)中的溶液中經(jīng)15分鐘滴加l-溴-3-甲基丁-2-酮(17.6g，106mmo1)。將該溶液回流1小時。往250mL水冷卻的水中加入該溶液，隨后用濃氨溶液堿化。該混合物用AcOE(乙酸乙酯)萃取兩次。有機相用鹽水洗滌，干燥(Na2SOzt)，隨后減壓蒸發(fā)。粗品經(jīng)柱層析純化(洗脫劑二氯甲烷至含2o/。MeOH(甲醇)的二氯甲烷)，得到13.1g(65。/。)目標產(chǎn)物^-NMR-CDC3:7，20(s，1H),4,49(叫2H)，3，25(m，1H),1，42(t，3H)，U5(d，6H).步驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage77</formula>在-78。C、氮氣氣氛下，往N,N-二乙基-4-甲氧基-2-甲基苯曱酰胺4(2.4g，11mmol)在無水THF(30mL)中的溶液中滴加正丁基鋰(8.9mL，在己烷中的2.5M溶液)。在-78。C下將該溶液繼續(xù)保持30分鐘。隨后滴加噻唑3在THF(5mL)中的溶液。在2小時后，該反應(yīng)在水冷卻的水和乙酸乙酯間分配。經(jīng)柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚/CH2Cl2，1:2:1)，得到1.8g(43。/。)黃色油狀的目標產(chǎn)物4:LCMS檢測純度〉950/。。步驟D在140。C下、密封管中，將5(1.98g,5.29mmol)和醋酸銨(12.2g，159mmol)的混合物加熱1小時，隨后將其冷卻至室溫。該反應(yīng)混合物在冰冷卻的水和CH2Cl2間分配，干燥(Na2S04)，隨后經(jīng)硅膠過濾，得到1.59經(jīng)(78%)白色粉末狀的目標產(chǎn)物6，m/z=301(M+H)+。10合成1-羥基-3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉(7)采用制備l-羥基-3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉6中所述方法，由甲基環(huán)丙基酮得到標題產(chǎn)物。合成1,3-二氯-6-曱氧基異喹啉(12)步驟A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage78</formula>15在0。C、氮氣氣氛下，往3-甲氧基肉桂酸(49.90g，280mmol)在丙酮(225mL)中的懸浮液中加入三乙胺(80.5mL,578mmo1)。在0。C下10分鐘后，滴加氯甲酸乙酯(46.50g,429mmol)同時將溫度保持在0。C下。在0。C下1小時后，緩慢加入疊氮化鈉(27.56g，424mmol)在水(200mL)中的溶液，隨后讓該反應(yīng)混合物升至室溫。在16小時后，將該反應(yīng)混合物傾入水(500mL)中，隨后蒸去丙酮。殘余物用曱苯萃取，得到溶液8，其直接用于下一步驟。步驟B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>在190。C下，往加熱的二苯基甲烷(340mL)和三丁基胺(150mL)中滴加前一步驟制備的8的甲苯溶液。用Dean-stark將甲苯即刻餾出。在加入完成后，將反應(yīng)溫度升至210。C保持2小時。在冷卻后，經(jīng)過濾收集沉淀的產(chǎn)物，用庚烷洗滌，得到49.1g(29。/。)白色粉末狀的目標產(chǎn)物9:w/z=176(M+H)+;'H.NMR(CDCI3):8.33(d，8.9Hz,1H)，7.13(d，7.2Hz，1H)，7.07(dd,/=8.9Hz，2.5Hz,1H),6.90(d,2.5Hz，1H),6.48(d，/=7.2Hz，1H),3.98(s，3H).步驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>往9(10.0g，57mmol)中緩慢力口入磷酰氯(25mL)，在溫和回流下將該混合物加熱3小時。在反應(yīng)完成后，將;粦酰氯蒸發(fā)。將殘余物傾入15冰冷卻的水(40mL)中，隨后用NaOH的水溶液(50%)調(diào)節(jié)pH至10。該混合物用CHCl3萃取，用鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，過濾，隨后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2Cl2)，得到8.42g黃色固體狀的目標產(chǎn)物10:m/z=194(M+H)+;!H-NMR(CDC13):8.21(d'/=9.3Hz'1H)'8.18(d，J-5.7Hz,1H)'7.47(d'J-5.6Hz,1H),7.28(dd，J=9.3Hz，2.5Hz，1H)，7.06(4/=2.5Hz,1H)，3.98(s,3H).20步驟D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>在0。C下，往10(2.70g，13.9mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液中少量分批加入間氯過苯甲酸(6.41g,28.6mmol)。在0。C下30分鐘后，將反應(yīng)混合物升至室溫12小時。隨后將該反應(yīng)混合物在1NNaOH和5CH2Cl2間分配，隨后用1NNaOH和鹽水洗滌。將有機層干燥(Na2S04),過濾，隨后蒸發(fā)，得到1.89g(64Q/。)橙色固體狀的目標產(chǎn)物11:m/z=209.9(M+H)+。步驟E<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>10在回流下，將11(1.86g，8.86mmol)在磷酰氯(18mL)中的溶液加熱3小時。隨后真空蒸去磷酰氯。將殘余物傾入冰冷卻的水(50mL)中，隨后用50%的NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH至10。該混合物用CHC13萃取，有機層用鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，過濾，隨后蒸發(fā)。粗品經(jīng)柱層析純化(CH2Cl2)，得到350mg(17。/。)黃色固體狀的目標產(chǎn)物12:m/--227.9(M+H)+;H-NMR(CDCh):8.16(d,/=9.3他，1H)，7.50(s，1H),i57.25(dd，9.3Hz,2.5Hz，1H)，6.98(d，/=2.5Hz,1H)，3.98(s,3H).合成4-溴-1-輕基-6-甲氧基異喹啉(13)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>往9(2.06g，11.8mmol)在DMF(40mL)中的溶液中加入N-溴代琥20珀酰亞胺(2.33g,14.3mmo1)。將得到的混合物于室溫下攪拌過夜。隨后蒸去DMF并往殘余物中加入CH2C12。將該懸浮液于45。C下加熱15分鐘。將白色固體濾出，隨后用異丙基醚洗滌，得到2.07g(69%)目標產(chǎn)物13:253.7(M+H)+;'HNMR(DMSO似8.14(d'8.8Hz，1H);7.52(s，1H),7.17(dd，《/=8.8Hz,2.5Hz,1H)，7.11(4/=2.4Hz，1H)，3.83(s,3H).合成5-溴-1-氯-6-甲氧基異喹啉(19)步驟A將等摩爾的對甲氧基苯甲醛(10g,73.5mmol)和氨基-乙醛二甲基10縮醛(7.93g,75.4mmol)在甲苯(50mL)中的溶液在Dean-Stark裝置中回流過夜。隨后將該溶液真空蒸發(fā)，得到目標產(chǎn)物14，其無需進一步純化直接用于下一步驟m/z=224(M+H)+。步驟B^_OOEt0-P(OCH3)21515在-10。C、劇烈攪拌下，往14(73.5mmol)在無水THF(50mL)中的溶液中加入氯甲酸乙酯(8.02g,73.9mmo1)。在30分鐘后，將該反應(yīng)混合物升至室溫，隨后加入亞磷酸三曱酯(10.6g,85.2mmo1)。在15小時后，將揮發(fā)物真空蒸發(fā)。將得到的油狀物與甲苯共蒸3次，得到油狀的目標產(chǎn)物15:m/z-406(M+H)+。20步驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage82</formula>將由步驟B得到的原料(15)溶解在CH2Cl2(200mL)中并冷卻至(TC。隨后加入四氯化鈦(86.0g，453mmol)，將該溶液回流過夜。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫。隨后加入NaOH(73g)在水(500mL)中的溶5液，將該混合物振搖10分鐘。將TiO2的沉淀濾出，隨后濾液用3NHC1萃取。水層的pH用NaOH調(diào)節(jié)至lO。該產(chǎn)物用CH2Cl2萃取，千燥(Na2S04)，隨后蒸發(fā)，得到5.32g(45。/。)目標產(chǎn)物16,其無需進一步純化直接用于下一步驟m/z=160(M+H)+。在0。C下往濃H2S04(33.5mL)中緩慢加入6-甲氧基異喹啉16(5.32g，33.4mmo1)。將該混合物冷卻至-25。C，隨后以反應(yīng)溫度保持在-25。C和-22。C間的速度加入NBS(7.68g,43.2mmo1)。在-22。C下將該混合物攪拌2小時、在-18。C攪拌3小時，隨后傾入壓碎的水中。15使用濃氨水將pH調(diào)節(jié)至9,隨后將該堿性漿狀物用乙醚萃取。合并的有機部分用lNNaOH和水洗滌，干燥(Na2S04),過濾，隨后蒸發(fā)至干，得到5.65g(7P/。)目標產(chǎn)物17:m/z=237.8(M+H)+。步驟D步驟E在0。C下，往17(5.65g,24mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液中力'入間氯過苯甲酸(6.73g,30mmol)。在0。C下、30分鐘后，將該反應(yīng)混合物升至室溫保持3.5小時。隨后另加入CH2Cl2(300mL)，該混合物依次用1NNaOH和鹽水洗滌。將有機層干燥(MgS04)，過濾，隨后蒸發(fā)，得到6.03g(100。/。)目標產(chǎn)物18，其直接用于下一步驟5m/z=253.9(M+H)+。步驟FBrBr往冷卻的18(6.03g，23.7mmol)中緩慢加入磷酰氯(60mL)，隨后在溫和回流下將該混合物加熱30分鐘。在反應(yīng)完成后，蒸去磷酰氯。10將殘余物傾入水冷卻的水中(50mL)，隨后用NaOH將pH調(diào)節(jié)至10。該混合物用CHCl3萃取，有機層用鹽水洗滌，千燥(Na2S04)，過濾，隨后蒸發(fā)。粗品經(jīng)柱層析純化(CH2Cl2),得到1.15g(18。/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物附々=271.7(M+H)+;'H-NMR(CDCb):8.17(d,/=9.3Hz,1H),8.28(d，/=6.0Hz，1H)，7.94(d，/-6.0Hz，1H),7.41(d，/=9.3Hz，1H).15合成(己-5-烯基)(甲基)胺(21)H20i21I步驟A在0°C下，往N-甲基三氟乙酰胺(25g)在DMF(140mL)中的溶液中20緩慢加入氫化鈉。在室溫、氮氣氣氛下，將該混合物攪拌l小時。隨后滴加溴己烯(32.1g)在DMF(25mL)中的溶液，將該混合物加熱至70。C保持12小時。將該反應(yīng)混合物傾入水(200mL)中，隨后用乙醚(4x50mL)萃取，干燥(MgS04)，過濾，隨后蒸發(fā)，得到35g淺黃色油狀的目標產(chǎn)物20，其無需進一步純化直接用于下一步。步驟B往20(35g)在曱醇(200mL)中的溶液中滴加氫氧化鉀(l87.7g)在水(130mL)中的溶液。將該混合物于室溫下攪拌12小時。隨后將該反應(yīng)混合物傾入水(100mL)中，用乙醚(4x50mL)萃取，干燥(MgS04)，過濾，隨后在大氣壓下蒸餾乙醚。得到的油狀物經(jīng)真空蒸餾純化(13毫米汞柱壓力，50°C)，得到7.4g(34。/。)無色油狀的標題產(chǎn)物21:'H-NMR(CDC13):55.8(叫1H)，5(ddd，/=17.2Hz,3.5Hz，1.8Hz,1H)，4.95(m，1H)，2.5(t,7.0Hz,2H),2.43(s，3H)，2.08(q，/=7.0Hz,2H)，1.4(m，4H),1.3(brs，1H).實施例2:17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基-異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(29)的制備步驟A在0。C下，往在DMF(3mL)中的六氟石粦酸2-(7-氮雜-lH-苯并三唑-1機基)-1,1,3,3-四甲基脲鏡(!^\11;)(1.348，3.52mmol)和N-曱基己-5-烯基胺(435mg，3.84mmol)中加入在4mLDMF中的3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-曱酸22(500mg，3.2mmo1)，隨后加入N,N-二異丙基乙20基胺(DIPEA)。在0。C下攪拌40分鐘后，該混合物于室溫下攪拌5小時。隨后蒸去溶劑，將殘余物溶解在乙酸乙酯(70mL)中，用飽和的NaHCO3(10mL)洗滌。水層用乙酸乙酯(2x25mL)萃取。合并有機相，用飽和的NaCl(20mL)洗滌，干燥(Na2S04),蒸發(fā)。經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/石油醚，2:1)，得到550mg(68。/。)無色油狀的目標產(chǎn)物23:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage85</formula>步驟B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage85</formula>在0。C下，往內(nèi)酰胺23中加入LiOH溶液(105mg在4mL水中)。在1小時后，轉(zhuǎn)化完成(HPLC)。該混合物用1NHC1酸化至pH為2-3，用乙酸乙酯萃取，干燥(MgS04)，蒸發(fā)，與甲苯共蒸數(shù)次，隨后高真空干燥過夜，得到520mg(88。/o)目標產(chǎn)物24:m/z=270(M+H)+。步驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage85</formula>往24(8.14g,30.2mmol)中加入l-(氨基)-2-(乙烯基)環(huán)丙烷甲酸乙酉旨-鹽酸鹽25(4.92g,31.7mmol)和HATU(12.6g，33.2mmo1)。在氬氣氣氛下，用水浴將該混合物冷卻，隨后依次加入DMF(100mL)和DIPEA(12.5mL，11.5mmo1)。在0。C下30分鐘后，該溶液于室溫下繼續(xù)攪拌3小時。隨后，該反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水間分配，依次用0.5NHCl(20mL)和飽和的NaC1(2x20mL)洗滌，干燥(Na2S04)。經(jīng)快速層析純化(乙酸乙酯/CH2CV石油醚，1:1:1)，得到T41g(60。/。)無色油狀的目標產(chǎn)物26:m/z=407(M+H)+。步驟D在-2(TC、氮氣氣氛下，往26(300mg,0.738mmo1)、異喹啉7(308mg，1.03mmol)和三苯基膦(271mg，1.03mmol)在無水THF(15mL)中的溶液中加入DIAD(218juL，l.llmmol)。隨后，將該反應(yīng)升至室溫。5在1.5小時后，將溶劑蒸發(fā)，粗品經(jīng)快速柱層析純化(梯度洗脫石油醚/CH2Cl2/乙醚，3:1.5:0.5至1:1:1)，得到含副產(chǎn)物的290mg目標產(chǎn)物(純度90%)。再次純化(同樣的洗脫劑)，得到228mg(43。/。)目標產(chǎn)物27:m/z=687(M十H)+,^-NMR(CDC13):8.11-7.98(m，1H)，7.98(s,1H)，7.13-7.10(m，2H)，6.89(s，1H)，5.78-5,69(m'2H),5.30-5.25(m,1H),5.11-5.09(m，1H)，4.99-4.87(m，2H)，4.15-4.08(m,2H),3.92(s,3H)，3.71-3.58(m,1H)，3.48-3,15(m4H),3.03(s，3H),2.90-2.85(m,2H)，2.60-2.252H),2.11-1.82(m,6H),1.55-U0(m,7H)，0.98-0.96(叫4H).io步驟E在70°C、氮氣氣氛下，將27(220mg，0.32mmol)和Hoveyda-Gmbbs第一代催化劑(19mg,0.032mmol)在干燥并脫氣的1，2-二氯乙烷(400mL)中的溶液加熱12小時。隨后將溶劑蒸去，殘余物經(jīng)硅膠層析純化(石油醚/012(312/乙醚；3:1:1)，得到180mg(85%)目標產(chǎn)物28:w/z=659(M+H)+，'H-NMR(CDC13):8.11-8.08(m，1H)，7.98(s,1H)，7.10-7.19(m，2H)，7.09(s,1H)，6.88(s，1H),5.70-5.781H),5.61-5.69(m，1H),5.18-5.29機1H)，4.63-4.69(叫1H)，4.05-4,15(m，3H)，3.92(s，3H)，4.01-4.08(m,1H),3.28-3.36(m，1H),3.06(s,3H)，2,88-3.05(m，2H),2.6卜2.69(m，2H)，2.10-2.41(m，3H),1.90-2.02(m，4H)，1.71-1.90(m,3H)，0,87-1.62步驟F往攪拌的28在THF(15mL)和甲醇(10mL)中的溶液中加入LiOH(327mg)在水(3mL)中的溶液。在48小時后，將溶劑蒸去，隨后殘余物在水和乙醚間分配。將水層酸化(pH二3)并用乙酸乙酯萃取，干10燥(MgS04),蒸發(fā)。殘余物用乙醚結(jié)晶，得到128mg(74。/。)目標產(chǎn)物29:631(M+H)+，'H-NMR(CDC13):8.00-8.03(d'/=9.0Hz,1H)，7.86(s,1H)，7.12(s，1H),7.10(dd,J=9.0Hz,2.4Hz，1H),7.06(d，■/=2.4Hz'1H),6.87(s，1H)，5.64-5.71(m，1H)，5.57-5.61(m，1H)，5.16(t,/=9.5Hz，1H)，4.574.64(rn^1H)，3.92(s'3H),3.52-3.60(m，1H)，3.25-3.37(m,1H),2.42-2.68(m，4H)，2.17-2.333H)，2.08-2.17(m,2H)，1.71-2,00(m，5H)，1.33-1.62(m，5H)，0.96-0.99(m，4H).實施例3:N-[17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基-異喹啉-l-基氧基]-13-曱基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(30)的制備在回流、氮氣氣氛下，將29(91mg,0.14mmol)和l,l，-羰基二咪5唑(CDI)(47mg,0.29mmol)在無水THF(7mL)中的混合物加熱2小時。LCMS分析表明中間體的一個峰(RT-5.37)。如需要，可任選將氮雜內(nèi)酯衍生物分離。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，隨后加入環(huán)丙基磺酰胺(52mg,0.43mmo1)。隨后加入DBU(50jliL，0.33mmol)并在室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌1小時，隨后于55。C下加熱24小時。將溶劑蒸去，10隨后殘余物在乙酸乙酯和酸性水(pH二3)間分配。粗品經(jīng)柱層析純化(乙酸乙酯/CH2Cl2/石油醚，1:1:1)。殘余物在乙醚中結(jié)晶，過濾，得到含環(huán)丙基-磺酰胺雜質(zhì)的目標化合物。該原料用3mL水研磨，過濾，用水洗滌，隨后用高真空干燥過夜，得到60mg(57n/。)淺黃色粉末狀的目標化合物30:w/z=734(M十H)+，,H-NMR(CDC13):10.94(s，IH)，8.08(d,J-8.6Hz，1H)，8.00(s，1H)，7.12-7.152H)，6,91(s,1H),6.35(s，1H),5.74-5,77(m,1H)，5.63-5.69(w1H),5.06(t,/=10.4Hz，1H)，4.60(t，/=12.3Hz,1H)，3.93(s,3H),3.35-3.42(m'2H),3.04(s，3H)，2.89-2.96(m，2H)，2.52-2.52(W2H),2.37-2.45(m，2H)，2.10-2.32(m，2H)，1.61-1.93(叫4H)，1.3-1.51(m，4H)，150.卯-1.30(m,8H).實施例4:17-[3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(31)的制備采用制備17-[3-(4-環(huán)丙基-噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]-十八碳-7-烯-4-5甲酸29(實施例2)的方法，由1-羥基-3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基-異喹啉6得到標題化合物m/z=633(M十H)+,!H-NMR(CDC13):8.03(4/=8.9Hz,1H)，7.91(s,1H),7.20(s,1H)，7.08-7.13(m,2H)，6.93(s，1H)，5,61-5.69(m，2H)，5,17(t，/=9.5Hz，1H),4.574.64(w1H)，3.92(s,3H),3.55-3,63(w1H)，3.25-3,36(m，1H),3.1-3.20(m，1H)，3,05(s，3H),2.72-2,83(m，1H)，2.53-2.66(m,2H),2.40-2.51(m，1H)，2.17-2.32(m，2H)，1.89-1.93(m,2H)，1.71-1.83(叫2H),1.43-1.60(m，2H),1.37(dd，J-6.9Hz，2.5Hz,6H)，1.18-1.362H).實施例5:N-[17-[3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧10基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(32)的制備采用制備N-[17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺30(實施例3)的方法，由17-[3-(4-異丙基噻唑-2-5基)-6-甲氧基-異喹啉-l-基氧基]-13-曱基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸31得到標題化合物w/z=736(M+H)+,^-NMR(CDC]3):10.90(s,1H)，8.02-8.09(m，2H)，7.11-7.142H),6.96(s，1H)，6.29(s'1H)，5.78-5.83(m'1H)'5.62-5.69(m，1H)'5.06(t,10.5Hz，1H)，4.56-4.64(m，1H)，3.93(s，3H)，3.37-3.422H)，3.15-3.21(m,1H)，3.04(s，3H)，2.89-2.98(m,2H)，2.52-2.61(m，2H)，2.23-2.43(m，3H)'1,64-1.93(m，4H)，1.31-1.50(ra，IOH)，U8-1.30(m，2H)，0,96-1.152H).實施例6:17-[3-(2-異丙基氨基噻唑-4-基)-6-曱氧基-異喹啉-1-基10氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3，13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(33)的制備10實施例7:N-[17-[3-(2-異丙基氨基噻唑-4-基)-6-甲氧基-異喹啉-l-基氧基]-13-曱基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(34)的制備、o34、、)尸、\—、、、、'采用制備N-[17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧采用制備17-[3-(4-環(huán)丙基-噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7_烯-4-甲酸29(實施例2)的方法，由l-羥基-3-(2-異丙基氨基遙唑-4-基)-6-曱氧基異喹啉得到標題化合物m/z=648(M+H)十''H-NMR(CDC13):8.03(d，/=9.0Hz，1H)，7.69(s,1H),7.19(s，1H)，7.04-7.113H)，5.60-5.68(m，2H)，5.20(t,9.2Hz，1H),4.54-4.61(m，1H)，3.93(s，3H)，3.54-3.70(m,2H),3.12-3.20(m，1H),2.83(s，3H)，2,35-2,60(m,4H)，2.11-2.302H),1.80-1.93(m,2H)，1.69-1.79(m，2H)，1.40-1.51(叫2H)，1.30(d，/=13.1Hz，6H)，1.10-1.21(m，2H).o、/」/c、、基]-13-曱基-2，14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯誦4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺30(實施例3)的方法，由17-[3-(2-異丙基氨基瘞唑-4-基)-6-曱氧基-異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸33得到標題化合物w/"751(M+H)+，'H-NMR(CDOa):10.90(s，1H),8.04(4/=9.3Hz，1H)，7.75(s，1H),7.04-7.07(m,3H)，6.32(s'1H),5.80-5.84(m，1H)'5.62-5.69(m'1H)，5.06(t，/=10.3Hz，2H)，4.58-4.65(m，1H)，3.91(s，3H)，3.71-3.79(m，1H)，3.24-3.41(m，2H)，3.03(s，3H),2.71-2.97(m，2H),2.57-2.60(m，2H)，2.30-2.41(m，2H)，2.15-2.30(m,1H)，1,78-2.02(m，4H),0.87-1.58(m，14H),實施例8:17-[3-(吡唑-1-基)-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(22)的制備采用制備17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基]-13-曱基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]-十八碳-7-烯-4-甲酸29(實施例2)的方法，由l-羥基-3-(吡唑-l-基)-6-甲M異會啉得到標題化合物m々=574(M+H)T，'H-NMR(CDC13):8.45(d,■/=2.3Hz,1H),8.03(4J-8.9Hz，1H),7.71(d,J=1.0Hz'1H)，7.64(s，1H)，7,22(s，1H)，7,01-7.05(rn^2H)，6.43-6.451H)'5.63-5.70(m，2H)'5.18(dd，/=10.3Hz,2.0Hz，1H)，4.53-4.42(m，1H),3.90(s，3H),3,58-3.67(m,1H),3.26-3.35(m,1H),3.02(s，3H)，2.65-2.77(m,1H),2.59-2.68(m,1H)，2.35-2.58(m，2H)，2.15-2.30(m，2H)，1.89-2.05(m，2H)，1.70-1.75(m，2H),1.18-1.61(m'4H).實施例9:N-[17-[3-(p比唑-l-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2，14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(36)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage93</formula>采用制備N-[17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-曱基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺30(實施例3)的方法，由17-[3-(吡唑-1-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)10[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯_4-曱酸22得到標題化合物(M+H)+,'H-NMR(CDCb):8.49(4/=2.4Hz，1H),8.06(d，9.7Hz，1H),7.74(d，/=6.4Hz,2H)，7.04-7.08(m，2H)，6.46-6.48(m，1H)，6,37(brs，1H),5,71-5.82(m，1H)，5.63-5.69(m，1H)，5.06(t，《/=10.5Hz，1H),4.58-4,65(m，2H)，3.93(s,3H)，3.36-3.44(m，2H)，3.04(s，3H)，2.80-2.95(m，2H)，2.50-2.62(m，2H),2.33-2.45(m,2H)，2.20-2,31(叫1H)，1.80-2,00(m，4H)，1.32-1.70(m,2H)，U7-1.30(m,2H)，0.90-1.15(m，4H).實施例10:合成17-(3-氯-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(42)15步驟A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage93</formula>往Boc-羥基脯氨酸(760mg，3.29mmol)在DMSO(50mL)中的溶液中加入叔丁醇鉀(l.llg，9.87mmo1)。在將得到的溶液于室溫下攪拌1小時后，加入1,3-二氯-6-曱氧基異喹啉12(750mg，3.29mmo1)。在室5溫、氮氣氣氛下12小時后，該反應(yīng)混合物用冰冷卻的水猝滅，用HC1酸化至pH4，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，干燥(MgS04),過濾，蒸發(fā)，得到1.39g(90。/。)白色固體狀的37:附/z=423(M+H)+;!H-NMR(CDC13):8.10J=9.3Hz,1H)，7.15(4J-2.4Hz,IH)，7-10(dd，J=9.3Hz，2.5Hz'IH)，6.9(s'IH)，5.80-5.67(brs，1H),4.45(t，/=7.9,IH)，3.95(s，3H),3.80<3.90(brs'1H),3.70-3.801H),2.75-2.6(m,1H),2.35-2.45(m,IH)，1.50(s，9H).步驟Bo、八在室溫、氮氣氣氛下，將化合物37(1.25g，2.96mmol)、1-氨基-2-乙烯基環(huán)丙烷甲酸乙酯-鹽酸鹽25(526mg，2.96mmol)、HATU(1.12g，2.96mmol)和DIPEA(1.29mL,7.39mmol)在DMF(50mL)中的溶液攪拌。在12小時后，加入二氯甲烷，隨后該溶液依次用NaHC03水溶液和15水洗滌。將有機層干燥(MgS04)并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化10(CH2Cl2/MeOH，95:5),得到1.5g(90。/。)黃色泡沫狀的所需產(chǎn)物38;加々=561(M+H)+;'H-NMR(CDC3):8.10(4/=9.3Hz1H)，7.50(s，1H)，7.25(d《/-9.3Hz，2.5Hz,1H),6.98(d，/=2.4Hz'H)，5.80-5.67(m，1H)，5.29(d，/=17.1Hz，1H)，5.12(d，/=10.3Hz，1H)，4.45"4.5(brs，1H)，4.14.18(n^2H)，3.95(s,3H)，3.8-3,9(brs，1H),3.7-3.8(m,1H)'3.25-3.35(m,2H)，2.35-2.45(rn^IH)，2.1-2.2(m,1H)，1,5-2(m,6H)，1.5(s'9H).步驟C.oCl0,1、0在室溫下，將38(3.0g，5.36mmol)在l:2的TFA-DCM(3mL)中的溶液攪拌60分鐘。隨后加入甲苯(3mL)并將得到的混合物蒸干，得到目標產(chǎn)物39(HPLC測得的純度〉95。/。)，其無需進一步純化直接用于下一步驟m/z=460(M+H)+。步驟D往39(1.0g，2.17mmol)在四氫呋喃(25mL)中的溶液中加入碳酸氫鈉(1.83g,21.7mmo1)。隨后，加入光氣(1.6mL,1.9M在甲苯中，4.5當量)。將該反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時，隨后過濾。將溶劑蒸發(fā)，隨后將殘余物溶解在二氯甲烷(25mL)中。隨后，加入碳酸氬鈉95、-、、<TP.5HS/o人"oI—8(1.83g，21.7mmol),接著加入(己-5-烯基)(曱基)胺21(1.2g,8.04mmol)。在室溫下12小時后，將反應(yīng)混合物過濾。濾液在水和二氯曱烷間分配。將有機層干燥(MgS04),過濾，隨后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(CH2Cl2/EtOAc，95:5)，得到0.80g(69.3。/。)目標產(chǎn)物40:m/z=600(M+H)+;!H-NMR(CDC13):8.10(d，/=9,3Hz,1H),7.50(s，1H),7.39(s,1H)，7.25(dd，/=9.3Hz,2.4Hz,1H)，6.98(d>/=2.4Hz,1H)，5.81-5.62(m，2H),5.56(t，■/=3.8Hz1H)，5.29諷</=1.3Hz,17.2Hz，1H)，5.12(dd^/-1.5Hz，10.4Hz，1H),5.00-4.86(ra，3H)，4.35(t，/=7.5Hz，2H)，3.98(s，3H)，3.48-3.37(m，1H)，3.10-3.00(m，1H)，2.87(s，3H)，2.77-2.67(叫2H),2.41-2.32(叫1H)，2.10(dd,/=8.6Hz,17.4Hz，1H),1.98(dd，/:14.4Hz'7.1Hz,2H)，1,88諷5.6Hz,8.1Hz,1H)，1.57-1.46(m，3H)，1.35-1.18(n^5H).步驟E<formula>formulaseeoriginaldocumentpage96</formula>往40(1.3g,2.17mmol)在脫氣的無水二氯乙烷(lL)中的溶液中加入Hoveyda-Gmbbs笫一代催化劑(261mg,20mol%)。隨后，在氮氣氣10氛下將該反應(yīng)混合物升至70。C保持20小時。將得到的混合物冷卻至室溫，隨后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。得到的油狀物經(jīng)硅膠柱層析純化(90/10的CH2Cl2/EtOAc)，得到720mg(58%)米黃色固體狀的標題產(chǎn)物41:附々=572(M+H)十;!H-NMR(CDC13):7.95(d>/=9-1Hz，1H)，7.55(s，1H),7.5(s,1H),7.10(dd，/=9.1Hz,2.4Hz,1H)，6.91(d,/=2.4Hz,1H)，5.85(brs,1H)，5.65(d《/=18.2Hz，8.0Hz，1H)，5.15(t，/=10.0Hz，1H)，4.80(t，7.2Hz,1H)，4.19-4.28(m,2H)，4.05(dd，/=3,7Hz,>/=11.3Hz,1H)，3.90(s，3H)，3.69(4/=11.5Hz，1H)，3.49-3.58(叫IH)，3.00-3.10(m，1H)，2.90(s，3H)，2.45-2.55(m，2H)，2.30-2.45(m，1H)，2.10-2.20(m，1H)，1.90-1.95(m,3H)，1.50-1.70(m，2H),1.20-1.45(m，5H).步驟F往41(100mg，0.18mmol)在四氫呋喃(5mL)和甲醇(2mL)中的溶液中加入在水(3mL)中的氫氧化鋰(lS0mg，3.6mmo1)。在室溫下48小時后，加入水并用1NHC1將得到的溶液的pH調(diào)至3。隨后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，干燥(Na2S04)，蒸發(fā)。殘余物用乙醚研磨，過濾，得到85mg(89o/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物42:'H-NMR(CDC13):7.95(d^/=9.1Hz,1H),7.55(s,1H)，7.15(s，1H),7.10(dd,/-9.1Hz，2,4Hz，1H),6.90(4/=2,4Hz，1H)，5,85(brs，1H),5.65(d4/=18,2Hz，8.0Hz,1H),5,15(t，/=10.0Hz，1H)，4.80(t，/=7.2Hz，1H)，4.05(dd,/-11.3Hz，3.7Hz'1H),3,90(s'3H),3.70-3.80(m,1H)'3.60(d^-11.3Hz,1H)，2.85(s，3H),2.80-2.85(叫1H)，2.25-2.50(m，4H)，1.95-2.00(m，1H)，2.90(dd>/=8,6Hz，5.9Hz，1H)，1.55-1.60(m，3H)，1.30-1,50(m，3H).實施例11:合成N-[17-(3-氯-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(43)在氮氣氣氛下，將17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13，15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(42)(80mg,0.147mmol)和羰基二咪唑(48mg，0.295mmol)在無水5THF(25mL)中的溶液攪拌回流3小時。隨后，將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入環(huán)丙基石黃酰胺(54mg,0.442mmol)和DBU(52mg，0.34mmo1)。將得到的溶液于50。C下攪拌48小時。隨后將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水間分配。將有機層千燥(MgS04)，過濾，隨后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(CH2Cl2/EtOAc,95:05),得到含環(huán)丙基磺酰胺雜質(zhì)的標題10產(chǎn)物。該固體在水中研磨10分鐘并過濾，用水洗滌，高真空干燥，再次在乙醚中研磨，過濾，得到37mg(39。/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物43:647(M+H)+;，H-NMR(CDC13):10.40(brs,1H),7.95(d,/=9.1Hz,1H)，7,55(s，1H),7.15(s,1H)，7.10諷/=9.12Hz，2.4Hz,1H),6.90(d>/=2.4Hz，1H)，5.85(brs，1H),5.65(dd,18.2Hz，8.0Hz,1H),5.15(t，/=10.0Hz，1H)，4.8(t，</=7.2Hz，1H)，4.10(dd，/=11.3Hz，3.8Hz，1H)，3.9(s,3H),3.60-3.70(m，1H),3.6(411.3Hz,1H)，3.10-3.20(m，1H)，2.90-3.00(m，1H)'2.85(s，3H)，2.4-2.6(m'3H)，1.90-2.203H),1.25-1.60(m,7H),0.90-U0(m'2H).實施例12:合成17-(5-溴-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基15-2，14-二氧代-3,13,15-三氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(50)步驟A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage99</formula>往Boc-羥基脯氨酸(1.0g，4.4mmol)、環(huán)丙基氨基酸25(825mg，4.3mmol)、HATU(1.7g，4.48mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入二異丙基乙基胺(1.9mL，10.9mmo1)。在室溫下2小時后，加入二氯曱烷(200mL)。該溶液依次用飽和的NaHC03和水洗滌。將有機層千燥并濃縮。殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2CyEtOAc，50:50),得到1.2g(76。/。)目標產(chǎn)物44:m/z=369(M十H)十;'H-NMR(CDC13):5.80-5.67(m,1H)，5.32-5.24(d，/=17.1Hz,1H),5.16-5.08(d■/=10.3Hz，1H)，4.614.45(叫1H)，4.45-4.29(bs,1H)，4.23-4.03(m，2H)，3.78-3.39(m，2H)，2.14-1.97(ra,1H),1.97-1.81(brs，1H)，1.81-1,32(w12H)，1.22(t，</=7.1Hz，3H).步驟B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage99</formula>在0。C下，往44(5.42g，7.4mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液中加入三乙胺(3.2mL,22mmo1)。在5分鐘后，于0。C下滴加間硝基苯曱酰氯(3.26g，18mmol)在CH2Cl2(50mL)t的溶液。隨后，讓該反應(yīng)混合物升至室溫。在20小時后，將該溶液傾入水冷卻的水中，用鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，過濾，隨后蒸發(fā)。粗制殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2Cl2/EtOAc，90:10),得到2.15g(56%)目標產(chǎn)物45:;n/z=518(M+H)+;^-NMR(CDC13):8.30(d,/=8.8Hz,2H)，8.16(d,/=8.8Hz，2H)，5.82-5.70(m，1H)，5.59-5.54(m,1H)，5.31(dd，J-17.2Hz，1.5Hz，1H),5.14(d，/=10.1Hz，1H),4.56-4.40(brs,1H)，4.26-4.15(m，2H),3.80-3.67(m，2H)，2.16-2.06(m,1H),1.98-1.84(bs，1H),1.59-1.48(bs，1H)，1.48-1.38(bs'12H)'1.280.213H).步驟c<formula>formulaseeoriginaldocumentpage100</formula>將45(2.15g，4.15mmol)在l:2的TFA畫DCM(80mL)中的溶液在室溫下保持4小時。隨后，加入曱苯(10mL)并將該溶液蒸發(fā)至干，得到目標化合物46(HPLC測得的純度〉95。/。)m/z-418(M+H)+。步驟D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage100</formula>10往46(1.73g，4.14mmol)和碳酸氬鈉(3.53g,42mmol)在THF(35mL)中的混合物中加入光氣(1.6mL,1.9M，在曱苯中，9.28g，4.5當量)。在室溫下1.5小時后，將該反應(yīng)混合物過濾，將得到的濾液蒸發(fā)，隨后將粗品重新溶解在二氯甲烷(35mL)中。隨后，加入^f友酸氬鈉(3.35g，o兒42mmol),接著加入(己-5-烯)(曱基)胺21(l.lg,9.67mmol)。在室溫下12小時后，將該反應(yīng)混合物過濾。隨后，加入水并且該混合物用二氯曱烷萃取。將合并的有機層干燥(MgS04)，過濾，隨后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(CH2Cl2/EtOAc，95:5)，得到2.31g(79%)目標產(chǎn)物47:附々=557(M+H)+;'H-NMR(CDC13):8.28(48.9Hz，2H)，8,13(d，/=8.9Hz，2H)，7.39(s，1H)，5.81-5.62(m，2H)，5.56(t'/=3.8Hz，1H),5.29(dd'/=17.2Hz，1.3Hz'1H)，5,12(dd，/=10.4Hz，1.52Hz,1H)，5.00-4.86(m，3H)'4.204.06(m,2H)，3.79(dd,/-12.1Hz,3.5Hz，1H),3.57(dd，/=12.1Hz，1.8ffe，1H),3.48-3.371H)，3.10-3.00機1H)，2.87(s,3H),2.77-2,67(m，1H)，2.41-2.32(m1H),2.10諷/=8.6，17.4Hz,1H)，1.98(dd，/=14.4Hz,7.1Hz,2H)，1.88(dd，</=8.1Hz,5.6Hz，1H)，1.57-1.46(m，3H),1.35-1.18(m，5H).步驟E在氮氣氣氛下，將47(1.8g,3.28mmol)Hoveyda-Grubbs第一代催10化劑(400mg，20mol。/o)在脫氣的無水二氯乙烷(2.0L)中的混合物升至7CTC保持20小時。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，隨后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2CVEtOAc，90:10),得到888mg(5P/。)米黃色固體狀的所需化合物48:w/z=529(M十H)+;'H-NMR(CDC13):8.28(d>/=8.8Hz，2H),8.16(d，/=8.8Hz，2H)，7.47(s，1H)，5.76>5.67(m，1H)，5.62-5.57(t，/=3,5Hz，1H)，5.29(dd，10.5Hz，7.8Hz，1H)，4.82(t^/-9.8Hz,7.1Hz，1H)，4.18-4.07(m，2H),4.00-3.88(m，2H)，3.55(d，11.6Hz，1H),3.07-2,97IH)'2.91(s，3H)，2.64-2.54(A1H),2.48-2.29(m，2H),2.16(dd，IH，J-17.4Hz'8.6Hz'1H),1.96-1.83(m,3H)，1.80-1.61(m，2H),1.45-1.25(m，2H),1.22(t，J;7.1Hz，3H).步驟F在0。C下往48(451mg，853mmol)在THF(25mL)中的溶液中加入5氫氧化鋰(71mg，1.66mmol)在水(5mL)中的溶液。在0。C下3小時后，該反應(yīng)混合物用水(25mL)稀釋，隨后用1NHCl酸化至pH為3。得到的溶液用乙酸乙酯萃取，千燥(MgS04)，過濾，隨后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2CyMeOH,90:10),得到234mg(72%)49:8.18(s，1H),7.66(s，1H),5.69(dd,/=18.0Hz,7.6Hz，1H)，5.37(t,/=9,6Hz，1H),4.68(dd,■/=9.6Hz，7.6Hz，1H),4.78-4.11(bs，1H)，4,18-3.91(叫2H)，3.79-3.612H),3.34(d，/=11.1Hz,1H)，3.19-3.06(m,1H)，2.85(s，3H),2.34-2.09(m，4H)，2.00-1,892H)，1.73(dd，/=8.8Hz，5.6Hz,1H)，1.69-1,52(m，2H)，1.40-1.272H)，1.20(t,</=7.1Hz'3H).io步驟G<formula>formulaseeoriginaldocumentpage103</formula>在0。C下，往49(260mg，0.683mmol)在DMF(8mL)中的溶液中少量分批加入氫化鈉(68.25mg，1.7mmo1)。將該混合物于室溫下攪拌2小時。隨后，在氮氣氣氛下一次性加入異喹啉19(241mg，0.887mmo1)。讓該混合物升至室溫。在20小時后，將該反應(yīng)混合物傾入冰冷卻的水(20mL)中并用CH2Cl2萃取，干燥(Na2S04)，過濾，蒸發(fā)。經(jīng)柱層析純化(96/4的CH2Cl2/MeOH),隨后如前所述進行酯水解，得到159mg(40。/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物50:m/z=588(M+H)+;H-NMR(CDC13):8.13(4/=9.1Hz，1H)，7.97(d，/=6,2Hz,1H)，7.54(d，/=6.2Hz，1H),7.39-7.30(bs,1H)，7.22(d>9.2Hz，1H)，5.卯-5.83(bs，1H)，5.71(dd乂-17.9Hz，8.1Hz，1H)'5.18(t'10.1Hz，1H)，4.79(dd，J-9.1Hz，7.3Hz,1H)，4.10-3.97(m，4H)，3.81-3.66(m，1H),3.62(d,lH，《/=11.6Hz，1H),3.19-3,051H)，2.85(s，3H)，2.59-2.22(m,4H)，2.01-1.90(m，1H),1.89(dd'/=8.6Hz，5.8Hz,1H),1.70(dd,/=9.8Hz，6.1Hz,1H)，1.67-1.58(m,2H)，1.43-1.28(m,2H).實施例13:合成N-[17-(5-溴-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-甲基-2，14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(51)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage104</formula>在氮氣氣氛下，將50(151mg，0.257mmol)和羰基二咪唑(162mg,0.437mmol)在無水THF(10mL)中的溶液攪拌回流2小時。如需要，可任選分離氮雜內(nèi)酯衍生物。隨后，將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并加入環(huán)丙基磺酰胺(58mg，0.482mmol)和DBU(76mg,0.502mmo1)。將得到的溶液于5(TC下攪拌12小時，隨后冷卻至室溫。該反應(yīng)混合物用水幹滅，隨后用乙酸乙酯萃取，干燥(MgS04)，過濾，蒸發(fā)。粗品經(jīng)柱層析純化(CH2CVEtOAc，95:5)。將得到的固體在水中研磨，過濾，高真空干燥，用乙醚研磨，再高真空干燥，得到138mg(77。/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物51:w/z=691(M+H)+;'H-NMR(CDC13):10.70(brs,1H)'8,12(d,9.1Hz，1H)，7.97(4/=6,3Hz，1H),7.54(4/=6.3Hz,1H),7.21(d，■/=9.1Hz，1H)，6.70(bs，1H),5.88(bs,1H)，5.74(dd，17.3Hz，8.3Hz,1H),5.16(t，/=10.4Hz，1H),4.74(d《9.4Hz'7.3Hz，1H),4.11-3.98(m，4H)，3.69-3.55(m，2H)'3.27-3.10(ra'1H)，3.02-2.89(m，1H),2.83(s'3H)，2.58-2.35(m'3H)'2.29-2.13(叫1H),2.11-1.92(m，2H)，1.75-0,76(m,9H).實施例14:合成N-[17-[5-(4-甲基-3-吡咬基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-l3-曱基-2,14-二氧代-3,13,l5-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳15-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(52),<formula>formulaseeoriginaldocumentpage105</formula>甲基吡。定-3-硼酸(5.9mg，0.005mmol)和碳酸鈉(5.8mg，將51(17.3mg，0.025mmo1)、6國0.028mmo1)、四(三苯基膦)合鈀(8.2mg，0.055mmol)在DMF(2mL)中的溶液升至90。C保持20小時。隨后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，隨后將溶劑蒸發(fā)。殘余物經(jīng)HPLC純化，得到3.7mg(2P/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物52:w/z=703(M十H)+;'H-NMR(CDCb):10.6(bs,1H),8.8(s，1H)，8.12(4/=9.1Hz，1H)，7.97(d，</=6.3Hz，1H),7,9(d,/=9.0Hz，1H)，7.54(46.3Hz，1H),7.3(d，Hz，1H)，7.21(d,/=9.1取1H),6,68(brs，1H)，5.87(brs,1H)，5.74(d山/=17,3Hz，8.3Hz,1H)，5.16(t，■/=10.4Hz，1H),4.74(dd，/=9.4Hz,7.3Hz,1H)，4.11-3.98(m,4H),3.69-3.55(m,2H),3.27-3.10(m，1H),3.02-2.89(m，1H)，2.83(s，3H)，2.58-2.35(m，3H)，2.50(s，3H)，2.29-2.13(m，1H),2.11-1.92(m，2H)，0.75-1.76(m，9H).實施例15:合成^[17-[5-(4-甲氧基苯基)-6-甲氧基異喹啉-1-基-10氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7畫烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(53)采用制備N-[17-[5-(4-甲基-3-p比啶基)-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13，15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(52,實施例14)的方法，由N-[17-(5-溴-6-曱5氧基異喹啉-l-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13，15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(51，實施例13)和4-曱氧基苯硼酸制備標題產(chǎn)物m/z=718(M+H)+。實施例16:合成N-[17-[5-苯基-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-曱10基-2,14-二氧代-3，13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(54),八、廣》k》10采用制備N-[17-[5-(4-甲基-3-吡啶基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯國4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(52，實施例14)的方法，由N-[17-(5-溴-6誦甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(51，實施例13)和苯硼酸制備標題產(chǎn)物m/z-688(M+H)+。實施例17:合成17-(6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(55)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage107</formula>采用與制備17-(3-氯-6-甲氧基-異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(42，實施例IO)所述相同的方法，由1-氯-6-甲氧基異*啉酮10制備標題產(chǎn)物55:w/z=509(M+H)+;'H-MMR(CDC13):7.98(4/=9.2H7',1H)，7.9(d，6.1Hz,1H),7.2(s'1H)，7.1(d4J=9.2Hz，2.4Hz,1H),7.10(4/=6.1Hz，1H)，6.90(d，J-2.4Hz，1H),5.85(brs，1H)，5,65(dd乂-18.2Hz，8,0Hz,1H),5.15(t，10,0Hz，1H),4.80(t，7,2Hz,1H)，4,05(dcU=11.3Hz，3.7Hz，1H)，3.90(s,3H)，3.70-3.80(m，1H)，3.60(d,/=11.3Hz，1H)，2.85(s，3H)，2.80-2.85(m，1H),2.25-2.50(m,4H),1.95-2.001H)，2.卯(dd，/=8.6Hz，5.9Hz，1H)，1.55-1.60(m,3H)，1.30-1.50(m,3H),實施例18:合成N-[17-(3-苯基-6-曱氧基異會啉-l-基氧基)-13-曱基-2，14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(56)采用與制備N-[17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)石黃酰胺(43，實施例ll)所述相同的方法，由17-(6-甲氧基異*啉國1誦基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳_7-烯-4-甲酸(55)制備標題產(chǎn)物56:m/z=688。實施例19:合成17-(3-(4-三氟曱氧基苯基)-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7國烯-4-甲酸(57)15采用與制備17-(3-氯-6-曱絲異喹啉-1-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(42，實施例IO)所述相同的方法，由l-氯-3-[4-(三氟甲基)苯基]-6-甲氧基異喹啉酮制備標題產(chǎn)物57:(M+H)+;H-NMR(CDC13):8.08(4/-8.4Hz，2H)，8.02(dJ-9.1Hz,IH)，7.55(s，IH)，7.30(d，/=8.4Hz，2H)，7.11(dd，/-9.1Hz,1.5，IH)，7.05(d，J^1.5Hz，IH)，6,07-5.95(bs，1H),5.71(dd,/=8.8Hz，■/=17.4Hz，IH)，5,24-5.09(m，IH)，4.84-4.79(叫4.14-4.03(m，IH)，3.92(s，3H)，3.77-3.58(m,3H)，3.20-3.07(m'IH)，2,86(s，3H),2,63-2.38(m，3H)，2.38-2.22(m，IH)，2.01-1.84(m,2H),1.74-1.38(m，5H).5實施例20:合成N-[17-(3-(4-三氟甲氧基苯基)-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7一烯_4_羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(58)采用與制備N-[17-(3-氯-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基10-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)石黃酰胺(43，實施例ll)所述相同的方法，由17-(3-(4-三氟曱氧基苯基)-6-曱氧基-異喹啉-l-基氧基)-13-甲基-2，14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(57)制備標題產(chǎn)物58:附/z=772(M+H)+;'H-NMR(CDC13):10.63-10.57(brs,1H)，8.00(4/=8.5Hz，2H)，7,94(4/=9.0Hz，1H)，7.49(s，1H)，7.26(d,/=8.5Hz，2H),7.01(d(^■/=9.0Hz，2.4，1H)，6.98(d，2.4Hz，1H)，6.79-6.72(bs，1H),5.98-5.92(叫1H)，5.67(dd,/=7.8Hz'>/=18.9Hz，1H)，5.09(t'10.4Hz，1H)，4.71(t，7=8.1Hz，1H)，4.03(dd,/=11.0Hz，4.0，1H),3.85(s，3H)，3.64(《11.0Hz,1H)，3.61-3.53(m1H)，3.15-3.03(ra，1H)，2.93-2.82(ra，1H)，2,77(s，3H)，2.54-2.38(m，3H)，2.25-2.08(ra，1H)，2.04-1.87(m,2H)，1.66-0.86(m，9H).實施例21:合成17-(4-溴-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十/^友-7曙烯-4國曱酸(65)步驟A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage110</formula>在0。C、氮氣氣氛下，往44(10g,27mmo1)、4-硝基苯甲酸(6.8g,41mmol)和三苯基膦(llg,41mmol)在無水THF(200mL)中的溶液中加入DIAD(8.2g，41mmo1)。隨后將該反應(yīng)升至室溫。在12小時后，將10溶劑蒸去，隨后粗品經(jīng)快速柱層析純化(梯度洗脫EtOAc/CH2Cl2，95/5至75/25)，得到8.1g(58。/。)目標產(chǎn)物加/z=518(M+H)+,!H-NMR(CDC13):8.20(s'4H),5.65-5.80(m，1H),5.55(brs，1H)，5.2(dd，/=17.0Hz,10.2Hz,1H)，4.4-4.5(m,1H)，3.94.1(m，2H)，3.75-3.85(m，1H)，3.6-3.7(m,1H)，2.0-2.1(m，1H)，1.80-1.90(m，1H)，1.50-1.70(n^5),1.50(s，9H)，1.10(t,/-7.1Hz,3H).步驟B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage111</formula>往60(5.56g,13.3mmol)和碳酸氬鈉(U.5g，137mmol)在THF(120mL)中的混合物中加入光氣(1.6mL，1.9M在甲苯中，4.5當量)。在室溫下1.5小時后，將該反應(yīng)混合物過濾，將得到的濾液蒸發(fā)，隨后將粗品重新溶解在二氯甲烷(35mL)中。隨后加入碳酸氬鈉(11.55g，137mmo1),接著加入(己-5-烯基)(曱基)胺21(2.65g,23.4mmo1)。在室溫下12小時后，將該反應(yīng)混合物過濾。隨后加入水，將該混合物用二氯甲烷萃取。將合并的有機層干燥(MgS04)，過濾，隨后蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化(CH2CVEtOAc，95:5),得到7.41g(58。/。)目標產(chǎn)物61:02N將59(6.89g，13.3mmol)在l:4的TFA-DCM(250mL)中的溶液于室溫下保持4小時。隨后加入甲苯(30mL),將該溶液蒸干，得到目標化合物60(HPLC測得的純度〉97%):m/z=418(M+H)+。步驟C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage111</formula>m/z=557(M+H)+;H-NMR(CDC13):8.28(4/-8.9Hz,2H)，8.13(d，/=8.9Hz'2H)，7.39(s'1H)，5.81-5.62(m，2H)，5,56(t，J-3.8Hz，1H)，5.29(d(U-17.2Hz，1.3Hz，1H)，5.12(d4/=10.4Hz'1.52Hz，IH)，5.00-4.86(m，3H),4.204.06(m，2H),3.79(dd,J=12.1Hz，3.5Hz,1H),3.57(dd，12.1Hz,1.8Hz，1H),3.48-3.37(m，1H),3.10.3.001H)，2.87(s，3H)，2.77-2,67(m,1H)，2.41-2.32(m^1H)'2.10(dd'■/=8.6，17.4Hz,1H)，1,98((14/=14.4Hz，7.1Hz，2H)，1.88(dd，J-8,1Hz,5.6Hz，1H)，1.57-1.46(m，3H),1.35-1.18(m，5H).步驟D、、、61在(TC下往61(4.34g,6.39mmol)在THF(180mL)中的溶液中加入5氫氧化鋰(632mg，14.8mmol)在水(40mL)中的溶液。在CTC下2小時后，該反應(yīng)混合物用水(25mL)稀釋，隨后用1NHCl酸化至pH6。得到的溶液用乙酸乙酯萃取，干燥(Na2S04)，過濾，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2CVMeOH，96:04)，得到2.1g(80%)62:附/z=408(M+H)+;!H-NMR(CDC13):5,84-5.68(11%2H)，5.29(dd，/=17.2Hz，1.3Hz，1H)，5.12(dd，/=10.4Hz,1.52，1H),5.05-4.93(m，2H),4.78(dd'/=9.1Hz，1.77,1H)，4.60(d,/=9.1,1H),4.464.37(m，1H),4.24-4.05(叫2H),3.66(d，/=10.4Hz，1H),3.43(dd，《/=10.4Hz，4.55，1H),3.37-3.26(m，1H)，3.17-3.07(m，1H)，2.88(s，3H)，2,29-2.02(m，5H)，1.87(dd，/=8.3Hz，5.6，1H),1.67-1.52(叫3H)，1.49(dd，/=9.8Hz，5.31，1H)，1.44-1.38(m2H)，1.22(t,/-7.1Hz，3H).10步驟Eo在-25。C、氮氣氣氛下，往62(900mg，2.208mmo1)、異喹啉13(673mg，2.65mmol)和三苯基膦(81Omg，3.1mmol)在無水THF(50mL)中的溶液中加入DIAD(669mg，3.31mmo1)。隨后，將該反應(yīng)在-10至5"5。C下保持3小時。將該混合物傾入冰冷卻的水溶液中，隨后用乙酸乙酯萃取。將合并的有機層干燥(MgS04),過濾，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)快速柱層析純化(梯度洗脫EtOAc/CH2Cl2，90/10)，得到lg目標產(chǎn)物63:m/z=644(M+H)+。在氮氣氣氛下將63(lg,1.55mmol)和Hoveyda-Grubbs第一代催化劑(186mg,310mmol)在脫氣的無水二氯乙烷(1.0L)中的混合物升溫至70。C保持20小時。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，隨后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。殘余物經(jīng)柱層析純化(CH2Cl2/EtOAc,90:10),得到360mg(38%)15米黃色的所需化合物64:m/z=616(M+H)+。步驟F步驟G往64(360mg，0.585mmol)在四氫呋喃(15mL)和曱醇(5mL)中的溶液中加入在水(3mL)中的氫氧化鋰(375mg，8.77mmo1)。在室溫下48小時后，加入水，將得到的溶液的pH用1NHC1調(diào)節(jié)至3。隨后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，干燥(Na2S04),蒸發(fā)。殘余物用乙醚研磨，過濾，得到300mg(87。/。)白色粉末狀的標題產(chǎn)物65:w/2=588(M+H)+;!H-NMR(CDC13):8.5(s,1H),8.2(4/=9.1Hz，1H)，7.35(brs，1H)，7.3(d，/=2.5Hz,1H),7.17(dd，《/=9.1Hz,2.5Hz,m)，5.8-5.85(brs，1H),5.7(d(W-18.3Hz'7.8Hz,1H),5.15(t,J=10.0Hz，IH)，4.80(dd，/=9.2Hz,7,IH)'4.05(dd,J=11.2Hz,4Hz,1H),3.95(s，3H)，3.70-3,80(m，1H),3.60(d，《/=11.2Hz，IH)，3-3.1IH)，2.85(s,3H)，2.40-2.50(m，3H)，2.25-2.40(m,IH)，1.85-1.95(m，3H),1.6-1,7實施例22:合成N-[17-(4-溴-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基)-13-甲基10-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(66)采用與制備N-[17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(43,實施例ll)所述相同的方法，由17-(4-溴-6-甲氧基異5喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13，15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳_7-烯-4-甲酸(65)制備標題產(chǎn)物66:附/z=691(M+H)+;!H-NMR(CDC13):10.7(brs，1H)，8.09(d9.1Hz,1H)，7,3(d，2.4Hz，1H)，7.25(s,1H)'7.15(dd,/=9,1Hz，2.4'1H),7(brs，1H)，5.8(brs，1H),5.74(dd^18.2Hz，8,1H)，5.1610.3Hz,1H)，4,74(dd，/-9,3Hz，7,1H)，4.05(dd，/=11.1Hz，4,1H)，3.95(s，3H),3.6(d，J-1UHz,1H)，3.1-3.2(m，1H),2.9-3IH),2.83(s，3H),2.4-2.5(m，3H)，2.19-2(ra^2H)，2.5-2.7(m,4H),1.4-13H)，1.2-1.35(m,2H)'1.05-1.15(m,1H)，0.95-1(m，1H),實施例23:合成17-(3-吡唑-1-基-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-10甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(67)采用與制備17-(3-氯-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15_三氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(42，實施例IO)所述相同的方法，由l-羥基-6-甲氧基-3-(吡唑-l-基)異喹啉制備標5題產(chǎn)物67:m/z=575(M+H)+。實施例24:合成N-[17-(3-吡唑-l-基-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(68)釆用與制備N-[17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3，13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(43,實施例ll)所述相同的方法，由17-(3-吡唑-1-基-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)15[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-甲酸(67)制備標題產(chǎn)物68:m々=678(M+H)十;'H-NMR(CDC13):10.5(brs，1H)，8.4(dd,/=2.5Hz，0.5，1H),8(49.8Hz,1H)，7,75(s,2H)，7.00-7.10(m,2H)，6.55(s，1H)，6.45(dd,</=2.5Hz，0.5，1H),5.95(brs,1H),5.75(d4/=18.1Hz，8Hz,1H)，5.1(t，/-10.3Hz，1H)，4.75(t，/=7.0Hz,1H)，4.1(d4/=11.0Hz,4.3,1H)，3.卯(s，3H)，3.70(d，/=11.0Hz，1H)，3.10-3.20(m，1H)，2.90-3.01(m,1H)，2,85(s，3H)，2.50-2.62(m，3H)，2.20-2.30(m，1H)，1.90-2.00(m，2H)，1.55-1.60(ra，4H)，1.30-1.50(m，6H).實施例25:合成17-[3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳5-7-烯-4-曱酸(69)采用與制備17-(3-氯-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二氧代-3，13，15-三氮雜三環(huán)[13,3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(42，實施例IO)所述相同的方法，由l-羥基-3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-甲氧基異喹10啉(6)制備標題產(chǎn)物69:m/z=634(M+H)+。實施例26:合成N-[17-[3-(4-異丙基噻唑-2-基)-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳_7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(70)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage118</formula>采用與制備1^-[17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(43,實施例ll)所述相同的方法，由17-[3-(4-異丙基p塞唑5-2-基)-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(69)制備標題產(chǎn)物70:m/z=737(M+H)+。實施例27:合成17-[3-(2-異丙基氨基噻唑-4-基)-6-曱氧基異喹啉10-1-基氧基]-13-曱基-2，14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八石友_7-烯-4-甲酸(71)采用與制備17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基)-13-甲基-2,14-二<formula>formulaseeoriginaldocumentpage118</formula>氧代-3,13,15-三氫雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(42,實施例IO)所述相同的方法，由l-羥基-3-(2-異丙基M噻唑-4-基)-6-曱氧基異喹啉制備標題產(chǎn)物71:m/z=649(M+H)+。實施例28:合成N-[17-[3-(2-異丙基氨基噻唑-4-基)-6-甲氧基-異喹啉-1-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3，13，15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳_7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(72)釆用與制備>1-[17-(3-氯-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基)-13-曱基10-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(43，實施例ll)所述相同的方法，由17-[3-(2-異丙基氨基噻唑-4-基)-6-甲氧基異喹啉-l-基氧基]-13-甲基-2,14-二氧代-3,13,15隱三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4-曱酸(71)制備標題產(chǎn)物72:wi/z=752(M+H)+.NMR(CDC13):0.93-1.03(m，1H),1.05-1,15(m，1H),1.18-1.28(m，3H)，1.32(d，/-6,6Hz,3H)，1,34(4/=6.6Hz,3H)，1.36-1.67(m，4H),1.93-2.07(m，2H),2.22-2.36(m,1H)，2.45-2.65(W3H)，2.85(s,3H)，2.91-3.001H)，3.05-3.17(m，1H)，3.64-3.80(m，3H),3.89(s,3H)'4.08(dd,7-3.8Hz,/=10.9Hz，1H)，4.78(t，J-8.1Hz，1H)，5,15(t，/=10.4Hz,1H)，5.21-5.36(寬峰s,1H)，5.73(dd，8.1Hz,/=18.4Hz，1H)，5.94-6.02(m，1H)，6.92-6.99(寬峰s，1H)，7.00-7.07(m，2H),7.22(s，1H)，7.74(s，1H)，7.95(d，《/=8.6Hz，1H)，10.54-10.99(寬峰s，1H).實施例29:合成18-[5-溴-6-曱氧基異會啉-1-基氧基]-2,15-二氧代-3,14,16-三氮雜三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳隱7-烯國4誦曱酸(74)5往Boc-羥基脯氨酸(1.15g，4.99mmol)在THF(50mL)中的溶液中加入NaH(60。/。在礦物油中，500mg,12.5mmo1)。將得到的溶液于室溫下攪拌l小時，隨后加入5-溴-6-甲氧基異喹啉(1.36g，4.99mmo1)。在室溫下、氮氣氣氛下48小時后，該反應(yīng)混合物用水冷卻的水捽滅，用HC1酸化至pH4,隨后用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，干燥(MgS04)，10過濾，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)柱層析純化(梯度洗脫EtOAc/CH2Cl2，5:95至50:50)，得到751mg(32.2。/。)白色固體狀的73:m/z=468(M+H)+。合成18-[5-溴-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基]-2,15-二氧代-3,14，16-三氮雜-三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7-烯-4-曱酸(74)采用與制備17-(3-氯-6-曱氧基異喹啉-1-基氧基)-13-曱基-2,14-二氧代-3,13,15-三氮雜-三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳-7-烯-4_甲酸(42)所述相同的方法(步驟B-F)，由中間體73和庚-8-烯胺制備標題化合物m/z=588(M+H)+。步驟A步驟B實施例30:合成N-[18-[5-溴-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基]-2,15-二氧代-3,14,16-三氮雜三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7-烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(75)Br采用與制備N-[17-[3-(4-環(huán)丙基噻唑-2-基)-6-曱氧基異喹啉-l-基氧基]-13-曱基-2,14-二氧代-3,13-二氮雜三環(huán)[13.3.0.04'6]十八碳國7誦烯-4-羰基](環(huán)丙基)磺酰胺(30)所述相同的方法，由18-[5-溴-6-甲氧基異喹啉-1-基氧基]-2,15-二氧代-3,14,16-三氮雜三環(huán)[14.3.0.04'6]十九碳-7-10烯-4-甲酸(74)制備標題化合物m/z=691(M+H)+。實施例31:合成晶狀(chrystalline)環(huán)戊烷合成3-氧代-2-氧雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷-5-曱酸叔丁酯(77)15在0°C、惰性氬氣氣氛下，往攪拌的76(180mg，1.15mmol)在2mLCH2C12中的溶液中加入DMAP(14mg,0.115mmol)和Boc20(252mg，1.44mmol)。將該反應(yīng)升至室溫并攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物濃縮，隨后粗品經(jīng)快速柱層析純化(梯度洗脫15:1,9:1,6:1,4:1，2:1的甲苯/乙酸乙酯)，得到白色晶狀的標題化合物(124mg,51%)。iH-NMR(300MHz,CD3OD)51.45(s,9H),1.90(d，11.0Hz，1H)，2.10-2.19(m，3H)，2.76-2.83(ra，1H)，3.10(s，1H),4.99(s，1H);"C隱NMR(75.5MHz，CD3OD)S27.1，33,0，37.7，40.8,46.1，81.1,81.6,172,0，177.7.制備化合物77的替代方法在氮氣氣氛下，將化合物76(13.9g，89mmol)溶解在二氯曱烷(200ml)中，隨后將其冷卻至約-l(TC。隨后往該溶液中鼓泡通入異丁5烯，直至總體積增至約250ml，這樣得到渾濁的溶液。加入BF3.Et20(5.6ml，44.5mmol,0.5當量)，在氮氣氣氛下將該反應(yīng)混合物保持在約-10。C。在10分鐘后，得到澄清的溶液。該反應(yīng)用TLC監(jiān)測(3:2的乙酸乙酯-甲苯(用幾滴醋酸酸化)和4:1的己烷-乙酸乙酉旨，用堿性過錳酸鹽溶液顯色)。在70分鐘時，僅殘留痕量的化合物1076，往該反應(yīng)混合物中加入飽和的NaHCO3水溶液(200ml)，將其劇烈攪拌10分鐘。有機層用飽和的NaHC03(3x200ml)和鹽水(1x150ml)洗滌，隨后用亞硫酸鈉干燥，過濾，將該殘余物蒸至油狀殘余物。往殘余物中加入己烷后產(chǎn)物沉淀。加入更多的己烷，隨后加熱至回流，得到澄清的溶液，產(chǎn)物從該溶液中結(jié)晶。過濾收集晶體并用己烷洗滌15(室溫)，隨后風干72小時，得到無色針狀物(12.45g，58.7mmo1，66%)。實施例32:式(I)化合物的活性復(fù)制子測定通過細胞測定檢測式(I)化合物抑制HCVRNA復(fù)制的活性。該測20定證明式(I)化合物在細胞培養(yǎng)物中表現(xiàn)抗HCV復(fù)制子功能的活性。細胞測定以雙順反子表達結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)，如描述于Lohmann等(1999)Science,285巻，110-113頁，并如Krieger等(2001)JournalofVirology75:4614-4624進行了改進，為多輩巴篩選策略?；旧希摲椒ㄈ缦滤?。25該測定利用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系Huh-7luc/neo(下文稱為Huh-Luc)。該細胞系包含編碼雙順反子表達構(gòu)造的RNA，所述表達構(gòu)造包含從腦心肌炎病毒(EMCV)的內(nèi)核糖體進入位點(IRES)翻譯的HCVlb型的野生型NS3-NS5B區(qū)，該區(qū)之前是報道部分(FfL-熒光素酶)和可選擇標記部分(neo11,新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶)。該結(jié)構(gòu)以HCVlb型的5'和TNTR(非翻譯區(qū))為邊界。在G418(neoR)存在下復(fù)制子細5胞的繼續(xù)培養(yǎng)取決于HCVRNA的復(fù)制。將表達HCVRNA(高水平自主復(fù)制，特別是編碼熒光素酶)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的復(fù)制子細胞用于篩選抗病毒化合物。將復(fù)制子細胞接種在添加有不同濃度的試驗和對照化合物的384孔板內(nèi)。培養(yǎng)3天后，通過測定熒光素酶的活性(用標準熒光素酶測10定底物和試劑以及PerkinElmerViewLuxTmultraHTS微板成像儀)測定HCV的復(fù)制。在無任何抑制劑的情況下，對照培養(yǎng)物中的復(fù)制子細胞具有高熒光素酶表達。對Huh-Luc細胞監(jiān)測化合物對熒光素酶活性的抑制活性，得到各種待測化合物的劑量-效應(yīng)曲線。然后計算EC50值，該值代表使檢測的焚光素酶活性水平或者更具體來講是遺傳上相15關(guān)聯(lián)的HCV復(fù)制子RNA復(fù)制的能力降低50%所需要的化合物的量。抑制測定這種體外測定的目的是測量本發(fā)明化合物對HCVNS3/4A蛋白酶復(fù)合物的抑制作用。該測定為本發(fā)明化合物將如何有效抑制HCVNS3/4A蛋白水解活性的指示。20基本按照Poliakov,2002ProtExpression&Purification25363371的描述測定全長丙型肝炎NS3蛋白酶的抑制作用。簡言之，在肽輔因子KKGSVVIVGRIVLSGK(AkeEngstrOm,DepartmentofMedicalBiochemistryandMicrobiology,UppsalaUniversity,Sweden)的存在下，用焚光光譜分析酯肽底物Ac-DED(Edans)EEAbm)/[COO]25ASK(Dabcyl)-NH2(AnaSpec,SanJos6，USA)的水解。[Landro,1997#Biochem369340-9348]。在300C將酶(lnM)與25NS4A輔因子和抑制劑在50mMHEPES,pH7.5,10mMDTT,40%甘油，0.1%正辛基-D-葡萄糖苷中培養(yǎng)10分鐘，加入0.5pM底物啟動反應(yīng)。使抑制劑溶于DMSO中，聲處理30秒，渦旋。每次測定之間將溶液貯存于-200C。將DMSO在測定樣品中的終濃度調(diào)節(jié)至3.3%。根據(jù)公開的方法用內(nèi)濾效應(yīng)校準水解速率。[Liu,1999AnalyticalBiochemistry2675331-335]。用竟爭性抑制模型和固定的Km值(0.15pM),通過非線性回歸分析估計Ki值(GraFit,ErithacusSoftware,Staines,MX,UK)。所有測量都重復(fù)至少兩次。下表l列出根據(jù)上述任一實施例制備的化合物?；衔锏幕钚砸苍诒?描述。io表l<table>tableseeoriginaldocumentpage124</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage125</column></row><table>權(quán)利要求1.下式的化合物id="icf0001"file="S200680035471XC00011.gif"wi="62"he="63"top="61"left="81"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>及其N-氧化物、鹽或立體異構(gòu)體，其中X是N、CH，當X帶有雙鍵時是C；R1是-OR5、-NH-SO2R6；R2是氫，且當X是C或CH時，R2也可為C1-6烷基；R3是氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基或C3-7環(huán)烷基；R4是任選被1、2或3個各自獨立選自以下基團的取代基取代的異喹啉基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基、鹵素、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氨基、單-或二-C1-6烷基氨基、單-或二-C1-6烷基氨基羰基、C1-6烷基羰基-氨基、芳基及Het；n是3、4、5或6；其中-----表示的各條虛線代表任選的雙鍵；R5是氫；芳基；Het；任選被C1-6烷基取代的C3-7環(huán)烷基；或任選被C3-7環(huán)烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基；R6是芳基；Het；任選被C1-6烷基取代的C3-7環(huán)烷基；或任選被C3-7環(huán)烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基；作為基團或作為基團的一部分的各個芳基是任選被1、2或3個選自以下基團的取代基取代的苯基鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基、氨基、單-或二-C1-6烷基氨基、疊氮基、巰基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、環(huán)丙基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-C1-6烷基哌嗪基、4-C1-6烷基羰基哌嗪基和嗎啉基；且其中所述嗎啉基和哌啶基可任選被1或2個C1-6烷基取代；且作為基團或作為基團的一部分的各個Het是飽和、部分不飽和或完全不飽和的5或6元雜環(huán)，其含有1-4個各自獨立選自氮、氧和硫的雜原子，所述雜環(huán)任選被1、2或3個各自獨立選自以下基團的取代基取代鹵素、羥基、硝基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基、氨基、單-或二-C1-6烷基氨基、疊氮基、巰基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、C3-7環(huán)烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-C1-6烷基-哌嗪基、4-C1-6烷基羰基-哌嗪基和嗎啉基，且其中所述嗎啉基和哌啶基可任選被1或2個C1-6烷基取代。2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是式(I-c)、(I-d)或(I-e)的化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>3.權(quán)利要求1-2中任-項的化合物，其中R4是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R4b和R4b’各自獨立是氮、C卜。烷基、Cl-65烷基氨基、單-或二-Cl-6烷基氨基撥基、羚基、基或Het；和烷氧基、單-或二-C,_6鹵素、三氟甲基、芳刃“或記d’獨立是氫、Cl_6烷基、Cl_6烷氧基或鹵素。4.權(quán)利要求1-2中任-項的化合物，其中R”是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中R4a選自以下部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中R4c各自獨立是氫、鹵素、cl_6烷基、氛基或單-或二-cl_6烷5基氨基、嗎林基、呱咤基、毗咯烷基、派漆基、4-Cl_6烷基-派漆基；和側(cè)“是氫、鹵素或三氟甲基。5.權(quán)利要求1-4中任-項的化合物，其中a)RI是-OR,，其中R，是cl-。烷基或氫；或lob)R，是-NHs卜。)2R6，其中R6是甲基、環(huán)丙基、甲基環(huán)丙基或苯基。6.權(quán)利要求1-5中任-項的化合物，其中R，是氫或Cl_6烷基。7.權(quán)利要求1-6中任-項的化合物，其中n是4或5。8.權(quán)利要求1-7中任-項的化合物，所述化合物不是N-氧化物或15鹽。9.-種組合，所述組合包含(a)權(quán)利要求1-7中任-項的化合物或其藥學上可接受的鹽；和(b)不J托那韋或其藥學上可接受的鹽。10.-種藥物組合物，所述組合物包含載體和抗病毒有效量的作20為活性成分的權(quán)利要求1-7中任-項的化合物或權(quán)利要求9的組合。11.用作藥物的權(quán)利要求1-7中任一項的化合物或權(quán)利要求9的組合。12.權(quán)利要求1-7中任一項的化合物或權(quán)利要求9的組合在制備抑制HCV復(fù)制的藥物中的用途。13.—種在溫血動物中抑制HCV復(fù)制的方法，所述方法包括給予有效量的權(quán)利要求1-7中任一項的化合物或有效量的權(quán)利要求9的組合中的各組分。14.一種制備權(quán)利要求1-8中任一項的化合物的方法，其中所述方法包括(a)如以下反應(yīng)流程所示，通過在C與Cs之間形成雙鍵，特別是通過烯烴復(fù)分解反應(yīng)，同時環(huán)化為大環(huán)，制備其中C7與Cs之間的鍵是雙鍵的式(I)化合物，也就是式(I-i)化合物(1a)(b)通過還原式(I-j)化合物的C7-C8雙#:,將式(I-i)化合物轉(zhuǎn)化為15其中大環(huán)中C7與C8之間的鍵是單鍵的式(I)化合物，即式(I-j)化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(c)如以下流程所示，通過在中間體(2a)與磺酰胺(2b)之間形成酰胺鍵，制備其中R1代表-NHS02R6的式(I)化合物，所述化合物由式(I-k-l)表示，或者通過在中間體(2a)與醇(2c)之間形成酯鍵，制備其中R^代表-0RS的式(I)化合物，即化合物(I-k-2),其中G代表以下基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(2a)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(2b)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(2c)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(l-k-1)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(l'k-2)Cd)用相應(yīng)的氮保護的中間體(3a)制備其中R3是氫的式(I)化合物:所述化合物由(I-1)表示，其中PG代表氮保護基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(4a)(I)其中(4a)的Y代表羥基或離去基團；所述反應(yīng)特別是O-芳基化反5應(yīng)，其中Y代表離去基團，或者Mitsunobu反應(yīng)，其中Y代表羥基；(f)通過官能團轉(zhuǎn)化反應(yīng)使式(I)化合物相互轉(zhuǎn)化；或(g)通過使式(I)化合物的游離形式與酸或堿反應(yīng)制備鹽形式。全文摘要本發(fā)明涉及作為HCV復(fù)制抑制劑的式(I)化合物及其N-氧化物、鹽和立體異構(gòu)體，其中X是N、CH，當X帶有雙鍵時是C；R¹是-OR⁵、-NH-SO₂R⁶；R²是氫，且當X是C或CH時，R²也可為C_1-6烷基；R³是氫、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基或C_3-7環(huán)烷基；R⁴是任選被1、2或3個各自獨立選自下述取代基取代的異喹啉基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羥基、鹵素、多鹵代C_1-6烷基、多鹵代C_1-6烷氧基、氨基、單-或二-C_1-6烷基氨基、單-或二-C_1-6烷基氨基羰基、C_1-6烷基羰基-氨基、芳基和Het；n是3、4、5或6；由-----表示的各虛線表示任選的雙鍵；R⁵是氫；芳基；Het；任選被C_1-6烷基取代的C_3-7環(huán)烷基；或任選被C_3-7環(huán)烷基、芳基或Het取代的C_1-6烷基；R⁶是芳基；Het；任選被C_1-6烷基取代的C_3-7環(huán)烷基；或任選被C_3-7環(huán)烷基、芳基或Het取代的C_1-6烷基；各芳基是任選被1、2或3個取代基取代的苯基；且各Het是飽和的、部分不飽和或完全不飽和的5或6元雜環(huán)，所述雜環(huán)含有1-4個各自獨立選自氮、氧和硫的雜原子，且任選被1、2或3個取代基取代；本發(fā)明還涉及含式(I)化合物的藥物組合物及制備化合物(I)的方法；還提供了式(I)化合物與利托那韋的生物可用的HCV抑制劑組合。文檔編號C07K5/078GK101273030SQ200680035471公開日2008年9月24日申請日期2006年7月28日優(yōu)先權(quán)日2005年7月29日發(fā)明者A·A·K·羅森奎斯特,A·塔里,B·B·薩穆爾森,D·L·N·G·蘇勒勞克斯,H·A·德科克,H·K·沃爾伯格,I·多蘭格,K·A·西門,K·M·尼爾森,L·胡,P·J·-M·B·拉博伊森,S·M·H·文德維爾,W·范德夫里肯,Y·西蒙內(nèi)特申請人:泰博特克藥品有限公司;美迪維爾公司