一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及測定棒曲霉素方法的應(yīng)用領(lǐng)域，特別涉及一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]棒曲霉素是真菌霉素中的一類有毒化合物，其對動物的細(xì)胞和組織有很強(qiáng)的毒性，具有潛在的致癌、致畸性和致突變性，其主要存在于蘋果、梨、葡萄等果蔬中。
[0003]目前，對于蘋果汁中棒曲霉素的檢測方法，往往需要很繁瑣的步驟，需要使用大量的輔助溶液試劑和固體樣品，這樣不僅使操作步驟變得費(fèi)時費(fèi)力，還因增加了大量的試劑和樣品而提高生產(chǎn)加工的成本，同時，該檢測方法還存在檢測結(jié)果不精確、不靈敏等缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為解決上述【背景技術(shù)】中存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，以達(dá)到不僅使操作步驟變得省時省力，還降低了生產(chǎn)加工的成本，且檢測結(jié)果更精確、更靈敏的目的。
[0005]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0006]一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟:
[0007]A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經(jīng)超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO2;
[0008]B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內(nèi)；
[0009]C、向步驟B中的離心管內(nèi)的液體樣品加入1ml乙酸乙酯/正己烷(60:40 ；V/V)提取液，再加入7.5g固體無水硫酸鈉或15g液體無水硫酸鈉；
[0010]D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩3-8秒，再將其經(jīng)超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心1分鐘，使液體樣品的上層析出有機(jī)液；
[0011]E、取2.5ml上述有機(jī)液放置在5ml或1ml離心管內(nèi)，將其在40°C條件下通氮氣吹5-8分鐘，使其不完全干燥；
[0012]F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入Iml水，再經(jīng)過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；
[0013]G、取步驟F中的樣液900 μ I至樣瓶中，向其內(nèi)加入100 μ I內(nèi)標(biāo)溶液(棒曲霉素C13 ;100ng/ml)，凈化后得到樣品；
[0014]H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。
[0015]優(yōu)選的，所述步驟D中的離心機(jī)轉(zhuǎn)速為2000rpm。
[0016]優(yōu)選的，所述步驟F中的水的PH值為4。
[0017]優(yōu)選的，所述步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。
[0018]通過上述技術(shù)方案，本發(fā)明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，通過該測定方法可省略了很多操作的步驟，也減少了輔助溶液試劑和固體樣品的使用，不僅使操作步驟變得省時省力，還因減少了試劑和樣品而降低了生產(chǎn)加工的成本，該測定方法由于采用了更為精確的配比關(guān)系，使得其檢測結(jié)果更加精確、更加靈敏。
【具體實施方式】
[0019]下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。
[0020]實施例一:
[0021]本發(fā)明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟:
[0022]A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經(jīng)超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO2;
[0023]B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內(nèi)；
[0024]C、向步驟B中的離心管內(nèi)的液體樣品加入1ml乙酸乙酯/正己烷(60:40 ；V/V)提取液，再加入7.5g固體無水硫酸鈉；
[0025]D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩3秒，再將其經(jīng)超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為2000rpm，使液體樣品的上層析出有機(jī)液；
[0026]E、取2.5ml上述有機(jī)液放置在5ml離心管內(nèi)，將其在40°C條件下通氮氣吹5分鐘，使其不完全干燥，完全干燥則棒曲霉素易丟失；
[0027]F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入Iml水，水的PH值為4，再經(jīng)過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；
[0028]G、取步驟F中的樣液900 μ I至樣瓶中，向其內(nèi)加入100 μ I內(nèi)標(biāo)溶液(棒曲霉素C13 ;100ng/ml)，凈化后得到樣品；
[0029]H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。
[0030]優(yōu)選的，步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。
[0031]實施例二:
[0032]本發(fā)明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟:
[0033]A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經(jīng)超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO2;
[0034]B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內(nèi)；
[0035]C、向步驟B中的離心管內(nèi)的液體樣品加入1ml乙酸乙酯/正己烷(60:40 ；V/V)提取液，再加入7.5g固體無水硫酸鈉；
[0036]D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩5秒，再將其經(jīng)超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為2000rpm，使液體樣品的上層析出有機(jī)液；
[0037]E、取2.5ml上述有機(jī)液放置在5ml離心管內(nèi)，將其在40°C條件下通氮氣吹6分鐘，使其不完全干燥，完全干燥則棒曲霉素易丟失；
[0038]F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入Iml水，水的PH值為4，再經(jīng)過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；
[0039]G、取步驟F中的樣液900 μ I至樣瓶中，向其內(nèi)加入100 μ I內(nèi)標(biāo)溶液(棒曲霉素C13 ;100ng/ml)，凈化后得到樣品；
[0040]H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。
[0041]優(yōu)選的，步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。
[0042]實施例三:
[0043]本發(fā)明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟:
[0044]A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經(jīng)超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO2;
[0045]B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內(nèi)；
[0046]C、向步驟B中的離心管內(nèi)的液體樣品加入1ml乙酸乙酯/正己烷(60:40 ；V/V)提取液，再加入15g液體無水硫酸鈉；
[0047]D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩7秒，再將其經(jīng)超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為2000rpm，使液體樣品的上層析出有機(jī)液；
[0048]E、取2.5ml上述有機(jī)液放置在1ml離心管內(nèi)，將其在40°C條件下通氮氣吹7分鐘，使其不完全干燥，完全干燥則棒曲霉素易丟失；
[0049]F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入Iml水，水的PH值為4，再經(jīng)過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；
[0050]G、取步驟F中的樣液900 μ I至樣瓶中，向其內(nèi)加入100 μ I內(nèi)標(biāo)溶液(棒曲霉素C13 ;100ng/ml)，凈化后得到樣品；
[0051]H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。
[0052]優(yōu)選的，步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。
[0053]實施例四:
[0054]本發(fā)明提供的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟:
[0055]A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經(jīng)超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO2;
[0056]B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內(nèi)；
[0057]C、向步驟B中的離心管內(nèi)的液體樣品加入1ml乙酸乙酯/正己烷(60:40 ；V/V)提取液，再加入15g液體無水硫酸鈉；
[0058]D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩8秒，再將其經(jīng)超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為2000rpm，使液體樣品的上層析出有機(jī)液；
[0059]E、取2.5ml上述有機(jī)液放置在1ml離心管內(nèi)，將其在40°C條件下通氮氣吹8分鐘，使其不完全干燥，完全干燥則棒曲霉素易丟失；
[0060]F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入Iml水，水的PH值為4，再經(jīng)過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液；
[0061]G、取步驟F中的樣液900 μ I至樣瓶中，向其內(nèi)加入100 μ I內(nèi)標(biāo)溶液(棒曲霉素C13 ;100ng/ml)，凈化后得到樣品；
[0062]H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。
[0063]優(yōu)選的，步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。
[0064]本發(fā)明公開的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，通過該測定方法可省略了很多操作的步驟，也減少了輔助溶液試劑和固體樣品的使用，不僅使操作步驟變得省時省力，還因減少了試劑和樣品而降低了生產(chǎn)加工的成本，該測定方法由于采用了更為精確的配比關(guān)系，使得其檢測結(jié)果更加精確、更加靈敏。
[0065]對所公開的實施例的上述說明，使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。對這些實施例的多種修改對本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來說將是顯而易見的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實施例中實現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會被限制于本文所示的這些實施例，而是要符合與本文所公開的原理和新穎特點相一致的最寬的范圍。
【主權(quán)項】
1.一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，其特征在于，包括以下步驟: A、將濃縮的蘋果汁用水稀釋10倍得到液體樣品，再將其經(jīng)超聲波15分鐘，去除液體樣本中含有的CO2; B、取5g上述液體樣品放置在50ml離心管內(nèi)； C、向步驟B中的離心管內(nèi)的液體樣品加入1ml乙酸乙酯/正己烷(60:40 ；V/V)提取液，再加入7.5g固體無水硫酸鈉或15g液體無水硫酸鈉； D、旋緊上述離心管的蓋子，使其震蕩3-8秒，再將其經(jīng)超聲波10分鐘、渦旋10分鐘、離心10分鐘，使液體樣品的上層析出有機(jī)液； E、取2.5ml上述有機(jī)液放置在5ml或1ml離心管內(nèi)，將其在40°C條件下通氮氣吹5_8分鐘，使其不完全干燥； F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入Iml水，再經(jīng)過超聲波5分鐘，使其完全溶解，得到樣液； G、取步驟F中的樣液900μ I至樣瓶中，向其內(nèi)加入100 μ I內(nèi)標(biāo)溶液(棒曲霉素C13 ；100ng/ml)，凈化后得到樣品； H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，其特征在于，所述步驟D中的離心機(jī)轉(zhuǎn)速為2000rpm。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，其特征在于，所述步驟F中的水的PH值為4。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，其特征在于，所述步驟A中的蘋果汁為非濃縮液體樣品無需用水稀釋。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定蘋果汁中棒曲霉素的方法，包括以下步驟：A、將濃縮的蘋果汁稀釋；B、取液體樣品放置在離心管內(nèi)；C、向其內(nèi)加入乙酸乙酯/正己烷提取液，再加入無水硫酸鈉；D、旋緊離心管的蓋子，使其震蕩，再經(jīng)超聲波、渦旋、離心；E、取2.5ml有機(jī)液放置在離心管內(nèi)，將其通氮氣吹5-8分鐘；F、向步驟E中的離心管內(nèi)的有機(jī)液加入水，再經(jīng)過超聲波；G、取步驟F中的樣液至樣瓶中，向其內(nèi)加入內(nèi)標(biāo)溶液，凈化后得到樣品；H、將步驟G中的樣品提取溶液，通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的多反應(yīng)檢測模式進(jìn)行檢測，測定完成。該方法不僅使操作步驟變得省時省力，還降低了生產(chǎn)加工的成本，并使得其檢測結(jié)果更精確、更靈敏。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104535687
【申請?zhí)枴緾N201410850550
【發(fā)明人】于勝良
【申請人】歐陸分析技術(shù)服務(wù)(蘇州)有限公司
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月29日