專利名稱：：血脂康特制紅曲有效成分的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物有效成分的分離方法，特別涉及血脂康特制紅曲的有效成分的分離方法。技術(shù)背景血脂康特制紅曲是按照ZL97103970.4號(hào)專利的方法制成的紅曲藥物制劑。血脂康膠囊是以特制紅曲為原料的中藥制劑，具有降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗癌、抗骨質(zhì)疏松等臨床療效。循證醫(yī)學(xué)臨床研究證明，可明顯減少冠心病事件發(fā)生率，降低總死亡率。文獻(xiàn)報(bào)道，化合物3P-羥基-5a,8P_環(huán)二氧麥角甾-6，22-二烯對(duì)L-1210細(xì)胞株有極強(qiáng)的抗癌活性并能抑制MCF-7人乳腺癌以及Walder256肉瘤細(xì)胞株的生長(zhǎng)，對(duì)人肝癌PLC/PRF5和KB細(xì)胞也有抑制作用，還能選擇性地增強(qiáng)亞油酸(《10mmol/L)對(duì)DNA聚合酶e活性的抑制作用；此外，還具有抗炎、抗補(bǔ)體、免疫抑制和促進(jìn)血小板凝聚等活性?；衔锎蠖管赵?、黃豆黃素、染料木素具有抗癌、降脂、降糖、舒張血管、抗氧化、抑制平滑肌增殖等活性?；衔锩撍{可林K、莫納可林K具有降脂活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供血脂康特制紅曲有效成分及其分離方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種血脂康特制紅曲的有效成分，含有如下化合物4-甲基-5-(2-甲基亞丙基)-1氫-吡咯-2(5氫)-酮、脫水莫納可林K，豆甾-5，22-二烯-33-醇，莫納可林K,3P-羥基-5ct，8P-環(huán)二氧麥角甾-6,22-二烯，氮-(1_(四氫-5-氧代呋喃-2)-乙基)乙酰唑胺、大豆苷元、黃豆黃素、染料木素、赤蘚醇，該有效成分由如下方法制備取血脂康原料藥，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取c部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分c-i、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-II部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100:10石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-m部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。本發(fā)明血脂康特制紅曲有效成分的具體分離方法如下取血脂康原料藥，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、80-100:5氯仿-甲醇部分C-n、80-100:IO氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)S印hadexLH-20迸一步純化，40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3:C-1I部分以90:10-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100:IO石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6,再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8:M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。本發(fā)明血脂康原料藥有效成分的優(yōu)選分離方法如下取血脂康原料藥，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、95:5氯仿-甲醇部分C-II、90:IO氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3,由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5,經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，50:50氯仿-甲醇洗脫，得到C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-n部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，90:IO石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-IO流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。本發(fā)明所用血脂康原料藥按照ZL97103970.4號(hào)專利的方法制成的紅曲或紅曲粗提物。上述C-l、C-2、C-3、C-5、C-6、C-7、C—8、C一9、M-l、P-3化學(xué)式如下:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>下述實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。具體實(shí)施方式實(shí)驗(yàn)例1結(jié)構(gòu)鑒定實(shí)驗(yàn)化合物C-1:白色針狀結(jié)晶(CHCl:「MeOH)。EIMSm/z386(M+)與monacolinK(C-3)404(M+)比較少1個(gè)肌其余碎片相似。'HNMR低場(chǎng)區(qū)較monacolinK多一對(duì)芳質(zhì)子，S4.0ppm5.0ppm少1個(gè)與氧相連的質(zhì)子，高場(chǎng)區(qū)的飽和仲氫信號(hào)(2.65卯ra,2H，dd)消失，進(jìn)一步提示為monacolinK的脫水結(jié)構(gòu)。'tNMR低場(chǎng)區(qū)較monacolinK多兩個(gè)烯碳，S90ppm50ppm少1個(gè)與氧相連的碳，DEPT提示S38.6ppn仲碳消失(C-2)。根據(jù)以上分析，鑒定該化合物為脫水莫納可林K。EIMSm/z386(M+),284[M+-CH:!CH2CH(CH2)C00H]，199，198,159(100),143,57。'H腦R(CDC1》6.85(1H，m,H—3)，6.00(2H,m，H-15，H-2)，5.80(1H'dd,H—16)，5.53(1H，s,H—13),5,39(1H,s，H-10)，4.33(1H,m,H-5).'tNMR(CDC1:,)S:176.6(C-1')，164.3(C—1)，144.8(C—3)，133.0(C—16),131.6(C—14),129.7(C—13)，128.4(C—15),121.5(C—2)，77.3(C—5)，67.8(C—10)'41.5(C-2')'37.3(C-9)'36.7(C-12)'32.7(C-11),32.5(C-4)，30.7(C-17),29.6(C-6)，27..5(C-8)，26.9(C-3'),24.3(C-7)，22.9(C—19),16.3(C-5'),13.9(C-18)，11.7(C-4'),根據(jù)以上數(shù)據(jù)，推斷其結(jié)構(gòu)為脫水莫納可林K?；衔顲-2:白色針狀結(jié)晶(CHC1:廠Me0H)，mp153-155。C,Liebernman-Burchard反應(yīng)陽性。EIMSm/z412(M+)，396(100)，382,367,300,273,255，213，161，i45。'HNMR(CDC1:,):5.35(1H,d，J=5.5Hz,H-6),5.15(2H，m，H—22，H-5)，5.02(1H，dd,J=8.5,15.0Hz,H-23)，3.52(1H,m,H-3)'3C臓(CDC1:,):140.8(C-5),138.4(C-23),129.3(C-22)，121.8(C-6)，71.8(C_3)，56.8(C-14)，56.1(C-17)，51.3(C-9),50.2(C—13)，42.3(C—24，04)，39.8(C-16),37.3(C—20),36.2(C—10)，31.9(C—7，C—8),31.7(C—27)，29.2(C—2),28.3(C—12),24.3(C—15)，23,1(C—25)，21.1(C—11),19.4(C—28)，19.1(C_19)，18.8(021)，13.9(C-1)，12.0(C-26),11.9(C-18).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)['2]報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為豆甾-5，22-二烯-3P-醇?；衔顲-3:白色針狀結(jié)晶(CHC1:,-MeOH),mpl58-160°C。EIMSm/z404(M+)，386(M+—H20)，284，198,159(100),143.'HNMR(CDCl》5.99(IH,d，J=9.6Hz,H—15)，5.79(IH,dd,J=9.6,2.3Hz，H-16),5.52(IH,s，H-13)，5.38(1H，s'H-10),4.62(IH,m,H-5),4.37(IH，m，H—3)，2.65(2H,dd,H-2)."CNMR(CDCL,):176.9(C-l'),170.4(C-l),133.1(C—16)，131.6(C—14)，129.7(C—13)，128.3(C-15),76.8(C-5)，67.9(C—10),62.7(C-3),41.5(C-2'),38.6(C-2)，37.3(C-4,C-9)，36.6(C-12)'33.0(C-6)，32.7(C-11)，30.7(C-17),27.5(C—8),26.9(C-3'),24.3(C—7),22.9(C—19)，16.3(C-5')，13.9(C-18),11.8(C-4').以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)["]報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為莫納可林K?；衔顲-5:白色粉末(CHCL-MeOH)，mp168-173°C,Liebernman-Burchard反應(yīng)陽性。EIMSm/z428(M+),410(M+-H20)，396(M+-0》，251[M+—02-(R+H)-H20],231(100).'HNMR(CDCL)S:6.50(1H，d,J=8.3Hz,H-7)，6.24(IH,d,J二8.3Hz，H-6),5.20(1H，dd,J=15.3,7.2Hz，H-22)，5.15(1H,dd，J=15.3，7.2Hz,H-23),3.96(IH,m,H-3)"CNMR(CDC1:,)S:135.4(C-7),135.2(C-23),132.3(C-22)，130.8(C-6)，82.2(C-8),79.5(C-5)，66.5(C-3)，56.2(C-17),51.7(C-9)，51.1(C-4)，44.6(C—13),42.8(C—24),39.8(C—20),39.4(C—1),37.0(C—10,14)，34.7(C—12),33.1(C-25)'30.1(C-2),28.7(C-15)，23.4(C-16)'20.9(C-27),20.7(C-l1),2O.O(C-26)，19.7(C-21),18.2(C-19),17.6(C-28),12.9(C-18).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為3P-羥基-Sa，8P-環(huán)二氧麥角甾-6，22-二烯?；衔顲-6:無色針狀結(jié)晶(CHCl:「MeOH)。EIMSm/z171(M+)，114,86(100),44,裂解途徑如下。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>化合物C-6的MS主耍碎片離子(EI-MSofC-6)HNMR及':iCNMR歸屬見下表，HMBC如下。表1化合物C-6的NMR數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>化合物C-6的HMBC(HMBCofcompoundC-6)化合物C-7:白色無定形粉末(CHC1廠Me0H)，mp195-197°C。EIMSm/z254(M+),253，137，136，118，108。'HNMR(DMS0)S:8.13(1H，s，H-2)，8.05(1H,d，J二9.0Hz，H-5),7.37(2H,d,J二8.7Hz，H—2'，H-6')'136.93(1H,dd，0Hz,2.lHz，H-6),6.84(1H，d,J二2.lHz,H—8)，6.82(1H，d,J二8.7Hz，H-3'，H-5').以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為大豆苷元?；衔顲-8:無色針狀結(jié)晶(CHCl:廠MeOH)，卿336-338°C，'關(guān)R(DMS0)S:10.60(1H,br，s,Ar—0H),9.51(1H,br,s,Ar-0H)，8.27(1H，s，H-2),7.42(1H,s,H-5)，7.37(2H，d，J=8.4Hz,H-2',H-6'),6.93(1H,s，H-8)，6.78(2H,d，J=8.4Hz，H-3',H-5')，3.86(3H，s，-0CH:,).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為黃豆黃素?；衔顲-9:白色無定形粉末(CHC1:廠MeOH),mp265-267°C。EIMSm/z270(M+)，269，241，153，152，124，118。'HNMR(DMSO)S:12.95(1H，s，H-5),10.89(1H,s，H-7),9.58(1H's,H-4')，8.32(1H，s，H-2),7.36(2H,d，H-2',H-6),6.81(2H,d，H-3'，H-5'),6.38(1H,s,H-8)，6.21(1H,s,H-6).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)^報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為染料木素?；衔颩-l:無色方晶(CHC1:,-MeOH),mp77-78°C。ESI-MSm/z121(M+_1)。l3CNMR(DMS0)S:72.56(C-1,C-4)，63.34(C-2,C-3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)"6]報(bào)道相同，推斷其結(jié)構(gòu)為赤蘚醇?；衔颬-3:白色針狀結(jié)晶(CHC1:,-MeOH)。EIMSm/z151(M+)，136(M+_CH3，100),108，93。'HNMR(CDCl:,)S:5.85(1H,s,H—3)，5.12(1H，d，J=9.9Hz,H—1')，2.72(1H,s，H-2')，2.04(3H,s，H-CH:i),1.08(3H，s，H-CH:,)，1.06(3H，s,H-CH/)."CNMR(CDCU5:172.7(C-2)，148.6(C-4)，137.6(C-5)，120.8(C-l')'120.6(C-3),27.4(C-2')，22.8(C-QVX2)'11.8(C-CH:,).下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。具體實(shí)施方式實(shí)施例1:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20-30min/次,合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;實(shí)施例2:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以2倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;實(shí)施例3:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;實(shí)施例4:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取4次，20-30rain/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;實(shí)施例5:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以2倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取5次，20-30min/次,合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;實(shí)施例6:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。實(shí)施例7:制備血脂康特制紅曲的有效成分取血脂康原料藥，依次以4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取4次，20-30min/次,合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分c-i、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，其中80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去;80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-l;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化C-5,由第11-17流份得到化合物C-3;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100:10石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到含有化合物C-6的物質(zhì)，再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8。實(shí)施例8:取血脂康原料藥2kg，依次以3倍量石油醚、氯仿、甲醇超聲分別4次，20min/次。合并提取液，回收溶劑,得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位250g上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、95:5氯仿-甲醇部分C-II、90:IO氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3為10mg，由第7-10流份得到化合物C-2為300mg，由第8-13流份得到化合物C-l為245mg;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份；由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，50:50氯仿-甲醇洗脫，得到8mg;由第11-17流份得到化合物C-3為120mg。由純乙酸乙酯洗脫部位得到化合物C-3為100mg;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，90:10石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3為300mg;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脫，得到7mg;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析得到C-7為45mg、C-9為35mg、C-8為12mg;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1為25mg。實(shí)施例9:取血脂康原料藥2.5kg,依次以2倍量石油醚、氯仿、甲醇超聲分別5次，25min/次；合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位250g上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、80:5氯仿-甲醇部分C-II、100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，100:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；80:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3為10mg,由第7-10流份得到化合物C-2為320mg，由第8-13流份得到化合物C-1為260mg;100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，45:50氯仿-甲醇洗脫，得到10mg;由第11-17流份得到化合物C-3為130rng。由純乙酸乙酯洗脫部位得到化合物C-3為110mg;C-II部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，100:10石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3為320mg;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以60:50氯仿-甲醇洗脫，得到9mg;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中100:IO氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析得到C-7為55mg、C-9為50mg、C-8為20mg;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-l為35mg。權(quán)利要求1、一種血脂康特制紅曲的有效成分，含有如下化合物4-甲基-5-(2-甲基亞丙基)-1氫-吡咯-2(5氫)-酮、脫水莫納可林K，豆甾-5，22-二烯-3β-醇，莫納可林K，3β-羥基-5α，8β-環(huán)二氧麥角甾-6，22-二烯，氮-(1-(四氫-5-氧代呋喃-2)-乙基)乙酰唑胺、大豆苷元、黃豆黃素、染料木素、赤蘚醇，其特征在于該有效成分由如下方法制備取血脂康原料藥，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M；取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、80-100∶5氯仿-甲醇部分C-II、80-100∶10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV；取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95∶5-0∶100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，其中80-100∶5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；80-100∶10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1；60-100∶20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)SephadexLH-20進(jìn)一步純化，40-60∶50氯仿-甲醇洗脫，得到純化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3；C-II部分以90∶10-0∶100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100∶10石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；60-100∶20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3；由第9-11流份得到化合物C-6，再上SephadexLH-20柱，以40-60∶50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6；C-III部分以90∶10-50∶50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90∶10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8；M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。2、如權(quán)利要求l所述的血脂康特制紅曲的有效成分，其特征在于該有效成分由如下方法制備取血脂康原料藥，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20min/次,合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-1、95:5氯仿-甲醇部分c-n、90:io氯仿-甲醇部分c-ni、甲醇部分c-iv;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3,由第7-10流份得到化合物C-2,由第8-13流份得到化合物C-1;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，，由第6-8流份得到化合物C-5,經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，50:50氯仿-甲醇洗脫，得到C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，90:IO石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。3、如權(quán)利要求1所述的血脂康特制紅曲的有效成分的分離方法，其特征在于該方法為取血脂康原料藥，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-I、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，其中80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-II部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，80-100:10石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脫，其中90:IO氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。4、如權(quán)利要求3所述的分離方法，其特征在于該方法為取血脂康原料藥，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分別超聲提取3-5次，20min/次，合并提取液，回收溶劑，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，得氯仿部分C-1、95:5氯仿-甲醇部分c-n、90:io氯仿-甲醇部分c-m、甲醇部分C-IV;取C-I部分繼續(xù)硅膠柱層析，以95:5-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脫部位棄去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3,由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，，由第6-8流份得到化合物C-5,經(jīng)S印hadexLH-20進(jìn)一步純化，50:50氯仿-甲醇洗脫，得到C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，90:IO石油醚-乙酸乙酯部分與上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脫部位經(jīng)硅膠柱層析，合并相似流份，由第3-IO流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脫，得到純化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿_甲醇梯度洗脫，其中90:10氯仿-甲醇洗脫部分經(jīng)再次硅膠柱層析得到C-7、C-9、C-8;M部位經(jīng)放置自然析晶，晶體以氯仿洗滌，得到化合物M-1。全文摘要本發(fā)明公開了血脂康特制紅曲的有效成分及其分離方法。循證醫(yī)學(xué)臨床研究證明，血脂康特制紅曲可明顯減少冠心病事件發(fā)生率，降低總死亡率。對(duì)血脂康的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離并鑒定了10個(gè)化合物，分別為4-甲基-5-(2-甲基亞丙基)-1氫-吡咯-2(5氫)-酮(P-3)、脫水莫納可林K(C-1)，豆甾-5，22-二烯-3β-醇(C-2)，莫納可林K(C-3)，3β-羥基-5α，8β-環(huán)二氧麥角甾-6，22-二烯(C-5)，氮-(1-(四氫-5-氧代呋喃-2)-乙基)乙酰唑胺(C-6)、大豆苷元(C-7)、黃豆黃素(C-8)、染料木素(C-9)、赤蘚醇(M-1)。文檔編號(hào)C07D309/30GK101113146SQ20061010381公開日2008年1月30日申請(qǐng)日期2006年7月27日優(yōu)先權(quán)日2006年7月27日發(fā)明者段震文,郭樹仁,馬學(xué)敏申請(qǐng)人:北京北大維信生物科技有限公司