專利名稱：作為β－內(nèi)分泌抑制劑用于治療阿耳茨海默氏病的2,3,4,6－四取代吡啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類新的2，3，4，6-取代的吡啶衍生物，它們可用作β-分泌酶的抑制劑，適用于治療與β-分泌酶有關(guān)的疾病，譬如阿耳茨海默氏病。
背景技術(shù)：
阿耳茨海默氏病的特征是淀粉樣蛋白在腦中以細(xì)胞外噬斑和細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)的形式異常沉積。淀粉樣蛋白蓄積的速率是形成、聚集和從腦外溢的速率的結(jié)合。人們普遍接受的是淀粉樣蛋白噬斑的主要組成是4kD淀粉樣蛋白(βA4，也稱作Aβ，β-蛋白和βAP)，它是更大分子量前體蛋白的蛋白酶解產(chǎn)物。淀粉樣蛋白前體蛋白具有受體樣結(jié)構(gòu)，帶有大的胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜區(qū)和短胞質(zhì)尾區(qū)。Aβ結(jié)構(gòu)域包括APP的胞外和跨膜結(jié)構(gòu)域兩者的多個(gè)部分，因此其釋放意味著存在兩種不同蛋白水解途徑來產(chǎn)生其NH2-和COOH-末端。至少存在兩種從膜釋放APP并且產(chǎn)生APP的可溶性COOH-截短形式(APPs)的分泌機(jī)制。從膜釋放APP及其片段的蛋白酶稱作分泌酶。大多數(shù)APPs是由公認(rèn)的α-分泌酶釋放的，其在Aβ蛋白內(nèi)裂解釋放α-APPs并且阻止了完整Aβ的釋放。少部分的APPs蛋白是由β-分泌酶(“β-分泌酶”)釋放的，其在APP的NH2-末端裂解并產(chǎn)生包含全部COOH-末端片段(CTFs)。
因此，β-分泌酶或β-位點(diǎn)淀粉樣蛋白前體蛋白裂解酶(“BACE”)的活性造成APP的異常裂解，產(chǎn)生Aβ，以及β-淀粉樣蛋白噬斑蓄積在腦中，后者是阿耳茨海默氏病的特征(參見R.N.Rosenberg，Arch.Neurol.，vol.59，Sep 2002，pp.1367-1368；H.Fukumoto等，Arch.Neurol.，vol.59，Sep 2002，pp.1381-1389；J.T.Huse等，J.Biol.Chem.，vol.277，No.18，2002年5月3日出版，pp.16278-16284；K.C.Chen和W.J.Howe，Biochem.Biophys.Res.Comm，vol.292，pp 702-708，2002)。所以，能夠抑制β-分泌酶或BACE的治療劑可以用于阿耳茨海默氏病的治療。
本發(fā)明的化合物通過抑制β-分泌酶或BACE的活性，由此防止不溶性Aβ形成和阻止Aβ的產(chǎn)生而能夠用于治療阿耳茨海默氏病。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及通式(I)所示的2，3，4，6-取代的吡啶基衍生物和其單一的對映體和非對映體，以及其藥學(xué)上可接受鹽，它們可用作β-分泌酶的抑制劑 本發(fā)明還涉及包含有效量式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受鹽以及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。本發(fā)明也涉及治療哺乳動(dòng)物與β-分泌酶有關(guān)的疾病(如阿耳茨海默氏病)的方法以及本發(fā)明的化合物和組合物在治療這類疾病中的應(yīng)用。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式(I)化合物
其中X選自基團(tuán) Y選自基團(tuán)(1)鹵素，(2)氰基，(3)-C1-6烷基，和(4)-C6-10芳基；A選自(1)氫，(2)-C1-10烷基，和(3)-C2-10鏈烯基，其中所述烷基或鏈烯基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-C3-12環(huán)烷基，(c)-OH，(d)-CN，(e)-O-C1-10烷基，(f)苯基，或(g)雜芳基，并且所述苯基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，(v)-C1-10烷基，或(vi)-C3-12環(huán)烷基；Q是-C0-3烷基，其中該烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(1)鹵素，(2)-C3-12環(huán)烷基，(3)-OH，(4)-CN，(5)-O-C1-10烷基，和(6)-C1-10烷基；R1選自(1)選自苯基和萘基的芳基，(2)雜芳基，(3)-C1-10烷基，和(4)-C3-8環(huán)烷基，該環(huán)烷基任選與C6-10芳基稠合，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基或雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被鹵素取代，(c)-OH，(d)-CN，(e)-O-C1-10烷基，(f)-C3-12環(huán)烷基，或(g)-NR10R11，其中R10和R11選自(i)氫，(ii)-C1-10烷基，和(iii)-C0-6亞烷基-C6-10芳基；R8和R9選自
(1)氫，(2)C1-10烷基，和(3)C0-6亞烷基-C6-10芳基；R4選自基團(tuán)(1)-C1-10烷基，(2)雜芳基，和(3)-NR12R13，其中R12和R13選自(a)氫，(b)C1-10烷基，和(c)C0-6亞烷基-C6-10芳基，或者R12和R13代表4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)選自CRaRb、S、NRc和O的環(huán)原子，并且與它們所連接的氮一起構(gòu)成非芳族環(huán)，其中所述烷基、亞烷基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-O-C1-10烷基，(e)-C1-10烷基(f)-C3-12環(huán)烷基，(g)選自苯基和萘基的芳基，(h)雜芳基，或(i)-C(＝O)-C1-10烷基，并且，其中所述芳基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，(v)-C3-12環(huán)烷基，或(vi)-C1-10烷基；R7選自基團(tuán)
(1)氫，(2)-C1-10烷基，(3)-C3-7環(huán)烷基，(4)-C6-10芳基，和(5)雜芳基，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-O-C1-10烷基，(e)-C3-12環(huán)烷基，(f)由4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)選自CRaRb、S、NRc和O的環(huán)原子構(gòu)成的非芳族環(huán)基，(g)選自苯基和萘基的芳基，或(h)-C5-12雜芳基，其中所述環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，(v)-C3-12環(huán)烷基，或(vi)選自苯基和萘基的芳基；或者，R4和R7可以連接成-CH2CH2CH2-基團(tuán)；R5和R6獨(dú)立地選自(1)氫，(2)-C1-10烷基，(3)-C2-10烯基，(4)-C2-10炔基，和(5)-C1-10亞烷基-C3-12環(huán)烷基；其中所述烷基、亞烷基、環(huán)烷基、烯基或炔基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-C1-10烷基，(e)-C3-12環(huán)烷基，(f)-O-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被-O-C1-10烷基-(-O-C1-10烷基)m取代，(g)雜芳基，其中該雜芳基可以是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(A)鹵素，或(B)-C1-10烷基，(h)苯基，(i)-NR14R15，其中R14和R15選自(A)氫，(B)-C1-10烷基，和(C)-C0-6烷基-C6-10芳基，(j)-C(＝O)-OR16，其中R16選自(A)氫，(B)-C1-10烷基，和(C)-C0-6亞烷基-C6-10芳基，和(k)-C(＝O)-NR17R18，其中R17和R18選自(A)氫，(B)-C1-10烷基，和(C)-C0-6亞烷基-C6-10芳基，或者，R17和R18代表4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)選自CRaRb、S、NRc和O的環(huán)原子，并且與它們所連接的氮一起構(gòu)成非芳族環(huán)，和(l)-C(＝O)-R19，其中R19選自(A)-C1-10烷基，(B)-C3-7環(huán)烷基，和(C)-C0-6亞烷基-C6-10芳基，或者，R5和R6與它們所連接的氮原子一起連接成4-6元環(huán)，該環(huán)是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)-C1-10烷基，(b)-C3-12環(huán)烷基，(c)-(CH2)n-苯基，(d)-C2-10烯基，或(e)-C2-10炔基，其中所述烷基、烯基和炔基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，或(v)-C3-12環(huán)烷基，并且所述環(huán)烷基和苯基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-C1-10烷基，(iii)-OH，(iv)-CN，(v)-C3-12烷基，或(vi)-O-C1-10烷基；Ra、Rb和Rc各自獨(dú)立地選自(1)氫，(2)鹵素，(3)-C1-6烷基，和(4)-C(＝O)-C1-6烷基；m是0，1或2；n是0，1，2，3或4；和其藥學(xué)上可接受鹽，以及其單一的對映體和非對映體。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備用于抑制人或動(dòng)物體中β-分泌酶活性的藥物或組合物的方法，包括將本發(fā)明化合物與藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑混合。本發(fā)明還涉及制備用于治療人類阿耳茨海默氏病的藥物或組合物的方法，包括將本發(fā)明化合物與藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑混合。
在一個(gè)實(shí)施方案中，X為選自以下的二唑 在一個(gè)實(shí)施方案中，Y為鹵素，優(yōu)選為氯。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及其中R1是未取代的或取代的苯基，且Q優(yōu)選為CH2的式(I)化合物。優(yōu)選R1是未取代的苯基或4-氟苯基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R1是雜芳基。優(yōu)選的R1雜芳基包括吡啶基、呋喃基、唑基和苯并唑基。
在其它實(shí)施方案中，R1是C1-12烷基或C3-8環(huán)烷基。優(yōu)選的C1-12烷基R1基團(tuán)包括C1-6烷基(優(yōu)選未取代的C1-6烷基，包括甲基和異丙基在內(nèi))。優(yōu)選的C3-8環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)戊基和環(huán)己基，優(yōu)選是未取代的。環(huán)烷基的兩個(gè)環(huán)碳原子可以連接形成C6-12芳基。該實(shí)施方案的代表性稠合基團(tuán)是 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及其中R8和R9都為氫的式(I)化合物。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方案中，A是未取代的或取代的(優(yōu)選未取代的)C1-10烷基，優(yōu)選未取代的或取代的(優(yōu)選是未取代的)C1-6烷基，更優(yōu)選甲基。
在其它可選擇的實(shí)施方案中，A可以是氫。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R6是-C1-10亞烷基-C3-12環(huán)烷基，其中該環(huán)烷基優(yōu)選被C1-10烷基取代。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R6是-C1-3亞烷基-C3-6環(huán)烷基，其中該環(huán)烷基優(yōu)選被C1-3烷基取代。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R5是C1-10烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-O-C1-10烷基，或(e)雜芳基。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方案中，R5和R6與它們二者所連接的氮原子一起連接形成吡咯烷環(huán)。
在式(I)化合物的另一實(shí)施方案中，R4和R7為C1-10烷基，優(yōu)選C1-6烷基。更優(yōu)選的是，R4是甲基或異丙基以及R7是甲基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R4是-C0-3亞烷基-雜芳基。優(yōu)選的R4雜芳基包括吡啶基、異唑基、咪唑基和唑基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R7是-C0-3亞烷基-雜芳基。優(yōu)選的R7雜芳基包括吡啶基、異唑基和四唑基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(II)化合物和其藥學(xué)上可接受鹽以及其單一的對映體和非對映體 其中Y是鹵素，且A、X、Q、R1、R4、R5、R7、R8和R9如上定義。
在一個(gè)實(shí)施方案中，X為二唑基
在一個(gè)實(shí)施方案中，Y為鹵素，優(yōu)選為氯。
在式(II)化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是苯基和Q為CH2。優(yōu)選R1是未取代的苯基或是4-氟苯基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及其中R8和R9都為氫的式(II)化合物。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方案中，A為C1-10烷基，優(yōu)選C1-6烷基，更優(yōu)選甲基。
在式(II)化合物的另一實(shí)施方案中，R4和R7為C1-10烷基，優(yōu)選C1-6烷基。更優(yōu)選的是，R4是甲基或異丙基以及R7是甲基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R5是C1-10烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)-O-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被-O-C1-10烷基-(-O-C1-10烷基)m取代，(b)雜芳基，或(c)-C(＝O)-R19，其中R19選自(i)-C1-10烷基，(ii)-C3-7環(huán)烷基，或(iii)-C0-6亞烷基-C6-10芳基。
在另一可選擇的實(shí)施方案中，R5是氫。
在式(II)化合物的優(yōu)選實(shí)施方案中，X是二唑，即如下面(III)所示的化合物和其藥學(xué)上可接受鹽以及其單一的對映體和非對映體 在式(III)化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，Y是氯。
在式(III)化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，R1是苯基和Q為CH2。
在式(III)化合物的另一實(shí)施方案中，R8和R9均為氫。
在式(III)化合物的另一實(shí)施方案中，A為甲基。
在式(III)化合物的另一實(shí)施方案中，R4和R7為C1-10烷基，優(yōu)選C1-6烷基。更優(yōu)選的是，R4是甲基或異丙基和R7是甲基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R5是C1-10烷基，其任選被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)-O-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被-O-C1-10烷基-(-O-C1-10烷基)m取代，(b)雜芳基，或(c)-C(＝O)-R19，其中R19選自(i)-C1-10烷基，(ii)-C3-7環(huán)烷基，或(iii)-C0-6亞烷基-C6-10芳基。
在另一可選擇的實(shí)施方案中，R5是氫。
式(II)和式(III)化合物的優(yōu)選對映體構(gòu)型在甲基-環(huán)丙基-甲基部分具有反式-S，S-構(gòu)型，如下面式(II’)和(III’)中所示 本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括選自后面實(shí)施例的標(biāo)題化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽。
如本文所用，術(shù)語“烷基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有指定數(shù)目碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基(例如C1-10烷基是指具有1-10個(gè)碳原子的烷基)。對于本發(fā)明的應(yīng)用來講，優(yōu)選的烷基是具有1-6個(gè)碳原子的C1-6烷基。烷基的實(shí)例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基，己基等。
如本文所用，術(shù)語“亞烷基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有指定數(shù)目碳原子的飽和直鏈或支鏈二價(jià)烴基。術(shù)語C0亞烷基(例如，在基團(tuán)“-C0亞烷基-C6-10芳基”中)是指亞烷基不存在。
如本文所用，術(shù)語“烯基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有一個(gè)碳-碳雙鍵和指定數(shù)目碳原子的直鏈或支鏈烴基(例如，C2-10烯基是指具有2-10個(gè)碳原子的烯基)。對于本發(fā)明的應(yīng)用而言，優(yōu)選的烯基是具有2-6個(gè)碳原子的C2-6烯基。烯基的實(shí)例包括乙烯基和丙烯基。
如本文所用，術(shù)語“炔基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有一個(gè)碳-碳三鍵和指定數(shù)目碳原子的直鏈或支鏈烴基(例如，C2-10炔基是指具有2-10個(gè)碳原子的炔基)。對于本發(fā)明的應(yīng)用而言，優(yōu)選的炔基是具有2-6個(gè)碳原子的炔基。炔基的實(shí)例包括乙炔基和丙炔基。
如本文所用，術(shù)語“環(huán)烷基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有指定數(shù)目碳原子的飽和單環(huán)、多環(huán)或橋環(huán)烴基(例如，C3-12環(huán)烷基是指具有3-12個(gè)碳原子的環(huán)烷基)。優(yōu)選的環(huán)烷基包括C3-8環(huán)烷基，尤其是C3-8單環(huán)環(huán)烷基。單環(huán)環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。典型的橋狀環(huán)烷基包括金剛烷基和降冰片基。
如本文所用，術(shù)語“芳基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有指定數(shù)目碳原子的芳族或環(huán)狀基團(tuán)(例如，C6-10芳基是指具有6-10個(gè)碳原子的芳基)。對于本發(fā)明的應(yīng)用而言，優(yōu)選的芳基包括苯基和萘基。
術(shù)語“鹵”或“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。
如本文所用，術(shù)語“雜芳基”本身或作為另一取代基的組成部分，是指具有環(huán)碳原子和至少一個(gè)環(huán)雜原子(O、N或S)的芳族環(huán)狀基團(tuán)。優(yōu)選的雜芳基具有5-12個(gè)環(huán)原子。更優(yōu)選的雜芳基具有5或6個(gè)環(huán)原子。對于本發(fā)明的應(yīng)用而言，代表性的雜芳基包括苯并吡喃基、呋喃基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、吲唑基、吲哚基、indynyl、二唑基、唑基、苯并唑基、異唑基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、四唑基、噻唑基、噻吩基(thienyl)、噻吩基(thiophenyl)、苯并噻吩基、三嗪基和三唑基。
術(shù)語“雜芳基”也包括部分芳香性的稠合芳族環(huán)狀基團(tuán)(即，稠合環(huán)之一是芳香性而其它環(huán)是非芳香性的)。部分芳香性的雜芳基實(shí)例包括四氫喹啉基、二氫苯并呋喃基和二氫吲哚基。
當(dāng)本文定義的雜芳基被取代時(shí)，所述取代基可以與雜芳基的環(huán)碳原子鍵合，或鍵連在環(huán)雜原子(即氮)上，它們具有允許取代的化合價(jià)。優(yōu)選地，所述取代基與環(huán)碳原子鍵合。同樣地，當(dāng)雜芳基在此定義為取代基時(shí)，連接位置可以在雜芳基的環(huán)碳原子上，或在環(huán)雜原子(即氮、氧或硫)上，它們具有允許取代的化合價(jià)。
本發(fā)明的一些化合物具有至少一個(gè)不對稱中心。根據(jù)分子上不同取代基的性質(zhì)可能存在另外的不對稱中心。具有不對稱中心的化合物產(chǎn)生對映異構(gòu)體(旋光異構(gòu)體)、非對映異構(gòu)體(構(gòu)型異構(gòu)體)或兩者，并且所有可能的對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體，無論是在混合物中還是作為純化或部分純化的化合物形式，預(yù)計(jì)都包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本發(fā)明包括這些化合物的所有此類異構(gòu)形式。
對映異構(gòu)或非對映異構(gòu)富集化合物的獨(dú)立合成，或其色譜分離，可以按照本領(lǐng)域已知的方法通過適當(dāng)改進(jìn)本文公開的方法獲得。它們的絕對立體化學(xué)可以利用結(jié)晶產(chǎn)物或中間體結(jié)晶的x-射線結(jié)晶學(xué)測定，必要時(shí)，其中的中間體用含有已知構(gòu)型的不對稱中心的試劑衍生化。
如果需要，可以對所述化合物的外消旋混合物進(jìn)行分離，從而離析出單一對映體。分離可以采用本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行，例如使化合物的外消旋混合物與對映體純化合物偶聯(lián)形成非對映體混合物，隨后采用標(biāo)準(zhǔn)方法分離單一的非對映異構(gòu)體，例如分級結(jié)晶或色譜法。偶聯(lián)反應(yīng)通常利用對映體純的酸或堿形成鹽。非對映體衍生物然后可以通過裂解附加的手性殘基轉(zhuǎn)化為純凈對映體?；衔锏耐庀旌衔镆部梢灾苯油ㄟ^色譜方法采用手性固定相分離，這類方法是本領(lǐng)域公知的。
另一方面，使用已知構(gòu)型的旋光純原料或試劑通過立體有擇合成，也可以獲得通式I化合物的任何對映異構(gòu)體。
在式(I)和(II)的化合物中，與R2、A和Q鍵合的碳原子通常為手性碳。結(jié)果，式(I)和(II)化合物可以以外消旋體形式，或者以立體化學(xué)純的(R)或(S)形式存在。式(I)化合物的異構(gòu)形式如下所示 優(yōu)選上面所示的第一種構(gòu)型(一般為(R)構(gòu)型，例如，當(dāng)A是CH3，R2是NH2，Q是-CH2-和R1是苯基時(shí))。
本發(fā)明所述的化合物可以按照下列通用方法和具體實(shí)施例所述制備。
本發(fā)明所述的化合物可以按照下列通用方法制備。
在路線方案1中，1.1類型的氨基酸衍生物被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的Boc-酸1.2。為獲得沒有市售的氨基酸衍生物，可以采用甘氨酸席夫堿1.3的兩步烷基化反應(yīng)。用于合成1.4而進(jìn)行的1.3的烷基化反應(yīng)如文獻(xiàn)所述按對映選擇性方式完成(參見K.Maruoka等，J.Am.Chem.Soc.2000，122，5228-5229和M.North等，Tetrahedron Lett.2003，44，2045-2048)。
路線方案1 在路線方案2中，使用就地產(chǎn)生的BH3還原氨基酸1.1，生成相應(yīng)的氨基醇，然后進(jìn)行N-保護(hù)反應(yīng)得到化合物2.1。氧化2.1生成醛2.2。將2.2進(jìn)行環(huán)氧化反應(yīng)，接著用氨開環(huán)，得氨基醇2.3。
路線方案2 路線方案3概括了環(huán)丙基甲基胺衍生物(NR5R6)的合成，該類化合物用于后面的路線方案中。以3.1類型的環(huán)丙基羧酸為原料，經(jīng)EDC偶聯(lián)和硼烷還原生成芐基胺3.2。氫化得到伯胺3.3。經(jīng)還原甲基化、氫化反應(yīng)生成甲基胺3.3。經(jīng)酰胺偶聯(lián)、硼烷還原和氫化芐基對3.2進(jìn)一步加工，生成3.6類型的取代胺，其也用作偶聯(lián)子。另一方法是，用不同的醛還原性胺化3.2、接著氫化，生成3.7類型的胺。
路線方案3 路線方案4描述了中間體4.2a-c和4.3a-c的制備，這些中間體用于不同種類雜環(huán)的加工中。盡管c類中間體在適當(dāng)?shù)奈恢靡呀?jīng)完全地引入了R7NSO2R4和R6R5N部分，但a和b類中間體依然可以在對雜環(huán)加工后引入這些部分。
路線方案4 路線5描述了5.1a-c和5.2a-c類型二唑的制備，即先偶聯(lián)1.2類型的氨基酸衍生物與酰肼4.3a-c、接著用三苯膦和四溴化碳進(jìn)行環(huán)化脫氫反應(yīng)。氯化物5.1a，b經(jīng)鈀化作用和脫保護(hù)而先后轉(zhuǎn)化成5.1c和5.2c。
路線方案5 路線方案6描述了6.2類型唑的制備偶聯(lián)氨基醇2.3與酸4.2，接著氧化成酮酰胺6.1，再進(jìn)行環(huán)化脫氫反應(yīng)。
路線方案6
路線方案7描述了7.5類型的呋喃的制備。
路線方案7 路線8描述了NCS介導(dǎo)的二唑、唑和呋喃衍生物的氯化反應(yīng)，生成衍生物8.1-4。
路線方案8 路線9描述了由二唑衍生物生成9.2-4類型化合物的氟化反應(yīng)與氰化反應(yīng)(后者經(jīng)溴化和Pd介導(dǎo)的氰化反應(yīng)完成)。注意的是，中間體9.3提供了經(jīng)Pd介導(dǎo)的官能化反應(yīng)獲得大量的3-取代吡啶化合物的途徑，從而得到9.5類型的3-烷基和3-芳基取代衍生物。
路線方案9
路線方案10描述了10.2類型的二唑-席夫堿的制備，該類化合物允許后期經(jīng)烷基化反應(yīng)引入-Q-R1。
路線方案10 術(shù)語“基本純”是指通過本領(lǐng)域已知的分析技術(shù)測定，分離物質(zhì)的純度至少為90％，優(yōu)選至少95％的純度，更優(yōu)選至少99％的純度。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”是指由可藥用的無毒堿或酸(包括無機(jī)或有機(jī)堿以及無機(jī)或有機(jī)酸)制備的鹽。本發(fā)明化合物可以是單、二或三鹽，這取決于游離堿形式化合物中存在的酸官能團(tuán)的數(shù)目。游離堿以及由無機(jī)堿衍生的鹽包括鋁鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、三價(jià)錳鹽、二價(jià)錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽等。特別優(yōu)選銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽和鈉鹽。固體形式的鹽可能存在多于一種的晶體結(jié)構(gòu)，并且還可以是水合物的形式。由可藥用的無毒有機(jī)堿衍生得到的鹽包括伯胺、仲胺或叔胺、取代胺包括天然存在的取代胺、環(huán)胺以及堿性離子交換樹脂的鹽，例如下列胺的鹽精氨酸、甜菜堿、咖啡堿、膽堿、N，N’-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、哈胺、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、多胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。當(dāng)本發(fā)明化合物是堿性時(shí)，鹽可用藥學(xué)上可接受的無毒的酸(包括無機(jī)和有機(jī)酸)制備。這些酸包括乙酸、三氟乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、苦杏仁酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、撲酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸等。特別優(yōu)選檸檬酸、氫溴酸、鹽酸、三氟乙酸、馬來酸、磷酸、硫酸、富馬酸和酒石酸。
本發(fā)明涉及本文所述化合物作為β-分泌酶活性或β-位點(diǎn)淀粉樣蛋白前體蛋白-裂解酶(“BACE”)活性的抑制劑在需要這種抑制作用的患者或受治療者例如哺乳動(dòng)物中的應(yīng)用，包括施用有效量的所述化合物。術(shù)語“β-分泌酶”、“β-位點(diǎn)淀粉樣蛋白前體蛋白-裂解酶”和“BACE”在本說明書中可以互換使用。除了人類之外，多種其他哺乳動(dòng)物也可以按照本發(fā)明方法進(jìn)行治療。
本發(fā)明化合物在治療、緩解、控制或減輕阿耳茨海默氏病的危險(xiǎn)中具有效用。例如，本發(fā)明化合物可以用于預(yù)防阿耳茨海默型癡呆癥，以及用于治療早期、中期或晚期阿耳茨海默型癡呆癥。本發(fā)明化合物也可以用于治療、緩解、控制或減輕淀粉樣蛋白前體蛋白(又稱APP)的異常裂解引起的疾病的危險(xiǎn)性，以及通過抑制2-分泌酶而能得以治療或預(yù)防的其他病癥。這些病癥包括輕度認(rèn)知損傷、Trisomy 21(唐氏綜合癥)、腦淀粉樣蛋白血管病、變性癡呆、伴隨Dutch-型淀粉樣變性的遺傳性腦出血(HCHWA-D)、Creutzfeld-Jakob病、朊病毒病、肌萎縮性側(cè)索硬化、進(jìn)行性核上麻痹、頭部創(chuàng)傷、中風(fēng)、唐氏綜合癥、胰腺炎、包埋性體肌炎、其他外周淀粉樣變性、糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化。
給藥本發(fā)明化合物的受治療者或患者通常是需要抑制β-分泌酶活性的人類(男性或女性)，但也可以包括需要抑制β-分泌酶活性或治療上述病癥的其他哺乳動(dòng)物，例如狗、貓、小鼠、大鼠、牛、馬、羊、兔、猴、黑猩猩或其他無尾猿或靈長類。
本發(fā)明化合物可以與一種或多種其他藥物聯(lián)合用于本發(fā)明化合物所適用的疾病或病癥的治療，其中這些藥物在一起聯(lián)用比單用任一種藥物要更安全或更有效。另外，本發(fā)明化合物可以與一種或多種能用于治療、預(yù)防、控制、緩解或減輕本發(fā)明化合物的副作用或毒性風(fēng)險(xiǎn)的其他藥物聯(lián)合使用。此類其他藥物可以通過其通常使用的途徑和用量與本發(fā)明化合物同時(shí)或順序給藥。另外，本發(fā)明的藥物組合物包括除本發(fā)明化合物外還含有一種或多種其他活性成分的那些組合物。這類聯(lián)用藥物可以作為單位劑型聯(lián)合產(chǎn)品的一部分給藥，或者作為藥盒或治療套餐(treatment protocol)給藥，其中一種或多種附加藥物以分離劑型作為治療方案的一部分給藥。
本發(fā)明化合物與其他藥物組成的單位劑量或藥物形式的聯(lián)用藥物的實(shí)例包括與抗阿耳茨海默氏病劑形成的聯(lián)用藥物，例如其他的β-分泌酶抑制劑或γ-分泌酶抑制劑；tau磷酸化抑制劑；M1受體正別構(gòu)調(diào)節(jié)劑；Aβ寡聚物形成阻斷劑；5-HT調(diào)節(jié)劑，例如PRX-03140，GSK742467，SGS-518，F(xiàn)K-962，SL-65.0155，SRA-33和扎利羅登(xaliproden)；p25/CDK 5抑制劑；NK1/NK3受體拮抗劑；COX-2抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；包括布洛芬在內(nèi)的NSAIDs；維生素E；抗淀粉樣蛋白抗體，包括抗淀粉樣蛋白人源化單克隆抗體；抗炎化合物如(R)-氟比洛芬、硝基氟比洛芬(nitroflurbiprofen)，羅格列酮，ND-1251，VP-025，HT-0712和EHT-202；CB-1受體拮抗劑或CB-1受體反向激動(dòng)劑；抗生素如脫氧土霉素和利福平；N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑，例如美金剛胺和neramexane；膽堿酯酶抑制劑如加蘭他敏，雷司替明，獨(dú)尼匹次，他克林，pheneserine，ladostigil和ABT-089；生長激素促分泌劑如伊布莫侖，甲磺酸伊布莫侖，和capromorelin；組胺H3拮抗劑如ABT-834，ABT829和GSK 189254；AMPA激動(dòng)劑或AMPA調(diào)節(jié)劑，例如CX-717，LY 451395和S-18986；PDE IV抑制劑；GABAA反向激動(dòng)劑；神經(jīng)元煙堿樣激動(dòng)劑；選擇性M1激動(dòng)劑；微管親和調(diào)節(jié)激酶(MARK)配體；或影響受體或酶的其他藥物，它們要么能提高本發(fā)明化合物的效力、安全性、方便性，要么能降低本發(fā)明化合物的不良副作用或毒性。上面列出的聯(lián)合藥物僅僅是舉例說明，而不以任何方式產(chǎn)生限定。
同許多蛋白酶抑制劑一樣，據(jù)認(rèn)為本發(fā)明化合物在體內(nèi)被細(xì)胞色素P-450單加氧酶所代謝。細(xì)胞色素P-450是影響藥物代謝的同工酶家族。細(xì)胞色素P-450同工酶(包括CYP3A4同工酶)在體內(nèi)通常通過氧化對藥物分子進(jìn)行轉(zhuǎn)化。細(xì)胞色素P-450引起的代謝通常產(chǎn)生不希望的藥代動(dòng)力學(xué)，這樣與期望的情形相比需要更頻繁給藥和更高的劑量。這些藥物與能抑制細(xì)胞色素P-450引起的代謝的藥劑聯(lián)合使用可以改善藥物的藥代動(dòng)力學(xué)(即增加半衰期，增長達(dá)到血藥峰濃度的時(shí)間，增高血液水平)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及聯(lián)合或共同給藥本發(fā)明化合物與細(xì)胞色素P-450抑制劑。本發(fā)明還涉及改善被細(xì)胞色素P-450單加氧酶代謝的本發(fā)明化合物的藥代動(dòng)力學(xué)，包括同時(shí)給藥本發(fā)明化合物和細(xì)胞色素P-450抑制劑。
P-450抑制劑和本發(fā)明化合物的聯(lián)用藥物可以作為單位劑型聯(lián)合產(chǎn)品的組成部分給藥，或者作為藥盒或治療套餐給藥，其中一種或多種P450抑制劑以分離劑型作為治療方案的一部分給藥。
代表性的p450抑制劑包括酮康唑，甲基紅霉素，紅霉素，異煙肼，氟西汀，咪噠唑侖，地拉韋定，茚地那韋，利托那韋，雙肼苯噠嗪，異博定，醋竹桃霉素，他莫昔芬和伊立替康。其他的p450抑制劑在下列文獻(xiàn)中公開Pea等，Clin Pharmacokinet 2001，40(11)，833-868；Zhou等，Current Drug Metabolism 2004，5，415-442；和Wienkers，J.Pharm.Toxicol Methods 2001，4579-84。優(yōu)選的p450抑制劑是利托那韋。
本文使用的術(shù)語“組合物”包括含有預(yù)定的量或比例的特定組分的產(chǎn)品，以及由特定含量的特定組分的組合直接或間接地得到的任何產(chǎn)品。與藥物組合物有關(guān)的該術(shù)語包括了包含一種或多種活性成分和任選的載體的產(chǎn)品(所述載體包括惰性成分)，以及任何直接或間接地由任意兩種或多種組分的組合、復(fù)合或聚集得到的產(chǎn)品，或者由一種或多種組分的離解得到的產(chǎn)品，或者由一種或多種組分的其他類型反應(yīng)或相互作用得到的產(chǎn)品。通常，藥物組合物通過均勻和致密地將活性成分與液體載體或細(xì)碎固體載體或二者一起混合來制備，隨后視需要將產(chǎn)物成型成需要的劑型。在藥物組合物中，活性目標(biāo)化合物以足以對疾病的過程或狀況產(chǎn)生預(yù)期作用的量存在。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括通過混合本發(fā)明化合物與藥學(xué)上可接受的載體制成的任何組合物。
供口服使用的藥物組合物可以按照本領(lǐng)域已知的制備藥物組合物的任何方法制備，并且該類組合物可以包含一種或多種選自甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑的物質(zhì)，以便提供藥學(xué)上美觀和可口的制劑。片劑可以包含活性成分以及與其混合的適合于制備片劑用的無毒可藥用賦形劑。這些賦形劑可以是例如惰性賦形劑，譬如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉、或藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯膠，以及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的，或者它們可以用已知技術(shù)進(jìn)行包衣以延遲在胃腸道內(nèi)的崩解和吸收，從而獲得更長的緩釋作用。
供口服使用的組合物也可以是硬明膠膠囊的形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或者是軟明膠膠囊的形式，其中的活性成分與水或油介質(zhì)例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
其他的藥物組合物包括水混懸劑，其包含與適合于制備水混懸劑用賦形劑混合的活性成分。此外，油性混懸劑可以通過將活性成分懸浮在植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油中或懸浮在礦物油例如液體石蠟中配制。油性混懸劑還可以包含各種賦形劑。本發(fā)明的藥物組合物也可以是水包油型乳劑，它也可以含有賦形劑例如甜味劑和調(diào)味劑。
本發(fā)明的藥物組合物可以是無菌可注射的水性或油性混懸劑的形式，其可以按照本領(lǐng)域已知的方法配制，或者可以以直腸給藥用的栓劑形式給藥。
本發(fā)明的化合物還可以借助本領(lǐng)域已知的吸入裝置吸入給藥或者通過透皮貼劑給藥。
“藥學(xué)上可接受的”是指載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑中的其他成分相容，并且對接受者無害。
術(shù)語“化合物的給藥”或“給藥化合物”應(yīng)理解為是指將本發(fā)明化合物以這樣的形式提供給需要治療的個(gè)體，即使化合物能夠以治療有用形式和治療有用量的方式進(jìn)入到個(gè)體體內(nèi)，這樣的形式包括但不限于口服劑型，例如片劑、膠囊劑、糖漿劑、混懸劑等；可注射劑型，例如IV、IM、或IP等；透皮劑型，包括霜?jiǎng)?、凍膠劑、粉劑或貼劑；經(jīng)頰劑型；吸入粉劑，噴霧劑，混懸劑等；以及直腸栓劑。
術(shù)語“有效量”或“治療有效量”是指由研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師尋找到的主體化合物在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人體中引起生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的量。
本文使用的術(shù)語“…的治療”或“治療…”是指給藥本發(fā)明的化合物并且包括(1)在經(jīng)歷或表現(xiàn)出疾病的病理或癥狀的動(dòng)物中抑制該疾病(即阻止病理和/或癥狀的進(jìn)一步發(fā)展)，或(2)在經(jīng)歷或表現(xiàn)出疾病的病理或癥狀的動(dòng)物中改善疾病(即逆轉(zhuǎn)該病理和/或癥狀)。術(shù)語“控制”包括預(yù)防性治療、根除、改善或降低受控制病癥的嚴(yán)重性。
含本發(fā)明化合物的組合物宜以單位劑型形式存在，并且可以通過藥學(xué)領(lǐng)域公知的方法制備。術(shù)語“單位劑型”是指其中所有活性與非活性成分結(jié)合為適當(dāng)體系的單一劑型，從而使得患者或?qū)⒃撍幬锝o藥于患者的人可以打開其中含有全部劑量的單個(gè)容器或包裝，并且不需要將取自兩個(gè)或更多個(gè)容器或包裝的任何組分混合在一起。單位劑型的典型實(shí)例有供口服用的片劑或膠囊劑，注射用單劑量小瓶，或直腸給藥用栓劑。上面列舉的單位劑型不產(chǎn)生任何限定作用，僅僅是單位劑型的代表性實(shí)例。
含有本發(fā)明化合物的組合物宜以藥盒的形式存在，由此兩種或多種組分，其可以是活性成分或非活性成分、載體、稀釋劑等，與配制實(shí)際劑型的說明書一起提供給患者或者給患者給藥的人。這類藥盒在其中提供所有必需的物質(zhì)和組分，或者它們可以包括供使用或制備所要物質(zhì)或組分用的說明書，這些物質(zhì)和組分是患者或給藥于患者的人必須獨(dú)立獲得的。
在治療、改善、控制或降低阿耳茨海默氏病或本發(fā)明化合物所指出的其他疾病的危險(xiǎn)時(shí)，當(dāng)本發(fā)明化合物以約0.1mg-約100mg/kg動(dòng)物體重的日劑量給藥時(shí)通常能獲得滿意的結(jié)果，這些劑量優(yōu)選以單一日劑量或每天2-6次分劑量的形式或以緩釋放形式給用?？?cè)談┝繛槊縦g體重約1.0mg-約2000mg，優(yōu)選約0.1mg-約20mg。對于70kg的成人，總?cè)談┝客ǔ榧s7mg-約1,400 mg。為獲得最佳治療反應(yīng)，可以對該劑量方案進(jìn)行調(diào)整。本發(fā)明化合物可以采用每天1-4次的方案給藥，優(yōu)選每天給藥1或2次。
本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的具體給藥劑量包括1mg，5mg，10mg，30mg，80mg，100mg，150mg，300mg和500mg。本發(fā)明的藥物組合物可以以含有約0.5mg-1000mg活性成分的制劑形式提供；更優(yōu)選其包含約0.5mg-500mg活性成分；或0.5mg-250mg活性成分；或1mg-100mg活性成分。用于治療的特定藥物組合物可包含約1mg，5mg，10mg，30mg，80mg，100mg，150mg，300mg和500mg的活性成分。
但應(yīng)當(dāng)理解，對于任何具體患者而言，具體的劑量水平和給藥次數(shù)是可以變化的，并且取決于多種因素，包括所用具體化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用長短、年齡、體重、健康狀況、性別、飲食情況、給藥方式和時(shí)間、排泄率、藥物聯(lián)用情況、特定病癥的嚴(yán)重程度以及宿主接受的療法。
本發(fā)明化合物作為β-分泌酶活性抑制劑的效力可以用本發(fā)明已知的方法學(xué)證實(shí)。酶抑制作用測定如下。
ECL測定法采用均相終點(diǎn)電化學(xué)分光測定法，使用生物素化BACE底物。底物的Km大于100μM并由于該底物溶解度的限制不能測定。典型的反應(yīng)物包含約0.1nM酶，0.25μM底物，和緩沖液(50mMNaOAc，pH4.5，0.1mg/ml BSA，0.2％CHAPS，15mM EDTA和1mM去鐵胺)，總反應(yīng)體積100μl。反應(yīng)進(jìn)行30分鐘，隨后加入25μL 1MTris-HCl，pH8.0中止。所得酶產(chǎn)物通過加入釕化抗體進(jìn)行分析，該抗體能特異性識別該產(chǎn)物的C-末端殘基。向溶液中加入鏈霉素包衣磁珠，將樣品進(jìn)行M-384(Igen Inc.，Gaithersburg，MD)測定。在這些條件下，小于10％的底物被BACE 1處理。這些研究中使用的酶是在桿狀病毒表達(dá)體系中產(chǎn)生的可溶性(不包括垮膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)延伸)人蛋白。為測定化合物的抑制效價(jià)，反應(yīng)混合物(DMSO終濃度為10％)中含有抑制劑在DMSO中的溶液(12種抑制劑濃度，從100μM開始通過三倍連續(xù)稀釋法制備)。所有的試驗(yàn)都是在室溫下采用上述標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件進(jìn)行。為測定化合物的IC50，使用四參數(shù)方程進(jìn)行曲線擬合。再現(xiàn)解離常數(shù)的誤差一般小于兩倍。
HPLC測定法均相終點(diǎn)HPLC測定采用底物(香豆素-CO-REVNFEVEFR)，它被BACE 1裂解釋放出與香豆素連接的N-末端片段。該底物的Km大于100μM并由于該底物溶解度的限制不能被測定。典型的反應(yīng)物包含約2nM酶，1.0μM底物，和緩沖液(50mMNaOAc，pH4.5，0.1mg/ml BSA，0.2％CHAPS，15mM EDTA和1mM去鐵胺)，總反應(yīng)體積100μl。反應(yīng)進(jìn)行30分鐘，隨后加入25μL 1MTris-HCl，pH8.0中止。將所得反應(yīng)混合物加載到HPLC上，通過5分鐘線性梯度洗脫使產(chǎn)物與底物分開。在這些條件下，小于10％的底物被BACE 1處理。這些研究中使用的酶是在桿狀病毒表達(dá)體系中產(chǎn)生的可溶性(不包括垮膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)延伸)人蛋白。為測定化合物的抑制效價(jià)，反應(yīng)混合物(DMSO終濃度為10％)中含有抑制劑在DMSO中的溶液(制備12種抑制劑濃度，濃度范圍取決于根據(jù)ECL預(yù)測的效價(jià))。所有的試驗(yàn)都是在室溫下采用上述標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件進(jìn)行。為測定化合物的IC50，使用四參數(shù)方程進(jìn)行曲線擬合。再現(xiàn)解離常數(shù)的誤差一般小于兩倍。
具體講，下列實(shí)施例的化合物在一種或兩種上述測定中具有抑制β-分泌酶的活性，一般具有約1nM-100μM的IC50。這樣的結(jié)果是本發(fā)明化合物作為β-分泌酶活性抑制劑使用時(shí)內(nèi)在活性的指標(biāo)。
制備本發(fā)明化合物用的若干方法在本文給出的路線方案和實(shí)施例中舉例說明。起始原料按照本領(lǐng)域公知的方法或本文所列舉的方法制備。為了更全面地了解本發(fā)明提供了以下實(shí)施例，但這些實(shí)施例僅僅是說明性的，不得以任何方式解釋為是對本發(fā)明的限制。
中間體1.2.1N 2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸(路線方案1) 步驟A席夫堿的形成向丙氨酸甲酯鹽酸鹽(10.0g 71.6mmol)在100mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入二苯酮亞胺(12.0mL，71.6mmol)。使反應(yīng)在室溫下進(jìn)行15小時(shí)，溶液中逐漸析出白色沉淀。反應(yīng)物用H2O和CH2Cl2稀釋，分離各層，將有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾、濃縮，得到N-(二苯基亞甲基)丙氨酸甲酯，為粘性油體，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.62(m，2H)，7.47-7.29(m，6H)，7.19-7.16(m，2H)，4.16(q，J＝6.8Hz，1H)，3.7(s，3H，1.40(d，J＝6.8Hz，3H).
步驟B烷基化于0℃、20分鐘內(nèi)，向步驟A的N-(二苯基亞甲基)丙氨酸甲酯(9.78g，36.6mmol)在60ml DMF中的溶液內(nèi)加入1M雙(三甲基甲硅烷基)氨化鈉的THF溶液(45.72ml，45.72mmol)。30分鐘后，通過套管在25分鐘內(nèi)向反應(yīng)物中加入4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(3.00g，18.29mmol)在40ml DMF中的熱源。溫?zé)岱磻?yīng)物到室溫，攪拌5小時(shí)。用飽和氯化銨水溶液中止反應(yīng)，繼用EtOAc(3x)提取。合并的有機(jī)層用3M LiCl(2x)和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮。經(jīng)硅膠色譜法(0-40％ EtOAc/己烷)純化，得到2-[(二苯基亞甲基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯，為白色固體(5.28g，81％)。
LCMS[M+H]＝359.2.1H NMR(d4-MeOH)δ8.51(dd，J＝4.5，1.5Hz，2H)，7.56(dd，J＝8.4，1.4Hz，2H)，7.40-7.37(m，4H)，7.34-7.30(m，2H)，7.26-7.23(m，2H)，7.10-7.07(m，2H)，3.33(A of AB，d，J＝13.0Hz，1H)，3.27(s，3H)，3.18(B of AB，d，J＝12.9Hz，1H)，1.32(s，3H).
步驟C席夫堿的除去向步驟B的2-[(二苯基亞甲基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯(5.28g，14.73mmol)在75ml 1∶1 MeOH/THF中的懸浮液內(nèi)加入6NHCl(3.68ml，22.10mmol)。室溫?cái)嚢?.5小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)物。使用離子交換色譜(SCX筒)純化得到2-氨基-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯，為黃色油體(2.76g，97％)。
LCMS[M+H]＝195.3.1H NMR(d4-MeOH)δ8.43(dd，J＝4.6，1.6Hz，2H)，7.24(dd，J＝4.6，1.5Hz，2H)，3.70(s，3H)，3.09(A of AB，d，J＝12.9Hz，1H)，2.90(B of AB，d，J＝13.0Hz，1H)，1.39(s，3H).
步驟DBoc保護(hù)于0℃，向步驟C的2-氨基-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯(2.76g，14.21mmol)在70ml THF中的懸浮液內(nèi)加入二碳酸二叔丁酯(4.03g，18.47mmol)。30分鐘后，溫?zé)岱磻?yīng)到室溫過夜。反應(yīng)物用EtOAc稀釋，繼用飽和氯化銨水溶液、水、鹽水洗滌。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，真空濃縮。經(jīng)硅膠色譜法(0-60％ EtOAc/CH2Cl2)純化得到2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯，為黃色固體(3.22g，77％)。
LCMS[M+H]＝295.2.1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.43(d，J＝5.1Hz，2H)，7.21(d，J＝5.9Hz，2H)，3.73(s，3H)，3.44(A of AB，d，J＝13.2Hz，1H)，3.12(B of AB，d，J＝13.2Hz，1H)，1.46(s，9H)，1.30(s，3H).
步驟E皂化向步驟D的2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸甲酯(0.25g，0.85mmol)在4.25ml 1∶1 MeOH/THF中的溶液內(nèi)加入3NNaOH(0.43ml，1.27mmol)。使反應(yīng)在50℃進(jìn)行1小時(shí)，然后冷卻到室溫，用6N HCl(0.21ml，1.27mmol)中止反應(yīng)。真空濃縮反應(yīng)物，得到2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-吡啶-4-基丙酸NaCl，為白色固體。
LCMS[M+H]＝281.3.1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.44(d，J＝5.3Hz，2H)，7.28(d，J＝5.9Hz，2H)，3.43(A of AB，d，J＝12.6Hz，1H)，3.33(B of AB，d，J＝12.3Hz，1H)，1.47(s，9H)，1.41(s，3H).
中間體1.2.2N-(叔丁氧羰基)-2，5-二甲基正亮氨酸(路線方案1) N-(叔丁氧羰基)-2，5-二甲基正亮氨酸以異丁基碘和丙氨酸席夫堿為原料按照制備中間體1.2.1所述方法制備。
中間體2.3.1(3R-氨基-1-芐基-2RS-羥基-1-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯(路線方案2)
步驟A還原室溫下，向D-α-甲基-苯基丙氨酸(1.74g，9.71mmol)在30mL THF中的溶液內(nèi)一次性加入NaBH4(0.92g，24.27mmol)。冷卻所得溶液到0℃。在30分鐘內(nèi)逐滴加入在5mL THF中的碘(2.46g，9.71mmol)。加料完畢后，加熱回流反應(yīng)2天。隨后冷卻反應(yīng)物至0℃，通過加入甲醇來中止反應(yīng)直至停止冒泡。反應(yīng)混合物通過加入6N HCl酸化至pH1，于50℃攪拌30分鐘，真空濃縮。利用離子交換色譜(SCX筒)進(jìn)行純化，得到白色固體2R-氨基-2-甲基-3-苯基丙-1-醇。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35-7.18(m，5H)，3.36(A of AB，d，J＝10.4Hz，1H)，3.31(B of AB，d，J＝10.4Hz，1H)，2.70(s，2H)，1.04(s，3H).
步驟BBoc保護(hù)室溫下攪拌2R-氨基-2-甲基-3-苯基丙-1-醇(4.14g，25mmol)與二碳酸二叔丁酯(7.1g，32.5mmol)的溶液16小時(shí)，濃縮得到(1-芐基-2R-羥基-1-甲基乙基)氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35-7.15(m，5H)，4.48(br s，1H)，4.17(br s，1H)，3.76-3.62(m，2H)，3.19(A of AB，d，J＝13.6Hz，1H)，2.81(B of AB，d，J＝13.6Hz，1H)，1.47(s，9H)，1.07(s，3H).
步驟C氧化向(1-芐基-2R-羥基-1-甲基乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.7g，25.2mmol)在DCM(100mL)與DMSO(25mL)中的溶液內(nèi)加入三乙胺(10.5mL，75.7mmol)和三氧化硫-吡啶(10g，63.1mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物3.5小時(shí)，用EtOAc稀釋，繼用10％KHSO4、飽和NaHCO3、水、鹽水和LiCl水溶液洗滌，硫酸鈉干燥，真空濃縮，并且通過快速色譜純化(硅膠，0-20％ EtOAc/己烷)，得到(1-芐基-1-甲基-2R-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 9.53(s，1H)，7.35-7.22(m，3H)，7.12-7.00(m，2H)，4.84(br s，1H)，3.17(A of AB，d，J＝13.6 Hz，1H)，3.08(B of AB，d，J＝13.6Hz，1H)，1.51(s，9H)，1.27(s，3H).
步驟D環(huán)氧化反應(yīng)向(1-芐基-1-甲基-2R-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g，3.80mmol)的乙腈(15mL)溶液中加入6滴水、三甲基碘化锍(775mg，3.80mmol)和氫氧化鉀(511mg，9.11mmol)。將該反應(yīng)在60℃下密封攪拌1.5小時(shí)，再加入三甲基碘化锍(775mg，3.80mmol)和氫氧化鉀(511mg，9.11mmol)，并且將反應(yīng)在60℃下密封攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，硫酸鎂干燥和真空濃縮，得到油狀物(1-甲基-1-環(huán)氧乙烷-2R-基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁酯。MS(ES，M+H)278.
步驟E環(huán)氧化物的開環(huán)將(1-甲基-1-環(huán)氧乙烷-2R-基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁酯(986mg，3.56mmol)在EtOH(35mL)與NH4OH(35mL)中的溶液于60℃密封攪拌16小時(shí)，真空濃縮并且通過快速色譜純化(硅膠，0-30％(10％ NH4OH/MeOH)/CH2Cl2)，得到(3R-氨基-1-芐基-2RS-羥基-1-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯，為粘稠油體。
1H NMR(400MHz，CD3OD，1∶1非對映體混合物)δ7.30-7.14(m，5H)，4.01(br d，J＝9.2Hz，0.5H)，3.54(dd，J＝10.0，2Hz，0.5H)，3.39(br s，0.5H)，3.36(br s，0.5H)，2.94-2.56(m，4H)，1.47(s，9H)，1.03(s，1.5H)，0.99(s，1.5H).
中間體3.2.1N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(路線方案3)
步驟A偶聯(lián)將2-甲基環(huán)丙烷羧酸(77.74g，777mmol)、芐胺(93.3mL，854mmol)和DIPEA(141.5mL，854mmol)溶解在1200mL二氯甲烷中。在室溫下向該溶液中分批加入固體EDC-HCl(163.7g，854mmol)，攪拌過夜。將反應(yīng)混合物倒入0.3M HCl中。分離各層，再次用0.3M HCl洗滌一次，并且用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌一次。有機(jī)層隨后依次用水、鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，殘留物用EtOAc/己烷重結(jié)晶，得到偶聯(lián)加成物，為白色結(jié)晶。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.28(m，5H)，5.81(br s，1H)，4.43(dd，J＝5.6，2.4Hz，2H)，1.37(m，1H)，1.17(m，1H)，1.07(d，J＝6.0Hz，3H)，1.04(重迭多峰m，1H)，0.56(m，1H).
任選進(jìn)行制備手性HPLC，得到優(yōu)選的反式-S，S對映異構(gòu)體。在下列中間體和實(shí)施例中，無論是優(yōu)選的反式-S，S對映異構(gòu)體還是反式-S，S與反式-R，R的外消旋混合物都無需鑒別即可使用。為簡化起見，甲基-環(huán)丙基-甲基部分繪制成反式-外消旋形式。
步驟B還原在500mL燒瓶內(nèi)加入N-芐基-反式-2-甲基環(huán)丙烷甲酰胺(步驟B，3.9g，20.6mmol)的THF(80mL)溶液。通過滴液漏斗滴加BH3-THF(1.0M，105mL，105mmol)。加料完畢(10分鐘)后回流混合物5小時(shí)。使混合物冷卻到室溫，小心用MeOH(15mL)中止。濃縮混合物至干，再溶于二氯甲烷，用3M KOH洗滌。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，再濃縮至干。粗物質(zhì)用1N HCl/二烷在50℃下處理1小時(shí)。濃縮混合物，得到鹽酸鹽，為白色固體。將該固體溶于飽和碳酸氫鈉水溶液(80mL)，用CHCl3(2×150mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，真空干燥后得到N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺，為灰白色半固體(定量)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.28(m，5H)，3.80(s，2H)，2.50(d，J＝6.8Hz，2H)，2.4(br s，1H)，1.02(d，J＝6.0Hz，3H)，0.69(m，1H)，0.52(m，1H)，0.23(m，2H).中間體3.3.1N-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(路線方案3) 向N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(8g，45.6mmol，中間體VI)在DCE(240mL)和MeOH(120mL)中的溶液內(nèi)加入甲醛(34mL，456mmol，37％水溶液)和NaBH(OAc)3(19.3g，91mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物1小時(shí)，用飽和碳酸氫鈉水溶液處理，濃縮近干，用水稀釋，繼用EtOAc(3x)提取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，再用HCl(50mL，50mmol，1M Et2O)處理，真空濃縮得到N-芐基-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺的鹽酸鹽，進(jìn)而在20％Pd(OH)2/C(616mg)的存在下在EtOH(400mL)中于60℃和1atm H2下氫化2小時(shí)。過濾，真空濃縮得到N-甲基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺的鹽酸鹽。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ2.88(d，J＝7.3Hz，2H)，2.69(s，3H)，1.09(d，J＝5.7Hz，3H)，0.78-0.70(m，2H)，0.52-0.50(m，1H)，0.50-0.40(m，1H).
中間體3.4.12-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(路線方案3) 向N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺(中間體3.2.1，255mg，1.46mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入1N HCl(1.53mL，1.53mmol)。將該溶液用氬氣脫氣，然后加入Pd(OH)2(30mg)。在1atm氫氣壓下于60℃攪拌反應(yīng)混合物16小時(shí)。在硅藻土上過濾，濃縮得到2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺的鹽酸鹽。
1H NMR(400MHz，CD3OD+CDCl3)δ2.90-2.60(m，2H)，1.09(bs，3H)，0.90-0.70(m，2H)，0.60-0.35(m，2H).
中間體3.6.1(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺(路線方案3)
步驟A偶聯(lián)向N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺鹽酸鹽(中間體3.2.1，10g，47.2mmol)的CHCl3(150mL)溶液中加入二異丙基乙胺(9.87mL，56.7mmol)、甲氧基乙酸(4.35mL，56.7mmol)、HOAt(1.29g，9.5mmol)和EDC(10.87g，56.7mmol)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物18小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，用EtOAc稀釋，繼用10％KHSO4、NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥和真空濃縮，得到反式N-芐基-2-甲氧基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]乙酰胺，其直接用于下一步驟。
步驟B還原向冷卻到0℃的反式N-芐基-2-甲氧基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]乙酰胺(12.18g，49.2mmol)的THF(100mL)溶液中緩慢加入硼烷-THF(123.1mL，123.1mmol，1M THF)。將反應(yīng)混合物在70℃下攪拌2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物至0℃，小心用MeOH中止。再加入MeOH(20mL)，在回流狀態(tài)下攪拌所得混合物0.5小時(shí)。真空濃縮至約200mL后，加入HCl(g)飽和的MeOH(25mL)，混合物于50℃攪拌1小時(shí)。再加入HCl(g)飽和的MeOH(25mL)，并于50℃攪拌混合物1小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，從EtOH、MeOH和DCM中再濃縮數(shù)次，得到反式N-芐基-2-甲氧基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]乙胺鹽酸鹽，為無色粘稠油體，其直接用于下一步驟。
步驟C氫化將反式N-芐基-2-甲氧基-N-[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]乙胺鹽酸鹽(16g，59.3mmol)的EtOH(400mL)的溶液用氬氣脫氣，然后加入Pd(OH)2(830mg，20％)，將混合物在1atm H2下室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物用N2沖洗，在N2保護(hù)下通過硅藻土過濾，真空濃縮，并且在真空下用P2O5干燥，得到反式(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺鹽酸鹽，為白色泡沫體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.46(bs，2H)，3.84(t，J＝5.1Hz，2H)，3.40(s，3H)，3.23(bt，J＝5.1Hz，2H)，3.08-2.88(m，2H)，1.09(d，J＝6.1Hz，3H)，1.02-0.91(m，1H)，0.86-0.78(m，1H)，0.65-0.57(m，1H)，0.50-0.42(m，1H).
中間體3.6.2(2，2-二氟乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺 以N-芐基-1-(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲胺鹽酸鹽和二氟乙酸為原料，采用中間體3.6.1制備中描述的類似方法制備。
1H NMR(400MHz，CD3OD)d6.35(tt，48，3Hz，1H)，3.56(td，J＝15.6，3.1Hz，2H)，3.03(m，2H)，1.11(d，J＝5.9Hz，3H)，0.83(m，2H)，0.60(m，1H)，0.50(m，1H).
中間體3.6.3(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)-甲基]胺 以(叔丁基)(二甲基)甲硅烷氧基)乙胺和2-甲基環(huán)丙烷羧酸為原料，采用制備中間體3.2.1所述的類似方法制備。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ3.74(t，J＝5.3Hz，2H)，2.76(m，2H)，2.52(m，2H)，1.04(d，J＝6.0Hz，3H)，0.90(s，9H)，0.68(m，1H)，0.55(m，1H)，0.29(m，1H)，0.24(m，1H)，0.07(s，6H).
中間體3.6.4{(1S)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}胺
步驟A(2E)-1，1-二乙氧基丁-2-烯將丁烯醛(23.64mL，285.35mmol)、原甲酸三乙酯(57.02mL，342.42mmol)和硝酸銨(2.28g，28.54mmol)在60mL EtOH中混合。在室溫下22小時(shí)后，將該反應(yīng)物用EtOAc(60mL)稀釋，繼用飽和碳酸氫鈉溶液(40mL)洗滌。水層用EtOAc(20mL)反提取。合并的有機(jī)相用鹽水(40mL)洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到36.5g％(89％)1，1-二乙氧基丁-2-烯。
1H NMR(CDCl3，400MHz)5.84(m，1H)；5.54(m，1H)；4.82(d，J＝5.7Hz，1H)；3.64(m，2H)；3.49(m，2H)；1.73(m，3H)；1.21(m，6H).
步驟B.(4S，5S)-2-[(1E)-丙-1-烯基]-1，3-二氧戊環(huán)-4，5-二羧酸二異丙酯將(2E)-1，1-二乙氧基丁-2-烯(32.20g，223.27mmol)、D-酒石酸(-)-二異丙酯(64.64mL，245.60mmol)和甲苯磺酸吡啶(2.24g，8.93mmol)在100mL苯中的溶液加熱到95℃，蒸餾除去溶劑和生成的EtOH。在95℃下7小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻至室溫，真空濃縮。經(jīng)正相色譜純化(10-＞30％ EtOAc/己烷)得到35.37g(55％)(4S，5S)-2-[(1E)-丙-1-烯基]-1，3-二氧戊環(huán)-4，5-二羧酸二異丙酯，為橙色油體。
1H NMR(CDCl3，400MHz)6.03(m，1H)；5.86(m，2H)；5.12(m，2H)；4.71(d，J＝3.84Hz，1H)；4.63(d，J＝3.84Hz，1H)；1.78(m，3H)；1.30(d，J＝6.23Hz，12H)；LC/MS[M+H]+＝287.
步驟C.(4S，5S)-2-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]-1，3-二氧戊環(huán)-4，5-二羧酸二異丙酯向中間體(4S，5S)-2-[(1E)-丙-1-烯基]-1，3-二氧戊環(huán)-4，5-二羧酸二異丙酯(4.10g，14.32mmol)在60mL己烷中的-20℃溶液內(nèi)加入1M的二乙基鋅己烷溶液(42.96mL，42.96mmol)。在劇烈攪拌下滴加二碘甲烷(6.92mL，85.92mmol)。在-20℃下1小時(shí)后，將該反應(yīng)物在-5℃下冷凍。在-5℃下17小時(shí)后，再于0℃攪拌反應(yīng)5小時(shí)，然后用飽和氯化銨冷溶液(100mL)中止，繼用Et2O(100mL×3)提取。合并的有機(jī)相用硫代硫酸鈉水溶液(100mL)和鹽水(100mL)洗滌，過濾，硫酸鈉干燥，再次過濾，然后真空濃縮。經(jīng)正相色譜純化(10-＞30％EtOAc/己烷)得到3.85g(89％)(4S，5S)-2-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]-1，3-二氧戊環(huán)-4，5-二羧酸二異丙酯，為黃色油體。
1H NMR(CDCl3，400MHz)5.12(m，2H)；4.78(d，J＝6.41Hz，1H)；4.66(d，J＝4.21Hz，1H)；4.57(d，J＝4.22Hz，1H)；1.30(m，12H)；1.09(d，J＝5.68Hz，3H)；0.94(m，2H)；0.67(m，1H)；0.39(m，1H)；LC/MS[M+H]+＝301.
步驟D.2-甲基-N-{(1E)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]亞甲基}丙烷-2-亞磺酰胺向(4S，5S)-2-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]-1，3-二氧戊環(huán)-4，5-二羧酸二異丙酯(0.450g，1.50mmol)在5mL CH2Cl2/200μL H2O中的溶液內(nèi)加入對甲苯磺酸(0.071g，0.38mmol)。將該反應(yīng)在50℃下加熱回流。在50℃下16小時(shí)后，冷卻反應(yīng)至室溫。除去在該反應(yīng)物頂部生成的水滴。加入硫酸銅(II)(0.507g，2.85mmol)和(R)-(+)-叔丁基亞磺酰胺(0.173g，1.43mmol)。在室溫下5.5小時(shí)后，通過硅藻土墊過濾反應(yīng)物。將該硅藻土用CH2Cl2(200mL)洗滌并且真空濃縮濾液。經(jīng)正相色譜純化(10-＞50％ EtOAc/己烷)得到0.235g(92％)2-甲基-N-{(1E)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]亞甲基}丙烷-2-亞磺酰胺，為清亮無色殘留物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)7.46(d，J＝7.69Hz，1H)；1.62(m，1H)；1.25(m，2H)；1.10(m，12H)；0.82(m，1H)；LC/MS[M+H]+＝188.
步驟E.2-甲基-N-{(1S)-1-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}丙烷-2-亞磺酰胺向2-甲基-N-{(1E)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]亞甲基}丙烷-2-亞磺酰胺(0.300g，1.60mmol)在5mL CH2Cl2中的-78℃溶液內(nèi)加入3M在Et2O中的甲基溴化鎂(1.07mL，3.20mmol)。在-78℃下2小時(shí)后，溫?zé)岱磻?yīng)至室溫。在室溫下1小時(shí)后，用飽和氯化銨溶液(15mL)中止反應(yīng)，繼用EtOAc(30mL×2)提取。合并的有機(jī)相用鹽水(15mL)洗滌，硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)正相色譜純化(0-＞80％ EtOAc/己烷)得到0.224g(69％)2-甲基-N-{(1S)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}丙烷-2-亞磺酰胺，為清亮無色殘留物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)2.77(m，1H)；1.31(d，J＝6.50Hz，3H)；1.21(s，9H)；1.03(d，J＝5.77Hz，3H)；0.54(m，3H)；0.30(m，1H)；LC/MS[M+H]+＝204.
步驟F.(1S)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙烷氯化銨向2-甲基-N-{(1S)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}丙烷-2-亞磺酰胺(0.210g，1.03mmol)在4mL MeOH中的0℃溶液內(nèi)加入2M在Et2O中的HCl(0.52mL，1.03mmol)。從0℃至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)18小時(shí)，然后真空濃縮，將所得物質(zhì)溶于Et2O(4mL)，真空濃縮兩次，得到(1S)-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙烷氯化銨，為白色固體。
1H NMR(CDCl3，400MHz)2.60(m，1H)；1.37(d，J＝6.59Hz，3H)；1.08(d，J＝6.04Hz，3H)；0.77(m，1H)；0.64(m，2H)；0.42(m，1H)；LC/MS[M+H]+＝100.
中間體3.6.5{(1R)-1-[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]乙基}胺 采用制備中間體3.6.4所述方法制備，其改進(jìn)之處是在步驟D中使用(S)-(+)-叔丁烷亞磺酰胺。LC/MS[M+H]+＝100。
中間體3.6.6(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺 以2-(2-甲氧基乙氧基)乙胺和反式-2-甲基環(huán)丙烷羧酸為原料，利用合成中間體3.6.1所述方法中的步驟A和B制備。
中間體3.6.7(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺 以2-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基]乙胺和反式-2-甲基環(huán)丙烷羧酸為原料，利用合成中間體3.6.1所述方法中的步驟A和B制備。MS(ES，M+H)232。
中間體3.6.8(1-(反式-2-甲基環(huán)丙基(-N-[(1-甲基-1H-吡唑-3-基)甲基]甲胺 以中間體3.4.1和1-甲基-1H-吡唑-3-羧酸為原料，利用合成中間體3.6.1所述方法中的步驟A和B制備。
中間體3.6.91-(反式-2-甲基環(huán)丙基)-N-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲基]甲胺 以中間體3.4.1和1-甲基-1H-咪唑-2-羧酸為原料，利用合成中間體3.6.1所述方法中的步驟A和B制備。
中間體3.6.101-(反式-2-甲基環(huán)丙基)-N-[(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]甲胺
以中間體3.4.1和1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸為原料，利用合成中間體3.6.1所述方法中的步驟A和B制備。
中間體3.7.1N-[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]甘氨酸乙酯 步驟A還原性胺化將中間體3.2.1的鹽酸鹽(2.0g，9.45mmol)的DCE溶液(50mL)冷卻至0℃，依次用乙醛酸乙酯(1.01g，2.2mL，9.92mmol，50％甲苯溶液)、NaHB(OAc)3(2.83g，13.2mmol)處理。溫?zé)崴萌芤褐潦覝?，攪拌過夜。此時(shí)加入碳酸氫鹽水溶液，進(jìn)一步攪拌該溶液20分鐘。將混合物用EtOAc重復(fù)提取，合并的有機(jī)層用鹽水洗滌。在用硫酸鈉干燥后除去溶劑，再進(jìn)一步減壓干燥，得到2.0g N-芐基-N-[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]甘氨酸乙酯，為白色半固體。LC/MS[M+H]＝262.2。
步驟B氫化在250mL燒瓶內(nèi)加入在75mL EtOH中的上述反應(yīng)物(2.0g，7.6mmol)，用N2沖洗10分鐘。向該溶液中依次加入10％Pd(OH)2(80mg)、HCl(2.0mL，7.6mmol，4.0N二烷溶液)。利用氫氣罐將內(nèi)容物置于氫氣氛圍中。攪拌過夜后將混合物通過硅藻土過濾。再加入等量的HCl，濃縮所得混合物，真空干燥得到1.6g上述標(biāo)題產(chǎn)物的鹽酸鹽(灰白色固體)1H NMR(CD3OD，400MHz)δ4.28(q，J＝7.2Hz，2H)；3.95(s，2H)；2.95(m，2H)；1.29(t，J＝7.2Hz，3H)；1.07(d，J＝5.6Hz，3H)；0.82(m，2H)；0.55(m，1H)；0.45(m，2H)；LC/MS[M+H]＝176.3.
中間體4.2a.12-氯-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯和甲基(甲磺?；?胺為原料按照制備中間體4.2c.1的步驟A和B所述制備。
中間體4.2b.12-氯-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1，步驟C所述的相似方法制備。MS M+1＝299。
中間體4.2b.22-氯-6-{(2-甲基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸和中間體3.3.1為原料按照制備中間體4.2c.1，步驟C所述的相似方法制備。MS M+1＝255。
中間體4.2c.12-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙酸(路線方案4) 步驟A磺酰胺引入向氬氣沖洗過的干燥燒瓶內(nèi)加入2，6-二氯異煙酸甲酯(25g，121.3mmol)、甲基(甲磺酰基)胺(3.18g，29.12mmol)、磷酸鉀(38.6g，182mmol)、Xantphos(4.2g，7.28mmol)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(2.22g，2.43mmol)。加入二烷(1200mL)，將所得溶液用氬氣脫氣，然后加熱到100℃反應(yīng)16小時(shí)。冷卻反應(yīng)至室溫，通過硅藻土過濾，真空蒸發(fā)。快速層析(硅膠，0-50％0-40％ EtOAc/己烷)得到2-氯-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸甲酯，為黃色油體1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.88(s，1H)，7.68(s，1H)，3.96(s，3H)，3.44(s，3H)，3.11(s，3H).
步驟B水解向2-氯-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸甲酯(90.2g，323.6mmol)在1∶1 THF∶MeOH(1L)中的溶液內(nèi)加入NaOH(388mL，388mmol，1N)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物2小時(shí)，用1N HCl酸化至pH3-4，以二氯甲烷(x2)提取，硫酸鈉干燥并且真空濃縮，得到2-氯-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙酸(中間體4.2c.1)，為白色固體。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.88(s，1H)，7.63(s，1H)，3.39(s，3H)，3.13(s，3H).
步驟C胺的引入將2-氯-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(20g，75.6mmol)、反式(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]胺鹽酸鹽(17.65g，98.2mmol)、磷酸鉀(48.12g，226.7mmol)在DMA(300mL)中的懸浮液用氬氣脫氣10分鐘。加入Pd(PtBu3)2(1.93g，3.78mmol)，再將反應(yīng)混合物用氬氣脫氣10分鐘。然后于110℃攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。冷卻反應(yīng)至室溫，通過硅藻土過濾，用EtOAc沖洗，加水稀釋，用1N HCl調(diào)節(jié)pH至3-4，再用EtOAc(x3)提取。有機(jī)層用LiCl水溶液洗滌，硫酸鈉干燥并且真空濃縮，得到2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙酸。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.05(s，1H)，7.02(s，1H)，3.76(t，J＝6.3Hz，2H)，3.60(t，J＝6.3Hz，2H)，3.52-3.43(m，1H)，3.39(s，3H)，3.36(s，3H)，3.38-3.30(m，1H)，3.18(s，3H)，1.23(d，J＝6.1Hz，3H)，0.82-0.64(m，2H)，0.46-0.39(m，1H)，0.32-0.25(m，1H).
中間體4.2c.22-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、甲基(甲磺酰基)胺和中間體3.2.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.88(s，1H)，7.63(s，1H)，3.39(s，3H)，3.13(s，3H).
中間體4.2c.32-{甲基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4)
以2，6-二氯異煙酸甲酯、甲基(甲磺?；?胺和中間體3.3.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.02(s，1H)，6.96(s，1H)，3.55(A of ABX，dd，J＝14.4，6.0Hz，1H)，3.29(B of ABX，dd，J＝14.4，7.2Hz，1H)，3.35(s，3H)，3.15(s，3H)，3.12(s，3H)，1.03(d，J＝6.0Hz，3H)，0.82-0.66(m，2H)，0.48-0.41(m，1H)，0.28-0.22(m，1H).
中間體4.2c.42-{(2，2-二氟乙基)[(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(2-甲氧基乙基)(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、2-甲氧基乙基(甲磺?；?胺和中間體3.6.2為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝422.
中間體4.2c.52-{(2-甲氧基乙基)[(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(2-甲氧基乙基)(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、2-甲氧基乙基(甲磺酰基)胺和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝416.
中間體4.2c.62-{(2-甲氧基乙基)[(2-反式-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(2-甲氧基乙基)(甲磺酰基)氨基]異煙酸(路線方案4)
以2，6-二氯異煙酸甲酯、2-甲氧基乙基(甲磺酰基)胺和中間體3.3.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝372.
中間體4.2c.72-(1，1-二氧化異噻唑烷-2-基)-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、異噻唑烷1，1-二氧化物和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝384.
中間體4.2c.82-{芐基[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-(1，1-二氧化異噻唑烷-2-基)異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、異噻唑烷1，1-二氧化物和中間體3.2.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝416.
中間體4.2c.92-{(2-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、甲基(甲磺?；?胺和中間體3.6.3為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝472.
中間體4.2c.102-({(1R)-1-[(2S)-2-甲基環(huán)丙基)乙基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、甲基(甲磺?；?胺和中間體3.6.5為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝328.
中間體4.2c.112-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(異丙基磺?；?氨基]異煙酸(路線方案4)
以2，6-二氯異煙酸甲酯、甲基(異丙基磺?；?胺和中間體3.2.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝432.
中間體4.2c.122-{芐基[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(乙基磺酰基)氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、甲基(乙基磺?；?胺和中間體3.2.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝418.
中間體4.2c.132-[芐基(甲磺酰基)氨基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、芐基(甲磺?；?胺和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝448.
2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸甲酯
步驟A甲胺偶聯(lián)向2，6-二氯異煙酸(25g，130.2mmol)在52mL水中的溶液內(nèi)加入60mL 40％甲胺水溶液。在100℃下加熱回流反應(yīng)物。16小時(shí)后，冷卻反應(yīng)物至室溫。將反應(yīng)物用1N HCl(200mL)酸化，繼用EtOAc(300mL×4)提取。合并的有機(jī)物用鹽水(150mL)洗滌，硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮得到24.2g(100％)2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸，為棕色固體。LC/MS[M+H]+＝187.0.
步驟B酯化向2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸(18.1g，97mmol)在600mL MeOH中的溶液內(nèi)極其緩慢地加入亞硫酰氯(7.783mL，107mmol)(劇烈釋出HCl氣體)?；亓鞣磻?yīng)至65℃2小時(shí)。2小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)。將殘留物溶于EtOAc(400mL)，用飽和NaHCO3溶液(300mL)中和。將該水溶液用EtOAc(150mL×3)提取。合并的有機(jī)相用鹽水(150mL)洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。通過正相色譜(5％EtOAc/己烷，然后20％EtOAc/己烷)純化得到11.3g(58％)2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸甲酯，為棕黃色固體。
1H NMR(CDCl3，400mHz)7.08(d，J＝0.91Hz，1H)；6.84(d，J＝0.73Hz，1H)；5.09(s，NH)；3.92(s，3H)；2.96(d，J＝5.31Hz，3H)；LC/MS[M+H]+＝201.0.
中間體4.2.c.142-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(吡啶-3-基磺?；?氨基]異煙酸 步驟A磺化向2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸甲酯(2.00g，9.97mmol)在3∶1 CH2Cl2∶吡啶(總計(jì)100mL)中的溶液內(nèi)加入3-吡啶磺酰氯鹽酸鹽(6.40g，29.9mmol)和二甲氨基吡啶(0.609g，4.98mmol)。在50℃加熱回流反應(yīng)。36小時(shí)后，冷卻反應(yīng)至室溫。加CH2Cl2(200mL)稀釋，繼用1N HCl(150mL)溶液洗滌。水溶液用CH2Cl2(100mL×2)提取。合并的有機(jī)相用鹽水(100mL)洗滌，硫酸鎂干燥，過濾，真空濃縮。經(jīng)正相色譜純化(20-＞40％EtOAc/己烷)得到3.12g(92％)2-氯-6-[甲基(吡啶-3-基磺?；?氨基]異煙酸甲酯，為黃色殘留物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)8.95(d，J＝0.64Hz，1H)；8.82(m，1H)；8.03(m，2H)；7.67(m，1H)；7.45(m，1H)；3.99(s，3H)；3.39(s，3H)；LC/MS[M+H]+＝341.9.
步驟B水解向2-氯-6-[甲基(吡啶-3-基磺酰基)氨基]異煙酸甲酯(3.12g，9.13mmol)在1∶1 MeOH∶THF(總計(jì)60mL)中的溶液內(nèi)加入1N NaOH溶液(27mL，27.4mmol)。1小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)。將反應(yīng)物用EtOAc(100mL)稀釋，進(jìn)而以1N HCl(50mL)溶液酸化。水溶液用EtOAc(100mL×3)提取。合并的有機(jī)相用鹽水(100mL)洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并進(jìn)行真空濃縮，得到2.63g(88％)2-氯-6-[甲基(吡啶-3-基磺?；?氨基]異煙酸，為白色固體。LC/MS[M+H]+＝328.1.
中間體4.2c.152-[[(3，5-二甲基異唑-4-基)磺?；鵠(甲基)氨基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸 以2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸甲酯和3，5-二甲基異唑-4-磺酰氯為原料按照制備中間體4.2c.14所述方法制備。MS M+1＝453.
中間體4.2c.162-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-{甲基[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)磺酰基]氨基}異煙酸 以2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸甲酯和1-甲基-1H-咪唑-4-磺酰氯為原料按照制備中間體4.2c.14所述方法制備。MS M+1＝438.
中間體4.2c.172-[({4-[(芐氧基)羰基]哌嗪-1-基}磺酰基)(甲基)氨基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、4-[(甲基氨基)磺?；鵠哌嗪-1-羧酸芐酯和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MSM+1＝576.
中間體4.2c.182-[[(1，2-二甲基-1H-咪唑-4-基)磺酰基](甲基)氨基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸
以2-氯-6-(甲基氨基)異煙酸甲酯和1，2-二甲基-1H-咪唑-4-磺酰氯為原料按照制備中間體4.2c.14所述方法制備。MS M+1＝576.
中間體4.2c.192-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(嗎啉-4-基磺酰基)氨基]異煙酸(路線方案4) 以2，6-二氯異煙酸甲酯、N-甲基嗎啉-4-磺酰胺和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝443.
中間體4.2c.202-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-(甲基{[(3-甲基異唑-5-基)甲基]磺?；鶀氨基)異煙酸 以2，6-二氯異煙酸甲酯、N-甲基-1-(3-甲基異唑-5-基)甲磺酰胺和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。
MS M+1＝453.
中間體4.2c.212-[[(二甲基氨基)磺?；鵠(甲基)氨基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}異煙酸 以2，6-二氯異煙酸甲酯、N，N，N’-三甲基磺酰胺和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝401.
中間體4.2c.222-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(吡咯烷-1-基磺?；?氨基]異煙酸 以2，6-二氯異煙酸甲酯、N-甲基吡咯烷-1-磺酰胺和中間體3.6.1為原料按照制備中間體4.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝427.
中間體4.3c.1N-(4-(肼基羰基)-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案4)
步驟A偶聯(lián)向2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙酸(14.05g，37.8mmol)的DCM(150mL)溶液中加入二異丙基乙胺(7.91mL，45.4mmol)、Boc-肼(6g，45.4mmol)、HOAt(1.03g，7.6mmol)和EDC(8.7g，45.4mmol)，并且在室溫下攪拌反應(yīng)混合物16小時(shí)。反應(yīng)混合物加EtOAc稀釋，繼用10％KHSO4、碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，真空濃縮，并且通過快速色譜純化(硅膠，30％-70％EtOAc/己烷)，得到2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酰基}肼羧酸叔丁酯。MS M+1＝486.
步驟BBoc的除去向冷卻到0℃的2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙?；鶀肼羧酸叔丁酯(13.6g，28mmol)的DCM(50mL)溶液中通入HCl(g)。經(jīng)LC確認(rèn)反應(yīng)完成后，真空濃縮反應(yīng)混合物，得到N-(4-肼基羰基)-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-N-甲基甲磺酰胺的鹽酸鹽。
1HNMR(400MHz，CD3OD)δ6.89(s，1H)，6.88(s，1H)，3.79(t，J＝6.1Hz，2H)，3.62(t，J＝6.3Hz，2H)，3.52-3.48(m，1H)，3.42-3.35(m，1H)，3.33(s，3H)，3.31(s，3H)，3.16(s，3H)，1.04(d，J＝5.9Hz，3H)，0.85-0.70(m，2H)，0.51-0.42(m，1H)，0.31-0.23(m，1H).
附注每一種4.2c類型的酸中間體都可以轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的4.3c類型的酰肼。
中間體5.2c.1N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案5) 步驟偶聯(lián)向N-(4-(肼基羰基)-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺鹽酸鹽(中間體4.3c.1，11.81g，28mmol)的DMF(100mL)溶液中加入二異丙基乙胺(9.75mL，56mmol)、Boc-D-α-甲基-苯基丙氨酸(8.6g，30.8mmol)、HOAt(1.9g，14mmol)和EDC(8.05g，42mmol)，并且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物加EtOAc稀釋，繼用10％KHSO4、碳酸氫鈉水溶液和LiCl水溶液洗滌，硫酸鈉干燥，真空濃縮并且通過快速色譜純化(硅膠，30％-70％EtOAc/己烷)，得到[(1R)-1-芐基-2-氧代-(2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙?；鶀肼基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁酯。MS M+1＝647.
步驟B環(huán)化脫水向[(1R)-1-芐基-2-氧代-(2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙?；鶀肼基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁酯(16.2g，25mmol)、三苯膦(7.88g，30.1mmol)和咪唑(2.05g，30.1mmol)在DCM(150mL)中的0℃冷溶液內(nèi)加入四溴化碳(9.97g，30.1mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，通過快速色譜純化(硅膠，20％-50％EtOAc/己烷)得到[(1R)-1-(5-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯。MS M+1＝629.
步驟CBoc的除去向冷卻到0℃的[(1R)-1-(5-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(14.65g，23.3mmol)的DCM(95mL)溶液中加入TFA(35mL)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物3小時(shí)，真空濃縮，再利用MeOH濃縮，隨后再利用DCM濃縮數(shù)次，得到N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。
MS M+1＝529.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32-7.26(m，3H)，7.21(s，1H)，7.09(s，1H)，7.08-7.02(m，2H)，3.82(t，J＝5.5Hz，2H)，3.75(t，J＝5.5Hz，2H)，3.54-3.47(m，2H)，3.45(s，3H)，3.42(s，3H)，3.42-3.36(m，2H)，3.16(s，3H)，1.96(s，3H)，1.05(d，J＝5.8Hz，3H)，0.79-0.70(m，2H)，0.50-0.44(m，1H)，0.42-0.35(m，1H).
中間體5.2c.2N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-2-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案5) 步驟偶聯(lián)向N-(4-(肼基羰基)-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺鹽酸鹽(中間體4.3c.1，10.16g，24.1mmol)的DMF(240mL)溶液中加入二異丙基乙胺(8.39mL，48.2mmol)、Boc-D-α-甲基-4-氟苯基丙氨酸(7.88g，26.5mmol)、HOAt(1.64g，12.0mmol)和EDC(6.92g，36.1mmol)，并且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物加EtOAc稀釋，繼用10％KHSO4、碳酸氫鈉水溶液和LiCl水溶液(x3)洗滌，硫酸鈉干燥，真空濃縮得到[(1R)-1-(4-氟苯基甲基)-2-氧代-(2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙?；鶀肼基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁酯。MS M+1＝665.
步驟B環(huán)化脫水向[(1R)-1-(4-氟苯基甲基)-2-氧代-(2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙?；鶀肼基)-1-甲基乙基]氨基甲酸叔丁酯(16.64g，25.0mmol)、三苯膦(7.89g，30.1mmol)和咪唑(2.05g，30.1mmol)在DCM(150mL)中的0℃冷溶液內(nèi)加入四溴化碳(9.98g，30.1mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物，真空濃縮，且通過快速色譜純化(硅膠，20％-50％EtOAc/己烷)，從而得到[(1R)-2-(4-氟苯基)-1-(5-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯。MSM+1＝647.
步驟CBoc的除去向冷卻到0℃的[(1R)-2-(4-氟苯基)-1-(5-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(11.58g，17.9mmol)的DCM(75mL)溶液中加入TFA(25mL)，在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物16小時(shí)，真空濃縮，再從DCM中濃縮數(shù)次，得到N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-2-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺的TFA鹽。
MS M+1＝547.1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.10(m，5H)，7.01(s，1H)，3.82(t，J＝5.86Hz，2H)，3.64(t，J＝5.86，2H)，3.50(AB重迭多峰m，4H)，3.39(s，3H)，3.35(s，3H)，3.18(s，3H)，1.88(s，3H)，1.05(d，J＝5.86，3H)，0.78(m，2H)，0.49(m，1H)，0.30(m，1H).
其中X為二唑的其他中間體如表1所述制備。
表I二唑中間體




中間體6.2.1[(1R)-1-(2-{2-(芐基{[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3-唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸酯 步驟A偶聯(lián)向中間體4.2c.2(0.452g，1.121mmol)和中間體2.3.1(0.300g，1.019mmol)在12mL DMF中的溶液內(nèi)加入EDC(0.240g，1.253mmol)和HOAt(0.153g，1.121mmol)。15小時(shí)后，加水和EtOAc稀釋反應(yīng)，隨后用10％KHSO4、飽和NaHCO3、3M LiCl(3x)和鹽水洗滌。有機(jī)相用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到[(1R)-1-芐基-3-({2-(芐基{[反式-(1S，2S)-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙?；鶀氨基)-2-羥基-1-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯，為兩種非對映體的混合物，該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化而直接使用。LCMS(M+H)＝680.
步驟B氧化向步驟A的[(1R)-1-芐基-3-({2-(芐基{[反式-(1S，2S)-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙?；鶀氨基)-2-羥基-1-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.693g，1.019mmol)和三乙胺(0.426mmL，3.058mmol)在10mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入在2.5mL DMSO中的三氧化硫吡啶配合物(0.406g，2.55mmol)。15小時(shí)后，加EtOAc稀釋反應(yīng)，隨后用10％KHSO4、飽和NaHCO3、3M LiCl和鹽水洗滌，之后再用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，殘留物使用正相硅膠色譜純化(10-＞40％EA/己烷)，得到[(1R)-1-芐基-3-({2-(芐基{[反式-(1S，2S)-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙?；鶀氨基)-1-甲基-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯，為白色泡沫體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32-7.26(m，5H)，7.23-7.19(m，3H)，7.10(d，J＝11.7Hz，2H)，6.81(s，1H)，6.80(s，2H)，4.86(m，2H)，4.62(m，2H)，4.48(m，2H)，3.56(m，2H)，3.33-3.28(m，5H)，3.05(d，J＝13.7Hz)，2.84(s，3H)，1.55(s，3H)，1.31(s，9H)，0.98(d，J＝5.9Hz，3H)，0.62(m，1H)，0.60(m，1H)，0.36(m，1H)，0.26(m，1H).LCMS(M+H)＝678.
步驟C脫水向[(1R)-1-芐基-3-({2-(芐基{[反式-(1S，2S)-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙?；鶀氨基)-1-甲基-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.230g，0.339mmol)在4mL 1，2-二氯乙烷中的溶液內(nèi)加入甲氧基羰基氨基磺?；一鶜溲趸@(0.485g，2.04mmol，Burgess試劑)。反應(yīng)在100℃下用微波處理40分鐘，然后直接通過正相硅膠色譜純化(10-＞40％EtOAc/己烷)，得到[(1R)-1-(2-{2-(芐基{[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3-唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸酯，為白色泡沫體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)□7.31-7.19(m，9H)，7.05-7.02(m，3H)，6.93(s，1H)，4.89(m，2H)，3.57(dd，J＝14.8，5.9Hz，1H)，3.47(m，1H)，3.34-3.30(m，4H)，3.11(d，J＝13.2Hz，1H)，2.88(s，3H)，1.59(s，3H)，1.34(s，9H)，0.98(d，J＝5.9Hz，3H)，0.82(m，1H)，0.61(m，1H)，0.36(m，1H)，0.27(m，1H).LCMS(M+H)＝660.
中間體6.2.2[(1R)-1-(2-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]吡啶-4-基}-1，3-唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯酯 以中間體4.2c.1和2.3.1為原料采用制備中間體6.2.1所述的相似方法制備。MS M+1＝628.
中間體8.4.1N-{4-(5-{(1R)-1-[(叔丁氧羰基)氨基]-1-甲基-2-苯基乙基}-1，3，4-二唑-2-基)-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]吡啶-2-基}-N-[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]甘氨酸(路線方案8) 步驟A氯化室溫下，在加有中間體5.2c.22(1.9g，3.41mmol)和DCM(34mL)的燒瓶中加入N-氯代琥珀酰亞胺(455g，3.41mmol)。攪拌反應(yīng)至起始原料消失為止(根據(jù)LC/MS檢測)。此時(shí)濃縮混合物至干，使用AcCN/H2O線性梯度液通過RP-HPLC純化。匯集含有產(chǎn)物的部分，凍干得到780mg 3-氯產(chǎn)物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.27(m，3H)；7.13(s，1H)；7.08(m，2H)；4.37(s，2H)；4.17(q，J＝7.1Hz，2H)；3.55(dd，J＝14.8，5.9Hz，2H)；3.35(m，2H)；3.20(s，3H)；3.18(s，3H)；1.60(s，3H)；1.41(s，9H)，1.24(t，J＝7.1Hz，3H)；1.05(d，J＝6.7，3H)；0.80(m，2H)；0.47(m，1H)；0.32(m，1H)；LC/MS[M+H]＝691.0步驟B水解將上面步驟A的中間體(750mg，1.09mmol)溶于11mL THF。向該溶液中加入5mL 4.0N LiOH。攪拌過夜后用1N HCl中和混合物的pH至4.0。將混合物重復(fù)用EtOAc(3×25mL)提取，合并的各層繼續(xù)用碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水洗滌。硫酸鈉干燥，隨后減壓除去溶劑，得到標(biāo)題中間體，為黃色泡沫體。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.27(m，3H)；7.18(m，3H)；4.32(s，2H)；3.50(m，2H)；3.35(m，2H)；3.20(s，3H)；3.18(s，3H)；1.60(s，3H)；1.41(s，9H)；1.09(d，J＝6.3，3H)；0.80(m，2H)；0.47(m，1H)；0.32(m，1H)；LC/MS[M+H]＝663.0.
中間體8.4.2[(1R)-1-(5-{2-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(路線方案8) 按照中間體8.4.1的制備所述，以中間體5.1c.2為原料，使用NCS制備。MS M+1＝615.
中間體9.1.13-氟-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-2-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸(路線方案9) 將2-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙酸(中間體4.2c.1，0.05g，0.135mmol)的乙腈(3mL)溶液用1-氯甲基-4-氟-1，4-二氮雜二環(huán)[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽)(0.047g，0.134mmol)處理，室溫?cái)嚢?6小時(shí)。反應(yīng)通過反相LC純化，得到3-氟-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-2-[甲基(甲磺?；?氨基]異煙酸，為淡黃色固體LCMS[M+H]+＝390.3.
中間體9.1.26-{芐基[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-3-氟-2-[甲基(甲磺酰基)氨基]異煙酸(路線方案9)
以中間體4.2c.2為原料采用制備中間體9.1.1所述的相似方法制備。MS M+1＝422.
中間體9.3.1[(1R)-1-(5-{3-溴-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-2-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(路線方案9) 向[(1R)-1-甲基-1-(5-{2-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(Boc除去之前的中間體5.2c.3，250mg，0.438mmol)在8mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入NBS(78mg，0.438mmol)。2小時(shí)后，濃縮該反應(yīng)物，通過正相硅膠色譜純化(20-＞40％EtOAc/己烷)，得到[(1R)-1-(5-{3-溴-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-2-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯，為黃色固體。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.31-7.26(m，3H)，7.06-7.04(m，2H)，6.90(s，1H)，4.94(m，1H)，3.57(d，J＝13.2Hz，1H)，3.42(d，J＝13.1Hz，1H)，3.24(s，3H)，3.23(s，3H)，3.18(m，1H)，3.07(m，1H)，1.71(s，3H)，1.43(s，9H)，1.09(d，J＝6.0Hz，3H)，0.80(m，1H)，0.70(m，1H)，0.41(m，1H)，0.33(m，1H).LCMS(M+H)＝649，651(溴圖案).
中間體10.2.1N-[3-氯-4-(5-{1-[(二苯基亞甲基)氨基]乙基}-1，3，4-二唑-2-基)-6-((3-甲氧基丙基){反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺(路線方案10) 步驟A氯化向N-[4-[5-(1-氨基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺三氟乙酸鹽(中間體10.1.1，3.600g，6.51mmol)在100mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入N-氯代琥珀酰亞胺(0.870g，6.51mmol)。12小時(shí)后，濃縮反應(yīng)物，所得殘留物由3∶1期望的∶非期望的氯位置異構(gòu)體的混合物組成，采用HPLC純化(Sunfire C18 Prep OBD柱，30×150mm，35mL/min)得到所需化合物。將包含所需氯位置異構(gòu)體的組分分配到EtOAc和飽和NaHCO3中，分離各層，有機(jī)層用鹽水洗滌，濃縮得到N-[4-[5-(1-氨基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺，為黃色泡沫體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.12(s，1H)，4.40(br s，1H)，3.71(m，2H)，3.54(m，2H)，3.43(dd，J＝14.8，6Hz，1H)，3.33-3.28(m，4H)，3.24(s，3H)，3.19(s，3H)，1.61(d，J＝5.9Hz，3H)，1.02(d，J＝5.9Hz，3H)，0.74-0.64(m，2H)，0.41(m，1H)，0.29(m，1H).LCMS[M+H]+＝473(氯圖案)。
步驟B鹽酸鹽的形成在0℃下，向N-[4-[5-(1-氨基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺(0.060g，0.102mmol)在1mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入4M的HCl二烷溶液(0.038mL，0.153mmol)。濃縮該反應(yīng)物得到N-[4-[5-(1-氨基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺鹽酸鹽，為黃色泡沫體。LCMS[M+H]+＝473(氯圖案(chlorine pattern))。
步驟B席夫堿的形成向步驟B的產(chǎn)物(0.720g，1.413mmol)的CH2Cl2溶液中加入二苯甲酮亞胺(0.356mL，2.12mmol)。在室溫下進(jìn)行反應(yīng)15小時(shí)，然后加水稀釋，繼用EtOAc(3x)提取。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。將殘留物通過硅膠色譜純化(5-＞50％EtOAc/己烷)，得到N-[4-(5-{1-[(二苯基亞甲基)氨基]乙基}-1，3，4-二唑-2-基)-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺，為黃色泡沫體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.62(d，J＝7.1Hz，2H)，7.52-7.45(m，2H)，7.40-7.37(m，2H)，7.33-7.24(m，4H)，7.14(s，1H)，4.93(q，J＝6.4Hz，1H)，3.71(m，2H)，3.54(t，J＝6.1Hz，2H)，3.45-3.42(m，1H)，3.34-3.27(m，4H)，3.24(s，3H)，3.20(s，3H)，1.68(d，J＝6.6Hz，3H)，1.01(d，J＝5.9Hz，3H)，0.89-0.64(m，2H)，0.40(m，1H)，0.26(m，1H).LCMS[M+H]+＝637(氯圖案).
實(shí)施例1N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-3-氯-6-{{反式-2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案8)
將N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基丙烷-2-磺酰胺三氟乙酸鹽(中間體5.2c.1，10.77g，16.75mmol)的DCM(145mL)溶液用NCS(2.35g，17.6mmol)處理，并且在室溫下攪拌該溶液24小時(shí)。再加入115mg NCS，在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)8小時(shí)。真空蒸發(fā)反應(yīng)物，隨后通過反相HPLC純化，得到N-(4-[5-(1R-氨基-1-甲基-2-苯基乙基)-1，3，4-二唑-2-基]-3-氯-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺三氟乙酸鹽，為淡黃色固體。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.34(t，J＝3.11，3H)，7.12(s，1H)，7.08(m，2H)，3.79(t，J＝5.9Hz，2H)，3.62(t，J＝5.7Hz，2H)，3.53(dd，J＝14.8，5.9Hz，1H)，3.44(s，2H)，3.40(dd，J＝15.0，7.0Hz，1H)，3.34(s，3H)，3.26(s，3H)，3.24(s，3H)，1.87(s，3H)，1.05(d，J＝5.9Hz，3H)，0.79(m，2H)，0.49(m，1H)，0.31(m，1H).LCMS[M+H]+＝563.3.
使用中間體3.2.1，步驟A的優(yōu)選的反式-S，S對映體，實(shí)現(xiàn)優(yōu)選的對映體純的S，S，R實(shí)施例的制備。
實(shí)施例2N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-2-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺(路線方案8) 將N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-2-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺三氟乙酸鹽(中間體5.2c.2，9.79g，17.9mmol)在DCM(250mL)中的溶液用NCS(2.39g，17.9mmol)處理，并且在室溫下攪拌該溶液60小時(shí)。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)的同時(shí)再于72小時(shí)內(nèi)分三份加入360mg NCS。真空蒸發(fā)反應(yīng)物，隨后通過反相HPLC純化來分離需要的氯異構(gòu)體。將所得物質(zhì)進(jìn)一步通過快速色譜純化(硅膠，0％-3％異丙醇/CHCl3)，得到N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-2-(4-氟苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲磺酰胺。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.13(s，1H)，7.02(m，2H)，6.93(m，2H)，3.74(t，J＝6.05，2H)，3.57(t，J＝6.04，2H)，3.41(AB重迭多峰m，5H)，3.28(m，4H)，3.22(s，3H)，3.07(B of AB重迭多峰m，1H)，1.86(s，2H)，1.64(s，3H)，1.05(d，J＝5.86，3H)，0.78-0.67(m，2H)，0.43(m，1H)，0.31(m，1H).LCMS[M+H]+＝581.0.
如下面表2所述制備更多的帶有二唑基團(tuán)的3-Cl取代吡啶衍生物。
表2-3-Cl衍生物





實(shí)施例37N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基-1-吡啶-2-基甲磺酰胺 步驟AMitsunobu在0℃下，向(1R)-1-(5-{3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-2-[(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(中間體8.4.2，0.028g，0.043mmol)的甲苯(1ml)溶液中加入2-(羥甲基)吡啶(0.004ml，0.043mmol)和三苯膦(0.011g，0.043mmol)，接著加入偶氮二羧酸二異丙酯(0.008ml，0.043mmol)。移去冰浴，室溫?cái)嚢枞芤哼^夜。次日真空濃縮該溶液，再吸收到DMF中，然后過濾。產(chǎn)物通過反相HPLC純化，得到0.015g(1R)-1-(5-{3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-2-[(甲磺?；?(吡啶-2-基甲基)氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯，LCMS[M+H]740.2.
步驟BBoc的除去向(1R)-1-(5-{3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-2-[(甲磺?；?(吡啶-2-基甲基)氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基氨基甲酸叔丁酯的CH2Cl2(1ml)溶液中加入TFA(0.5ml)，在室溫下攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑得到0.008g N-[4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-(吡啶-2-基甲基)甲烷磺酰胺。LCMS[M+H]640.2。C31H38ClN7O4S的精確質(zhì)譜計(jì)算值640.2468；實(shí)測值640.2482。
表3 3-Cl衍生物

實(shí)施例49N-(4-{5-[1-氨基-2-(3，5-二溴苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氨-6-{(2-甲氧基乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺(路線方案10) 在0℃下，向N-[4-(5-{1-[(二苯基亞甲基)氨基]乙基}-1，3，4-二唑-2-基)-6-((2-甲氧基乙基){[反式-(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲烷磺酰胺(0.106g，0.162mmol)在2mL DMF中的溶液內(nèi)加入在THF中的1M NaHMDS(0.211mL，0.211mmol)。5分鐘后，通過套管向生成的深藍(lán)色溶液中加入在1mL DMF中的3，5-二溴芐基溴(0.072g，0.219mmol)，溶液在經(jīng)套管加料完畢后變?yōu)辄S色。30分鐘后，加入1mL 1N HCl，讓反應(yīng)進(jìn)行15小時(shí)以完成席夫堿的水解。將反應(yīng)物倒入10g SCX離子交換酮上，先用150mL MeOH洗脫，繼用150mL在MeOH中的2M NH3洗脫，得到分析純的N-[4-{5-[(1R)-1-氨基-2-(3，5-二溴苯基)-1-甲基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-((2-甲氧基乙基){[反式-(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲烷磺酰胺，為黃色泡沫體。由該烷基化產(chǎn)生的非對映異構(gòu)體可以采用ChiralPak AD手性固定相分離。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.55(s，J＝7.1Hz，1H)，7.17(s，2H)，7.04(s，1H)，3.71(m，2H)，3.52(t，J＝5.9Hz，2H)，3.42(dd，J＝14.8，5.7Hz，1H)，3.33-3.29(m，4H)，3.24(s，3H)，3.19(s，3H)，1.80(s，3H)，1.01(d，J＝5.9Hz，3H)，0.72-0.65(m，2H)，0.40(m，1H)，0.28(m，1H)。LCMS [M+H]+＝721(配合物圖案)。C26H34Br2ClN6O4S的精確質(zhì)譜計(jì)算值719.0412；實(shí)測值719.0446。
如下面表3所述，使用適當(dāng)?shù)耐榛瘎?，制備其他帶有二唑基和替換的Q-R1基團(tuán)的3-Cl取代吡啶衍生物。
表4-3-Cl衍生物


實(shí)施例66N2-{4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-5-氯-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-2-基}-N，N-二甲基-N2-[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基]甘氨酰胺 步驟A偶聯(lián)向裝有中間體8.4.1(25mg，0.04mmol)、二甲胺(5.1mg，0.11mmol)、HOAt(2.6mg，0.02mmol)和DMF(0.2mL)的13×100mm螺旋蓋試驗(yàn)管中加入EDC-HCl(10.2mg，0.05mmol)。攪拌3小時(shí)后，加KHSO4稀釋反應(yīng)物，繼用EtOAc(2×10mL)提取。有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮至干，得到Boc-保護(hù)酰胺粗品LC/MS[M+H]＝689.1(氯圖案)步驟BBoc的除去將上面步驟A的酰胺溶于0.3mL CH2Cl2，在冰浴上冷卻，用TFA(16μL，0.2mmol)處理。起始原料消失后在氮?dú)饬飨聺饪s反應(yīng)物，并且通過RP-HPLC純化。凍干包含產(chǎn)物的部分，得到白色固體標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(m，3H)，7.10(s，1H)，7.08(m，2H)，4.54(s，2H)，3.55(dd，J＝(br s，1H)，3.71(m，2H)，3.54(m，2H)，3.45(s，3H)，3.33-3.28(m，2H)，3.19(s，3H)，3.13(s，3H)，3.14(s，3H)，2.92(s，3H)，1.87(s，3H)，1.05(d，J＝5.9Hz，3H)，0.80(m，2H)，0.48(m，1H)，0.32(m，1H)；LC/MS[M+H]＝590.0表5-酰胺衍生物
實(shí)施例71N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{(2-環(huán)丙基-2-氧代乙基)[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺 步驟AWeinreb酰胺的形成在實(shí)施例66所述的類似條件下，偶聯(lián)中間體8.4.1與N，O-二甲基羥胺，得到Weinreb酰胺LC/MS[M+H]＝706.0.
步驟B格利雅加成室溫下，在含有步驟A的Weinreb反應(yīng)物(40mg，0.06mmol)和甲苯(0.5mL)的燒瓶中一次性加入5當(dāng)量的環(huán)丙基格利雅(0.29mmol，1.0M乙醚)。20分鐘后，加入2mL NH4Cl水溶液，隨后再加入H2O和EtOAc。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，減壓濃縮。所得粗品經(jīng)RP-HPLC純化得到被保護(hù)的酮LC/MS[M+H]＝680.7.
步驟CBoc的除去將步驟B的中間體(10mg，0.01mmol)溶于1.0mL CH2Cl2，在冰浴中冷卻，且用TFA(10μL)處理。待起始原料消失后在氮?dú)饬飨聹p壓濃縮反應(yīng)，再通過RP-HPLC純化。凍干包含產(chǎn)物的部分，得到白色固體標(biāo)題化合物1H MR(400MHz，CD3OD)δ7.31(m，3H)，7.06(m，3H)，4.65(s，2H)，3.52(m，2H)，3.42(br s，2H)，3.17(s，3H)，3.13(s，3H)，2.16(m，1H)，1.85(s，3H)，1.02(d，J＝6.0Hz，3H)，0.98(m，4H)，0.70(m，2H)，0.45(m，1H)，0.30(m，1H)；LC/MS[M+H]＝587.0.
實(shí)施例72N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基][2-(5-甲基-1，3，4-二唑-2-基)-2-氧代乙基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺 步驟A偶聯(lián)8.4.1和乙酰肼在實(shí)施例66所述的類似條件下，偶聯(lián)中間體8.4.1與乙酰肼，得到雙?；翷C/MS[M+H]＝719.0
步驟B環(huán)化脫水向含有步驟A的反應(yīng)物(60mg，0.08mmol)、聚苯乙烯鍵合三苯膦(100mg，0.13mmol，1.3mmol/g，200目)、和咪唑(8mg，0.12mmol)的0℃CH2Cl2溶液中一次性加入CBr4(39mg，0.12mmol)。攪拌反應(yīng)48消失。此時(shí)將該混合物過濾，濃縮并通過RP-HPLC純化。匯集包含產(chǎn)物的部分，在用碳酸氫鈉水溶液/EtOAc后處理后進(jìn)行分離。最后的有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮得到環(huán)化的中間體LC/MS[M+H]＝701.0.
步驟CBoc的除去將步驟B的中間體(56mg，0.08mmol)溶于6.0mL CH2Cl2，在冰浴中冷卻，并用TFA(100μL)處理。待起始原料消失后在氮?dú)饬飨聹p壓濃縮反應(yīng)，再通過RP-HPLC純化。凍干包含產(chǎn)物的部分，得到白色固體標(biāo)題化合物L(fēng)C/MS[M+H]＝600.9(氯圖案)。
實(shí)施例73N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{[(2-甲基環(huán)丙基)甲基][2-(1，3，4-二唑-2-基)-2-氧代乙基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺 按照制備N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氯-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基][2-(5-甲基-1，3，4-二唑-2-基)-2-氧代乙基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺(實(shí)施例72)所述，以中間體8.4.1和甲酰肼為原料制備。MS M+1＝587.
實(shí)施例74
N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3-唑-2-基}-3-氯-6-({[反式-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲烷磺酰胺 步驟A脫芐基化向[(1R)-1-(2-{2-(芐基{[反式-(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3-唑-5-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(中間體6.2.1，0.050g，0.076mmol)在5mL EtOH中的溶液內(nèi)加入三氟乙酸(0.006mL，0.076mmol)和20％Pd(OH)2-碳(0.011g)。連接氫氣罐，抽空燒瓶，開通H2(3x)。15小時(shí)后，再次抽空反應(yīng)物，接通氬氣(3x)，通過硅藻土墊過濾，濃縮得到[(1R)-1-甲基-(2-{2-({[反式-(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3-唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.31-7.26(m，4H)，7.12(s，1H)，7.04-7.03(m，2H)，6.98(s，1H)，3.50(m，1H)，3.43-3.34(m，4H)，3.23-3.13(m，4H)，3.11(d，J＝13.2Hz，1H)，1.60(s，3H)，1.41(s，9H)，1.09(d，J＝5.9Hz，3H)，0.85(m，1H)，0.72(m，1H)，0.48(m，1H)，0.39(m，1H).LCMS(M+H)＝570.
步驟BBoc脫保護(hù)向[(1R)-1-甲基-(2-{2-({[反式-(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)-6-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3-唑-5-基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.040g，0.070mmol)在0.5mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入0.5mL三氟乙酸。1小時(shí)后，凍干該反應(yīng)物，得到N-[4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3-唑-2-基}-6-({[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲烷磺酰胺，為黃色固體。
1HNMR(400MHz，d4-MeOH)δ7.29-7.26(m，3H)，7.22(s，1H)，7.06(d，J＝1.1Hz，1H)，7.03-7.01(m，2H)，6.95(d，J＝1.1Hz，1H)，3.47(d，J＝13.4Hz，1H)，3.37(s，3H)，3.28-3.23(m，3H)，3.19(s，3H)，1.72(s，3H)，1.06(d，J＝5.9Hz，3H)，0.85(m，1H)，0.71(m，1H)，0.43(m，1H)，0.27(m，1H).LCMS(M+H)＝470.
步驟C氯化向N-[4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3-唑-2-基}-6-({[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲烷磺酰胺(0.009g，0.015mmol)在0.3mL CH2Cl2中的溶液內(nèi)加入0.09mL 0.15MNCS的二氯甲烷儲備溶液。15小時(shí)后，進(jìn)一步加入0.10mL CH2Cl2和0.1mL 0.15M NCS的二氯甲烷儲備溶液。24小時(shí)后，濃縮反應(yīng)物，再溶于DMF，經(jīng)制備HPLC純化得到N-[4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3-唑-2-基}-3-氯-6-({[(1S，2S)-2-甲基環(huán)丙基]甲基}氨基)吡啶-2-基]-N-甲基甲烷磺酰胺，為黃色固體。
1HNMR(400MHz，d4-MeOH)δ7.30-7.29(m，3H)，7.24(s，1H)，7.04-7.02(m，3H)，3.47(d，J＝13.3Hz，1H)，3.28(s，3H)，3.26-3.20(m，5H)，1.71(s，3H)，1.06(d，J＝5.9Hz，3H)，0.85(m，1H)，0.71(m，1H)，0.43(m，1H)，0.27(m，1H).LCMS(M+H)＝505(氯圖案).
實(shí)施例75N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3-唑-2-基}-3-氯-6{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺 以中間體6.2.2為原料按照以下順序制備如上所述的Boc的除去和NCS氯化。MS M+1＝562.
實(shí)施例76N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3-唑-2-基}-3-氯-6-{(2-甲氧基乙基)[(2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺 以中間體9.1.1和Boc-D-α-甲基-苯丙氨酸為原料，采用如制備中間體5.2c.1所述的相似方法制備。MS M+1＝547.
實(shí)施例77N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氟-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺(路線方案9) 以中間體9.1.2和Boc-D-α-甲基-苯丙氨酸為原料，采用如制備中間體5.2c.1所述的相似方法制備，但在Boc除去之前要進(jìn)行氫化介導(dǎo)的脫芐基化反應(yīng)。MS M+1＝489.
實(shí)施例78N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氰基-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺(路線方案9) 向[(1R)-1-(5-{3-溴-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-2-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯(中間體9.3.1，18mg，0.028mmol)中加入Zn(CN)2(7mg，0.055mg)、Zn粉(一刮刀端量，～1mg，～0.014mmol)和Pd(t-Bu3)2(3mg，0.006mmol)。加入脫過氣的二甲基乙酰胺(0.3mL)。反應(yīng)物進(jìn)一步用氬氣脫氣，然后在130℃下用微波處理90分鐘。過濾反應(yīng)物，經(jīng)反相制備HPLC純化得到[(1R)-1-(5-{3-氰基-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}-2-[甲基(甲磺?；?氨基]吡啶-4-基}-1，3，4-二唑-2-基)-1-甲基-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯和最終化合物N-(4-{5-[(1R)-1-氨基-1-甲基-2-苯基乙基]-1，3，4-二唑-2-基}-3-氰基-6-{[(反式-2-甲基環(huán)丙基)甲基]氨基}吡啶-2-基)-N-甲基甲烷磺酰胺的混合物。使用1∶1的TFA/CH2Cl2溶液將前者加工成后者衍生物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.34-7.32(m，3H)，7.15(br s)，7.10-7.07(m，3H)，3.45(s，，2H)，3.34(s，3H)，3.33(m，2H)，3.27(s，3H)，1.87(s，3H)，1.06(d，J＝5.9Hz，3H)，0.83(m，1H)，0.71(m，1H)，0.46(m，1H)，0.31(m，1H)；LCMS(2M+H)＝991；C24H30N7O3S的精確質(zhì)譜計(jì)算值496.126；實(shí)測值496.2149.
本文中使用下列縮寫Me 甲基Bu 丁基i-Bu異丁基t-Bu叔丁基
Et 乙基Pr 丙基i-Pr異丙基Ar 芳基Ph 苯基Py 吡啶Ac 乙酰基NaHMDS六甲基二硅烷基氨化鈉EDC 乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亞胺HOAt1-羥基-7-氮雜苯并三唑DMF N，N1-二甲基甲酰胺THF 四氫呋喃DMSO二甲亞砜EDTA乙二胺四乙酸Boc叔丁氧羰基BOP六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)磷CHAPS3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲基銨基]-2-羥基-1-丙烷磺酸鹽TFA 三氟乙酸NCS N-氯代琥珀酰亞胺DCE 二氯乙烷DIPEA二異丙基乙胺DCM 二氯甲烷DMA N，N-二甲基乙酰胺aq 含水rt 室溫HPLC高效液相色譜雖然本發(fā)明已經(jīng)參考某些具體實(shí)施方案進(jìn)行了描述和說明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神與范圍的情形下，可以對其方法和方案進(jìn)行各種修改、改變、修飾、替代、省略或添加。因此，本發(fā)明由后面的權(quán)利要求的范圍加以限定，并且這些權(quán)利要求要合理地廣義解釋。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物和其藥學(xué)上可接受鹽，以及其單一的對映體和非對映體 其中X選自 Y選自(1)鹵素，(2)氰基，(3)-C1-6烷基，和(4)-C6-10芳基；A選自(1)氫，(2)-C1-10烷基，和(3)-C2-10鏈烯基，其中所述烷基或鏈烯基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-C3-12環(huán)烷基，(c)-OH，(d)-CN，(e)-O-C1-10烷基，(f)苯基，或(g)雜芳基，并且所述苯基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，(v)-C1-10烷基，或(vi)-C3-12環(huán)烷基；Q是-C0-3烷基，其中該烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(1)鹵素，(2)-C3-12環(huán)烷基，(3)-OH，(4)-CN，(5)-O-C1-10烷基，和(6)-C1-10烷基；R1選自(1)選自苯基和萘基的芳基，(2)雜芳基，(3)-C1-10烷基，和(4)-C3-8環(huán)烷基，該環(huán)烷基任選與C6-10芳基稠合，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基或雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被鹵素取代，(c)-OH，(d)-CN，(e)-O-C1-10烷基，(f)-C3-12環(huán)烷基，或(g)-NR10R11，其中R10和R11選自(i)氫，(ii)-C1-10烷基，和(iii)-C0-6亞烷基-C6-10芳基；R8和R9選自(1)氫，(2)C1-10烷基，和(3)C0-6亞烷基-C6-10芳基；R4選自(1)-C1-10烷基，(2)雜芳基，和(3)-NR12R13，其中R12和R13選自(a)氫，(b)C1-10烷基，和(c)C0-6亞烷基-C6-10芳基，或者R12和R13代表4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)選自CRaRb、S、NRc和O的環(huán)原子，并且與它們所連接的氮一起構(gòu)成非芳族環(huán)，其中所述烷基、亞烷基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-O-C1-10烷基，(e)-C1-10烷基(f)-C3-12環(huán)烷基，(g)選自苯基和萘基的芳基，(h)雜芳基，或(i)-C(＝O)-C1-10烷基，并且，其中所述芳基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，(v)-C3-12環(huán)烷基，或(vi)-C1-10烷基；R7選自基團(tuán)(1)氫，(2)-C1-10烷基，(3)-C3-7環(huán)烷基，(4)-C6-10芳基，和(5)雜芳基，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基和雜芳基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-O-C1-10烷基，(e)-C3-12環(huán)烷基，(f)由4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)選自CRaRb、S、NRc和O的環(huán)原子構(gòu)成的非芳族環(huán)基，(g)選自苯基和萘基的芳基，或(h)-C5-12雜芳基，其中所述環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，(v)-C3-12環(huán)烷基，或(vi)選自苯基和萘基的芳基；或者，R4和R7可以連接成-CH2CH2CH2-基團(tuán)；R5和R6獨(dú)立地選自(1)氫，(2)-C1-10烷基，(3)-C2-10烯基，(4)-C2-10炔基，和(5)-C1-10亞烷基-C3-12環(huán)烷基；其中所述烷基、亞烷基、環(huán)烷基、烯基或炔基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)鹵素，(b)-OH，(c)-CN，(d)-C1-10烷基，(e)-C3-12環(huán)烷基，(f)-O-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被-O-C1-10烷基-(-O-C1-10烷基)m取代，(g)雜芳基，其中該雜芳基可以是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(A)鹵素，或(B)-C1-10烷基，(h)苯基，(i)-NR14R15，其中R14和R15選自(A)氫，(B)-C1-10烷基，和(C)-C0-6烷基-C6-10芳基，(j)-C(＝O)-OR16，其中R16選自(A)氫，(B)-C1-10烷基，和(C)-C0-6亞烷基-C6-10芳基，和(k)-C(＝O)-NR17R18，其中R17和R18選自(A)氫，(B)-C1-10烷基，和(C)-C0-6亞烷基-C6-10芳基，或者，R17和R18代表4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)選自CRaRb、S、NRc和O的環(huán)原子，并且與它們所連接的氮一起構(gòu)成非芳族環(huán)，和(l)-C(＝O)-R19，其中R19選自(A)-C1-10烷基，(B)-C3-7環(huán)烷基，和(C)-C0-6亞烷基-C6-10芳基，或者，R5和R6與它們所連接的氮原子一起連接成4-6元環(huán)，該環(huán)是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(a)-C1-10烷基，(b)-C3-12環(huán)烷基，(c)-(CH2)n-苯基，(d)-C2-10烯基，或(e)-C2-10炔基，其中所述烷基、烯基和炔基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-OH，(iii)-CN，(iv)-O-C1-10烷基，或(v)-C3-12環(huán)烷基，并且所述環(huán)烷基和苯基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代(i)鹵素，(ii)-C1-10烷基，(iii)-OH，(iv)-CN，(v)-C3-12烷基，或(vi)-O-C1-10烷基；Ra、Rb和Rc各自獨(dú)立地選自(1)氫，(2)鹵素，(3)-C1-6烷基，和(4)-C(＝O)-C1-6烷基；m是0，1或2；n是0，1，2，3或4。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X為二唑基團(tuán)
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中Y為鹵素。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中R1是苯基，Q是CH2，R8和R9都是氫，且A為C1-6烷基。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R4和R7是C1-10烷基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R4是甲基或異丙基和R7是甲基。
7.權(quán)利要求1的化合物，其是式(II)化合物 其中A、X、Y、Q、R1、R4、R5、R7、R8和R9如權(quán)利要求1中定義，和其藥學(xué)上可接受的鹽，以及其單一的對映體和非對映體。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中X是二唑基團(tuán)
9.權(quán)利要求7或8的化合物，其中R1是苯基，Q是CH2，R8和R9都是氫，且A為C1-6烷基。
10.權(quán)利要求7-9中任一項(xiàng)的化合物，其中R5是氫或C1-10烷基，其中所述C1-10烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)-O-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被-O-C1-10烷基-(-O-C1-10烷基)m取代，(b)雜芳基，或(c)-C(＝O)-R19，其中R19選自(i)-C1-10烷基，(ii)-C3-7環(huán)烷基，或(iii)-C0-6亞烷基-C6-10芳基。
11.權(quán)利要求1的化合物，其是式(III)化合物 其中A、X、Y、Q、R1、R4、R5、R7、R8和R9如權(quán)利要求1中定義，和其藥學(xué)上可接受的鹽，以及其單一的對映體和非對映體。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中R1是苯基，Q是CH2，R8和R9都是氫，且A為C1-10烷基。
13.權(quán)利要求11或12的化合物，其中R5是氫或C1-10烷基，其中所述C1-10烷基是未取代的或被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代(a)-O-C1-10烷基，其中該烷基是未取代的或被-O-C1-10烷基-(-O-C1-10烷基)m取代，(b)雜芳基，或(c)-C(＝O)-R19，其中R19選自(i)-C1-10烷基，(ii)-C3-7環(huán)烷基，或(iii)-C0-6亞烷基-C6-10芳基。
14.權(quán)利要求13的化合物，其選自 和其藥學(xué)上可接受的鹽。
15.一種藥物組合物，其包括治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體。
16.權(quán)利要求15的藥物組合物，其進(jìn)一步包括P-450抑制劑。
17.權(quán)利要求16的藥物組合物，其中所述P-450抑制劑是利托那韋。
18.一種治療患者阿耳茨海默氏病的方法，該方法包括對需要這種治療的患者給藥治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥學(xué)上可接受的鹽。
19.權(quán)利要求18的方法，其中所述的權(quán)利要求1的化合物是與P-450抑制劑一起給藥的。
全文摘要
本發(fā)明涉及2，3，4，6－四取代的吡啶基衍生物，它們是β－分泌酶的抑制劑且可用于與β－分泌酶有關(guān)的疾病例如阿耳茨海默氏病的治療。本發(fā)明還涉及包含這些化合物的組合物以及這些化合物和組合物在治療與β－分泌酶有關(guān)的疾病中的應(yīng)用。
文檔編號C07D413/00GK101061113SQ200580039720
公開日2007年10月24日 申請日期2005年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月23日
發(fā)明者P·G·南特梅特, M·G·斯坦頓, H·A·拉亞帕克斯, H·G·塞爾尼克, J·C·巴羅, S·R·斯陶菲爾, J·P·瓦卡, K·P·穆爾, S·J·施塔赫爾 申請人:默克公司