專利名稱：具有血管生成抑制活性的取代的吡啶和噠嗪的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請(qǐng)涉及小分子雜環(huán)藥物，更具體來說，涉及具有血管生成抑制活性的取代的吡啶和噠嗪。
背景技術(shù)：
血管發(fā)生涉及由內(nèi)皮細(xì)胞前體或成血管細(xì)胞重新形成血管。胚胎中的第一個(gè)血管結(jié)構(gòu)是通過血管發(fā)生形成的。血管生成涉及從現(xiàn)存的血管發(fā)展毛細(xì)血管，并且是器官例如腦和腎形成血管的主要機(jī)制。雖然血管發(fā)生局限于胚胎發(fā)育，但是血管生成可在成人中發(fā)生，例如在妊娠、女性周期、或傷口愈合期間發(fā)生。
在胚胎發(fā)育和某些血管生成依賴性疾病中，血管生成和血管發(fā)生的主要調(diào)質(zhì)是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF；還稱為血管滲透因子，VPF)。VEGF代表一族由可變RNA剪接產(chǎn)生、并以同源二聚體形式存在的促細(xì)胞分裂原同種型。VEGF KDR受體對(duì)于血管內(nèi)皮細(xì)胞有高度特異性(關(guān)于綜述參見Farrara等人.Endocr.Rev.1992，13，18；Neufield等人.FASEB J.1999，13，9)。
VEGF表達(dá)是由低氧(Shweiki等人.Nature 1992，359，843)以及多種不同的細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子例如白介素-1、白介素-6、表皮生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-α與-β誘導(dǎo)的。
迄今為止，已有報(bào)道，VEGF和VEGF族成員能結(jié)合三種跨膜受體酪氨酸激酶中的一種或多種(Mustonen等人.J.Cell.Biol.，1995，129，895)、VEGF受體-1(還稱為flt-1(fms-樣酪氨酸激酶-1))；VEGFR-2(還稱為含有激酶插入結(jié)構(gòu)域的受體(KDR)，稱為胎肝激酶-1(f1k-1)的KDR的鼠類似物)；和VEGFR-3(還稱為flt-4)。據(jù)表明KDR和flt-1具有不同的信號(hào)傳導(dǎo)特征(Waltenberger等人.J.Biol.Chem.1994，269，26988；Park等人.Oncogene 1995，10，135)。因此，在完整細(xì)胞中KDR經(jīng)受強(qiáng)的配體依賴性酪氨酸磷酸化，而flt-1表現(xiàn)出弱的反應(yīng)。因此，對(duì)于誘導(dǎo)完全范圍的VEGF-介導(dǎo)的生物反應(yīng)來說，與KDR結(jié)合是必須的。
在體內(nèi)，VEGF在血管發(fā)生中起著關(guān)鍵作用，并誘導(dǎo)血管生成和血管滲透。失控的VEGF表達(dá)將導(dǎo)致特征是異常血管生成和/或高滲透過程的多種疾病。因此，控制VEGF-介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)將提供有用的控制異常血管生成和/或高滲透過程的方法。
血管生成被認(rèn)為是超過約1-2mm的腫瘤生長(zhǎng)的絕對(duì)必備條件。在小于該限度的腫瘤中，氧和營(yíng)養(yǎng)物可通過擴(kuò)散供給細(xì)胞。然而，當(dāng)達(dá)到一定尺寸時(shí)，每個(gè)腫瘤為了繼續(xù)生長(zhǎng)都要依賴血管生成。在低氧區(qū)域內(nèi)的腫瘤發(fā)生細(xì)胞通過刺激VEGF生成而起反應(yīng)，這引發(fā)靜息內(nèi)皮細(xì)胞的激活來刺激新的血管形成(Shweiki等人.Proc.Nat’l.Acad.Sci.，1995，92，768)。此外，在沒有任何血管生成的腫瘤區(qū)域中的VEGF生成可通過ras信號(hào)傳導(dǎo)途徑來進(jìn)行(Grugel等人.J.Biol.Chem.，1995，270，25915；Rak等人.Cancer Res.1995，55，4575)。原位雜交實(shí)驗(yàn)已證實(shí)了在多種人腫瘤中VEGF mRNA被嚴(yán)重地上調(diào)，這些腫瘤包括肺癌(Mattern等人.Br.J.Cancer 1996，73，931)、甲狀腺癌(Viglietto等人.Oncogene 1995，11，1569)、乳腺癌(Brown等人.Human Pathol.1995，26，86)、胃腸道癌(Brown等人.Cancer Res.1993，53，4727；Suzuki等人.Cancer Res.1996，56，3004)、腎和膀胱癌(Brown等人.Am.J.Pathol.1993，1431，1255)、卵巢癌(Olson等人.Cancer Res.1994，54，1255)、和子宮頸癌(Guidi等人.J.Nat’l Cancer Inst.1995，87，12137)，以及血管肉瘤(Hashimoto等人.Lab.Invest.1995，73，859)和幾種顱內(nèi)腫瘤(Plate等人.Nature 1992，359，845；Phillips等人.Int.J.Oncol.1993，2，913；Berkman等人.J.Clin.Invest.，1993，91，153)。據(jù)表明，中和KDR的單克隆抗體能有效地阻斷腫瘤血管生成(Kim等人.Nature 1993，362，841；Rockwell等人.Mol.Cell.Differ.1995，3，315)。
過度表達(dá)VEGF，例如在極度低氧條件下過度表達(dá)VEGF可導(dǎo)致眼睛內(nèi)血管生成，導(dǎo)致血管過度增殖，最終導(dǎo)致失明。已經(jīng)在多種視網(wǎng)膜病中觀察到了一系列這樣的事件，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視網(wǎng)膜-靜脈堵塞、早熟性視網(wǎng)膜病(Aiello等人.New Engl.J.Med.1994，331，1480；Peer等人.Lab.Invest.1995，72，638)、和老年黃斑變性(AMD；參見Lopez等人.I nvest.Opththalmol.Vis.Sci.1996，37，855)。
在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)中，血管翳的生長(zhǎng)可通過產(chǎn)生血管生成因子來介導(dǎo)。在RA患者的滑液中，免疫反應(yīng)性VEGF的水平很高，而在患有其它形式的伴有退化性關(guān)節(jié)病的關(guān)節(jié)炎的患者的滑液中，VEGF水平很低(Koch等人.J.Immunol.1994，152，4149)。據(jù)表明，在大鼠膠原關(guān)節(jié)炎模型中，血管生成抑制劑AGM-170能預(yù)防關(guān)節(jié)的新血管形成(Peacock等人.J.Exper.Med.1992，175，1135)。
在患牛皮癬的皮膚，以及與表皮下水皰形成有關(guān)的大皰性疾病例如大皰性類天皰瘡、多形性紅斑、皰疹樣皮炎中也發(fā)現(xiàn)了VEGF表達(dá)增加(Brown等人.J.Invest.Dermatol.1995，104，744)。
因?yàn)橐种芀DR信號(hào)傳導(dǎo)將導(dǎo)致抑制VEGF-介導(dǎo)的血管生成和滲透性，KDR抑制劑可用于治療特征是異常血管生成和/或高滲透過程的疾病，包括上述疾病。
在結(jié)構(gòu)上類似于本申請(qǐng)化合物的酞嗪和其它稠合噠嗪的實(shí)例公開在下列專利或?qū)＠暾?qǐng)中WO 9835958(Novartis)、US 5849741、US 3753988、US 3478028和JP 03106875。涉及酞嗪的其它文獻(xiàn)有El-Feky，S.A.，Bayoumy，B.E.，和Abd El-Sami，Z.K.，Egypt.J.Chem.(1991)，Volume Data 1990，33(2)，189-197；Duhault，J.，Gonnard，P.，和Fenard，S.，Bull.Soc.Chim.Biol.，(1967)，49(2)，177-190；和Holava，H.M.和Jr，Partyka，R.A.，J.Med.Chem.，(1969)，12，555-556。本發(fā)明化合物與在上述各篇文獻(xiàn)中描述的化合物不同，并且只有Novartis出版物描述了用作血管生成抑制劑的這樣的化合物。
如上所述，抑制血管生成的化合物在多種不同病癥的治療中有應(yīng)用價(jià)值，并因此是可取的。這樣的物質(zhì)是本發(fā)明主題。

發(fā)明內(nèi)容
在其最廣的方面，本發(fā)明涉及三組化合物、或其可藥用鹽或前藥，其中每組化合物與其它組化合物在范圍上有重疊。在每組化合物中，化合物的通式是相同的，但是應(yīng)當(dāng)注意，在每組中構(gòu)成一般結(jié)構(gòu)的幾個(gè)基團(tuán)的定義多少有些不同。因此，確定的各組化合物彼此不同，但是在其范圍上有重疊。
第一組化合物具有如下所示的通式
其中R1和R2一起形成含有兩個(gè)T2和一個(gè)T3的橋基，所述橋基與其所連接的環(huán)一起形成下列結(jié)構(gòu)所示的二環(huán) 或 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CR4G1、C(R4)2、或NR3。
在上述結(jié)構(gòu)中，G1是獨(dú)立地選自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；環(huán)烷基；低級(jí)鏈烯基；低級(jí)環(huán)烯基；鹵素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N-低級(jí)鏈烷酰基氨基取代的烷基；羥基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；鹵素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被涣u基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的飽和雜環(huán)基烷基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基烷基；-OCO2R3；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；和-NR3CON(R6)2。
基團(tuán)R3是H或低級(jí)烷基。R6獨(dú)立地選自H；烷基；環(huán)烷基；任選取代的芳基；任選取代的芳基低級(jí)烷基；低級(jí)烷基-N(R3)2；和低級(jí)烷基-OH。
在通式(I)中，R4是H、鹵素、或低級(jí)烷基。下標(biāo)p是0、1、或2；且X選自O(shè)、S、和NR3。
連接基團(tuán)Y選自低級(jí)亞烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-O-；-S-；-NH-；-O-CH2-；-S(O)-；-S(O)2-；-SCH2-；-S(O)CH2-；-S(O)2CH2-；-CH2S(O)-；-CH2S(O)2-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元雜芳基)-(CR42)s-；和-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-。在后兩個(gè)連接基團(tuán)Y中，n和s分別獨(dú)立地為0或1-2的整數(shù)。取代基G2選自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2。
Z代表CR4或N。
對(duì)于含有A、B、D、E、和L的環(huán)，環(huán)上可能的取代基G3的數(shù)目由下標(biāo)q指示，q是0、1或2。
取代基G3是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)低級(jí)烷基；-NR3COR6；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CH2OR3；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-NO2；-CN；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3二價(jià)橋基。在該二價(jià)橋基中，每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3。G3′代表任意上述定義的單價(jià)G3；且橋基的末端T2與L連接，T3與D連接，由此形成5-元稠合環(huán)。
在通式(I)中左側(cè)所示的環(huán)中，A和D獨(dú)立地代表N或CH；B和E獨(dú)立地代表N或CH；且L代表N或CH；條件是a)在含有A、B、D、E、和L的環(huán)中，N原子的總數(shù)目是0、1、2或3；b)當(dāng)L代表CH，且q＝0或任何G3是單價(jià)取代基時(shí)，A和D當(dāng)中至少有一個(gè)是N原子；和c)當(dāng)L代表CH，且G3是結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3二價(jià)橋基時(shí)，則A、B、D和E也是CH。
J是選自芳基；吡啶基；和環(huán)烷基的環(huán)。下標(biāo)q′代表環(huán)J上的取代基G4的數(shù)目，并且是0、1、2、3、4、或5。
環(huán)J上的可能的取代基G4是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；環(huán)烷基；低級(jí)鏈烯基；低級(jí)環(huán)烯基；鹵素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛?；羥基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；鹵素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷酰基氨基取代的烷基氨基；羥基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；-OCO2R3；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和連接于并連接環(huán)J相鄰位置的形成稠合環(huán)的二價(jià)橋基，所述橋基具有下列結(jié)構(gòu) 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且是經(jīng)由末端原子T2和T3與環(huán)J連接；
其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；條件是最多有兩個(gè)橋原子T2可以是N；并且是經(jīng)由末端原子T2與環(huán)J連接；和 或 其中每個(gè)T4、T5、和T6獨(dú)立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且是經(jīng)由末端原子T4或T5與環(huán)J連接；條件是i)當(dāng)一個(gè)T4是O、S、或NR3時(shí)，另一個(gè)T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的橋基團(tuán)最多可含有兩個(gè)雜原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的橋基團(tuán)中，當(dāng)一個(gè)T5和一個(gè)T6是O原子，或者兩個(gè)T6是O原子時(shí)，所述O原子被至少一個(gè)碳原子分隔。
當(dāng)G4是位于環(huán)J上與連接基團(tuán)-(CR42)p-相鄰的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基時(shí)，則G4和X上的烷基取代基R3可以連接形成結(jié)構(gòu)-(CH2)p′-橋基，其中p′是2、3、或4，條件是p和p′之和是2、3、或4，從而形成5、6、或7元含氮環(huán)。
另外的條件是1)在G1、G2、G3、和G4中，當(dāng)兩個(gè)基團(tuán)R3或R6分別是烷基，并且位于相同N原子上時(shí)，它們可通過一個(gè)鍵、O、S、或NR3連接以形成具有5-7個(gè)環(huán)原子的含氮雜環(huán)；和2)當(dāng)芳基、雜芳基、或雜環(huán)基環(huán)任選被取代時(shí)，該環(huán)可攜帶最高達(dá)5個(gè)獨(dú)立地選自下列的取代基氨基、一低級(jí)烷基取代的氨基、二低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)鏈烷酰基氨基、鹵素、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、鹵代低級(jí)烷氧基、鹵代低級(jí)烷硫基、低級(jí)鏈烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巰基、磺基、和氰基；和3)當(dāng)任何烷基連接到O、S、或N上，并攜帶羥基取代基時(shí)，則所述羥基取代基與烷基所連接的O、S、或N被至少兩個(gè)碳原子分隔開。
第二組化合物具有如下所示的通式
其中R1和R2i)獨(dú)立地代表H或低級(jí)烷基；ii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；iii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；iv)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中一個(gè)或兩個(gè)環(huán)單元T1是N，并且其它環(huán)單元是CH或CG1，且連接是經(jīng)由末端原子實(shí)現(xiàn)的；或v)一起形成含有兩個(gè)T2和一個(gè)T3的橋基，所述橋基與其所連接的環(huán)一起形成下列結(jié)構(gòu)所示的二環(huán)
或 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CR4G1、C(R4)2、或NR3。
在上述橋結(jié)構(gòu)中，下標(biāo)m是0或1-4的整數(shù)；這意味著所形成的稠合環(huán)可任選攜帶最高達(dá)4個(gè)取代基G1。
G1是獨(dú)立地選自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；環(huán)烷基；低級(jí)鏈烯基；低級(jí)環(huán)烯基；鹵素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛涣u基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；鹵素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被涣u基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺?；?；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的飽和雜環(huán)基烷基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基烷基；-OCO2R3；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；和-NR3CON(R6)2。
基團(tuán)R3是H或低級(jí)烷基。R6獨(dú)立地選自H；烷基；環(huán)烷基；任選取代的芳基；任選取代的芳基低級(jí)烷基；低級(jí)烷基-N(R3)2；和低級(jí)烷基-OH。
在通式(I)中，R4是H、鹵素、或低級(jí)烷基；下標(biāo)p是0、1、或2；且X選自O(shè)、S、和NR3。
連接基團(tuán)Y選自低級(jí)亞烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-O-；-S-；-NH-；-O-CH2-；-S(O)-；-S(O)2-；-SCH2-；-S(O)CH2-；-S(O)2CH2-；-CH2S(O)-；-CH2S(O)2-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元雜芳基)-(CR42)s-；和-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-。在后兩個(gè)連接基團(tuán)Y中，n和s分別獨(dú)立地為0或1-2的整數(shù)。G2選自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2。
Z代表N或CR4。
對(duì)于含有A、B、D、E、和L的環(huán)，環(huán)上可能的取代基G3的數(shù)目由下標(biāo)q指示，q是1或2。
取代基G3是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)低級(jí)烷基；-NR3COR6；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CH2OR3；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-NO2；-CN；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3二價(jià)橋基。在該二價(jià)橋基中，每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3。G3′代表任意上述定義的單價(jià)G3；且橋基的末端T2與L連接，T3與D連接，由此形成5-元稠合環(huán)。
在通式(I)中左側(cè)所示的環(huán)中，A和D獨(dú)立地代表CH；B和E獨(dú)立地代表CH；且L是CH；條件是形成的苯環(huán)攜帶所述結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3二價(jià)橋基作為G3取代基。
J是選自芳基；吡啶基；和環(huán)烷基的環(huán)。下標(biāo)q′代表環(huán)J上的取代基G4的數(shù)目，并且是0、1、2、3、4、或5。
G4是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；環(huán)烷基；低級(jí)鏈烯基；低級(jí)環(huán)烯基；鹵素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N-低級(jí)鏈烷酰基氨基取代的烷基；羥基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；鹵素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被?；羥基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；-OCO2R3；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和連接于并連接環(huán)J相鄰位置的形成稠合環(huán)的二價(jià)橋基，所述橋基具有下列結(jié)構(gòu) 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且是經(jīng)由末端原子T2和T3與環(huán)J連接； 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；條件是最多有兩個(gè)橋原子T2可以是N；并且是經(jīng)由末端原子T2與環(huán)J連接；和 或 其中每個(gè)T4、T5、和T6獨(dú)立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且是經(jīng)由末端原子T4或T5與環(huán)J連接；
條件是i)當(dāng)一個(gè)T4是O、S、或NR3時(shí)，另一個(gè)T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的橋基團(tuán)可含有最多兩個(gè)雜原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的橋基團(tuán)中，當(dāng)一個(gè)T5和一個(gè)T6是O原子，或者兩個(gè)T6是O原子時(shí)，所述O原子被至少一個(gè)碳原子分隔。
當(dāng)G4是位于環(huán)J上與連接基團(tuán)-(CR42)p-相鄰的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基時(shí)，則G4和X上的烷基取代基R3可以連接形成結(jié)構(gòu)-(CH2)p′-橋基，其中p′是2、3、或4，條件是p和p′之和是2、3、或4，從而形成5、6、或7元含氮環(huán)。
另外的條件是1)在G1、G2、G3、和G4中，當(dāng)兩個(gè)基團(tuán)R3或R6分別是烷基，并且位于相同N原子上時(shí)，它們可通過一個(gè)鍵、O、S、或NR3連接以形成具有5-7個(gè)環(huán)原子的含氮雜環(huán)；和2)當(dāng)芳基、雜芳基、或雜環(huán)基環(huán)任選被取代時(shí)，該環(huán)可攜帶最高達(dá)5個(gè)獨(dú)立地選自下列的取代基氨基、一低級(jí)烷基取代的氨基、二低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)鏈烷?；被?、鹵素、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、鹵代低級(jí)烷氧基、鹵代低級(jí)烷硫基、低級(jí)鏈烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巰基、磺基、和氰基；和3)當(dāng)任何烷基連接到O、S、或N上，并攜帶羥基取代基時(shí)，則所述羥基取代基與烷基所連接的O、S、或N被至少兩個(gè)碳原子分隔開。
第三組化合物具有如下所示的通式 其中R1和R2i)獨(dú)立地代表H或低級(jí)烷基；ii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基
其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；iii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；iv)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中一個(gè)或兩個(gè)環(huán)單元T1是N，并且其它環(huán)單元是CH或CG1，且連接是經(jīng)由末端原子實(shí)現(xiàn)的；或v)一起形成含有兩個(gè)T2和一個(gè)T3的橋基，所述橋基與其所連接的環(huán)一起形成下列結(jié)構(gòu)所示的二環(huán) 或 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CR4G1、C(R4)2、或NR3。
在上述橋結(jié)構(gòu)中，下標(biāo)m是0或1-4的整數(shù)；這意味著所形成的稠合環(huán)可任選攜帶最高達(dá)4個(gè)取代基G1。
G1是獨(dú)立地選自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；環(huán)烷基；低級(jí)鏈烯基；低級(jí)環(huán)烯基；鹵素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N-低級(jí)鏈烷酰基氨基取代的烷基；羥基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；鹵素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被涣u基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺?；?；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的飽和雜環(huán)基烷基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基烷基；-OCO2R3；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；和-NR3CON(R6)2。
基團(tuán)R3是H或低級(jí)烷基。R6獨(dú)立地選自H；烷基；環(huán)烷基；任選取代的芳基；任選取代的芳基低級(jí)烷基；低級(jí)烷基-N(R3)2；和低級(jí)烷基-OH。
在通式(I)中，R4是H、鹵素、或低級(jí)烷基；下標(biāo)p是0、1、或2；且X選自O(shè)、S、和NR3。
連接基團(tuán)Y選自低級(jí)亞烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-O-；-S-；-NH-；-O-CH2-；-S(O)-；-S(O)2-；-SCH2-；-S(O)CH2-；-S(O)2CH2-；-CH2S(O)-；-CH2S(O)2-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元雜芳基)-(CR42)s-；和-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-。在后兩個(gè)連接基團(tuán)Y中，n和s分別獨(dú)立地為0或1-2的整數(shù)。G2選自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2。
Z代表CR4。
對(duì)于含有A、B、D、E、和L的環(huán)，環(huán)上可能的取代基G3的數(shù)目由下標(biāo)q指示，q是1或2。
取代基G3是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)-NR3COR6；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CH2OR3；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-NO2；-CN；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3二價(jià)橋基。在該二價(jià)橋基中，每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3。G3′代表任意上述定義的單價(jià)G3；且橋基的末端T2與L連接，T3與D連接，由此形成5-元稠合環(huán)。
在通式(I)中左側(cè)所示的環(huán)中，A和D獨(dú)立地代表N或CH；B和E獨(dú)立地代表N或CH；且L代表N或CH；條件是a)在含有A、B、D、E、和L的環(huán)中，N原子的總數(shù)目是0、1、2或3；b)當(dāng)L代表CH，且任何G3是單價(jià)取代基時(shí)，A和D當(dāng)中至少有一個(gè)是N原子；和c)當(dāng)L代表CH，且G3是結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3二價(jià)橋基時(shí)，則A、B、D和E也是CH。
J是選自芳基；吡啶基；和環(huán)烷基的環(huán)。下標(biāo)q′代表環(huán)J上的取代基G4的數(shù)目，并且是0、1、2、3、4、或5。
G4是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；環(huán)烷基；低級(jí)鏈烯基；低級(jí)環(huán)烯基；鹵素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛涣u基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；鹵素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷酰基氨基取代的烷基氨基；羥基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺?；?；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的飽和雜環(huán)基；任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；-OCO2R3；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和連接于并連接環(huán)J相鄰位置的形成稠合環(huán)的二價(jià)橋基，所述橋基具有下列結(jié)構(gòu)
其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且是經(jīng)由末端原子T2和T3與環(huán)J連接； 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；條件是最多有兩個(gè)橋原子T2可以是N；并且是經(jīng)由末端原子T2與環(huán)J連接；和 或 其中每個(gè)T4、T5、和T6獨(dú)立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且是經(jīng)由末端原子T4或T5與環(huán)J連接；條件是i)當(dāng)一個(gè)T4是O、S、或NR3時(shí)，另一個(gè)T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的橋基團(tuán)可含有最多兩個(gè)雜原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的橋基團(tuán)中，當(dāng)一個(gè)T5和一個(gè)T6是O原子，或者兩個(gè)T6是O原子時(shí)，所述O原子被至少一個(gè)碳原子分隔；當(dāng)G4是位于環(huán)J上與連接基團(tuán)-(CR42)p-相鄰的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基時(shí)，則G4和X上的烷基取代基R3可以連接形成結(jié)構(gòu)-(CH2)p′-橋基，其中p′是2、3、或4，條件是p和p′之和是2、3、或4，從而形成5、6、或7元含氮環(huán)。
另外的條件是1)在G1、G2、G3、和G4中，當(dāng)兩個(gè)基團(tuán)R3或R6分別是烷基，并且位于相同N原子上時(shí)，它們可通過一個(gè)鍵、O、S、或NR3連接以形成具有5-7個(gè)環(huán)原子的含氮雜環(huán)；和2)當(dāng)芳基、雜芳基、或雜環(huán)基環(huán)任選被取代時(shí)，該環(huán)可攜帶最高達(dá)5個(gè)獨(dú)立地選自下列的取代基氨基、一低級(jí)烷基取代的氨基、二低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)鏈烷?；被Ⅺu素、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、鹵代低級(jí)烷氧基、鹵代低級(jí)烷硫基、低級(jí)鏈烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巰基、磺基、和氰基；和3)當(dāng)任何烷基連接到O、S、或N上，并攜帶羥基取代基時(shí)，則所述羥基取代基與烷基所連接的O、S、或N被至少兩個(gè)碳原子分隔開。
這些化合物的可藥用鹽以及這些化合物的常用前藥例如含有羥基的本發(fā)明化合物的O-?；苌镆苍诒景l(fā)明范圍內(nèi)。
本發(fā)明還涉及在可藥用載體中含有一種或多種本發(fā)明化合物或其鹽或前藥的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及使用這些化合物來治療患有特征是異常血管生成或高滲透過程的病癥的哺乳動(dòng)物的方法，包括給哺乳動(dòng)物施用能有效治療所述病癥的量的本發(fā)明化合物或其鹽或前藥。
定義前綴“低級(jí)”是指具有最高達(dá)并包括最多7個(gè)原子、尤其是具有最高達(dá)并包括最多5個(gè)碳原子的基團(tuán)，基團(tuán)呈直鏈或具有一個(gè)或多個(gè)分支的支鏈。
“烷基”是指具有最高達(dá)12個(gè)碳原子的烴基，其可以呈直鏈或具有一個(gè)或多個(gè)分支的支鏈。烷基尤其是低級(jí)烷基。
當(dāng)化合物、鹽等采用復(fù)數(shù)形式時(shí)，這也包括單數(shù)形式的化合物、鹽等。
任何不對(duì)稱碳原子可以以(R)-、(S)-或(R，S)構(gòu)型存在，優(yōu)選以(R)-或(S)-構(gòu)型存在。在雙鍵或環(huán)上的取代基可以以順式-(＝Z-)或反式-(＝E-)形式存在。因此，化合物可以作為異構(gòu)體混合物或純異構(gòu)體存在，優(yōu)選作為純的對(duì)映體、非對(duì)映體和具有純的順式或反式雙鍵的異構(gòu)體存在。
低級(jí)亞烷基Y可以呈支鏈或直鏈，優(yōu)選呈直鏈，尤其是亞甲基(-CH2)、亞乙基(-CH2-CH2)、1，3-亞丙基(-CH2-CH2-CH2)或1，4-亞丁基(-CH2CH2CH2CH2)。當(dāng)Y是低級(jí)亞烷基時(shí)，其最優(yōu)選為亞甲基。
“芳基”是指具有6-14個(gè)碳原子的芳族基團(tuán)，例如苯基、萘基、芴基或菲基。
“鹵素”是指氟、氯、溴、或碘，但尤其是氟、氯、或溴。
“吡啶基”是指1-吡啶基、2-吡啶基、或3-吡啶基，但尤其是2-吡啶基或3-吡啶基。
“環(huán)烷基”是含有3-12個(gè)碳原子、但優(yōu)選3-8個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)。
“環(huán)烯基”是指含有3-12個(gè)碳原子、但優(yōu)選3-8個(gè)碳原子和最高達(dá)3個(gè)雙鍵的非反應(yīng)性、非芳族不飽和碳環(huán)。本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知，與芳基的不同之處在于僅少一個(gè)雙鍵的環(huán)烯基例如環(huán)己二烯由于不具有足夠的非反應(yīng)性而不是適當(dāng)?shù)乃幬?，因此其作為取代基的?yīng)用不在本發(fā)明范圍內(nèi)。
環(huán)烷基和環(huán)烯基可含有支化點(diǎn)，這樣它們可以被烷基或鏈烯基取代。這樣的支鏈環(huán)狀基團(tuán)的實(shí)例有3，4-二甲基環(huán)戊基、4-烯丙基環(huán)己基或3-乙基環(huán)戊-3-烯基。
鹽尤其是式I化合物的可藥用鹽，例如酸加成鹽，優(yōu)選具有堿性氮原子的式I化合物與有機(jī)或無機(jī)酸形成的鹽。合適的無機(jī)酸有例如氫鹵酸例如鹽酸，硫酸，或磷酸。合適的有機(jī)酸是例如羧酸、膦酸、磺酸、或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、月桂酸、乙醇酸、乳酸、羥基丁酸、葡萄糖酸、葡萄糖一羧酸、富馬酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、葡萄糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸例如谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰基氨基乙酸、N-乙?；於０坊騈-乙?；腚装彼?、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸絲氨酸、2-甘油磷酸或3-甘油磷酸。
在Y的定義中，二基“-(5元雜芳基)-”是指含有1-3個(gè)選自O(shè)、S、和N的雜原子的5-元芳雜環(huán)，其中N原子的數(shù)目是0-3，O和S原子的數(shù)目各是0-1，并且該芳雜環(huán)經(jīng)由碳與硫連接，經(jīng)由C或N原子與-(CR42)s-連接。這樣的二基的實(shí)例包括
在G1、G2、G3、和G4的定義中，聲明—當(dāng)兩個(gè)基團(tuán)R3或R6位于-個(gè)N上時(shí)，它們可連接形成具有5-7個(gè)原子的雜環(huán)。包含它們所連接的N的這樣的雜環(huán)的實(shí)例有 “雜環(huán)基”或“雜環(huán)”是指具有1-3個(gè)選自氮、氧、和硫的雜原子的5-7元雜環(huán)系，該雜環(huán)系可以是不飽和或全飽和或部分飽和的，并且未取代或者被取代，尤其是被低級(jí)烷基例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、或叔丁基取代。
當(dāng)指明芳基、雜芳基、或雜環(huán)基可任選被取代時(shí)，該環(huán)可攜帶最高達(dá)5個(gè)獨(dú)立地選自下列的取代基氨基、一低級(jí)烷基取代的氨基、二低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)鏈烷?；被?、鹵素、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基例如三氟甲基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、鹵代低級(jí)烷氧基例如三氟甲氧基、鹵代低級(jí)烷硫基例如三氟甲硫基、低級(jí)鏈烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巰基、磺基、和氰基。
在與Y連接的環(huán)中，環(huán)單元A、B、D、E、和L可以是N或CH，應(yīng)當(dāng)理解，任選的取代基G3必須連接在碳上而不是氮上，并且當(dāng)給定的碳原子攜帶取代基G3時(shí)，該G3是代替了不存在G3時(shí)碳攜帶的H原子?？梢砸黄鹦纬傻诙€(gè)稠合環(huán)的環(huán)J與兩個(gè)相鄰G的實(shí)例有 “雜芳基”是指總共具有5-10個(gè)原子，其中有1-4個(gè)選自氮、氧、和硫的雜原子，且余下的原子是碳的單環(huán)或稠合二環(huán)芳系。雜芳基優(yōu)選為總共具有5或6個(gè)原子，其中有1-3個(gè)是雜原子的單環(huán)系。
“鏈烯基”是指具有最高達(dá)12個(gè)碳原子，可以呈直鏈或具有一個(gè)或多個(gè)分支的支鏈，并含有最高達(dá)3個(gè)雙鍵的不飽和基團(tuán)。鏈烯基尤其是具有最高達(dá)2個(gè)雙鍵的低級(jí)鏈烯基。
“鏈烷酰基”是指烷基羰基，尤其是低級(jí)烷基羰基。
鹵代低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷氧基和鹵代低級(jí)烷硫基是指其中烷基部分或完全被鹵素取代，優(yōu)選被氯和/或氟取代，最優(yōu)選被氟取代的取代基。這樣的取代基的實(shí)例有三氟甲基、三氟甲氧基、三氟甲硫基、1，1，2，2-四氟乙氧基、二氯甲基、氟甲基和二氟甲基。
當(dāng)取代基以一串基團(tuán)例如“苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基”命名時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解，連接點(diǎn)在這串基團(tuán)的最后部分(對(duì)于上述實(shí)例是氨基)上，并且這串基團(tuán)的其它基團(tuán)是以它們?cè)诨鶊F(tuán)串中列出的順序彼此連接。因此，實(shí)例“苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基”是
當(dāng)取代基以在起點(diǎn)有一個(gè)鍵(一般寫作破折號(hào))的一串基團(tuán)例如“-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)”命名時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解，連接點(diǎn)在該串基團(tuán)的第一個(gè)原子(對(duì)于上述實(shí)例是S或硫)上，并且這串基團(tuán)的其它基團(tuán)是以它們?cè)诨鶊F(tuán)串中列出的順序彼此連接。因此，實(shí)例“-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)”是 應(yīng)當(dāng)理解，連接基團(tuán)Y的各變量的最左側(cè)部分與含有A、B、D、E、和L的環(huán)連接，并且連接基團(tuán)的最右側(cè)部分與通式的噠嗪部分連接。因此，使用連接基團(tuán)“-CH2-O-”或連接基團(tuán)“-O-CH2-”的實(shí)例代表下列本發(fā)明化合物 在通式(I)中，優(yōu)選的和最優(yōu)選的基團(tuán)如下。
R1和R2優(yōu)選i)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基
其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；ii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中一個(gè)或兩個(gè)環(huán)單元T1是N，并且其它環(huán)單元是CH，且連接是經(jīng)由末端原子實(shí)現(xiàn)的；或iii)一起形成含有兩個(gè)T2和一個(gè)T3的橋基，所述橋基與其所連接的環(huán)一起形成下列結(jié)構(gòu)所示的二環(huán) 或 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CH2、或NR3；且條件是當(dāng)T3是O或S時(shí)，至少一個(gè)T2是CH或CG1。
最優(yōu)選地，任何G1位于橋基的非末端原子上。最優(yōu)選地，在iii)的橋基中，末端T2是N或CH，非末端T2是CH或CG1，且T3是S或O。
下標(biāo)m優(yōu)選為0或1-2的整數(shù)，且取代基G1優(yōu)選選自-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；低級(jí)烷基；羥基取代的烷基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；羥基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺?；?OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-NO2；-CN；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；任選取代的雜芳基烷氧基；和-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)。最優(yōu)選地，m是0，且G1是獨(dú)立地選自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；-OR6，其中R6代表低級(jí)烷基；-NO2；任選取代的雜芳氧基；和任選取代的雜芳基烷氧基。
當(dāng)R6是烷基時(shí)，其優(yōu)選為低級(jí)烷基?；鶊F(tuán)R4優(yōu)選為H；p優(yōu)選為0或1；且X優(yōu)選為NR3。
在連接基團(tuán)Y中，下標(biāo)n和s優(yōu)選為0或1，最優(yōu)選為0。Y優(yōu)選選自低級(jí)亞烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-S-；-NH-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元雜芳基)-(CR42)8-；-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-；和-O-CH2-。Y最優(yōu)選選自-CH2-O-；-CH2-NH-；-S-；-NH-；-(CR42)n- S(O)p-(5-元雜芳基)-(CR42)s-；和-O-CH2-。
在結(jié)構(gòu)(I)左側(cè)的環(huán)中，A、D、B、和E優(yōu)選為CH，且L是N或CH，條件是當(dāng)L是N時(shí)，任何取代基G3優(yōu)選為單價(jià)基團(tuán)，當(dāng)L是CH時(shí)，任何取代基G3優(yōu)選為二價(jià)基團(tuán)。
取代基G3優(yōu)選選自單價(jià)低級(jí)烷基；-NR3COR6；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-CO2R6；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-CN；任選取代的芳基；任選取代的雜芳基；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；和結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3的二價(jià)橋基，其中T2代表N或CH。T3優(yōu)選為S、O、CR42、或NR3。
G3最優(yōu)選選自單價(jià)低級(jí)烷基；-NR3COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；和結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3的二價(jià)橋基，其中T2代表N或CH。T3最優(yōu)選為S、O、CH2、或NR3。
代表取代基G3數(shù)目的下標(biāo)q最優(yōu)選為1。
環(huán)J優(yōu)選為苯基環(huán)，代表苯基環(huán)上取代基G4數(shù)目的下標(biāo)q′優(yōu)選為0、1、2、或3。下標(biāo)q′最優(yōu)選為1、或2。
G4優(yōu)選選自-N(R6)2；-NR3COR6；鹵素；烷基；鹵素取代的烷基；羥基取代的烷基；羧基取代的烷基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被?；羥基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；鹵代低級(jí)烷氧基；鹵代低級(jí)烷硫基；鹵代低級(jí)烷基磺?；?；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；任選取代的雜芳基烷基；任選取代的雜芳氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基)；任選取代的雜芳基烷氧基；-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；和連接于并連接苯基環(huán)相鄰位置的形成稠合環(huán)的橋基，所述橋基具有下列結(jié)構(gòu) 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、或CH；T3代表S、或O；并且是經(jīng)由末端原子T2和T3與苯基環(huán)連接； 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；條件是最多有兩個(gè)橋原子T2可以是N；并且是經(jīng)由末端原子T2與苯基環(huán)連接；和 其中每個(gè)T5、和T6獨(dú)立地代表O、S、或CH2；并且是經(jīng)由末端原子T5與苯基環(huán)連接；條件是i)包含T5和T6原子的橋基團(tuán)可含有最多兩個(gè)雜原子O、S、或N；和ii)在包含T5和T6原子的橋基團(tuán)中，當(dāng)一個(gè)T5和一個(gè)T6是O原子，或者兩個(gè)T6是O原子時(shí)，所述O原子被至少一個(gè)碳原子分隔。
構(gòu)成G4全部或一部分的烷基優(yōu)選為低級(jí)烷基。
當(dāng)G4是位于環(huán)J上與連接基團(tuán)-(CR42)p-相鄰的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基時(shí)，則G4和X上的烷基取代基R3可以連接形成結(jié)構(gòu)-(CH2)p′-橋基，其中p′優(yōu)選為2或3，條件是p和p′之和是2或3，從而形成含氮5或6元環(huán)。最優(yōu)選地，p和p′總和為2，從而形成5元環(huán)。
最優(yōu)選地，在G1、G2、G3、和G4中，當(dāng)兩個(gè)基團(tuán)R6分別是烷基，并且位于相同N原子上時(shí)，它們可通過一個(gè)鍵、O、S、或NR3連接以形成具有5-6個(gè)環(huán)原子的含氮雜環(huán)。
優(yōu)選地，當(dāng)芳基、雜芳基、或雜環(huán)基環(huán)任選被取代時(shí)，該環(huán)可攜帶最高達(dá)2個(gè)獨(dú)立地選自下列的取代基氨基、一低級(jí)烷基取代的氨基、二低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)鏈烷?；被?、鹵素、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、鹵代低級(jí)烷氧基、鹵代低級(jí)烷硫基、-CH2OR3、硝基、和氰基。
本發(fā)明方法可用于在人和其它哺乳動(dòng)物中治療VEGF-介導(dǎo)的病癥。
化合物可以劑量單位制劑口服施用、經(jīng)皮施用、非胃腸道施用、通過注射施用、通過吸入或噴霧施用、或舌下施用、直腸施用或陰道施用。術(shù)語“通過注射施用”包括靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、肌內(nèi)、皮下和非胃腸道注射，以及使用輸注技術(shù)。經(jīng)皮施用可包括局部施用或透皮施用。一種或多種化合物可以與一種或多種無毒可藥用載體、以及如果需要的話其它活性組分一起存在。
口服施用的組合物可通過本領(lǐng)域已知的制備藥物組合物的任意適當(dāng)方法制得。這樣的組合物可含有一種或多種選自稀釋劑、甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑的物質(zhì)以提供適口制劑。
片劑含有活性組分，以及與其混合的適于制備片劑的無毒可藥用賦形劑。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；制粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉、或藻酸；和粘合劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。片劑可以未包衣，或者可通過已知技術(shù)包衣來延遲崩解和在胃腸道中吸附，并由此實(shí)現(xiàn)在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的持續(xù)作用。例如，可采用延時(shí)材料例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。還可以將這些化合物制成固體、速釋形式。
口服施用的制劑還可以制成硬明膠膠囊，其中活性組分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高齡土混合；或制成軟明膠膠囊，其中活性組分與水或油介質(zhì)例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
還可以使用含有與適于制備水懸浮液的賦形劑混合的活性組分的水懸浮液。這樣的賦形劑是懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、西黃蓍膠和阿拉伯膠；分散劑或潤(rùn)濕劑可以是天然磷脂例如卵磷脂，或氧化乙烯與脂肪酸的縮合產(chǎn)物例如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物例如十七氧化乙烯鯨蠟醇，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的部分酯的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯山梨醇一油酸酯，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的部分酯的縮合產(chǎn)物例如聚乙烯脫水山梨醇一油酸酯。水懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑例如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯，一種或多種著色劑，一種或多種矯味劑，和一種或多種甜味劑例如蔗糖或糖精。
通過加入水，適于制備水懸浮液的分散粉末和顆?？商峁┗钚越M分與分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑的混合物。合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑是上文列舉的那些。也可以含有其它賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
化合物還可以呈非水液體制劑的形式，例如可通過將活性組分懸浮在植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或花生油中，或懸浮在礦物油例如液體石蠟中而配制的油懸浮液。油懸浮液可含有增稠劑例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可加入甜味劑例如上述甜味劑和矯味劑來提供適口的口服制劑。這些組合物可通過加入抗氧化劑例如抗壞血酸來防腐。
本發(fā)明藥物組合物還可以呈水包油乳劑的形式。油相可以是植物油例如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟，或它們的混合物。合適的乳化劑可以是天然樹膠，例如阿拉伯膠或西黃蓍膠，天然磷脂例如大豆、卵磷脂，和衍生自脂肪酸與己糖醇酐的酯或部分酯，例如脫水山梨醇一油酸酯，和所述部分酯與氧化乙烯的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯脫水山梨醇一油酸酯。乳劑還可以含有甜味劑和矯味劑。
還可以用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖漿劑和酏劑。這樣的制劑還可以含有緩和劑、防腐劑和矯味劑以及著色劑。
本發(fā)明化合物還可以以直腸或陰道給藥用栓劑的形式施用。這些組合物可通過將藥物與在常溫下是固體、但是在直腸或陰道溫度下是液體、并由此將在直腸或陰道內(nèi)熔化以釋放藥物的合適的非刺激性賦形劑混合來制得。這樣的物質(zhì)包括椰子油和聚乙二醇。
本發(fā)明化合物還可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法透皮施用(參見例如Chien；“Transdermal Controlled SystemicMedications”；Marcel Dekker.Inc.；1987.Lipp等人WO 94/04157，3Mar94)。例如，可將式I化合物在任選含有滲透促進(jìn)劑的適當(dāng)揮發(fā)性溶劑中的溶液或懸浮液與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它添加劑例如基質(zhì)材料和殺菌劑混合。滅菌后，可按照已知方法將所得混合物配制成劑型。此外，通過用乳化劑和水處理，可將式I化合物的溶液或懸浮液配制成洗劑或軟膏劑。
制備透皮給藥系統(tǒng)的合適的溶劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，并包括低級(jí)醇例如乙醇或異丙醇，低級(jí)酮例如丙酮，低級(jí)羧酸酯例如乙酸乙酯，極性醚例如四氫呋喃，低級(jí)烴例如己烷、環(huán)己烷或苯，或鹵代烴例如二氯甲烷、氯仿、三氯三氟乙烷、或三氯氟乙烷。合適的溶劑還可以包括一種或多種選自下列的物質(zhì)的混合物低級(jí)醇、低級(jí)酮、低級(jí)羧酸酯、極性醚、低級(jí)烴、鹵代烴。
適用于透皮給藥系統(tǒng)的滲透促進(jìn)劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，并包括例如一元或多元醇例如乙醇、丙二醇或苯甲醇，飽和或不飽和C8-C18脂肪醇例如月桂醇或鯨蠟醇，飽和或不飽和C8-C18脂肪酸例如硬脂酸，具有最高達(dá)24個(gè)碳原子的飽和或不飽和脂肪酯，例如下列酸的甲酯、乙酯、丙酯、異丙酯、正丁酯、仲丁酯、異丁酯、叔丁酯或甘油單酯乙酸、己酸、月桂酸、豆蔻酸、硬脂酸、或棕櫚酸，或總共具有最高達(dá)24個(gè)碳原子的飽和或不飽和二元羧酸的二酯，例如己二酸二異丙酯、己二酸二異丁酯、癸二酸二異丙酯、馬來酸二異丙酯、或富馬酸二異丙酯。其它滲透促進(jìn)物質(zhì)包括磷脂?；苌锢缏蚜字蚰X磷脂，萜烯、酰胺、酮、脲和它們的衍生物，以及醚例如二甲基異山梨醇醚和二甘醇一乙醚。合適的滲透促進(jìn)制劑還可以包括一種或多種下列物質(zhì)的混合物一元或多元醇、飽和或不飽和C8-C18脂肪醇、飽和或不飽和C8-C18脂肪酸、具有最高達(dá)24個(gè)碳原子的飽和或不飽和脂肪酯、總共具有最高達(dá)24個(gè)碳原子的飽和或不飽和二元羧酸的二酯、磷脂?；苌?、萜烯、酰胺、酮、脲和它們的衍生物、以及醚。
適用于透皮給藥系統(tǒng)的粘合物質(zhì)是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，并包括聚丙烯酸酯、硅氧烷、聚氨酯、嵌段聚合物、苯乙烯-丁二烯共聚物、以及天然和合成橡膠。纖維素醚、衍生化的聚乙烯、以及硅酸鹽也可用作基質(zhì)組分。可加入其它添加劑例如粘性樹脂或油來提高基質(zhì)的粘性。
對(duì)于本文所公開的關(guān)于式I化合物的所有給藥方案，日口服劑量?jī)?yōu)選為0.01-200mg/kg總體重。對(duì)于注射給藥，包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下和非胃腸道注射、以及使用輸注技術(shù)，日劑量?jī)?yōu)選為O.01-200mg/kg總體重。對(duì)于直腸給藥，日劑量?jī)?yōu)選為0.01-200mg/kg總體重。對(duì)于陰道給藥，日劑量?jī)?yōu)選為0.01-200mg/kg總體重。對(duì)于局部給藥，日劑量?jī)?yōu)選為0.1-200mg，每天給藥1-4次。透皮濃度優(yōu)選為保持0.01-200mg/kg的日劑量所需的濃度。對(duì)于吸入給藥，日劑量?jī)?yōu)選為0.01-10mg/kg總體重。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，特定的給藥方法將取決于多種不同因素，當(dāng)給藥治療時(shí)所有這些因素都要常規(guī)考慮。然而，還應(yīng)當(dāng)理解，對(duì)于任何給定患者，具體劑量水平將取決于多種不同因素，包括但不限于所用的特定化合物的活性、患者年齡、患者體重、患者的一般健康、患者性別、患者飲食、給藥時(shí)間、給藥途徑、分泌速度、藥物聯(lián)合、進(jìn)行治療的病癥的嚴(yán)重程度。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，最佳治療過程，即治療方式和在確定治療天數(shù)內(nèi)式I化合物或其可藥用鹽的日給藥次數(shù)可由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用常規(guī)治療試驗(yàn)來確定。
一般制備方法本發(fā)明化合物可通過使用已知的化學(xué)反應(yīng)和方法來制得。然而，通過下述一般制備方法來幫助閱讀者合成KDR抑制劑，并且在描述工作實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)部分中提供更詳細(xì)的特定實(shí)施例。
在下文中如果沒有具體定義，這些方法中的所有可變基團(tuán)都如一般描述中所述。應(yīng)當(dāng)理解，在給定結(jié)構(gòu)中，當(dāng)具有給定符號(hào)的可變基團(tuán)或取代基(即R3、R4、R6、G1、G2、G3、或G4)使用一次以上時(shí)，每個(gè)這些基團(tuán)或取代基都在該符號(hào)的定義范圍內(nèi)獨(dú)立地變化。如上所定義，本發(fā)明化合物含有環(huán)單元，每個(gè)環(huán)單元可獨(dú)立地?cái)y帶0-5個(gè)未定義為H的取代基G1、G3、或G4。相反，應(yīng)當(dāng)指出，在下述一般方法反應(yīng)方案中，使用的G1、G3、或G4取代基的定義包括H，以表明G1、G3、或G4取代基在結(jié)構(gòu)中的位置，并易于畫得精確。然而，該非標(biāo)準(zhǔn)用法并不是打算改變G1、G3、或G4的定義。因此，只是為了下述一般方法反應(yīng)方案，G1、G3、或G4才除了是G1、G3、或G4的定義中列出的基團(tuán)以外還可以是H。最終的化合物含有0-5個(gè)非氫基團(tuán)G1、G3、或G4。
在這些一般方法中，變量M等于如下所示的基團(tuán)
其中每個(gè)可變基團(tuán)或取代基在上文該符號(hào)的定義限度內(nèi)獨(dú)立地改變。
在這些一般方法中，變量Q1等于如下所示的基團(tuán) 其中L是N并且每個(gè)可變基團(tuán)或取代基在上文該符號(hào)的定義限度內(nèi)獨(dú)立地改變。
在這些一般方法中，變量Q2等于如下所示的基團(tuán) 其中每個(gè)可變基團(tuán)或取代基在上文該符號(hào)的定義限度內(nèi)獨(dú)立地改變。
應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到，具有每個(gè)要求保護(hù)的任選官能團(tuán)的本發(fā)明化合物不能用每種下列方法制得。在每種方法的范圍內(nèi)，使用在反應(yīng)條件下穩(wěn)定的任選取代基，或者可能參與反應(yīng)的官能團(tuán)按照需要以保護(hù)形式存在，并且在適當(dāng)步驟通過本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法除去這樣的保護(hù)基。
一般方法A其中X、M、和Q2如上所定義，Y是-CH2-O-、-CH2-S-、-CH-NH-、-O-、-S-、或-NH-，R1和R2與它們所連接的碳一起形成稠合的5-元芳雜環(huán)，hal是鹵素(Cl、Br、F、或I，但是優(yōu)選為Cl、Br或F)的式I-A化合物是按照方法A中所示的反應(yīng)方案方便地制得的。因此，其中R是低級(jí)烷基的式II雜環(huán)可由本領(lǐng)域技術(shù)人員依據(jù)在參考表中的相應(yīng)的出版的方法制得。對(duì)于噻吩-2，3-二甲酸(表項(xiàng)目1)和吡唑-3，4-二甲酸(表項(xiàng)目10)，可通過在回流條件下用相應(yīng)的醇和催化無機(jī)酸(一般是硫酸)處理來將羧酸轉(zhuǎn)化成甲酯或乙酯。用肼水合物處理式II二酯，以獲得中間體III(關(guān)于具體反應(yīng)條件參見Robba，M.；Le Guen，Y.Bull.Soc.Chem.Fr.，1970 12 4317)。用鹵化劑例如三氯氧化磷、三溴氧化磷、五溴化磷、或五氯化磷處理化合物III，以生成二鹵代中間體IV。可通過與氟化氫反應(yīng)將二氯或二溴中間體轉(zhuǎn)化成二氟中間體(在需要時(shí))。通過在隨后的步驟中使用碘試劑例如碘化鉀或四丁基碘化銨，在反應(yīng)混合物中形成了碘中間體，不用分離成純物質(zhì)。在回流的醇或其它適當(dāng)溶劑例如四氫呋喃(THF)、二甲氧基乙烷(DME)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亞砜(DMSO)等中用式V親核試劑處理二鹵代中間體IV，以獲得式VI中間體。這樣的縮合還可以不使用溶劑在熔化狀態(tài)下進(jìn)行，并且可用酸例如HCl或堿例如三乙胺或1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。將式VI化合物與式VII化合物在下述條件下反應(yīng)在合適的非質(zhì)子傳遞溶劑例如DMSO、DMF中，或者不使用溶劑，通常使用堿性催化劑例如DBU或CsCO4、或冠醚例如18-冠-6，通常在室溫至回流溫度下進(jìn)行反應(yīng)，以生成本發(fā)明式I-A化合物。應(yīng)當(dāng)理解，本領(lǐng)域技術(shù)人員將根據(jù)原料的性質(zhì)來選擇合適的溶劑、催化劑(如果使用的話)和溫度。式V和VII中間體一般是市售的，或者可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法方便地制得。例如，關(guān)于其中Y是-CH2-O-，且Q2是被2-氨基羰基(2-CONH2)取代的4-吡啶基的VII的制備，參見Martin，I.，等人Acta.Chem.Scand.，199549 230。
方法A
關(guān)于制備原料II的參考表 一般方法B其中X、M、和Q2如上所定義，Y是-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-O-、-S-、或-NH-的式I-B化合物是按照方法B制得的。依據(jù)文獻(xiàn)中描述的方法(Tomisawa和Wang，Chem.Pharm.Bull.，21，1973，2607，2612)，將異喹諾酮VIII與PBr5在熔化狀態(tài)下反應(yīng)以生成1，4-二溴異喹啉IX。在回流的醇中用式V親核試劑處理中間體IX，以生成式X中間體。這樣的縮合還可以不使用溶劑在熔化狀態(tài)下進(jìn)行，并且可用酸例如HCl或堿例如三乙胺或1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。將式X化合物與式VII化合物在下述條件下反應(yīng)在合適的非質(zhì)子傳遞溶劑例如DMSO、DMF中，或者不使用溶劑，通常使用堿性催化劑例如DBU或CsCO4，在高溫下進(jìn)行反應(yīng)，以生成本發(fā)明式I-B化合物。當(dāng)Y是-CH2-S-或-S-時(shí)，該方法是最有用的。
方法B 一般方法C其中M、X、R1、R2、m和Q2如上所定義的式I-C化合物可依據(jù)方法C中所示的反應(yīng)方案方便地制得。在該方法中，m優(yōu)選為0，R1和R2與它們所連接的碳一起形成稠合苯或稠合的5-元芳雜環(huán)。原料XI是市售的，或者可按照在下述參考表中列出的方法由本領(lǐng)域技術(shù)人員制得。將原料XI與脲或氨反應(yīng)，通常在高溫和高壓(對(duì)于氨)下反應(yīng)，以生成酰亞胺XII。在回流下將酰亞胺與醛XIII在乙酸和哌啶中反應(yīng)以形成中間體XIV。按照I.W.Elliott和Y.Takekoshi(J.Heterocyclic Chem.1976 13，597)描述的一般方法，將XIV與硼氫化鈉在甲醇或其它合適的溶劑中反應(yīng)，以生成中間體XV。用合適的鹵化劑例如POCl3、POBr3、PCl5、PBr5或亞硫酰氯處理XV，以生成鹵代中間體XVI，將其與式V親核試劑在回流的醇中反應(yīng)，以獲得式I-C本發(fā)明化合物。這樣的縮合還可以不使用溶劑在熔化狀態(tài)下進(jìn)行，并且可用酸例如HCl或堿例如三乙胺或1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。或者，試劑V與中間體XV的縮合可通過將這兩種組分與P2O5在熔化狀態(tài)下加熱來進(jìn)行，以生成本發(fā)明結(jié)構(gòu)I-C化合物。
當(dāng)X是胺連接基團(tuán)時(shí)，后一種方法特別有效。
方法C 制備原料的參考表
一般方法D其中R1、R2、R6、M、X、Y、G3和Z如上所定義，q是0或1的式I-D-1化合物可通過方法D中所示的反應(yīng)方案制得。因此，按照文獻(xiàn)中描述的方法(Minisci等人，Tetrahedron，1985，41，4157)，在過氧化氫和鐵鹽存在下，通過使用甲酰胺(XVII)，將吡啶取代的噠嗪或吡啶(I-D-1)官能化成式(I-D-2)取代的2-氨基羰基吡啶。當(dāng)R1和R2一起形成稠合芳雜環(huán)或稠合芳碳環(huán)時(shí)，該方法最佳。當(dāng)Z是CH，R1和R2不形成稠合芳環(huán)時(shí)，可形成其中Z是CCONHR6的異構(gòu)副產(chǎn)物，如果形成的話，通過色譜法將其從所需產(chǎn)物中分離出去。
方法D 一般方法E其中R1、R2、R6、M、X、Y、G3和Z如上所定義，q是0或1，且R3是低級(jí)烷基的式I-E-1和I-E-2化合物可通過方法E中所示的反應(yīng)方案制得。因此，按照文獻(xiàn)中描述的方法(Coppa，F(xiàn).等人，Tetrahedron Letters，1992，33(21)，3057)，在S2O8-2、酸和催化量的AgNO3存在下，通過使用草酸一烷基酯(XVIII)，將吡啶取代的噠嗪或吡啶(I-D-1)官能化成式(I-E-1)的取代的2-烷氧基羰基吡啶。然后通過用堿例如氫氧化鈉在甲醇/水中將酯水解來形成其中R3是H的式I-E-1化合物。其中R6獨(dú)立地如上所定義的式I-E-2化合物，尤其包括其中兩個(gè)R6都不是H的化合物，可通過在偶聯(lián)劑例如DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)存在下用胺XIX處理而由酸(I-E-1，R3＝H)方便地制得。當(dāng)R1和R2一起形成稠合芳雜環(huán)或稠合芳碳環(huán)時(shí)，該方法最佳。當(dāng)Z是CH，R1和R2不形成稠合芳環(huán)時(shí)，在第一步中可形成其中Z是CCO2R3的異構(gòu)副產(chǎn)物，如果形成的話，通過色譜法將其從所需產(chǎn)物中分離出去。
方法E 一般方F其中M、Q2和X如上所定義，m是1-5的整數(shù)，且R1和R2與它們所連接的碳一起形成稠合的5-元芳雜環(huán)的式I-F化合物可通過方法F中所示的反應(yīng)方案制得。將易于獲得的雜環(huán)基羧酸原料XX與丁基鋰反應(yīng)，然后與二甲基甲酰胺反應(yīng)，以生成結(jié)構(gòu)XXI醛。將XXI與肼反應(yīng)以生成噠嗪酮XXII。用合適的鹵化劑例如POCl3、POBr3PCl5、PBr5或亞硫酰氯處理XXII，以生成鹵代中間體，將其與式V親核試劑在回流的醇中反應(yīng)，以獲得式XXIII中間體化合物。這樣的縮合還可以不使用溶劑在熔化狀態(tài)下進(jìn)行，并且可用酸例如HCl或堿例如三乙胺或1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化?；蛘撸噭￢與中間體XXII的縮合可通過將這兩種組分與P2O5在熔化狀態(tài)下加熱來進(jìn)行，以生成XXII。當(dāng)X是胺連接基團(tuán)時(shí)，后一種方法特別有效。按照F.D.Popp，Heterocycles，1980，14，1033的一般方法，形成并用鹵化物XXIV將Reissert化合物XXIII烷基化，以生成結(jié)構(gòu)XXV中間體。然后用堿處理，以生成本發(fā)明化合物I-F。
方法F 一般方法G其中M、Q2和X如上所定義，m是1-4的整數(shù)，且R1和R2與它們所連接的碳一起形成稠合的5-元芳雜環(huán)的式I-G化合物可通過方法G中所示的反應(yīng)方案制得?？捎门饸浠c將得自方法F的醛XXI還原，以生成羥基酸，可用本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法例如使用甲苯磺酰氯將該羥基酸內(nèi)酯化，以生成內(nèi)酯XXVI。在堿例如甲醇鈉存在下，通常在溶劑例如甲醇中，在回流狀態(tài)下將中間體XXVI與醛XIII縮合，以生成結(jié)構(gòu)XXVII中間體。將XXVII與肼或優(yōu)選與肼水合物在100-150℃溫度下反應(yīng)，以生成結(jié)構(gòu)XXVIII中間體。按照方法C中描述的方法，使用XXVIII而不是XV將中間體XXVIII轉(zhuǎn)化成結(jié)構(gòu)I-G本發(fā)明化合物。
方法G
一般方法H其中R1、R2、M、X、R6、q和G3如上所定義的式I-H化合物可通過方法H中所示的反應(yīng)方案方便地制得。因此，使用在Martin，I；Anvelt，J.；Vares，L.；Kuehn，I.；Claesson，A.ActaChem.Scand.1995，49，230-232中描述的方法，或者上述方法D或E、但是用易于獲得的吡啶-4-甲酸酯XXX代替I-D-1來將XXX轉(zhuǎn)化成XXXI。然后按照上文中Martin等人描述的方法，用溫和的還原劑例如NaBH4將酯還原以使酰胺取代基保持不變，獲得醇XXXII。然后將該醇與堿例如DBU或CsCO4以及得自方法A的鹵代噠嗪VI在無水條件下加熱，以生成本發(fā)明式I-H化合物。
方法H
一般方法I其中R1、R2、M、X、R6、q和G3如上所定義，且W是一個(gè)鍵或-CH2-的式I-I化合物可通過方法I中所示的反應(yīng)方案方便地制得。當(dāng)q是1，且XXXIII是4-氯吡啶時(shí)，該方法尤其有用。或者，在該方法中可使用其它4-鹵代吡啶例如4-氟吡啶或4-溴吡啶。使用上述方法D或E的一般步驟，通過用4-鹵代吡啶代替I-D-1，將易于獲得的4-鹵代吡啶XXXIII轉(zhuǎn)化成式XXXIV中間體。將XXXIV與硫氫化鉀或硫氫化鈉反應(yīng)，以生成式XXXV硫醇?；蛘?，通過與甲磺酰氯和適當(dāng)?shù)膲A例如三乙胺在低溫條件下反應(yīng)(這樣可將聚合物形成降至最小)將得自方法H的中間體XXXII的醇官能團(tuán)轉(zhuǎn)化成離去基團(tuán)，并將所得中間體與硫氫化鉀或硫氫化鈉反應(yīng)，以生成式XXXVI硫醇。將式XXXY或式XXXVI硫醇與得自方法A的中間體VI和適當(dāng)?shù)膲A例如二異丙基乙基胺或CsCO4在DMF或其它適當(dāng)無水溶劑中或者不存在溶劑條件下反應(yīng)，以生成I-D-9。
方法I
一般方法J其中R1、R2、M、X、W、和G3如上所定義，并且結(jié)構(gòu)內(nèi)具有亞砜或砜的式I-J-1或I-J-2化合物可通過方法J中所示的反應(yīng)方案方便地制得。通過用一當(dāng)量間氯過苯甲酸在二氯甲烷或氯仿中處理(MCPBA，Synth.Commun.，26，10，1913-1920，1996)或通過用高碘酸鈉在甲醇/水中于0℃-室溫處理(J.Org.Chem.，58，25，6996-7000，1993)，將含有硫醚作為取代基G1、G3、或G4一部分或者作為如在得自方法I的代表性結(jié)構(gòu)I-I中所示的Y的一部分的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化成具有亞砜基團(tuán)的本發(fā)明化合物例如I-J-1。由各種N-氧化物和砜I-J-2組成的預(yù)計(jì)的副產(chǎn)物可通過色譜法除去。砜I-J-2是通過使用另外一當(dāng)量MCPBA或優(yōu)選使用高錳酸鉀在乙酸/水中(Eur.J.Med.Chem.Ther.，21，1，5-8，1986)或在乙酸中使用過氧化氫(Chem.Heterocycl.Compd.，15，1085-1088，1979)而獲得的。當(dāng)不需要的N-氧化物變成主要產(chǎn)物時(shí)，可通過在乙醇/乙酸中用披鈀炭催化劑氫化(Yakugaku Zasshi，69，545-548，1949，Chem.Abstr.1950，4474)將它們轉(zhuǎn)回成所需的亞砜或砜。
一般方法K其中R1、R2、M、X、和Q1如上所定義的本發(fā)明式I-K化合物可通過方法K中所示的反應(yīng)方案方便地制得。本領(lǐng)域技術(shù)人員可通過文獻(xiàn)中的已知方法制備結(jié)構(gòu)XXXVII原料。例如，其中R1和R2與它們所連接的碳一起形成2，3-取代的噻吩、呋喃、吡咯、環(huán)戊二烯、噁唑或噻唑的XXXVII可用在J.Org.Chem.，1981，46，211中描述的方法制得，并用三氟乙酸將最初形成的叔丁酯水解。吡唑原料可通過將2-氧代-3-戊炔-1，5-二酸(J.Chem.Phys.1974，60，1597)與重氮甲烷反應(yīng)而制得。其中R1和R2與它們所連接的碳一起形成苯基的原料可通過Cymerman-Craig等人，Aust.J.Chem.1956，9，222，225的方法制得。其中R1和R2是低級(jí)烷基的式XXXVII化合物可按照在專利CH 482415(Chem.Abstr.120261u，1970)中描述的方法方便地制得。然后用肼處理式XXXVII二酸粗產(chǎn)物，以生成噠嗪酮XXXVIII(關(guān)于具體反應(yīng)條件參見Vaughn，W.R.；Ba ird，S.L.J.Am.Chem.Soc.1946 68 1314)。用鹵化劑例如三氯氧化磷處理噠嗪酮XXXVIII，獲得了二氯中間體，通過水性處理將其水解，獲得了氯噠嗪XXXIX。在堿例如氫化鈉存在下在溶劑例如DMF中或者不存在溶劑下用式V親核試劑處理含氯酸XXXIX。按照Tilley，J.W.；Coffen D.L.Schaer，B.H.；Lind，J.J.Org.Chem.1987 52 2469的方法，用還原劑例如BH3·THF將所得酸XXXX還原。將產(chǎn)物醇XXXXI與堿和任選取代的4-鹵代吡啶基、任選取代的4-鹵代嘧啶基或任選取代的4-鹵代噠嗪基(XXXXII)反應(yīng)，以獲得本發(fā)明式I-K化合物(關(guān)于具體反應(yīng)條件參見Barlow，J.J；Block，M.H；Hudson，J.A.；Leach，A.；Longridge，J.L.；Main，B.g.；Nicholson，S.J.Org.Chem.1992 57 5158)。
方法K
一般方法L其中R1、R2、M、X、和Q1如上所定義的本發(fā)明式I-L化合物可通過方法L中所示的反應(yīng)方案方便地制得。在合適的堿存在下將得自方法K的式XXXXI醇與甲磺酰氯反應(yīng)，然后與硫氫化鉀或硫氫化鈉反應(yīng)，以生成硫醇XXXXIII。然后將該硫醇與得自方法K的4-鹵代吡啶XXXXII在合適的堿例如三乙胺存在下反應(yīng)，以生成本發(fā)明化合物I-K?；蛘撸ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法將XXXXI轉(zhuǎn)化成式XXXXIV鹵代中間體，并將該鹵化物與硫醇XXXXV反應(yīng)以生成I-K。還可以通過用KHS或NaHS處理將中間體XXXXIV轉(zhuǎn)化成中間體XXXXIII。試劑XXXXV可商購獲得例如4-巰基吡啶，或者可由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過上述方法I制得。
方法L
具體實(shí)施方式
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1制備1-(4-氯苯基氨基)-4-(4-吡啶基硫基)異喹啉 步驟1制備中間體A將2.90g，19.07mMol異喹諾酮和14.40g，33.68mMol五溴化磷在140℃熔化在一起。該熔化物轉(zhuǎn)化成紅色液體，并且約10分鐘后該反應(yīng)混合物固化，并將其冷卻。將該反應(yīng)混合物壓碎，并傾倒入冰水中。將所得固體過濾并風(fēng)干。wt.5.50g，產(chǎn)率為96％，mp.＝94-96℃。Rf＝0.66，在40％乙酸乙酯在己烷中的混合物中。
步驟2將1.00g，3.49mMol得自步驟1的1，4-二溴異喹啉(中間體A)和4-氯苯胺的混合物在140℃熔化在一起。該反應(yīng)混合物變成深紅色液體，并且約10分鐘后固化，并將其冷卻。將該反應(yīng)混合物壓碎，并用50/50甲醇/THF混合物研制，然后過濾并風(fēng)干，不用進(jìn)一步純化。wt.0.75g，64.4％，mp.＝260-263℃。Rf＝0.58，在40％乙酸乙酯在己烷中的混合物中。
步驟3將0.05g，0.1498mMol 1-(4-氯苯胺)-4-溴異喹啉和0.02g，0.18mMol 4-巰基吡啶混合，并在140℃熔化約10分鐘。將所得反應(yīng)混合物在1000微米制備板上純化，使用5％甲醇在己烷中的混合物作為溶劑。wt.0.0103g，產(chǎn)率為19％，mp.＝192-195℃。Rf＝0.50，在40％乙酸乙酯在己烷中的混合物中。
實(shí)施例2制備1-(二氫茚-5-基氨基)-4-(4-吡啶基硫基)異喹啉 使用制備實(shí)施例1所用的方法，在步驟2中用5-氨基二氫茚代替4-氯苯胺來制備本標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)100-103℃，TLC Rf0.40(40％乙酸乙酯在己烷中的混合物)。
實(shí)施例3制備1-(苯并噻唑-6-基氨基)-4-(4-吡啶基硫基)異喹啉
使用制備實(shí)施例1所用的方法，在步驟2中用6-氨基苯并噻唑代替4-氯苯胺來制備本標(biāo)題化合物。
TLC Rf0.36(5％甲醇/二氯甲烷)；MS＝387實(shí)施例4制備1-(4-氯苯基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)異喹啉 步驟1將高鄰苯二甲酰亞胺(770mg，4.78mmol)、4-吡啶甲醛(0.469mL，4.78mmol)和哌啶(0.5mL)在乙酸(25mL)中的混合物加熱回流1小時(shí)。將所得溶液冷卻至室溫。通過過濾除去固體產(chǎn)物，用水(4×10mL)洗滌，并真空干燥，獲得了920mg(3.67mmol，產(chǎn)率為77％)上述化合物的Z和E異構(gòu)體的混合物。1H-NMR(DMSO-d6)由于既存在E異構(gòu)體，也存在Z異構(gòu)體，在芳族區(qū)域中顯示了復(fù)雜的質(zhì)子信號(hào)。MS ES 251(M+H)+，252(M+2H)+。
步驟2在0℃，向原料(1.70g，6.8mmol)在甲醇(250mL)內(nèi)的懸浮液中緩慢地加入硼氫化鈉(3.0g，79mmol)。將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，并繼續(xù)攪拌1小時(shí)。用水(10mL)中止該反應(yīng)，并攪拌10分鐘。將所得混合物濃縮以除去溶劑。向殘余物中加入冰水(100mL)，并用2N鹽酸調(diào)節(jié)至pH＝2。攪拌10分鐘，加入2N NaOH直至溶液的pH約為11。用二氯甲烷(4×100mL)萃取所得溶液。收集合并的有機(jī)層，用硫酸鎂干燥并濃縮。通過柱色譜(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)純化殘余物，獲得了400mg本標(biāo)題化合物，為固體(1.70mmol，產(chǎn)率為25％)。
1H-NMR(MeOH-d4)8.33 to 8.39(m，4H)，7.50-7.68(m，3H)，7.30-7.31(m，2H)，7.14(s，1H)，4.15(s，2H)；MS ES 237(M+H)+，238(M+2H)；TLC(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)Rf＝0.40。
步驟3將4-氯苯胺(178mg，1.40mmol)、五氧化二磷(396mg，1.40mmol)和三乙胺鹽酸鹽(193mg，1.40mmol)在氬氣氛下于200℃加熱攪拌1.5小時(shí)或者直至形成均勻的熔化物。向該熔化物中加入原料(82mg，0.35mmol)。將該反應(yīng)混合物在200℃攪拌2小時(shí)。將所得固體黑色物質(zhì)冷卻至100℃。加入甲醇(5mL)和水(10mL)，并將該反應(yīng)混合物超聲處理直至黑色物質(zhì)溶解。加入二氯甲烷(40mL)，并加入濃氨水(～2mL)以將該混合物調(diào)節(jié)至pH＝10。分離出有機(jī)層，用二氯甲烷(3×20mL)萃取水層。用硫酸鎂將合并的有機(jī)層干燥，過濾，并濃縮。通過制備TLC板(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)純化，獲得了26mg(0.08mmol，產(chǎn)率為22％)本標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H-NMR(MeOH-d4)8.37(d，J＝7.8Hz，3H)，7.86(s，1H)，7.55-7.77(m，5H)，7.27-7.33(m，4H)，4.31(s，2H)；MS ES 346(M+H)+；TLC(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)Rf＝0.45。
實(shí)施例5制備1-(苯并噻唑-6-基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)異喹啉
使用實(shí)施例4制備所用的方法，在步驟3中用6-氨基苯并噻唑代替4-氯苯胺來制備本標(biāo)題化合物。
1H-NMR(MeOH-d4)9.08(s，1H)，8.37-8.59(m，4H)，7.79-8.01(m，2H)，7.60-7.78(m，4H)，7.30(d，2H)，4.34(s，2H)；MS ES 369(M+H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.20。
實(shí)施例6制備1-(二氫茚-5-基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)異喹啉 使用實(shí)施例4制備所用的方法，在步驟3中用5-氨基二氫茚代替4-氯苯胺來制備本標(biāo)題化合物。
1H-NMR(MeOH-d4)8.35(m，3H)，7.46-7.77(m，5H)，7.15-7.27(m，4H)，4.26(s，2H)，2.87-2.90(m，4H)，2.05-2.10(m，2H)；MS ES 352(M+H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.25。
實(shí)施例7制備1-(3-氟-4-甲基苯基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)異喹啉
使用實(shí)施例4制備所用的方法，在步驟3中用3-氟-4-甲基苯胺代替4-氯苯胺來制備本標(biāo)題化合物。
1H-NMR(MeOH-d4)8.34(d，3H)，7.87(s，1H)，7.54-7.69(m，4H)，7.10-7.31(m，4H)，2.22(s，3H)；MS ES 344(M+2H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.20。
實(shí)施例8制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(4-吡啶基甲氧基)噻吩并[2，3-d]噠嗪 步驟1給干燥的2L三頸園底燒瓶裝配上機(jī)械攪拌器和加液漏斗。在氬氣氛下向該燒瓶中加入在無水THF(500mL)中的2-噻吩甲酸(25g，195mmol)。用干冰-異丙醇浴將該混合物冷卻至-78℃，并攪拌30分鐘。用30分鐘滴加正丁基鋰的己烷溶液(2.5M，1.72mL)。在攪拌下將該反應(yīng)在-78℃保持1小時(shí)，然后置于干燥二氧化碳?xì)夥障?。隨著二氧化碳的加入，該反應(yīng)物變稠。將該反應(yīng)在-78℃保持1小時(shí)，然后溫?zé)嶂?10℃。用2N HCl(213mL)中止該反應(yīng)，并讓其達(dá)到室溫。分離各層，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取水層。將有機(jī)層合并，干燥(硫酸鈉)并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。將該棕色固體從熱的異丙醇中結(jié)晶，并真空干燥過夜。獲得了所需的噻吩-2，3-二甲酸(27.3g，159mmol；產(chǎn)率為82％)；1H NMR(DMSO-d6)7.69(d，J＝1.5，1)，7.38(d，J＝4.8，1)；ES MS(M+H)+＝173；TLC(氯仿-MeOH-水，6∶4∶1)；Rf＝0.74。
步驟1A或者，在步驟1中使用3-噻吩甲酸而不是2-噻吩甲酸，獲得了相同產(chǎn)物。
步驟2給1L園底燒瓶裝配上攪拌棒和回流冷凝器。向燒瓶中加入在含有催化量硫酸(～5mL)的甲醇(500mL)中的步驟1產(chǎn)物(62g，360mmol)。將該反應(yīng)加熱至回流，并攪拌24小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至室溫，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。通過硅膠色譜(己烷-乙酸乙酯80∶20-60∶40梯度)純化該棕色混合物。獲得了所需的噻吩-2，3-二甲酸二甲酯(21.2g，106mmol；產(chǎn)率為31％)；1H NMR(DMSO-d6)7.93(d，J＝4.8，1)，7.35(d，J＝4.8，1)，3.8(d，J＝1，6)；ES MS(M+H)+＝201；TLC(己烷-乙酸乙酯，70∶30)；Rf＝0.48。
步驟3給250mL園底燒瓶裝配上攪拌棒和回流冷凝器。向該燒瓶中加入步驟2產(chǎn)物(16g，80mmol)、肼水合物(6.6mL，213mmol)、和乙醇(77mL)，并回流2.5小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至室溫，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。加入水(50mL)，并將濾液與不溶固體分離開。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將水層濃縮，獲得了淺黃色固體。將該固體在真空烘箱中于50℃干燥過夜。獲得了所需的噻吩并[2，3-d]噠嗪-4，7-二酮(12g，71mmol；產(chǎn)率為89％)；1H NMR(DMSO-d6)7.85(d，J＝5.1，1)，7.42(d，J＝5.1，1)；ES MS(M+H)+＝169；TLC(二氯甲烷-甲醇，60∶40)；Rf＝0.58。
步驟4制備中間體B給250mL園底燒瓶裝配上攪拌棒和回流冷凝器。向該燒瓶中加入步驟3產(chǎn)物(2.5g，14.8mmol)、三氯氧化磷(45mL，481mmol)、和吡啶(4.57mL，55mmol)，并回流2.5小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至室溫，并倒入冰上。將該混合物分離，并用氯仿(4×75mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(硫酸鈉)，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，獲得了深黃色固體。所需的4，7-二氯噻吩并[2，3-d]噠嗪(中間體B；1.5g，7.3mmol；產(chǎn)率為49％)；熔點(diǎn)＝260-263℃；1H NMR(DMSO-d6)8.55(d，J＝5.7，1)，7.80(d，J＝5.7，1)；ES MS(M+H)+＝206；TLC(己烷-乙酸乙酯，70∶30)；Rr＝0.56。還參見Robba，M.；Bull.Soc.Chim.Fr.；1967，4220-4235。
步驟5給250mL園底燒瓶裝配上攪拌棒和回流冷凝器。向該燒瓶中加入步驟4產(chǎn)物(7.65g，37.3mmol)、在乙醇(75mL)中的4-氯苯胺(4.76g，37.3mmol)。將該混合物回流3小時(shí)。3小時(shí)后橙色固體從反應(yīng)中沉淀出來。將該反應(yīng)冷卻至室溫，通過過濾收集固體，并用己烷洗滌。獲得了所需的7-氯-4-(4-氯苯基氨基)噻吩并[2，3-d]噠嗪(6.5g，21.9mmol；產(chǎn)率為60％)；熔點(diǎn)＝139-142℃；ES MS(M+H)+＝297；TLC(己烷-乙酸乙酯，60∶40)；Rf＝0.48。
步驟6給150mL園底燒瓶裝配上攪拌棒和回流冷凝器。向該燒瓶中加入步驟5產(chǎn)物(0.33g，1.1mmol)、在DBU(2.5mL，16.7mmol)中的4-吡啶基甲醇(1.2g，11.2mmol)，并將該混合物在125℃加熱24小時(shí)。將乙酸乙酯(10mL)加到仍然熱的該反應(yīng)中，然后將該反應(yīng)倒入水(10mL)中。分離各層，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取水層。合并有機(jī)相，干燥(硫酸鎂)，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。通過硅膠色譜(二氯甲烷-甲醇-丙酮，90∶5∶5)純化所得混合物，獲得了淺黃色固體。獲得了所需的本標(biāo)題化合物(0.03g，0.08mmol；產(chǎn)率為7.3％)；熔點(diǎn)＝203-205℃(分解)；ES MS(M+H)+＝369；TLC(二氯甲烷-甲醇-丙酮，95∶2.5∶2.5)；Rf＝0.56。
實(shí)施例9制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪 步驟1向裝配有加液漏斗、氬氣入口、和機(jī)械攪拌器的干燥的3L三頸燒瓶中加入正丁基鋰(2.5M己烷溶液，196mL，491mmol)。用無水THF(500mL)將該混合物稀釋，并冷卻至-78℃。滴加3-呋喃甲酸(25g，223mmol)在THF(500mL)中的溶液。將該混合物攪拌1.5小時(shí)，向該反應(yīng)混合物中通入1小時(shí)的無水二氧化碳。逐漸溫?zé)嶂?10℃后，用鹽酸(2N，446mL)處理所得濃稠的白色漿狀液。分離兩層，用乙酸乙酯(3×300mL)萃取水層。將合并的有機(jī)層干燥(硫酸鈉)，過濾，并濃縮，獲得了呋喃-2，3-二甲酸粗產(chǎn)物，為橙色固體(44g)，不用進(jìn)一步純化直接使用。
1H NMR(300MHz，d6-丙酮)δ7.06(d，J＝1.7，1)，7.97(d，J＝1.7，1)，10.7(bs，2H)；TLC(CHCl3/MeOH/H2O 6∶4∶1)Rf＝0.56.
步驟2給干燥的500mL園底燒瓶裝配上攪拌棒和氬氣入口。向該燒瓶中加入溶解在甲醇(250mL)中的在步驟1中制備的二酸粗產(chǎn)物(44g)。向該反應(yīng)混合物中分批加入氯三甲基硅烷(80mL，630mmol)。在室溫?cái)嚢?5.5小時(shí)后，將該溶液濃縮至油狀物，并加入二氧化硅(5g)。將該混合物懸浮在甲醇(100mL)中，除去揮發(fā)性物質(zhì)。將懸浮在甲醇(100mL)中并除去揮發(fā)性物質(zhì)的操作再重復(fù)2次。將殘余物直接施加到快速色譜柱的頂部，用己烷/乙酸乙酯60∶40洗脫，獲得了呋喃-2，3-二甲酸二甲酯，為橙色油狀物(38g，對(duì)于聯(lián)合起來的步驟1和步驟2，產(chǎn)率為93％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.81(s，3)，3.86(s，3)，6.71(d，J＝2.8，1)，7.46(d，J＝2.8，1)；TLC(己烷/EtOAc 60∶40)Rf＝0.46.
步驟3向裝配有氬氣入口、回流冷凝器、和攪拌棒的500mL園底燒瓶中加入溶解在乙醇(250mL)中的呋喃-2，3-二甲酸二甲酯(44g，236mmol)。向該溶液中加入肼水合物(55％N2H4，40mL，3.0mmol)，并將該反應(yīng)混合物加熱至回流。經(jīng)過5.5小時(shí)緩慢地沉淀出了黃色固體，將該混合物冷卻至室溫。減壓除去揮發(fā)性物質(zhì)，獲得了黃色糊狀物，將其懸浮在水中并過濾。用水洗滌該黃色固體，并轉(zhuǎn)移到裝配有氬氣入口、回流冷凝器、和攪拌棒的500mL園底燒瓶中。將該固體懸浮在鹽酸(2N，200mL)中，并將該混合物加熱至回流。加熱4小時(shí)后，將該橙色漿狀液冷卻至室溫并過濾。用水將該固體充分洗滌，真空干燥，獲得了4，7-二氧代[2，3-d]呋喃并噠嗪，為橙色固體(21.5g，60％)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.00(d，J＝2.1，1)，8.19(d，J＝2.1，1H)，11.7(bs，2H).
步驟4制備中間體C給1L園底燒瓶裝配上回流冷凝器、攪拌棒、和氬氣入口。將步驟3的呋喃(15.5g，102mmol)加到三氯氧化磷(300mL)和吡啶(30mL)的混合物中，并將所得橙色懸浮液加熱至回流。將該反應(yīng)混合物加熱4小時(shí)后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)性物質(zhì)。將殘余物倒入冰上，用氯仿(4×250mL)萃取含水混合物。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，并濃縮，獲得了4，7-二氯[2，3-d]呋喃并噠嗪(中間體C，11.3g，59％)，為橙紅色固體，不用進(jìn)一步純化直接使用。TLC(己烷/乙酸乙酯)Rf＝0.352；1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.40(d，J＝2.0，1)，8.63(d，J＝2.0，1).
步驟5向裝配有攪拌棒、氬氣入口、和回流冷凝器的100mL園底燒瓶中加入溶解在乙醇(40mL)中的步驟4產(chǎn)物(1.50g，7.98mmol)。向該混合物中加入氯苯胺(1.02g，7.98mmol)，并將所得懸浮液加熱至回流。加熱4小時(shí)后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將該混合物濃縮。將橙色固體粗產(chǎn)物施加到快速柱的頂端，用二氯甲烷/甲醇97∶3洗脫，獲得了4-氯-7-[N-(4-氯苯基)氨基][2，3-d]呋喃并噠嗪和7-氯-4-[N-(4-氯苯基)氨基][2，3-d]呋喃并噠嗪的混合物，為黃色粉末(1.2g，55％)。
TLC(CH2Cl2/MeOH 97∶3)；Rf＝0.7；1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ主要異構(gòu)體(A)7.40(d，J＝8.9，2)，7.45(d，J＝2.0，1)，7.87(d，J＝9.2，2)，8.34(d，J＝2.0，1)9.62(s，1)；次要異構(gòu)體(B)7.28(d，J＝2.0，1)，7.40(d，J＝8.9，2)，7.87(d，J＝9.2，2)，8.48(d，J＝2.1，1)，9.88(s，1).
步驟6給25mL園底燒瓶裝配上氬氣入口、攪拌棒、和回流冷凝器。將步驟5產(chǎn)物(400mg，1.4mmol)與4-吡啶基甲醇(782mg，7.17mmol)以及1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(2.5mL，16.7mmol)混合，并將該漿狀液加熱至125℃。攪拌24小時(shí)后，將該反應(yīng)冷卻，直接施加到快速柱的頂端，并用二氯甲烷/甲醇95∶5洗脫。在相同條件下通過色譜法再純化所得黃色油狀物，獲得了作為三組分混合物一部分的本標(biāo)題化合物。HPLC分離(C18柱，CH3CN/H2O 10∶90-100∶0梯度)，獲得了本標(biāo)題化合物，為灰白色固體(13.7mg，3％)。
TLC(CH2Cl2/MeOH 95∶5)＝0.19；MP 198℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.60(s，2)，6.6(d，J＝2.1，1)，7.18-7.20(m，2)，7.35-7.43(m，6)，7.66(d，J＝2.1，1)8.54(d，J＝5.6，2).
步驟5A和6A或者，按照步驟5的方法，但是用二溴中間體代替二氯中間體，即使用4，7-二溴[2，3-d]呋喃并噠嗪(下文中的中間體G)來制備本標(biāo)題化合物。通過在CsCO4而不是1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯存在下將兩種組分熔化來進(jìn)行步驟6A。如上所述純化粗產(chǎn)物。
中間體D-G制備其它二環(huán)4，5-稠合-3，6-二鹵代噠嗪
采用實(shí)施例9、步驟2-4的一般方法，用適當(dāng)?shù)碾s環(huán)二羧酸代替呋喃-2，3-二甲酸以制得如下表所示的取代的二氯噠嗪D-G。使用實(shí)施例9步驟2-3的方法制備二溴呋喃并噠嗪G，然后如下所述進(jìn)行步驟4’向0.50g(3.287mmol)步驟3產(chǎn)物中加入2.83g(6.57mmol)五溴化磷。將該混合物加熱至125℃。在約115℃該反應(yīng)混合物熔化，然后在到達(dá)125℃之前再次固化。將該反應(yīng)混合物冷卻，將固體殘余物壓碎，傾倒入冰水中。然后過濾出所得固體并真空干燥。wt.＝0.75g(產(chǎn)率為82％)。如給定的參考文獻(xiàn)所示，在幾種情況下二氯噠嗪是已知物質(zhì)。所有這些二鹵代雜環(huán)都可用于制備本發(fā)明化合物。
中間體H制備(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基)甲醇
步驟1用冰浴將異煙酸乙酯(250mL，1.64mol)和濃硫酸(92mL，1.64mol)在N-甲基甲酰胺(2.0L)中的攪拌溶液冷卻至6℃。加入硫酸鐵(II)七水合物(22.8g，0.0812mol，用研缽和研棒研磨過的)，然后滴加30％過氧化氫水溶液(56mL，0.492mol)。將加入硫酸鐵(II)和過氧化氫的操作再重復(fù)4次，同時(shí)將反應(yīng)溫度保持在22℃以下。將該反應(yīng)混合物攪拌30分鐘后，加入檸檬酸鈉溶液(2L，1M)(所得混合物的pH約為5)。用二氯甲烷(1L，2×500mL)萃取該混合物。將合并的有機(jī)萃取液用水(2×500mL)、5％碳酸氫鈉水溶液(3×100mL)、和鹽水(500mL)洗滌。然后用硫酸鈉將所得有機(jī)溶液干燥，過濾并真空濃縮，獲得了固體。用己烷研制固體粗產(chǎn)物，過濾，并用己烷洗滌，并真空干燥，獲得了270.35g(79.2％)粉黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.9(d，1H)，8.3(m，1H)，8.0(dd，1H)，4.4(q，2H)，2.8(d，3H)，1.3(t，3H).
步驟2向機(jī)械攪拌的步驟1產(chǎn)物(51.60g，0.248mol)在乙醇(1.3L)內(nèi)的漿狀液中加入硼氫化鈉(18.7g，0.495mol)。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。用飽和氯化氫銨水溶液(2L)小心地驟冷所得水溶液。驟冷期間，觀察到了氣體放出。用濃的氫氧化銨溶液(200ml)將所得混合物堿化至pH＝9。然后用乙酸乙酯(8×400mL)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(硫酸鎂)，過濾，并真空濃縮，獲得了中間體H，為澄清的淺黃色油狀物(36.6g，產(chǎn)率為89％)。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.74(q，1H)，8.53(dd，1H)，7.99(m，1H)，7.48(m，1H)，5.53(t，1H)，4.60(d，2H)，2.81(d，3H)；MS m/z 167[M+H]+.
中間體I-N制備[2-(N-取代的)氨基羰基-4-吡啶基]甲醇中間體的一般方法 在0℃向胺2(3當(dāng)量)在苯中的溶液中加入三甲基鋁(3當(dāng)量)。觀察到釋放出氣體，然后溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時(shí)(Lipton，M.F.等人，Org.Synth.Coll.Vol.6，1988，492或Levin，J.I.等人，Synth.Comm.，1982，12，989)。將已知的甲醇1(1當(dāng)量，Hadri，A.E.；Leclerc，G.Heterocyclic Chem，1993，30，631)加到鋁試劑中，并將該混合物加熱回流1小時(shí)。用水中止該反應(yīng)，并濃縮。一般通過硅膠柱色譜(20/1乙酸乙酯/甲醇)純化粗產(chǎn)物，以獲得本標(biāo)題化合物3。一般通過LC/MS和NMR光譜法證實(shí)終產(chǎn)物。
*使用二氯甲烷而不是苯作為溶劑。
實(shí)施例10制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)噻吩并[2，3-d]噠嗪 給25mL三頸園底燒瓶裝配上攪拌棒和溫度計(jì)。向燒瓶中加入實(shí)施例8產(chǎn)物(0.475g，1.29mmol)、硫酸鐵七水合物(0.179g，0.64mmol)、甲酰胺(11.15mL，281mmol)和濃硫酸(0.14mL)。將該混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后向該混合物中滴加H2O2(0.2mL，6.44mmol)。將該反應(yīng)在室溫再攪拌1小時(shí)，然后用30分鐘加熱至55℃。將該反應(yīng)在該溫度下保持3小時(shí)，然后冷卻至室溫。將檸檬酸鈉水溶液(0.27M，1mL)加到該反應(yīng)中，然后分離各層，用乙酸乙酯(4×5mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(硫酸鎂)，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。將所得固體置于熱的丙酮中，并通過過濾與任何剩余固體分離開。然后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將濾液濃縮，并將所得殘余物置于熱的甲醇中，并通過過濾收集白色固體。所需化合物(0.14g，0.034mmol；產(chǎn)率為2.7％)；熔點(diǎn)＝233℃；ES MS(M+H)+＝412；TLC(二氯甲烷-甲醇-丙酮，95∶2.5∶2.5)；Rf＝0.20。
實(shí)施例11制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)噻吩并[2，3-d]噠嗪
使用制備實(shí)施例10所用的方法，用甲基甲酰胺代替甲酰胺，來制備本標(biāo)題化合物1H NMR(DMSO-d6)8.80(d，1)，8.62(d，1)，8.31(d，1)，8.09(d，2)，7.86(d，2)，7.65(d，1)，7.35(d，2)，5.74(s，2)，2.84(d，3)；ES MS(M+H)+＝426(ES)；Rf(95/2.5/2.5DCM/MeOH/丙酮)＝0.469.
實(shí)施例12制備1-(4-氯苯基氨基)-4-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲基)異喹啉 使用制備實(shí)施例10所用的方法，用實(shí)施例4產(chǎn)物代替實(shí)施例8產(chǎn)物，來制備本標(biāo)題化合物。通過制備性TLC板(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯，產(chǎn)率為19％)純化粗產(chǎn)物，獲得了本標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H-NMR(MeOH-d4)8.42(d，1H)，8.34(d，1H)，7.94(s，1H)，7.88(s，1H)，7.55 to7.76(m，5H)，7.26 to 7.36(m，3H)，4.34(s，2H)；MS ES 389(M+H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.44。
實(shí)施例13制備1-(4-氯苯基氨基)-4-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲基)異喹啉
使用制備實(shí)施例11所用的方法，用實(shí)施例4產(chǎn)物代替實(shí)施例8產(chǎn)物，來制備本標(biāo)題化合物。通過柱色譜(2∶3v/v己烷-乙酸乙酯，產(chǎn)率為20％)純化粗產(chǎn)物，獲得了本標(biāo)題化合物，為黃色固體。
1H-NMR(MeOH-d4)8.42(d，1H)，8.33(d，1H)，7.88(d，2H)，7.55 to 7.77(m，5H)，7.28 to 7.36(m，3H)，4.34(s，2H)，2.89(s，3H)；MS ES 403(M+H)+；TLC(2∶3v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.30。
實(shí)施例14和15制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪和4-(4-氯苯基氨基)-2-甲基氨基羰基-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪 在室溫，向?qū)嵤├?終產(chǎn)物(19.20g，54.4mmol)在N-甲基甲酰胺(200mL)和蒸餾水(20mL)內(nèi)的懸浮液中滴加濃硫酸(2.9mL，54.4mmol)。將該混合物攪拌直至其變成澄清溶液。向該溶液中一次性加入FeSO4.7H2O(1.51g，5.43mmol)，然后加入羥基胺-O-磺酸(HOSA，1.84g，16.3mmol)。以10分鐘的時(shí)間間隔將加入FeSO4.7H2O和HOSA的操作重復(fù)11次。HPLC分析表明大多數(shù)原料已消耗完。用冰浴將該反應(yīng)混合物冷卻。在劇烈攪拌下加入檸檬酸鈉溶液(600mL，1M，600mmol)。將所得懸浮液再劇烈攪拌10分鐘。通過過濾收集固體，用水洗滌(3×100mL)，并在50℃真空干燥16小時(shí)。通過經(jīng)由硅膠墊過濾純化粗產(chǎn)物(21g)，周5％甲醇/二氯甲烷洗脫。將所得3.7g產(chǎn)物在CH3CN中重結(jié)晶(125mL，煮沸1.5小時(shí))。通過過濾收集固體，用CH3CN(2×15mL)洗滌，并在50℃真空干燥16小時(shí)。終產(chǎn)物(4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪)是淺黃色固體(3.38g，15.2％)。熔點(diǎn)＝223-224℃。
通過上述硅膠墊過濾來分離主要副產(chǎn)物。通過1H NMR、2D NMR、元素分析、和MS來確定副產(chǎn)物4-(4-氯苯基氨基)-2-甲基氨基羰基-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪的結(jié)構(gòu)。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ9.32(brs，1H)，8.93(q，1H)，8.79(q，1H)，8.63(dd，1H)，8.12(m，1H)，7.91(m，3H)，7.70(dd，1H)，7.35(m，2H)，5.76(br s，2H)，2.81(d，6H).MS m/z 467[M+H]+.
實(shí)施例14A制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪-方法2 在室溫，向得自實(shí)施例9步驟5的中間體(10.0g，35.7mmol)、中間體H(12.4g，74.6mmol)、和18-冠-6(0.42g，1.59mmol)在甲苯(100mL)內(nèi)的混合物中一次性加入KOH粉末(4.4g，85％，66.7mmol)。在劇烈攪拌下將該反應(yīng)混合物加熱至85±2℃。將該反應(yīng)混合物在該溫度下劇烈攪拌過夜。然后將其冷卻至室溫，傾出甲苯溶液，向樹膠狀殘余物中加入水(100mL)。將所得混合物劇烈攪拌直至起變成自由流動(dòng)的懸浮液。通過過濾收集固體，用水洗滌(2×10mL)，并在45℃真空干燥16小時(shí)。將該黃色/棕色固體懸浮在乙腈(70mL)中，并將該懸浮液在回流狀態(tài)下攪拌2小時(shí)。將其冷卻至室溫后，通過過濾收集固體，用少量乙腈洗滌，并在45℃真空干燥過夜。以46％的產(chǎn)率分離出了產(chǎn)物(6.73g)，為淺黃色固體。
實(shí)施例16制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪 使用制備實(shí)施例14所用的方法，但是用甲酰胺代替N-甲基甲酰胺制備本標(biāo)題化合物。該反應(yīng)是用500mg實(shí)施例9終產(chǎn)物和按比例量的溶劑和試劑進(jìn)行的。在75×30mm C18柱上通過HPLC純化粗產(chǎn)物，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以10ml/分鐘的速度線性梯度洗脫10分鐘，獲得了18mg本標(biāo)題化合物，為黃色固體HPLC(50×4.6mm YMC CombiScreen_C18柱，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以3ml/分鐘的速度線性梯度洗脫5分鐘，在254nm進(jìn)行UV檢測(cè))2.35分鐘，峰；MS ES 396(M+H)+。
實(shí)施例17制備4-(4-氯苯基氨基)-7-(苯并噻唑-6-基氨基)噻吩并[2，3-d]噠嗪
向得自實(shí)施例8步驟4的二氯化物(1.00g，4.90mmol)中加入對(duì)氯苯胺(622mg，4.90mmol)和無水乙醇(10.0mL)。將該混合物在95℃回流2小時(shí)，然后冷卻至室溫。過濾所形成的黃色沉淀(2)，依次用異丙醇、4.0N KOH、H2O、和己烷洗滌。然后將濾液(2)與6-氨基苯并噻唑(883mg，5.88mmol)在10mL正丁醇中混合，并在150℃加熱過夜。將該反應(yīng)冷卻至室溫，然后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物用4.0N KOH溶液處理，用二氯甲烷(50mL)萃取，干燥(硫酸鎂)，并將溶劑蒸發(fā)。通過快速硅膠色譜純化粗產(chǎn)物，使用95％二氯甲烷/甲醇作為洗脫劑。通過LC/MS和NMR證實(shí)純的本標(biāo)題化合物的結(jié)構(gòu)TLC(30％乙酸乙酯/己烷)Rf(3)＝0.20；1H NMR(DMSO)δ7.2(dd，3H)，7.38(dd，3H)，7.65(d，1H)，8.0(d，1H)，8.45(d，1H)，8.8(s，1H)；LC/MS m/z 41.0rt＝4.21min.
實(shí)施例18制備4-(二氫茚-5-基氨基)-7-(苯并噻唑-6-基氨基)噻吩并[2，3-d]噠嗪 使用制備實(shí)施例17所用的方法，用5-氨基二氫茚代替4-氯苯胺來制備本標(biāo)題化合物。通過快速硅膠柱色譜純化粗產(chǎn)物，用30％乙酸乙酯/己烷洗脫。通過LC/MS和NMR證實(shí)純的本標(biāo)題化合物的結(jié)構(gòu)TLC(30％乙酸乙酯/己烷)Rf(3)＝0.20；(3)1H NMR(DMSO)δ2.0(m，2H)，2.85(m，4H)，7.18(d，1H)，7.8(d，1H)，7.95(d，1H)，8.10(d，1H)，8.18(d，1H)，8.7(d，2H)，9.1(d，2H)，LC/MS m/z 414rt＝4.43min.
實(shí)施例19制備4-(5-溴二氫吲哚-1-基)-7-(4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪
將得自實(shí)施例9步驟4的4，7-二氯[2，3-d]呋喃并噠嗪(95mg，0.50mmol)和5-溴二氫吲哚(100mg，0.50mmol)在60mL無水乙醇中于95℃回流2小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過濾出所形成的沉淀，用異丙醇、4.0N KOH、水、和己烷洗滌，然后干燥。該中間體的純度約為95％(rt＝4.72，(M+H)+350)，不用進(jìn)一步純化直接用于下一步驟中。將4-吡啶基甲醇(28mg，0.26mmol)和氫化鈉(60％，50mg，1.25mmol)在20mL無水四氫呋喃中于0℃、氬氣氛下攪拌20分鐘，然后加入44mg上述中間體(0.13mmol)。將該反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)，將溫度升至室溫。將該混合物再攪拌12小時(shí)，并將溶劑減壓蒸發(fā)。將所獲得的固體溶解在50mL二氯甲烷中，并用碳酸鉀溶液和水洗滌。分離出有機(jī)層，干燥(硫酸鎂)，并減壓蒸發(fā)。通過硅膠制備性TLC(Rf＝0.3)純化粗產(chǎn)物，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脫。通過LC/MS和NMR證實(shí)純的本標(biāo)題化合物的結(jié)構(gòu)1H NMR(CDCl3)δ3.20(m，2H)，4.30～4.50(m，2H)，5.60(s，2H)，6.9～8.0(m，7H)，8.60(m，2H)；LC/MS(M+H)+423rt＝4.49min.
實(shí)施例20制備4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪
向得自實(shí)施例9步驟4的4，7-二氯[2，3-d]呋喃并噠嗪(400mg，2.12mmol，1當(dāng)量)和對(duì)甲氧基苯胺(p-MeOC6H4NH2)(260mg，2.12mmol，1當(dāng)量)在DME(5mL)中的懸浮液中加入水(1mL)。將所得溶液在50℃加熱48小時(shí)。冷卻至室溫后，通過過濾除去棕色沉淀，將濾液真空濃縮，獲得了粗產(chǎn)物，為棕色固體。用二氯甲烷研制該棕色固體，獲得了292mg(50％)通過LC/MS和NMR證實(shí)的中間體4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-氯呋喃并[2，3-d]噠嗪。將該中間體(292mg，1.06mmol，1當(dāng)量)、(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基)甲醇(中間體H，529mg，3.18mmol，3當(dāng)量)和18-冠-6(42mg，0.16mmol，15mol％)在甲苯(4mL)中的懸浮液于室溫?cái)嚢?0分鐘。然后加入KOH(178mg，3.18mmol，3當(dāng)量)，并將該反應(yīng)混合物在80℃加熱36小時(shí)。冷卻至室溫后，加入水(10mL)，將該混合物劇烈攪拌直至形成細(xì)的白色懸浮液。將該懸浮液過濾，用水和乙醚洗滌，獲得了125mg(29％)所需產(chǎn)物，為淺黃色固體(M+H)+406；Rf＝0.50(100％乙酸乙酯)。
實(shí)施例21制備4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-(4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪 使用制備實(shí)施例20所用的方法，用4-吡啶基甲醇代替(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基)甲醇來制備本標(biāo)題化合物。通過快速柱色譜分離出純的產(chǎn)物(M+H)+349；Rf＝0.3(95∶5二氯甲烷/甲醇)。
實(shí)施例22制備4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]噠嗪 使用制備實(shí)施例16所用的方法，用實(shí)施例21產(chǎn)物代替實(shí)施例9產(chǎn)物來制備本標(biāo)題化合物。該反應(yīng)是用250mg原料和按比例量的溶劑和試劑進(jìn)行的。在75×30mm C18柱上通過HPLC純化粗產(chǎn)物，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以10ml/分鐘的速度線性梯度洗脫10分鐘，獲得了16mg本標(biāo)題化合物，為黃色固體HPLC(50×4.6mm YMC CombiScreen_C18柱，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以3ml/分鐘的速度線性梯度洗脫5分鐘，在254nm進(jìn)行UV檢測(cè))1.98分鐘，峰；MS ES 392(M+H)+。
實(shí)施例23-80通過方法A-1、A-2和A-3制備本發(fā)明化合物 方法A-1將等當(dāng)量的二氯化物(1)與M-NH2在適當(dāng)量無水乙醇中于95℃回流2小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過濾所形成的沉淀(2)，并依次用異丙醇、4.0N KOH、水和己烷洗滌，然后干燥。然后將濾液(2)與1.2當(dāng)量Q-NH2在適當(dāng)量正丁醇中于150℃反應(yīng)10小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至室溫，然后將溶劑減壓蒸發(fā)。用4.0N KOH水溶液處理殘余物，并用二氯甲烷萃取。將有機(jī)層干燥(硫酸鎂)，并蒸發(fā)。通過制備薄層色譜(TLC)或快速硅膠色譜純化粗產(chǎn)物(3)，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脫。通過LC/MS和/或NMR證實(shí)終產(chǎn)物。下表所示實(shí)施例23-25、48、和76-80的本發(fā)明化合物是通過方法A-1制得的。
方法A-2將1當(dāng)量的二氯化物(1)與2.2當(dāng)量M-NH2在適當(dāng)量正丁醇中于150℃回流10小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過濾所形成的沉淀(4)，并依次用異丙醇、4.0N KOH、水和己烷洗滌，然后干燥。通過制備TLC或快速硅膠色譜純化粗產(chǎn)物(4)，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脫。通過LC/MS和/或NMR證實(shí)終產(chǎn)物。下表所示實(shí)施例26-33和75的本發(fā)明化合物是通過方法A-2制得的。
方法A-3將1當(dāng)量二氯化物(1)和1當(dāng)量M-NH2懸浮在DME(0.3M)中，加入水直至形成溶液。將該反應(yīng)混合物在65℃加熱48小時(shí)。冷卻至室溫后，過濾出所形成的沉淀，用DME洗滌，獲得了通過LC/MS和NMR證實(shí)的中間體產(chǎn)物(2)。在某些情況下，通過制備性TLC或用其它溶劑洗滌來進(jìn)一步純化中間體(2)。將(2)(1當(dāng)量)、甲醇(3)(3當(dāng)量)、和18-冠-6(10mol％)在甲苯(0.3M)中的懸浮液在室溫?cái)嚢?0分鐘。然后加入KOH(3當(dāng)量)，并將該反應(yīng)混合物在80℃加熱24小時(shí)。冷卻至室溫后，加入水，將該混合物劇烈攪拌直至形成懸浮液。將該懸浮液過濾，并用水洗滌，獲得了所需產(chǎn)物(4)。在某些情況下使用制備性TLC和/或用其它溶劑洗滌來進(jìn)一步純化終產(chǎn)物。通過LC/MS和NMR光譜確定終產(chǎn)物。通過LC/MS和NMR證實(shí)終產(chǎn)物。下表所示實(shí)施例34-47、49-74、和81-82D的本發(fā)明化合物是通過方法A-3制得的。
通過平行方法A-1、A-2或A-3制備的化合物





*該表中的所有化合物都是通過HPLC-正離子電噴霧質(zhì)譜(HPLCES-MS，條件如下)進(jìn)行特征確定。此外，某些化合物是在硅膠板上通過TLC進(jìn)行特征確定，并示出了Rf值和溶劑。對(duì)于表中的其它實(shí)施例，給出了HPLC保留時(shí)間；aHPLC-電噴霧質(zhì)譜(HPLC ES-MS)是用裝配有四級(jí)泵、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器、YMC Pro C18 2.0mm×23mm柱、和具有電噴霧電離作用的Finnigan LCQ離子阱質(zhì)譜儀的Hewlett-Packard1100 HPLC獲得的。在HPLC上用90％A-95％B梯度洗脫4分鐘。緩沖液A是98％水，2％乙腈和0.02％TFA。緩沖液B是98％乙腈，2％水和0.018％TFA。根據(jù)離子源中離子的數(shù)目使用不同的離子時(shí)間從140-1200amu掃描光譜；b除了HPLC ES-MS實(shí)驗(yàn)外，還實(shí)施進(jìn)行UV峰檢測(cè)的HPLC測(cè)定，并且條件是50×4.6mm YMC CombiScreen_C18柱，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以3ml/分鐘的速度線性梯度洗脫5分鐘，在254nm進(jìn)行UV檢測(cè)；c在C18柱上通過RP-HPLC純化產(chǎn)物，使用含有三氟乙酸的水/乙腈進(jìn)行梯度洗脫，加入三氟乙酸使得可通過將純產(chǎn)物蒸發(fā)來分離出三氟乙酸鹽；d如所指出的那樣，在方法A-1的步驟2中使用4-吡啶基甲醇而不是胺；e關(guān)于5-氨基-2，3-二氫苯并呋喃的制備，參見Mitchell，H.；Leblanc，Y.J.Org.Chem.1994，59，682-687。f關(guān)于制備已知的TBS保護(hù)的醇中間體的參考文獻(xiàn)是Parsons，A.F.；Pettifer，R.M.J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1998，651。
下式所示結(jié)構(gòu)部分 的脫保護(hù)是按照下述方法完成的在室溫將3當(dāng)量1.0M TBAF的THF溶液加到保護(hù)的醇在THF內(nèi)的溶液(0.05M)中。將該反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，用水中止反應(yīng)，然后用乙酸乙酯萃取。
實(shí)施例83-92通過方法B-1制備異喹啉
方法B-1將在8-mL小瓶?jī)?nèi)的實(shí)施例1步驟1的二溴異喹啉(5.29mg，0.1mmol)和M-NH2(0.2mmol)在1mL正丁醇中于90℃加熱36小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫，將溶劑減壓蒸發(fā)。向該小瓶中加入4-巰基吡啶(23mg，0.2mmol)和碳酸銫(67mg，0.2mmol)。將該混合物在180℃加熱1小時(shí)，并冷卻至室溫。向該小瓶中加入甲醇(2mL)，將該混合物超聲10分鐘并過濾。收集反應(yīng)混合物的甲醇溶液，并減壓蒸發(fā)。通過LC/MS證實(shí)產(chǎn)物的形成。下表所示實(shí)施例83-92的本發(fā)明化合物是通過方法B-1制得的。
通過方法B-1制得的化合物

*HPLC-電噴霧質(zhì)譜(HPLC ES-MS)是用裝配有四級(jí)泵、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器、YMC Pro C18 2.0mm×23mm柱、和具有電噴霧電離作用的FinniganLCQ離子阱質(zhì)譜儀的Hewlett-Packard 1100 HPLC獲得的。在HPLC上用90％A-95％B梯度洗脫4分鐘。緩沖液A是98％水，2％乙腈和0.02％TFA。緩沖液B是98％乙腈，2％水和0.018％TFA。根據(jù)離子源中離子的數(shù)目使用不同的離子時(shí)間從140-1200amu掃描光譜。
實(shí)施例93-105通過平行合成制備本發(fā)明新的酞嗪化合物使用如上所述的方法A-1或A-2，由1，4-二氯酞嗪(其制備參見Novartis專利WO 98/35958，11.02.98)而不是二氯雜環(huán)并噠嗪和適當(dāng)?shù)亩h(huán)化合物以及取代的苯胺來制備本發(fā)明新的鄰苯二甲酰亞胺化合物93-105。
通過方法A-1或A-2制備的新的酞嗪

*HPLC-電噴霧質(zhì)譜(HPLC ES-MS)是用裝配有四級(jí)泵、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器、YMC Pro C18 2.0mm×23mm柱、和具有電噴霧電離作用的FinniganLCQ離子阱質(zhì)譜儀的Hewlett-Packard 1100 HPLC獲得的。在HPLC上用90％A-95％B梯度洗脫4分鐘。緩沖液A是98％水，2％乙腈和0.02％TFA。緩沖液B是98％乙腈，2％水和0.018％TFA。根據(jù)離子源中離子的數(shù)目使用不同的離子時(shí)間從140-1200amu掃描光譜。
實(shí)施例106-114制備實(shí)施例14的鹽將實(shí)施例14的產(chǎn)物(1.50g，3.66mmol)作為在甲醇(20ml)中的漿狀液攪拌，迅速滴加甲苯磺酸水合物(0.701g，3.67mmol)在甲醇(5ml加5ml洗滌)中的溶液。所有物質(zhì)在5分鐘內(nèi)溶解，獲得了黃色溶液。加入無水乙醚(30ml)，并繼續(xù)攪拌5分鐘直至開始沉淀出固體。通過在冰/水浴中攪拌45分鐘將所得混合物急冷，然后通過過濾收集固體標(biāo)題產(chǎn)物(實(shí)施例104)，用乙醚洗滌，在真空烘箱中于55℃干燥直至NMR分析不存在溶劑(1.5小時(shí))。按照類似方法通過使用不是甲苯磺酸的不同的酸來制備其它化合物。在第一個(gè)步驟中按比例放大和使用較少甲醇一般會(huì)使得鹽更快地沉淀出來，并且使用不是乙醚的所指出的不同溶劑可有助于結(jié)晶出單獨(dú)的鹽。在某些情況下，首先通過真空蒸發(fā)除去甲醇。最后根據(jù)物質(zhì)的量和所用的特定酸干燥1.5小時(shí)-幾天。
制得的實(shí)施例14的鹽 *對(duì)于HCl，分離出的是二鹽而不是1∶1鹽。如果使用小于2當(dāng)量的酸也是如此。
生物測(cè)定和體外測(cè)試數(shù)據(jù)KDR測(cè)定將KDR激酶的胞質(zhì)激酶結(jié)構(gòu)域作為6His融合蛋白在Sf9昆蟲細(xì)胞中表達(dá)。用Ni++螯合柱純化融合蛋白的KDR結(jié)構(gòu)域。用在100μl HEPES緩沖液(20mM HEPES，pH 7.5，150mM NaCl，0.02％硫汞撒)中的5μg聚(Glu4；Tyr1)(Sigma Chemical Co.，St Louis，MO)將96-孔ELISA板于4℃包被過夜。在使用前，用HEPES，NaCl緩沖液洗滌該平板，用1％BSA，0.1％吐溫20在HEPES，NaCl緩沖液中的溶液阻斷。
將測(cè)試化合物在100％DMSO中以半對(duì)數(shù)稀釋方式從4mM-0.12μM作系列稀釋。將這些稀釋液在水中進(jìn)一步稀釋20倍，以獲得在5％DMSO中的化合物溶液。用85μl測(cè)定緩沖液(20mM HEPES，pH 7.5，100mMKCl，10mM MgCl2，3mM MnCl2，0.05％甘油，0.005％Triton X-100，1mM巰基乙醇，含有或不含有3.3μM ATP)負(fù)載測(cè)定板后，將5μl稀釋的化合物加到100μl最終測(cè)定溶液中。最終濃度為10μM-0.3nM(在0.25％DMSO中)。通過加入10μl(30ng)KDR激酶結(jié)構(gòu)域來開始測(cè)定。
將測(cè)定物與測(cè)試化合物或載體在輕微攪動(dòng)下于室溫培養(yǎng)60分鐘，用磷酸酪氨酸(PY)洗滌這些孔，用抗-磷酸酪氨酸(PY)，mAb克隆4G10(Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)探測(cè)。用抗-小鼠IgG/HRP綴合物(Amersham International plc，Buckinghamshire，England)檢測(cè)PY/抗-PY復(fù)合物。通過與100μl 3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺溶液(Kirkegaard and Perry，TMB Microwell 1 Component過氧化物酶底物)培養(yǎng)來定量測(cè)定磷酸酪氨酸。通過加入100μl基于1％HCl的終止溶液(Kirkegaard and Perry，TMB 1 Component StopSolution)來停止顯色。
在96-孔平板讀數(shù)計(jì)SpetraMax 250(Molecular Devices)中在450nm通過分光光度法測(cè)定光密度。從所有ODs減去背景(在測(cè)定中不含ATP)OD值，并依據(jù)下述公式計(jì)算抑制百分比％抑制＝[(OD(載體對(duì)照)-OD(含有化合物))×100]/[OD(載體對(duì)照)-OD(沒有加入ATP)]使用化合物濃度對(duì)抑制百分比，用最小平方分析確定IC50值。在該測(cè)定中IC50≤100nM的化合物包括實(shí)施例1、2、4、6、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、22、23、24、34、37、38、39、40、42、43、44、47、49、51、52、53、54、56、57、59、60、62、63、65、66、68、69、70、71、72、73、74、75、78、82B、82C、82D、85、88、93、96、97、98、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、和112的化合物。IC50值為100nM-1000nM的化合物包括實(shí)施例3、5、7、21、27、28、35、36、45、46、48、50、55、58、61、64、67、76、79、82A、89、95、99、和100的化合物。IC50值＞1000nM的化合物包括實(shí)施例26、29、30、31、32、33、41、77、80、81、和94的化合物。沒有列出的實(shí)施例化合物可假定具有弱的活性，其IC50值大于1μM。
細(xì)胞機(jī)械測(cè)定-抑制3T3 KDR磷酸化在補(bǔ)充有10％新生小牛血清、低葡萄糖、25mM/L丙酮酸鈉、鹽酸吡哆醇和0.2mg/ml G418(Life Technologies Inc.，Grand Island，NY)的DMEM(Life Technologies，Inc.，Grand Island，NY)中生長(zhǎng)表達(dá)全長(zhǎng)KDR受體的NIH3T3細(xì)胞。將細(xì)胞在膠原I-包被的T75燒瓶(Becton Dickinson Labware，Bedford，MA)中于潮濕的5％CO2氣氛下在37℃保持。
將15000個(gè)細(xì)胞鋪到膠原I-包被的96-孔平板的各孔內(nèi)的DMEM生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。6個(gè)小時(shí)后，將細(xì)胞洗滌，并用不含血清的DMEM替換培養(yǎng)基。過夜培養(yǎng)以靜止細(xì)胞后，用含有0.1％牛白蛋白(SigmaChemical Co.，St Louis，MO)的Dulbecco’s磷酸鹽緩沖鹽水(LifeTechnologies，Inc.，Grand Island，NY)替換培養(yǎng)基。向細(xì)胞(以1％終濃度在DMSO中)中加入不同濃度(0-300nM)的測(cè)試化合物后，將細(xì)胞在室溫培養(yǎng)30分鐘。然后用VEGF(30ng/ml)將細(xì)胞在室溫處理10分鐘。VEGF刺激后，除去緩沖液，通過加入150μl提取緩沖液(50mM Tris，pH 7.8，補(bǔ)充10％甘油，50mM BGP，2mM EDTA，10mM NaF，0.5mM NaVO4，和0.3％TX-100)將細(xì)胞在4℃裂解30分鐘。
為了評(píng)價(jià)受體磷酸化，將100微升各細(xì)胞裂解物加到用300ng抗體C20(Santa Cruz Biotechnology，Inc.，Santa Cruz，CA)預(yù)包被的ELISA板的孔中。培養(yǎng)60分鐘后，洗滌該平板，用抗-磷酸酪氨酸mAb克隆4G10(Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)探測(cè)結(jié)合的KDR的磷酸酪氨酸。將平板洗滌，將各孔與抗-小鼠IgG/HRP綴合物(Amersham International plc，Buckinghamshire，England)培養(yǎng)60分鐘。洗滌這些孔，通過每個(gè)孔加入100μl 3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺溶液(Kirkegaard and Perry，TMB Microwell 1 Component過氧化物酶底物)來定量測(cè)定磷酸酪氨酸。通過加入100μl基于1％HCl的終止溶液(Kirkegaard and Perry，TMB 1 Component StopSolution)來停止顯色。
在96-孔平板讀數(shù)計(jì)(SpetraMax 250，Molecular Devices)中在450nm通過分光光度法測(cè)定光密度(OD)。從所有ODs減去背景(未加入VEGF)OD值，并依據(jù)下述公式計(jì)算抑制百分比％抑制＝[(OD(VEGF對(duì)照)-OD(含有化合物))×100]/[OD(VEGF對(duì)照)-OD(未加入VEGF)]使用化合物濃度對(duì)抑制百分比，用最小平方分析確定某些實(shí)施例化合物的IC50。在該測(cè)定中IC50≤20nM的化合物包括實(shí)施例2、6、10、11、14、23、96、101、102、103、104、105的化合物。IC50值為20nM-50nM的化合物包括實(shí)施例1、4、8、9、12、13、17、24、93、98的化合物。IC50值為50nM-400nM的化合物包括實(shí)施例97、99、和100的化合物。
Matrigel_血管生成模型制備Matrigel塞和體內(nèi)期Matrigel_(CollaborativeBiomedical Products，Bedford，MA)是由鼠腫瘤提取的基底膜，其主要由昆布氨酸、膠原IV和類肝素硫酸蛋白多糖組成。其是作為在4℃的無菌液體提供的，但是在37℃會(huì)迅速形成固體凝膠。
在4℃將液體Matrigel與SK-MEL2人腫瘤細(xì)胞混合，其中所述腫瘤細(xì)胞用含有具有可選擇標(biāo)記物的鼠VEGF基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染過。在選擇下將腫瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)，并將細(xì)胞與冷的液體Matrigel以2×106/0.5ml的比例混合。用25規(guī)格針頭在接近腹部中線處皮下植入0.5毫升。從植入的當(dāng)天開始，將測(cè)試化合物作為在乙醇/Cremaphor EL/鹽水(12.5％∶12.5％∶75％)中的溶液以30、100、和300mg/kg的劑量每天口服給藥一次。植入后12天，給小鼠實(shí)施安樂死，收集Matrigel小團(tuán)以分析血紅蛋白含量。
血紅蛋白測(cè)定在4℃將Matrigel小團(tuán)置于4體積(w/v)裂解緩沖液(20mM Tris pH 7.5，1mM EGTA，1mM EDTA，1％Triton X-100[EM Science，Gibbstown，N.J.]，和完全的、不含EDTA的蛋白酶抑制劑雞尾酒[Mannheim，Germany])中，并在4℃均化。將均化物在冰上于振搖條件下培養(yǎng)30分鐘，并以14K×g于4℃離心30分鐘。將上清液轉(zhuǎn)移到急冷的microfuge管中，并在4℃貯存以進(jìn)行血紅蛋白測(cè)定。
將小鼠血紅蛋白(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)以5mg/ml的濃度懸浮在高壓滅菌水(BioWhittaker，Inc，Walkersville，MD.)中。在裂解緩沖液(見上文)中從500微克/ml到30微克/ml產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)曲線。將標(biāo)準(zhǔn)曲線和裂解物樣本以一式兩份的方式、5微升/孔的量加到聚苯乙烯96-孔平板中。使用Sigma Plasma血紅蛋白試劑盒(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)，在室溫將TMB底物重懸在50ml乙酸溶液中。向每個(gè)孔中加入100微升底物，然后在室溫加入100微升/孔過氧化氫溶液。將平板在室溫培養(yǎng)10分鐘。
在96-孔平板讀數(shù)計(jì)SpetraMax 250微板分光光度計(jì)系統(tǒng)(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)中在600nm通過分光光度法測(cè)定光密度。從所有孔中減去背景裂解緩沖液讀數(shù)。
依據(jù)下述公式計(jì)算總的樣本血紅蛋白含量總血紅蛋白＝(樣本裂解物體積)×(血紅蛋白濃度)從每個(gè)含有細(xì)胞的Matrigel樣本的總血紅蛋白減去不含細(xì)胞的Matrigel樣本的平均總血紅蛋白。依據(jù)下述公式計(jì)算抑制百分比％抑制＝(平均總血紅蛋白藥物治療的腫瘤裂解物)×100/(平均總血紅蛋白未治療的腫瘤裂解物)以100和300mg/kg的劑量口服給藥的實(shí)施例8化合物在該測(cè)定中表現(xiàn)出顯著活性，相對(duì)于載體對(duì)照動(dòng)物，得自給藥動(dòng)物的Matrigel樣本的總血紅蛋白含量被抑制了＞60％。在該模型中未測(cè)定其它實(shí)例化合物。
通過閱讀本說明書或本文所公開的本發(fā)明的實(shí)施，本發(fā)明其它實(shí)施方案對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說將是顯而易見的。本說明書和實(shí)施例僅是舉例說明，本發(fā)明的確切范圍和實(shí)質(zhì)由權(quán)利要求書限定。
權(quán)利要求
1.具有如下所示通式的化合物或其可藥用的鹽或前藥 其中R1和R2i)獨(dú)立地代表H或低級(jí)烷基；ii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；iii)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中連接是經(jīng)由末端碳原子實(shí)現(xiàn)的；iv)一起形成下述結(jié)構(gòu)所示的橋基 其中一個(gè)或兩個(gè)環(huán)單元T1是N，而其它環(huán)單元是CH或CG1，且連接是經(jīng)由末端原子實(shí)現(xiàn)的；并且其中m是0或1-4的整數(shù)；G1是獨(dú)立地選自下列的取代基●-N(R6)2；●-NR3COR6；●鹵素；●烷基；●環(huán)烷基；●低級(jí)鏈烯基；●低級(jí)環(huán)烯基；●鹵素取代的烷基；●氨基取代的烷基；●N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；●N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；●N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛?；●羥基取代的烷基；●氰基取代的烷基；●羧基取代的烷基；●低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；●苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；●鹵素取代的烷基氨基；●氨基取代的烷基氨基；●N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；●N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；●N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被弧窳u基取代的烷基氨基；●氰基取代的烷基氨基；●羧基取代的烷基氨基；●低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；●苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；●-OR6；●-SR6；●-S(O)R6；●-S(O)2R6；●鹵代低級(jí)烷氧基；●鹵代低級(jí)烷硫基；●鹵代低級(jí)烷基磺酰基；●-OCOR6；●-COR6；●-CO2R6；●-CON(R6)2；●-CH2OR3；●-NO2；●-CN；●脒基；●胍基；●磺基；●-B(OH)2；●任選取代的芳基；●任選取代的雜芳基；●任選取代的飽和雜環(huán)基；●任選取代的飽和雜環(huán)基烷基；●任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；●任選取代的部分不飽和雜環(huán)基烷基；●-OCO2R3；●任選取代的雜芳基烷基；●任選取代的雜芳氧基；●-S(O)p(任選取代的雜芳基)；●任選取代的雜芳基烷氧基；●-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；●-CHO；●-OCON(R6)2；●-NR3CO2R6；●-NR3CON(R6)2；R3是H或低級(jí)烷基；R6獨(dú)立地選自●H；●烷基；●環(huán)烷基；●任選取代的芳基；●任選取代的芳基低級(jí)烷基；●低級(jí)烷基-N(R3)2；和●低級(jí)烷基-OH；R4是H、鹵素、或低級(jí)烷基；p是0、1、或2；X選自O(shè)、S、和NR3；Y選自●低級(jí)亞烷基；●-CH2-O-；●-CH2-S-；●-CH2-NH-；●-O-；●-S-；●-NH-；●-(CR42)n-S(O)p-(5-元雜芳基)-(CR42)s-；●-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-；其中n和s分別獨(dú)立地為0或1-2的整數(shù)；且G2選自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2；●-O-CH2-；●-S(O)-；●-S(O)2-；●-SCH2-；●-S(O)CH2-；●-S(O)2CH2-；●-CH2S(O)-；和●-CH2S(O)2-；Z是CR4；q是1或2；G3是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)●-NR3COR6；●羧基取代的烷基；●低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；●-OR6；●-SR6；●-S(O)R6；●-S(O)2R6；●-OCOR6；●-COR6；●-CO2R6；●-CH2OR3；●-CON(R6)2；●-S(O)2N(R6)2；●-NO2；●-CN；●任選取代的芳基；●任選取代的雜芳基；●任選取代的飽和雜環(huán)基；●任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；●任選取代的雜芳基烷基；●任選取代的雜芳氧基；●-S(O)p(任選取代的雜芳基)；●任選取代的雜芳基烷氧基；●-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；●-OCON(R6)2；●-NR3CO2R6；●-NR3CON(R6)2；和●結(jié)構(gòu)T2＝T2-T3的二價(jià)橋基，其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3；其中G3′代表任意上述定義的單價(jià)G3；且末端T2與L連接，T3與D連接，形成5-元稠合環(huán)；A和D獨(dú)立地代表N或CH；B和E獨(dú)立地代表N或CH；L代表N或CH；條件是a)在含有A、B、D、E、和L的環(huán)中，N原子的總數(shù)目是1、2或3；和b)當(dāng)L代表CH，且任何G3是單價(jià)取代基時(shí)，A和D當(dāng)中至少有一個(gè)是N原子；J是選自下列的環(huán)●芳基；●吡啶基；和●環(huán)烷基；q′代表環(huán)J上的取代基G4的數(shù)目，并且是0、1、2、3、4、或5；且G4是選自下列的單價(jià)或二價(jià)基團(tuán)●-N(R6)2；●-NR3COR6；●鹵素；●烷基；●環(huán)烷基；●低級(jí)鏈烯基；●低級(jí)環(huán)烯基；●鹵素取代的烷基；●氨基取代的烷基；●N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基；●N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基；●N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛?；●羥基取代的烷基；●氰基取代的烷基；●羧基取代的烷基；●低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；●苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基；●鹵素取代的烷基氨基；●氨基取代的烷基氨基；●N-低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；●N，N-二低級(jí)烷基氨基取代的烷基氨基；●N-低級(jí)鏈烷?；被〈耐榛被弧窳u基取代的烷基氨基；●氰基取代的烷基氨基；●羧基取代的烷基氨基；●低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；●苯基低級(jí)烷氧基羰基取代的烷基氨基；●-OR6；●-SR6；●-S(O)R6；●-S(O)2R6；●鹵代低級(jí)烷氧基；●鹵代低級(jí)烷硫基；●鹵代低級(jí)烷基磺?；弧?OCOR6；●-COR6；●-CO2R6；●-CON(R6)2；●-CH2OR3；●-NO2；●-CN；●脒基；●胍基；●磺基；●-B(OH)2；●任選取代的芳基；●任選取代的雜芳基；●任選取代的飽和雜環(huán)基；●任選取代的部分不飽和雜環(huán)基；●-OCO2R3；●任選取代的雜芳基烷基；●任選取代的雜芳氧基；●-S(O)p(任選取代的雜芳基)；●任選取代的雜芳基烷氧基；●-S(O)p(任選取代的雜芳基烷基)；●-CHO；●-OCON(R6)2；●-NR3CO2R6；●-NR3CON(R6)2；和●連接于并連接環(huán)J相鄰位置的形成稠合環(huán)的二價(jià)橋基，所述橋基具有下列結(jié)構(gòu)a) 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；其中G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且經(jīng)由末端原子T2和T3與環(huán)J連接；b) 其中每個(gè)T2獨(dú)立地代表N、CH、或CG4′；其中G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；且條件是最多有兩個(gè)橋原子T2可以是N；并且經(jīng)由末端原子T2與環(huán)J連接；和c) 或 其中每個(gè)T4、T5、和T6獨(dú)立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；其中G4′代表任意上述定義的單價(jià)G4；并且經(jīng)由末端原子T4或T5與環(huán)J連接；條件是i)當(dāng)一個(gè)T4是O、S、或NR3時(shí)，另一個(gè)T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的橋基團(tuán)可含有最多兩個(gè)雜原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的橋基團(tuán)中，當(dāng)一個(gè)T5和一個(gè)T6是O原子，或者兩個(gè)T6是O原子時(shí)，所述O原子被至少一個(gè)碳原子分隔；當(dāng)G4是位于環(huán)J上與連接基團(tuán)-(CR42)p-相鄰的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基時(shí)，則G4和X上的烷基取代基R3可以連接形成結(jié)構(gòu)-(CH2)p′-的橋基，其中p′是2、3、或4，條件是p和p′之和是2、3、或4，從而形成5、6、或7元含氮環(huán)；另外的條件是-在G1、G2、G3、和G4中，當(dāng)兩個(gè)基團(tuán)R3或R6分別是烷基，并且位于相同N原子上時(shí)，它們可通過一個(gè)鍵、O、S、或NR3連接以形成具有5-7個(gè)環(huán)原子的含氮雜環(huán)；-當(dāng)芳基、雜芳基、或雜環(huán)基環(huán)任選被取代時(shí)，該環(huán)可攜帶最高達(dá)5個(gè)獨(dú)立地選自下列的取代基氨基、一低級(jí)烷基取代的氨基、二低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)鏈烷?；被?、鹵素、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、鹵代低級(jí)烷氧基、鹵代低級(jí)烷硫基、低級(jí)鏈烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巰基、磺基、和氰基；和-當(dāng)任何烷基連接到O、S、或N上，并攜帶羥基取代基時(shí)，則所述羥基取代基與烷基所連接的O、S、或N被至少兩個(gè)碳原子分隔開。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是H。
3.包含權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體的藥物組合物。
4.權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療患有特征是異常血管生成或高滲透過程的病癥的哺乳動(dòng)物的藥物中的用途。
5.權(quán)利要求4的用途，其中所述病癥是腫瘤生長(zhǎng)；視網(wǎng)膜病，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病、缺血性視網(wǎng)膜-靜脈堵塞、早熟性視網(wǎng)膜病、和老年黃斑變性；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；牛皮癬；或與表皮下水皰形成有關(guān)的大皰性疾病，包括大皰性類天皰瘡、多形性紅斑、和皰疹樣皮炎。
6.選自下列的化合物
全文摘要
具有血管生成抑制活性的通式(I)的取代的吡啶和噠嗪，其中含有A、B、D、E、和L的環(huán)是苯基或含氮雜環(huán)；基團(tuán)X和Y可以是任意所定義的連接基團(tuán)；R
文檔編號(hào)C07D491/04GK1769282SQ200510127109
公開日2006年5月10日 申請(qǐng)日期2000年9月26日 優(yōu)先權(quán)日1999年9月28日
發(fā)明者J·P·杜馬斯, T·K·喬, H·C·E·克呂恩德, W·李, D·納加拉斯納姆, R·N·西布利, N·蘇, S·J·博爾, J·A·迪克松 申請(qǐng)人:美國拜爾公司