專(zhuān)利名稱：制造對(duì)映體純化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制造對(duì)映體純化合物的方法。
對(duì)映體純化合物的生產(chǎn)是制藥、化學(xué)和生物技術(shù)工業(yè)中非常重要的課題。這是因?yàn)榫哂邢嗤M成的化學(xué)物質(zhì)的兩個(gè)對(duì)映體可以具有完全不同的生物活性。因此希望具有可利用的分離試劑和技術(shù)，使得分離對(duì)映體和分析對(duì)映體純度的制藥、化學(xué)和生物技術(shù)產(chǎn)品成為可能。特別希望具有可利用的方法，使得制造制備級(jí)的所需對(duì)映體成為可能，例如從對(duì)映體的外消旋混合物開(kāi)始來(lái)制造。
專(zhuān)利申請(qǐng)EP-A-206 283公開(kāi)了7，8-二氟-2，3-二氫-3-甲基-4H-〔1，4〕苯并嗪對(duì)映體的分離，該對(duì)映體衍生于(S)-N-甲苯磺酰脯氨酸氯化物，并隨后經(jīng)過(guò)各種分離操作。
希望具有可利用的方法，使得以經(jīng)濟(jì)的方法制造大量對(duì)映體純化合物特別是對(duì)映體純氨基酸成為可能，尤其是在對(duì)映體純化合物的產(chǎn)量和純度以及該方法的總體經(jīng)濟(jì)性方面。
本發(fā)明的目的在于克服這些問(wèn)題。
因而本發(fā)明涉及制造對(duì)映體純化合物的方法，該化合物包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，所述方法開(kāi)始于所述化合物的對(duì)映體混合物，在該方法中(a)使包含對(duì)映體混合物和基于對(duì)映體純氨基酸的試劑的反應(yīng)介質(zhì)在適當(dāng)條件下發(fā)生能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)與活性羧基之間的反應(yīng)，從而形成羰基鍵，其中在所述試劑中氨基酸的至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)并且在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)羧基是活性的；(b)對(duì)所得非對(duì)映體混合物進(jìn)行分離操作，從而獲得基本由非對(duì)映體構(gòu)成的至少一個(gè)級(jí)分；(c)使得至少一部分所述級(jí)分在保護(hù)性基團(tuán)基本穩(wěn)定的條件下經(jīng)歷羰基鍵裂解步驟；和
(d)回收所述對(duì)映體純化合物和氨基酸的對(duì)映體純衍生物，在所述氨基酸中至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)。
令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的方法使得制備對(duì)映體獲得良好的結(jié)果成為可能，所述對(duì)映體包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)。根據(jù)本發(fā)明的方法是特別經(jīng)濟(jì)的，這是由于用于分離對(duì)映體純化合物所需要的對(duì)映體純?cè)噭┫臅?huì)受限于受保護(hù)氨基酸的對(duì)映體純衍生物的回收，其可以容易地再利用。
對(duì)本發(fā)明來(lái)說(shuō)，術(shù)語(yǔ)“氨基酸”是指包含至少一個(gè)氨基特別是NH2基團(tuán)和至少一個(gè)羧基的任意化合物。用于本發(fā)明的氨基酸是包含至少一個(gè)不對(duì)稱碳的手性氨基酸?？梢允褂帽旧肀娝苤奶烊换蚝铣稍吹娜我馐中园被帷?br> 對(duì)本發(fā)明來(lái)說(shuō)，術(shù)語(yǔ)“羰基鍵”是指具體而言在羰基碳原子和包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)的化合物原子之間的鍵。
例如，根據(jù)本發(fā)明的試劑實(shí)例基于下列天然氨基酸丙氨酸、纈氨酸、正纈氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、異絲氨酸、高絲氨酸、蘇氨酸、別蘇氨酸、蛋氨酸、乙硫氨酸、谷氨酸、焦谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、鳥(niǎo)氨酸、谷氨酰胺和瓜氨酸。
也可以使用非天然對(duì)映體。
可以用作根據(jù)本發(fā)明的試劑主要成分的合成源氨基酸的實(shí)例包括例如下列氨基酸(1-萘基)丙氨酸、(2-萘基)丙氨酸、高苯基丙氨酸、(4-氯苯基)丙氨酸、(4-氟苯基)丙氨酸、(3-吡啶基)丙氨酸、苯基甘氨酸、二氨基庚二酸(2，6-二氨基庚烷-1，7-二酸)、2-氨基丁酸、2-氨基萘滿-2-羧酸、赤式-β-甲基苯基丙氨酸、蘇式-β-甲基苯基丙氨酸、(2-甲氧苯基)丙氨酸、1-氨基-5-羥基茚滿-2-羧酸、2-氨基庚烷-1，7-二酸、(2，6-二甲基-4-羥苯基)丙氨酸、赤式-β-甲基酪氨酸或蘇式-β-甲基酪氨酸。
術(shù)語(yǔ)“對(duì)映體純氨基酸”是指基本由一種對(duì)映體構(gòu)成的手性氨基酸。對(duì)映體過(guò)量值(ee)定義為ee(％)＝100(x1-x2)/(x1-x2)，其中x1＞x2；x1和x2分別表示混合物中對(duì)映體1或2的含量。
通常使用具有大于或等于99％的對(duì)映體過(guò)量值的對(duì)映體純氨基酸。優(yōu)選使用具有大于或等于99.5％的對(duì)映體過(guò)量值的對(duì)映體純氨基酸。在特別優(yōu)選的方法中，使用具有大于或等于99.9％的對(duì)映體過(guò)量值的對(duì)映體純氨基酸。
任意對(duì)映體純氨基酸可用作根據(jù)本發(fā)明試劑的主要成分。優(yōu)選地，對(duì)映體純氨基酸選自上述天然或合成源的氨基酸。在特別優(yōu)選的方法中，對(duì)映體純氨基酸選自脯氨酸、谷氨酸和焦谷氨酸，它們?nèi)芜x地被取代。焦谷氨酸是非常特別優(yōu)選的。在一個(gè)具體實(shí)施例中，所述試劑基于(2S)-焦谷氨酸。
在根據(jù)本發(fā)明的方法中，該試劑的至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)。
作為氨基官能團(tuán)的保護(hù)性基團(tuán)的非限制性實(shí)例，可以具體提及的是取代或非取代的烷類(lèi)或芳烷類(lèi)基團(tuán)例如苯甲基、二苯基甲基、二(甲氧苯基)甲基或三苯基甲基(三苯甲基)，取代或非取代的酰類(lèi)基團(tuán)例如甲?；?、乙?；⑷阴；⒈郊柞；蜞彵蕉柞；?，取代或非取代的芳烷氧羰(aralkyloxycarbonyl)類(lèi)基團(tuán)例如芐氧羰基、對(duì)氯芐氧羰基、對(duì)溴芐氧羰基、對(duì)硝基芐氧羰基、對(duì)甲氧芐氧羰基、二苯甲氧羰基、2-(對(duì)聯(lián)苯基)異丙氧羰基、2-(3，5-二甲氧苯基)異丙氧羰基、對(duì)苯基偶氮芐氧羰基、三苯基膦酰乙氧羰基或9-芴基甲氧羰基，取代或非取代的烷氧羰類(lèi)基團(tuán)例如叔丁氧羰基、二異丙基甲氧羰基、異丙氧羰基、乙氧羰基、烯丙氧羰基或2，2，2-三氯乙氧羰基，或者環(huán)烷氧羰類(lèi)基團(tuán)例如環(huán)戊氧羰基、環(huán)己氧羰基、金剛烷氧羰基或異冰片氧羰基。
保護(hù)性基團(tuán)通常是磺酰基，特別是烷基磺?；蚍蓟酋；?，優(yōu)選芳基磺?；?br> 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，磺?；貏e是(雜)芳基磺?；沟每梢蕴貏e有效地回收對(duì)映體純氨基酸的N-磺?；苌?，同時(shí)使得可以定量和基本無(wú)外消旋作用地回收對(duì)映體混合物。
試劑中使用的典型芳基磺?；?-24個(gè)碳原子，例如選自苯磺酰基、萘基磺酰基、蒽基磺?；?、芴基磺?；洼祯酋；?，這些基團(tuán)任選地被取代。具體實(shí)例選自對(duì)甲苯磺?；?tosyl)、均三甲苯磺酰基或甲氧三甲苯基磺?；?。優(yōu)選對(duì)甲苯磺?；?。
在根據(jù)本發(fā)明的方法中，試劑中至少一個(gè)羧基是活性的。
活性基團(tuán)可以例如是酸性鹵化物或酸酐。這些酸性鹵化物中可以提及的是酸性氟化物、酸性氯化物和酸性溴化物。優(yōu)選使用酸性氯化物。
在第一實(shí)施方案中，包含預(yù)先活化的羧基的試劑用于根據(jù)本發(fā)明的方法中。
在第二實(shí)施方案中，試劑的羧基被現(xiàn)場(chǎng)活化，即利用反應(yīng)介質(zhì)中存在的活化化合物。這種方法的實(shí)例是通過(guò)DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)活化羧基，任選地使用共活化劑例如HOBT(羥基苯并三唑)。
根據(jù)本發(fā)明的方法中使用的試劑可以通過(guò)公知的方法從各種對(duì)映體純氨基酸獲得。例如可通過(guò)與相應(yīng)的磺?；u化物反應(yīng)來(lái)引入磺?；＠玺然梢酝ㄟ^(guò)與PCl5反應(yīng)轉(zhuǎn)化成酸性氯化物。
在根據(jù)本發(fā)明的方法中，根據(jù)本發(fā)明的試劑與至少包含對(duì)映體的混合物反應(yīng)，所述對(duì)映體包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)。
能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)通常是氨基、羥基或硫羥基，所述氨基任選地被單烷基化。
在這種情況下，分別獲得酰胺、酯或硫酯鍵作為羰基鍵。
當(dāng)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)是氨基時(shí)，使用包含這種基團(tuán)的化合物的全硅烷化衍生物是有利的，例如可以根據(jù)在申請(qǐng)EP 184 243中公開(kāi)的方法來(lái)獲得。
可以通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的方法分離的、包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)的對(duì)映體通常是氨基酸、伯胺或仲胺、肽、醇、羥基酸或硫醇。根據(jù)本發(fā)明的方法在分離氨基酸的對(duì)映體方面提供良好的效果，例如上述天然或合成源的氨基酸對(duì)映體的分離。
在第一特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法適用于對(duì)映體純?chǔ)?氨基酸的生產(chǎn)。
在第二特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法適用于對(duì)映體純?chǔ)?氨基酸的生產(chǎn)。根據(jù)本發(fā)明的方法還可用于生產(chǎn)其它在氨基和羧基之間存在較大距離的氨基酸，例如γ-、δ-或ε-氨基酸。根據(jù)本發(fā)明的方法適合于環(huán)狀或無(wú)環(huán)氨基酸的生產(chǎn)，氨基可以存在于雜環(huán)中。
根據(jù)本發(fā)明方法可獲得的β-氨基酸的具體實(shí)例是選自例如β-高纈氨酸、β-高苯基丙氨酸、β-高苯基甘氨酸、β-高(3’-吡啶基)甘氨酸、β-高丙氨酸、ε-三氟乙?；?β-高賴氨酸、β-高賴氨酸、β-高天冬氨酸、β-高脯氨酸和2-哌啶乙酸。
根據(jù)本發(fā)明的方法還在分離氨基酸的對(duì)映體混合物方面提供良好的效果。術(shù)語(yǔ)“氨基酸”是指包含至少一個(gè)NHR基團(tuán)和至少一個(gè)羧基的任意化合物，其中R表示有機(jī)基團(tuán)例如烷基或芳基。
亞氨基酸可以是脂族的，例如具有化學(xué)式HOOC-CnH2n-NHR，其中n＞1例如2-12，C-H鍵可以例如被官能團(tuán)或鹵素取代。在這種情況下，R適當(dāng)?shù)剡x自C1-C4烷基或任選地為取代苯基。N-甲基纈氨酸是這種脂族亞氨基酸的實(shí)例。
亞氨基酸還可以含有嵌入雜環(huán)中的仲胺基。在這種情況下，含有亞氨基的環(huán)通常由3、4、5、6或7個(gè)原子構(gòu)成，優(yōu)選由5、6或7個(gè)原子構(gòu)成。雜環(huán)可以被取代和/或成為稠環(huán)體系的一部分。
這種雜環(huán)亞氨基酸例如是選自脯氨酸、哌啶酸(哌啶-2-羧酸)、嗎啉-3-羧酸、哌嗪-2-羧酸、1-硫-4-氮雜環(huán)己烷-3-羧酸、α-甲基脯氨酸、順式-4-羥基脯氨酸、蓓豆堿(1，2，3，5-四氫吡啶-2-羧酸)、順式-4-羥基六氫哌啶酸、反式-5-羥基哌啶酸、1，2，3，4-四氫化降哈爾滿(tetrahydronorharman)-1-羧酸、1，2，3，4-四氫-6-羥基異喹啉-3-羧酸、1，2，3，4-四氫吡啶異喹啉-3-羧酸和1，2，3，4-四氫吡啶異喹啉-1-羧酸。
在第三特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法適用于對(duì)映體純醇的生產(chǎn)。醇優(yōu)選是伯醇或仲醇。
如果醇是伯醇，則它通常在2-或3-位置上含有多手性(stereogenic)中心。
醇可以含有取代基例如芳基、雙鍵或優(yōu)選三鍵、脂環(huán)族基團(tuán)和優(yōu)選的雜環(huán)基團(tuán)、前述官能團(tuán)或鹵素。伯醇的具體實(shí)例選自(任選地取代的)苯乙醇、1-辛炔-3-醇和1-丁炔-3-醇。
在具體的實(shí)施方案中，醇是氨基醇。在這種情況下，氨基相對(duì)于羥基適當(dāng)存在于1-、2-或3-位，優(yōu)選在1-或2-位。氨基可以作為取代基存在或嵌入雜環(huán)中。氨基醇的具體實(shí)例選自2-羥基哌啶和2，2’-哌啶乙醇。
在根據(jù)本發(fā)明的方法中，使用的對(duì)映體混合物優(yōu)選是外消旋混合物。它還可以是富含一種對(duì)映體的混合物，這可以例如通過(guò)立體選擇性反應(yīng)來(lái)獲得。
在根據(jù)本發(fā)明方法的步驟(a)中，通常在堿性反應(yīng)介質(zhì)中實(shí)施操作。優(yōu)選在至少一種堿的存在下實(shí)施操作。叔胺堿例如三乙胺或二異丙基乙胺或N，N，N，N-四甲基乙二胺特別適合作為堿，所述三乙胺或二異丙基乙胺分別包含一個(gè)堿性官能團(tuán)，所述N，N，N，N-四甲基乙二胺包含兩個(gè)堿性官能團(tuán)。優(yōu)選三乙胺。
如果合適，堿的使用量取決于試劑的量和堿中堿性官能團(tuán)的數(shù)目。試劑與堿性官能團(tuán)的摩爾比通常至少為1。比值一般至多為2。比值為1時(shí)產(chǎn)生良好的效果。
根據(jù)本發(fā)明方法的步驟(a)通常在溶劑體系中實(shí)施，其中對(duì)映體混合物和試劑具有足夠的溶解性并且能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)具有足夠的親核性從而與所述基團(tuán)反應(yīng)。例如包含至少一種極性有機(jī)溶劑的體系適合作為溶劑體系?？梢岳玫臉O性有機(jī)溶劑是例如脂族或脂環(huán)族醚例如二乙醚、四氫呋喃或1，4-二烷以及脂族酯例如優(yōu)選的乙酸乙酯、脂族仲酰胺如二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺、或例如N-甲基吡咯烷酮或乙腈。
使用的試劑量取決于有機(jī)化合物中能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)數(shù)量。對(duì)于每單位的能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，一般使用至少1摩爾當(dāng)量的試劑。對(duì)于每單位的能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，一般使用至多10摩爾當(dāng)量的試劑。對(duì)于每單位的能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，最常使用至多5摩爾當(dāng)量的試劑。對(duì)于每單位的能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，優(yōu)選使用至多3摩爾當(dāng)量的試劑。在特別優(yōu)選的方法中，對(duì)于每單位的能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，使用1.1-2.5摩爾當(dāng)量的試劑。
在根據(jù)本發(fā)明的方法中，試劑與包含對(duì)映體的混合物的反應(yīng)持續(xù)時(shí)間通常小于或等于10小時(shí)。大多數(shù)情況下，時(shí)間小于或等于5小時(shí)。優(yōu)選時(shí)間小于或等于3小時(shí)。大于或等于15分鐘的時(shí)間獲得良好的結(jié)果。實(shí)踐中，通常采用大于或等于30分鐘的反應(yīng)時(shí)間。30-90分鐘的時(shí)間是十分合適的。
在步驟(a)中，試劑與至少包含有機(jī)化合物對(duì)映體的混合物反應(yīng)的溫度通常小于或等于50℃。大多數(shù)情況下，溫度小于或等于30℃。溫度通常大于或等于-30℃。大多數(shù)情況下，溫度大于或等于-10℃。
在根據(jù)本發(fā)明方法的步驟(b)中，對(duì)由步驟(a)產(chǎn)生的非對(duì)映體混合物進(jìn)行分離操作，以獲得基本由非對(duì)映體組成的第一級(jí)分?？捎糜诜蛛x非對(duì)映體混合物的分離操作本身是已知的?？梢蕴峒暗姆蛛x操作的實(shí)例有蒸餾、結(jié)晶和氣相或液相色譜操作。在這些操作中，優(yōu)選結(jié)晶和液相色譜操作，例如固體吸收劑比如氧化鋁或二氧化硅的色譜。特別優(yōu)選二氧化硅作為固體吸收劑。
具體地，從N-磺?；噭╅_(kāi)始獲得的非對(duì)映體通過(guò)二氧化硅色譜特別是未接枝二氧化硅色譜產(chǎn)生良好的制備分離效果。
在根據(jù)本發(fā)明方法的替代形式中，對(duì)獲得的非對(duì)映體混合物在沒(méi)有預(yù)先純化的情況下進(jìn)行分離操作。根據(jù)本發(fā)明的方法和試劑使得可以不分離非對(duì)映體的粗制混合物并且在沒(méi)有預(yù)先純化的情況下進(jìn)行分離操作。
根據(jù)步驟(b)，獲得基本由非對(duì)映體組成的至少一個(gè)級(jí)分。通常，這種級(jí)分的非對(duì)映體過(guò)量值大于或等于90％。非對(duì)映體過(guò)量值通常大于或等于95％。優(yōu)選大于或等于97％。甚至可以得到大于或等于約99％的非對(duì)映體過(guò)量值。
特別是當(dāng)在步驟(a)中使用的對(duì)映體混合物是外消旋混合物時(shí)，還可以在步驟(b)中獲得基本由另一種非對(duì)映體組成的第二級(jí)分，通常具有如上文中定義的非對(duì)映體過(guò)量值，這使得可以獲得化合物的其它對(duì)映體。
在根據(jù)本發(fā)明方法的步驟(c)中，至少一部分第一級(jí)分在保護(hù)性基團(tuán)基本穩(wěn)定的條件下經(jīng)歷羰基鍵裂解步驟。
例如可實(shí)施水解或醇解反應(yīng)作為裂解步驟。優(yōu)選水解步驟。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，可以選擇性裂解非對(duì)映體的羰基鍵而基本不導(dǎo)致受保護(hù)的對(duì)映體純氨基酸衍生物或釋放的對(duì)映體純化合物的外消旋，特別是當(dāng)使用包含磺?；Ｗo(hù)性基團(tuán)的試劑時(shí)。
術(shù)語(yǔ)“保護(hù)性基團(tuán)基本穩(wěn)定的條件”是指具體而言氨基去保護(hù)程度(級(jí)分中發(fā)生不利變化的保護(hù)性基團(tuán)的量相對(duì)于保護(hù)性基團(tuán)的初始量)小于或等于20％的條件。這種程度通常小于或等于10％。優(yōu)選其小于或等于5％。小于或等于1％的去保護(hù)程度是更特別優(yōu)選的。
裂解步驟通常在大于或等于60℃的溫度下實(shí)施。該溫度一般大于或等于70℃。優(yōu)選大于或等于80℃的溫度。裂解步驟通常在小于或等于150℃的溫度下實(shí)施。該溫度通常小于或等于130℃。優(yōu)選小于或等于120℃的溫度。
裂解步驟通常在大于或等于1bar(大氣壓力)的壓力下實(shí)施。優(yōu)選大于或等于2bar的壓力。裂解步驟通常在小于或等于30bar(大氣壓力)的壓力下實(shí)施。優(yōu)選小于或等于5bar的壓力。
在步驟(c)的第一替代形式中，在酸性介質(zhì)中實(shí)施裂解步驟。當(dāng)羰基鍵是酰胺鍵時(shí)，該替代形式特別適用。
在該替代形式中，有利地使用無(wú)機(jī)酸水溶液，例如硫酸、磷酸或氫鹵酸比如氫氟酸和鹽酸。優(yōu)選鹽酸。
如果合適，無(wú)機(jī)酸水溶液的當(dāng)量濃度一般為至少1N。當(dāng)量濃度通常為至少2N。優(yōu)選至少3N。無(wú)機(jī)酸水溶液的當(dāng)量濃度一般為至多8N。當(dāng)量濃度通常為至多6N。優(yōu)選至多4N。
在步驟(c)的第二替代形式中，在堿性介質(zhì)中實(shí)施裂解步驟。當(dāng)羰基鍵是酯或硫酯鍵時(shí)，該替代形式特別適用。
在該替代形式中，有利地使用堿的水溶液，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀或碳酸鈉。
在該替代形式中，通常在至少9的PH、優(yōu)選至少11的PH下實(shí)施裂解反應(yīng)。在該替代形式中，通常在至多13的PH、優(yōu)選至多12的PH下實(shí)施裂解反應(yīng)。
也可以任選地在中性或酸性水介質(zhì)中來(lái)裂解酯或硫酯，特別是硫酯。
在根據(jù)本發(fā)明方法的步驟(d)中，回收對(duì)映體純化合物和氨基酸的對(duì)映體純衍生物，在所述氨基酸中至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)。
例如可以通過(guò)如在步驟(b)中所述的分離技術(shù)來(lái)實(shí)施回收。在優(yōu)選的替代形式中，通過(guò)提取操作回收其中至少一個(gè)氨基酸基團(tuán)被保護(hù)的氨基酸的對(duì)映體純衍生物，例如用在上文步驟(a)中所述的溶劑提取。
利用極性溶劑，特別是酯，優(yōu)選乙酸乙酯，獲得了良好的效果，特別是對(duì)N-磺酰基衍生物來(lái)說(shuō)。N-磺?；苌?，特別是N-芳基磺?；苌?，如果需要的話，可以容易地通過(guò)結(jié)晶進(jìn)行提純。
例如通過(guò)上述活化方法可以從回收的氨基酸對(duì)映體純衍生物開(kāi)始再生試劑。例如在根據(jù)步驟(a)制造反應(yīng)中、任選地在提純和/或活化之后，可以再利用和/或再循環(huán)所回收的氨基酸對(duì)映體純衍生物。
在N-磺化焦谷氨酸的優(yōu)選情況中，氨基酸的對(duì)映體純衍生物可以是對(duì)應(yīng)的N-磺化谷氨酸，N-磺化谷氨酸可以在活化步驟期間環(huán)化，例如通過(guò)PCl5來(lái)實(shí)施。
在根據(jù)本發(fā)明方法的可替代形式中，基于步驟(b)，至少另外回收包含至少一種其它非對(duì)映體的第二級(jí)分，根據(jù)步驟(c)對(duì)該級(jí)分進(jìn)行裂解操作，并且進(jìn)一步回收額外量的氨基酸對(duì)映體純衍生物和任選的富含化合物的其它對(duì)映體的級(jí)分，所述化合物包含能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)。
根據(jù)本發(fā)明的方法和試劑可以用于對(duì)映體的制備或分析分離。該方法和試劑十分適合于對(duì)映體的制備性分離。
本發(fā)明還涉及基于對(duì)映體純谷氨酸或焦谷氨酸的試劑的用途，用于制造包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)的對(duì)映體純化合物，在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)氨基被如上所述的磺?；Ｗo(hù)性基團(tuán)所保護(hù)，并且在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)羧基如上所述是活性的。
這種試劑為經(jīng)濟(jì)地制備對(duì)映體純化合物提供特別好的效果。
下文實(shí)施例的目的在于示例性闡述本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。
實(shí)施例1(2S)-1-甲苯磺酰基焦谷氨?；然?8.2g(0.15mol，1當(dāng)量)的Nα-甲苯磺酰基-L-谷氨酸溶于400ml乙醚中。將反應(yīng)介質(zhì)在0℃下置于氮?dú)庵?。然后?℃下加入94.9g(0.45mol，3當(dāng)量)的PCl5。在環(huán)境溫度下攪拌反應(yīng)介質(zhì)15-20小時(shí)。
隨后通過(guò)燒結(jié)玻璃過(guò)濾器過(guò)濾掉過(guò)量PCl5并將750ml石油醚加入到濾出液中。將混合物放在冰箱中并沉淀出白色固體。通過(guò)過(guò)濾將其回收(產(chǎn)率80％)。
實(shí)施例2.13-[5-(5S)-(1-甲苯磺?；?-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-3-苯基-β-丙氨酸
通過(guò)類(lèi)似于本申請(qǐng)公司的專(zhuān)利申請(qǐng)EP184 243的方法制備91mmol全硅烷化D/L-3-氨基-3-苯基丙酸在130ml乙酸乙酯中的溶液。
25.6g(83mmol，1當(dāng)量)的(2S)-1-甲苯磺?；构劝滨；然锶芙庥?30ml的乙酸乙酯中。將該溶液在0℃下置于氮?dú)庵小?br> 然后加入硅烷化氨基酸溶液，接著再加入12.7g(125mmol，1.5當(dāng)量)三乙胺的40ml乙酸乙酯溶液。大約30分鐘后，停止反應(yīng)。用200ml的5％KHSO4水溶液洗滌介質(zhì)，然后用200ml的5％NaCl水溶液洗滌，最后用200ml的水洗滌。
有機(jī)相被蒸發(fā)，得到油狀物，其在乙醚中第一次被吸收以沉淀出固體，該固體在Büchner漏斗上過(guò)濾出來(lái)。再在乙醚中吸收該固體，過(guò)濾后在烘箱中干燥并磨細(xì)，從而產(chǎn)生31g粉末(產(chǎn)率86％)。
實(shí)施例2.23-[5-(5S)-(1-甲苯磺?；?-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-3-甲基-β-丙氨酸 方法對(duì)應(yīng)于實(shí)施例2.1中的方法，但是反應(yīng)從600mmol的DL-3-甲基-β-丙氨酸開(kāi)始進(jìn)行。獲得的產(chǎn)率為76％。
實(shí)施例2.32-[5-(5S)-(1-甲苯磺?；?-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-3-甲基丁酸 方法對(duì)應(yīng)于實(shí)施例2.1中的方法，但是反應(yīng)從70mmol的DL-纈氨酸開(kāi)始進(jìn)行。獲得的產(chǎn)率為84％。
實(shí)施例2.43-[5-(5S)-(1-甲苯磺?；?-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-脯氨酸 方法對(duì)應(yīng)于實(shí)施例2.1中的方法，但是反應(yīng)從70mmol的DL-脯氨酸開(kāi)始進(jìn)行。獲得的產(chǎn)率為84％。
實(shí)施例2.51-[5-(5S)-(1-甲苯磺?；?-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-(2’-(β-羥乙基))-1-哌啶方法基本對(duì)應(yīng)于實(shí)施例2.1中的方法，但是反應(yīng)從90mmol全硅烷化2-(β-羥乙基)哌啶在100ml乙酸乙酯中的溶液開(kāi)始進(jìn)行，所述溶液與溶于100ml乙酸乙酯中的81.8mmol試劑反應(yīng)，并用NaHCO3洗滌替代KHSO4洗滌。獲得的產(chǎn)率為79％。
實(shí)施例3.13-[5-(5S)-(1-甲苯磺酰基)-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-3-苯基-β-丙氨酸的非對(duì)映體的分離通過(guò)硅膠MPLC(固定相多孔硅膠珠15-20μm，流動(dòng)相乙酸乙酯+0.1％乙酸)分離根據(jù)實(shí)施例2.1獲得的30g受保護(hù)3-氨基-3-苯基丙酸的非對(duì)映異構(gòu)體混合物，從而產(chǎn)生9g具有98.7％的d.e.(非對(duì)映體過(guò)量值)的非對(duì)映異構(gòu)體(tr＝4.30min)和15g具有96.3％的d.e.的其它非對(duì)映異構(gòu)體(tr＝4.55min)。
實(shí)施例3.23-[5-(5S)-(1-甲苯磺?；?-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-3-甲基-β-丙氨酸的非對(duì)映體的分離通過(guò)反相HPLC(固定相Chromasil C18，流動(dòng)相水/乙腈/乙酸梯度)分離根據(jù)實(shí)施例2.2獲得的17g受保護(hù)3-氨基丁酸(tr＝3.00和3.25min)的非對(duì)映異構(gòu)體混合物；獲得5.7g具有97.7％的d.e.的非對(duì)映異構(gòu)體和6.5g具有92.7％的d.e.的其它非對(duì)映異構(gòu)體。
實(shí)施例3.31-[5-(5S)-(1-甲苯磺酰基)-(2-吡咯烷酮)]乙酰胺-(2’-(β-羥乙基))-1-哌啶的非對(duì)映體的分離通過(guò)柱色譜法(固定相Kromasil Sil 16μm，流動(dòng)相乙酸異丙酯中3體積％的異丙醇)分離根據(jù)實(shí)施例2.5獲得的22.5g受保護(hù)2-(β-羥乙基)哌啶的非對(duì)映異構(gòu)體混合物；獲得4.5g具有98.9％的d.e.的非對(duì)映異構(gòu)體(tr＝7.1min)和8.5g具有93.9％的d.e.的其它非對(duì)映異構(gòu)體(tr＝5.4min)。
實(shí)施例4.1對(duì)映體純3-氨基-3-苯基丙酸的分離和Nα-甲苯磺酰基-L-谷氨酸的回收在高壓釜中在120℃下用100ml 4N鹽酸處理在實(shí)施例3.1中回收的3.3g非對(duì)映異構(gòu)體級(jí)分(tr＝4.30min)，持續(xù)16小時(shí)。由此用乙酸乙酯提取可以回收2.2g Nα-甲苯磺?；?L-谷氨酸(產(chǎn)率95％)。
經(jīng)Dowex AG 50W NH4+樹(shù)脂色譜分析后，存在于水相中的3-氨基-3-苯基丙酸以其中性形式被分離。分離出1.0g的D異構(gòu)體，具有98.4％的對(duì)映體過(guò)量值(產(chǎn)率79％)。
權(quán)利要求
1.制造對(duì)映體純化合物的方法，該化合物包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，所述方法開(kāi)始于所述化合物的對(duì)映體混合物，在該方法中(a)使包含對(duì)映體混合物和基于對(duì)映體純氨基酸的試劑的反應(yīng)介質(zhì)在適當(dāng)條件下發(fā)生能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)與活性羧基之間的反應(yīng)，從而形成羰基鍵，其中在所述試劑中氨基酸的至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)并且在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)羧基是活性的；(b)對(duì)所得非對(duì)映體混合物進(jìn)行分離操作，從而獲得基本由非對(duì)映體構(gòu)成的至少一個(gè)級(jí)分；(c)使得至少一部分所述級(jí)分在保護(hù)性基團(tuán)基本穩(wěn)定的條件下經(jīng)歷羰基鍵裂解步驟；和(d)回收所述對(duì)映體純化合物和氨基酸的對(duì)映體純衍生物，其中在所述氨基酸中至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中活性羧基是酸性鹵化物或酸酐，優(yōu)選是酸性氯化物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中羧基被現(xiàn)場(chǎng)活化。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)的方法，其中保護(hù)性基團(tuán)是磺?；?，具體是烷基磺酰基或芳基磺?；瑑?yōu)選芳基磺?；?br> 5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)的方法，其中所述試劑基于選自下列物質(zhì)的對(duì)映體純氨基酸丙氨酸、纈氨酸、正纈氨酸、亮氨酸、正亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、異絲氨酸、高絲氨酸、蘇氨酸、別蘇氨酸、蛋氨酸、乙硫氨酸、谷氨酸、焦谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、鳥(niǎo)氨酸、谷氨酰胺、瓜氨酸、(1-萘基)丙氨酸、(2-萘基)丙氨酸、高苯基丙氨酸、(4-氯苯基)丙氨酸、(4-氟苯基)丙氨酸、(3-吡啶基)丙氨酸、苯基甘氨酸、二氨基庚二酸(2，6-二氨基庚烷-1，7-二酸)、2-氨基丁酸、2-氨基萘滿-2-羧酸、赤式-β-甲基苯基丙氨酸、蘇式-β-甲基苯基丙氨酸、(2-甲氧苯基)丙氨酸、1-氨基-5-羥基茚滿-2-羧酸、2-氨基庚烷-1，7-二酸、(2，6-二甲基-4-羥苯基)丙氨酸、赤式-β-甲基酪氨酸和蘇式-β-甲基酪氨酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中試劑基于(2S)-焦谷氨酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任意一項(xiàng)的方法，其中步驟(a)在堿存在的情況下并且在-30至+50℃的溫度下實(shí)施。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任意一項(xiàng)的方法，其中步驟(b)是結(jié)晶操作或色譜操作。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)的方法，其中能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)選自氨基、羥基或硫羥基，所述氨基任選地被單烷基化。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中羰基鍵是酰胺鍵并且裂解反應(yīng)在酸性介質(zhì)中實(shí)施。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中使用當(dāng)量濃度為1-8N的無(wú)機(jī)酸水溶液，優(yōu)選鹽酸。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11的方法，其中裂解反應(yīng)在60-150℃的溫度下實(shí)施。
13.根據(jù)權(quán)利要求9-12中任意一項(xiàng)的方法，其中包含能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)的化合物是氨基酸。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中氨基酸是β-氨基酸。
15.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中羰基鍵是酯或硫酯鍵并且裂解反應(yīng)在堿性介質(zhì)中實(shí)施。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中裂解反應(yīng)在8-12的PH下實(shí)施。
17.根據(jù)權(quán)利要求15或16的方法，其中裂解反應(yīng)在60-120℃的溫度下實(shí)施。
18.根據(jù)權(quán)利要求15-17中任意一項(xiàng)的方法，其中包含能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)的化合物是醇。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)的方法，其中基于步驟(b)，至少另外回收包含至少一種其它非對(duì)映體的第二級(jí)分，根據(jù)步驟(c)對(duì)該級(jí)分進(jìn)行裂解操作，并且進(jìn)一步回收額外量的氨基酸對(duì)映體純衍生物和任選的富含化合物的其它對(duì)映體的級(jí)分，所述化合物包含能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-19中任意一項(xiàng)的方法，其中從回收的氨基酸對(duì)映體純衍生物開(kāi)始再生試劑。
21.基于對(duì)映體純谷氨酸或焦谷氨酸的試劑的用途，用于制造包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)的對(duì)映體純化合物，在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)氨基被磺酰基保護(hù)性基團(tuán)所保護(hù)，并且在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)羧基是活性的。
全文摘要
制造對(duì)映體純化合物的方法，該化合物包含至少一個(gè)能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)，所述方法開(kāi)始于所述化合物的對(duì)映體混合物，在該方法中(a)使包含對(duì)映體混合物和基于對(duì)映體純氨基酸的試劑的反應(yīng)介質(zhì)在適當(dāng)條件下發(fā)生能夠與活性羧基反應(yīng)的官能團(tuán)與活性羧基之間的反應(yīng)，從而形成羰基鍵，其中在所述試劑中氨基酸的至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)并且在該試劑中氨基酸的至少一個(gè)羧基是活性的；(b)對(duì)所得非對(duì)映體混合物進(jìn)行分離操作，從而獲得基本由非對(duì)映體構(gòu)成的至少一個(gè)級(jí)分；(c)使得至少一部分所述級(jí)分在保護(hù)性基團(tuán)基本穩(wěn)定的條件下經(jīng)歷羰基鍵裂解步驟；和(d)回收所述對(duì)映體純化合物和氨基酸的對(duì)映體純衍生物，其中在所述氨基酸中至少一個(gè)氨基被保護(hù)性基團(tuán)保護(hù)。
文檔編號(hào)C07D207/48GK1845934SQ200480025613
公開(kāi)日2006年10月11日 申請(qǐng)日期2004年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月9日
發(fā)明者羅蘭·卡倫斯, 喬治斯·布隆迪爾, 西里爾·普塞, 羅南·吉爾 申請(qǐng)人:索爾維公司