專(zhuān)利名稱(chēng)：毛葉假鷹爪素，其制法和抗腫瘤和艾滋病的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及全新骨架化合物毛葉假鷹爪素C及其衍生物的全合成方法；該先導(dǎo)化合物的系列衍生物，及其制備方法和不同合成途徑；毛葉假鷹爪素B的合成；以上各種化學(xué)結(jié)構(gòu)及含它們的藥物組合物及其在抗腫瘤或抗艾滋病中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
毛葉假鷹爪素C是本發(fā)明人從中國(guó)民間藥用植物毛葉假鷹爪根中提取、分離、純化得到的一種具有抗腫瘤活性的天然化合物。其化合物的骨架的有關(guān)研究已獲得中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利，專(zhuān)利號(hào)為ZL01126471.3。
desmosdumotin C毛葉假鷹爪素C該化合物的化學(xué)名稱(chēng)為2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)已烯(4，5)二酮。經(jīng)體外抗癌活性試驗(yàn)，該化合物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有明顯的抑制作用。其抑制之強(qiáng)度分別為骨癌細(xì)胞HOS(bone cancer cell)ED50＜2.5μg/ml，乳腺癌細(xì)胞MCF-7(breast cancer cell)ED50＜3.8μg/ml，卵巢癌細(xì)胞IA9(ovarian cancer cell)ED50＜4.0μg/ml。同時(shí)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞KB(epidermoid carcinoma of the nasopharynx)ED50＜6.5μg/ml，而對(duì)KB-VIN(MDR)即對(duì)長(zhǎng)春新堿(vincristine)有抗藥性之鼻咽癌細(xì)胞亦顯示有更好的抑制作用，其強(qiáng)度為ED50＜5.6μg/ml。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于以骨架化合物毛葉假鷹爪素C作為先導(dǎo)化合物，對(duì)其進(jìn)行全合成、結(jié)構(gòu)修飾與改造、制備其一系列衍生物。并通過(guò)對(duì)其結(jié)構(gòu)與活性的研究，尋找出活性作用基團(tuán)，開(kāi)發(fā)一系列高效抗腫瘤或抗艾滋病毒活性的新化合物。進(jìn)而開(kāi)發(fā)出全新結(jié)構(gòu)的抗癌及抗艾滋病新型藥物。
為了完成本發(fā)明的目的，第一方面，本發(fā)明提供一種具有通式(I)的毛葉假鷹爪素類(lèi)化合物， 其中R1＝C2-C8R1’所述的C2-C8為飽和/或不飽和的烴，不飽和烴為順、反異構(gòu)體，其中R1’可選自芳環(huán)，或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基等取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基等取代的芳雜環(huán)。
優(yōu)選的是R1＝CH2＝CH2R1’其中R1’選自芳環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。其中R1’更優(yōu)選的是選自4-溴苯基、4-氯苯基、4-碘苯基、羥基取代的苯基、低級(jí)烷基取代的苯基、烷氧基取代的苯基、2-呋喃取代基、2-噻吩取代基、2-噻唑取代基。
具體而言，本發(fā)明的化合物包括2-[1’-羥基-3-(4-溴苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物2)；2-[1’-羥基-3-(2-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物3)；2-[1’-羥基-3-(3-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物4)；2-[1’-羥基-3-(4-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物5)；2-[1’-羥基-3-(4羥苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物6)；2-[1’-羥基-2-呋喃-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物7)；2-[1’-羥基-2-噻吩-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物8)；2-[1’-羥基-2-噻唑-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物9)；7-羥基-6，8，8-三甲基-2-苯基-2，3-二氫-8H-苯并吡喃-4，5-二酮(化合物11)；2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-羥基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(化合物12)；2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-6，6-二甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(化合物13)。
第二方面，本發(fā)明提供一種制備上述通式(I)化合物的合成方法，該方法包括的步驟為a)2，4，6-三羥苯乙酮和甲醇鈉溶于無(wú)水乙醇中，與甲基碘回流；反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提??；合并有機(jī)層，干燥，濃縮后得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮；b)對(duì)所述的2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為-78℃得到其甲基化產(chǎn)物2-乙酰基-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、苯甲醛在室溫下攪拌，提取反應(yīng)混合物；提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮。
在本發(fā)明的這一制備方法中，還可以包括的步驟為用選自4-溴苯基芳醛、4-甲氧基苯基芳醛、3-甲氧基苯基芳醛、2-甲氧基苯基芳醛、4-羥基苯基芳醛、2-呋喃芳醛、2-噻吩芳醛、2-噻唑芳醛來(lái)代替該方法步驟(C)中的苯甲醛。
第三方面，本發(fā)明還提供一種通(I)化合物的制備方法，其包括的步驟為a)2，4，6-三羥苯乙酮溶于AcOH中，同Ac2O和BF3OEt2回流，反應(yīng)產(chǎn)物冷卻后，采用NaOH調(diào)節(jié)pH2-6；用5％的MeOH/AcOEt提取，合并有機(jī)相并真空干燥，產(chǎn)物用MeOH溶解后與NaOH常溫下回流，回流產(chǎn)物經(jīng)HCL酸化后，用MeOH/AcOEt提取，提取物經(jīng)鹽洗、干燥、硅膠柱分離得到1，5-二乙?；?2，4，6-三羥基苯；b)1，5-二乙?；?2，4，6-三羥基苯與濃硫酸發(fā)生強(qiáng)氧化還原反應(yīng)，與TMSCHN2進(jìn)行甲基化反應(yīng)，產(chǎn)物用乙酸乙酯/甲醇提取分離得到2-乙酰基-5-甲氧基-6，6-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-6，6-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液在強(qiáng)堿條件下與苯甲醛反應(yīng)，提取反應(yīng)混合物，經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶。
第四方面，本發(fā)明還涉及通式(I)化合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
第五方面，本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，其中含有藥物有效劑量的通式(I)化合物和藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明還涉及該組合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
第六方面，本發(fā)明提供一種通過(guò)如權(quán)利要求1所述的通式(I)化合物的R1位和2位羰基發(fā)生和環(huán)反應(yīng)生成通式(II)或者通式(III)化合物， 其中R1＝C2-C8R1’所述的C2-C8為飽和/或不飽和的烴，不飽和烴為順、反異構(gòu)體，其中R1’選自芳環(huán)、選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)、雜環(huán)、選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)、芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。
優(yōu)選的是，其中R1＝CH2＝CH2R1’其中R1’選自芳環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。優(yōu)選的是R1’為選自4-溴苯基、4-氯苯基、4-碘苯基、羥基取代的苯基、低級(jí)烷基取代的苯基、烷氧基取代的苯基、2-呋喃取代基、2-噻吩取代基、2-噻唑取代基。
具體而言，本發(fā)明的環(huán)合化合物，包括7-羥基-6，8，8-三甲基-2-苯基-8H-苯并吡喃-4，5-二酮，或7-甲氧基-6，8，8-三甲基-2-苯基-8H-苯并吡喃-4，5-二酮。
第七方面，本發(fā)明還提供一種本發(fā)明通式(II)或者通式(III)環(huán)合化合物的制備方法，包括以下步驟a)2，4，6-三羥苯乙酮和甲醇鈉溶于無(wú)水乙醇中，與甲基碘回流；反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提??；合并有機(jī)層，干燥，濃縮后得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮；b)對(duì)所述的2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為-78℃溫度得到其甲基化產(chǎn)物2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、苯甲醛在室溫下攪拌，提取反應(yīng)混合物；提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮；d)向所述的2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮的無(wú)水DMSO溶液中，加入碘溶液、濃硫酸?；旌衔锛訜?0-90℃，優(yōu)選80℃，直至反應(yīng)結(jié)束，然后提取，提取物經(jīng)水洗、干燥后，于硅膠色譜柱上分離。
第八發(fā)方面，本發(fā)明還涉及通式(II)和/或(III)化合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
第九方面，本發(fā)明還涉及一種藥物組合物，其中含有藥物有效劑量的如權(quán)利要求11所述的通式(II)和/或(III)化合物和藥學(xué)上可接受的載體，以及所述的組合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
第十方面，本發(fā)明還提供一種以下結(jié)構(gòu)式示出的毛葉假鷹爪素C的制備方法，包括以下步驟 desmosdumotin Ca)2，4，6-三羥苯乙酮和甲醇鈉溶于無(wú)水乙醇中，與甲基碘回流；反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提?。缓喜⒂袡C(jī)層，干燥，濃縮后得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮；b)對(duì)所述的2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為-78℃溫度得到其甲基化產(chǎn)物2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、苯甲醛在室溫下攪拌，提取反應(yīng)混合物；提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮。
由此可見(jiàn)，本申請(qǐng)披露的發(fā)明內(nèi)容包括四部分首先是毛葉假鷹爪素C骨架先導(dǎo)化合物的全合成方法(路線(xiàn))；第二部分是毛葉假鷹爪素C的衍生物及其不同合成方法(路線(xiàn))；第三部分是毛葉假鷹爪素B的全合成；第四部分是上述化合物在抗腫瘤或抗HIV中的應(yīng)用。
具體實(shí)施方案第一部分.毛葉假鷹爪素C的全合成毛葉假鷹爪素C的合成過(guò)程從2，4，6-三羥苯乙酮開(kāi)始。
2，4，6-三羥苯乙酮(2)在甲醇鈉存在的情況下與3當(dāng)量碘甲烷回流得2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮(3)，產(chǎn)率56％，同時(shí)伴有四甲基產(chǎn)物(4)的生成，產(chǎn)率9％。產(chǎn)物(3)的選擇性甲基化可在-78℃的低溫下進(jìn)行，TMSCHN2作用下以中等產(chǎn)率完成。提高溫度并不能使反應(yīng)選擇性升高，反而降低了目標(biāo)化合物的產(chǎn)率。C6位的強(qiáng)酸性質(zhì)子使反應(yīng)不能在其它條件下進(jìn)行，
最后，在50％KOH水溶液中3-羥基丁醛與苯甲醛縮合得到毛葉假鷹爪素C(1)，產(chǎn)率54％，得到兩種互變異構(gòu)體的混合物，比率為13∶1。在CHCl3-MeOH中重結(jié)晶后以黃色針晶的形式得到主要異構(gòu)體。
第二部分.毛葉假鷹爪素C的衍生物及它們的合成路線(xiàn)一.本發(fā)明的毛葉假鷹爪素C的衍生物的結(jié)構(gòu)為通式(I)所示 其中R1＝C2-C8R1’，所述的C2-C8為飽和/或不飽和的烴，不飽和烴可為順、反異構(gòu)體；其中R1’可選自芳環(huán)、選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)、雜環(huán)、選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)、芳雜環(huán)和選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。
根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的化合物為具有通式(I)的化合物，其中R1＝CH2＝CH2R1’，
其中R1’可選自芳環(huán)、選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)、雜環(huán)、選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)、芳雜環(huán)和選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。具體而言，R1’優(yōu)選的取代基為例如o-，p-，m鹵素取代的苯基，例如4-溴苯基，4-氯苯基，4-碘苯基；o-，p-，m-羥基取代的苯基；o-，p-，及m-烷基，優(yōu)選為低級(jí)烷基取代的苯基，烷氧基取代的苯基，2-呋喃取代基，2-噻吩取代基，2-噻唑取代基。
R1還可以進(jìn)一步和2位羰基發(fā)生合環(huán)反應(yīng)生成具有如下通式II和式III結(jié)構(gòu)之化合物 通式II 通式III二.合成路線(xiàn)本發(fā)明還涉及以毛葉假鷹爪素C為先導(dǎo)化合物制備的系列衍生物的合成方法，毛葉假鷹爪素C提供了新的有希望的先導(dǎo)結(jié)構(gòu)，其新的類(lèi)似物、衍生物能夠作為潛在的抗癌介質(zhì)。
采用其他芳環(huán)、雜環(huán)、取代的芳環(huán)代替末端苯基，可以得到一些衍生物；對(duì)其中的A環(huán)進(jìn)行修飾，得到另外一些化合物衍生物。其中部分衍生物可以以下面的反應(yīng)路線(xiàn)來(lái)合成方案A， 按照方案A，以2，4，6-三羥苯乙酮為起始物，經(jīng)過(guò)三步可完成毛葉假鷹爪素C的全合成。最后一步時(shí)，使用不同的芳醛代替苯甲醛，所獲得化合物為以毛葉假鷹爪素C為先導(dǎo)化合物的不同的毛葉假鷹爪素C的類(lèi)似物。
再以它們?yōu)槠鹗挤磻?yīng)物進(jìn)行合環(huán)反應(yīng)，可繼續(xù)生成另一系列衍生物(見(jiàn)實(shí)施例2-9)。
方案B，部分毛葉假鷹爪素C的衍生物還可以通過(guò)下面的反應(yīng)路線(xiàn)來(lái)合成 通過(guò)改良的Marchand’s醛醇縮合反應(yīng)，將2，4，6-三羥苯乙酮乙?；?。C-5位雙烷基取代后，在強(qiáng)酸(濃硫酸)作用下發(fā)生脫乙酰基反應(yīng)，取代基優(yōu)選為甲基，該產(chǎn)物與RCHO在堿性條件下發(fā)生縮合，得到毛葉假鷹爪素C的其它衍生物。
方案C，用過(guò)量的MeI和NaOMe處理2，4，6-三羥苯乙酮足以形成并得到四甲基衍生物。
總之，本發(fā)明的上述的合成方法包括1.反應(yīng)類(lèi)型甲基化，氧化還原、取代、乙?；?、Marchand(醛醇縮合反應(yīng))、環(huán)化反應(yīng)等。
2.反應(yīng)條件通常為時(shí)間約4-24小時(shí)；溫度約-78℃。
第三部分.毛葉假鷹爪素B的全合成活性化合物毛葉假鷹爪素B結(jié)構(gòu)特別具有與眾不同的A環(huán)結(jié)構(gòu)(A未示出)或者合環(huán)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)(參見(jiàn)以下的產(chǎn)物1，3，4，6)。毛葉假鷹爪素C可能是毛葉假鷹爪素B的生物合成前體。
前面已經(jīng)描述了毛葉假鷹爪素C的全合成以及一些具有不同末端芳環(huán)或其它結(jié)構(gòu)取代的衍生物的化學(xué)合成。毛葉假鷹爪素C分子內(nèi)成環(huán)后得到毛葉假鷹爪素B(黃酮1)，同樣得到新的類(lèi)黃酮3、4。
毛葉假鷹爪素C在DMSO中與碘和濃硫酸反應(yīng)，得到毛葉假鷹爪素B(1)，產(chǎn)率為33％，并伴有7-甲氧基衍生物，產(chǎn)率55％。合成得到的毛葉假鷹爪素B(1)與天然提取的產(chǎn)物具有相同的光譜數(shù)據(jù)。濃鹽酸下通過(guò)毛葉假鷹爪素C的甲醇-丙酮溶液回流可得(±)-4，產(chǎn)率13％并伴有查耳酮5生成，產(chǎn)率40％。
第四部分.本發(fā)明化合物在抗腫瘤或抗HIV中的應(yīng)用本發(fā)明所述的毛葉假鷹爪素C及其系列衍生物通過(guò)體外細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)考察具有抗癌和抗艾滋病毒的活性。動(dòng)物體內(nèi)抑癌試驗(yàn)顯示有較好的抑制腫瘤作用，且安全性好。
體外細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)采用的腫瘤細(xì)胞系皆為人體癌細(xì)胞其中包括肺癌細(xì)胞(A549)，乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、卵巢癌細(xì)胞(IA9)、鼻咽癌細(xì)胞(KB)和對(duì)長(zhǎng)春新堿有抗藥性的鼻咽癌細(xì)胞(KB-VIN)、前列腺癌細(xì)胞(PC-3)、黑素瘤細(xì)胞(SK-MEL-2)、腸癌(HCT-8)，腎癌細(xì)胞(CAKI)、骨癌細(xì)胞(HOS)等十幾種腫瘤細(xì)胞。化合物的抗癌能力用半數(shù)有效劑量(ED50)來(lái)表示。對(duì)照品為V-16(依托泊苷，鬼臼乙叉甙，Etoposide)。
體內(nèi)腫瘤活性試驗(yàn)采用小鼠S180的急毒試驗(yàn)和抑瘤作用試驗(yàn)。方法急性毒性試驗(yàn)根據(jù)預(yù)測(cè)按常規(guī)進(jìn)行毛葉假鷹爪素C的靜脈途徑給藥對(duì)昆明小鼠的LD50。抑瘤試驗(yàn)對(duì)小鼠S180肉瘤采用腫瘤均獎(jiǎng)法，皮下接種，給藥，最后與陰性對(duì)照組比較，計(jì)算抑瘤率，以P值統(tǒng)計(jì)顯著性。結(jié)果毛葉假鷹爪素C樣品對(duì)昆明小鼠靜脈單次給藥LD50為46.0mg/kg?？鼓[瘤試驗(yàn)以10、5及2.5mg/kg劑量，ivx 10qd的治療方案對(duì)小鼠S180肉瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別為47.02％、43.16％、30.18％。三個(gè)劑量均產(chǎn)生一定的抗腫瘤效果，且在療效試驗(yàn)時(shí)即使高劑量組動(dòng)物體重變化與陰性對(duì)照組相似，提示本品具有較好的安全性。
本發(fā)明化合物的抗艾滋病毒能力由治療指數(shù)(Therapeutic Index，TI)表示。具體操作過(guò)程為H9淋巴細(xì)胞在含有10％小牛血清和L-谷氨酸鹽的RPMI 1640型培養(yǎng)基中，于37℃，5％CO2的條件下連續(xù)培養(yǎng)。試驗(yàn)樣品溶解于二甲基亞砜中，配制成100，20，4和0.8μg/mL的系列濃度。首先，H9淋巴細(xì)胞用艾滋病毒(HIV-1)進(jìn)行感染，病毒儲(chǔ)備液的TCID50值為104感染單位/mL，取適量病毒儲(chǔ)備液加入到H9淋巴細(xì)胞中，使感染濃度達(dá)到0.1～0.01感染單位/細(xì)胞。同時(shí)，取等量的H9淋巴細(xì)胞加入相同量的培養(yǎng)基，用于測(cè)定細(xì)胞毒活性IC50。兩者都置于37℃和5％CO2孵箱中培養(yǎng)4小時(shí)，取出，洗滌3次，分別鋪入24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，加入不同濃度的試驗(yàn)樣品或?qū)φ諛悠罚渲嘘?yáng)性對(duì)照為齊多夫定(疊氮胸苷，AZT)，陰性對(duì)照為等量的培養(yǎng)液。將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃，5％CO2孵箱中培養(yǎng)4天后，收集去除細(xì)胞后的上清液作P24抗原檢查。P24抗原是HIV的殼蛋白，通過(guò)對(duì)其計(jì)數(shù)就可確定HIV的數(shù)量，從而計(jì)算出化合物抑制HIV的EC50值?；衔锏腎C50值由未被HIV感染的H9淋巴細(xì)胞計(jì)算得到。例如，毛葉假鷹爪素D經(jīng)上述方法測(cè)定，其IC50值為10.7μg/mL，EC50值為0.022μg/mL。TI＝IC50/EC50＝10.7/0.022＝489。假鷹爪素(Lawinal)經(jīng)上述方法測(cè)定，其IC50為104μg/mL，EC50為2.30μg/mL，治療指數(shù)(Therapeutic Index，TI＝IC50/EC50)為45.2。
按照本發(fā)明，本發(fā)明還涉及含至少一種上述化合物或其衍生物及藥用載體或輔形劑的藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明所合成之任一化合物及其衍生物可以與藥用載體或賦形劑組成藥物組合物。該藥物組合物可口服或通過(guò)非腸道途徑給藥。本發(fā)明化合物及其衍生物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備。適用口服或非腸道給藥的劑型，包括但不限定于片劑、膠囊、溶液、混懸液、顆粒劑、注射劑或透皮制劑等。
本發(fā)明還涉及至少一種上述化合物在制備用于治療與腫瘤或HIV感染有關(guān)的疾病或癥狀的藥物中的用途。本發(fā)明的化合物對(duì)哺乳動(dòng)物包括人的一般使用劑量為0.5-10mg/kg體重。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，下述實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而并非對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1毛葉假鷹爪素C及其兩個(gè)成環(huán)衍生物(化合物I和II)的制備毛葉假鷹爪素C的合成路線(xiàn)依據(jù)方案A進(jìn)行；兩個(gè)成環(huán)衍生物的制備在此基礎(chǔ)上依據(jù)毛葉假鷹爪素B的合成方法進(jìn)行。
化合物I(7-羥基-6，8，8-三甲基-2-苯基-8H-苯并吡喃-4，5-二酮)化合物II(7-甲氧基-6，8，8-三甲基-2-苯基-8H-苯并吡喃-4，5-二酮)合成路線(xiàn) 化合物I 化合物IIa)2，4，6-三羥苯乙酮(1,487mg，2.9mmol)和甲醇鈉(1.95ml，3.7mmol)溶于無(wú)水乙醇(3ml)與甲基碘(0.6ml，3.3mmol)回流。反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提取三次。合并有機(jī)層，干燥，濃縮。剩余的以乙酸乙酯-正己烷(1∶9 to 1∶4，v/v)為洗脫劑在硅膠上進(jìn)行色譜分離，得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮，收率為56％。
b)2-乙酰基-4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮的甲基化反應(yīng)要在低溫(-78℃)下進(jìn)行。將2M TMSCHN2乙醚溶液緩緩加入到2-乙酰基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮(412mg，1.96mmol)溶液(2∶1，6ml)中。過(guò)量TMSCHN2用乙酸分解。混合物用乙酸乙酯提取三次，合并提取液，Na2SO4干燥，真空濃縮，以乙酸乙酯-正己烷(1∶2)為洗脫劑，在硅膠上進(jìn)行柱層析，純化得到甲基化產(chǎn)物，收率為61％。
c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液(72mg，0.32mmol)與50％KOH水溶液(1ml)、苯甲醛(0.1ml，0.99mmol)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮。
d)2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(97mg，0.31mmol)的無(wú)水DMSO(3mL)溶液中，緩緩加入0.5v/w％碘溶液(1mL，0.02mmol of I2)、濃硫酸?；旌衔锛訜?小時(shí)后，繼續(xù)緩慢滴加濃硫酸，反應(yīng)1.5小時(shí)后用10％Na2S2O3冰浴，用EtOAc提取，提取物經(jīng)水洗、干燥后，于硅膠色譜柱上分離得化合物1(30mg，收率33％)，化合物2(52mg，收率54％)。
化合物I的理化參數(shù)為黃色棱晶mp224-224.5℃(二氯甲烷-正己烷CH2Cl2-hexane)(熔點(diǎn).217-218℃).3紅外光譜IR(KBr)1669，1633，1602，1553，1454，1432，1300，1162，873cm-1.核磁共振氫譜1H-NMR(CDCl3)δ13.1(s，1H，chelated-OH)，7.84-7.77(m，2H，Ar-2’，6’-H)，7.66-7.53(m，3H，Ar-3’，4’，5’-H)，6.90(s，1H，3-H)，1.88(s，3H，6-CH3)，1.59(s，6H，8-CH3X2).質(zhì)譜MS m/z 297(M++1)，282(M++1-CH3)，269(M++1-CO).
化合物II的理化參數(shù)為黃色棱晶，mp212-213℃(EtOAc-hexane).紅外光譜IR(KBr)1675，1405，1124cm-1.核磁共振氫譜1H-NMR(CDCl3)δ7.80-7.74(m，2H，Ar-2’，6’-H)，7.58-7.50(m，3H，Ar-3’，4’，5’-H)，6.84(s，1H，3-H)，3.96(s，3H，7-OCH3)1.99(s，3H，6-CH3)，1.65(s，6H，8-CH3X2).質(zhì)譜MS m/z 311(M++1).
實(shí)施例22-[1’-羥基-3-(4-溴苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物2)的全合成合成路線(xiàn) (2-[1`-羥基-3-R-取代-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀基-1，3-二酮化合物)合成方法
采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟b)中的反應(yīng)溫度為-78℃，而且步驟c)中，2-乙酰基5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液(72mg，0.32mmol)與50％KOH水溶液(1ml)、4-溴苯基芳醛(RCHO)(0.1ml，0.99mmol)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物2(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物2“2-[1’-羥基-3-(4-溴苯基)-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)2976，2935，1657，1623，1517，1488，1468，1429cm-1.1H-NMR(CDCl3)19.20(s)and 18.66(s)(11∶1，1H，chelated-OH)，8.51(d)and 8.30(d)(1∶11，1H，J＝15.9Hz，trans-olefinic proton)，7.84(d)and 7.83(d)(1∶11，1H，J＝15.9Hz，trans-olefinic proton)，7.56-7.48(m，4H，Ar-2”，3”，5”，6”-H)，3.95(s)and 3.88(s)(11∶1，3H，5-OCH3)，1.99(s)and 1.94(s)(11∶1，3H，4-CH3)，1.46(s)and1.36(s)(1∶11，6H，6-CH3x2).MS m/z 391and 393(M+，1∶1).
實(shí)施例32-[1’-羥基-3-(2-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物3)的全合成合成方法采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟c)2-乙?；?-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、2-甲氧基苯基芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物3(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物32-[1’-羥基-3-(2-甲氧苯基)-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)2976，2938，1657，1615，1513，1487，1465，1423，1246cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.16(s)and 18.82(s)(2.5∶1，1H，chelated-OH)，8.54(d)and 8.38(d)(1∶2.5，1H，J＝15.5Hz，trans-olefinic proton)，8.39(d)and 8.31(d)(1∶2.5，1H，J＝15.5Hz，trans-olefinic proton)，7.79(dd)and 7.76(dd)(1∶2.5，1H，J＝6.9and 1.2Hz，Ar-6”-H)，7.37(ddd)and 7.35(ddd)(1∶2.5，1H，J＝8.2，6.9 and 1.2Hz，Ar-4”-H)，7.00-6.87(m，2H，Ar-3”，5”-H)，3.94(s)and 3.90(s)(2.5∶1，3H，5-OCH3)，3.89(s)and 3.87(s)(2.5∶1，3H，Ph-OCH3)，1.98(s)and 1.94(s)(2.5∶1，3H，4-CH3)，1.45(s)and 1.36(s)(1∶2.5，6H，6-CH3X2).MS m/z 343(M++1).
實(shí)施例42-[1’-羥基-3-(3-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物4)的全合成合成方法采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟b)中的反應(yīng)溫度為-50℃，步驟c)2-乙?；?-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、3-甲氧基苯基芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物4(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物42-[1’-羥基-3-(3-甲氧苯基)-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)2976，2938，1656，1624，1580，1514，1450，1425，1256cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.16(s)and 18.75(s)(3.5∶1，1H，chelated-OH)，8.50(d)and 8.29(d)(1∶3.5，1H，J＝15.5Hz，trans-olefinic proton)，7.91(d)and 7.89(d)(1∶3.5，1H，J＝15.5Hz，trans-olefinic proton)，7.34-7.12(m，3H，Ar-2”，5”，6”-H)，6.98-6.90(m，2H，Ar-4”-H)，3.95(s)and 3.88(s)(3.5∶1，3H，5-OCH3)，3.84(s，3H，Ph-OCH3)，1.99(s)and 1.94(s)(3.5∶1，3H，4-CH3)，1.46(s)and 1.37(s)(1∶3.5，6H，6-CH3X2).MS m/z 343(M++1)實(shí)施例52-[1’-羥基-3-(4-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物5)的全合成合成方法
采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟c)2-乙?；?-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、4-甲氧苯基芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物5(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物52-[1`-羥基-3-(4-甲氧苯基)-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)2975，2934，1656，1621，1600，1572，1510，1423，1243，1171cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.19(s，1H，chelated-OH)，8.23(d，1H，J＝15.5Hz，trans-olefinic proton)，7.94(d，1H，J＝15.5Hz，trans-olefinic proton)，7.68-7.61(m，2H，Ar-2”，6”-H)，6.95-6.87(m，2H，Ar-3”，5”-H)，3.95(s，3H，5-OCH3)，3.85(s，3H，Ph-OCH3)，2.00(s，3H，4-CH3)，1.38(s，6H，6-CH3X2).MS m/z 343(M++1)。
實(shí)施例62-[1’-羥基-3-(4羥苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物6)的全合成合成方法采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟c)2-乙?；?-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、4-羥基苯基芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物6(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物62-[1’-羥基-3-(4-羥基苯基)-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)2359，2331，1647，1619，1600，1518，1446，1415，1148，830，771cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.15(s)and 18.81(s)(2∶1，1H，chelated-OH)，8.32(d)and 8.14(d)(1∶2，1H，J＝15.7Hz，trans-olefinic proton)，7.91(d)and 7.89(d)(1∶2，1H，J＝15.7Hz，trans-olefinic proton)，7.54(d)and 7.53(d)(1∶2，2H，J＝8.6Hz，Ar-2”，6”-H)，6.82(d)and 6.81(d)(1∶2，2H，J＝8.6Hz，Ar-3”，5”-H)，3.91(s)and 3.85(s)(2∶1，3H，5-OCH3)，2.36(br s，1H，Ph-OH)，1.95(s)and 1.91(s)(2∶1，3H，4-CH3)，1.42(s)and 1.33(s)(1∶2，6H，6-CH3X2).MS m/z 327(M+-1).
實(shí)施例72-[1’-羥基-2-呋喃-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物7)的全合成合成方法采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟c)2-乙?；?-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、2-呋喃芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物7(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物72-[1’-羥基-3-呋喃-2-丙烯叉基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)3120，2986，2945，1654，1626，1558，1502，1442，1414cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.07(s)and 18.71(s)(2.2∶1，1H，chelated-OH)，8.35(d)and 8.15(d)(1∶2.2，1H，J＝15.7Hz，trans-olefinic proton)，7.73(d)and 7.68(d)(1∶2.2，1H，J＝15.7Hz，trans-olefinic proton)，7.54(d)and 7.52(d)(1∶2.2，1H，J＝0.8Hz，Ar-5”-H)，6.75(d)and 6.72(d)(1∶2.2，1H，J＝3.1Hz，Ar-3”-H)，6.50(dd)and 6.48(dd)(1∶2.2，1H，J＝3.1and 0.8Hz，Ar-4”-H)，3.94(s)and 3.87(s)(2.2∶1，3H，5-OCH3)，1.98(s)and 1.94(s)(2.2∶1，3H，4-CH3)，1.45(s)and 1.36(s)(1∶2.2，6H，6-CH3X2).MS m/z303(M++1).
實(shí)施例82-[1’-羥基-2-噻吩-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物8)的全合成合成方法采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟c)2-乙酰基5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、2-噻吩芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物8(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物82-(3’-噻吩-1’-羥基-丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)3083，2978，2934，1655，1607，1521，1501，1467，1447，1408，1199，1150cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.17(s)and 18.79(s)(2.5∶1，1H，chelated-OH)，8.34(d)and 8.15(d)(1∶2.5，1H，J＝15.6Hz，trans-olefinic proton)，8.08(d)and 8.05(d)(1∶2.5，1H，J＝15.6Hz，trans-olefinic proton)，7.49-7.34(m，2H，Ar-3”，5”-H)，7.11-7.04(m，1H，Ar-4”-H)，3.94(s)and 3.87(s)(2.5∶1，3H，5-OCH3)，1.98(s)and 1.94(s)(2.5∶1，3H，4-CH3)，1.45(s)and 1.36(s)(1∶2.5，6H，6-CH3X2).MS m/z319(M++1).
實(shí)施例92-[1’-羥-2-噻唑-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物9)的全合成(合成路線(xiàn)同上)合成方法采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟c)2-乙?；?-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、2-噻唑芳醛(RCHO)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取。提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物9(毛葉假鷹爪素C的衍生物之一)。
化合物92-(3’-噻唑-1’-羥基-丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-稀-1，3-二酮”的理化性質(zhì)IR(KBr)3078，2976，2934，1655，1621，1517，1470，1448，1433，1387，1199，1136，974，942cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.02(s)and 18.50(s)(2.5∶1，1H，chelated-OH)，8.65(d)and 8.44(d)(1∶2.5，1H，J＝15.6Hz，trans-olefinicproton)，8.03(d)and 8.00(d)(1∶2.5，1H，Ｊ＝15.6Hz，trans-olefinic proton)，7.98-7.92(m，1H，Ar-4”-H)，7.48-7.42(m，1H，Ar-5”-H)，3.96(s)and 3.89(s)(2.5∶1，3H，5-OCH3)，2.00(s)and 1.94(s)(2.5∶1，3H，4-CH3)，1.47(s)and 1.37(s)(1∶2.5，6H，6-CH3X2).MSm/z 320(M++1).
由上述的實(shí)施例制得的化合物的具體結(jié)構(gòu)如下
化合物2 化合物6 化合物3 化合物7 化合物4 化合物8 化合物5 化合物9化合物2 R4-溴苯基；化合物6R4-羥基苯基；化合物3 R2-甲氧苯基；化合物7 R呋喃基；化合物4 R3-甲氧苯基；化合物8 R噻吩基；化合物5 R4-甲氧苯基；化合物9 R噻唑基；實(shí)施例107-羥基-6，8，8-三甲基-2-苯基-2，3-二氫-8H-苯并吡喃-4，5-二酮(化合物11)和2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-羥基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(化合物12)合成路線(xiàn)
化合物11化合物12采用實(shí)施例1相同的步驟，不同是的步驟d)2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(94mg，0.30mol)無(wú)水丙酮溶液中，加入甲醇(3mL)、濃鹽酸(1mL)，回流1小時(shí)，冷卻后，揮發(fā)產(chǎn)物用真空干燥后，乙酸乙酯-水分離，有機(jī)相中的提取物經(jīng)鹽洗、干燥、濃縮后在硅膠色譜柱上以乙酸乙酯-正己烷hexane(1∶4-1∶1，v/v)為洗脫劑分離得到化合物11(12mg，收率13％)和化合物12(36mg，收率40％)化合物11的理化性質(zhì)為黃色粉末mp159-160.5℃(CH2Cl2-hexane).IR(KBr)2978，2930，2359，1669，1622，1559，1413，1290，1150cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ11.62(s，1H，OH)，D2O disappeared)，7.52-7.38(m，5H，Ar-H)，5.58(dd，1H，J＝13.8 and 3.8Hz，2-H)，3.10(dd，1H，J＝17.3 and 13.8Hz，3-Hax)，2.88(dd，1H，J＝17.3 and 3.8Hz，3-Heq)，1.81(s，3H，5-CH3)，1.45(s，3H，8-CH3)，1.41(s，3H，8-CH3).MS m/z 299(M++1).
化合物12的理化性質(zhì)為黃色粉末，mp150-151℃(CH2Cl2-hexane).IR(KBr)3264(br)，1621，1510，1447，1470，1433，1230，1117cm-1.1H-NMR(CDCl3)δ19.19(s)and 18.71(s)(3∶1，1H，chelated-OH)，8.59(d)and 8.33(d)(1∶3，1H，J＝15.4Hz，trans-olefinic proton)，7.96(d)and 7.92(d)(1∶3，1H，J＝15.4Hz，trans-olefinic proton)，7.74-7.62(m，2H，Ar-2”，6”-H)，7.47-7.34(m，3H，Ar-3”，4”，5”-H)，5.89(s)and 5.36(s)(3∶1，1H，5-OH，D2O disappeared)，1.93(s)and 1.90(s)(3∶1，3H，4-CH3)，1.54(s)and1.45(s)(1∶3，3H，6-CH3X2).MS m/z 297(M+-1).
實(shí)施例112-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-6，6-二甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(化合物13)的合成合成路線(xiàn)

化合物13a)以2，4，6-三羥苯乙酮為起始物，進(jìn)行改進(jìn)的Marchand反應(yīng)2，4，6-三羥苯乙酮溶于AcOH中，同Ac2O和BF3OEt2回流21小時(shí)，反應(yīng)產(chǎn)物冷卻到0℃后，2N NaOH調(diào)節(jié)pH4。用5％的MeOH/AcOEt提取，合并有機(jī)相并真空干燥，產(chǎn)物用MeOH溶解后與NaOH常溫下回流5小時(shí)，回流產(chǎn)物經(jīng)HCL酸化后，用MeOH/AcOEt提取，提取物經(jīng)鹽洗、干燥、硅膠柱分離得到1，5-二乙?；?2，4，6-三羥基苯；b)1，5-二乙?；?2，4，6-三羥基苯與濃硫酸發(fā)生強(qiáng)氧化還原反應(yīng)，與TMSCHN2進(jìn)行甲基化反應(yīng)，產(chǎn)物用乙酸乙酯/甲醇提取分離得到2-乙酰基-5-甲氧基-6，6-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-6，6-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液在強(qiáng)堿條件下與苯甲醛反應(yīng)，反應(yīng)混合物用二氯甲烷提取，經(jīng)水洗，再經(jīng)干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到化合物13。
實(shí)施例12毛葉假鷹爪素(Desmosdumotin)C與合成化合物2～9的體外抗腫瘤活性試驗(yàn)結(jié)果(摩爾濃度表示μmol L-1)

MCF-7乳腺癌細(xì)胞 A549肺癌細(xì)胞
IA9卵巢癌細(xì)胞 KB鼻咽癌細(xì)胞KB-VIN對(duì)長(zhǎng)春新堿有抗藥性的鼻咽癌細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除化合物7之外，所有合成類(lèi)似物之活性均高于先導(dǎo)化合物毛葉假鷹爪素C(Desmosdumotin C)。其中，化合物3的活性是Desmosdumotin C的四倍。
實(shí)施例13毛葉假鷹爪素(Desmosdumotin)B的體外抗腫瘤活性試驗(yàn)結(jié)果環(huán)合化合物(II)，(III)的藥理作用表現(xiàn)為毛葉假鷹爪素(Desmosdumotin)B有較強(qiáng)的體外抗腫瘤活性，特別是對(duì)長(zhǎng)春新堿有抗藥性的鼻咽癌細(xì)胞(KB-V)顯示了非常強(qiáng)的細(xì)胞毒活性ED50＜2.0μg/mL。
實(shí)施例14毛葉假鷹爪素C(Desmosdumotin C)的單次靜脈給藥對(duì)昆明種小鼠的LD50試驗(yàn)(表)

實(shí)施例15毛葉假鷹爪素C(Desmosdumotin C)對(duì)小鼠S180肉瘤的療效實(shí)驗(yàn)
(表)

實(shí)施例16化合物2注射劑的制備制備方法采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，取注射用水適量(40ml)，加入氯化鈉(0.45g)，攪拌溶解，再加入化合物2(50mg)，用0.1N的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH6.5-7.5，再加入足量水(至50ml)，攪勻，過(guò)濾分裝于中性玻璃中，用流通蒸氣100℃，30分鐘滅菌。
權(quán)利要求
1.具有通式(I)的毛葉假鷹爪素化合物 其中R1＝C2-C8R1’所述的C2-C8為飽和/或不飽和的烴，不飽和烴為順、反異構(gòu)體，其中R1’可選自芳環(huán)，或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1＝CH2＝CH2R1’其中R1’選自芳環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1’為選自4-溴苯基、4-氯苯基、4-碘苯基、羥基取代的苯基、低級(jí)烷基取代的苯基、烷氧基取代的苯基、2-呋喃取代基、2-噻吩取代基、2-噻唑取代基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中該化合物包括2-[1’-羥基-3-(4-溴苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物2)；2-[1’-羥基-3-(2-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物3)；2-[1’-羥基-3-(3-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物4)；2-[1’-羥基-3-(4-甲氧苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物5)；2-[1’-羥基-3-(4羥苯基)-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物6)；2-[1’-羥基-2-呋喃-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物7)；2-[1’-羥基-2-噻吩-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物8)；2-[1’-羥基-2-噻唑-亞-2-丙烯基]-5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-4-烯-1，3-二酮(化合物9)；7-羥基-6，8，8-三甲基-2-苯基-2，3-二氫-8H-苯并吡喃-4，5-二酮(化合物11)；2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-羥基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(化合物12)；2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-6，6-二甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮(化合物13)。
5.一種制備上述通式(I)化合物的合成方法，該方法包括的步驟為a)2，4，6-三羥苯乙酮和甲醇鈉溶于無(wú)水乙醇中，與甲基碘回流；反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提取；合并有機(jī)層，干燥，濃縮后得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮；b)對(duì)所述的2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為-78℃溫度得到其甲基化產(chǎn)物2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、苯甲醛在室溫下攪拌，提取反應(yīng)混合物；提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，還包括的步驟為用選自4-溴苯基芳醛、4-甲氧基苯基芳醛、3-甲氧基苯基芳醛、2-甲氧基苯基芳醛、4-羥基苯基芳醛、2-呋喃芳醛、2-噻吩芳醛、2-噻唑芳醛來(lái)代替該方法步驟(C)中的苯甲醛。
7.一種通(I)化合物的制備方法，包括的步驟為a)2，4，6-三羥苯乙酮溶于AcOH中，同Ac2O和BF3OEt2回流，反應(yīng)產(chǎn)物冷卻后，采用NaOH調(diào)節(jié)pH2-6；用5％的MeOH/AcOEt提取，合并有機(jī)相并真空干燥，產(chǎn)物用MeOH溶解后與NaOH常溫下回流，回流產(chǎn)物經(jīng)HCL酸化后，用MeOH/AcOEt提取，提取物經(jīng)鹽洗、干燥、硅膠柱分離得到1，5-二乙酰基-2，4，6-三羥基苯；b)1，5-二乙酰基-2，4，6-三羥基苯與濃硫酸發(fā)生強(qiáng)氧化還原反應(yīng)，與TMSCHN2進(jìn)行甲基化反應(yīng)，產(chǎn)物用乙酸乙酯/甲醇提取分離得到2-乙?；?5-甲氧基-6，6-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙酰基-5-甲氧基-6，6-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液在強(qiáng)堿條件下與苯甲醛反應(yīng)，提取反應(yīng)混合物，經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶。
8.通式(I)化合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
9.一種藥物組合物，其中含有藥物有效劑量的通式(I)化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
10.如權(quán)利要求9所述的組合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
11.一種通過(guò)如權(quán)利要求1所述的通式(I)化合物的R1位和2位羰基發(fā)生和環(huán)反應(yīng)生成通式(II)或者通式(III)化合物， 其中R1＝C2-C8R1’所述的C2-C8為飽和/或不飽和的烴，不飽和烴為順、反異構(gòu)體，其中R1’選自芳環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物，其中R1＝CH2＝CH2R1’其中R1’選自芳環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳環(huán)，雜環(huán)，選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的雜環(huán)，芳雜環(huán)或選自鹵素、羥基、低級(jí)烷基、烷氧基、呋喃基、噻吩基、噻唑基取代的芳雜環(huán)。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物，其中R1’為選自4-溴苯基、4-氯苯基、4-碘苯基、羥基取代的苯基、低級(jí)烷基取代的苯基、烷氧基取代的苯基、2-呋喃取代基、2-噻吩取代基、2-噻唑取代基。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物，其包括7-羥基-6，8，8-三甲基-2-苯基-8H-苯并吡喃-4，5-二酮，或7-甲氧基-6，8，8-三甲基-2-苯基-8H-苯并吡喃-4，5-二酮。
15.一種如權(quán)利要求11所述的化合物的制備方法，包括以下步驟a)2，4，6-三羥苯乙酮和甲醇鈉溶于無(wú)水乙醇中，與甲基碘回流；反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提?。缓喜⒂袡C(jī)層，干燥，濃縮后得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮；b)對(duì)所述的2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為-78C°溫度得到其甲基化產(chǎn)物2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、苯甲醛在室溫下攪拌，提取反應(yīng)混合物；提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮；d)向所述的2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮的無(wú)水DMSO溶液中，加入碘溶液、濃硫酸?；旌衔锛訜?0-90℃，直至反應(yīng)結(jié)束，然后提取，提取物經(jīng)水洗、干燥后，于硅膠色譜柱上分離。
15.如權(quán)利要求11的通式(II)和/或(III)化合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
16.一種藥物組合物，其中含有藥物有效劑量的如權(quán)利要求11所述的通式(II)和/或(III)化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
17.如權(quán)利要求16所述的組合物在制備抗腫瘤和/或抗艾滋病藥物中的用途。
18.一種以下結(jié)構(gòu)式示出的毛葉假鷹爪素C的制備方法，包括以下步驟 a)2，4，6-三羥苯乙酮和甲醇鈉溶于無(wú)水乙醇中，與甲基碘回流；反應(yīng)混合物冷卻后用鹽酸酸化，而后用乙酸乙酯提??；合并有機(jī)層，干燥，濃縮后得到2-乙?；?4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮；b)對(duì)所述的2-乙?；?4，4，6-三甲基環(huán)己烷-1，3，5-三酮進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)溫度為-78℃溫度得到其甲基化產(chǎn)物2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮；c)2-乙?；?5-甲氧基-4，6，6-三甲基環(huán)己烷-1，3-二酮的乙醇溶液與50％KOH水溶液、苯甲醛在室溫下攪拌，提取反應(yīng)混合物；提取物經(jīng)水洗，干燥，濃縮，分離，重結(jié)晶，得到2-(1’-羥基苯丙烯叉基)-5-甲氧基-4，6，6-三甲基-1，3-環(huán)己烯(4，5)二酮。
全文摘要
本發(fā)明涉及全新骨架化合物毛葉假鷹爪素C的合成方法；該先導(dǎo)化合物的系列衍生物及其制備方法；毛葉假鷹爪素B的全合成；以及衍生物和含它們的藥物組合物在制備抗腫瘤或抗艾滋病藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07D333/16GK1796351SQ20041010364
公開(kāi)日2006年7月5日 申請(qǐng)日期2004年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月29日
發(fā)明者吳久鴻, 後藤中川享子, 王夕紅, 史寧 申請(qǐng)人:吳久鴻