專利名稱：制備c－7取代的5－雄甾烯的方法
背景技術(shù)：
某些C-7取代的甾族化合物，例如環(huán)氧孕烯酮(eplerenone)，具有醛固酮拮抗劑活性是眾所周知的，因而用于治療和預防循環(huán)系統(tǒng)疾病。環(huán)氧孕烯酮是若干專利和申請的主題，例如US4,559,332和5,981,744以及國際公開W098/25948和W097/21720。對環(huán)氧孕烯酮新的和擴展的臨床應用的出現(xiàn)產(chǎn)生了對制備這些和其它相關(guān)甾族化合物的改進方法的需求。有效合成環(huán)氧孕烯酮和相關(guān)甾族化合物的主要障礙是在C-7引入羧基或可轉(zhuǎn)變?yōu)轸然墓倌軋F。
已經(jīng)描述了在稱為“烯丙基化”的方法中，已知在路易斯酸影響下烯丙基衍生物，尤其是烯丙基乙酸酯、苯甲酸酯、新戊酸酯等與親核試劑反應。烯丙基化反應已應用于許多物質(zhì)。例如在烯丙基化過程中烯糖可產(chǎn)生烯丙基糖苷、糖基氰化物和糖基疊氮化物(Yadav，J.S.等，Tetrahedron Lett.，2001，42，4057。烯丙基乙酸酯和碳酸酯得到相應的氰化物(Yasushi，T.等，J.Org.Chem.，1993，58，16)。富電子芳香和雜芳香化合物得到相應的烯丙基化產(chǎn)物(Malkov，A.V.，等，J.Org.Chem.，1999，64，2751)。然而，烯丙基反應至今未應用于甾族化合物以得到7-取代的甾族化合物，用于轉(zhuǎn)化為7-羧基取代的甾族化合物，例如環(huán)氧孕烯酮。3，17-二乙酰氧基-7-羥基雄甾-5-烯，或相應的7-甲磺酸酯與苯酚和苯甲醚使用粗糙催化劑氯化鋁反應(Negi，A.S.，等，Steroids，1995，60，470)。生成的7-芳基衍生物以低收率作為C-7差向異構(gòu)體的混合物得到。此外，7-芳基衍生物非常難以用于制備7-羧基取代的甾族化合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及制備新的式I的7-羧基取代的甾族化合物的方法
式I其中R1是-COR2；R2是C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；Z1是CH2或 其中OR3是α構(gòu)型；R3是H或-COR2；Z2是-CH-；或Z1和Z2可以一起形成碳-碳雙鍵；Q是 或 Y是-CN，-CH2-CH＝CH2， CHR4C(O)Ar、CHR4C(O)C1-6烷基、CHR4C(O)XAr或CHR4C(O)XC1-6烷基；其中R4是OC1-6烷基或芳基X是O或S。
這些新的中間體用于制備7-羧基取代的甾族化合物，本發(fā)明尤其涉及新的和有利的制備9，11-α-環(huán)氧-1-α-羥基-3-氧代孕甾-4-烯-α-21-二羧酸，γ-內(nèi)酯、甲酯(環(huán)氧孕烯酮(eplerenone)；epoxymexrenone)。
在本發(fā)明的方法中，關(guān)鍵步驟是使新的式II甾族中間體 式II其中R1和R3獨立地選自H、C(O)OR2或COR2，和R1或R2中至少一個是C(O)OR2或COR2；Z1、Z2、R2和Q如式I定義；與親核試劑在路易斯酸催化劑存在下反應，所述親核試劑選自三C1-4-烷基甲硅烷基氰化物、三C1-4-烷基甲硅烷基烯醇醚、三C1-4-烷基甲硅烷基氧基烯酮硫縮醛(即RCH＝C(OSiRC1-6烷基)SRC1-6烷基)、烯丙基三-C1-4-烷基硅烷、烯丙基三-C1-4-烷基錫烷、2-C1-4-烷基呋喃和2-C1-4-烷基吡咯。
其中式II化合物具備烯丙基醇衍生物在C-5、-C-6、-C7-OR3的結(jié)構(gòu)單元。利用“烯丙基化”反應的新合成方案在實施方案描述中詳細描述。
實施方案說明定義在詳細描述中，使用如下定義。
術(shù)語“烷基”其本身或作為另一取代基的部分是指，除非另有說明，直鏈或支鏈，或環(huán)狀烴基或它們的組合。飽和烴基的實例包括，但不限于，基團，例如甲基、己基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、環(huán)己基、(環(huán)己基)乙基、環(huán)丙基甲基，其同系物和異構(gòu)體，例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基。
單獨使用或與其它術(shù)語結(jié)合使用(例如芳氧基、芳硫基、芳烷基)的術(shù)語“芳基”(Ar)是指，除非另有說明，芳香取代基，它可以是單環(huán)或多環(huán)(至多三環(huán))，它們是稠合或共價連接的。
術(shù)語親核試劑是指富電子試劑，如Morrison，R.T.等，Organic Chemistry，第6版，Prentice Hall pub.，1992，第172頁所述，它趨向于攻擊碳核。
術(shù)語路易斯酸是指電子對受體，如McQuarrie，D.A.等，General Chemistry，第3版，WH.Freeman and Company pub.，1991，第665頁所述。
實施方案描述出乎意料的，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)式II的C-7-羥基-C-5Δ6-烯甾族化合物的羧基衍生物用各種親核試劑進行烯丙基化反應生成相應的如表1中所示的式I的C-7取代的甾族衍生物。在路易斯酸催化劑存在下，合適的親核試劑包括，但不限于，三C1-4-烷基甲硅烷基氰化物、三C1-4-烷基甲硅烷基烯醇醚、三烷基甲硅烷基氧基烯酮硫縮醛(即RCH＝C(OSiR3)SR烯丙基三-C1-4-烷基硅烷、烯丙基三-C1-4-烷基錫烷、2-C1-4-烷基呋喃和2-C1-4-烷基吡咯。合適的路易斯酸包括，但不限于過渡元素三氟甲磺酸鹽(OTf＝OSO2CF3)，例如Sc(OTf)3、Ce(OTf)3、Fe(ClO4)2、Cu(ClO4)2和Yb(OTf)3，和鉬(II)配合物，例如Mo(CO)5(OTf)2和[Mo(CO)4Br2]2。
TMSCN＝三甲基甲硅烷基氰化物。
表1然而，在類似條件下，吲哚和苔黑酚得到＜10％的收率和復雜的混合物。乙烯基三甲基硅烷和三甲基甲硅烷基乙炔不能反應。
方案概述如上所述，式I化合物可在環(huán)氧孕烯酮合成中用作原料，方案I和II提供了使用通過本發(fā)明方法制備的式I化合物制備環(huán)氧孕烯酮的實例的方案流程圖。
方案I
方案II原料1的制備(方案I)，以兩種方法之一得到用于方案I-II的(3β，7β，11α-三羥基-5-雄甾烯-17-酮)。一種方法是首先使5-雄甾烯-3β-醇-17-酮與棉色二孢(Diplodia gossypina)ATCC 20517(synonym Botryodiplodia theobromae IFO6469)的深層培養(yǎng)物接觸以產(chǎn)生5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮(參見實施例10)，隨后使5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮與赭色曲霉(Aspergillus ochraceus)ATCC18500的深層培養(yǎng)物接觸以產(chǎn)生5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮1(方案I)。用另一種方法，可以使5-雄甾烯-3β-醇-17-酮與藍色犁頭霉(Absidiacoerulea)ATCC 6647的深層培養(yǎng)物接觸以產(chǎn)生5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮1(方案I)。
步驟IA和IIB羥基中間體1和11(方案II)用?；噭┰谑逵袡C堿存在下通過現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法?；玫?和12。?；噭┌ǖ图夋溚樗狒?、低級鏈烷酰氯、低級烷基羰基氯、低級烷基碳酸酐等。合適的叔有機堿包括吡啶、4-二甲基氨基吡啶、三乙胺、二異丙基乙胺等?；蛘?，混合碳酸酯(RO-CO-O-)制備可通過與烷氧基羰基氧基苯并三唑在叔有機堿存在下用改進的公開方法(Harada，T.等，J.Carbohydrate Chem.，(1995)，14，165)反應進行。
步驟I-B和II-E三?；衔?(方案I)和14(方案II)與親核試劑在路易斯酸存在下通常在惰性溶劑，例如乙腈或二氯甲烷中反應分別得到3(方案I)和15(方案II)。合適的親核試劑包括，但不限于，三烷基甲硅烷基氰化物、3-甲硅烷基取代的烯烴，烯醇乙酸酯、甲硅烷基烯醇醚、烯丙基錫烷、N-烷基吡咯、N，N-二烷基苯胺、甲硅烷基烯醇硫酯、甲硅烷基烯醇酯和富電子雜芳族化合物，例如2-烷基取代的呋喃。合適的路易斯酸包括，但不限于過渡元素三氟甲磺酸鹽(OTf＝OSO2CF3)，例如Sc(OTf)3、Ce(OTf)3和Yb(OTf)3，和鉬(II)配合物，例如Mo(CO)5(OTf)2和[Mo(CO)4Br2]2。
步驟I-C和II-F3(方案I)和15(方案II)的?；獾玫?(方案I)或16(方案II)使用堿土金屬氫氧化物、碳酸氫鹽或碳酸鹽，例如氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、氫氧化銫、碳酸氫鋰等，使用甲醇作為溶劑，任選用共溶劑進行。
步驟I-D和II-A17-氧代中間體4(方案I)和1(方案I)與乙炔根據(jù)文獻中描述的方法反應得到相應的加成化合物5(方案I)和11(方案II)(參見例如Schwede，W.等，Steroids，(1998)，63 166；Corey，E.J等，J.Amer.Chem.Soc.(1999)，121，710-714；Schwede，W.等，Steroids(1998)，63(3)，166-177；Ali，H.等，J.Med.Chem.(1993)，36(21)，3061；Turuta，A.M.等，Mendeleev Commun.(1992)，47-8；Kumar，V.等，Tetrahedron(1991)，47(28)，5099；Page，P.C.，Tetrahedron(1991)，47，2871-8；Curts，S.W.等，Steroids(1991)，56，8；Kataoka，H.等Chem.Lett.(1990)，1705-8；Christiansen，R.G.等，J.Med.Chem.(1990)，33(8)，2094-100)。在步驟II-A中的三羥基化合物可任選在加入乙炔前無需分離被三甲基甲硅烷基化。甲硅烷基化過程用六甲基乙硅氮烷和溫和的酸性催化劑，例如三甲基甲硅烷基氯或糖精進行。在加成乙炔后，在用溫和無機酸、乙酸、磷酸、四烷基氟化鋁等反應處理中除去三甲基甲硅烷基。
步驟E根據(jù)文獻中描述的方法(Wuts，P.G.M.等，J.Org.Chem.1989，54，5180；Botteghi，C.等，Tetrahedron，2001，57，1631)鄰位羥基內(nèi)醚中間體6(方案I)和13(方案II)的形成通過用一氧化碳和氫氣在催化量的銠催化劑和銠配合配位體存在下5和12的加氫甲酰基化實現(xiàn)。反應在14-500psi，優(yōu)選100-200psi的壓力下進行，氫氣與一氧化碳的比率是1/5-5/1，通常是1/1。合適的銠催化劑包括乙酸銠、氯化銠和二羰基乙?；香橧I。合適的配位體包括三芳基膦、三烷基亞磷酸二齒膦，例如xantphos，二齒亞磷酸等。
步驟I-Fa和II-D6(方案I)氧化至6a(方案I)和16(方案II)氧化成7(方案II)可用各種標準氧化劑實現(xiàn)。合適氧化劑的實例包括碘代琥珀酰亞胺/四丁基碘化銨(Kraus，George A.Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(2000)，10(9)，895-897；Barrett，A.G.M.等，J.Org.Chem.(1989)，54(14)，3321)；Jones試劑(在丙酮中的鉻酸)(Panda，J.等，Tetrahedron Letters(1999)，40，6693；Tomioka，K.等，J.Org.Chem.(1988)，53(17)，4094)；碳酸銀(Chow，T.J.等，J.Chem.Soc.，PerkinTransactions 1，(1999)，1847)；氯鉻酸吡啶鎓(Uchiyama，M.等，TetrahedronLetters(2000)，41(51)，10013；Vanderiei，J.M.de L.，Synthetic Communications(1998)，28(16)，3047；Kassou，M.等，Journal of Organic Chemistry(1997)，62，3696；Rehnberg，N.等，J.Org.Chem.(1990)，55(14)，4340-9；RuO4/四烷基銨鹽/叔胺N-氧化物，Jeewoo，K.等，Chem.Lett.(1995)，(4)，299；重鉻酸吡啶鎓，Paquette，L.A.等，J.Am.Chem.Soc.(1995)，117(4)，1455-6)；次氯酸鈉/叔胺N-氧化物(Waldemar，A.等，Chem.Rev.，(2001)，101，3499)；鏈烷醇鋁/丙酮(Ooi，T.等，Synthesis(2002)，279)；Djerassi，C.等，Org.React.(1951)，6，207)；三乙酰氧基全碘二氫化茚(Martin，J.C.等，J.Amer.Chem.Soc.，(1991)，113，7277)。
步驟Fb在其中步驟Fa的氧化產(chǎn)生非共軛5-6雙鍵的情況下，6a(方案I)中的雙鍵由C5-6位置向C4-5位置的遷移通過使6a(方案I)與有機或無機酸在惰性有機溶劑或溶劑的含水混合物中在0-80℃的溫度下接觸完成。合適的有機酸包括，但不限于，甲苯磺酸、甲磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、草酸、三氯乙酸等。合適的無機酸包括，但不限于，鹽酸、氫溴酸、磷酸、高氯酸等。另一方面，催化劑可以是叔有機堿，例如三乙胺、二氮雜雙環(huán)十一烷(DBU)等或無機堿，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣等。雙鍵遷移在(Bakshi等，U.S.5,237，064；Pollack，等，J.Amer.Chem.Soc.，1987，109，5048；Tsubuki等，J.Org.Chem.，1992，57，2930；Zeng等，J.Amer.Chem.Soc.，1991，113，3838)中描述。
步驟I-H和II-I，J11-羥基中間體7(方案I)和18(方案II)的脫氫如(US4,559,332)所述用五氯化磷完成。另一方面，如WO97/21720和WO98/25948中所述，11-羥基中間體7(方案I)可轉(zhuǎn)化為磺?；?，例如甲磺酸酯或?qū)妆交撬狨?，隨后用堿處理進行脫水。
步驟I-H和II-H在7(方案I)中呋喃環(huán)降解為8的甲酯(方案II)如實施例中所述通過臭氧分解、氧化和酯化完成。
步驟I-J和II-K已知的中間體9(方案I)向10(方案I)(環(huán)氧孕烯酮)的轉(zhuǎn)化過程在US4,559,332和5,981,744中描述。
實施例原料1的制備，方法1步驟15-雄甾烯-3β-醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化 5-雄甾烯-3β-醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化過程以10L發(fā)酵規(guī)模用棉色二孢(Diplodia gossypina ATCC)20517(synonymBotryodiplodia theobromae IFO 6469)的深層培養(yǎng)物進行。
(A)初級接種階段解凍冷凍的棉色二孢ATCC 20571植物細胞，轉(zhuǎn)移到馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂板(PDA)，在28℃培養(yǎng)72小時。單一菌絲體-塞(直徑6-7mm)用于接種含有100mL初級接種培養(yǎng)基的硅化500-mL點刻的振蕩燒瓶。初級接種培養(yǎng)基由以下成分組成糊精，50g；soyflour，35g；結(jié)晶葡萄糖，5g；氯化鈷六水合物，2mg；硅氧烷消泡劑(SAG 471)，0.5mL；預殺菌，pH 7.0-7.2，用氫氧化鈉(2N)調(diào)節(jié)。使用設(shè)定在280r.p.m.(1”軌道沖程)控制環(huán)境培養(yǎng)箱-振蕩器將棉色二孢ATCC 20571在28℃培養(yǎng)48小時。
(B)二次接種階段10升二次接種發(fā)酵物用1.2mL植物初級接種培養(yǎng)物接種(0.012％[v/v]接種率)。二次接種培養(yǎng)基含有(每升RO水)結(jié)晶葡萄糖60g；soyflour，25g；大豆油，30mL；硫酸鎂七水合物，1g；磷酸二氫鉀，0.74g；聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，2mL；硅氧烷消泡劑(SAG 471)，0.5mL；預殺菌pH 3.95-4.00，用濃硫酸調(diào)節(jié)。含有二次接種培養(yǎng)基的發(fā)酵器用夾套和注射蒸汽在121℃殺菌20分鐘。殺菌時攪拌速率是200r.p.m.，后殺菌，培養(yǎng)基pH用無菌硫酸(5％)調(diào)節(jié)至4.0。采用如下初始參數(shù)在28℃培養(yǎng)棉色二孢ATCC 20571攪拌，100r.p.m.；背壓＝5psig；空氣流量＝2.5SLM(0.25VVM)；低DO設(shè)定點，30％；pH控制，無。當DO首次下降至30％時，空氣流量增加至5SLM(0.5VVM)。當培養(yǎng)物重新達到低DO時，用攪拌控制保持30％DO。在接種后約60小時，當OUR在約10-15mM/L/h時，收獲二次接種培養(yǎng)物。
(C)甾族化合物生物轉(zhuǎn)化將10升甾族化合物生物轉(zhuǎn)化發(fā)酵物用500mL植物二次接種培養(yǎng)物接種(5％[v/v]接種率)，甾族化合物生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基與二次接種培養(yǎng)基相同。殺菌條件和pH調(diào)節(jié)如二次接種培養(yǎng)基所述。棉色二孢ATCC 20571在28℃下用基本上與用于二次接種培養(yǎng)使用的相同初始參數(shù)培養(yǎng)，只是低DO設(shè)定點由30％增加到50％。當DO首次下降至50％時，空氣流量由2.5SLM(0.25VVM)增加至5SLM(0.5VVM)。當培養(yǎng)基重新達到低DO時，用攪拌控制保持50％DO。在接種后24小時開始，以1小時間隔向發(fā)酵物中加入在最少體積的0.2％聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯中成漿的微粉化5-雄甾烯-3β-醇-17-酮，直至加入總共400g。在接種后約3天，向10-L發(fā)酵物中加入附加的100g結(jié)晶葡萄糖。
每日用TLC分析生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)物的5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮。用10mL甲醇萃取1毫升全啤酒。通過離心(3,000xg 10分鐘)由含水甲醇混合物分離細胞，幾微升用于TLC板。TLC板在環(huán)己烷∶乙酸乙酯∶甲醇(90∶60∶15)中展開，通過用50％硫酸噴灑TLC觀察到產(chǎn)物，隨后在烘箱中炭化。產(chǎn)物與在噴灑50％硫酸時轉(zhuǎn)變?yōu)樗{色的真實標準比較。5-雄甾烯-3β-醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化在接種后約4天完成。
(D)分離方法離心收獲的全啤酒，通過離心回收富集固體，富集固體用10升二氯甲烷萃取，離心收集富集萃取物。精制萃取物，通過蒸餾濃縮至約1升，結(jié)晶漿狀物冷卻到-10℃。經(jīng)過濾回收結(jié)晶，用冷的二氯甲烷洗滌以脫色，干燥得到227g純化的結(jié)晶5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮。
步驟25-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化 5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化以10L發(fā)酵物規(guī)模用赭色曲霉(Aspergillus ochraceus)ATCC 18500(synonym NRRL 405)的深層培養(yǎng)物進行。
(A)初級接種階段如實施例12中用于棉色二孢ATCC 20571所述制備赭色曲霉ATCC18500初級接種培養(yǎng)物。
(B)二次接種階段10升二次接種發(fā)酵物用1.2mL植物初級接種培養(yǎng)物接種(0.012％[v/v]接種率)。二次接種培養(yǎng)基含有(每升RO水)結(jié)晶葡萄糖40g；soyflour，25g；大豆油，30mL；硫酸鎂七水合物，1g；磷酸二氫鉀，0.74g；壬基苯氧基聚乙氧基乙醇0.25mL；硅氧烷消泡劑(SAG 471)，0.5mL；預殺菌pH 3.95-4.00，用濃硫酸調(diào)節(jié)。含有二次接種培養(yǎng)基的發(fā)酵器用夾套和注射蒸汽在121℃殺菌20分鐘。殺菌時攪拌速率是200r.p.m.，后殺菌，培養(yǎng)基pH用無菌硫酸(5％)調(diào)節(jié)至4.0。采用如下初始參數(shù)在28℃培養(yǎng)Aspergillus ochraceus ATCC18500攪拌，100r.p.m.；背壓＝5psig；空氣流量＝2.5SLM(0.25VVM)；低DO設(shè)定點，50％；pH控制，無。當DO首次下降至50％時，空氣流量增加至5SLM (0.5VVM)。當培養(yǎng)物重新達到低DO時，用攪拌控制保持50％DO。在接種后50-54小時，當OUR在約20-26mM/L/h時，收獲二次接種培養(yǎng)物。
(C)甾族化合物生物轉(zhuǎn)化10升甾族化合物生物轉(zhuǎn)化發(fā)酵物用500mL植物二次接種培養(yǎng)物接種(5％[v/v]接種率)。甾族化合物生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基與二次接種培養(yǎng)基基本相同，只是壬基苯氧基聚乙氧基乙醇由0.25mL/L增加至2mL/L，預殺菌pH用濃硫酸調(diào)節(jié)至2.95-3.00。殺菌條件如二次接種培養(yǎng)基所述。接種后，培養(yǎng)基pH用無菌濃硫酸(5％)調(diào)節(jié)至3.0。赭色曲霉ATCC18500在28℃下用基本上與用于二次接種培養(yǎng)的相同初始參數(shù)培養(yǎng)，只是攪拌最初設(shè)定為200r.p.m.。在接種后約18小時，向10-L發(fā)酵物中加入在最少體積的0.2％壬基苯氧基聚乙氧基乙醇中成漿的200g微粉化5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮。
如實施例10所述，每日用TLC分析生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)物的5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮。5-雄甾烯-3β，7β-二醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化在接種后約4天完成。
(D)分離方法離心回收全啤酒固體，棄掉液體。富集固體用10升的80％丙酮20％水在45-50℃下萃取，通過過濾溫萃取物變得澄清。通過蒸餾濃縮富集濾液以除去丙酮得到粗結(jié)晶的含水漿狀物。過濾回收粗結(jié)晶，棄掉母液。水濕結(jié)晶在600mL二氯甲烷中研制以除去雜質(zhì)，溶解在700mL甲醇(加熱至55℃)中，隨后用5g Darco G-60 carbon脫色。在過濾除去碳后，濾液濃縮以結(jié)晶產(chǎn)物。通過加入300mL乙酸正丁基酯和濃縮至粘稠結(jié)晶漿狀物進一步除去甲醇。過濾結(jié)晶，用乙酸正丁基酯洗滌，干燥得到158g純化的結(jié)晶5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮。
1的制備，方法25-雄甾烯-3β-醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化 5-雄甾烯-3β-醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化以10L發(fā)酵物規(guī)模用藍色犁頭霉(Absidia coerulea)ATCC 6647的深層培養(yǎng)物進行。
(A)初級接種階段如實施例12中用于棉色二孢ATCC 20571所述制備藍色犁頭霉ATCC6647初級接種培養(yǎng)物。
(B)二次接種階段10升二次接種發(fā)酵物用1.2mL植物初級接種培養(yǎng)物接種(0.012％[v/v]接種率)。二次接種培養(yǎng)基含有(每升RO水)糖精50g；soyflour，35g；結(jié)晶葡萄糖，5g；氯化鈷六水合物，2mg；硅氧烷消泡劑(SAG 471)，0.5mL；預殺菌pH 4.95-5.00，用濃硫酸調(diào)節(jié)。含有二次接種培養(yǎng)基的發(fā)酵器用夾套和注射蒸汽在121℃殺菌20分鐘。殺菌時攪拌速率是200r.p.m.，殺菌后，培養(yǎng)基pH用無菌硫酸(5％)調(diào)節(jié)至5.0。采用如下初始參數(shù)在28℃培養(yǎng)藍色犁頭霉ATCC 6647攪拌，100r.p.m.；背壓＝5psig；空氣流量＝2.5SLM(0.25VVM)；低DO設(shè)定點，50％；pH控制，無。當DO首次下降至30％時，空氣流量增加至5SLM(0.5VVM)。當培養(yǎng)物重新達到低DO時，用攪拌控制保持30％DO。在接種后約76小時，當OUR在約4-7mM/L/h時，收獲二次接種培養(yǎng)物。
(C)甾族化合物生物轉(zhuǎn)化10升甾族化合物生物轉(zhuǎn)化發(fā)酵物用500mL植物二次接種培養(yǎng)物接種(5％[v/v]接種率)，甾族化合物生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基含有(每升RO水)糖精50g；soyflour，35g；結(jié)晶葡萄糖，20g；硅氧烷消泡劑(SAG 471)，0.5mL；預殺菌pH 2.95-3.00，用濃硫酸調(diào)節(jié)。殺菌條件如二次接種培養(yǎng)基所述。殺菌后，培養(yǎng)基pH用無菌濃硫酸(5％)調(diào)節(jié)至3.0。藍色犁頭霉ATCC 6647在28℃下用與用于二次接種培養(yǎng)的相同初始參數(shù)培養(yǎng)。在接種后約17小時，向10-L發(fā)酵物中加入在最少體積的0.2％辛基苯氧基聚乙氧基乙醇中成漿的200g微粉化5-雄甾烯-3β-醇-17-酮。
如實施例1所述，每日用TLC分析生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)物的5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮。5-雄甾烯-3β-醇-17-酮向5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮的生物轉(zhuǎn)化在接種后約6-7天完成。
(D)分離方法用離心回收全啤酒固體，棄掉液體。富集固體用10升的85％丙酮15％水在45-50℃下萃取，溫萃取物通過過濾變得澄清。通過蒸餾濃縮富集濾液以除去丙酮得到粗結(jié)晶的含水漿狀物。過濾結(jié)晶漿狀物，棄掉母液。水濕結(jié)晶在600mL二氯甲烷中研制以除去雜質(zhì)，溶解在700mL甲醇(加熱至55℃)中，隨后用5g Darco G-60炭脫色。在過濾除去炭后，濾液濃縮以結(jié)晶產(chǎn)物。通過加入300mL乙酸正丁基酯和濃縮至粘稠結(jié)晶漿狀物進一步除去甲醇。過濾結(jié)晶，用乙酸正丁基酯洗滌，干燥得到75.5g粗結(jié)晶5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮。
粗結(jié)晶在600mL二氯甲烷中研制以除去其它雜質(zhì)，溶解在700mL甲醇(加熱至55℃)中，隨后用5g Darco G-60炭脫色。在過濾除去炭后，濾液濃縮以結(jié)晶產(chǎn)物。通過加入300mL乙酸正丁基酯和濃縮至粘稠結(jié)晶漿狀物進一步除去甲醇。過濾結(jié)晶，用乙酸正丁基酯洗滌，干燥得到42.1g純化的結(jié)晶5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮。
實施例1三碳酸酯2的制備向3N 250ml RBF中加入溶解在吡啶(100ml)中的三醇1(方案I)(10.00g，31mmol)。向該溶液中加入三乙胺(31ml，218mmol)、甲氧羰基苯并三唑(24.2g，125mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(1.2g，9.4mmol)。得到的漿狀物攪拌2小時，此時全部溶解。加入附加的甲氧羰基苯并三唑(12g，62mmol)和三乙胺(10ml，73mmol)。一旦固體溶解，則反應完成。緩慢加入水(300ml)，混合物在冰浴中冷卻。過濾出沉淀，用10％HCl(2×35ml)和己烷(3×50ml)洗滌，在真空烘箱中干燥24小時得到標題化合物2(方案I)。13C NMR(CDCl3)δ 217.78，155.60，155.23，154.88，144.48，122.35，78.58，76.81，75.39，55.29，54.93，51.09，49.47，47.79，38.48，37.89，36.19，36.08，27.96，23.58，19.07，14.40。
實施例2呋喃3的制備(方案I)三碳酸酯2(1.0g，2.02mmol)在7mL乙腈中的溶液在室溫下用2-甲基呋喃(0.2mL，2.22mmol)和0.298g Sc(OTf)3處理1小時。TLC(30％EtOAc/Hex)顯示反應完成。在硅膠上用25％EtOAc/Hex進行色譜純化得到0.92g(96％收率)呋喃3。13C NMR(CDCl3)δ 217.88，171.08，155.34，154.93，152.38，151.49，140.72，123.98，110.56，106.45，77.50，75.89，60.51，54.98，54.71，47.45，46.57，38.73，37.66，36.21，35.91，27.96，22.22，19.14，13.98，13.77。
實施例3二醇4的制備(方案I)二碳酸酯3(1.0g)在10mL MeOH中的溶液用500mg K2CO3處理，加熱到40℃。攪拌混合物考慮到TLC顯示反應完成。反應完成后將漿狀物傾入水中，用EtOAc分離產(chǎn)物，濃縮有機物得到二醇4粘稠油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ 5.7(s，H)，5.45(d，J＝5.7Hz，1H)，3.45(m，1H)，3.29(t，J＝5.1Hz，1H)，2.09(s，3H)，1.1(s，3H)，0.75(s，3H)。
實施例4炔5的制備(方案I)2.8g(25.0mmol)t-BuOK在50mL THF中的溶液在-10℃下用乙炔鼓泡30分鐘，隨后緩慢加入酮11在10mL THF中的溶液，同時持續(xù)乙炔鼓泡?；旌衔镌?10℃下攪拌1小時，隨后加入在10mL水中的2.0mL乙酸。在混合物傾入水中后，經(jīng)EtOAc萃取分離產(chǎn)物。用甲苯經(jīng)共沸除去乙酸。NMR譜顯示存在少量乙酸和甲苯；產(chǎn)量2.25g。13C NMR(CDCl3)δ153.77，151.21，142.66，122.83，110.12，106.1，87.3，79.42，74.03，72.29，69.48，50.61，47.49，45.70，43.64，42.87，39.38，39.06，38.29，37.68，31.84，23.7，21.26，19.27，14.19，13.9。
實施例5鄰位羥基內(nèi)醚6的制備(方案I)將1.55g炔5(方案I)、27mg Rh2(OAc)2和92mg Ph3P在20mL EtOAc中的溶液用CO和H2加壓至100psi，加熱至80℃過夜。濃縮混合物，在硅膠上用90％EtOAc/Hex進行色譜純化得到兩個餾分。經(jīng)NMR顯示餾分1是回收的原料，餾分2是所需的鄰位羥基內(nèi)醚。CMR顯示鄰位羥基內(nèi)醚混合物的信號在94.8和94.5ppm。
實施例65，6-烯酮6a的制備(方案I)將2.0g鄰位羥基內(nèi)醚、50mg KBr、12mg TEMPO、800mg NaHCO3在20mL CH2Cl2和5mL水中的混合物冷卻到5℃，混合物隨后緩慢地用8mL 1.1M NaOCl處理，同時保持溫度低于6℃。在加完后，混合物再攪拌30分鐘，隨后用CH2Cl2分離產(chǎn)物得到6a(方案I)。13C NMR(CDCl3)δ 209.82，176.37，153.19，151.78，143.34，128.15，121.41，110.62，106.53，94.35，72.0，55.39，50.44，47.99，44.41，42.26，39.03，38.63，37.1，35.67，31.9，29.19，23.39，18.33，15.69，14.07。
實施例7使用酸制備4，5-烯酮7(方案I)將5，6-烯酮6a(方案I)(500mg)和草酸(200mg)在乙醇(10ml)中的混合物在40℃加熱3小時，減壓除去乙醇，殘余物溶解在乙酸乙酯(50ml)中，有機溶液用水(2×50ml)洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化得到4，5-烯酮7(方案I)。
實施例8用堿制備4，5-烯酮7將5，6-烯酮6a(500mg)和DBU(200mg)在四氫呋喃(5ml)中的混合物回流加熱3小時，隨后冷卻，用氯化銨溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取。萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化得到4，5-烯酮7。
實施例9二烯酮的制備(方案I)將1.2g醇7溶解在10mL THF中，所得溶液冷卻到-33℃。隨后一次加入PCl5(950mg)。溶液在-33℃攪拌3小時，隨后加入水猝滅。用EtOAc分離產(chǎn)物得到二烯9(方案I)，它用硅膠色譜分離用EtOAc/Hex純化。
實施例10由呋喃取代基制備甲酯方法A 將呋喃衍生物8(方案I)(1.0g，2.280mmol)在100ml二氯甲烷中的溶液冷卻到-79℃，將O3/O2通過溶液10分鐘，隨后將混合物溫熱到室溫，濃縮至固體殘余物，將其溶解在50ml 1/1甲醇/二氯甲烷中，用1.0ml吡啶處理，在室溫下攪拌18小時。將溶液冷卻到-80℃，隨后將O3/O2氣流通過溶液4分鐘?；旌衔镫S后用100ml乙酸乙酯稀釋，用70ml碳酸氫鈉水溶液萃取。水相用含水鹽酸酸化至pH 0.5，隨后用二氯甲烷萃取，濃縮至泡沫狀物(重量250mg)。將泡沫狀物溶解在甲苯/甲醇中，在室溫下用三甲基甲硅烷基重氮甲烷(0.5ml 2.0M己烷溶液，1.0mmol)處理，隨后濃縮溶液得到酯9油狀物。
方法B步驟1)5α，17β-二羥基孕-9(11)-烯-3-酮，7α，21-二羧酸，雙-γ-內(nèi)酯8a(方案I) 將17β-羥基-7α-(5’-甲基-2’-呋喃基)-孕-4，9(11)-二烯-3-酮-21-羧酸，γ-內(nèi)酯(100g，0.23778mol)和乙酸鉀(50.0g，0.5094mol，2.14當量)在丙酮(500ml)和水(150ml)中的混合物冷卻到-10℃，用dibromantin(34.0g，0.1189mol，0.50摩爾當量)在水(100ml)中的漿狀物處理直至出現(xiàn)氧化還原電勢升高。此時，LC分析顯示完成轉(zhuǎn)化為烯二酮(III-順)。含有烯二酮(III-順)的反應混合物隨后用異丁基乙烯基醚(1.0ml，0.768g，7.668mmol，0.032當量)猝滅，濃縮到粘稠漿狀物，用二氯甲烷(200ml)稀釋，用20℃濃鹽酸(50.0ml，0.50mol，2.10當量)處理?；旌衔镌?0-25℃攪拌2小時，此時，LC分析顯示完全轉(zhuǎn)化為烯二酮(III-順)。分離出含有烯二酮(III-反)的有機相，用二氯甲烷(80ml)和甲醇(300ml)稀釋，冷卻到-48℃。將O3/O2氣流鼓泡通過該混合物直至LC分析顯示烯二酮(III-反)完全消失，隨后混合物用二甲基硫醚(30.0ml，25.38g，0.4085mol，1.72當量)猝滅，在-10℃攪拌16小時，濃縮至約300ml的體積，用甲醇(350ml)稀釋，濃縮至約300ml的體積，用異丙醇(40ml)和甲醇(80ml)稀釋，隨后用碳酸氫鉀(120g，1.1986mol，5.04當量)在水(240ml)中的溫(55-60℃)溶液處理。將該漿狀物冷卻到5-10℃，在3小時內(nèi)加入過氧化氫(50％，66.0g，含有33.0g(0.9703mol，4.08當量)過氧化氫)。混合物攪拌4小時，用二甲基硫醚(40ml，33.84g，0.5447moles，2.29當量)猝滅。在20-25℃下攪拌23小時后，混合物用二氯甲烷(100ml)和水(80ml)稀釋，用濃鹽酸酸化至pH＝3.0。將兩相混合物加熱至36℃，進行相分離，水相用二氯甲烷(100ml)萃取，合并有機相，用水(75ml)洗滌，水相用二氯甲烷(25ml)反萃取。合并有機相，濃縮到150ml的體積，隨后用苯磺酸(1.0g 90％純原料，含有0.90g(5.690mmol，0.0239當量)苯磺酸)和丙酮(50ml)處理。混合物常壓濃縮至160ml的體積，隨后用丙酮(250ml)稀釋，濃縮至200ml的體積，冷卻到12℃，過濾。濾餅用冷丙酮(2×25ml)洗滌，用氮氣氣流干燥得到標題化合物，CMR(100MHz，CDCl3)206.08，176.47，175.41，139.63，124.00，94.89，90.97，47.08，43.90，42.36，41.58，41.07，38.93，36.97，35.16，33.01，32.42，32.42，31.35，29.10，23.08，22.98和14.23δ；NMR(400MHz，CDCl3)0.94，1.40，1.4-2.8和5.70；MS(CI，NH3)m/e＝385(P+H，100％)。
步驟2)17β-羥基-7α-羰基甲氧基孕-4，9(11)-二烯-3-酮-21-羧酸，γ-內(nèi)酯9(方案I)
將5α，17β-二羥基孕-9(11)-烯-3-酮，7α，21-二羧酸，雙-γ-內(nèi)酯(50.0g，0.13005mol)和碳酸氫鉀(16.92g，0.1690mol，1.30當量)在丙酮(200ml)和水(100ml)中的混合物在45℃下攪拌2小時，此時LC顯示5，7-內(nèi)酯(VII)向羧酸(VI)的轉(zhuǎn)化完成。得到的混合物隨后用二甲基硫醚(22.92g，0.1817mol，1.40當量)處理，在45℃下攪拌3小時，隨后用碳酸氫鉀(1.3g，0.0130mol，0.100當量)在水(10ml)中的溶液和純?nèi)野?1.81ml，1.314g，0.0130mol，0.100當量)處理。混合物在45℃下攪拌1小時，用濃鹽酸(1.92ml，2.304g，含有0.852g(0.0234mol，0.180當量)鹽酸)猝滅，冷卻到0℃，減壓濃縮至150ml的體積(釜溫13℃)，隨后過濾，濾餅用水(2×25ml)洗滌，干燥得到標題化合物9(方案I)。
實施例11制備環(huán)氧孕烯酮如US4,559,332和5,981,744，和WO97/21720和WO98/25948中所述，二烯酮9(方案I)被氧化得到環(huán)氧孕烯酮。
實施例12三甲基甲硅烷基氰與I的烯丙基化作用將三乙酸酯I(表1)(1.0g，2.24mmol)在10mL CH2Cl2中的溶液冷卻到14℃，用0.6ml TMSCN和100mg Sc(OTf)3處理?；旌衔飻嚢?小時，用乙酸乙酯萃取。在濃縮萃取物過程中，由溶液中沉淀出結(jié)晶。過濾出結(jié)晶，干燥得到腈18，是異構(gòu)體的混合物。13C NMR(CDCl3，混合物)δ147.31，146.0，131.68，129.39，128.12，119.23，115.47，115.04，62.74，82.50，51.13，49.0，47.72，44.38，43.67，43.05，37.32，37.04，36.32，33.58，32.09，32.0，27.92，27.79，26.75，23.68，23.32，20.45，19.13，18.26，12.30。
實施例13烯丙基三甲基甲硅烷與V的烯丙基化作用在室溫下用Sc(OTf)3處理三乙酸酯V(表1)和烯丙基三甲基硅烷在乙腈中的溶液。1小時后，緩慢加入水以沉淀產(chǎn)物。過濾和干燥得到烯丙基衍生物19。13C NMR(CDCl3)δ 221.05，170.89，193.87，137.62，127.15，116.36，74.26，47.81，46.29，38.61，37.49，36.23，35.61，35.31，31.57，28.04，22 61，20.56，19.64，13.48。
實施例14乙炔與17-氧代中間體的加成 步驟1將六甲基乙硅氮烷(HMDS)(100ml)加入50.0g三醇1在400ml二氯甲烷中的攪拌漿狀物中。加入糖精(0.57g)，混合物回流加熱3小時，在此期間漿狀物逐漸溶解成透明琥珀色溶液。加入水(5ml)以猝滅任何過量的HMDS。在回流5分鐘后，混合物通過在350ml粗玻璃料填料漏斗中32.6g酸式硅酸鎂的CH2Cl2濕層過濾。濾液應是透明和幾乎無色的。濾餅用2×100mlCH2Cl2洗滌，合并的濾液減壓濃縮，通過與2×500ml部分的四氫呋喃一起蒸發(fā)除去殘余二氯甲烷，在每次加入后濃縮至干得到白色固體。
步驟2用冰/甲醇浴將叔丁醇鉀(42.0g)在500ml THP中的懸浮液冷卻到-9℃±5℃，在溫和攪拌下乙炔鼓泡入表面下混合物中至少1小時。將在THF(400ml)中的如上得到的甲硅烷基化甾族中間體在30分鐘內(nèi)加入，同時保持0℃±5℃的反應溫度。加完后，在5℃±5℃下再攪拌混合物1小時。緩慢加入水(100ml)使反應混合物溫熱到15℃±5℃，緩慢加入125ml 10％ HCl以降低pH至2.5-3。混合物在pH 2.5-3下在20℃±5℃下攪拌1-2小時，根據(jù)需要加入少量5％HCl以保持pH 2.5-3。當水解完成時，加入半飽和的NaHCO3溶液以提高pH至5.5-6?；旌衔镉靡宜嵋阴?500ml)稀釋，分相。水相用乙酸乙酯萃取，合并的乙酸乙酯相用水、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮得到加成產(chǎn)物2。13C NMR(DMSO-d6)δ141.99，127.38，89.37，77.73，75.24，72.13，70.54，67.68，54.13，49.57，47.43，43.94，42.58，40.52，40.22，39.01，38.09，31.95，25.8，18.58，14.09。
實施例15羥基乙?；?將四醇11(方案II)(50.00g，144mmol)溶解在吡啶(150ml)中的混合物在冰浴中冷卻到＜10℃。加入二甲基氨基吡啶(DMAP)(1.7g，14mmol)，隨后以保持溶液溫度低于10℃的速率緩慢加入乙酐(41.4ml，439mmol)。加完后，反應混合物溫熱到室溫，混合物用乙酸乙酯(75ml)和水(50ml)稀釋，攪拌5分鐘，分層。有機層用10％ HCl(4×25ml)和水(2×50ml)洗滌，用MgSO4干燥并濃縮。產(chǎn)物由甲苯(100ml)重結(jié)晶。13C NMR(CDCl3)δ170.68，170.10，143.48，128.90，128.10，125.17，122.59，86.63，78.21，75.07，74.40，72.79，71.47，50.16，48.07，47.02，38.76，38.06，37.83，37.67，36.92，27.66，24.18，21.74，21.44，18.65，13.06。
實施例16乙炔加合物的加氫甲?；?將三乙酸酯12(方案II)(25.4g，54mmol)、PPh3(2.13g，8.1mmol)和Rh2(OAc)4(716mg，1.62mmol)在乙酸乙酯(200ml)中的溶液在80℃在氫氣/一氧化碳的1/1混合物下在170psi壓力下加熱12小時?；旌衔餃p壓濃縮，產(chǎn)物13(方案II)用柱色譜(70/30EtOAc/Hex和500g硅膠)純化。由于開環(huán)和閉環(huán)異構(gòu)體該化合物的CMR譜是復雜的，沒有完全表征。
實施例17鄰位羥基內(nèi)醚氧化成內(nèi)酯
將鄰位羥基內(nèi)醚4(方案I)(25g，50mmol)、二氯甲烷(250ml)、水(38ml)、2，2，6，6-四甲基哌啶-1-基氧基(TEMPO)(156mg，1mmol)、KBr(595mg，5mmol)和NaHCO3(5.5g，65mmol)的混合物在冰浴中冷卻到＜10℃。緩慢加入次氯酸鈉(NaOCl)的1.1M溶液(50ml，55mmol)。使混合物溫熱至室溫，用水(50ml)稀釋。分層，有機層用鹽水(2×50ml)洗滌，有機層用MgSO4干燥，過濾和濃縮得到5，灰白色泡沫狀物。13C NMR(CDCl3)δ177.94，172.60，172.15，171.58，145.49，124.36，96.18，(79.22，78.90，78.59 CDCl3)，76.59，74.57，72.63，52.14，49.55，47.75，40.00，39.75，39.61，38.65，37.47，32.74，30.85，29.56，26.01，23.61，23.37，23.17，23.11，20.52，16.19。
實施例18呋喃化 將三乙酸酯14(方案I)(1.30g，2.58mmol)、2-甲基呋喃(0.8mL)在25mL乙腈中的溶液在20℃用250mg Sc(OTf)3處理，隨后攪拌1小時。通過EtOAc萃取分離產(chǎn)物，用40％ EtOAc/Hex經(jīng)硅膠柱色譜純化得到1.0g(74％收率)呋喃15。13CNMR(CDCl3)δ176.27，170.45，169.85，152.53，150.96，140.60，123.45，110.05，106.01，94.95，73.39，71.37，46.50，45.40，44.60，38.55，38.37，38.06，37.78，37.74，36.89，35.41，31.81，30.72，28.96，28.93，27.69，23.07，22.63，21.74，20.98，18.80，14.83，14.13，14.06，13.62。
實施例19乙酸酯水解
將810mg二乙酸酯15(方案II)、112mg K2CO3在20mL甲醇中的混合物在室溫下攪拌過夜。TLC顯示反應未完全，因而加入附加的100mg K2CO3，持續(xù)攪拌直至TLC顯示完全反應。混合物用1MHCl酸化，產(chǎn)物用EtOAc萃取。用100％ EtOAc經(jīng)硅膠色譜分離得到610mg(89.5％收率)二醇16(方案II)。13C NMR(CDCl3)δ176.68，153.20，150.79，142.05，122.32，109.80，105.94，95.3，71.83，68.64，50.13，45.81，44.88，42.73，42.62，39.01，38.56，37.73，36.81，35.44，31.57，30.84，29.06，23.13，18.81，15.27，13.64。
實施例2016氧化制備17 將二醇16(方案II)溶解在2mL甲苯和0.1mL丙酮中，用50mg異丙醇鋁處理，加熱至100℃。幾小時后，顯示未轉(zhuǎn)化，因而加入0.1mL環(huán)己酮，混合物加熱過夜。使用乙酸乙酯作洗脫劑經(jīng)硅膠色譜分離得到產(chǎn)物17(方案II)。13C NMR(CDCl3)δ199.96，177.05，170.32，153.34，150.74，126.7，109.14，106.33，95.54，69.08，52.50，46.26，46.0，43.58，40.13，39.05，38.8，37.93，36.92，35.66，34.59，31.33，29.47，23.06，18.83，16.01，13.90。
權(quán)利要求
1.制備式I的7-取代的甾族化合物的方法 式1其中R1是H或-COR2；R2是C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；Z1是CH2或 其中OR3是α構(gòu)型；R3是H或-COR2；Z2是-CH-；或Z1和Z2可以一起形成碳-碳雙鍵；Q是 或 Y是-CN，-CH2-CH＝CH2， CHR4C(O)Ar、CHR4C(O)C1-6烷基、CHR4C(O)XAr或CHR4C(O)XC1-6烷基；其中R4是OC1-6烷基或芳基X是O或S其包括使式II甾族中間體 式II其中R1和R3、Z1、Z2、R2和Q如式I定義；與親核試劑在路易斯酸催化劑存在下反應。
2.式I的化合物其中R1是H或-COR2；R2是C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；Z1是CH2或 其中OR3是α構(gòu)型；R3是H或-COR2；Z2是-CH-；或Z1和Z2可以一起形成碳-碳雙鍵；Q是 或 Y是-CN，-CH2-CH＝CH2， CHR4C(O)Ar、CHR4C(O)C1-6烷基、CHR4C(O)XAr或CHR4C(O)XC1-6烷基；其中R4是OC1-6烷基或芳基X是O或S。
3.權(quán)利要求1的方法，其進一步包括下列步驟a)使式1的酮甾族化合物與氯甲酸C1-C6烷基酯或氯甲酸芐基酯或烷氧基羰基苯并三唑在叔有機堿存在下反應得到其中R是C1-C6烷基或芐基的式2的三碳酸酯； 式2b)使式2的三?；衔锱c2-C1-C6烷基呋喃在路易斯酸催化劑存在下反應得到式3的二?；セ衔铮?式3c)在堿存在下水解式3的二?；セ衔锏玫绞?的二羥基酯； 式4d)使式4的化合物與乙炔在強堿存在下反應得到式5的乙炔化合物； 式5e)使式XVII的乙炔化合物與一氧化碳在銠催化劑配位體存在下反應得到式6的鄰位羥基內(nèi)醚； 式6f)氧化式6的鄰位羥基內(nèi)醚得到式6a的內(nèi)酯； 式6ag)異構(gòu)化6a的4，5-雙鍵得到式7的內(nèi)酯； 式7h)溴化、臭氧化、氧化和酯化式7化合物得到式8的酯； 式8i)式8的化合物脫水得到式9的中間體； 式9j)氧化式9的二烯酮從而得到環(huán)氧孕烯酮(式10)。 式10
4.通過如下方法制備的產(chǎn)物，所述方法包括使式II的甾族中間體， 式II其中R1是H或-COR2；R2是C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；Z1是CH2或 其中OR3是α構(gòu)型；R3是H或-COR2；Z2是-CH-；或Z1和Z2可以一起形成碳-碳雙鍵； 或 與親核試劑在路易斯酸催化劑存在下反應。
5.式6a化合物。 式6a
6.權(quán)利要求1的方法，其進一步包括下列步驟a)使式1的化合物與乙炔反應得到式11的化合物； b)?；?1化合物得到式12的化合物； c)加氫甲酰基化式12化合物得到式13化合物； d)氧化式13化合物得到式14化合物； e)使式14化合物與2-烷基呋喃在路易斯酸存在下接觸得到式15化合物； f)水解式15化合物得到式16化合物； g)氧化式16化合物得到式17化合物； h)轉(zhuǎn)化式17化合物的呋喃環(huán)為式18的甲氧基羰基化合物； i)轉(zhuǎn)化式18化合物為式19磺酸酯； j)除去式19的磺酸酯基得到式9的化合物； k)氧化式9的化合物得到式10的化合物，環(huán)氧孕烯酮。
7.通過如下方法制備的產(chǎn)物，所述方法包括下列步驟a)使5-雄甾烯-3β，7β，11α-三醇-17-酮與與乙炔反應得到式11的化合物； b)酰基化式11化合物得到式12的化合物； c)加氫甲?；?2化合物得到式13化合物； d)氧化式13化合物得到式14化合物； e)使式14化合物與2-烷基呋喃在路易斯酸存在下接觸得到式15化合物； f)水解式15化合物得到式16化合物； g)氧化式16化合物得到式17化合物； h)轉(zhuǎn)化式17化合物的呋喃環(huán)為式18的甲氧基羰基化合物； i)轉(zhuǎn)化式18化合物為式19的磺酸酯； j)除去式19的磺酸酯基得到式9的化合物； k)氧化式9的化合物得到式10的化合物，環(huán)氧孕烯酮。
8.權(quán)利要求6的制備環(huán)氧孕烯酮的方法，其還包括在與乙炔反應前甲硅烷基化式1的化合物以得到甲硅烷基化中間體和在分離式11化合物過程中除去所述甲硅烷基。
全文摘要
本發(fā)明涉及制備新的式1的取代的甾族化合物的方法，其中R
文檔編號C07J1/00GK1694896SQ03824869
公開日2005年11月9日 申請日期2003年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月7日
發(fā)明者彼得·Gm·伍茨 申請人:法馬西亞和厄普喬恩公司